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7味中药对西藏牦牛源肠出血性大肠杆菌抑菌活性的研究
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作者 赵燕娟 王刚 索朗斯珠 《中兽医医药杂志》 2019年第2期8-11,共4页
考察石榴皮、诃子、炒白术、黄连、败酱草、红藤、薏苡仁等7味中药对西藏牦牛源肠出血性大肠杆菌的抑菌作用。采用纸片法对近年来实验室分离保存的14株西藏牦牛源肠出血性大肠杆菌进行了药物敏感性检测。结果表明,14株牦牛源肠出血性大... 考察石榴皮、诃子、炒白术、黄连、败酱草、红藤、薏苡仁等7味中药对西藏牦牛源肠出血性大肠杆菌的抑菌作用。采用纸片法对近年来实验室分离保存的14株西藏牦牛源肠出血性大肠杆菌进行了药物敏感性检测。结果表明,14株牦牛源肠出血性大肠杆菌对黄连敏感;对石榴皮、诃子、败酱草中度敏感;对炒白术、红藤、薏苡仁均耐药;对14种常用抗生素的药物敏感性检测结果显示,14株牦牛源肠出血性大肠杆菌对万古霉素、青霉素、红霉素表现为耐药,对呋喃妥因中度敏感,对氯霉素、诺氟沙星、万古霉素、头孢唑啉等10种抗生素均敏感。提示7味中药中石榴皮、诃子、黄连、败酱草对肠出血性大肠杆菌病具有一定的治疗作用。 展开更多
关键词 中药 出血性大肠杆菌 抑菌 药敏试验
交叉引物等温扩增技术在EHEC检测中的应用 预览
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作者 刘文鑫 袁超文 冯瑜菲 《中国卫生标准管理》 2019年第6期104-108,共5页
目的建立一种新型的交叉引物等温扩增技术检测组织中的肠出血性大肠杆菌(EHEC),为临床诊断提供快速、灵敏、有效的检测方法。方法根据EHEC O157:H7的基因特征性保守序列,进行交叉、剥离引物设计之后,采用检测探针来进行O157:H7检测,从... 目的建立一种新型的交叉引物等温扩增技术检测组织中的肠出血性大肠杆菌(EHEC),为临床诊断提供快速、灵敏、有效的检测方法。方法根据EHEC O157:H7的基因特征性保守序列,进行交叉、剥离引物设计之后,采用检测探针来进行O157:H7检测,从而检测出比较常见的食源性细菌并对这些细菌的特异性进行验证,对菌液进行不同浓度稀释,从而对交叉引物等温扩增技术检测的灵敏度进行评估,多次实验验证此方法的实用性。结果检测中,仅O157:H7菌株呈阳性,特异性良好,灵敏度也比较高。结论在EHEC O157:H7进行检测的过程中,应用交叉引物等温扩增技术来进行,操作简单易上手,检测速度比较快,检测灵敏结果准确,特异性比较强,应当广泛应用于肠出血性大肠杆菌O157:H7的检测实践当中。 展开更多
关键词 交叉引物 等温扩增技术 出血性大肠杆菌 快速检测 特异性 灵敏度
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西藏牦牛源肠出血性大肠杆菌毒力基因检测与进化分析
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作者 赵燕娟 王刚 索朗斯珠 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期107-114,共8页
为调查西藏地区牦牛源肠出血性大肠杆菌的流行情况,利用PCR检测和生物进化分析方法,对西藏林芝、拉萨不同地、市149株牦牛源大肠杆菌的肠出血性大肠杆菌相关毒力基因进行了研究。结果表明:牦牛源肠出血性大肠杆菌6对毒力基因中,只检出e... 为调查西藏地区牦牛源肠出血性大肠杆菌的流行情况,利用PCR检测和生物进化分析方法,对西藏林芝、拉萨不同地、市149株牦牛源大肠杆菌的肠出血性大肠杆菌相关毒力基因进行了研究。结果表明:牦牛源肠出血性大肠杆菌6对毒力基因中,只检出ehxA基因,检出率为9.40%;对检测到的14株牦牛源肠出血性大肠杆菌进行克隆测序,经系统发育分析发现牦牛源肠出血性大肠杆菌菌株内同源性达到99.9%左右,与GenBank中所录其他菌株的同源性达到99%。因此,西藏牦牛源肠出血性大肠杆菌基因确实存在,其毒力基因主要为ehxA基因;西藏林芝、阿里、日喀则、昌都均有分布,拉萨、山南和那曲地区未检出,应引起重视。西藏地区要根据各地实际情况需要加强监测肠出血性大肠杆菌引起的腹泻,建立流行毒株预警机制并合理用药。 展开更多
关键词 牦牛 出血性大肠杆菌 毒力基因 进化分析
肠道致病菌感染位点识别机制
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作者 杨斌 蒋玲艳 +3 位作者 黄笛 丁鹏 刘斌 王磊 《中国科学:生命科学》 CSCD 北大核心 2019年第9期1069-1075,共7页
肠道是病原菌定殖和感染的主要人体器官.肠道感染每年在世界范围内可造成150~250万人死亡,居所有疾病的第三位.不同的肠道致病菌选择不同的肠道部位侵染、定殖,其中小肠和大肠是病原菌在肠道内定殖和感染的最主要位点.在致病过程中,肠... 肠道是病原菌定殖和感染的主要人体器官.肠道感染每年在世界范围内可造成150~250万人死亡,居所有疾病的第三位.不同的肠道致病菌选择不同的肠道部位侵染、定殖,其中小肠和大肠是病原菌在肠道内定殖和感染的最主要位点.在致病过程中,肠道致病菌通过感受一系列环境信号(生物素、核酸、氧、短链脂肪酸、胆盐等)来精确识别其感染位点,启动致病基因表达,快速吸附或入侵肠上皮细胞,进而导致疾病发生.本文简要综述两种最重要的致病菌(大肠致病菌——肠出血性大肠杆菌,小肠致病菌——沙门氏菌)的感染位点识别机制. 展开更多
关键词 道致病菌 出血性大肠杆菌 沙门氏菌 感染位点 识别机制
5种复合藏药对西藏牦牛源大肠杆菌抗菌活性的研究 预览
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作者 赵燕娟 王刚 +1 位作者 参木友 索朗斯珠 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2019年第2期108-112,共5页
为了解石榴健胃丸、仁青芒觉、十五味黑药丸、仁青常觉等5种复合藏药对西藏牦牛源肠出血性大肠杆菌的抑菌情况。利用药敏试验的研究方法,对近几年来实验室分离保存的14株西藏牦牛源肠出血性大肠杆菌进行了药物敏感性检测的研究。结果表... 为了解石榴健胃丸、仁青芒觉、十五味黑药丸、仁青常觉等5种复合藏药对西藏牦牛源肠出血性大肠杆菌的抑菌情况。利用药敏试验的研究方法,对近几年来实验室分离保存的14株西藏牦牛源肠出血性大肠杆菌进行了药物敏感性检测的研究。结果表明:14株牦牛源肠出血性大肠杆菌对仁青芒觉表现为中度敏感;对石榴健胃丸、十五味黑药丸、仁青二十五味马宝丸、仁青常觉均表现为耐药;14株牦牛源肠出血性大肠杆菌对常用抗生素均敏感。通过动物试验表明,只接种牦牛源肠出血性大肠杆菌没有注射仁青芒觉的分离菌株均能引起大多数小鼠死亡,均具有高致病性,致死率达到95%,而注射了仁青芒觉复合藏药的试验组,死亡情况明显降低。结论提示:5种复合藏药中仁青芒觉对肠出血性大肠杆菌具有一定的治疗价值,目前对于肠出血性大肠杆菌的治疗没有有效的方法,特别是在耐药性泛滥的形势下,大肠杆菌病的治疗方面除了临床上常用的抗生素,复合藏药也是一个良好的选择。 展开更多
关键词 藏药 出血性大肠杆菌 抑菌 药敏试验
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胰岛素受体酪氨酸激酶底物生物学功能的研究进展 预览
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作者 拜苏扬 任茜 +4 位作者 刘征 杨晓艳 陈兆峰 王玉平 周永宁 《山东医药》 2018年第5期90-92,共3页
胰岛素受体酪氨酸激酶底物(IRTKS)是逆向-二重-两性蛋白-RVS超家族成员之一,广泛表达于机体各组织、细胞中。该蛋白能够促进肌动蛋白装配参与板状伪足的形成,并与多种肿瘤相关基因产物相互作用,抑制肿瘤细胞凋亡,促进肿瘤细胞增殖、... 胰岛素受体酪氨酸激酶底物(IRTKS)是逆向-二重-两性蛋白-RVS超家族成员之一,广泛表达于机体各组织、细胞中。该蛋白能够促进肌动蛋白装配参与板状伪足的形成,并与多种肿瘤相关基因产物相互作用,抑制肿瘤细胞凋亡,促进肿瘤细胞增殖、迁移及侵袭;IRTKS作为胰岛素受体适配器,参与调控IR-IRS1-PI3K-AKT信号通路,最终实现对血糖水平的调节;IRTKS还可抑制抗RNA病毒免疫反应,并且与IRSp53共同调节正常的胚胎和胎盘发育;IRTKS在肠出血性大肠杆菌的致病机制中参与形成细菌定植的肌动蛋白底座,促进黏附/脱落损伤。 展开更多
关键词 胰岛素受体酪氨酸激酶底物 肿瘤 细胞形态 代谢 免疫 胚胎 出血性大肠杆菌
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食源性致病菌安全事故处置与警示——以“2011年德国肠出血性大肠杆菌感染暴发疫情”为例 预览 被引量:1
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作者 汤初美 朱龙佼 +2 位作者 郭顺堂 苗敬 许文涛 《生物技术通报》 CSCD 北大核心 2018年第8期204-214,共11页
在全球范围内,随着生活水平的提高,食品安全问题受到了越来越多的关注。而在当今世界的食品安全事件中,由食源性致病菌引起的安全事故以其广泛性、频发性和强致病性成为突出的食品安全问题。首先,概述了食源性致病菌的特点,以及历... 在全球范围内,随着生活水平的提高,食品安全问题受到了越来越多的关注。而在当今世界的食品安全事件中,由食源性致病菌引起的安全事故以其广泛性、频发性和强致病性成为突出的食品安全问题。首先,概述了食源性致病菌的特点,以及历史上几例食源性致病菌导致的食品安全事件来简介食源性致病菌与食品安全之间的关系;接着,以2011年德国肠出血性大肠杆菌感染暴发疫情为示例,详细展开介绍食源性致病菌的致病特点、检测技术及溯源方法,并总结防控措施、政府应对及消费者应对指南;最后,在案例基础上探讨了食源性致病菌安全案例同时实现教学与科普任务的可能性。通过对案例的多角度分析,旨在为食源性致病菌安全事故处置与警示起到推动作用。 展开更多
关键词 食品安全 食源性致病菌 德国 出血性大肠杆菌 警示 案例
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一起输入性肠出血性大肠杆菌聚集性疫情调查 预览
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作者 卞如新 《江苏预防医学》 CAS 2018年第6期681-682,共2页
目的 分析一起涉外船舶船员肠出血性大肠杆菌(EHEC-stx1)感染性腹泻调查处置情况,为处置类似境外输入性传染病疫情事件提供参考。 方法 运用现场流行病学调查方法,结合实验室检测结果进行分析。 结果 2016年3月10-25日,16名船员... 目的 分析一起涉外船舶船员肠出血性大肠杆菌(EHEC-stx1)感染性腹泻调查处置情况,为处置类似境外输入性传染病疫情事件提供参考。 方法 运用现场流行病学调查方法,结合实验室检测结果进行分析。 结果 2016年3月10-25日,16名船员中5例患者出现腹泻、腹疼症状,经运用实时定量荧光PCR方法对16份肛拭纸标本和10份粪便样进行检测,显示1份肛拭纸标本和2份粪便样品EHEC-stx1阳性。 结论 该输入性疫情为肠出血性大肠杆菌感染性腹泻聚集性疫情,应加强信息统一管理,妥善处置涉外传染性疫情。 展开更多
关键词 出血性大肠杆菌 输入性疫情 感染性腹泻
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1株宽噬菌谱肠出血性大肠杆菌噬菌体的分离及生物学特性分析 预览
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作者 孙利厂 周艳 +6 位作者 张莉莉 庞茂达 何涛 包红朵 张辉 何灵尘 王冉 《中国动物传染病学报》 北大核心 2018年第6期58-63,共6页
本研究从养殖场采集的污水样品中分离到宽噬菌谱肠出血性大肠杆菌烈性噬菌体V_EcoM_C1,并进行了噬菌斑、噬菌谱、形态学(透射电镜)、遗传物质、酸碱及热稳定性、一步生长曲线等生物学特性及控制养殖环境中的肠出血性大肠杆菌的污染研究... 本研究从养殖场采集的污水样品中分离到宽噬菌谱肠出血性大肠杆菌烈性噬菌体V_EcoM_C1,并进行了噬菌斑、噬菌谱、形态学(透射电镜)、遗传物质、酸碱及热稳定性、一步生长曲线等生物学特性及控制养殖环境中的肠出血性大肠杆菌的污染研究。结果表明:噬菌体V_EcoM_C1呈现出典型裂解性噬菌体特征,空斑透亮,无晕环,空斑边缘整齐清晰;噬菌体V_EcoM_C1噬菌斑直径为1.0~1.5mm;噬菌体V_EcoM_C1头部椭圆形,长径约86nm,横径约54nm;噬菌体V_EcoM_C1具有可收缩性尾,尾长约76nm,直径约10nm,头部与尾部被颈圈隔开;噬菌体V_EcoM_C1可裂解5种不同血清型肠出血性大肠杆菌,且噬菌斑透亮,具有较宽噬菌谱;噬菌体V_EcoM_C1在30℃~50℃保持高活性;噬菌体V_EcoM_C1在pH5~10稳定;噬菌体V_EcoM_C1感染宿主菌的潜伏期约10min,爆发持续时间约60min,平均爆发量为26,具有较高的裂解活性;噬菌体V_EcoM_C1可以控制养殖环境中的肠出血性大肠杆菌证明该噬菌体可以有效杀灭养殖环境(奶牛料槽表面)中的肠出血性大肠杆菌。综上所述,V_EcoM_C1为1株宽噬菌谱肠出血性大肠杆菌烈性噬菌体,可用于肠出血性大肠杆菌噬菌体制剂的研发。 展开更多
关键词 出血性大肠杆菌 噬菌体 分离 生物学特性
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夏季小心细菌大闹肠道 预览
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作者 任珊珊 《中华养生保健》 2018年第7期16-17,共2页
每年的7~9月是肠道传染病的高发季节,今年发生在欧洲的肠出血性大肠杆菌疫情再次为人们敲响警钟。吃坏肚子,轻则腹绞痛,重则上吐下泻,甚至可能发展为重症,要人性命。
关键词 道传染病 出血性大肠杆菌 细菌 小心 夏季 腹绞痛
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牛源产志贺毒素大肠杆菌分离株的毒力基因分布和遗传进化分析 预览
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作者 薛涛 李丽 +4 位作者 高清清 陈先亮 李甜甜 曲信芹 高崧 《中国畜牧兽医》 北大核心 2017年第10期2878-2885,共8页
为了探讨牛源产志贺毒素大肠杆菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)分离株在毒力基因分布和遗传进化方面与人源EHEC O157菌株之间的关系,本试验选择收集来自江苏某奶牛场的STEC菌株18株以及人源、羊源、猪源、禽源STEC... 为了探讨牛源产志贺毒素大肠杆菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)分离株在毒力基因分布和遗传进化方面与人源EHEC O157菌株之间的关系,本试验选择收集来自江苏某奶牛场的STEC菌株18株以及人源、羊源、猪源、禽源STEC参考菌株9株,参照美国疾病预防控制中心Pulse Net推荐的方法,运用XbaⅠ酶进行酶切并完成脉冲肠凝胶电泳(PFGE)分型和聚类分析;同时对部分STEC菌株进行毒力基因检测。结果表明,经毒力基因检测,不同来源的O157菌株毒力基因分布不尽相同,其中牛源STEC O157与参考株EHEC O157∶H7(EDL933W)的基因排谱最为相近;牛源STEC O18和O26的基因排谱与参考株EHEC O157∶H7(EDL933W)类似,但存在部分基因的缺失。对27株不同来源的STEC分离株进行PFGE,产生了22种不同的酶切图谱。总体来看,不同来源的STEC Dice相似性系数在72%~100%之间。牛源O157分离株与猪源及禽源O157菌株的相似度偏低,而与两株人源O157分离株的相似度偏高,Dice相似性系数在83%~95%之间,牛源O26(克隆群Ⅶ、Ⅷ)与人源O157的相似性系数〉82%。显然,从牛群中分离到的部分STEC菌株与人源EHEC O157具有较近的遗传进化关系。 展开更多
关键词 产志贺毒素大肠杆菌(STEC) 出血性大肠杆菌 毒力基因分布 脉冲场凝胶电泳 遗传进化
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黑龙江省猪场潜在肠出血性大肠杆菌分离鉴定及其遗传相关性分析 预览
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作者 孙奇 姜成刚 《饲料博览》 2017年第3期42-46,共5页
肠出血性大肠杆菌感染是由肠出血性大肠埃希杆菌(EHEC)引起的肠道传染病。EHEC为出血性肠炎的病原,主要有大肠埃希杆菌O157:H7,是1982年新发现的一种致腹泻大肠埃希杆菌。此外,其他血清型如O5、O26、O91、O111和O113大肠杆菌也对人... 肠出血性大肠杆菌感染是由肠出血性大肠埃希杆菌(EHEC)引起的肠道传染病。EHEC为出血性肠炎的病原,主要有大肠埃希杆菌O157:H7,是1982年新发现的一种致腹泻大肠埃希杆菌。此外,其他血清型如O5、O26、O91、O111和O113大肠杆菌也对人类公共卫生造成严重威胁。黑龙江省养猪业发达,试验在黑龙江省5个规模化猪场采集发生腹泻的仔猪粪便样品,进行肠出血性大肠杆菌分离鉴定及其遗传相关性分析。 展开更多
关键词 出血性大肠杆菌 仔猪 腹泻 血清型
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肠出血性大肠杆菌z5150毒素基因在细胞黏附过程中的作用
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作者 何志利 谭琳琳 +4 位作者 王建新 李崭 陈芳红 李涛 王慧 《军事医学》 CSCD 北大核心 2017年第12期978-982,共5页
目的通过体内过度表达验证z5150基因毒性,利用Red重组系统构建肠出血性大肠杆菌(EHEC)z5150基因缺失突变株并探究其致病力。方法在菌体内过度表达z5150基因,测定细菌生长曲线验证其毒性。应用PCR技术扩增出含有卡那霉素抗性基因的目... 目的通过体内过度表达验证z5150基因毒性,利用Red重组系统构建肠出血性大肠杆菌(EHEC)z5150基因缺失突变株并探究其致病力。方法在菌体内过度表达z5150基因,测定细菌生长曲线验证其毒性。应用PCR技术扩增出含有卡那霉素抗性基因的目的基因上下游同源臂片段,电转入含有p KD46质粒的EHEC中,在阿拉伯糖诱导下使打靶片段重组到基因组。卡那霉素基因的两端包含FRT位点,p FLP2质粒可介导FLP位点专一性重组去除抗性标记。经DNA测序验证目的基因缺失后,通过菌株感染HT29细胞和BALB/c雌鼠检测缺失株细胞黏附能力和毒力的改变。结果与结论成功构建EHEC△z5150缺失突变株。z5150的缺失不影响细菌的正常生长,但过度表达后明显抑制细菌生长,发挥毒素效应。与野生株相比,EHEC△z5150缺失突变株对肠上皮细胞黏附能力明显增强;小鼠致死率增高,提示其致病力增强。该研究为EHEC基因功能研究提供了基因敲除技术,证明了Rel E家族z5150参与EHEC细胞黏附,并增强菌株毒力,为进一步研究EHEC致病机制奠定了基础。 展开更多
关键词 出血性大肠杆菌 RED重组系统 毒素 REL E 致病性
肠出血性大肠杆菌O157∶H7z0986-z1444双缺失突变株构建 预览 被引量:1
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作者 苏莉 王建新 +4 位作者 陈芳红 李崭 黄洁 李涛 王慧 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第2期155-159,共5页
目的 采用Red重组方法敲除肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157∶H7z0986和z1444基因,构建双缺失突变株。方法 首先构建z0986、z1444打靶片段;其次以电击法转化感受态细胞,之后通过PCR鉴定所得菌株;最终所得阳性单克隆测定生长曲线。结果 z144... 目的 采用Red重组方法敲除肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157∶H7z0986和z1444基因,构建双缺失突变株。方法 首先构建z0986、z1444打靶片段;其次以电击法转化感受态细胞,之后通过PCR鉴定所得菌株;最终所得阳性单克隆测定生长曲线。结果 z1444单基因缺失突变株(Δz1444/933)及z0986-z1444双基因缺失突变株(Δz0986/Δz1444/933)构建成功,其生长曲线与野生型EHECO157∶H7差异均无统计学意义。结论 z0986与z1444基因缺失对EHEC的生长无影响。构建Δz1444/933及Δz0986/Δz1444/933为深入研究z1444基因的功能及作用机制奠定了基础。 展开更多
关键词 出血性大肠杆菌 RED重组系统 三型分泌系统
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肠出血性大肠杆菌O157∶H7前噬菌体CP-933Y缺失突变株的构建 预览
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作者 张传朋 刘雄 +1 位作者 李涛 王慧 《生物技术通讯》 CAS 2016年第6期804-807,共4页
目的:利用Red重组系统敲除肠出血性大肠杆菌O157∶H7前噬菌体片段CP-933Y,进而构建CP-933Y缺失突变株。方法:以肠出血性大肠杆菌O157∶H7菌株为模板,加入酶切位点PCR扩增前噬菌体CP-933Y上、下游各600 bp的同源臂序列;酶切后分别连接... 目的:利用Red重组系统敲除肠出血性大肠杆菌O157∶H7前噬菌体片段CP-933Y,进而构建CP-933Y缺失突变株。方法:以肠出血性大肠杆菌O157∶H7菌株为模板,加入酶切位点PCR扩增前噬菌体CP-933Y上、下游各600 bp的同源臂序列;酶切后分别连接到p UC19-kan质粒的卡那霉素(包含FRT位点)抗性基因两侧,构建中间是卡那霉素抗性基因标记含有目的基因上、下游同源序列的线性片段;导入含有p KD46质粒的O157∶H7菌株中,利用Red编码的同源重组酶使该片段与目的基因上、下游发生同源重组,卡那霉素抗性基因置换菌株中CP-933Y前噬菌体片段,最后导入p CP20质粒去除卡那霉素抗性标记基因。结果:经PCR及测序验证,O157∶H7菌株中前噬菌体片段CP-933Y被敲除,敲除株与野生株具有相似的生长曲线。结论:构建了大肠杆菌O157∶H7前噬菌体CP-933Y缺失株,为进一步研究前噬菌体CP-933Y的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 出血性大肠杆菌 前噬菌体 CP-933Y RED重组系统
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肠出血性大肠杆菌群体感受系统拮抗策略抗菌机制研究 预览
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作者 曲迪 李治 +2 位作者 罗礼阳 李明凯 罗晓星 《中国药理学与毒理学杂志》 CSCD 北大核心 2016年第10期1090-1091,共2页
目的研究LED209抑制肠出血性大肠杆菌(EHEC)群体感受器Qse C后的体内外抗菌作用,并探寻其抗菌作用机理,寻求不诱导细菌耐药的抗菌新策略。方法利用108CFU肠出血性大肠杆菌EHEC O157:H7野生菌株、EHEC O157:H7的群体感受器Qse C缺陷菌感... 目的研究LED209抑制肠出血性大肠杆菌(EHEC)群体感受器Qse C后的体内外抗菌作用,并探寻其抗菌作用机理,寻求不诱导细菌耐药的抗菌新策略。方法利用108CFU肠出血性大肠杆菌EHEC O157:H7野生菌株、EHEC O157:H7的群体感受器Qse C缺陷菌感染BALB/c小鼠(8~10只/组),并使用5,10和20 mg·kg-1的Qse C抑制剂LED209进行治疗,观察并计数小鼠生存率以及感染小鼠脏器中细菌菌落数(CFU),评价LED209的体内抗菌活性;使用氯磷酸脂质体清除小鼠巨噬细胞后进行腹腔感染,评价EHEC感染时巨噬细胞发挥的保护作用;建立巨噬细胞和EHEC O157:H7野生菌株、EHEC O157:H7的Qse C缺陷菌的共培养模型,使用透射电镜以及流式细胞仪观察及检测LED209对巨噬细胞吞噬细胞功能的影响。提取感染后巨噬细胞中的蛋白,使用Western blotting检测NLRP3-caspase-1介导的炎性复合体的活化程度以及MMP12的表达,使用平板计数法评价巨噬细胞的菌落数,评价巨噬细胞胞内杀菌活性。结果 EHEC O157:H7群体感受抑制剂LED209能够增加感染小鼠生存率,且具有显著的剂量关系,20 mg·kg-1LED209能够提升感染小鼠生存率至60%,并降低小鼠肝、脾、肺、肾中的菌落数,具有体内保护作用;清除小鼠腹腔巨噬细胞后,LED209治疗组与对照组相比小鼠生存率无差异,即巨噬细胞介导群体感受抑制剂的体内保护作用。体外感染巨噬细胞后,LED209 200μmol·L-1能增加巨噬细胞对细菌的吞噬作用,且能增加NLRP3-caspase-1炎性复合体的活化以及巨噬细胞金属基质蛋白酶MMP12的表达水平,降低巨噬细胞中菌落数。结论 LED209抑制EHEC的群体感受器后可以增强巨噬细胞对细菌的吞噬作用;增强巨噬细胞中NLRP3-caspase-1介导的炎性复合体的活化,增加MMP12的表达从而发挥胞内杀菌作用。 展开更多
关键词 出血性大肠杆菌 群体感受系统 巨噬细胞 炎性复合体 巨噬细胞金属基质蛋白酶
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10株动物源肠出血性大肠杆菌的分离与药敏试验
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作者 吕文新 李军朝 +4 位作者 展天松 狄荻 刘慧谋 杨跃飞 王彦红 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第1期150-151,共2页
为了探讨病死动物中肠出血性大肠杆菌的感染情况及分离菌的生化特性和药物敏感性,试验无菌采集病料,对其进行细菌分离、生化鉴定和药敏试验。结果表明:从病料中共采集到10株细菌,将其接种至绵羊血平板上出现B溶血,在麦康凯琼脂培... 为了探讨病死动物中肠出血性大肠杆菌的感染情况及分离菌的生化特性和药物敏感性,试验无菌采集病料,对其进行细菌分离、生化鉴定和药敏试验。结果表明:从病料中共采集到10株细菌,将其接种至绵羊血平板上出现B溶血,在麦康凯琼脂培养基上生长变为粉色;生化鉴定结果基本符合肠出血性大肠杆菌的生化特点;药敏试验结果显示分离菌对不同药物具有不同的敏感性,其中对阿米卡星的敏感率最高达到95.5%,而对多西环素的敏感率仅为4.5%。说明肠出血性大肠杆菌易感染动物,且呈现不同的药物敏感率。 展开更多
关键词 出血性大肠杆菌 分离 溶血 鉴定 生化特性 药物敏感性
肠出血性大肠杆菌O157:H7抗原基因及毒力基因多重荧光定量PCR检测方法的建立 被引量:3
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作者 夏灿 蒋蔚 +5 位作者 刘迎春 陈永军 龙梦瑶 薛俊欣 王权 孙卫东 《畜牧与兽医》 北大核心 2016年第10期13-21,共9页
根据Gen Bank公布的大肠杆菌O157:H7的菌体抗原基因rfb E、鞭毛抗原基因fli C、溶血素基因hly A、紧密黏附素基因eae A和志贺样毒素基因stx1和stx2的序列,同源性比较后选择保守序列分别设计6对特异性的引物及相应的Taqman探针,rfb E/ea... 根据Gen Bank公布的大肠杆菌O157:H7的菌体抗原基因rfb E、鞭毛抗原基因fli C、溶血素基因hly A、紧密黏附素基因eae A和志贺样毒素基因stx1和stx2的序列,同源性比较后选择保守序列分别设计6对特异性的引物及相应的Taqman探针,rfb E/eae A、Stx1/hly A、fli C/Stx2探针5'端分别标记为FAM、HEX、CY5荧光报告基团,3'端均标记为BHQ1荧光淬灭基团。通过优化反应体系和程序,建立2个能够快速、特异性地检测大肠杆菌O157:H7及其4个主要毒力基因的三重荧光定量PCR方法。结果显示,该方法灵敏度高,stx1、rfb E、fli C、eae A、hly A、stx2的最低检测限分别为20、30、20、20、30和40拷贝数/μL;特异性试验证明,该菌与其他菌种无交叉反应;重复性好,变异系数均小于2%;检测过程耗时约1 h。将建立的荧光定量PCR体系应用到人工染菌模拟猪肉样品试验中,未富集或富集8 h后测得大肠杆菌O157:H7的最低检出限分别为200 cfu/m L与1 cfu/m L。以上结果表明,本试验所建立的三重荧光定量PCR方法的敏感性、重复性及特异性均较好,可作为同时快速检测肠出血性大肠杆菌O157:H7及其毒力基因的方法。 展开更多
关键词 出血性大肠杆菌 O157:H7 三重荧光定量PCR 毒力基因 TAQMAN探针
饲料中肠出血性大肠杆菌O157∶H7双重PCR检测方法的建立 被引量:1
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作者 陈玲 王少辉 +3 位作者 任建鸾 诸葛祥凯 汤芳 戴建君 《畜牧与兽医》 北大核心 2016年第8期73-76,共4页
根据肠出血性大肠杆菌(enterohemorrhagic E.coli,EHEC)O157∶H7的O抗原编码基因rfb E和H抗原编码基因fli C分别设计引物,建立双重PCR方法。饲料样品人工污染EHEC O157∶H7后进行增菌培养,利用双重PCR进行检测EHEC O157∶H7。结果表... 根据肠出血性大肠杆菌(enterohemorrhagic E.coli,EHEC)O157∶H7的O抗原编码基因rfb E和H抗原编码基因fli C分别设计引物,建立双重PCR方法。饲料样品人工污染EHEC O157∶H7后进行增菌培养,利用双重PCR进行检测EHEC O157∶H7。结果表明:建立的PCR方法能够特异性扩增出目的条带,敏感性可达到100 cfu细菌。双重PCR方法可以有效地检测出饲料中人工污染的EHEC O157∶H7,人工污染饲料样品经4 h预增菌处理后,该方法的检测下限为20 cfu细菌。本研究建立的双重PCR方法可快速、特异地检测出饲料中污染的EHEC O157∶H7,可用于饲料中EHEC O157∶H7的检测及流行病学调查。 展开更多
关键词 出血性大肠杆菌 O157∶H7 饲料 PCR
2010年全国监测网食源性致病菌实验室检验质控考核的结果分析 被引量:4
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作者 韩海红 郭云昌 +5 位作者 李宁 刘秀梅 陈艳 李业鹏 余东敏 姚景会 《中国食品卫生杂志》 2015年第3期277-282,共6页
目的为了摸底承担监测任务的检验技术机构的食源性致病菌检验能力,确保食源性致病菌检验结果的准确性和可比性,提高监测工作质量。方法制备考核样品,用辐照灭菌的奶粉添加食源性致病菌(沙门菌、金黄色葡萄球菌、肠出血性大肠杆菌、阪... 目的为了摸底承担监测任务的检验技术机构的食源性致病菌检验能力,确保食源性致病菌检验结果的准确性和可比性,提高监测工作质量。方法制备考核样品,用辐照灭菌的奶粉添加食源性致病菌(沙门菌、金黄色葡萄球菌、肠出血性大肠杆菌、阪崎肠杆菌中的2~3种),经稳定性测试后对327个检验机构进行质控考核,用点分数法对上报结果进行评价,Pearsonχ2检验进行率的比较。结果 327个检验机构中有319个上报了检验结果,上报率为97.6%,其中299个检验机构的结果较满意,满意率为93.7%。4种细菌的漏检率不全相同,阪崎肠杆菌的漏检率要高于其他3种。2009年以前入网和2010年新加入监测点的满意率,省级和地市级疾病预防控制中心的满意率差异均没有统计学意义(P〉0.05)。结论本次质控考核为开展针对性的实验室培训提供了数据依据,也反映了全国监测点的4种食源性致病菌检验能力基本满足监测任务的需求。 展开更多
关键词 质量控制 考核 点分数法 沙门菌 金黄色葡萄球菌 出血性大肠杆菌 阪崎杆菌 食源性致病菌
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