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新化合物OSU-03012对结肠癌细胞增殖、迁移以及凋亡的影响 预览
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作者 李玉琴 施建平 +3 位作者 金怒云 步丽梅 王凯 田培营 《天津医药》 CAS 北大核心 2019年第2期113-118,225共7页
目的在细胞水平上初步探讨新化合物OSU-03012抗结肠癌的机制。方法分别用1、3、5和10μmol/L OSU-03012化合物干预的人结肠癌细胞株HCT-116作为研究对象,以等体积二甲基亚砜(DMSO)处理的HCT-116细胞作为对照组。CCK-8法检测各组细胞干... 目的在细胞水平上初步探讨新化合物OSU-03012抗结肠癌的机制。方法分别用1、3、5和10μmol/L OSU-03012化合物干预的人结肠癌细胞株HCT-116作为研究对象,以等体积二甲基亚砜(DMSO)处理的HCT-116细胞作为对照组。CCK-8法检测各组细胞干预24、48、72 h时的抑制率,划痕实验和Transwell实验检测各组细胞迁移能力,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,免疫荧光、Western blot检测各组细胞Bcl-2、Caspase-3蛋白表达情况,Real-time PCR检测各组细胞Bcl-2、Caspase-3 mRNA表达情况。结果对照组、1μmol/L组、3μmol/L组、5μmol/L组和10μmol/L组的细胞抑制率、凋亡率呈逐渐升高趋势,而细胞迁移距离、细胞迁移数目呈逐渐减小或降低趋势,组间多重比较差异均有统计意义(均P<0.05);3、5、10μmol/L组Bcl-2 mRNA和蛋白表达量低于对照组,而Caspase-3mRNA和蛋白表达量高于对照组(均P<0.05)。结论新化合物OSU-03012可抑制结肠癌细胞增殖与迁移,并促进结肠癌细胞凋亡,且呈剂量依赖效应。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 细胞增殖 细胞运动 细胞凋亡 OSU-03012 环氧合酶-2
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Abl相互作用蛋白3的生物学功能及与疾病关系的研究进展 预览
2
作者 熊静 王梓炫 +1 位作者 陈飞宇 邢昂 《精准医学杂志》 2019年第4期357-361,共5页
Abl相互作用蛋白3(ABI3)属于ABI蛋白家族,参与WAVE复合体的组成,但不同于家族其他成员,ABI3是一种磷蛋白,磷酸化后的ABI3失去活性,因而不促进c-Abl介导的WAVE磷酸化,而是与F-肌动蛋白结合参与细胞骨架重组。既往研究表明ABI3参与多种肿... Abl相互作用蛋白3(ABI3)属于ABI蛋白家族,参与WAVE复合体的组成,但不同于家族其他成员,ABI3是一种磷蛋白,磷酸化后的ABI3失去活性,因而不促进c-Abl介导的WAVE磷酸化,而是与F-肌动蛋白结合参与细胞骨架重组。既往研究表明ABI3参与多种肿瘤的发生发展,具有抑制肿瘤细胞迁移、增殖以及促进细胞凋亡的生物学作用。最近又发现ABI3与阿尔茨海默病及Nasu-Hakola病的发病机制相关,甚至还参与了衰老的相关过程。ABI3作为治疗多种临床疾病潜在的新靶点,具有广阔的研究前景。 展开更多
关键词 ABI3蛋白 衔接蛋白质类 信号转导 细胞骨架 细胞运动 细胞增殖 细胞凋亡 肿瘤 阿尔茨海默病 Nasu-Hakola病 综述
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半枝莲总黄酮对非小细胞肺癌细胞增殖及迁移的影响 预览
3
作者 任守雷 郭晓晓 +2 位作者 陈翠翠 赵海燕 李来庆 《安徽医药》 CAS 2019年第10期1939-1942,I0002共5页
目的观察半枝莲总黄酮对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移及凋亡的影响并对其机制进行初步探索。方法体外培养非小细胞肺癌A549细胞,分为阴性对照组、实验组、阳性对照组。阴性对照组用1640培养液200μL处理细胞,实验组分别用1,5,10,20,40μg... 目的观察半枝莲总黄酮对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移及凋亡的影响并对其机制进行初步探索。方法体外培养非小细胞肺癌A549细胞,分为阴性对照组、实验组、阳性对照组。阴性对照组用1640培养液200μL处理细胞,实验组分别用1,5,10,20,40μg/mL半枝莲总黄酮处理细胞24 h,阳性对照组用200μL 40μg/mL芦丁溶液处理细胞。采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)观察细胞增殖情况;通过流式细胞术检测细胞凋亡情况;蛋白质印迹法(Western Blot)检测凋亡抑制蛋白Survivin和促凋亡蛋白酶Caspase?3蛋白的表达;迁移划痕实验检测迁移的情况。结果MTT检测结果显示,阳性对照组的增殖抑制率为(57.234±0.533)%,实验组的增殖抑制率分别为(14.852±1.059)%、(23.486±1.366)%、(36.396±0.321)%、(46.179±1.334)%和(51.530±1.054)%,随浓度增加抑制率显著升高,呈浓度依赖(F=1 408.303,P<0.001);流式细胞术检测细胞凋亡率,阴性对照组(9.09±0.50)%、阳性对照组(67.27±1.48)%、实验组分别为(24.62±0.70)%、(34.67±0.46)%、(46.92±0.29)%、(55.67±0.57)%和(59.29±0.73)%,实验组的细胞凋亡率均高于阴性对照组(F=1 467.681,P<0.001);Western Blot结果显示,实验组Survivin蛋白表达均低于阴性对照组,Caspase?3蛋白表达均高于对照组(F=34.176,P<0.001;F=57.730,P<0.001);迁移划痕实验结果显示,半枝莲总黄酮抑制肺腺癌A549细胞迁移并呈现剂量依赖性。结论半枝莲总黄酮可抑制人肺腺癌A549细胞的增殖,可能与Survivin蛋白降低和Caspase?3蛋白表达量升高有关;另外,半枝莲总黄酮可抑制人肺腺癌A549细胞的迁移。 展开更多
关键词 半枝莲 非小细胞 凋亡抑制蛋白质类 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 细胞迁移分析 细胞运动 总黄酮
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miR-182-5p靶向原癌基因Bcl-2对骨肉瘤细胞增殖和迁移的调节作用 预览
4
作者 陈勇 韩俊 +2 位作者 蒋现永 钟群琼 余国力 《解放军医药杂志》 CAS 2019年第7期15-19,共5页
目的 探讨miR-182-5p靶向原癌基因Bcl-2对骨肉瘤细胞增殖和迁移的调节作用。方法 收集2017年10月—2018年5月我院经病理检查确诊为骨肉瘤的组织及癌旁正常组织,检测miR-182-5p和Bcl-2在人骨肉瘤组织中表达情况。将骨肉瘤细胞株MG-63分... 目的 探讨miR-182-5p靶向原癌基因Bcl-2对骨肉瘤细胞增殖和迁移的调节作用。方法 收集2017年10月—2018年5月我院经病理检查确诊为骨肉瘤的组织及癌旁正常组织,检测miR-182-5p和Bcl-2在人骨肉瘤组织中表达情况。将骨肉瘤细胞株MG-63分为实验组、对照组和空白组;实验组将miR-182-5p过表达后转染到骨肉瘤细胞,对照组不做处理,空白组加入同等剂量的Bcl-2空白转染液。采用蛋白免疫印迹实验检测骨肉瘤细胞株MG-63中miR-182-5p调控Bcl-2的表达情况,细胞划痕实验检测miR-182-5p对骨肉瘤细胞株MG-63迁移能力的影响,MTT实验检测miR-182-5p对骨肉瘤细胞株MG-63增殖能力的影响。结果 人骨肉瘤组织中miR-182-5p表达水平低于癌旁正常组织( P <0.01)。过表达miR-182-5p后骨肉瘤细胞株MG-63中Bcl-2的表达水平相对上调。实验组miR-182-5p表达水平高于对照组和空白组,细胞增殖率低于空白组和对照组( P <0.05)。实验组骨肉瘤细胞株MG-63迁移距离低于空白组和对照组( P <0.05)。结论 miR-182-5p靶向原癌基因Bcl-2对骨肉瘤细胞增殖和迁移有一定的抑制作用,表明miR-182-5p在人骨肉瘤的发生发展过程中扮演着重要角色。 展开更多
关键词 骨肉瘤 miR-182-5p BCL-2 细胞增殖 细胞运动
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FBXO22对乳腺癌细胞侵袭迁移能力的影响 预览
5
作者 方虹舒 张薇 《国际检验医学杂志》 CAS 2019年第10期1157-1160,1164共5页
目的探究FBXO22基因沉默后对乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭迁移能力的影响,并初步研究其相关分子机制。方法利用小干扰RNA(siRNA)技术制备FBXO22小片段干扰RNA转染乳腺癌MDA-MB-231细胞,下调FBXO22基因表达,通过蛋白质印迹(Western blot)法... 目的探究FBXO22基因沉默后对乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭迁移能力的影响,并初步研究其相关分子机制。方法利用小干扰RNA(siRNA)技术制备FBXO22小片段干扰RNA转染乳腺癌MDA-MB-231细胞,下调FBXO22基因表达,通过蛋白质印迹(Western blot)法检测细胞转染效率,细胞划痕实验检测干扰FBXO22基因表达水平对乳腺癌细胞侵袭能力的影响,Transwell小室迁移实验检测下调FBXO22基因表达水平对乳腺癌细胞迁移能力的影响,Western blot法检测下调FBXO22基因表达水平对乳腺癌细胞侵袭迁移相关蛋白表达的影响。结果FBXO22-siRNA转染后乳腺癌MDA-MB-231细胞中FBXO22蛋白表达明显下降,迁移侵袭能力降低,E-cadherin蛋白水平升高,而波形蛋白的蛋白水平降低,基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9水平下降。结论下调FBXO22基因水平能抑制乳腺癌细胞的迁移侵袭能力。其潜在的机制可能为FBXO22基因表达下调抑制了MDA-MB-231上皮细胞-间充质转化进程,并使细胞转移相关重要蛋白--MMP-2和MMP-9表达减少。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 肿瘤浸润 细胞运动 FBXO22
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HIBADH蛋白表达在胃腺癌组织中的临床意义及其在胃癌细胞中的功能研究
6
作者 吴巨钢 裴国清 +4 位作者 杨建军 火海钟 宋致成 俞继卫 顾岩 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2019年第3期294-300,共7页
目的研究3-羟异丁酸脱氢酶(3-hydroxyisobutyrate dehydrogenase,HIBADH)蛋白在胃腺癌中表达的临床意义及其在胃癌细胞中的生物学功能。方法回顾性收集2006年1月至2007年12月期间上海交通大学医学院附属第九人民医院普外科收治的76例胃... 目的研究3-羟异丁酸脱氢酶(3-hydroxyisobutyrate dehydrogenase,HIBADH)蛋白在胃腺癌中表达的临床意义及其在胃癌细胞中的生物学功能。方法回顾性收集2006年1月至2007年12月期间上海交通大学医学院附属第九人民医院普外科收治的76例胃腺癌患者。采用免疫组织化学染色检测胃癌原发灶、癌旁组织及癌转移淋巴结中HIBADH蛋白的表达,分析胃癌组织中HIBADH蛋白的表达与患者临床病理学特征的关系。在细胞层面,采用分子克隆技术构建HIBADH稳定敲除的MKN45胃癌细胞系。通过细胞增殖实验、迁移实验、侵袭实验及伤口愈合实验(细胞分为转染组和阴性对照组,分别转染干扰序列和阴性对照序列),探索HIBADH蛋白在胃癌细胞中的生物学功能。结果胃腺癌原发灶组织中的HIBADH蛋白表达阳性率较癌旁组织高(χ~2=54.738,P<0.001),且胃癌组织中HIBADH蛋白的表达与肿瘤直径、淋巴管浸润、pT分期、淋巴结转移及pTNM分期均相关(P<0.05)。在癌转移的淋巴结中,HIBADH蛋白的表达阳性率为100%(48/48)。HIBADH蛋白表达阳性组和HIBADH蛋白表达阴性组患者的术后10年生存率分别为16.4%和69.4%,后者的生存时间较长(χ~2=19.612,P<0.001)。HIBADH蛋白表达被干扰后,MKN45胃癌细胞的迁移能力、侵袭能力及伤口愈合能力较阴性对照组均明显下降(P<0.05),但细胞增殖能力无明显变化(P>0.05)。结论 HIBADH蛋白在胃癌原发灶中的表达提示肿瘤分期晚、患者预后差。抑制HIBADH蛋白表达可降低胃癌细胞的运动能力。 展开更多
关键词 3-羟异丁酸脱氢酶 胃癌 预后 细胞运动
高糖对大鼠心肌微血管内皮细胞凋亡和迁移的影响及机制 预览
7
作者 程锦 孙闯 +1 位作者 邹青 薛玉刚 《解放军医药杂志》 CAS 2019年第7期5-8,共4页
目的 观察高糖对体外培养的心肌微血管内皮细胞(CMEC)的凋亡及迁移能力的影响及可能的分子机制。方法 将原代分离、培养的大鼠CMEC随机分为对照组、高糖组、抑制剂组(高糖+XMD8-92)。流式细胞计数检测细胞凋亡,划痕实验测定细胞迁移能力... 目的 观察高糖对体外培养的心肌微血管内皮细胞(CMEC)的凋亡及迁移能力的影响及可能的分子机制。方法 将原代分离、培养的大鼠CMEC随机分为对照组、高糖组、抑制剂组(高糖+XMD8-92)。流式细胞计数检测细胞凋亡,划痕实验测定细胞迁移能力;蛋白免疫印迹实验测定细胞外信号调节激酶5(extracellular signal-regulated kinase5, ERK5)水平及ERK5磷酸化水平。酶联免疫吸附试验测定血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)水平。结果 与对照组比较,高糖组细胞凋亡率增加,迁移能力及VEGF表达水平明显降低,P-ERK5水平明显升高( P <0.05)。抑制剂组与对照组比较差异无统计学意义( P >0.05)。结论 高糖可促进CMEC凋亡,抑制内皮细胞迁移能力,其机制可能与高糖促进ERK5的磷酸化从而抑制VEGF的表达有关。 展开更多
关键词 心肌微血管内皮细胞 细胞凋亡 细胞运动 磷酸化 血管内皮生长因子类 大鼠 Sprague-Dawley
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低糖浓度耐受对膀胱肿瘤T24细胞细胞学行为及免疫逃逸的影响 预览
8
作者 吴晖 刘大千 +4 位作者 秦路峰 张钰 杨学成 梁晔 牛海涛 《精准医学杂志》 2019年第2期147-151,共5页
目的 探讨低糖培养基筛选的低糖浓度耐受型膀胱肿瘤T24细胞系增殖和迁移能力的变化,以及其免疫检查点PD-L1表达量的变化。方法 用不同葡萄糖浓度(2000、1500、1000、500mg/L)的培养基逐代筛选出低糖浓度耐受型膀胱肿瘤T24细胞系。将耐10... 目的 探讨低糖培养基筛选的低糖浓度耐受型膀胱肿瘤T24细胞系增殖和迁移能力的变化,以及其免疫检查点PD-L1表达量的变化。方法 用不同葡萄糖浓度(2000、1500、1000、500mg/L)的培养基逐代筛选出低糖浓度耐受型膀胱肿瘤T24细胞系。将耐1000mg/L葡萄糖浓度培养基的T24细胞设为A组,将耐500mg/L葡萄糖浓度培养基的T24细胞设为B组,将普通T24细胞设为C组。通过乳酸浓度检测比较不同组别细胞糖酵解能力的差异。通过细胞划痕实验测定不同组别细胞的迁移能力。通过MTT法检测不同组别细胞的增殖能力。通过荧光定量PCR技术检测不同组别细胞PD-L1mRNA的表达水平。采用WesternBlot方法检测不同组别细胞PD-L1蛋白的表达水平。结果 乳酸浓度检测结果显示,B组和A组乳酸生成量较C组明显增加(F=30.72,q=7.29、10.88,P<0.05),且B组大于A组(q=3.59,P<0.05)。划痕实验结果显示,B组和A组迁移能力较C组明显增强(F=13.11,q=6.39、6.15,P<0.05),A、B组间比较差异无显著性(P>0.05)。MTT法检测结果显示,B组与A组的膀胱肿瘤增殖能力较C组明显增强(F=63.22,q=9.32、21.99,P<0.05),而且B组大于A组(q=6.42,P<0.05)。荧光定量PCR以及WesternBlot方法检测结果证明,无论在mRNA还是蛋白水平,PD-L1的表达量均为B组>A组>C组。结论 低糖浓度耐受型膀胱肿瘤细胞系相较于非低糖浓度耐受型膀胱肿瘤细胞系糖酵解、迁移及增殖能力增强,并且其免疫检查点PD-L1的表达亦有明显增加,可能可以作为膀胱肿瘤的潜在治疗靶点。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 细胞 肿瘤 糖酵解 细胞增殖 细胞运动 B7-H1抗原
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Rab35与肿瘤关系的研究现状及展望 预览
9
作者 李美月 田文艳 +1 位作者 王颖梅 薛凤霞 《天津医药》 CAS 北大核心 2019年第5期548-551,共4页
Rab蛋白是小分子GTP结合蛋白Ras超家族中最大的亚家族,在囊泡的形成、运输、融合等过程中发挥着重要的作用。Rab35作为Rab家族的新成员,在人体组织中的分布比较广泛。已有研究证实Rab35与肿瘤迁移和侵袭等生物学特性有关,可能为潜在的... Rab蛋白是小分子GTP结合蛋白Ras超家族中最大的亚家族,在囊泡的形成、运输、融合等过程中发挥着重要的作用。Rab35作为Rab家族的新成员,在人体组织中的分布比较广泛。已有研究证实Rab35与肿瘤迁移和侵袭等生物学特性有关,可能为潜在的肿瘤预后标志物,可为临床治疗提供新的靶点。本文就Rab35的来源、结构、功能及其在肿瘤中的作用进行综述。 展开更多
关键词 肿瘤侵润 细胞运动 肿瘤 Rab35 GTP磷酸水解酶类
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长链非编码RNA H19促进胃癌干细胞的增殖和转移 预览
10
作者 夏荣钧 欧英富 +3 位作者 邢维山 郑琳琳 于生金 林黎娟 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第13期2022-2027,共6页
背景:研究发现,干扰长链非编码RNA H19的表达,可以降低胃癌细胞系MGC-803肿瘤球细胞的成瘤能力、增殖和克隆形成能力,而H19在胃癌中是否能通过影响肿瘤干细胞关键标志物Sox2的表达进而调控胃癌干细胞尚不清楚。目的:研究长链非编码RNA ... 背景:研究发现,干扰长链非编码RNA H19的表达,可以降低胃癌细胞系MGC-803肿瘤球细胞的成瘤能力、增殖和克隆形成能力,而H19在胃癌中是否能通过影响肿瘤干细胞关键标志物Sox2的表达进而调控胃癌干细胞尚不清楚。目的:研究长链非编码RNA H19在胃癌组织及胃癌干细胞中的表达水平,并探讨其对胃癌干细胞增殖和转移的影响及作用机制。方法:qRT-PCR检测H19在38例胃癌组织、癌旁组织、胃癌干细胞CSC-G、人永生化正常胃上皮细胞GES-1中的表达;经脂质体分别转染H19 siRNA(si-H19)和阴性对照siRNA(si-NC)48 h后,软琼脂克隆形成实验、MTS实验、Transwell实验检测CSC-G细胞干性、增殖和转移能力,Western blot检测CSC-G细胞中Sox2蛋白的表达。结果与结论:①qRT-PCR结果显示H19在胃癌组织中的表达显著高于其配对的癌旁组织,且在肿瘤T分期高及有淋巴结转移的组织中高表达(P均<0.05),同时H19在CSC-G细胞中的表达显著高于GES-1细胞(P <0.05);②转染H19 siRNA后,CSC-G细胞软琼脂克隆球形成的数目显著减少,细胞增殖能力抑制、细胞侵袭能力减弱、Sox2蛋白表达减少(P均<0.05);③结果表明,H19在胃癌组织和胃癌干细胞中高表达,H19可能通过作用于干细胞相关蛋白Sox2促进胃癌干细胞的增殖和转移。 展开更多
关键词 胃癌 肿瘤干细胞 长链非编码RNAH19 细胞增殖 细胞转移 细胞侵袭 辽宁省自然科学基金 胃肿瘤 细胞运动 组织工程
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波形蛋白在不同肝癌细胞系中的表达及其对肝癌增殖、侵袭及迁移的影响 预览
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作者 李国炜 李海洋 +4 位作者 成超 桑志山 杨钦喜 贾磊 温欣慰 《重庆医学》 CAS 2019年第17期2913-2917,2922共6页
目的探讨波形蛋白(VIM)在不同肝癌细胞系中的差异表达及其对肝癌细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响。方法体外培养两种不同转移潜能肝癌细胞系(MHCC97-H、MHCC97-L),Western blot检测VIM在人肝癌细胞系MHCC97-H、MHCC97-L细胞中的表达水... 目的探讨波形蛋白(VIM)在不同肝癌细胞系中的差异表达及其对肝癌细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响。方法体外培养两种不同转移潜能肝癌细胞系(MHCC97-H、MHCC97-L),Western blot检测VIM在人肝癌细胞系MHCC97-H、MHCC97-L细胞中的表达水平。应用siRNA干扰技术沉默VIM基因的表达,通过CCK-8、Transwell、细胞划痕实验,观察下调VIM后对肝癌细胞增殖、侵袭、迁移能力的影响。结果Western blot检测VIM在MHCC97-H细胞中表达水平明显高于MHCC97-L细胞(1.20±0.33 vs.0.93±0.29,P<0.05)。Western blot及实时荧光定量PCR(qPCR)检测显示在肝癌细胞系MHCC97-H和MHCC97-L中,VIM-siRNA转染组VIM的表达水平明显抑制(P<0.05)。与阴性组和空白组比较,VIM-siRNA转染的实验组细胞的增殖、侵袭、迁移能力明显降低(P<0.05)。结论抑制VIM基因的表达可明显降低肝癌细胞的增殖和体外侵袭转移能力。 展开更多
关键词 波形蛋白 细胞 细胞增殖 侵袭 细胞运动
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ClC-3在子宫内膜异位症中的研究进展
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作者 皮亚男 曹婧 +2 位作者 侯爽 周碎央 邱晓红 《中国医师杂志》 CAS 2019年第2期319-320,F0003共3页
氯离子通道3(ClC-3)是由CLCN3基因编码,电压门控成员Cl2通道超家族的一员,并涉及到调节电活动、细胞体积、增殖、迁移、侵袭、凋亡和细胞内pH,成为目前研究的热点。近年来ClC-3在妇科疾病中的研究日益增多,本文将对ClC-3与妇科良恶性疾... 氯离子通道3(ClC-3)是由CLCN3基因编码,电压门控成员Cl2通道超家族的一员,并涉及到调节电活动、细胞体积、增殖、迁移、侵袭、凋亡和细胞内pH,成为目前研究的热点。近年来ClC-3在妇科疾病中的研究日益增多,本文将对ClC-3与妇科良恶性疾病,尤其是对ClC-3与子宫内膜异位症发生发展相关的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 氯化物通道 细胞运动 综述
COL4A1在肝癌中的表达及其对肝癌细胞迁移、侵袭能力的影响 预览
13
作者 王译文 李民 +4 位作者 阿布都艾合提·买买提明 程方雄 罗少锋 何峰 王必蓉 《重庆医学》 CAS 2019年第9期1472-1475,共4页
目的探讨血清Ⅳ型胶原蛋白基因α1(COL4A1)在肝癌组织中的表达,分析敲低COL4A1表达对肝癌细胞迁移及侵袭能力的影响。方法采用Western blot法检测COL4A1在68例肝癌及配对癌旁组织的表达水平;运用siRNA技术敲低肝癌细胞COL4A1表达,采用CC... 目的探讨血清Ⅳ型胶原蛋白基因α1(COL4A1)在肝癌组织中的表达,分析敲低COL4A1表达对肝癌细胞迁移及侵袭能力的影响。方法采用Western blot法检测COL4A1在68例肝癌及配对癌旁组织的表达水平;运用siRNA技术敲低肝癌细胞COL4A1表达,采用CCK-8试验检测其对肝癌细胞增殖能力的影响,采用Transwell试验检测其对肝癌细胞迁移和侵袭能力的影响。结果生物信息学分析提示COL4A1mRNA在肝癌中高表达(P<0.01);COL4A1在肝癌组织表达水平明显高于癌旁组织(P<0.05),敲低COL4A1表达明显降低肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P<0.05)。结论 COL4A1在肝癌组织中高表达,并促进肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 肝肿瘤 Ⅳ型胶原蛋白基因α1 细胞运动 侵袭
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miR-429在食管鳞癌中的表达及对细胞增殖迁移的影响 预览
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作者 花光斌 朱国玺 苏煜强 《中国医药生物技术》 2019年第1期46-51,共6页
目的探讨微小RNA-429(miR-429)在食管鳞癌(ESCC)中的表达及其对细胞增殖及迁移的影响。方法选取本院45例ESCC患者手术切除的癌组织(ESCC组)及癌旁组织(正常组)标本为研究对象,并采用实时荧光定量(qRT-PCR)检测两组miR-429表达水平。体... 目的探讨微小RNA-429(miR-429)在食管鳞癌(ESCC)中的表达及其对细胞增殖及迁移的影响。方法选取本院45例ESCC患者手术切除的癌组织(ESCC组)及癌旁组织(正常组)标本为研究对象,并采用实时荧光定量(qRT-PCR)检测两组miR-429表达水平。体外培养ESCC癌细胞株系ECa109及人正常食管上皮细胞株Het-1A,将转染试剂、miR-429阴性对照质粒、miR-429 mimic质粒分别转染ECa109细胞,命名为空白组、阴性转染组、miR-429过表达组,同时应用生物信息学工具预测miR-429的靶基因为CTl0激酶调节子样蛋白(CRKL),荧光素酶活性检测miR-429与CRKL的靶向调控关系。采用qRT-PCR法检测细胞中miR-429与CRKL mRNA表达水平,蛋白免疫印迹法检测细胞中CRKL蛋白表达。MTT法检测细胞增殖情况,Transwell检测细胞迁移能力。结果与正常组相比,ESCC组miR-429表达水平显著降低(P﹤0.05);荧光素酶活性测定显示3'UTR-Wt细胞中miR-429过表达组荧光素酶活性显著低于阴性对照组(P﹤0.05),3'UTR-Mut细胞中miR-429阴性转染组与过表达组比较差异无统计学意义(P﹥0.05);与Het-1A细胞相比,ECa109细胞中miR-429表达水平显著降低(P﹤0.05),而CRKL mRNA及蛋白表达水平显著升高(P﹤0.05);与空白组、阴性转染组相比,miR-429过表达组miR-429表达水平显著升高(P﹤0.05),而CRKL mRNA及蛋白表达水平显著降低(P﹤0.05);与空白组、阴性转染组相比,miR-429过表达组细胞增殖率及迁移数量均显著降低(P﹤0.05)。结论ESCC中miR-429呈低表达,其可通过下调CRKL表达进而抑制ESCC细胞增殖及迁移。 展开更多
关键词 食管肿瘤 细胞增殖 细胞运动 微小RNA-429
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骨碎补总黄酮通过SDF1/CXCR4信号途径促进小鼠骨髓基质细胞ST-2迁移 预览
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作者 吴紫璇 郝征 +4 位作者 郭亚萍 张翟轶 陈璐瑶 彭雁飞 郑纺 《天津医药》 CAS 北大核心 2019年第10期1009-1014,共6页
目的探讨骨碎补总黄酮(AFRD)对小鼠骨髓基质细胞系ST-2迁移能力及SDF1/CXCR4信号途径的调节作用。方法以乙醇超声提取法从强骨胶囊中获取AFRD,采用CCK-8法确定不同浓度AFRD( 5、 20、 50、 100mg/L)对ST-2细胞增殖的影响;Transwell实验... 目的探讨骨碎补总黄酮(AFRD)对小鼠骨髓基质细胞系ST-2迁移能力及SDF1/CXCR4信号途径的调节作用。方法以乙醇超声提取法从强骨胶囊中获取AFRD,采用CCK-8法确定不同浓度AFRD( 5、 20、 50、 100mg/L)对ST-2细胞增殖的影响;Transwell实验检测AFRD对ST-2迁移能力的影响;使用荧光定量PCR和Westernblot检测AFRD对SDF1和CXCR4基因表达的影响;CXCR4抑制剂AMD3100干预ST-2细胞后再次观察AFRD对ST-2细胞迁移能力及SDF1和CXCR4基因表达的变化。结果 AFRD促进ST-2细胞的迁移,上调细胞中SDF1和CXCR4基因的表达,并呈现浓度依赖性。C XCR4抑制剂AMD3100能够在一定程度上逆转AFRD对ST-2细胞迁移的促进作用及SDF1和CXCR4基因表达的上调效应。结论 AFRD能够促进ST-2的迁移,该作用是通过SDF1/CXCR4信号途径介导的。 展开更多
关键词 骨碎补 细胞运动 趋化因子CXCL12 骨髓基质细胞 SDF1 CXCR4
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淋巴瘤细胞来源性的外泌体对人淋巴瘤细胞恶性生物学行为的影响
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作者 张淑贤 许壁榆 +6 位作者 菅成莲 叶芬 肖菲 韩晓凤 黄洪晖 侯健 王婷 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期427-438,共12页
目的:观察淋巴瘤细胞来源的外泌体对淋巴瘤细胞株增殖、耐药、迁移及侵袭能力的影响。方法:诱导建立对多柔比星(doxorubicin,DOX)耐药的弥漫大B细胞淋巴瘤Su-DHL-4/DOX细胞及Burkitt淋巴瘤Raji/DOX细胞。应用商品化试剂盒Total Exosome ... 目的:观察淋巴瘤细胞来源的外泌体对淋巴瘤细胞株增殖、耐药、迁移及侵袭能力的影响。方法:诱导建立对多柔比星(doxorubicin,DOX)耐药的弥漫大B细胞淋巴瘤Su-DHL-4/DOX细胞及Burkitt淋巴瘤Raji/DOX细胞。应用商品化试剂盒Total Exosome Isolation(from cell culture media)从亲本Su-DHL-4和Raji细胞以及耐药Su-DHL-4/DOX和Raji/DOX细胞的培养上清液中分离提取外泌体(分别命名为Su-EXO、Raji-EXO、Su/DOX-EXO及Raji/DOX-EXO)。用透射电子显微镜观察提取获得的外泌体的形态及大小,采用蛋白质印迹法检测外泌体表面标志蛋白凋亡相关基因-2(apoptosis-linked gene-2,ALG-2)相互作用蛋白X(ALG-2 interacting protein-X,ALIX)和肿瘤易感基因101(tumor susceptibility gene 101,TSG101)的表达,以及纳米颗粒跟踪分析仪Zetaview检测外泌体粒径。将不同浓度的外泌体(Su-EXO和Raji-EXO)与其亲本Su-DHL-4和Raji细胞共培养后,应用锥虫蓝拒染法绘制细胞增殖曲线;不同浓度的Su-EXO、Raji-EXO以及Su/DOX-EXO(40μg/mL)和Raji/DOX-EXO(40μg/mL)与亲本Su-DHL-4和Raji细胞共培养后,CCK-8法检测DOX对淋巴瘤细胞的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50),Transwell小室法检测淋巴瘤细胞的迁移和侵袭能力。结果:成功建立对DOX耐药的Su-DHL-4/DOX和Raji/DOX细胞株。透射电子显微镜下观察结果显示,分离获得的外泌体呈典型的茶托样、双层膜囊泡结构,且大小均一。蛋白质印迹法结果显示,分离获得的外泌体上有外泌体标志蛋白ALIX及TSG101的表达;Zetaview粒径分析结果显示,所提取的外泌体粒径均在30~150 nm之内。Su-DHL-4和Raji细胞与其各自来源的外泌体Su-EXO和Raji-EXO共培养后,细胞增殖能力均显著增强(P值均<0.01)。Su-DHL-4细胞与其DOX耐药Su-DHL-4/DOX细胞株来源的外泌体Su/DOX-EXO共培养后,Su-DHL-4细胞对的DOX敏感性显著降低(P<0.01)。Su-EXO和Raji-EXO能显著增强淋巴瘤细胞株Su-DHL-4与Raji细� 展开更多
关键词 淋巴瘤 外泌体 细胞增殖 抗药性 肿瘤 细胞运动
脂肪间充质干细胞来源外泌体对角质形成细胞增殖和迁移的影响与机制 预览
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作者 田新立 江波 颜洪 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第1期68-73,共6页
背景:皮肤烧烫伤是一类非常常见且致死和致残率极高的疾病,探索有效促进伤口愈合的方法意义重大。目的:探讨脂肪间充质干细胞来源外泌体是否对角质形成细胞增殖与迁移产生影响及其潜在机制。方法:采用胰酶消化法培养人角质形成细胞,并... 背景:皮肤烧烫伤是一类非常常见且致死和致残率极高的疾病,探索有效促进伤口愈合的方法意义重大。目的:探讨脂肪间充质干细胞来源外泌体是否对角质形成细胞增殖与迁移产生影响及其潜在机制。方法:采用胰酶消化法培养人角质形成细胞,并利用角质形成细胞特异标记蛋白Keratin 14进行鉴定;超速离心法分离人脂肪间充质干细胞来源外泌体,并利用外泌体特异标记蛋白CD9、CD63和CD81进行鉴定;将纯化好的脂肪间充质干细胞来源外泌体,以不同质量浓度(0,10,20,50,100 mg/L)加入第3代角质形成细胞中,在处理的不同时间点(0,12,24,48 h)进行增殖和迁移相关指标检测。结果与结论:脂肪间充质干细胞来源外泌体促进角质形成细胞增殖和迁移,在质量浓度为50 mg/L和处理48 h时增殖最显著,脂肪间充质干细胞来源外泌体可能通过调控ERK、AKT和STAT3蛋白的磷酸化而促进角质形成细胞增殖与迁移。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞 外泌体 角质形成细胞 细胞增殖 细胞迁移 细胞 角蛋白细胞 脂肪组织 间质干细胞 外泌体 细胞增殖 细胞运动 组织工程
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CXCR4抑制剂对膀胱癌细胞的增殖、迁移和侵袭的影响及其机制的研究
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作者 张涛 陈志毅 +1 位作者 王灿 刘涛 《国际泌尿系统杂志》 2019年第3期441-445,共5页
目的探讨趋化因子受体4(CXCR4)在膀胱癌发展过程中的作用及其调控机制。方法采用qPCR法检测膀胱癌细胞株SW780、5637和T24中CXCR4mRNA的表达。在SW780细胞加入CXCR4抑制剂AMD346510uM处理后,以未加入AMD3465的SW780细胞为对照组,用MTT、... 目的探讨趋化因子受体4(CXCR4)在膀胱癌发展过程中的作用及其调控机制。方法采用qPCR法检测膀胱癌细胞株SW780、5637和T24中CXCR4mRNA的表达。在SW780细胞加入CXCR4抑制剂AMD346510uM处理后,以未加入AMD3465的SW780细胞为对照组,用MTT、Transwell法分别检测抑制CXCR4对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭性的作用。Westernblotting检测β-catenin、Wnt/β-catenin通路相关基因和EMT相关基因的表达变化。用裸鼠皮下异体移植模型研究CXCR4对人膀胱癌SW780细胞裸鼠移植瘤生长的影响。结果SW780膀胱癌细胞经AMD3465处理48、72h后,细胞增殖减慢,其吸光度值与对照组相比差异有统计学意义(P<0.001)。经AMD3465处理48h后的SW780膀胱癌细胞迁移指数、侵袭指数降低,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.001)。AMD3465明显抑制β-catenin、Wnt/β-catenin通路相关基因MMP-2和c-myc的蛋白表达,同时上调E-cadherin的蛋白表达。结论抑制CXCR4可以通过调控Wnt/β-catenin通路抑制膀胱癌的进展。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 受体 CXCR4 细胞增殖 细胞运动
SMAD4基因新突变体对胰腺导管腺癌细胞迁移能力的影响 预览
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作者 占世雄 张顺 +2 位作者 张璐 刘世国 王祖森 《精准医学杂志》 2019年第3期254-258,共5页
目的研究SMAD4新突变体对胰腺导管腺癌(PDAC)发生发展的影响。方法 将构建好的空白对照组(NC组)、野生型组(SMAD4 wt组)、突变型组(SMAD4 Y353C组)3组质粒用TransIntro TM EL转染试剂分别导入PDAC细胞PANC-1中,首先进行实时荧光定量聚... 目的研究SMAD4新突变体对胰腺导管腺癌(PDAC)发生发展的影响。方法 将构建好的空白对照组(NC组)、野生型组(SMAD4 wt组)、突变型组(SMAD4 Y353C组)3组质粒用TransIntro TM EL转染试剂分别导入PDAC细胞PANC-1中,首先进行实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western Blot实验,分析不同质粒对PDAC细胞mRNA和蛋白质表达的影响,然后进行伤口愈合实验和细胞侵袭实验,研究不同质粒对PDAC细胞PANC-1伤口愈合和侵袭能力的影响。结果 RT-qPCR和Western Blot检测结果显示,NC组、SMAD4 wt组、SMAD4 Y353C组PDAC细胞PANC-1 SMAD4 mRNA和蛋白表达量比较差异均有统计学意义( F =695.76、 194.98 , P <0.05),而且SMAD4 Y353C组mRNA和蛋白表达量均低于SMAD4 wt组,高于NC组,差异均有显著性( P <0.05)。体外伤口愈合实验和细胞侵袭实验结果显示,NC组、SMAD4 wt组和SMAD4 Y353C组细胞的迁移面积和侵袭能力比较差异有统计学意义( F =1 741.15、299.12, P <0.05),SMAD4 Y353C组细胞的迁移面积和侵袭能力明显大于SMAD4 wt组细胞,小于NC组细胞,差异均有显著意义( P <0.05)。结论 突变型SMAD4 Y353C能抑制PANC-1细胞 SMAD4 mRNA和蛋白质的表达,促进PANC-1细胞的迁移和侵袭,为PDAC的治疗提供理论依据。 展开更多
关键词 Smad4蛋白质 胰腺管 突变 转染 细胞运动 肿瘤侵润
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巨噬细胞移动抑制因子影响胶质瘤细胞迁移、凋亡的机制
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作者 江晓珍 邓葵 +2 位作者 花美玲 李智 徐姗 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期108-111,共4页
目的探讨巨噬细胞移动抑制因子(MIF)对胶质瘤细胞株U87MG、U251生物学功能的影响及可能的作用机制。方法运用小干扰RNA(siRNA)技术靶向沉默U87MG细胞株中MIF基因的表达,经蛋白免疫印迹(Western blot)法检测沉默效果;对微弱表达MIF蛋白的... 目的探讨巨噬细胞移动抑制因子(MIF)对胶质瘤细胞株U87MG、U251生物学功能的影响及可能的作用机制。方法运用小干扰RNA(siRNA)技术靶向沉默U87MG细胞株中MIF基因的表达,经蛋白免疫印迹(Western blot)法检测沉默效果;对微弱表达MIF蛋白的U251细胞株,则外源性添加不同浓度重组人MIF(rhMIF)。采用划痕实验观察细胞的迁移、流式细胞术检测细胞凋亡率,并经Western blot法检测U87MG、U251细胞内相关蛋白水平的变化。结果经siRNA靶向沉默MIF基因表达后,U87MG细胞的迁移、抗凋亡能力明显下降,细胞内p-AKT、抗凋亡蛋白bcl-2表达水平下降,而凋亡蛋白bax表达升高;微弱表达MIF蛋白的U251细胞随着rhMIF处理浓度的增加,其细胞内MIF蛋白、p-AKT及bcl-2表达水平逐渐升高,凋亡蛋白bax水平则随之下降。结论MIF促进胶质瘤细胞的迁移,抑制其凋亡,影响胶质瘤细胞生物学功能,可能是通过活化PI3K/AKT信号通路实现的。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 巨噬细胞游走抑制因子 细胞运动 细胞凋亡
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