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曲古霉素A通过调控Ku70乙酰化水平对结肠癌HCT116细胞上皮间充质转化和侵袭转移的影响
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作者 孟瑾 刘新利 +4 位作者 车玲 陈明 吴漫 马晨珂 赵冠人 《军事医学》 CAS 北大核心 2019年第2期140-145,共6页
目的探讨曲古霉素A(TSA)通过调控Ku70乙酰化水平对结肠癌HCT116细胞上皮间充质转化(EMT)和侵袭转移的影响。方法体外培养HCT116细胞,采用MTT法筛选并确定TSA的最佳给药浓度;采用Western印迹(WB)检测对照组(DMSO处理组)和TSA处理组细胞中... 目的探讨曲古霉素A(TSA)通过调控Ku70乙酰化水平对结肠癌HCT116细胞上皮间充质转化(EMT)和侵袭转移的影响。方法体外培养HCT116细胞,采用MTT法筛选并确定TSA的最佳给药浓度;采用Western印迹(WB)检测对照组(DMSO处理组)和TSA处理组细胞中Ku70及其乙酰化水平以及EMT相关蛋白E-钙黏蛋白(cadherin)、N-钙黏蛋白、Snail和Slug的表达情况;采用Transwell-迁移和侵袭实验观察TSA介导Ku70乙酰化对HCT116细胞侵袭和转移能力的影响。结果 MTT检测结果表明TSA可明显降低HCT116细胞的活性(P<0.05);WB结果显示,TSA可明显上调HCT116细胞中acetyl-Ku70的蛋白水平并抑制其EMT,表现为上调上皮细胞标志蛋白E-钙黏蛋白的表达,并下调EMT标志蛋白N-钙黏蛋白及EMT相关转录因子Snail和Slug的表达(P<0.05);此外,Transwell-迁移和侵袭实验结果表明,TSA可明显抑制HCT116细胞的迁移和侵袭(P<0.05)。结论 TSA可能通过上调HCT116细胞中Ku70乙酰化水平,降低Ku70与DNA的亲和力,从而抑制肿瘤细胞DNA的损伤修复能力,发挥抑制结肠癌细胞EMT和迁移侵袭的作用,为临床抗结肠癌转移治疗提供新的思路和作用靶点。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 曲古霉素A Ku70乙酰化 HCT166细胞 上皮间充质转化 肿瘤 肿瘤转移 肿瘤药物
人结直肠癌肿瘤干样细胞生物学特性及其与细胞自噬关系
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作者 侯松林 蒋先虹 +3 位作者 周国俊 李利发 张广军 周彤 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1253-1260,共8页
目的:探讨人结直肠癌肿瘤干样细胞的生物特性及其与自噬发生的关系。方法:采用无血清培养法从人结直肠癌HCT116细胞中获取HCT116球细胞(结直肠癌肿瘤干样细胞);分别用克隆集落形成实验、成球实验、Transwell实验检测HCT116细胞与HCT116... 目的:探讨人结直肠癌肿瘤干样细胞的生物特性及其与自噬发生的关系。方法:采用无血清培养法从人结直肠癌HCT116细胞中获取HCT116球细胞(结直肠癌肿瘤干样细胞);分别用克隆集落形成实验、成球实验、Transwell实验检测HCT116细胞与HCT116球细胞的增殖能力、自我更新能力及侵袭和迁移能力,用免疫荧光法检测两种细胞中自噬标志物LC3B的荧光表达,并用RT-PCR和Western blot分别检测两种细胞中LC3B及自噬相关基因ATG5、ATG7的mRNA与蛋白表达。结果:HCT116球细胞克隆形成能力、新成球能力以及侵袭与迁移能力均较HCT116细胞明显增强(均P<0.05)。HCT116球细胞中LC3B的荧光表达强度较HCT116细胞明显增高(P<0.05);HCT116球细胞中LC3B、ATG5、ATG7的mRNA和蛋白表达量较HCT116细胞均显明显升高(均P<0.05)。结论:结直肠癌肿瘤干样细胞较结直肠癌细胞具有更强的自我更新和体外增殖能力,以及更强的侵袭和迁移能力,该生物学特性可能与其高自噬活性密切相关。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 肿瘤干细胞 自噬 肿瘤
HOXA末端转录本反义RNA在肝癌组织中的表达及对肝癌HepG2细胞增殖、侵袭与迁移能力的影响
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作者 陈大欣 吴瑶强 +2 位作者 姜峰 李海洋 吕洪洋 《肿瘤研究与临床》 CAS 2019年第9期581-585,共5页
目的探讨HOXA末端转录本反义RNA(HOTTIP)在肝癌组织中的表达以及对肝癌HepG2细胞增殖、侵袭与迁移能力的影响。方法收集2012年1月至2018年6月在辽宁省丹东市第一医院经手术切除的肝癌组织及对应的癌旁组织标本各60例,应用实时荧光定量... 目的探讨HOXA末端转录本反义RNA(HOTTIP)在肝癌组织中的表达以及对肝癌HepG2细胞增殖、侵袭与迁移能力的影响。方法收集2012年1月至2018年6月在辽宁省丹东市第一医院经手术切除的肝癌组织及对应的癌旁组织标本各60例,应用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测HOTTIP在肝癌组织及癌旁组织中的表达情况,并分析表达情况与临床病理特征的关系。通过细胞转染技术构建HOTTIP高表达HepG2细胞株为实验组,设空载质粒pcDNA3.1-NC为对照组。CCK-8法检测HOTTIP对HepG2细胞增殖能力的影响,Transwell法检测HOTTIP对HepG2细胞侵袭与迁移能力的影响。结果HOTTIP mRNA在肝癌组织中的表达高于癌旁组织,差异有统计学意义(1.9±0.6比0.9±0.7,t=6.069,P<0.01)。以HOTTIP mRNA表达中位值(1.92)为临界点,将60例肝癌病例分为高表达组(30例)和低表达组(30例)。HOTTIP表达与TNM分期、分化程度及淋巴结转移有关(χ2值分别为10.800、8.076、5.711,均P<0.05),与患者年龄、性别、肿瘤直径、肿瘤数目、有无合并肝炎及甲胎蛋白(AFP)水平无关(均P>0.05)。RT-qPCR结果显示转染过表达HOTTIP肝癌HepG2细胞中HOTTIP mRNA表达增加,与对照组相比差异有统计学意义(63±6比13±9,t=9.129,P<0.01)。CCK-8法实验结果提示HepG2细胞过表达HOTTIP后细胞增殖活力增强(24、36、72 h在490 nm处吸光度分别为1.497±0.017比0.826±0.006、2.002±0.025比1.211±0.020、3.257±0.042比1.772±0.021),差异均有统计学意义(t值分别为5.321、7.349、8.793,均P<0.01)。Transwell侵袭实验中,实验组转入底层膜的细胞数为(101±9)个,多于对照组的(41±11)个,差异有统计学意义(t=6.839,P<0.01)。Transwell迁移实验中,实验组转入底层膜的细胞数为(112±9)个,多于对照组的(53±11)个,差异有统计学意义(t=7.105,P<0.01)。结论HOTTIP在肝癌组织中表达上调,过表达HOTTIP后能够促进肝癌细胞的增殖、侵袭与迁移。 展开更多
关键词 肿瘤 HOXA末端转录本反义RNA 细胞增殖 肿瘤 肿瘤转移
TGF-β1对结直肠癌细胞株侵袭转移及IL-22表达的影响 预览
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作者 阮洪训 秦晓宁 +5 位作者 黄炜 李猛 赵晶 任鹏涛 郝英豪 林林 《天津医药》 CAS 北大核心 2019年第9期907-912,共6页
目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)对结直肠癌细胞株侵袭转移及白细胞介素22(IL-22)蛋白表达的影响。方法以结直肠癌HCT116细胞株为研究对象,以不同浓度(0、5、10、15、20、30、50μg/L)TGF-β1处理24、48 h后,CCK-8法检测结直肠癌HCT11... 目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)对结直肠癌细胞株侵袭转移及白细胞介素22(IL-22)蛋白表达的影响。方法以结直肠癌HCT116细胞株为研究对象,以不同浓度(0、5、10、15、20、30、50μg/L)TGF-β1处理24、48 h后,CCK-8法检测结直肠癌HCT116细胞体外增殖情况;将结直肠癌HCT116细胞株分为对照组和10μg/L TGF-β1处理组。Transwell侵袭迁移实验和划痕实验检测TGF-β1对HCT116细胞侵袭迁移能力的影响;采用RT-PCR检测TGF-β1对HCT116细胞TGF-β1、IL-22 mRNA表达的影响;免疫细胞化学染色和Western blot检测HCT116细胞中TGF-β1、IL-22、信号转导和转录激活因子3(STAT3)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平。结果 CCK-8结果显示,0、5、10、15、20、30、50μg/L TGF-β1溶液刺激24、48 h后,不同TGF-β1浓度处理组结直肠癌HCT116细胞光密度(OD)值差异均无统计学意义(均P>0.05)。10μg/L TGF-β1处理HCT116细胞48 h后,细胞侵袭能力、迁移能力和迁移距离均明显升高(均P<0.01);TGF-β1处理组TGF-β1 mRNA表达水平明显高于对照组,而IL-22 mRNA表达水平明显低于对照组(均P<0.01);免疫细胞化学染色和Western blot结果显示,TGF-β1处理组TGF-β1、STAT3蛋白表达水平明显高于对照组,而IL-22、E-cadherin蛋白表达水平明显低于对照组(均P<0.05)。结论 TGF-β1可能促进HCT116细胞侵袭和迁移,但对HCT116细胞的增殖影响不明显,结直肠癌HCT116细胞中TGF-β1可能抑制IL-22蛋白的表达。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 肿瘤 肿瘤转移 转化生长因子Β1 白细胞介素22
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缺氧诱导Calpain 2表达可促进胰腺癌细胞迁移和侵袭
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作者 曾智锐 雷珊 +6 位作者 张金娟 杨宇石 薛燕 兰金芝 孙远梅 胡晓霞 陈腾祥 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期595-605,共11页
目的:探讨缺氧微环境中卡配因即钙蛋白酶(Calpain)1和Calpain 2蛋白表达情况,以及调控Calpain 2蛋白表达对胰腺癌PANC-1细胞迁移和侵袭的影响。方法:通过公共数据库GEPIA(Gene Expression Proling Interactive Analysis)分析Calpain 1和... 目的:探讨缺氧微环境中卡配因即钙蛋白酶(Calpain)1和Calpain 2蛋白表达情况,以及调控Calpain 2蛋白表达对胰腺癌PANC-1细胞迁移和侵袭的影响。方法:通过公共数据库GEPIA(Gene Expression Proling Interactive Analysis)分析Calpain 1和Calpain 2 mRNA在胰腺癌组织中的表达情况,以及它们与患者生存预后的相关性。采用蛋白质印迹法和实时荧光定量PCR法分别检测在常氧(21%O2)和缺氧(1%O2)条件下,胰腺癌PANC-1细胞中Calpain 1、Calpain 2 mRNA和蛋白的表达水平。将靶向Calpain 2编码基因CAPN 2的siRNA转染胰腺癌PANC-1细胞,采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法验证CAPN 2基因沉默效果。分别在常氧和缺氧条件下培养Calpain 2低表达组和阴性对照组细胞,然后采用划痕愈合实验和Transwell小室法分别检测各组细胞的迁移和侵袭能力,再采用蛋白质印迹法检测各组细胞中Calpain 2、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达水平,最后用倒置显微镜观察各组细胞的形态学变化。结果:相对于正常胰腺组织,胰腺癌组织中Calpain 1和Calpain 2 mRNA表达水平明显增高(P值均<0.01),并且Calpain 2高表达与胰腺癌患者的不良预后有明显相关性(P=0.013)。相对于常氧条件,缺氧条件下胰腺癌PANC-1细胞中Calpain 1 mRNA和蛋白表达水平变化不明显,而Calpain 2 mRNA和蛋白表达水平明显上调(P值均<0.01)。成功构建Calpain 2低表达的PANC-1细胞株。在常氧条件下,下调Calpain 2表达可明显抑制PANC-1细胞的迁移和侵袭能力(P值均<0.05);缺氧培养可促进PANC-1细胞迁移和侵袭(P值均<0.05);而在缺氧条件下,下调Calpain 2表达可以逆转缺氧培养对PANC-1细胞迁移和侵袭的促进作用(P值均<0.05)。常氧条件下,下调Calpain 2表达的胰腺癌PANC-1细胞中,E-cadherin表达量增多(P <0.05),Vimentin表达量减少(P <0.05),而且PANC-1细胞轮廓变大,部分细胞有凋亡样改变;缺氧条件下,E-cadherin蛋白表 展开更多
关键词 胰腺肿瘤 细胞低氧 肿瘤微环境 卡配因2 上皮-间质转化 肿瘤
MiR-200c调节人结肠癌SW480细胞迁移与侵袭的分子机制研究
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作者 何平 宋辉 +3 位作者 梁杰雄 邵天松 张钊 李洋 《实用肿瘤杂志》 CAS 2019年第3期210-214,共5页
目的探究miR-200c对人结肠癌SW480细胞侵袭和迁移的影响及其相关机制。方法将SW480细胞分为类似物转染组(转染miR-200c类似物)、抑制物转染组(转染miR-200c核酸抑制剂)、类似物阴性对照组(转染miR-200c类似物的无义序列)、抑制物阴性对... 目的探究miR-200c对人结肠癌SW480细胞侵袭和迁移的影响及其相关机制。方法将SW480细胞分为类似物转染组(转染miR-200c类似物)、抑制物转染组(转染miR-200c核酸抑制剂)、类似物阴性对照组(转染miR-200c类似物的无义序列)、抑制物阴性对照组[加入miR-200c核酸抑制剂的载体(不含miR-200c核酸抑制剂)]以及空白组(不进行任何处理)。实时定量聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)检测12 h和24 h转染效率。细胞划痕实验和transwell侵袭实验检测细胞迁移和侵袭。Western blot法检测转染后β-catenin和E-cadherin的表达。结果细胞划痕实验显示,类似物转染组12 h和24 h后伤痕宽度均高于类似物阴性对照组(均P<0.05),抑制物转染组均低于抑制物阴性对照组(均P<0.05)。Transwell实验显示,与类似物阴性对照组和抑制物阴性对照组比较,类似物转染组24 h和48 h通过8μm孔径的细胞数减少,抑制物转染组增多(均P<0.05)。类似物转染组β-catenin和E-cadherin的表达均升高,抑制物转染组各蛋白表达均下降(均P<0.05)。结论 miR-200c可能通过Wnt/β-catenin信号通路抑制SW480细胞的侵袭和迁移。 展开更多
关键词 结肠肿瘤/病理学 微RNAs 细胞运动 肿瘤 Wnt蛋白质类/代谢 β连环素/代谢 信号传导 肿瘤细胞 培养的
年轻Ⅰa2~Ⅱa2期子宫颈癌患者的构成比变化趋势及临床病理特征分析
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作者 王伟 郝敏 +12 位作者 陈春林 刘萍 凌斌 康山 陆安伟 王武亮 赵卫东 朱前勇 赵岳阳 赵宏伟 靳双玲 倪妍 郎景和 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期666-672,共7页
目的探讨年轻Ⅰa2~Ⅱa2期子宫颈癌患者的构成比变化趋势及临床病理特征.方法收集2004年1月-2016年12月共13年间中国11省市37家三级甲等医院收治的46313例子宫颈癌患者的临床病理资料,按照2018年国际妇产科联盟(FIGO)的临床分期标准进行... 目的探讨年轻Ⅰa2~Ⅱa2期子宫颈癌患者的构成比变化趋势及临床病理特征.方法收集2004年1月-2016年12月共13年间中国11省市37家三级甲等医院收治的46313例子宫颈癌患者的临床病理资料,按照2018年国际妇产科联盟(FIGO)的临床分期标准进行重新分期,选择期别为Ⅰa2~Ⅱa2期、行B型或C型子宫切除+盆腔淋巴结切除术的子宫颈癌患者共19041例,其中年龄≤35岁的年轻患者1888例(≤35岁组),年龄>35岁的中老年患者17153例(>35岁组),分析2004-2016年的13年间年轻Ⅰa2~Ⅱa2期子宫颈癌患者的构成比变化趋势,并比较两组患者发病相关因素、临床病理特征的差异.结果(1)2004-2016年的13年间,≤35岁组患者的构成比呈显著下降趋势(χ^2趋势=119.543,P<0.01);在≤35岁组患者中,2004-2010年间的构成比明显高于2011-2016年间[分别为12.6%(820/6484)、8.5%(1068/12557);χ^2=82.101,P<0.01].(2)与>35岁组患者比较,≤35岁组患者的初潮年龄较早、结婚年龄较晚、孕次和产次较少,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.01);而两组间高危型HPV阳性率比较,差异则无统计学意义(P>0.05).(3)与>35岁组患者比较,≤35岁组患者中临床分期Ⅰ期(分别为68.5%、83.4%)、外生型肿瘤(分别为56.2%、63.2%)、非鳞癌(分别为12.0%、13.9%)所占比例均较高,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05);而两组间低分化所占比例比较,差异则无统计学意义(P>0.05).(4)与>35岁组患者比较,≤35岁组患者中切缘阳性(分别为1.8%、1.1%)、间质浸润深度>1/2(分别为50.9%、40.1%)所占比例均较低,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05);而宫旁浸润、肿瘤直径、淋巴脉管间隙浸润方面,两组间分别比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论2004-2016年的13年间,年轻的Ⅰa2~Ⅱa2期子宫颈癌患者的构成比呈显著下降趋势.相对于中老年患者,年轻的Ⅰa2~Ⅱa2期子宫颈癌患者的初潮年龄较早、Ⅰ期和非鳞癌比� 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 年龄因素 乳头状瘤病毒感染 鳞状细胞 肿瘤 肿瘤分期
槐耳浸膏对人胃癌MKN-45、SGC-7901细胞凋亡及基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶9表达的影响
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作者 高运宾 李晓文 +2 位作者 全秀莲 吕金燕 冀学宁 《肿瘤研究与临床》 CAS 2019年第4期217-222,共6页
目的分析槐耳浸膏对人胃癌低分化细胞株MKN-45和中分化细胞株SGC-7901细胞凋亡及对细胞侵袭、转移相关的基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9表达的影响。方法分别用0(阴性对照组)、5、10、20 mg/ml槐耳浸膏作用于MKN-45和SGC-7901细胞24 h,... 目的分析槐耳浸膏对人胃癌低分化细胞株MKN-45和中分化细胞株SGC-7901细胞凋亡及对细胞侵袭、转移相关的基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9表达的影响。方法分别用0(阴性对照组)、5、10、20 mg/ml槐耳浸膏作用于MKN-45和SGC-7901细胞24 h,经吖啶橙-溴化乙啶(AO-EB)双荧光染色后,显微镜下观察其形态学表现;作用24、48、72 h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡率;作用24 h后,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测MMP-2、MMP-9 mRNA表达情况,以凝胶电泳后条带吸光度值为其表达量。结果荧光显微镜下观察发现,阴性对照组细胞绿染(正常细胞),大小均一,结构完整;随着槐耳浸膏浓度增加,凋亡细胞和坏死细胞比例增加,其中凋亡细胞黄染,形态不规则,细胞膜可见芽状突起,细胞核固缩、碎裂,染色质浓染并沿核膜分布;坏死细胞染成红色,大小、形态较均一。槐耳浸膏作用于MKN-45细胞24 h后,阴性对照组和5、10、20 mg/ml槐耳浸膏组的细胞凋亡率分别为(6.5±0.8)%、(14.6±1.0)%、(18.0±1.1)%、(23.1±1.2)%(F=333.972,P<0.01),作用48 h后分别为(7.3±1.2)%、(18.3±1.6)%、(24.5±1.3)%、(27.2±1.7)%(F=528.432,P=0.001),作用72 h后分别为(7.5±0.9)%、(50.2±1.6)%、(58.0±1.9)%、(69.0±1.4)%(F= 3 814.238,P<0.01)。槐耳浸膏作用于SGC-7901细胞24 h后,阴性对照组和5、10、20 mg/ml槐耳浸膏组细胞凋亡率分别为(12.9±1.0)%、(19.4±1.2)%、(22.0±1.7)%、(23.0±1.9)%(F=120.190,P<0.01),作用48 h后分别为(10.2±1.3)%、(40.9±1.4)%、(51.6±1.9)%、(66.2±1.9)%(F=1 281.342,P<0.01),作用72 h后分别为(27.4±1.8)%、(49.7±1.4)%、(65.1±1.4)%、(69.0±2.0)%(F=1 112.767,P<0.01)。槐耳浸膏诱导两种细胞凋亡时表现为时间和剂量依赖性(均P<0.01)。相同作用条件,SGC-7901细胞凋亡率较MKN-45细胞有增高趋势。槐耳浸膏作用于胃癌MKN-45细胞后,阴性对照组和5、10、20 mg/ml槐耳浸膏组MMP-2 mRNA表达量(吸光度)分别为0.64±0.02、0.4 展开更多
关键词 肿瘤 细胞凋亡 肿瘤 肿瘤转移 槐耳浸膏
微小RNA-138通过调控上皮间质转化抑制乳腺癌侵袭和迁移的机制研究
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作者 沈庆林 彭敏 +4 位作者 章必成 姚颐 徐唐鹏 褚玉新 宋启斌 《中国医师进修杂志》 2019年第1期42-46,共5页
目的探讨微小RNA(miR)-138通过调控上皮间质转化(EMT)影响乳腺癌细胞侵袭和迁移的分子机制。方法2017年7月至2018年6月采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测正常乳腺上皮细胞MCF-10A和乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231转染miR阴性对照模拟物... 目的探讨微小RNA(miR)-138通过调控上皮间质转化(EMT)影响乳腺癌细胞侵袭和迁移的分子机制。方法2017年7月至2018年6月采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测正常乳腺上皮细胞MCF-10A和乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231转染miR阴性对照模拟物(miR-NC)和miR-138模拟物后miR-138表达量;MTT法检测乳腺癌细胞活性;细胞划痕实验和Transwell实验分别检测细胞迁移距离和侵袭率。RT-PCR检测转染miR-138模拟物后EMT关键分子Vimentin、N-cadherin和E-cadherinmRNA表达量。结果MCF-10A中miR-138表达水平明显高于MCF-7和MDA-MB-231(1.006±0.009比0.324±0.027和0.512±0.068),差异有统计学意义(P<0.05);MCF-7和MDA-MB-231miR-138表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。MCF-7和MDA-MB-231转染miR-138模拟物后第3和4天乳腺癌细胞活性明显低于转染miR-NC(MCF-7:0.514±0.052比0.593±0.061和0.643±0.074比0.784±0.081;MDA-MB-231:0.552±0.043比0.614±0.063和0.673±0.074比0.792±0.077),差异有统计学意义(P<0.05)。MCF-7和MDA-MB-231转染miR-138模拟物后乳腺癌细胞迁移距离和侵袭率明显低于转染miR-NC(MCF-7:0.572±0.051比1.003±0.012和0.624±0.043比1.002±0.007,MDA-MB-231:0.472±0.051比1.003±0.095和0.573±0.044比1.004±0.091),差异有统计学意义(P<0.05)。MCF-7和MDA-MB-231转染miR-138模拟物后Vimentin和N-cadherinmRNA表达量明显低于转染miR-NC,而E-cadherinmRNA表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论miR-138在乳腺癌细胞中表达量降低;miR-138可以抑制乳腺癌细胞增殖,并通过调控EMT过程抑制细胞侵袭和迁移能力。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 RNA 上皮细胞-间充质细胞转换 肿瘤 肿瘤转移
DAPK在人食管鳞癌组织及食管癌EC9706细胞中的表达及其对食管鳞癌转移侵袭的影响 预览
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作者 贾敬周 孙继伟 +3 位作者 袁五营 侯智亮 王文波 赵正国 《重庆医学》 CAS 2019年第6期925-928,共4页
目的探讨死亡相关蛋白激酶1(DAPK)在人食管鳞癌组织及EC9706细胞中的表达及其对食管鳞癌转移侵袭的作用。方法采用免疫组织化学法检测人食管鳞癌组织及癌旁正常组织中DAPK的表达。培养人食管癌EC9706细胞,分别用pReceiver-M29-DAPK质粒... 目的探讨死亡相关蛋白激酶1(DAPK)在人食管鳞癌组织及EC9706细胞中的表达及其对食管鳞癌转移侵袭的作用。方法采用免疫组织化学法检测人食管鳞癌组织及癌旁正常组织中DAPK的表达。培养人食管癌EC9706细胞,分别用pReceiver-M29-DAPK质粒和pReceiver-M29转染细胞,以未转染的细胞作为对照组,各组细胞培养48h。应用蛋白印迹法(Western blot)检测各组细胞中DAPK蛋白表达的变化,划痕修复实验检测细胞迁移能力,Transwell小室侵袭实验检测细胞侵袭能力。结果人食管鳞癌组织DAPK的阳性率及DAPK的阳性区域面积明显高于癌旁正常组织(P<0.05)。在未转染的EC9706细胞中和空载脂质体转染的EC9706细胞中未见明显DAPK蛋白表达,DAPK蛋白在转染后的EC9706细胞中高表达(P<0.05)。与未转染的EC9706细胞比较,pReceiverM29-DAPK转染的EC9706细胞迁移率及细胞侵袭数目明显升高(P<0.01),未转染的EC9706细胞与空载脂质体转染的EC9706细胞迁移率及细胞侵袭数目差异无统计学意义(P>0.05)。结论 DAPK在人食管鳞癌组织中高表达,DAPK高表达后促进了EC9706细胞转移和侵袭。 展开更多
关键词 关蛋白激酶1 食管肿瘤 鳞状细胞 EC9706细胞 肿瘤转移 肿瘤
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miR-199a-5p下调NF-κB信号通路激活水平抑制宫颈癌细胞恶性生物学行为 预览
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作者 张明川 张玲 +2 位作者 马一鸣 程淑霞 王莉 《中国医药生物技术》 2019年第4期329-334,共6页
目的探讨miR-199a-5p对宫颈癌细胞生长、侵袭和迁移的影响和机制。方法Real-time PCR测定miR-199a-5p在宫颈癌HeLa、HCC94、CaSki细胞和正常宫颈Ect1/E6E7细胞中的表达差异。在宫颈癌细胞中转染miR-199a-5p mimics,Real-time PCR检测过... 目的探讨miR-199a-5p对宫颈癌细胞生长、侵袭和迁移的影响和机制。方法Real-time PCR测定miR-199a-5p在宫颈癌HeLa、HCC94、CaSki细胞和正常宫颈Ect1/E6E7细胞中的表达差异。在宫颈癌细胞中转染miR-199a-5p mimics,Real-time PCR检测过表达效果,MTT检测增殖,克隆形成实验测定克隆形成能力,Transwell小室测定侵袭和迁移能力,Western blot检测细胞中p-p65、p-IκB蛋白表达变化。使用核因子-κB(NF-κB)激活剂PMA处理转染miR-199a-5pmimics后的宫颈癌细胞,同样使用上述方法测定细胞生长、克隆、侵袭和迁移能力变化。结果miR-199a-5p在宫颈癌HeLa、HCC94、CaSki细胞中的表达水平低于正常宫颈Ect1/E6E7细胞。miR-199a-5pmimics提高宫颈癌细胞中miR-199a-5p表达水平,降低细胞增殖、克隆、侵袭和迁移能力,减少细胞中p-p65、p-IκB蛋白表达。NF-κB激活剂PMA可以逆转miR-199a-5p对宫颈癌细胞增殖、克隆、侵袭和迁移能力的抑制作用。结论miR-199a-5p通过下调NF-κB信号通路激活水平抑制宫颈癌细胞生长、侵袭和迁移。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 肿瘤 细胞增殖 NF-ΚB miR-199a-5p
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乌头碱抑制食管癌EC-1细胞增殖与侵袭并诱导其凋亡作用研究 预览
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作者 周小剑 李玉华 +2 位作者 唐湘 吕钰冰 周嘉彬 《中国医药生物技术》 2019年第4期335-340,共6页
目的研究乌头碱对食管癌EC-1细胞增殖、侵袭和凋亡的影响。方法CCK8法及克隆形成抑制实验检测乌头碱对食管癌EC-1细胞的生长抑制作用;采用Hoechst 33258染色检测乌头碱对EC-1细胞凋亡的影响;Transwell实验观察乌头碱对细胞侵袭能力的作... 目的研究乌头碱对食管癌EC-1细胞增殖、侵袭和凋亡的影响。方法CCK8法及克隆形成抑制实验检测乌头碱对食管癌EC-1细胞的生长抑制作用;采用Hoechst 33258染色检测乌头碱对EC-1细胞凋亡的影响;Transwell实验观察乌头碱对细胞侵袭能力的作用;Western blot检测药物作用后细胞侵袭及凋亡相关蛋白的表达情况。结果CCK8实验结果显示,乌头碱可明显抑制食管癌EC-1细胞增殖,并呈时间和剂量效应(P<0.01),48h对EC-1细胞半数抑制浓度(IC50)为6.171μg/ml。与正常对照组相比,6.25、12.5μg/ml的乌头碱能明显降低EC-1细胞克隆形成能力,抑制细胞侵袭以及诱导细胞凋亡,并且显著下调MMP-9及Bcl-2蛋白的表达。结论乌头碱具有明显的抗肿瘤作用,其机制可能与其抑制肿瘤细胞增殖、侵袭及促凋亡相关。 展开更多
关键词 乌头碱 食管肿瘤 细胞增殖 肿瘤 细胞凋亡
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长链非编码RNA HOST2对胰腺癌细胞增殖迁移和侵袭的影响 被引量:2
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作者 陈伟业 邢宏松 +4 位作者 江帆 吴国俊 黎建军 孙权 潘德锐 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期285-291,共7页
目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)HOST2对胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及机制。方法:qRT-PCR检测正常胰腺上皮细胞系HPDE6-C7及胰腺癌细胞系Panc-1、AsPC-1、BxPC-3、HPAC中lncRNAHOST2表达水平。将Panc-1细胞分别转染siRNA-HOST2(s... 目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)HOST2对胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及机制。方法:qRT-PCR检测正常胰腺上皮细胞系HPDE6-C7及胰腺癌细胞系Panc-1、AsPC-1、BxPC-3、HPAC中lncRNAHOST2表达水平。将Panc-1细胞分别转染siRNA-HOST2(si-HOST2组)和阴性对照序列(阴性对照组)后,用MTT法测定细胞增殖,细胞划痕和Transwell实验测定细胞迁移和侵袭,Western blot测定上皮-间质转化(EMT)相关蛋白vimentin、Snail、Twist的表达。以无转染的Panc-1细胞为空白对照组。结果:与正常胰腺上皮细胞HPDE6-C7相比,lncRNAHOST2在各胰腺癌细胞系中的表达均明显上调(均P<0.05)。与空白对照组比较,si-HOST2组细胞增殖、迁移和侵袭能力均明显减弱,vimentin、Twist1、Snail蛋白相对表达量均明显下调(均P<0.05),而阴性对照组上述指标均无明显变化(均P>0.05)。结论:lncRNAHOST2在胰腺癌细胞中高表达,且与胰腺癌增殖、迁移和侵袭密切相关,其机制可能与调节EMT相关蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 胰腺肿瘤 RNA 长链非编码 细胞增殖 肿瘤 上皮-间质转化
沉默ACLY基因可抑制结肠癌HCT116细胞的迁移和侵袭
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作者 文君 闵雪洁 +4 位作者 赵丽 唐德伟 刘建军 黄钢 赵小平 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期460-468,共9页
目的:探讨沉默ATP柠檬酸裂解酶(ATP citrate lyase,ACLY)基因表达对结肠癌HCT116细胞增殖和迁移的抑制作用。方法:采用成簇规律间隔的短回文重复序列(clustered regulatory interspaced short palindromic repeats,CRISPR)/CRISPR相关蛋... 目的:探讨沉默ATP柠檬酸裂解酶(ATP citrate lyase,ACLY)基因表达对结肠癌HCT116细胞增殖和迁移的抑制作用。方法:采用成簇规律间隔的短回文重复序列(clustered regulatory interspaced short palindromic repeats,CRISPR)/CRISPR相关蛋白9(CRISPR-associated protein 9,Cas9)技术特异性靶向ACLY基因,构建2株稳定沉默ACLY表达的结肠癌HCT116细胞(即ACLY-knockout-1和ACLY-knockout-2,简称KO-1和KO-2)。应用蛋白质印迹法检测KO-1和KO-2组及未敲除ACLY的对照组(Ctrl)HCT116细胞中ACLY蛋白的表达,应用CCK-8法和软琼脂克隆形成实验分别检测Ctrl、KO-1和KO-2组HCT116细胞的增殖能力,划痕愈合实验和Transwell小室法分别检测Ctrl、KO-1和KO-2组HCT116细胞的迁移和侵袭能力,应用实时荧光定量PCR法检测Ctrl、KO-1和KO-2组HCT116细胞中上皮-间质转化标志分子E-cadhrein、N-cadherin和波形蛋白(vimentin,VIM)以及相关转录因子Snail和锌指E盒增强子结合蛋白1(zinc-nger E-box binding homeobox 1,ZEB1)mRNA的表达水平。结果:KO-1和KO-2组HCT116细胞中ACLY蛋白不能正常表达,而Ctrl组HCT116细胞中可见ACLY蛋白表达。细胞培养72和96 h,KO-1和KO-2组HCT116细胞的增殖能力明显低于Ctrl组(P值均<0.01);KO-1组HCT116细胞形成的克隆数显著少于Ctrl组(P<0.01)。KO-1和KO-2组单克隆HCT116细胞的迁移(P值均<0.05)和侵袭(P值均<0.01)能力均低于Ctrl组。KO-1和KO-2组单克隆HCT116细胞中上皮-间质转化标志分子N-cadherin和VIM以及相关转录因子Snail和ZEB1 mRNA的表达水平均明显低于Ctrl组(P值均<0.01),E-cadherin mRNA的表达水平均明显高于Ctrl组(P值均<0.01)。结论:沉默ACLY基因可能逆转结肠癌HCT116细胞的上皮-间质转化,显著抑制结肠癌HCT116细胞的增殖和迁移。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 细胞迁移分析 肿瘤 上皮-间质转化 ACLY基因 成簇规律间隔的短回文重复序列/CRISPR相关蛋白9
miR-34a对乳腺癌细胞增殖与侵袭的影响 预览
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作者 冯刚 李良平 +1 位作者 樊友本 刘志苏 《重庆医学》 CAS 2019年第2期207-211,共5页
目的研究miR-34a对乳腺癌细胞生物学功能的影响及其作用机制,为乳腺癌的诊治提供理论依据。方法实时荧光定量PCR法检测miR-34a在乳腺癌细胞系中的表达,CCK8法、Transwell实验检测miR-34a对乳腺癌细胞增殖、侵袭能力的影响,双荧光素酶法... 目的研究miR-34a对乳腺癌细胞生物学功能的影响及其作用机制,为乳腺癌的诊治提供理论依据。方法实时荧光定量PCR法检测miR-34a在乳腺癌细胞系中的表达,CCK8法、Transwell实验检测miR-34a对乳腺癌细胞增殖、侵袭能力的影响,双荧光素酶法和Western blot法对靶基因Wnt1进行验证,并检测其下游基因β-catenin、CyclinD1的表达。结果miR-34a抑制乳腺癌细胞的增殖、侵袭能力,Wnt1蛋白为miR-34a的直接作用靶点,过表达miR-34a可直接抑制Wnt1蛋白的表达,下游基因β-catenin、CyclinD1也受到抑制。结论miR-34a直接靶向作用于Wnt1蛋白从而抑制乳腺癌细胞的增殖和侵袭。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 MIR-34A WNT1 细胞增殖 肿瘤
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Knosp分级和海绵窦分区在侵袭性垂体瘤经鼻内镜手术中的临床意义 预览
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作者 吴新宇 侯小川 +2 位作者 鲍跃 王义宝 康军(点评) 《中国现代神经疾病杂志》 CAS 北大核心 2019年第3期170-176,共7页
目的探讨Knosp分级和海绵窦分区对评价垂体瘤侵袭性和指导经鼻内镜手术的临床意义。方法75例患者(Knosp分级3级44例、4级31例)均源自2015年7月至2017年6月住院行经鼻内镜手术的垂体瘤病例。术前通过鞍区冠状位MRI计算颈内动脉海绵窦段... 目的探讨Knosp分级和海绵窦分区对评价垂体瘤侵袭性和指导经鼻内镜手术的临床意义。方法75例患者(Knosp分级3级44例、4级31例)均源自2015年7月至2017年6月住院行经鼻内镜手术的垂体瘤病例。术前通过鞍区冠状位MRI计算颈内动脉海绵窦段至前床突上段血管中点连线距离与肿瘤向鞍旁侵袭最远点至该连线垂直距离的比值(比值R)以判断Knosp分级3级垂体瘤的侵袭程度,然后根据内镜下海绵窦分区和海绵窦内侧壁是否受累将侵入不同海绵窦间隙的Knosp分级3级垂体瘤进一步分为3A级(侵袭性和非侵袭性)和3B级,从而制定手术方案。结果Knosp分级3A级垂体瘤患者共36例,肿瘤呈侵袭性生长12例(主要侵入海绵窦后上间隙,影响动眼神经)、非侵袭生长24例(肿瘤推挤海绵窦内侧壁但未侵入,呈假侵袭),侵袭组比值R小于非侵袭组(1.28±0.18对1.74±0.27;t=5.275,P=0.000)。Knosp分级3A级患者中比值R≤1.59(中位值)者17例、>1.59者19例,前者肿瘤侵袭性高于后者(12/17对0/19;Fisher确切概率法:P=0.000)。75例患者中肿瘤全切除率72%(54/75),Knosp分级3级达84.09%(37/44)、4级为54.84%(17/31)。术后平均随访(14.84±5.66)个月,无一例复发。结论术前通过鞍区冠状位MRI计算比值R,有助于评价Knosp分级3A级垂体瘤侵袭程度,结合术中内镜下海绵窦分区,对经鼻内镜垂体瘤切除术具有重要指导意义。 展开更多
关键词 垂体肿瘤 肿瘤 海绵窦 内窥镜 神经外科手术
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乳腺多形性浸润性小叶癌的临床病理特征和预后 预览
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作者 李丽 张秀珊 《安徽医药》 CAS 2019年第8期1637-1641,I0005共6页
目的研究乳腺多形性浸润性小叶癌(invasive pleomorphic lobular carcinoma,P-ILC)的临床病理特征及其预后。方法选用2007年1月至2017年12月合肥市滨湖医院和安徽医科大学第一附属医院同期诊治的86例经典型浸润性小叶癌(classic invasiv... 目的研究乳腺多形性浸润性小叶癌(invasive pleomorphic lobular carcinoma,P-ILC)的临床病理特征及其预后。方法选用2007年1月至2017年12月合肥市滨湖医院和安徽医科大学第一附属医院同期诊治的86例经典型浸润性小叶癌(classic invasive lobular carcinoma,C-ILC)和29例乳腺P-ILC病人的临床病理资料,回顾性分析研究P-ILC的临床病理特征及其预后因素。结果与C-ILC相比,P-ILC病人TNM分期(χ^2=3.902,P=0.048),肿瘤组织学分级(χ^2=18.752,P<0.001),脉管浸润阳性率(27.6%比11.6%,χ^2=4.183,P=0.044),Ki-67增殖指数(χ^2=14.551,P=0.001)和人类表皮生长因子受体2(human epidermalgrowth factor receptor-2,HER-2)阳性率(χ^2=9.135,P=0.015)均较高。单因素分析显示,P-ILC与C-ILC的无病生存率和总生存率均差异有统计学意义(P=0.047,P=0.038)。多因素分析显示淋巴结状态和TNM分期具有独立预后意义(P=0.038,P=0.031)。P-ILC与C-ILC的无病生存率和总生存率差异无统计学意义(P=0.532,P=0.481)。结论与C-ILC相比,P-ILC病人TNM分期、肿瘤组织学分级、脉管浸润阳性率、Ki-67增殖指数和HER-2阳性率均较高。P-ILC具有较差的预后,需要更进一步的研究指导临床选择治疗策略。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 性小叶癌 原位癌 肿瘤 KI-67抗原 受体 表皮生长因子 病理学 分子 预后
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高危胸腺瘤与胸腺癌的CT征象鉴别 预览
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作者 廖俊杰 李胜开 +1 位作者 蓝博文 代海洋 《中国医学影像学杂志》 CSCD 北大核心 2019年第7期513-516,共4页
目的探讨CT对高危胸腺瘤和胸腺癌的鉴别诊断价值。资料与方法回顾性分析137例经手术或穿刺病理证实的高危胸腺瘤和胸腺癌的CT表现,对其CT特征进行分析,并构建Logistic回归模型。结果137例中,高危胸腺瘤45例,胸腺癌92例。胸腺癌出现肿瘤... 目的探讨CT对高危胸腺瘤和胸腺癌的鉴别诊断价值。资料与方法回顾性分析137例经手术或穿刺病理证实的高危胸腺瘤和胸腺癌的CT表现,对其CT特征进行分析,并构建Logistic回归模型。结果137例中,高危胸腺瘤45例,胸腺癌92例。胸腺癌出现肿瘤形态不规则,不均匀强化、坏死或囊变、纵隔侵犯、血管侵犯、淋巴结肿大、心包积液和胸外器官转移的比例均高于高危胸腺瘤,差异有统计学意义(P<0.01);而胸腺癌和高危胸腺瘤在肿瘤大小、部位、钙化、强化程度、胸膜转移、肺转移和胸腔积液等征象间差异无统计学意义(P>0.05)。Logistic回归分析显示,纵隔淋巴结肿大、血管侵犯和心包积液是鉴别高危胸腺瘤和胸腺癌的独立预测因子。受试者工作特征曲线分析显示,该Logistic模型曲线下面积为0.919(95%CI 0.826~0.975)。结论CT对高危胸腺瘤和胸腺癌具有重要的鉴别价值。淋巴结肿大、血管侵犯和心包积液是诊断胸腺癌的重要征象。 展开更多
关键词 胸腺瘤 胸腺肿瘤 体层摄影术 螺旋计算机 淋巴结 肿瘤 血管 心包积液 诊断 鉴别
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sFRP4和WIF1参与无功能垂体腺瘤侵袭和复发的研究
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作者 李丹 王红云 +4 位作者 王大维 王嵩 陈一元 张亚卓 高华 《中华神经外科杂志》 CSCD 北大核心 2019年第5期520-524,共5页
目的探讨分泌型卷曲相关蛋白4(sFRP4)和WNT抑制因子1(WIF1)在无功能垂体腺瘤组织中的表达,分析其与临床特征的关系以及成为治疗靶点的可能性。方法标本取材于2012年1月至2016年12月首都医科大学附属北京天坛医院神经外科收治的且随访资... 目的探讨分泌型卷曲相关蛋白4(sFRP4)和WNT抑制因子1(WIF1)在无功能垂体腺瘤组织中的表达,分析其与临床特征的关系以及成为治疗靶点的可能性。方法标本取材于2012年1月至2016年12月首都医科大学附属北京天坛医院神经外科收治的且随访资料完整的126例无功能垂体腺瘤患者。构建54例侵袭性腺瘤(侵袭组)、72例非侵袭性腺瘤(非侵袭组)和6例正常垂体组织石蜡标本的组织芯片。免疫组织化学方法检测sFRP4和WIF1蛋白的水平;实时荧光定量PCR检测GT1-1细胞中sFRP4和WIF1的mRNA水平;细胞活力实验检测地西他滨对GT1-1细胞增殖的影响;Transwell小室实验检测地西他滨对GT1-1细胞侵袭能力的影响。结果免疫组织化学染色结果显示,侵袭组中sFRP4和WIF1的H-Score值分别为134.5±45.3和73.7±24.1;而非侵袭组分别为223.3±47.6和133.6±35.7(均P<0.05)。随访资料显示,sFRP4和WIF1与肿瘤复发密切相关(r=-0.383,P=0.025;r=-0.557,P=0.006),与肿瘤大小、年龄和性别无关(均P>0.05)。给予地西他滨24 h、48 h和72 h后,与等体积二甲基亚砜(对照组)相比,药物组GT1-1细胞的细胞活力分别为(84.5±7.3)%、(74.3±6.5)%和(62.2±5.8)%(均P<0.05);Transwell实验结果显示,药物组的透膜细胞为(154±42)个,而对照组为(436±85)个(P<0.01)。实时荧光定量PCR实验结果显示,sFRP4和WIF1的mRNA水平随给药时间的延长则逐渐升高(P<0.05)。结论sFRP4和WIF1的表达水平与无功能垂体腺瘤的侵袭性密切相关,地西他滨能上调sFRP4和WIF1的水平,从而起到肿瘤抑制作用。 展开更多
关键词 垂体肿瘤 肿瘤 分泌型卷曲相关蛋白4 WNT抑制因子1 地西他滨
Id-1在肝细胞癌中表达及其在肿瘤转移中作用机制探讨 预览
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作者 艾军华 刘刚 +3 位作者 程素芬 项灯 熊振芳 时军 《中华肝脏外科手术学电子杂志》 CAS 2019年第2期175-178,共4页
目的探讨分化抑制因子-1(Id-1)在肝细胞癌(肝癌)组织中的表达及其在肿瘤转移中的作用机制。方法标本来源于2014年1月至2016年12月在南昌大学第一附属医院接受肝切除的56例肝癌患者组织标本。患者均签署知情同意书,符合医学伦理学规定。... 目的探讨分化抑制因子-1(Id-1)在肝细胞癌(肝癌)组织中的表达及其在肿瘤转移中的作用机制。方法标本来源于2014年1月至2016年12月在南昌大学第一附属医院接受肝切除的56例肝癌患者组织标本。患者均签署知情同意书,符合医学伦理学规定。其中男41例,女15例;年龄26~79岁,中位年龄55岁。45例癌旁肝组织和21例正常肝组织为对照。采用免疫组化法检测Id-1、E-cadherin、Vimentin和MMP-9表达。两组阳性率比较采用χ2检验,并进行Spearman等级相关分析。结果肝癌组织Id-1、E-cadherin、Vimentin、MMP-9表达阳性率分别为86%(48/56)、75%(42/56)、39%(22/56)、84%(47/56),明显高于对照组的62%(41/66)、33%(22/66)、15%(10/66)、47%(31/66)(χ2=8.57,13.62,10.73,11.08;P<0.05)。肿瘤直径>5cm患者Id-1阳性率为100%(24/24),明显高于直径≤5cm患者的75%(24/32);转移患者Id-1阳性率97%(34/35),亦明显高于无转移患者的66%(14/21)(χ2=9.25,10.24;P<0.05)。Id-1表达强度与肝癌分化程度呈负相关(rs=-0.295,P<0.05)。Id-1表达与E-cadherin、MMP-9表达呈负相关(rs=-0.432,-0.326;P<0.05),而与Vimentin表达呈正相关(rs=0.713,P<0.05)。结论Id-1在肝癌中高表达,其可能机制为通过诱导上皮-间质转化和降解细胞外基质而促进肝癌侵袭转移。 展开更多
关键词 肝细胞 肿瘤 肿瘤转移 上皮细胞-间充质细胞转换
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