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镰形棘豆黄酮含药血清对人肺癌A549细胞活力、凋亡及周期的影响
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作者 牛俐燃 李冠聪 +2 位作者 张婉婷 杨光明 潘扬 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期790-795,共6页
目的研究镰形棘豆黄酮提取物(OFF)含药血清对人肺腺癌A549细胞活力、细胞形态学、凋亡率及增殖周期的影响。方法将SD大鼠随机分为5组:空白对照组,阳性对照组(环磷酰胺CTX,40 mg·kg-1),OFF低剂量组(0.587 g·kg-1)、中剂量组(1.... 目的研究镰形棘豆黄酮提取物(OFF)含药血清对人肺腺癌A549细胞活力、细胞形态学、凋亡率及增殖周期的影响。方法将SD大鼠随机分为5组:空白对照组,阳性对照组(环磷酰胺CTX,40 mg·kg-1),OFF低剂量组(0.587 g·kg-1)、中剂量组(1.174 g·kg-1)、高剂量组(2.348 g·kg-1);早晚各给药1次,连续4 d,制备含药血清。采用CCK-8法检测细胞活力;倒置显微镜观察细胞形态;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;流式细胞术检测细胞周期。结果在12、24、48 h给药时间内,OFF含药血清各剂量组的细胞活力随剂量递增呈抑制增强效果,且在24 h抑制作用最强,48 h抑制作用减弱,但与空白对照组比较,差异均有统计学意义(P <0.001);倒置显微镜下观察, OFF含药血清作用24 h后,各剂量组的A549细胞均生长缓慢,细胞呈不规则形态。与空白对照组比较,OFF含药血清低、中、高剂量组的凋亡细胞比例上升,凋亡率分别为47.91%、55.09%、60.37%,差异均有统计学意义(P <0.001);OFF各剂量组的细胞周期中,G0/G1期细胞比例明显上升(P <0.01),S期(P<0.05,OFF高剂量组)及G2期(P<0.01,OFF中、高剂量组)比例下降。结论OFF含药血清对A549人肺腺癌细胞活力有较好的抑制作用,并能够诱导细胞凋亡,将细胞周期阻滞在G0/G1期。 展开更多
关键词 镰形棘豆 黄酮提取物 含药血清 A549细胞 细胞活力 细胞凋亡 细胞周期
miR-105靶向负调控KIFC1抑制非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力 预览
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作者 赵继聪 王薇 +3 位作者 刘建伟 马建欣 徐德利 郭靖涛 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1432-1438,共7页
目的:研究微小RNA-105(miR-105)对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,并探讨其机制。方法:运用RT-qPCR法检测非小细胞肺癌组织及癌旁组织和细胞中miR-105和驱动蛋白家族成员C1(KIFC1) mRNA的表达;用Western blot检测非小细胞肺癌... 目的:研究微小RNA-105(miR-105)对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,并探讨其机制。方法:运用RT-qPCR法检测非小细胞肺癌组织及癌旁组织和细胞中miR-105和驱动蛋白家族成员C1(KIFC1) mRNA的表达;用Western blot检测非小细胞肺癌组织及癌旁正常组织和细胞中KIFC1蛋白的表达。将细胞分为miR-105组(转染miR-105 mimics)、miR-NC组(转染mimics阴性对照序列)、inhibitor-NC组(转染inhibitor阴性对照序列)、inhibitor-miR-105组(转染miR-105 inhibitor)、si-NC组(转染阴性对照siRNA)、si-KIFC1组(转染KIFC1 siRNA)、miR-105+vector组(miR-105 mimics和pcDNA 3.1共转染)和miR-105+KIFC1组(miR-105 mimics和pcDNA 3.1-KIFC1共转染),均以脂质体法转染至非小细胞肺癌H460细胞;MTT法检测各组细胞活力;Transwell法检测各组细胞的迁移和侵袭能力;双萤光素酶报告基因检测实验检测各组细胞萤光素酶相对活性。结果:与癌旁组织相比,非小细胞肺癌组织中的miR-105表达显著降低,KIFC1的表达显著升高(P<0.05);与人正常胚肺成纤维细胞MRC-5相比,H460细胞中的miR-105表达显著降低,KIFC1的表达显著升高(P<0.05);miR-105可降低野生型KIFC1的H460细胞萤光素酶相对活性,且负向调控KIFC1的蛋白表达。过表达miR-105或敲减KIFC1表达均可显著抑制H460细胞的增殖、迁移和侵袭能力,且过表达KIFC1可逆转miR-105对细胞活力、迁移和侵袭能力的抑制作用。结论:miR-105可抑制非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭,其机制与靶向负调控KIFC1的表达有关。 展开更多
关键词 微小RNA-105 驱动蛋白家族成员C1 非小细胞肺癌 细胞活力 细胞迁移 细胞侵袭
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尿素对婴幼儿血管瘤内皮细胞增殖和凋亡影响的体外研究
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作者 稂翠玲 雷红召 +4 位作者 孙斌 龚毓宾 李淼淼 张宏宇 董长宪 《中华整形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期189-194,共6页
目的检测不同浓度和剂量的尿素对人血管瘤内皮细胞凋亡的影响,为尿素治疗血管瘤的机制研究提供依据。方法体外培养的人血管瘤内皮细胞和正常血管内皮细胞经不同浓度(40%、50%、60%、70%)和剂量(3、6、9μl/ml)的尿素干预后,通过CCK-8法... 目的检测不同浓度和剂量的尿素对人血管瘤内皮细胞凋亡的影响,为尿素治疗血管瘤的机制研究提供依据。方法体外培养的人血管瘤内皮细胞和正常血管内皮细胞经不同浓度(40%、50%、60%、70%)和剂量(3、6、9μl/ml)的尿素干预后,通过CCK-8法检测细胞活力及抑制率;采用流式细胞术和碘化丙啶荧光染色观察人血管瘤内皮细胞的凋亡情况。结果在不同浓度和剂量的尿素作用下,人血管瘤内皮细胞的细胞活性比正常血管内皮细胞的活性低(P<0.05);40%尿素对人血管瘤内皮细胞的抑制率随着尿素剂量的增加而升高(P<0.05),且在4h和12h时抑制率相对较高;40%尿素作用下人血管瘤内皮细胞的凋亡随尿素剂量增加和时间的延长而升高,大剂量(9μl/ml)、40%尿素可显著促进人血管瘤内皮细胞的凋亡(P<0.05)。结论低剂量40%尿素对血管瘤内皮细胞的增殖有明显的抑制、对正常血管内皮细胞无明显作用,而大剂量尿素能促使人血管瘤内皮细胞凋亡。 展开更多
关键词 尿素 人血管瘤内皮细胞 血管内皮细胞 细胞活力 细胞凋亡
癌基因HuR调节胃癌功能的研究 预览
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作者 曹小梅 曹楠婧 +3 位作者 王福花 孙瑞芳 李峰 郭素堂 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1328-1332,共5页
目的:探讨癌基因HuR在胃癌组织的表达和对胃癌MGC-803细胞功能的影响。方法:使用RT-qPCR分析80例临床确诊的胃癌患者胃癌组织样本中HuR的表达水平;利用pSIH载体构建敲减HuR的重组质粒,实现HuR在MGC-803细胞中的低表达,以空载体pSIH作为... 目的:探讨癌基因HuR在胃癌组织的表达和对胃癌MGC-803细胞功能的影响。方法:使用RT-qPCR分析80例临床确诊的胃癌患者胃癌组织样本中HuR的表达水平;利用pSIH载体构建敲减HuR的重组质粒,实现HuR在MGC-803细胞中的低表达,以空载体pSIH作为对照;使用划痕实验检测细胞迁移能力,使用Transwell实验检测细胞侵袭能力,使用CCK-8法检测细胞活力。结果:RT-qPCR结果显示,与癌旁对照相比,67例(84%)胃癌组织中出现HuR的表达上调;低表达HuR能显著抑制MGC-803细胞的侵袭能力、迁移能力和活力(P<0.05),提示HuR作为癌基因起作用。结论:HuR的异常表达可能与胃癌的发生发展有关,低表达HuR可以抑制胃癌MGC-803细胞的侵袭、迁移和活力。 展开更多
关键词 HuR基因 胃癌 细胞活力 细胞迁移 细胞侵袭
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同型半胱氨酸通过Rho激酶信号通路促进大鼠脑基底动脉平滑肌细胞活力与迁移 预览
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作者 肖猛 任传忠 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1372-1378,共7页
目的:探讨同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)对大鼠脑基底动脉平滑肌细胞(basilar arterial smooth muscle cells,BASMCs)活力和迁移的作用及可能的分子机制。方法:分离培养大鼠BASMCs,给予不同浓度的Hcy刺激后,用CCK-8法初步测定细胞活... 目的:探讨同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)对大鼠脑基底动脉平滑肌细胞(basilar arterial smooth muscle cells,BASMCs)活力和迁移的作用及可能的分子机制。方法:分离培养大鼠BASMCs,给予不同浓度的Hcy刺激后,用CCK-8法初步测定细胞活力的变化,Western blot检测Rho激酶信号通路的活性。然后固定Hcy的浓度(1 mmol/L),并采用ROCK抑制剂Y-27632作为工具药对细胞进行处理,流式细胞术检测细胞的周期分布,划痕实验和Transwell实验检测细胞的迁移情况;检测细胞抗氧化酶超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)的活性以及丙二醛(malondialdehyde,MDA)的水平反映细胞的氧化应激状态。结果:Hcy可浓度依赖性地提高BASMCs的活力,并上调细胞中GTP-RhoA和ROCK2的蛋白表达(P<0.05);同浓度的Hcy处理细胞后,48 h处理组的细胞活力显著高于24 h处理组(P<0.05)。Hcy处理组BASMCs中S期细胞的比例明显升高,G0/G1期细胞的比例显著降低(P<0.05);加入Y-27632预处理可显著抑制Hcy处理组BASMCs的G1/S期转换。划痕实验和Transwell的实验结果显示,Hcy处理组BASMCs的迁移率显著高于对照组;加入Y-27632预处理可抑制Hcy处理组BASMCs的迁移(P<0.05)。此外,Hcy可降低BASMCs中SOD和GSH-Px的活性,同时升高MDA的含量;相较Hcy处理组,加入Y-27632预处理后,细胞内SOD和GSH-Px的活性升高,MDA的含量降低(P<0.05)。结论:同型半胱氨酸可促进大鼠脑基底动脉平滑肌细胞的活力及迁移,其作用机制可能与激活Rho激酶信号通路并提高细胞内氧化应激的水平有关。 展开更多
关键词 同型半胱氨酸 脑基底动脉平滑肌细胞 细胞活力 细胞迁移 Rho激酶信号通路
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斑点叉尾[鱼回]头肾巨噬细胞分离及初步应用
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作者 胡先勤 周建军 +3 位作者 胡骏鹏 王学东 王文彪 王锐 《齐鲁渔业》 2019年第6期7-10,I0001共5页
通过Percoll密度梯度离心法分离斑点叉尾[鱼回]头肾巨噬细胞,经含2%胎牛血清的L-15培养液中培养,在光镜和电镜下观察其形态和超微结构;采用MTS法研究酵母细胞壁对巨噬细胞体外作用的合适浓度和最佳时间。结果表明:使用34%、51%的密度梯... 通过Percoll密度梯度离心法分离斑点叉尾[鱼回]头肾巨噬细胞,经含2%胎牛血清的L-15培养液中培养,在光镜和电镜下观察其形态和超微结构;采用MTS法研究酵母细胞壁对巨噬细胞体外作用的合适浓度和最佳时间。结果表明:使用34%、51%的密度梯度分离斑点叉尾[鱼回]头肾细胞,经过3~12小时培养,巨噬细胞纯化率95%以上;分离的头肾巨噬细胞具有巨噬细胞的形态特征。酵母细胞壁对斑点叉尾[鱼回]的巨噬细胞最适的作用浓度为0-500pg/ml,作用时间为12小时。本研究为进一步探讨酵母细胞壁对鱼类免疫细胞的作用机理奠定了基础。 展开更多
关键词 头肾巨噬细胞 细胞活力 斑点叉尾[鱼回] 酵母细胞
刃天青法检测mtDNA缺失C6ρ0细胞的活力
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作者 靳有才 张一鸣 +2 位作者 李忌 王洪伦 白波 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1136-1141,共6页
目的建立以刃天青为氧化还原指示剂测定mtDNA被完全清除的大鼠胶质瘤C6细胞(C6ρ0)增殖及活力的方法,并对其有效性进行验证。方法取对数生长期的C6ρ0细胞,采用刃天青法比较不同细胞数量、刃天青浓度、孵育时间对荧光强度的影响,优化测... 目的建立以刃天青为氧化还原指示剂测定mtDNA被完全清除的大鼠胶质瘤C6细胞(C6ρ0)增殖及活力的方法,并对其有效性进行验证。方法取对数生长期的C6ρ0细胞,采用刃天青法比较不同细胞数量、刃天青浓度、孵育时间对荧光强度的影响,优化测定C6ρ0细胞活力的条件。比较MTT法和刃天青法测定C6ρ0和C6细胞活力的灵敏性,并以天然化合物熊果酸对C6ρ0和C6细胞活力的影响对该方法进行验证。结果 C6ρ0细胞数为0~30 000/孔,25μg/mL刃天青培养基避光孵育1~4 h,细胞数量与荧光强度呈良好线性关系,灵敏性高于MTT法。熊果酸0~50μmol/L对C6ρ0和C6细胞具有增殖抑制作用,且增殖抑制率差异有统计学意义(P<0.05),IC50分别为20.82、14.62μg/mL。结论刃天青法灵敏、简单、安全无毒、经济便宜、重复性好,特别适用于生长代谢缓慢的细胞系,可用于其细胞增殖测定、活力分析及化合物细胞毒的高通量筛选。 展开更多
关键词 刃天青 神经胶质瘤C6细胞 C6ρ0细胞 细胞活力 熊果酸
NEU3对人前列腺癌DU145细胞生物学行为的影响 预览
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作者 王晨霄 王梦秋 +5 位作者 李思 冯颖 马芳 吴衣论 王琳 马学 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期305-310,共6页
目的:探讨神经氨酸酶3(NEU3)与人前列腺癌DU145细胞活力、侵袭和凋亡的关系,并探讨其分子机制。方法:体外培养人前列腺癌DU145细胞,并分为空白对照组和处理组,处理组再分别给予神经氨酸酶活性抑制剂DANA处理和RNA干扰靶向沉默NEU3,采用C... 目的:探讨神经氨酸酶3(NEU3)与人前列腺癌DU145细胞活力、侵袭和凋亡的关系,并探讨其分子机制。方法:体外培养人前列腺癌DU145细胞,并分为空白对照组和处理组,处理组再分别给予神经氨酸酶活性抑制剂DANA处理和RNA干扰靶向沉默NEU3,采用CCK-8法检测细胞的活力;Transwell法检测细胞侵袭能力;qPCR法检测2种处理方式对凋亡抑制蛋白Bcl-2mRNA水平的影响;Western blot法检测2种处理方式对NEU3、基质金属蛋白酶2(MMP2)和Bcl-2表达的影响;流式细胞术检测细胞凋亡水平。结果:与空白对照组相比,DANA处理后前列腺癌细胞的NEU3表达无明显变化,细胞活力增强,MMP2蛋白表达减少,侵袭力减弱,凋亡无明显变化,Bcl-2的mRNA和蛋白表达减少(P<0.05);NEU3沉默后NEU3蛋白表达减少,细胞活力增强,MMP2蛋白表达和细胞侵袭力无明显变化,凋亡能力增强,Bcl-2的mRNA和蛋白表达均下降(P<0.05)。结论:抑制NEU3可以减弱人前列腺癌DU145细胞活力,增强细胞凋亡能力,但对侵袭能力无明显影响。 展开更多
关键词 神经氨酸酶3 细胞侵袭 细胞凋亡 细胞活力 前列腺癌
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miR-129-3p靶向Smad3在TGF-β诱导NIH3T3细胞转分化为肌成纤维细胞过程中抑制细胞活力与迁移 预览
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作者 郝洲华 卢晓明 +3 位作者 孟浦 钟严艳 李晓南 李盛 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1668-1675,共8页
目的:探讨微小RNA-129-3p(miR-129-3p)在转化生长因子β(TGF-β)诱导NIH3T3细胞转分化为肌成纤维细胞的过程中对细胞活力与迁移的作用和相关机制。方法: RT-qPCR法检测肾癌患者癌旁组织和肾纤维化组织中miR-129-3p的表达量。建立TGF-β... 目的:探讨微小RNA-129-3p(miR-129-3p)在转化生长因子β(TGF-β)诱导NIH3T3细胞转分化为肌成纤维细胞的过程中对细胞活力与迁移的作用和相关机制。方法: RT-qPCR法检测肾癌患者癌旁组织和肾纤维化组织中miR-129-3p的表达量。建立TGF-β诱导NIH3T3细胞转分化为肌成纤维细胞的模型,RT-qPCR法确定miR-129-3p的表达模式。在细胞中给予miR-129-3p模拟物转染48 h,利用MTT实验检测细胞活力,Western blot法检测Ki-67的蛋白表达水平,利用划痕实验观察其对细胞迁移的影响。利用miRNA靶点分析数据库TargetScan和双萤光素酶报告基因实验对miR-129-3p的靶点进行分析,并通过Western blot实验对其靶点蛋白表达水平的检测进行确证。结果:和肾癌患者癌旁组织相比较,在肾纤维化组织中miR-129-3p的表达明显下调( P <0.01)。同时,在TGF-β诱导NIH3T3细胞转分化为肌成纤维细胞的模型中,miR-129-3p的表达水平也有下调( P <0.01)。在给予TGF-β刺激的同时给予miR-129-3p的模拟物导致细胞活力下降,Ki-67表达降低,细胞迁移行为也受到抑制。TargetScan预测Smad3的3’-UTR与miR-129-3p存在结合位点,并被双萤光素酶报告基因实验确认;Western blot实验结果也进一步证实了miR-129-3p影响Smad3表达。结论: miR-129-3p靶向Smad3在TGF-β诱导NIH3T3细胞转分化为肌成纤维细胞的模型中抑制细胞活力与迁移。 展开更多
关键词 微小RNA-129-3p 肌成纤维细胞 细胞活力 细胞迁移 SMAD3蛋白
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吡咯烷螺二吲哚对非小细胞肺癌A549细胞活力及凋亡的影响 预览
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作者 马金珠 颜亮 +3 位作者 昝嘉伟 徐蕾 王毅 张根葆 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期286-290,共5页
目的:探讨吡咯烷螺二吲哚对人非小细胞肺癌A549细胞活力及凋亡的影响。方法:用不同浓度(25、50和100mg/L)的吡咯烷螺二吲哚处理A549细胞24h,通过CCK-8法测定吡咯烷螺二吲哚对细胞活力的影响,流式细胞术分析细胞凋亡情况,Western blot法... 目的:探讨吡咯烷螺二吲哚对人非小细胞肺癌A549细胞活力及凋亡的影响。方法:用不同浓度(25、50和100mg/L)的吡咯烷螺二吲哚处理A549细胞24h,通过CCK-8法测定吡咯烷螺二吲哚对细胞活力的影响,流式细胞术分析细胞凋亡情况,Western blot法检测吡咯烷螺二吲哚对p53和PARP表达及mTOR磷酸化的影响。结果:不同浓度的吡咯烷螺二吲哚处理A549细胞后,细胞的活力较DMSO对照组明显下降(P<0.01),细胞的凋亡率较DMSO对照组明显升高(P<0.01)。与DMSO对照组相比,吡咯烷螺二吲哚可以诱导p53的表达并诱导PARP切割,抑制mTOR的磷酸化水平(P<0.01)。结论:吡咯烷螺二吲哚诱导A549细胞凋亡,其作用机制可能与抑制mTOR的磷酸化有关。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 吡咯烷螺二吲哚 细胞活力 细胞凋亡
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虾青素通过线粒体抑制高糖诱导的HBZY-1细胞凋亡 预览
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作者 林小丁 谢曦 《海南大学学报:自然科学版》 CAS 2019年第1期14-22,共9页
为了探究虾青素是否能有效改善高糖诱导的HBZY-1细胞的凋亡及其抗凋亡的机制,本研究采用CCK8法测定了正常糖和高糖环境下,不同浓度的虾青素对HBZY-1细胞活力的影响,并运用相关试剂盒测试了细胞死活比例和细胞凋亡的变化,在光镜下观察了H... 为了探究虾青素是否能有效改善高糖诱导的HBZY-1细胞的凋亡及其抗凋亡的机制,本研究采用CCK8法测定了正常糖和高糖环境下,不同浓度的虾青素对HBZY-1细胞活力的影响,并运用相关试剂盒测试了细胞死活比例和细胞凋亡的变化,在光镜下观察了HBZY-1细胞形态的变化,使用JC-1探针在荧光显微镜下观察了HBZY-1细胞线粒体膜电位的变化,运用Western Blot技术检测了HBZY-1细胞中促细胞凋亡蛋白bax和抑制细胞凋亡蛋白bcl-2的表达水平,运用caspase 3/7活细胞荧光实时法检测了HBZY-1细胞中的caspase 3/7活性.结果表明:虾青素可有效逆转高糖引起的细胞活力降低,能抑制高糖引起的HBZY-1细胞凋亡和细胞形态异常,并能改善线粒体膜电位和影响参与调控HBZY-1细胞的凋亡相关蛋白.由此认为:虾青素可以通过影响线粒体膜电位来改善高糖引起的肾小球系膜细胞凋亡,其有可能成为改善糖尿病肾病的潜在药物. 展开更多
关键词 HBZY-1细胞 虾青素 细胞活力 线粒体 细胞凋亡
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脑心通对小鼠巨噬细胞Raw264.7的活力及凋亡的影响 预览
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作者 邓子亮 蓝明明 +6 位作者 郭洪胜 谭锦麟 李婉怡 周雅贤 梁艳君 王森 王焱 《海南医学》 CAS 2019年第8期956-959,共4页
目的研究脑心通(Naoxintong,NXT)对Raw264.7小鼠单核巨噬细胞系细胞活力和凋亡的影响及NXT的作用特点。方法实验设置空白组(培养基100μL)、对照组[细胞悬液100μL+1/10二甲基亚砜(DMSO)原液1μL]和三种浓度的NXT组。用CCK-8法检测空白... 目的研究脑心通(Naoxintong,NXT)对Raw264.7小鼠单核巨噬细胞系细胞活力和凋亡的影响及NXT的作用特点。方法实验设置空白组(培养基100μL)、对照组[细胞悬液100μL+1/10二甲基亚砜(DMSO)原液1μL]和三种浓度的NXT组。用CCK-8法检测空白组、对照组、1∶1000NXT组、1∶10000NXT组和1∶100000NXT组经NXT作用12h后Raw264.7细胞的活力。选取1∶1000NXT组,CCK-8法检测作用1h、3h和6h后Raw264.7细胞的活力。用Hoechst33258细胞凋亡试剂盒检测对照组和1:1000的NXT组的细胞凋亡程度。结果与对照组比较,1∶1000NXT组和1∶10000NXT组分别提高Raw264.7细胞活力至(108.2±5.35)%和(105.69±3.02)%,差异均有统计学意义(P<0.05);作用6h内,NXT对Raw264.7细胞活力的提高效果均非常显著,差异有统计学意义(P<0.05);1∶1000的NXTDMSO浸取原液组细胞凋亡数量显著减少。结论NXT可提高Raw264.7细胞活力,降低细胞凋亡,其最佳作用浓度1/1000,最佳作用时间1~6h。 展开更多
关键词 脑心通 RAW264.7细胞 细胞凋亡 细胞活力 CCK-8
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miR-23b-3p靶向XIAP调控类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖和凋亡的机制研究 预览
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作者 蔡松涛 孙京涛 魏瑄 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1310-1315,共6页
目的:探讨微小RNA-23b-3p(miR-23b-3p)靶向X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法:应用RT-qPCR检测体外培养的RA滑膜成纤维细胞中miR-23b-3p和XIAP的表达水平。通过TargetScan预测分... 目的:探讨微小RNA-23b-3p(miR-23b-3p)靶向X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法:应用RT-qPCR检测体外培养的RA滑膜成纤维细胞中miR-23b-3p和XIAP的表达水平。通过TargetScan预测分析miR-23b-3p与XIAP的靶向关系,并使用双萤光素酶报告基因实验进行验证。采用脂质体法将miR-23b-3p模拟物和抑制物转入细胞中,RT-qPCR法检测miR-23b-3p和XIAP表达水平的变化;CCK-8法和细胞流式术分别检测miR-23b-3p对细胞活力和细胞凋亡的影响;Western blot检测Ki67和Bcl-2蛋白表达量的变化。结果:类风湿关节炎滑膜成纤维细胞中miR-23b-3p表达显著下调,XIAP表达显著上调(P<0.05)。转染miR-23b-3p模拟物促使XIAP表达显著下调(P<0.05),并且显著抑制细胞活力,促进细胞凋亡(P<0.05),同时Ki67和Bcl-2显著下调(P<0.05);转染miR-23b-3p抑制物的效果与之相反。结论:miR-23b-3p通过靶向XIAP抑制类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖,促进其凋亡。 展开更多
关键词 微小RNA-23b-3p X连锁凋亡抑制蛋白 类风湿关节炎 细胞活力 细胞凋亡
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双亚苄基哌啶RA190阻滞HL60细胞于G0/G1期并诱导细胞凋亡 预览
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作者 郑晓辉 徐淑娟 +5 位作者 黄家福 林振兴 祝珊珊 许雅苹 马丽娟 黄黎月 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1331-1332,共2页
急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)是具有明显遗传异质性的临床侵袭性疾病。靶向异常基因治疗是当前研究热点。黏附调节分子1(adhesion regulating molecule 1,ADRM1)亦被称为hRpnl3(human Rpn13),是26S蛋白酶体亚单位19S调... 急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)是具有明显遗传异质性的临床侵袭性疾病。靶向异常基因治疗是当前研究热点。黏附调节分子1(adhesion regulating molecule 1,ADRM1)亦被称为hRpnl3(human Rpn13),是26S蛋白酶体亚单位19S调节颗粒上两个主要泛素受体之一,决定26S蛋白酶体结构不对称性。该蛋白在多细胞真核生物内高度保守,在生命过程中可能发挥重要功能。有研究表明[1-3],ADRM1在肝癌、胃癌、急性白血病等多种恶性肿瘤中过表达,下调ADRM1蛋白水平可明显抑制肿瘤细胞增殖,促进其凋亡。因此,ADRM1可能成为肿瘤治疗靶点。 展开更多
关键词 RA190 HL60细胞 ADRM1 细胞活力 周期 凋亡
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猫爪草多糖对小鼠腹腔巨噬细胞活力的调节作用
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作者 杨牧之 王国萍 王斌 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期1997-2003,共7页
此次研究旨在探讨猫爪草多糖对体外培养的正常状态下的原代小鼠腹腔巨噬细胞活性的调节作用,以及小鼠腹腔巨噬细胞在体外培养条件下的活力变化情况。以原代培养的小鼠腹腔巨噬细胞为研究对象,设对照组(加入100μL DMEM培养基)和实验组(... 此次研究旨在探讨猫爪草多糖对体外培养的正常状态下的原代小鼠腹腔巨噬细胞活性的调节作用,以及小鼠腹腔巨噬细胞在体外培养条件下的活力变化情况。以原代培养的小鼠腹腔巨噬细胞为研究对象,设对照组(加入100μL DMEM培养基)和实验组(分别加入25μg/mL, 50μg/mL, 100μg/mL, 200μg/mL,400μg/mL的猫爪草多糖),分别采用噻唑蓝(MTT)比色法、CCK-8法、乳酸脱氢酶释放法和中性红吞噬实验检测不同浓度的猫爪草多糖对体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞活力的调节作用;同时设置24 h、36 h、48 h、60 h和72 h的不同培养时间,观察在体外培养条件下,小鼠腹腔巨噬细胞活力的变化情况。结果表明:与对照组相比,不同浓度的猫爪草多糖均能增强小鼠腹腔巨噬细胞的活力,且猫爪草多糖浓度在100~400μg/mL的细胞活力极显著增强(p<0.01)。此外,各处理组的巨噬细胞在体外培养24~72 h不更换培养液的条件下,48 h处活性最佳。体外培养条件下,一定浓度的猫爪草多糖可以激活小鼠腹腔巨噬细胞,通过猫爪草多糖激活巨噬细胞,可能是猫爪草发挥提升机体免疫力的作用机制之一。此外,体外培养的巨噬细胞虽能存活长达一个月,但仍有一个最佳活力时间。 展开更多
关键词 猫爪草 多糖 巨噬细胞 细胞活力
鱼藤素对大鼠H9C2心肌细胞的生存活力和凋亡的影响 预览
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作者 王月 李姗姗 +3 位作者 赵春明 张美香 王威 蔡红星 《科学技术与工程》 北大核心 2019年第7期54-59,共6页
为探讨不同浓度的鱼藤素(deguelin)对大鼠H9C2心肌细胞活力及凋亡的影响,通过将不同浓度(0、10、50、100、500、1 000 nmol/L)的鱼藤素作用于H9C2细胞24、48、72 h,应用CCK-8法测定鱼藤素对H9C2细胞存活率的影响;划痕实验检测(0、10、50... 为探讨不同浓度的鱼藤素(deguelin)对大鼠H9C2心肌细胞活力及凋亡的影响,通过将不同浓度(0、10、50、100、500、1 000 nmol/L)的鱼藤素作用于H9C2细胞24、48、72 h,应用CCK-8法测定鱼藤素对H9C2细胞存活率的影响;划痕实验检测(0、10、50、100、500、1 000 nmol/L)浓度的鱼藤素作用于H9C2细胞24、48 h后,对细胞迁移能力的影响。应用Hoechst33342/PI双染试剂盒检测不同浓度鱼藤素(0、10、50 nmol/L)作用于H9C2细24 h后对细胞凋亡的影响。结果表明:10、50、100、500、1 000 nmol/L的鱼藤素作用H9C2细胞24、48、72 h后,能明显抑制其存活率,10、50、100、500、1 000 nmol/L的鱼藤素作用H9C2细胞24、48 h后,能明显抑制其迁移能力;且呈浓度和时间依赖性。荧光倒置显微镜观察发现鱼藤素在低浓度时便可以诱导H9C2细胞凋亡。可见鱼藤素能够呈时间和浓度依赖性来抑制H9C2细胞的生存活力并诱导其凋亡。 展开更多
关键词 鱼藤素 H9C2细胞 细胞活力 凋亡
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白露汤含药血清对人肺癌A549细胞活力、凋亡及周期的影响 预览
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作者 朱紫薇 周忠光 韩玉生 《中医药信息》 2019年第3期1-4,共4页
目的:研究白露汤含药血清对人肺癌A549细胞活力、凋亡及生长周期的影响。方法:将人肺癌A549细胞培养至对数生长期,分别加入白露汤低、中、高剂量含药血清,空白对照组加入含10%胎牛血清的RPMI1640培养液,采用CCK-8法检测细胞活力;Western... 目的:研究白露汤含药血清对人肺癌A549细胞活力、凋亡及生长周期的影响。方法:将人肺癌A549细胞培养至对数生长期,分别加入白露汤低、中、高剂量含药血清,空白对照组加入含10%胎牛血清的RPMI1640培养液,采用CCK-8法检测细胞活力;Western-blot法测定人肺腺癌A549凋亡细胞Bax、Bcl-2、C-caspase、HIF-1α及β-actin蛋白的表达;流式细胞术检测细胞周期。结果:与空白对照组比较,白露汤各给药组的A549细胞活力在24、48、72 h均明显降低(P<0.05),且呈剂量依赖性。作用24、48、72 h后,白露汤各给药组均出现不同程度的细胞凋亡。流式细胞术检测显示,白露汤作用后,可使人肺腺癌A549细胞其发生早期凋亡(P<0.05)。结论:白露汤可抑制人肺癌A549细胞活力、诱导细胞凋亡、延缓细胞周期进程,这可能与下调GLUT1、HK2、PKM2、LDH-A、HIF-1α和β-actin等表达有关。 展开更多
关键词 白露汤 A549细胞 细胞活力 凋亡 周期
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伏马毒素B1对猪肾上皮细胞增殖的影响 预览
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作者 袁巧玲 范颖 +2 位作者 宁玲忠 苏建明 雷红宇 《饲料博览》 2019年第7期1-3,9共4页
研究旨在探究伏马毒素B1(FB1)对猪肾上皮细胞增殖的影响,通过MTT检测FB1对PK15细胞活力和qPCR检测周期相关基因的mRNA表达水平.结果表明,FB1显著减少细胞活力,降低细胞核增殖抗原PCNA和周期蛋白Cyclin B和Cyclin D的mRNA表达水平,升高P2... 研究旨在探究伏马毒素B1(FB1)对猪肾上皮细胞增殖的影响,通过MTT检测FB1对PK15细胞活力和qPCR检测周期相关基因的mRNA表达水平.结果表明,FB1显著减少细胞活力,降低细胞核增殖抗原PCNA和周期蛋白Cyclin B和Cyclin D的mRNA表达水平,升高P21和P27的mRNA表达水平.说明FB1可通过调控细胞周期相关基因的表达抑制猪肾上皮细胞增殖. 展开更多
关键词 伏马毒素B1 猪肾上皮细胞 细胞活力 增殖 周期
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siRNA沉默ARC对低氧下大鼠肺动脉平滑肌细胞活力的影响 预览
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作者 张婕 金泉 +1 位作者 吴素玲 管明 《重庆医学》 CAS 2019年第16期2723-2727,2733共6页
目的利用小干扰RNA(siRNA)技术干扰大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)含胱冬肽酶富集功能域的凋亡抑制因子(ARC)的表达,验证ARC在PASMCs活力变化中的作用。方法体外培养PASMCs,分为常氧组、缺氧组、siRNA-Negative+缺氧组、siRNA-ARC+缺氧... 目的利用小干扰RNA(siRNA)技术干扰大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)含胱冬肽酶富集功能域的凋亡抑制因子(ARC)的表达,验证ARC在PASMCs活力变化中的作用。方法体外培养PASMCs,分为常氧组、缺氧组、siRNA-Negative+缺氧组、siRNA-ARC+缺氧组。采用CCK-8法检测细胞活力情况,免疫荧光染色法及Western blot检测ARC在PASMCs中的表达,RT-PCR法分别检测caspase-3、Fadd、Bcl-2、Bad mRNA表达。结果低氧下PASMCs活力较常氧下增加,并呈时间依赖性;与siRNA-Negative+缺氧组比较,siRNA-ARC+缺氧组的PASMCs活力受到抑制;siRNA-ARC+缺氧组PASMCs的caspase-3、Bad、Fadd mRNA表达较siRNA-Negative+缺氧组增加,而Bcl-2 mRNA表达较siRNA-Negative+缺氧组减少(P<0.05)。结论ARC参与调控低氧下大鼠PASMCs生长,对PASMCs活力具有一定的增强作用,可能是促凋亡因子及抗凋亡因子共同作用的结果。 展开更多
关键词 低氧 含胱冬肽酶富集功能域的凋亡抑制因子 大鼠肺动脉平滑肌细胞 细胞活力
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氧化苦参碱干预砷致肝星状细胞活化中细胞自噬的研究 预览
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作者 马子华 张景允 +8 位作者 杨柳 田甜 汤雷 郑璐 蔡爽 韩冰 谢汝佳 杨婷 杨勤 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1662-1667,共6页
目的:探讨氧化苦参碱干预砷致肝星状细胞(HSC)活化过程中细胞自噬的变化。方法:本实验使用100 μmol/L亚砷酸钠作用于人胎肝细胞株LO2 24 h,收取培养上清。将染砷LO2细胞培养上清与正常培养液按照1 ∶ 4比例混合,用于培养人肝星状细胞株... 目的:探讨氧化苦参碱干预砷致肝星状细胞(HSC)活化过程中细胞自噬的变化。方法:本实验使用100 μmol/L亚砷酸钠作用于人胎肝细胞株LO2 24 h,收取培养上清。将染砷LO2细胞培养上清与正常培养液按照1 ∶ 4比例混合,用于培养人肝星状细胞株LX-2,24 h后采用低(0.25 g/L)和高(1 g/L)剂量氧化苦参碱干预培养24 h;采用全自动生化分析仪检测染砷LO2细胞培养上清中天冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平;ELISA检测染砷LO2细胞培养上清中转化生长因子β1(TGF-β1)水平;MTT法检测LX-2细胞活力;Western blot检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、自噬相关基因12(Atg12)、自噬相关基因5(Atg5)和微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)蛋白表达水平变化;油红O染色光镜下观察LX-2细胞中脂滴。结果:(1)染砷LO2细胞培养上清AST和ALT水平显著增加( P <0.05),此上清加入LX-2细胞培养基中可明显增强LX-2细胞活力( P <0.05),与染砷LO2细胞培养上清共孵育的LX-2细胞内脂滴数量显著减少,且LX-2活化标志蛋白α-SMA表达水平显著上调( P <0.05);(2)与染砷LO2细胞培养上清共孵育可上调LX-2细胞Atg12、Atg5和LC3Ⅱ蛋白表达,较对照组差异具有显著性( P <0.05);(3)低、高剂量氧化苦参碱干预可抑制与染砷LO2细胞培养上清共孵育的LX-2细胞的活力( P <0.05),且使LX-2细胞α-SMA、Atg12、Atg5和LC3-Ⅱ蛋白表达水平显著下调( P <0.05),高剂量氧化苦参碱干预的LX-2细胞自噬标志蛋白LC3-Ⅱ表达水平降低较低剂量氧化苦参碱干预更为显著( P <0.05);(4)低、高剂量氧化苦参碱干预后LX-2细胞内脂滴数量较染砷LO2细胞培养上清共孵育的LX-2细胞均显著增多。结论:砷致肝纤维化过程中间接活化HSC与砷损伤肝细胞有关,细胞自噬参与这一过程,且HSC可能通过促进其内脂滴降解而促进自身的活化。氧化苦参碱可通过抑制细胞自噬,减少HSC活化实现其减轻肝纤维化� 展开更多
关键词 肝星状细胞 氧化苦参碱 自噬 细胞活力 肝纤维化
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