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高粱体胚发生的组织细胞学观察 预览
1
作者 季艳丽 陈发菊 +1 位作者 邓为 张德春 《生物资源》 CAS 2019年第4期371-375,共5页
以Sb33高粱非胚性、胚性愈伤组织和体胚为材料,用传统石蜡切片法对各组织材料进行组织化学染色,对高粱胚性与非胚性愈伤组织以及体胚进行组织细胞学观察。结果表明:高粱非胚性愈伤组织无淀粉粒积累,高粱胚性愈伤组织淀粉粒积累较多,而... 以Sb33高粱非胚性、胚性愈伤组织和体胚为材料,用传统石蜡切片法对各组织材料进行组织化学染色,对高粱胚性与非胚性愈伤组织以及体胚进行组织细胞学观察。结果表明:高粱非胚性愈伤组织无淀粉粒积累,高粱胚性愈伤组织淀粉粒积累较多,而与胚性愈伤组织相比,高粱体胚淀粉粒积累更多,这说明淀粉粒的积累与高粱体细胞的胚胎发生密切相关。此外,高粱可通过鱼雷胚基部产生球形胚的方式实现体胚的增殖,高粱离体再生途径以体细胞胚发生为主,并同时存在少量器官发生途径。在高粱体细胞胚胎发生中,外起源和内起源同时存在。本研究为高粱体细胞胚胎发生提供细胞学理论基础。 展开更多
关键词 高粱 胚性愈伤组织 非胚性愈伤组织 体胚 组织细胞学观察
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白刺花胚性愈伤组织诱导及体细胞胚发生和萌发 预览
2
作者 吴丽芳 魏晓梅 陆伟东 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期13-19,共7页
探讨不同因素对白刺花下胚轴、子叶2种外植体胚性愈伤组织诱导及体细胞胚发生和萌发的影响。以B5和MS为基本培养基,研究2,4-D、6-BA和TDZ对白刺花下胚轴和子叶胚性愈伤组织的诱导;在MS培养基上添加不同浓度2,4-D,研究胚性愈伤组织增殖情... 探讨不同因素对白刺花下胚轴、子叶2种外植体胚性愈伤组织诱导及体细胞胚发生和萌发的影响。以B5和MS为基本培养基,研究2,4-D、6-BA和TDZ对白刺花下胚轴和子叶胚性愈伤组织的诱导;在MS培养基上添加不同浓度2,4-D,研究胚性愈伤组织增殖情况;采用ABA,探究对体细胞胚发生的影响。结果表明:下胚轴比子叶更易诱导胚性愈伤组织,筛选出2种外植最佳的胚性愈伤组织诱导培养基均为MS+2.0mg/L2,4-D+0.5mg/LTDZ+0.5mg/L6-BA,胚性愈伤组织诱导率分别为77.3%和41.0%。15.0mg/LABA、0.2mg/L2,4-D和2.0mg/L6-BA有利于体细胞胚发生,1/3MS+0.2mg/LNAA+0.1mg/L6-BA+2.0g/L活性炭+25g/L蔗糖+7g/L琼脂的培养基可使体细胞胚萌发率达80%以上,再生植株移栽成活率高达90%。白刺花外植体种类及培养基类型均会影响胚性愈伤组织的诱导,其中下胚轴诱导效果优于子叶;MS培养基较适合启动细胞脱分化形成愈伤组织,2,4-D对胚性愈伤组织的增殖保持有调控作用,ABA有利于体细胞胚的发生。 展开更多
关键词 白刺花 胚性愈伤组织 体细胞胚发生 体细胞胚萌发
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抗松针褐斑病湿地松体细胞的悬浮培养 预览
3
作者 方珞 吴小芹 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期13-18,共6页
为了获得大量的抗松针褐斑病胚性愈伤组织试验材料,完善抗性湿地松体胚发生技术,以抗松针褐斑病湿地松胚性愈伤组织为材料,探究抗性湿地松体细胞悬浮培养的较适条件,建立抗性湿地松体细胞的悬浮培养体系。研究结果显示:悬浮培养的胚性... 为了获得大量的抗松针褐斑病胚性愈伤组织试验材料,完善抗性湿地松体胚发生技术,以抗松针褐斑病湿地松胚性愈伤组织为材料,探究抗性湿地松体细胞悬浮培养的较适条件,建立抗性湿地松体细胞的悬浮培养体系。研究结果显示:悬浮培养的胚性细胞较分散,利于胚性细胞充分获取营养,可产成熟体胚153个/g,而固体培养的胚性细胞产胚仅为56个/g。抗性湿地松悬浮细胞的较佳培养周期为7-9 d,较适宜的基本培养基为1/4 DCR,麦芽糖添加量为15 g/L,NAA添加量为0.5 mg/L;较佳的继代添加比为1/2;同时研究还发现不同基因型的抗性湿地松悬浮细胞在相同的培养条件下,细胞活力有一定差异,其中无性系13#-9活力最佳。 展开更多
关键词 抗性湿地松 悬浮培养 体胚发生 胚性愈伤组织
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桃SERK2的克隆及其在不同状态愈伤组织中的表达分析 预览
4
作者 谭彬 陈谭星 +5 位作者 韩亚萍 张亚如 郑先波 程钧 王伟 冯建灿 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期882-892,共11页
【目的】分离克隆桃(Prunus persica L.)体细胞胚胎发生相关类受体蛋白激酶(somatic embryogenesis receptor-like kinases,SERKs)基因SERK2,检测其在不同状态桃愈伤组织中的表达差异,分析SERK2与胚性愈伤组织发生的关系,为揭示组织培... 【目的】分离克隆桃(Prunus persica L.)体细胞胚胎发生相关类受体蛋白激酶(somatic embryogenesis receptor-like kinases,SERKs)基因SERK2,检测其在不同状态桃愈伤组织中的表达差异,分析SERK2与胚性愈伤组织发生的关系,为揭示组织培养困难树种桃胚性愈伤组织产生的分子机理奠定基础。【方法】采用同源克隆法获得PpSERK2的cDNA全长序列,运用TMPred、DNAMAN和MEGA 5.0等生物信息学软件对序列进行分析;以‘秋蜜红’花药为外植体,接种至添加2.0 mg·L-1 6-BA和1.0 mg·L-1 2,4-D的NN69培养基诱导愈伤组织;将获得的不同状态愈伤组织制作石蜡切片并进行组织细胞学观察;通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)对PpSERK2在4种不同状态愈伤组织中的表达进行分析。【结果】克隆获得‘秋蜜红’PpSERK2的cDNA全长序列1 881 bp,编码626个氨基酸,其蛋白质理论分子量为68.99 kD,理论等电点为5.38,具有完整的SERK蛋白的保守结构域,与牡丹(Paeonia suffruticosa)等物种的同源性为67.88%—92.71%,且与秘鲁番茄(Solanum peruvianu)和温州蜜柑(Citrus unshiu)的相似性最高。在与其他物种的SERK蛋白构建的系统进化树中,PpSERK2与SpSERK1、CitSERK1和PsSERK2等聚在一起,与同源性比对结果一致。以‘秋蜜红’花药为外植体诱导获得4种不同状态的愈伤组织,组织细胞学观察发现黄色疏松状(球形胚出现)、绿色紧实状(心形胚出现)和浅黄色透明状(尚未完全形成的鱼雷形胚结构出现)的3种状态的愈伤组织细胞小、排列紧密;而黄白色水渍状愈伤组织细胞体积大、排列不规则,细胞质稀且染色浅。根据形态学和组织学的鉴定结果,可知黄色疏松状、绿色紧实状和浅黄色透明状的3种状态的愈伤组织均为胚性愈伤组织,而黄白色水渍状愈伤组织为非胚性愈伤组织。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)结果表明,PpSERK2在‘秋蜜红’3种状态的胚性愈伤组织中的表达量显著高于� 展开更多
关键词 桃 体细胞胚发生 SERK2 胚性愈伤组织
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油棕细胞悬浮培养及植株再生技术 预览
5
作者 潘登浪 邹积鑫 +2 位作者 曾宪海 林位夫 Khengtuan Chean 《广东农业科学》 CAS 2019年第2期59-65,173共8页
【目的】建立油棕胚性体细胞悬浮培养植株再生技术体系,为油棕优株无性系种植材料高效繁育、细胞生物学研究、生物技术育种研究等提供技术平台和参考。【方法】以源于成龄油棕芯叶的瘤状愈伤组织为材料,采用不同质量浓度2,4-D、麦草畏... 【目的】建立油棕胚性体细胞悬浮培养植株再生技术体系,为油棕优株无性系种植材料高效繁育、细胞生物学研究、生物技术育种研究等提供技术平台和参考。【方法】以源于成龄油棕芯叶的瘤状愈伤组织为材料,采用不同质量浓度2,4-D、麦草畏与德夸霉素组合诱导易碎胚性愈伤组织,分析不同激素质量浓度及其组合对油棕体细胞悬浮系增殖与后续体胚发育的影响。【结果】0.1 mg/L德夸霉素与一定浓度2,4-D或麦草畏组合,促进胚性愈伤组织形成,0.1 mg/L德夸霉素与1 mg/L麦草畏组合诱导易碎胚性愈伤组织较佳,诱导率为28.67%;用生长旺盛、质地松散的易碎胚性愈伤组织悬浮培养21 d可建立生长状态较均一、分散性好的悬浮细胞系;0.3 mg/L德夸霉素与1 mg/L麦草畏组合较有利于悬浮细胞系增殖和后续体胚发育;将悬浮细胞系转到MS+谷氨酰胺100 mg/L +蔗糖30g/L培养基上,于28(±2)℃、2 000 lx下进行胚诱导培养,每两周更换新培养基1次,培养60 d可获得直径大于1 mm的胚,最高每瓶295粒;将大于1 mm的胚转到固体培养基培养可获得再生植株。【结论】适当质量浓度德夸霉素与2,4-D或麦草畏组合,促进油棕芯叶瘤状愈伤组织形成易碎胚性愈伤组织;用生长旺盛、质地松散的易碎胚性愈伤组织悬浮培养21 d可建立生长状态较均一、分散性好的悬浮细胞系;初步发现含适当质量浓度德夸霉素与麦草畏液体培养基利于悬浮细胞系增殖和后续体胚发育。 展开更多
关键词 油棕 胚性愈伤组织 悬浮培养 体细胞胚 油料作物
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白刺花胚性愈伤组织诱导及体细胞胚发生 预览
6
作者 吴丽芳 魏晓梅 陆伟东 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第7期170-177,共8页
【目的】探讨不同植物生长调节剂对白刺花胚性愈伤组织诱导的作用,以及培养基中氮源和无机盐浓度对白刺花体细胞胚发生和植株再生的影响,以期建立白刺花体细胞胚发生、发育及调控技术体系,为白刺花种苗快速繁殖体系建立及遗传转化研究... 【目的】探讨不同植物生长调节剂对白刺花胚性愈伤组织诱导的作用,以及培养基中氮源和无机盐浓度对白刺花体细胞胚发生和植株再生的影响,以期建立白刺花体细胞胚发生、发育及调控技术体系,为白刺花种苗快速繁殖体系建立及遗传转化研究提供参考。【方法】以白刺花叶片为外植体,研究生长调节剂2,4-D(1.0、2.0、3.0、4.0 mg ·L -1 )、NAA(0、0.5、0.8、1.0 mg ·L -1 )、6-BA(0.2、0.5、1.0、2.0 mg ·L -1 )和TDZ(0、0.2、0.5、1.0 mg ·L -1 )组合对胚性愈伤组织诱导,及NAA(0、0.2、0.5 mg ·L -1 )、6-BA(0、0.5、1.0 mg ·L -1 )和TDZ(0、0.2、0.5 mg ·L -1 )组合对体细胞胚发生的调控作用,筛选最优生长调节剂组合;并研究培养基中KNO 3和NH 4NO 3比例对体细胞胚发生的作用,及MS培养基中无机盐浓度(1/5MS 、1/4MS、1/3MS、1/2MS)对体细胞胚萌发的影响,筛选最佳的体细胞胚发育及成熟萌发条件。【结果】白刺花叶片外植体胚性愈伤组织诱导适宜培养基为MS + 2,4-D 3.0 mg ·L -1 + NAA 0.5 mg ·L -1 + 6-BA 0.2 mg ·L -1 + TDZ 1.0 mg ·L -1 +蔗糖40 g ·L -1 +琼脂7.0 g ·L -1 ,诱导率为42.0%。采用MS基本培养基时,最佳的体细胞胚发生培养基为MS + NAA 0.5 mg ·L -1 + 6-BA 1.0 mg ·L -1 + TDZ 0.5 mg ·L -1 +蔗糖40 g ·L -1 +谷氨酰胺100 mg ·L -1 +琼脂7.0 g ·L -1 ,体细胞胚发生率为78.46%,总胚数为对照的3.6倍;MS培养基中,KNO 3浓度提高1倍、NH 4NO 3降至1/2时,体细胞胚发生率可提高至91.33%,总胚数为采用MS基本培养基时的1.4倍;1/3MS培养基有利于体细胞胚的萌发,萌发率为82.75%,幼苗长势良好,单株平均鲜质量为76 mg,幼苗驯化移栽1个月后成活率达90%以上。【结论】白刺花叶片接种于添加2,4-D、NAA、6-BA和TDZ不同组合的诱导培养基上,可脱分化形成愈伤组织或胚性愈伤组织,2,4-D浓度对愈伤组织形态和质地有较大影响。TDZ有利于体细胞胚的形成,适宜浓度的生� 展开更多
关键词 白刺花 胚性愈伤组织 体细胞胚发生 生长调节剂 培养基
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白刺花胚性愈伤组织诱导和植株再生体系建立
7
作者 吴丽芳 魏晓梅 陆伟东 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期218-224,共7页
本文探讨了不同因素对白刺花(Sophora davidii)下胚轴、子叶、茎段三种外植体胚性愈伤组织的诱导和体细胞胚发生的影响。以MS为基本培养基,研究了2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)对胚性愈伤组织诱导的影响,蔗糖对胚性细胞状态的调整,6-苄氨基... 本文探讨了不同因素对白刺花(Sophora davidii)下胚轴、子叶、茎段三种外植体胚性愈伤组织的诱导和体细胞胚发生的影响。以MS为基本培养基,研究了2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)对胚性愈伤组织诱导的影响,蔗糖对胚性细胞状态的调整,6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)和噻苯隆(TDZ)对体细胞胚形成的调控,以及脱落酸(ABA)对体细胞胚萌发的影响。白刺花不同外植体接种于愈伤组织诱导培养基上,能形成胚性、部分胚性和非胚性三种不同类型的愈伤组织,下胚轴和茎段最佳胚性愈伤组织诱导培养基为MS+2.5 mg·L-1 2,4-D+0.5 mg·L-16-BA+0.5 mg·L-1 TDZ+40 g·L-1蔗糖+3 g·L-1植物凝胶+100 mg·L-1谷氨酰胺+10 g·L-1香蕉泥,诱导率分别为73.8%和41.5%;子叶最佳胚性愈伤组织诱导培养基为MS+2.0 mg·L-1 2,4-D+0.5 mg·L-1 6-BA+0.5 mg·L-1 TDZ+40 g·L-1蔗糖+3 g·L-1植物凝胶+100 mg·L-1谷氨酰胺+10 g·L-1香蕉泥,诱导率为57.1%。2.0 mg·L-1 6-BA时,下胚轴体胚发生率最高,为66.67%,总胚数为74个·g-1;子叶体胚发生率为57.65%,总胚数为61个·g-1;茎段体胚发生率49.12%,总胚数为44个·g-1。1.0 mg·L-1 TDZ时以下胚轴和茎段为外植体的体胚发生率最高分别为80.81%和69.18%,获得总胚数分别为113和69个·g-1;TDZ浓度为1.5 mg·L-1时,子叶体胚发生率最高,为71.77%,总胚数87个·g-1。0.5~1.0 mg·L-1 ABA时,体细胞胚萌发率相对较高,幼苗生长比较健壮。 展开更多
关键词 白刺花 下胚轴 子叶 茎段 胚性愈伤组织 体细胞胚发生
云南松胚性愈伤组织诱导研究 预览
8
作者 谢忠利 李旦 +3 位作者 陈远书 于相君 古旭 何承忠 《西南林业大学学报》 CAS 北大核心 2019年第5期28-34,共7页
以未成熟云南松种子为研究材料,选择合适的消毒方法,进行合子胚发育状态观测,从外植体类型、采果母树基因型、培养基种类3方面探讨其对胚性愈伤组织诱导的影响,并鉴定了胚性愈伤组织。结果表明:75%乙醇消毒30 s,无菌水冲洗2次,2%氯酸钠... 以未成熟云南松种子为研究材料,选择合适的消毒方法,进行合子胚发育状态观测,从外植体类型、采果母树基因型、培养基种类3方面探讨其对胚性愈伤组织诱导的影响,并鉴定了胚性愈伤组织。结果表明:75%乙醇消毒30 s,无菌水冲洗2次,2%氯酸钠浸泡15 min,无菌水冲洗4~5次为种子最佳消毒方案;不同外植体类型对出愈率影响不显著,但对胚性愈伤组织的形成具有极显著影响,取带胚乳的合子胚作为外植体的胚性愈伤组织诱导率可达34.3%,而合子胚作为外植体时诱导率为14.3%;采用14种培养基接种,平均诱导率在2.2%~17.6%之间,其中接种于MLV+2, 4-D 2.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+KT 1.0 mg/L+肌醇0.1 g/L,1/2LM+2, 4-D 2.2 mg/L+6-BA 1.1 mg/L+AgNO3 3.4 mg/L+肌醇0.1 g/L,DCR+6-BA 0.63 mg/L+KT 0.61 mg/L+NAA 2.0 mg/L+肌醇0.2 g/L+麦芽糖15 g/L培养基的胚性愈伤诱导率分别为17.6%、17.6%、16.5%,表明该3种培养基适合于云南松的胚性愈伤诱导;8株云南松优株未成熟带胚乳合子胚的胚性愈伤组织平均诱导率为5.1%~19.4%,最高的是076号云南松,最低的是075号云南松,表明基因型对胚性愈伤组织诱导具有极显著的影响。 展开更多
关键词 云南松 未成熟胚 胚性愈伤组织 诱导率
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云杉属树种体胚发生研究进展 预览
9
作者 李青梅 高芳 +3 位作者 韩姣 孙悦 赵吉胜 陈士刚 《新农业》 2019年第15期39-41,共3页
体胚发生具有遗传稳定、繁殖快、数量多结构完整等优点,为云杉属树种细胞分化和全能性表达提供较为理想的理论体系。体胚发生的影响因素主要有,外植体的部位及所处生理时期、基本培养基的种类、植物生长调节物质的种类与浓度、糖的种类... 体胚发生具有遗传稳定、繁殖快、数量多结构完整等优点,为云杉属树种细胞分化和全能性表达提供较为理想的理论体系。体胚发生的影响因素主要有,外植体的部位及所处生理时期、基本培养基的种类、植物生长调节物质的种类与浓度、糖的种类与浓度、以及培养条件等,不同因素对体胚发生的影响也不尽相同。本文综述了云杉属树种体胚发生的研究进展。 展开更多
关键词 云杉属 体胚发生 再生植株 胚性愈伤组织
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湿地松及其杂种的体细胞胚胎发生与植株再生 预览
10
作者 胡继文 郭文冰 +7 位作者 邓乐平 钟岁英 王为民 赵奋成 黄婷 吴惠姗 李义良 廖仿炎 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期107-115,共9页
【目的】明确适合湿地松Pinus elliottii及其杂交种的体细胞胚胎发生条件,建立体胚成熟萌发的技术。【方法】以2016年6月采集的2个湿地松家系(EE1,EE2)、2个湿地松杂交种家系(EC,EH)的未成熟合子胚(含胚乳)为材料,从诱导、增殖、成熟到... 【目的】明确适合湿地松Pinus elliottii及其杂交种的体细胞胚胎发生条件,建立体胚成熟萌发的技术。【方法】以2016年6月采集的2个湿地松家系(EE1,EE2)、2个湿地松杂交种家系(EC,EH)的未成熟合子胚(含胚乳)为材料,从诱导、增殖、成熟到萌发配制3个系列培养基,比较外植体采集时间、家系、基本培养基对胚性愈伤组织诱导的影响。用显微镜进行胚性愈伤组织鉴别后,进一步挑选诱导形成的胚性愈伤组织进行增殖、成熟、萌发,最终获得再生植株。【结果】湿地松及其杂交种合子胚的发育进程可划分为8个阶段,阶段Ⅱ、Ⅲ为未成熟胚,适合体胚发生,EC最早出现阶段Ⅲ合子胚。外植体诱导产生具有胚性胚柄团(ESM)结构的胚性愈伤组织,可进一步增殖。诱导培养基对愈伤组织形成及胚性愈伤组织占比具有较大影响,3种诱导培养基(T1、T2和T3)产生愈伤组织效率最高的为T1培养基(49.0%),胚性愈伤组织所占愈伤组织的比例最高为T2培养基(22.4%)。培养基配方的诱导率存在基因型间的差异,T1培养基整体诱导率低;T2培养基对家系EE1诱导率最高,为5.82%;T3培养基对参试材料均能诱导成功,且平均诱导率最高,为3.75%。随采样时间延后,家系EE1、EH的体胚诱导率逐渐增加,家系EE2、EC的体胚诱导率则随采样时间延后逐渐降低。体胚诱导率与合子发育阶段结果基本一致,阶段Ⅲ合子胚均出现较晚,前期诱导率低。胚性愈伤组织继代24次以后,胚活性逐渐降低。成熟培养基T1S和T3S可完成胚的成熟,平均每克成熟培养基分别成熟23.3和15.9个子叶胚,萌发率为32.1%,移栽保存率为47.8%。【结论】诱导培养基T3对参试家系均能诱导成功,T3具有较广泛适用性,各家系在阶段Ⅲ合子胚出现时表现出较大的诱导率,阶段Ⅲ合子胚可能为体细胞胚发生的最佳诱导阶段。建立了湿地松及其杂种体细胞胚发生方法并� 展开更多
关键词 湿地松 合子胚 体细胞胚胎发生 植株再生 杂交 胚性愈伤组织 诱导培养基
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大苞白山茶胚性愈伤的诱导及植株再生
11
作者 陈朋 杨蕾蕾 +2 位作者 张苏州 张寿洲 杨建芬 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期767-773,共7页
大苞白山茶(Camellia granthamiana)是我国特有珍稀木本植物,具有重要的理论研究和应用价值。本研究以幼胚子叶为外植体,探究不同植物生长调节剂配比对愈伤形成、体胚发生及体胚诱导成苗的影响。结果表明, 2.0 mg·L-1 6-BA与2.5 mg... 大苞白山茶(Camellia granthamiana)是我国特有珍稀木本植物,具有重要的理论研究和应用价值。本研究以幼胚子叶为外植体,探究不同植物生长调节剂配比对愈伤形成、体胚发生及体胚诱导成苗的影响。结果表明, 2.0 mg·L-1 6-BA与2.5 mg·L-1 2,4-D协同作用下,愈伤组织诱导效果最好,诱导率最高可达100%,但形成的均为非胚性愈伤;TDZ浓度为0.05 mg·L-1时,胚性愈伤诱导率可达85.47%;体胚诱导的最佳培养基为MS+0.5mg·L-1 6-BA+0.05 mg·L-1 NAA+0.05 mg·L-1 TDZ,每克胚性愈伤体胚数可达162个,其正常体胚率达58.34%;在1/2MS+1.5 mg·L-1 6-BA+0.05 mg·L-1 NAA中,体胚成苗率最高,达33.91%;试管苗移栽于熟化红壤土:木屑:有机肥=5:4:1的基质中,成活率可达80%以上。 展开更多
关键词 大苞白山茶 胚性愈伤组织 体胚发生 植株再生
苜蓿胚性愈伤组织诱导及植株再生研究 预览
12
作者 王红梅 《甘肃农业科技》 2019年第10期24-28,共5页
以苜蓿5~7d苗龄无菌苗的子叶和下胚轴为外植体,研究培养基中不同激素和浓度配比对苜蓿愈伤组织诱导和分化的影响。结果表明,MS+2,4-D2.0mg/L+6-BA1.0mg/L愈伤组织诱导率达100%,且愈伤组织状态良好,增殖速度快。MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.05m... 以苜蓿5~7d苗龄无菌苗的子叶和下胚轴为外植体,研究培养基中不同激素和浓度配比对苜蓿愈伤组织诱导和分化的影响。结果表明,MS+2,4-D2.0mg/L+6-BA1.0mg/L愈伤组织诱导率达100%,且愈伤组织状态良好,增殖速度快。MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L为苜蓿胚性愈伤组织诱导的适宜培养基,诱导率为37.8%。胚性愈伤组织分化成苗培养基为MS+6-BA0.2mg/L+NAA0.01mg/L,生根培养基为1/2MS+NAA0.02mg/L+蔗糖10.0g/L。 展开更多
关键词 苜蓿 胚性愈伤组织 诱导 植株再生
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花椰菜松散型胚性愈伤组织的诱导 预览 被引量：1
13
作者 史滟滪 刘艳军 +1 位作者 杨静慧 牟坤 《天津农业科学》 CAS 2019年第5期9-12,共4页
本研究采用花椰菜组培苗不同外植体诱导愈伤组织,从中筛选出理想外植体类型;将诱导出的愈伤组织转移到不同培养基上进行松散型愈伤组织的诱导,从中筛选出理想的培养基配方;将诱导出的花椰菜松散型愈伤组织转接到不同的胚性愈伤组织诱导... 本研究采用花椰菜组培苗不同外植体诱导愈伤组织,从中筛选出理想外植体类型;将诱导出的愈伤组织转移到不同培养基上进行松散型愈伤组织的诱导,从中筛选出理想的培养基配方;将诱导出的花椰菜松散型愈伤组织转接到不同的胚性愈伤组织诱导培养基上,找到理想的培养基配方。试验结果表明,选用花椰菜组培苗茎段为外植体,在MS+0.5mg·L^-1BA+1.0mg·L^-12,4-D+30g·L^-1蔗糖的培养基上进行愈伤组织诱导,可以获得松散型愈伤组织;在MS+1mg·L^-1BA+1mg·L^-12,4-D+30g·L^-1蔗糖的培养基上通过3~4次继代培养,可以诱导出花椰菜松散型胚性愈伤组织。 展开更多
关键词 花椰菜 外植体 胚性愈伤组织 激素
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铁兰液体振荡培养再生与快速繁殖 预览
14
作者 李志英 符运柳 徐立 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2019年第1期92-97,共6页
以铁兰叶片为外植体,诱导获得脆性愈伤组织,液体振荡进行胚性愈伤组织培养及快速增殖,固体培养诱导胚状体萌发、不定芽生根,最后移栽成活,实现了铁兰的快速繁殖。在优化的培养条件下,铁兰无菌苗叶片愈伤组织诱导率90%以上,振荡后的愈伤... 以铁兰叶片为外植体,诱导获得脆性愈伤组织,液体振荡进行胚性愈伤组织培养及快速增殖,固体培养诱导胚状体萌发、不定芽生根,最后移栽成活,实现了铁兰的快速繁殖。在优化的培养条件下,铁兰无菌苗叶片愈伤组织诱导率90%以上,振荡后的愈伤组织100%成为胚状体,体积增殖系数可达5.0;90%以上的胚状体可分化为不定芽,95%以上的不定芽可诱导生根,移栽成活率95%以上。研究结果表明成功进行了铁兰的液体振荡培养及快速繁殖。 展开更多
关键词 铁兰 胚性愈伤组织 液体振荡培养 快速繁殖
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百子莲2个ARF基因与2个Aux/IAA基因的全长克隆与序列分析 预览
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作者 杨舟 吕可 +2 位作者 吕珊 王俊杰 张荻 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第1期86-97,共12页
采用不同浓度外源生长素类调节物质毒莠定(PIC)对百子莲(Agapanthus praecox ssp.orientalis)进行继代培养,并对其胚性愈伤组织进行比较转录组学研究,获得了百子莲生长素信号转导途径中的2个ARF和2个Aux/IAA家族基因,推测其为体胚发生... 采用不同浓度外源生长素类调节物质毒莠定(PIC)对百子莲(Agapanthus praecox ssp.orientalis)进行继代培养,并对其胚性愈伤组织进行比较转录组学研究,获得了百子莲生长素信号转导途径中的2个ARF和2个Aux/IAA家族基因,推测其为体胚发生过程中生长素信号传导途径相关的重要调控因子。采用RACE技术获得ApARF 1、ApARF 2、ApAux/IAA 2与ApAux/IAA 3的cDNA全长,分别为2 343、2 888、1 034和821 bp,开放阅读框(ORF)长度分别为1 770、2 349、480和549 bp,分别编码589、782、159和182个氨基酸残基。生物学分析表明,ApARF1与ApARF2蛋白均具有ARF家族的典型结构,ApAux/IAA2蛋白结构域Ⅳ不完整,ApAux/IAA3结构域Ⅱ部分缺失,但仍具有Aux/IAA蛋白的典型功能。转基因实验表明,ApAux/IAA过表达植株表现出生长延缓及发育受阻的表型,ApARF过表达植株表现出生长促进、花期提前的表型,验证了百子莲ApARF和ApAux/IAA家族蛋白对植物生长发育的调控作用。 展开更多
关键词 百子莲 生长素信号 ARF AUX/IAA 基因克隆 胚性愈伤组织
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宜昌百合胚性愈伤组织诱导及植株再生体系的研究 预览
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作者 张璐 潘远智 +2 位作者 刘柿良 陈源 申理嘉 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期338-346,357共10页
采用L^9(3^4)正交试验等方法,以野生宜昌百合(Lilium leucanthum)鳞片为外植体,分别在光照和黑暗培养条件下,研究了TDZ、NAA、2,4-D不同浓度配比对宜昌百合的胚性愈伤组织诱导效果的影响,并采用石蜡切片技术对愈伤组织进行了的组织学观... 采用L^9(3^4)正交试验等方法,以野生宜昌百合(Lilium leucanthum)鳞片为外植体,分别在光照和黑暗培养条件下,研究了TDZ、NAA、2,4-D不同浓度配比对宜昌百合的胚性愈伤组织诱导效果的影响,并采用石蜡切片技术对愈伤组织进行了的组织学观察。在此基础上,探讨了NAA对体胚苗壮苗生根的影响。结果表明:在光照条件下诱导胚性愈伤组织的最佳培养基为MS+TDZ0.5mg·L^-1+NAA1.0mg·L^-1+2,4-D0.05mg·L^-1,诱导率为62.690%;黑暗条件下诱导胚性愈伤组织的最佳培养基为MS+TDZ0.5mg·L^-1+NAA1.5mg·L^-1+2,4-D0.1mg·L^-1,诱导率为59.423%。胚性愈伤组织黄绿色或深绿色,颗粒状明显;非胚性愈伤组织松散易碎、呈水渍状,经石蜡切片观察可观察到胚性愈伤组织细胞核大、胞质浓,且细胞内含丰富淀粉粒,细胞直径为50~80μm。非胚性愈伤组织细胞较大,未见明显细胞核,直径约为100~180μm。体胚苗壮苗生根的最适宜培养基为1/2MS+NAA0.2mg·L^-1+AC1g·L^-1,培养60d后,幼苗移至草炭∶蛭石∶珍珠岩=1∶1∶1基质中,成活率为90%。本试验成功建立了宜昌百合鳞片胚性愈伤组织的再生体系,为宜昌百合利用胚状体进行无性育种以及种质资源的创新奠定了基础。 展开更多
关键词 宜昌百合 胚性愈伤组织 再生体系
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连香树胚性与非胚性愈伤组织生理生化差异及同工酶分析
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作者 王慧纯 韦虹宇 +2 位作者 刘金炽 候玉坤 梁宏伟 《基因组学与应用生物学》 CSCD 北大核心 2018年第10期4449-4454,共6页
本研究以连香树未成熟种子子叶胚诱导产生的胚性愈伤组织与非胚性愈伤组织为原材料,测定了两者的可溶性蛋白质、可溶性糖及游离脯氨酸的含量,并利用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术（polyacrylamide gelelectrophoresis, PAGE）对两者的... 本研究以连香树未成熟种子子叶胚诱导产生的胚性愈伤组织与非胚性愈伤组织为原材料,测定了两者的可溶性蛋白质、可溶性糖及游离脯氨酸的含量,并利用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术（polyacrylamide gelelectrophoresis, PAGE）对两者的过氧化物酶（peroxidase, POD）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、淀粉酶（amylase, AMY）同工酶进行了分析。比较发现胚性愈伤组织在可溶性蛋白质和游离脯氨酸的含量上均极显著高于非胚性愈伤组织。在可溶性糖含量上,胚性愈伤组织也显著地高于非胚性愈伤组织。胚性愈伤组织具有较高的代谢活性,为进一步胚性分化提供物质和能量基础。POD、SOD和AMY同工酶在连香树胚性愈伤组织与非胚性愈伤组织中酶带差异明显,表明这3种酶的活性与胚性愈伤组织的诱导密切相关,酶谱的差异可作为体细胞胚胎发生的参考标记。 展开更多
关键词 连香树 生理生化性质 胚性愈伤组织 非胚性愈伤组织 同工酶
香榧幼胚发育与胚性感受态之间的相关性 预览 被引量：1
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作者 龚丽 胡恒康 +4 位作者 胡渊渊 喻卫武 吴家胜 黄坚钦 张启香 《浙江农林大学学报》 CSCD 北大核心 2018年第5期861-867,共7页
以突破种鳞第8周至第15周种子的香榧Torreya grandis‘Merrillii’幼胚为外植体,研究了香榧幼胚胚龄、生长素等对香榧胚性愈伤组织以及体细胞胚直接发生的影响,筛选出高胚性感受态的香榧幼胚胚龄,并根据幼胚内源吲哚乙酸(IAA)和脱落酸(A... 以突破种鳞第8周至第15周种子的香榧Torreya grandis‘Merrillii’幼胚为外植体,研究了香榧幼胚胚龄、生长素等对香榧胚性愈伤组织以及体细胞胚直接发生的影响,筛选出高胚性感受态的香榧幼胚胚龄,并根据幼胚内源吲哚乙酸(IAA)和脱落酸(ABA)质量分数检测结果,初步确定了高胚性感受态的香榧幼胚生理特点。结果表明:在SH附加0.1 mg·L^-1 NAA培养基中培养,第9周幼胚的胚性愈伤组织发生率最高,为48.3%,第10周幼胚的体胚直接发生率最高,为42.7%;而培养于SH基本培养基中的第14周幼胚直接萌发率最高,为65.1%。香榧不同胚龄幼胚内源ABA及IAA质量分数检测结果表明:不同发育时期香榧幼胚的内源IAA及ABA质量分数具显著差异(P<0.05)。其中香榧第8周幼胚内源IAA的质量分数最高,为53.90 ng·g-1,随着胚龄的逐渐增加,内源IAA质量分数呈下降趋势,第15周内源IAA质量分数最低,为35.60 ng·g^-1。内源ABA质量分数随着胚龄的增加呈先缓慢下降,再快速上升,后下降,其中第15周达到最大值,为160.20 ng·g^-1。通过对香榧幼胚离体培养及内源激素的测定,发现香榧第8~12周幼胚具有较高的胚性感受态。该研究结果对维持香榧幼胚高胚性感受态,开展香榧胚性愈伤组织及体胚发生培养条件的优化提供了技术指导。 展开更多
关键词 植物学 香榧 胚性愈伤组织 体细胞胚 内源激素 胚龄
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安祖花胚性愈伤组织诱导及植株再生研究 预览 被引量：1
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作者 刘宝骏 刘国锋 《热带亚热带植物学报》 CSCD 北大核心 2018年第4期407-414,共8页
为构建安祖花(Anthurium andreanum)胚性愈伤组织再生体系,以3个盆栽品种幼嫩叶片和叶柄为外植体,分析了基本培养基、植物生长调节剂组合和培养条件等因素的影响。结果表明,安祖花胚性愈伤组织诱导的最佳培养基为改良MS3+1.5 mg L–1 2,... 为构建安祖花(Anthurium andreanum)胚性愈伤组织再生体系,以3个盆栽品种幼嫩叶片和叶柄为外植体,分析了基本培养基、植物生长调节剂组合和培养条件等因素的影响。结果表明,安祖花胚性愈伤组织诱导的最佳培养基为改良MS3+1.5 mg L–1 2,4-D+0.5 mg L–1 KT+4%蔗糖+2%葡萄糖+0.25%Phytagel,且胚性愈伤组织诱导能力差异显著,表现为‘粉冠军’>‘罗宾奴’>‘冠军’和叶片>叶柄,其中‘粉冠军’叶片的胚性愈伤组织诱导率可达57.9%。胚状体分化的最佳培养基为1/2改良MSa+2%蔗糖+0.25%Phytagel,其中?粉冠军?叶片诱导的胚状体分化率可达31.6%,且在光、暗下分化率的差异不显著。分化苗移栽后的成活率可达100%。 展开更多
关键词 安祖花 胚性愈伤组织 体细胞胚 组织培养
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桃儿七体细胞胚胎发生的初步探究
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作者 郭生虎 陈虞超 +1 位作者 朱永兴 关雅静 《分子植物育种》 CSCD 北大核心 2018年第19期6455-6460,共6页
以桃儿七种子胚培养获得7 d生的无菌苗,切取无菌苗的下胚轴、子叶做为外植体,通过调控不同生长调节剂浓度配比,诱导培养获得愈伤组织,利用愈伤组织进行体细胞胚胎发生研究,观察体细胞胚胎的发育过程,分析不同激素配比对桃儿七体细胞胚... 以桃儿七种子胚培养获得7 d生的无菌苗,切取无菌苗的下胚轴、子叶做为外植体,通过调控不同生长调节剂浓度配比,诱导培养获得愈伤组织,利用愈伤组织进行体细胞胚胎发生研究,观察体细胞胚胎的发育过程,分析不同激素配比对桃儿七体细胞胚发生的影响,从而建立桃儿七体细胞胚胎发生技术体系。本研究结果表明最适宜桃儿七愈伤组织诱导的培养基是MS＋0.2 mg/L NAA＋0.1 mg/L GA3＋1.0 mg/L 6-BA,有利于胚性愈伤组织转化和增殖的培养基为MS＋1.0 mg/L 6-BA＋0.1 mg/L NAA＋0.1 mg/L GA3＋300 mg/L CH＋40.0 g/L蔗糖,培养基MS＋6-BA 0.5 mg/L＋GA30.1 mg/L＋NAA 0.01 mg/L有利于体细胞胚的增殖和萌发。 展开更多
关键词 桃儿七 胚性愈伤组织 体细胞胚
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