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机械牵张对人肺血管内皮细胞通透性的影响及其分子机制 预览
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作者 王亚 兰媛 +4 位作者 傅威 刘晓青 黄勇波 毛璞 黎毅敏 《中华重症医学电子杂志》 2019年第2期151-158,共8页
目的观察机械牵张对人肺动脉内皮细胞(HPAEC)和人肺微血管内皮细胞(HPMVEC)通透性的影响及对通透性关键蛋白VE-cadherin、Claudin-5和Caveolin-1表达的调控。方法采用机械牵张装置Flexcell FX-5000T对HPAEC(ATCC)和HPMVEC(ATCC)施加0.5... 目的观察机械牵张对人肺动脉内皮细胞(HPAEC)和人肺微血管内皮细胞(HPMVEC)通透性的影响及对通透性关键蛋白VE-cadherin、Claudin-5和Caveolin-1表达的调控。方法采用机械牵张装置Flexcell FX-5000T对HPAEC(ATCC)和HPMVEC(ATCC)施加0.5 Hz频率10%或20%牵张应力。应用qRT-PCR及Western Blot方法检测机械牵张前后内皮通透性关键蛋白VEcadherin、Claudin-5、Caveolin-1 mRNA和蛋白含量表达变化。采用细胞动态分析仪以及Transwell小室/异硫氰酸荧光素(FITC)-白蛋白法检测机械牵张后的HPAEC细胞和HPMVEC细胞通透性改变。结果20%机械牵张后,与对照组比较,HPAEC细胞通透性关键蛋白VE-cadherin mRNA和蛋白表达、Claudin-5 mRNA和蛋白表达和Caveolin-1 mRNA表达均下降(P<0.05),而Caveolin-1蛋白水平较对照组无明显变化;HPMVEC细胞通透性关键蛋白VE-cadherin mRNA和蛋白表达,Caveolin-1 mRNA和蛋白表达均下降(P<0.05),而Claudin-5 mRNA和蛋白水平较对照组无明显变化。结论机械牵张会导致肺血管内皮通透性增高,是通过下调通透性关键蛋白的表达,并且两种细胞的通透性影响机制有差异,HPAEC牵涉紧密连接,HPMVEC牵涉跨内皮细胞途径。 展开更多
关键词 机械牵张 人肺动脉内皮细胞 细胞通透性 内皮通透性关键蛋白VEcadherin、Claudin-5、Caveolin-1
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表面活性素对粗毛栓菌富集和吸附铬影响的研究 预览
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作者 杨柳 吴俊贤 +1 位作者 孙丹宇 刘国庆 《合肥工业大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2019年第5期696-701,共6页
文章为探明表面活性素促进粗毛栓菌D2富集/吸附铬的可能原因,对表面活性素浓度对粗毛栓菌D2富集/吸附铬的影响进行了研究,并分析了表面活性素与铬的配合反应、表面活性素对粗毛栓菌细胞通透性的影响。实验结果表明:当表面活性素浓度为0.... 文章为探明表面活性素促进粗毛栓菌D2富集/吸附铬的可能原因,对表面活性素浓度对粗毛栓菌D2富集/吸附铬的影响进行了研究,并分析了表面活性素与铬的配合反应、表面活性素对粗毛栓菌细胞通透性的影响。实验结果表明:当表面活性素浓度为0.20mmol/L时,粗毛栓菌D2富集/吸附Cr(Ⅲ)的量达到最大,比对照样(无表面活性素)分别增加了817.73%(富集)和152.18%(吸附);当表面活性素浓度为0.40mmol/L时,粗毛栓菌D2富集/吸附Cr(Ⅵ)的量比对照样分别增加了558.65%(富集)和222.22%(吸附)。配合实验表明,表面活性素能与铬形成溶解度较低的配合物,降低了溶液中的铬离子浓度;表面活性素能够增加粗毛栓菌细胞通透性,促进细胞对金属离子的吸收。表面活性素促进粗毛栓菌富集/吸附Cr(Ⅲ)和Cr(Ⅵ)的主要原因是其能够增加细胞通透性。 展开更多
关键词 粗毛栓菌 表面活 富集 吸附 细胞通透性 配合作用
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毛蕊异黄酮对流感病毒感染HUVEC细胞通透性及其MLC磷酸化的影响
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作者 张俊杰 钟婧 +5 位作者 张淑静 董瑞娟 葛东宇 玄子男 陈晓鸣 吴莹 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2019年第6期1368-1372,1547-1548共6页
目的:通过检测毛蕊异黄酮(Calycosin)对流感病毒A/PR/8/34(H1N1)感染的脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVECs)通透性升高及其肌球蛋白轻链(MLC)磷酸化的影响来探讨其改善内皮细胞通透性的机制。方法:设置正常... 目的:通过检测毛蕊异黄酮(Calycosin)对流感病毒A/PR/8/34(H1N1)感染的脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVECs)通透性升高及其肌球蛋白轻链(MLC)磷酸化的影响来探讨其改善内皮细胞通透性的机制。方法:设置正常组、病毒组和毛蕊异黄酮组;将HUVEC接种于96孔板,MTT法检测不同浓度毛蕊异黄酮的细胞毒性;30 MOI PR8病毒感染病毒组与毛蕊异黄酮组HUVECs后,毛蕊异黄酮组加入20μg/mL毛蕊异黄酮溶液,采用内皮细胞跨膜电阻法检测各组在不同时间点的跨膜电阻值;激光共聚焦显微镜观察各组细胞内丝状肌动蛋白(Filamentous actin,F-actin)的表达和分布;Western Blot检测各组MLC、p-MLC蛋白表达水平;将MDCK接种于96孔板,用PR8病毒感染细胞,MTT法检测不同浓度毛蕊异黄酮的抗病毒活性。结果:毛蕊异黄酮对HUVEC的最大无毒浓度为40μg/mL,细胞存活率约为91.69%;毛蕊异黄酮组细胞通透性与正常组细胞相比无显著差异,但通透性显著低于病毒组(P<0.05);病毒组的F-actin发生变构、细胞中出现粗大的应力纤维,分布于胞浆中,而毛蕊异黄酮组的F-actin分布于细胞膜、应力纤维减少;与正常组相比,病毒组的p-MLC蛋白表达显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)、与病毒组相比,毛蕊异黄酮组的p-MLC蛋白表达明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);毛蕊异黄酮对流感病毒感染的MDCK细胞的抗病毒作用并不明显。结论:毛蕊异黄酮可通过抑制p-MLC蛋白的表达来抑制流感病毒引起的内皮细胞通透性升高及F-actin变构的作用,从而达到保护内皮细胞的功能。 展开更多
关键词 毛蕊异黄酮 流感病毒 HUVEC 细胞通透性 MLC
抗氧化抗衰老的有效途径 预览
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作者 王晓芊 《中国化妆品》 2019年第7期101-103,共3页
人为什么会衰老?每吸一口气,氧给了你生命力,同时氧会在细胞里转换,变成自由基分子。自由基是什么?自由基(Free Radicals)亦称为游离基,可诱发机体脂类发生过氧化,降低细胞通透性,导致细胞破裂、凋亡,造成人体老化。自由基——老化的元... 人为什么会衰老?每吸一口气,氧给了你生命力,同时氧会在细胞里转换,变成自由基分子。自由基是什么?自由基(Free Radicals)亦称为游离基,可诱发机体脂类发生过氧化,降低细胞通透性,导致细胞破裂、凋亡,造成人体老化。自由基——老化的元凶。延缓衰老,你需要了解的抗氧化成分? 展开更多
关键词 抗氧化成分 抗衰老 自由基分子 细胞通透性 人体老化 延缓衰老 游离基 过氧化
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益生菌对非酒精性脂肪肝相关细胞的作用 预览
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作者 王斌 蔡敏 +3 位作者 黄玲 姜子廷 童敏思 李力 《药学实践杂志》 CAS 2018年第5期409-416,共8页
目的探讨益生菌对非酒精性脂肪肝相关的肠上皮细胞、肝Kupper细胞和肝实质细胞的作用及其作用机制。方法将人肠上皮细胞Caco-2、大鼠肝Kupper细胞和小鼠肝实质细胞AML12分别分成空白对照组、脂多糖(LPS)组、嗜酸乳杆菌组、LPS+嗜酸... 目的探讨益生菌对非酒精性脂肪肝相关的肠上皮细胞、肝Kupper细胞和肝实质细胞的作用及其作用机制。方法将人肠上皮细胞Caco-2、大鼠肝Kupper细胞和小鼠肝实质细胞AML12分别分成空白对照组、脂多糖(LPS)组、嗜酸乳杆菌组、LPS+嗜酸乳杆菌组、粪肠球菌组、LPS+粪肠球菌组、双歧杆菌组、LPS+双歧杆菌组,孵育培养6h。分别检测人肠上皮细胞Caco-2紧密连接相关因子表达情况及细胞通透性、大鼠肝Kupper细胞功能表型相关因子和IκB及p-IκB变化水平、小鼠肝实质细胞AML12脂代谢基因水平和脂类吸收情况。结果益生菌可显著抑制由LPS刺激引起的人肠上皮细胞Caco-2紧密连接相关因子Occludin、Claudin-1、JAM、ZO-1表达的下降和细胞通透性的增加;明显抑制LPS刺激引起的大鼠肝Kupper细胞表达TNF-α、IFN-γ和IL-6的增加,同时抑制IL-4、IL-10、IL-13的降低和p-IκB蛋白表达的增加;显著抑制由LPS刺激引起的小鼠肝实质细胞AML12脂代谢基因ACACA、SREBF1、FAS、FABP3、FABP4、DGAT1的上调和脂类吸收的增加。结论益生菌可以通过促进肠上皮细胞紧密连接相关因子的表达,降低细胞通透性,抑制肝Kupper细胞NF-κB通路活性,降低促炎性细胞因子、增加抑炎性细胞因子表达水平,抑制肝实质细胞脂代谢基因表达和脂类吸收等多种途径,保护非酒精性脂肪肝。 展开更多
关键词 非酒精脂肪肝 益生菌 Caco-2细胞 细胞通透性 KUPFFER细胞 p-IκB AML12细胞 脂类吸收
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烟曲霉对肺微血管内皮细胞通透性的影响及可能机制 预览
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作者 宋珺 韩菁 +1 位作者 孙越 施伟民 《同济大学学报:医学版》 CAS 2018年第3期19-23,共5页
目的探讨烟曲霉对肺微血管内皮细胞通透性的影响及其机制。方法利用激光共聚焦扫描显微镜检测人肺微血管内皮细胞肌动蛋白(F-actin)和细胞跨膜电阻仪测定细胞跨膜电位,以观察细胞通透性的改变,并利用p38 MAPK抑制剂、ROCK抑制剂和蛋... 目的探讨烟曲霉对肺微血管内皮细胞通透性的影响及其机制。方法利用激光共聚焦扫描显微镜检测人肺微血管内皮细胞肌动蛋白(F-actin)和细胞跨膜电阻仪测定细胞跨膜电位,以观察细胞通透性的改变,并利用p38 MAPK抑制剂、ROCK抑制剂和蛋白激酶C抑制剂探讨其机制。结果烟曲霉处理后肺微血管内皮细胞Factin染色的荧光强度显著下降(P〈0.01),烟曲霉处理组也出现细胞跨膜电阻值的显著下降(P〈0.01)。与单独烟曲霉处理组比较,SB203580(20μmol/L,p38 MAPK抑制剂)干预组、Y27632(20μmol/L,ROCK抑制剂)干预组以及LY317615(10μmol/L,蛋白激酶C抑制剂)干预组的跨膜电阻值均显著上升(P〈0.05)。结论烟曲霉处理致肺微血管内皮细胞通透性增加,其机制可能涉及p38 MAPK、ROCK激酶以及蛋白激酶C通路。 展开更多
关键词 烟曲霉 肺微血管内皮细胞 细胞通透性
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HIF2α与细胞通透性关系的研究进展 预览
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作者 张烨 蒋荣珍 《医学研究杂志》 2018年第1期13-15,114共4页
细胞通透性改变是炎性反应、组织缺氧以及细胞代谢障碍等多种疾病的重要病理过程,HIF2ct是细胞缺氧应答反应中重要的调节因子,可对多种基因的表达进行调控。HIF2ct可通过不同的信息调控途径,参与调节不同组织细胞通透性变化的病理性... 细胞通透性改变是炎性反应、组织缺氧以及细胞代谢障碍等多种疾病的重要病理过程,HIF2ct是细胞缺氧应答反应中重要的调节因子,可对多种基因的表达进行调控。HIF2ct可通过不同的信息调控途径,参与调节不同组织细胞通透性变化的病理性过程。 展开更多
关键词 缺氧诱导因子2α 细胞通透性 作用机制
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氧化石墨烯对邻苯二甲酸二丁酯藻毒性的影响 被引量:1
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作者 涂海峰 刘成 +3 位作者 王宇擎 储祺 侯晓冬 李锋民 《环境科学》 CSCD 北大核心 2018年第8期3927-3936,共10页
以海洋微藻青岛大扁藻(Platymonas helgolanidica var.tingtaoensis)为受试对象,研究了氧化石墨烯(graphene oxide,GO)与邻苯二甲酸二丁酯(dibutyl phthalate,DBP)单独及共同对青岛大扁藻的急性毒性效应,考察了藻细胞的生长状况,... 以海洋微藻青岛大扁藻(Platymonas helgolanidica var.tingtaoensis)为受试对象,研究了氧化石墨烯(graphene oxide,GO)与邻苯二甲酸二丁酯(dibutyl phthalate,DBP)单独及共同对青岛大扁藻的急性毒性效应,考察了藻细胞的生长状况,光合色素产量,细胞通透性,氧化应激指标及扫描电镜,以探讨GO的加入对DBP藻毒性的影响.结果表明,低浓度GO(0.1-10 mg·L-(-1))对青岛大扁藻的藻密度和叶绿素产量无明显影响,但藻细胞通透性随GO浓度升高显著增加(P〈0.05),10mg·L-(-1)时达到空白组的2.2倍.DBP对青岛大扁藻的EC50,96 h为(11.14±0.80)mg·L-(-1),其毒性远大于GO(EC50,96 h大于100mg·L-(-1)).1 mg·L-(-1)GO的加入使DBP的EC50,96 h降低到(4.93±2.14)mg·L-(-1),低浓度GO对DBP藻毒性表现出一定的增强作用.1 mg·L-(-1)的GO加入时,对低浓度DBP组(0.1-2 mg·L-(-1))的藻密度、叶绿素产量、细胞通透性水平没有显著性影响,但加剧了高浓度DBP组(4 mg·L-(-1))对藻密度、叶绿素产量的抑制,使单个藻细胞内ROS和SOD平均增加了21%和7%.扫描电镜结果发现GO对藻细胞具有覆盖,包裹及聚集作用,这些可能是DBP藻毒性增强的主要原因.该结果为揭示新型污染物碳纳米材料对海洋生物的风险提供了数据支持. 展开更多
关键词 氧化石墨烯 邻苯二甲酸二丁酯 藻毒 青岛大扁藻 细胞通透性
超声波促进巴氏醋杆菌发酵生长的研究 预览 被引量:1
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作者 孙悦 夏蓉 +2 位作者 陶汇源 石吉勇 邹小波 《中国酿造》 北大核心 2018年第8期45-49,共5页
为促进巴氏醋杆菌(Acetobacter pasteurianus)的生长,该研究探讨了超声波对巴氏醋杆菌的生物量、产酸总量及细胞膜渗透性的影响,利用平板计数法,研究不同超声时间、超声温度及超声功率对巴氏醋杆菌生物量的影响,并对巴氏醋杆菌不同生长... 为促进巴氏醋杆菌(Acetobacter pasteurianus)的生长,该研究探讨了超声波对巴氏醋杆菌的生物量、产酸总量及细胞膜渗透性的影响,利用平板计数法,研究不同超声时间、超声温度及超声功率对巴氏醋杆菌生物量的影响,并对巴氏醋杆菌不同生长时期超声处理对其产酸能力的影响及不同超声时间和功率对巴氏醋杆菌细胞外液核酸和蛋白质渗透性的影响进行研究。结果表明,最优的超声条件为超声时间15 min、超声温度40℃、超声功率600 W。在此最优超声条件下,与无超声处理相比,巴氏醋杆菌生物量增加了82.35%;在巴氏醋杆菌生长稳定期中期(25 h)进行超声处理总酸含量比无超声处理总酸含量高16.70%;核酸和蛋白质的提高率均随着超声时间和超声功率的增大呈先降低后升高的趋势。该研究结果为超声强化镇江香醋发酵过程的应用提供参考。 展开更多
关键词 超声波 巴氏醋杆菌 生物量 总酸含量 细胞通透性
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MAPKs家族在中暑小鼠肺微血管内皮细胞凋亡中的作用及机制研究 预览 被引量:5
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作者 刘亚楠 徐秋林 +6 位作者 郭晓华 周耿标 王郑莲 童华生 陆杰富 邱俊铭 苏磊 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期279-284,共6页
目的研究丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)活化对热打击致小鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)凋亡的影响。方法建立重症中暑小鼠模型,采用TUNEL染色及免疫组化检测肺组织损伤情况。二次磁珠分选法分离乳鼠PMVECs,TUNEL染色检测PMvEcs凋亡情况... 目的研究丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)活化对热打击致小鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)凋亡的影响。方法建立重症中暑小鼠模型,采用TUNEL染色及免疫组化检测肺组织损伤情况。二次磁珠分选法分离乳鼠PMVECs,TUNEL染色检测PMvEcs凋亡情况,Westernblotting检测热打击恢复期(0、2、6h)MAPKs家族活化情况。通过检测单层内皮细胞跨膜电阻(TEER)及辣根过氧化物酶(HRP)值观察不同热打击温度对单层细胞通透性的影响,同时使用MAPKs家族抑制剂检测热打击对单层细胞通透性及凋亡的影响。结果在重症中暑小鼠恢复期肺组织中可观察到PMVECs发生凋亡。TUNEL染色发现随着恢复期时间的延长,PMVECs凋亡数目增多,热打击可使PMVECsMAPKs家族活化且微血管通透性增加,给予p38活化抑制剂SB203s80及ERK活化抑制剂PD98059预处理后细胞通透性增加,凋亡数目增多,而给予TNK抑制剂SP600125预处理后细胞则出现相反的变化。结论重症中暑小鼠PMVECs可发生凋亡,p38及ERK起着抗凋亡的作用,JNK起着促凋亡的作用。 展开更多
关键词 中暑 肺微血管内皮细胞 丝裂原活蛋白激酶类 细胞凋亡 细胞通透性
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ox-Lp(a)通过上调miR-125a-5p靶向抑制10,11-转位酶2增加单层血管内皮细胞通透性 被引量:2
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作者 张凯 邓智敏 +5 位作者 曾召林 陈姣姣 刘亚密 马小峰 姜淼 王佐 《中国动脉硬化杂志》 北大核心 2017年第11期1107-1113,共7页
目的探讨ox-Lp(a)损伤血管内皮细胞的表观遗传调控机制。方法生物信息学分析和筛选与10,11-转位酶2(TET2)mRNA 3’-UTR靶向结合的候选miRNA,荧光素酶报告基因系统验证其结合的靶向性;以0 mg/L、25 mg/L、50 mg/L、100 mg/L及200 mg/... 目的探讨ox-Lp(a)损伤血管内皮细胞的表观遗传调控机制。方法生物信息学分析和筛选与10,11-转位酶2(TET2)mRNA 3’-UTR靶向结合的候选miRNA,荧光素酶报告基因系统验证其结合的靶向性;以0 mg/L、25 mg/L、50 mg/L、100 mg/L及200 mg/L的ox-Lp(a)与HUVEC-12内皮细胞孵育24 h,或用100 mg/L ox-Lp(a)与HUVEC-12内皮细胞孵育0 h、6 h、12 h、24 h及48 h,qRT-PCR和Western blot分别检测TET2 mRNA和蛋白的表达水平。qRT-PCR检测hsa-miR-125a-5p表达水平,以5hmc水平分析TET2活性的变化,Transwell检测ox-Lp(a)对单层血管内皮细胞通透性的影响。结果生物信息学分析和荧光素酶报告基因验证结果表明TET2为hsa-miR-125a-5p的靶基因,且hsa-miR-125a-5p与TET2 mRNA的3’-UTR结合的自由能值低(-30.1 kcal/mol)。ox-Lp(a)呈剂量和时间依赖性抑制TET2蛋白和mRNA的表达水平,以100 mg/L ox-Lp(a)作用HUVEC-12内皮细胞24 h的效果最佳;100 mg/L ox-Lp(a)作用HUVEC-12内皮细胞24 h后,TET2活性显著下降,且显著上调hsamiR-125a-5p的表达。anti-hsa-miR-125a-5p能逆转ox-Lp(a)对HUVEC-12内皮细胞TET2蛋白和mRNA表达水平的抑制作用和活性下降。ox-Lp(a)显著增加单层血管内皮细胞通透性,但可被anti-hsa-miR-125a-5p部分逆转。结论ox-Lp(a)通过上调hsa-miR-125a-5p并与TET2 mRNA 3’-UTR靶向性结合,抑制TET2蛋白和mRNA的表达水平及活性,从而增加单层血管内皮细胞通透性。 展开更多
关键词 血管内皮细胞 微小RNA 细胞通透性 氧化型脂蛋白(a) 10 11-转位酶2
基因沉默解离素-金属蛋白酶17(ADAM17)对高糖环境下人视网膜微血管内皮细胞通透性、增殖、迁移以及蛋白表达的影响 预览
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作者 吕伯昌 刘蓓 +3 位作者 刘静 杨新光 赵曦泉 朱忠桥 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2017年第3期205-209,共5页
目的 探讨基因沉默解离素-金属蛋白酶17(a disintegrin and metalloproteinase 17,ADAM17)对高糖环境下人视网膜微血管内皮细胞(human retinal microvascular endothelial cells,HRMECs)通透性、增殖、迁移以及蛋白表达的影响。方... 目的 探讨基因沉默解离素-金属蛋白酶17(a disintegrin and metalloproteinase 17,ADAM17)对高糖环境下人视网膜微血管内皮细胞(human retinal microvascular endothelial cells,HRMECs)通透性、增殖、迁移以及蛋白表达的影响。方法 将HRMECs分为4组:正常组(5 mmol·L-1 D-葡萄糖)、高糖组(25 mmol·L-1 D-葡萄糖)、NC(siRNA阴性对照)+高糖组和siADAM17(ADAM17 siRNA)+高糖组。ADAM17表达采用实时定量PCR和蛋白印迹法检测;辣根过氧化酶法检测HRMECs通透性;CCK-8和BrdU检测细胞增殖;Transwell检测细胞迁移;蛋白印迹法检测p-EGFR、p-ERK和MMP9表达水平。结果 与正常组相比,高糖组ADAM17蛋白表达水平显著升高(P〈0.01),NC+高糖组与高糖组相比无明显差异(P〉0.05);与NC+高糖组比较,siADAM17+高糖组ADAM17蛋白表达水平显著下调(P〈0.05)。沉默ADAM17可降低高糖环境下HRMECs的通透性。沉默ADAM17可抑制高糖介导的细胞增殖。Transwell实验结果显示,各组相对迁移的细胞数分别为高糖组(157.00±7.93)个、NC+高糖组(169.00±10.12)个、siADAM17+高糖组(121.00±9.28)个、正常组(110.00±8.25)个。沉默ADAM17可抑制高糖介导的细胞迁移。siADAM17+高糖组较NC+高糖组p-EGFR、p-ERK和MMP9蛋白表达显著减少(均为P〈0.01)。结论 基因沉默ADAM17可能通过EGFR、ERK、MMP9通路降低高糖诱导的细胞通透性并抑制细胞增殖和迁移。 展开更多
关键词 解离素-金属蛋白酶17 细胞通透性 细胞迁移
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小檗碱对流感病毒感染HUVEC细胞骨架及通透性的影响
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作者 陈晓鸣 张淑静 +5 位作者 齐晓宇 玄子男 张俊杰 葛东宇 王旭丹 吴莹 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2017年第12期28-31,共4页
目的 :检测小檗碱(Berberine)对流感病毒A/PR/8/34(H1N1)感染的脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVECs)细胞骨架及通透性的影响。方法 :常规鸡胚增殖传代甲型流感病毒A/PR/8/34,-80℃冰箱保存,空斑实... 目的 :检测小檗碱(Berberine)对流感病毒A/PR/8/34(H1N1)感染的脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVECs)细胞骨架及通透性的影响。方法 :常规鸡胚增殖传代甲型流感病毒A/PR/8/34,-80℃冰箱保存,空斑实验检测病毒滴度;将HUVEC接种于96孔板,MTT法检测小檗碱对HUVEC的细胞毒性;用30 MOI A/PR/8/34病毒株刺激病毒组和小檗碱给药组HUVECs,小檗碱组加入5μg/m L小檗碱溶液,分别于给药的第0、2、6、12、24、36小时检测各组电阻值;激光共聚焦检测观察各组细胞骨架形态。结果 :A/PR/8/34的病毒滴度为(2~3)×10^8 PFU/m L;小檗碱对HUVEC最大无毒浓度为10μg/m L,细胞存活率约为94.05%;小檗碱组(5μg/m L)较病毒组细胞通透性显著降低(P〈0.05),且与正常组相差不大(P〉0.05);小檗碱组与病毒组相比,HUVEC细胞内球状肌动蛋白聚合成丝状肌动蛋白(filamentous actin,F-actin)分布于细胞膜,应力纤维减少,且细胞边缘恢复平整,呈现出不规则多边形,与正常组细胞表现趋向一致。结论 :小檗碱具有改善流感病毒感染后的内皮细胞骨架重构、细胞收缩和细胞形态改变的作用,从而改善流感病毒感染后内皮细胞通透性的升高。 展开更多
关键词 小檗碱 流感病毒 细胞骨架 细胞通透性
急性肺损伤炎症环境中TNF-α介导肺通透性增加的机制研究 预览 被引量:2
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作者 李方治 侯春阳 孙佳英 《临床和实验医学杂志》 2017年第19期1914-1918,共5页
目的探讨急性肺损伤(ALI)时,炎症环境中肿瘤坏死因子(TNF-α)介导肺通透性增加的机制。方法30只SPF级健康Balb/c小鼠分为6组,对照组、0 h实验组、1 h实验组、2 h实验组、4 h实验组、8 h实验组,每组5只。实验组采用腹腔注射脂多糖(... 目的探讨急性肺损伤(ALI)时,炎症环境中肿瘤坏死因子(TNF-α)介导肺通透性增加的机制。方法30只SPF级健康Balb/c小鼠分为6组,对照组、0 h实验组、1 h实验组、2 h实验组、4 h实验组、8 h实验组,每组5只。实验组采用腹腔注射脂多糖(LPS)法,根据体重用要求的剂量于不同时间点进行注射,对照组注入同等剂量的生理盐水。LPS诱导急性肺损伤模型后,眼眶取血制备血清,游离肺组织碾磨制备上清,ELISA检测肺组织上清液中TNF-α的含量;LPS诱导急性肺损伤模型后,尾静脉注射伊文思蓝,在620 nm波长下检测不同时间点伊文思蓝溶液的吸收值;Western Blotting检测急性肺损伤小鼠模型中肺组织的低氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管扩张刺激磷蛋白(VASP)的蛋白表达水平改变。结果 LPS能成功诱导急性肺损伤模型,4 h实验组和8 h实验组的ELISA结果显示,实验组肺组织上清液中的TNF-α的含量明显升高;LPS造模后,尾静脉注射伊文思蓝,在620 nm波长下检测伊文思蓝溶液的吸收值,各组1 h开始升高,4 h实验组较0 h实验组明显升高,且差异有显著性(P〈0.01);在小鼠的急性肺损伤模型中,实验组小鼠肺组织中HIF-1α的蛋白表达在4 h和8 h明显增加,同时VASP的蛋白表达在4 h和8 h明显降低。结论急性肺损伤症过程中,TNF-α可诱导HIF-1α的活化,进而引起VASP的表达下调,肺泡-毛细血管屏障损害,随着时间的增长,情况有所减退。 展开更多
关键词 小鼠 肺损伤 VASP TNF-Α 细胞通透性
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卡博替尼抑制产单核细胞李斯特菌侵袭Caco-2细胞的机制 预览 被引量:1
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作者 杜蕾 曾庆 +7 位作者 何肖龙 邱嘉文 宋豪语 吴同薇 蔡丹娴 龙敏 罗军 曹虹 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期226-231,共6页
目的探讨c-Met受体阻断剂卡博替尼(Cabozantinib,XL-184)能否抑制产单核细胞李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)进入Caco-2细胞并降低对细胞的损伤。方法通过侵袭实验研究XL-184在抑制LM进入Caco-2细胞中的作用,并研究剂量及时间... 目的探讨c-Met受体阻断剂卡博替尼(Cabozantinib,XL-184)能否抑制产单核细胞李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)进入Caco-2细胞并降低对细胞的损伤。方法通过侵袭实验研究XL-184在抑制LM进入Caco-2细胞中的作用,并研究剂量及时间与侵袭率的关系;Caco-2细胞种植于Transwell上室,LM感染单层Caco-2细胞,然后在上室中加入辣根过氧化物酶(HRP),通过测定跨上皮细胞电阻(TEER)值及计数从上室渗透到下室的LM数量和HRP浓度,预测X-184对单层细胞通透性的保护作用;检测乳酸脱氢酶(LDH)释放水平推测细胞膜的渗透性;荧光染色鉴定细胞活性。结果相比对照组,侵袭实验显示,XL-184处理组的LM侵袭率明显降低(P=0.000),且侵袭率随XL-184浓度和作用时间的增加而显著降低,联合用药效果优于单独用药(P〈0.05)。细胞通透性实验表明,XL-184可明显抑制LM诱导的跨上皮细胞电阻(TEER)的降低(P〈0.05),并可降低辣根过氧化物酶和细菌介导的细胞通透性(P=0.000);细胞活性实验表明,XL-184可提高细胞存活率(P〈0.01);同时,可显著降低LM诱导的LDH释放(P〈0.05)。结论 XL-184可能在抑制LM侵袭Caco-2及降低LM诱导的Caco-2损伤中起重要作用。因此,XL-184有望成为潜在的治疗和预防李斯特菌感染的有效药物。 展开更多
关键词 卡博替尼 产单核细胞李斯特菌 CACO-2细胞 侵袭 细胞通透性
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脓毒症患者血清诱导血管内皮细胞通透性相关因素研究 被引量:3
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作者 郑运江 胡晓峰 +4 位作者 陈庆青 王彩平 化学胜 章韵 汤耀卿 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1059-1062,共4页
目的 观察脓毒症患者血清对人血管内皮细胞单层通透性的影响。方法 选择45例脓毒症患者纳入试验组,根据处理方法的不同分为试验Ⅰ组(n=32,不处理)和试验Ⅱ组[(n=23,ROCK抑制药(Y27632)],同时将40例健康志愿者分为正常Ⅰ组(n=20,... 目的 观察脓毒症患者血清对人血管内皮细胞单层通透性的影响。方法 选择45例脓毒症患者纳入试验组,根据处理方法的不同分为试验Ⅰ组(n=32,不处理)和试验Ⅱ组[(n=23,ROCK抑制药(Y27632)],同时将40例健康志愿者分为正常Ⅰ组(n=20,不处理)和正常Ⅱ组(n=20,Y27632)。分别以20%脓毒症患者血清刺激内皮细胞6 h;测定内皮细胞单层通透性,观察内皮细胞的形态分布并检测RhoA(Ras homolog A)蛋白的表达。结果 与正常组相比,试验Ⅰ组的内皮细胞通透性显著升高(P〈0.05),但是试验Ⅱ组预处理Y27632后,可以显著抑制内皮细胞通透性的增高(P〈0.05);抑制药本身(正常Ⅱ组)对内皮细胞通透性无影响。试验Ⅰ与Ⅱ组的血清可增加内皮细胞间间隙的数量,改变细胞通透性,并能有效诱导RhoA蛋白的表达。结论 脓毒症患者血清能够明显诱导血管内皮细胞通透性增高;其机制与激活Rho相关蛋白激酶/Rho相关的卷曲蛋白激酶(Rho/ROCK)信号通路、破坏内皮细胞屏障功能有关。 展开更多
关键词 脓毒症 人血管内皮细胞 细胞通透性
低氧环境下小鼠肾小球内皮细胞通透性的变化及其机制 预览 被引量:2
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作者 王妍君 罗朋立 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第31期31-33,共3页
目的观察低氧环境对小鼠肾小球内皮细胞(MGEC)透通性的影响,并探讨其机制。方法取处于对数生长期的MGEC,将细胞分为低氧1组、低氧2组、抑制剂1组、抑制剂2组和对照组。低氧1、2组分别在10%、5%氧浓度的低氧环境中培养36 h;抑制剂1、2... 目的观察低氧环境对小鼠肾小球内皮细胞(MGEC)透通性的影响,并探讨其机制。方法取处于对数生长期的MGEC,将细胞分为低氧1组、低氧2组、抑制剂1组、抑制剂2组和对照组。低氧1、2组分别在10%、5%氧浓度的低氧环境中培养36 h;抑制剂1、2组细胞先加入重组人VEGF抑制剂继续培养48 h,然后分别在10%、5%氧浓度的低氧环境培养36 h;对照组细胞常规培养,不做特殊处理。各组细胞分别于低氧处理0、12、24、36 h测算单层MGEC对白蛋白的通透率,反映细胞通透性;采用real-time PCR法检测小鼠MGEC中的VEGF mRNA。结果低氧1组、低氧2组培养0、12、24、36 h时细胞通透率逐渐升高,同组不同时点相比,P均〈0.05;低氧1、2组培养12、24、36 h细胞通透率高于抑制剂1、2组及对照组(P均〈0.05)。低氧处理12、24、36 h低氧2组细胞通透率高于低氧1组。低氧1、2组培养0、12、24、36 h时细胞中VEGF mRNA相对表达量均逐渐升高,组内不同时点相比,P均〈0.05;低氧1、2组培养12、24、36 h细胞中VEGF mRNA相对表达量高于抑制剂1、2组及对照组,且低氧2组VEGF mRNA相对表达量高于低氧1组(P均〈0.05)。结论低氧环境下小鼠MGEC通透性升高,可能与细胞中VEGF mRNA表达上调有关。 展开更多
关键词 低氧损伤 肾小球内皮细胞 细胞通透性 血管内皮生长因子
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补阳还五汤通过调节MAPK信号通路抗内皮细胞损伤的作用 被引量:6
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作者 刘志勇 游宇 +2 位作者 刘玉晖 易文凤 曾兰芳 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第22期2098-2103,共6页
目的 研究补阳还五汤抗同型半胱氨酸(Hcy)诱导的脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤的作用及机制。方法 以补阳还五汤连续灌胃SD大鼠1周,提取补阳还五汤含药血清。将HUVEC置于5%CO2、37℃细胞恒温培养箱中培养,当细胞汇合度达到80%,选取对... 目的 研究补阳还五汤抗同型半胱氨酸(Hcy)诱导的脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤的作用及机制。方法 以补阳还五汤连续灌胃SD大鼠1周,提取补阳还五汤含药血清。将HUVEC置于5%CO2、37℃细胞恒温培养箱中培养,当细胞汇合度达到80%,选取对数期细胞,开始分组与模型制备。将HUVEC随机分为10组:空白组(10%空白血清)、模型组(10%空白血清+Hcy)、小中大3个百分含量实验组(5%,10%,20%补阳还五汤)、模型组-Ⅰ(10%胎牛血清+Hcy)、抑制剂-Ⅰ组(10μmol·L-1MAPK抑制剂SB203580+Hcy)、抑制剂-Ⅱ组(10μmol·L-1ERK抑制剂PD98059+Hcy)、抑制剂-Ⅲ组(10μmol·L-1Rho激酶抑制剂Y27632+Hcy)、抑制剂-Ⅳ组(10μmol·L-1MLCK抑制剂ML-7+Hcy),且Hcy造模浓度为3 mmol·L-1。用噻唑蓝(MTT)测定Hcy对HUVEC的毒性作用;用蛋白质印迹法测定丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)蛋白的表达量;用MillicellERS电阻仪测定各组单层细胞跨膜电阻值(TEER)的变化。结果 与空白组的光密度值(代表细胞增值)为0.95±0.05比较,7个Hcy梯度组的光密度值分别是0.91±0.06,0.88±0.08,0.68±0.06,0.60±0.07,0.58±0.04,0.51+0.06,0.40+0.02,差异有统计学意义(P〈0.05)。P38MAPK蛋白的相对表达量:空白组、模型组、小中大3个百分含量实验组、模型对照组(即模型-Ⅰ组)及4个抑制剂组分别是0.42±0.06,1.10±0.12,0.33±0.03,0.68±0.08,0.46±0.04,0.42±0.03,0.37±0.04,0.48±0.05,0.32±0.02,0.63±0.08。磷酸化P38MAPK蛋白相对表达量以上各组分别是0.12±0.01,0.42±0.04,0.40±0.05,0.18±0.02,0.20±0.01,0.22±0.02,0.18±0.02,0.30±0.03,0.17±0.01,0.19±0.02。与空白组比较,模型组的P38MAPK、磷酸化P38MAPK表达量显著增加,差异有明显统计学意义(P〈0.01)。与模型组比较,中高2个百分含量实验组和抑制剂组,磷酸化P38MAPK蛋白相对表达量表达显著下降,差异 展开更多
关键词 补阳还五汤 同型半胱氨酸 丝裂原活化蛋白激酶 细胞通透性 人脐静脉内皮细胞
Absence of galectin-3 attenuates neuroinflammation improving functional recovery after spinal cord injury 预览
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作者 Caio Andrade Prins Fernanda Martins Almeida Ana Maria Blanco Martinez 《中国神经再生研究:英文版》 SCIE CAS CSCD 2016年第1期92-93,共2页
<正>After spinal cord injury(SCI),a cascade of events begins.At first,there is physical damage with disruption of the blood-brain barrier(BBB)and the integrity of the nervous tissue.The disruption of central ner... <正>After spinal cord injury(SCI),a cascade of events begins.At first,there is physical damage with disruption of the blood-brain barrier(BBB)and the integrity of the nervous tissue.The disruption of central nervous system(CNS)BBB alters the endothelial permeability,the protein and chemokines expression and the propensity to release in situ inflammatory cytokines,overcoming anti-inflammatory signals,facilitating the attraction 展开更多
关键词 脊髓损伤 炎症反应 功能恢复 中枢神经系统 细胞通透性 轴突再生 生长抑制因子 细胞凋亡
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奶牛乳房炎的预防 预览
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作者 李宁 王应玉 王亮 《山东畜牧兽医》 2016年第10期32-33,共2页
乳房炎导致奶牛乳腺组织损伤,乳糖、乳脂、乳蛋白合成减少,产奶量下降。病变组织细胞通透性增加,血液混入乳汁,乳中脂肪酶和血浆酶含量增加,乳脂和酪蛋白降解加速,乳质变差,营养减少,保质期缩短。急性乳房炎有一定的全身症状,... 乳房炎导致奶牛乳腺组织损伤,乳糖、乳脂、乳蛋白合成减少,产奶量下降。病变组织细胞通透性增加,血液混入乳汁,乳中脂肪酶和血浆酶含量增加,乳脂和酪蛋白降解加速,乳质变差,营养减少,保质期缩短。急性乳房炎有一定的全身症状,在一定程度上危害奶牛健康。奶牛乳房炎较难治愈,发病严重的奶牛必须淘汰,以免给奶农带来经济损失。 展开更多
关键词 奶牛乳房炎 预防 细胞通透性 乳房炎 组织损伤 蛋白合成 病变组织 蛋白降解
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