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IL-6/STAT3报告基因系统的构建及抑制IL-6/STAT3信号通路的中药单体的筛选及验证
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作者 张露露 李晶哲 +3 位作者 马琰岩 尚腾飞 王子依 刘长振 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期353-361,共9页
寻找可抑制IL-6/STAT3信号通路的活化从而抑制肿瘤的生长和恶化的中药单体化合物具有重要意义及发展前景。文中通过基因重组技术构建出一种含有STAT3增强子序列和NanoLuc(NLuc)报告基因序列的新表达载体,并进一步建立受STAT3调控并稳定... 寻找可抑制IL-6/STAT3信号通路的活化从而抑制肿瘤的生长和恶化的中药单体化合物具有重要意义及发展前景。文中通过基因重组技术构建出一种含有STAT3增强子序列和NanoLuc(NLuc)报告基因序列的新表达载体,并进一步建立受STAT3调控并稳定表达NLuc荧光素酶的细胞系,利用该细胞系定量检测多种中药单体化合物对IL-6/STAT3信号通路的调控作用,并对抑制IL-6/STAT3信号通路的中药单体的效果进行验证。酶切鉴定及测序结果表明报告基因表达载体pQCXIP-STAT3-NLuc构建成功。STAT3转录因子的刺激物白细胞介素-6(IL-6)作用于所构建的稳定表达NLuc的细胞系后出现特异性荧光素酶反应,且作用效果呈良好的剂量依赖性,表明受STAT3调控稳定表达NLuc荧光素酶的细胞系构建成功。Western blotting及Real-time PCR实验结果表明所筛选的中药单体化合物石斛碱及粉防己碱可抑制IL-6/STAT3信号通路并显著下调其下游基因Bcl-2及Bcl-x的表达,且作用呈剂量依赖性。综上所述,文中构建了可高效检测STAT3转录活性的报告基因系统,并利用该系统成功地筛选出可抑制IL-6/STAT3信号通路的中药单体化合物,具有一定的理论和应用价值。 展开更多
关键词 IL-6/STAT3信号系统 NLuc荧光素酶 石斛 粉防己
强筋祛湿液质量标准研究 预览
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作者 殷少文 叶世芸 +2 位作者 赵琳珺 王维 郑立肯 《医药导报》 CAS 北大核心 2020年第3期387-392,共6页
目的制定强筋祛湿液质量标准,为该药质量控制提供保障。方法采用薄层色谱法对处方中防己、延胡索、独活、何首乌、丁香、川牛膝等6味药材进行鉴别;采用高效液相色谱法测定处方中药效物质粉防己碱含量。结果薄层色谱法鉴别中,阴性对照品... 目的制定强筋祛湿液质量标准,为该药质量控制提供保障。方法采用薄层色谱法对处方中防己、延胡索、独活、何首乌、丁香、川牛膝等6味药材进行鉴别;采用高效液相色谱法测定处方中药效物质粉防己碱含量。结果薄层色谱法鉴别中,阴性对照品无干扰,与杂质斑点分离较好。高效液相色谱法测定含量中,粉防己碱浓度在0.073 8~0.246 0μg·mL^-1(r=0.999 7)范围内与峰面积呈良好的线性关系。结论该实验所建立的薄层色谱法和高效液相色谱含量测定方法简便,重复性好,专属性强,可用于强筋祛湿液质量控制。 展开更多
关键词 强筋祛湿液 粉防己 色谱法 薄层 色谱法 高效液相
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HPLC法同时测定参莲胶囊中7种生物碱成分的含量
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作者 韩胆 《中国药师》 CAS 2019年第11期2127-2129,共3页
目的:建立RP-HPLC双波长法同时测定参莲胶囊中氧化苦参碱、槐定碱、氧化槐果碱、苦参碱、槐果碱、粉防己碱、防己诺林碱7种生物碱含量。方法:采用Venusil XBP NH2(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.01%醋酸铵水溶液为流动相梯... 目的:建立RP-HPLC双波长法同时测定参莲胶囊中氧化苦参碱、槐定碱、氧化槐果碱、苦参碱、槐果碱、粉防己碱、防己诺林碱7种生物碱含量。方法:采用Venusil XBP NH2(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.01%醋酸铵水溶液为流动相梯度洗脱,流速为1.0 ml·min^-1,检测波长为210 nm、280 nm。结果:氧化苦参碱、槐定碱、氧化槐果碱、苦参碱、槐果碱、粉防己碱、防己诺林碱线性范围分别为32.07~513.07μg·ml^-1(r=0.9988)、37.90~606.40μg·ml^-1(r=0.9992)、23.07~369.07μg·ml^-1(r=0.9992)、52.37~837.87μg·ml^-1(r=0.9997)、17.63~282.13μg·ml^-1(r=0.9991)、5.30~84.80μg·ml^-1(r=0.9995)、8.87~141.87μg·ml^-1(r=0.9997);平均加样回收率(n=9)为100.16%~102.84%(RSD≤2.0%)。5批样品中氧化苦参碱、槐定碱、氧化槐果碱、苦参碱、槐果碱、粉防己碱、防己诺林碱含量依次为9.18~9.69 mg·g^-1、9.35~11.74 mg·g^-1、6.73~7.09 mg·g^-1、15.17~15.96 mg·g^-1、5.03~5.33 mg·g^-1、1.23~1.97 mg·g^-1、2.48~2.74 mg·g^-1。结论:所建立的多成分分析方法可用于参莲胶囊中7个生物碱成分的含量测定。 展开更多
关键词 参莲胶囊 高效液相色谱 氧化苦参 槐定 氧化槐果 苦参 槐果 粉防己 防己诺林
HPLC-QAMS法同时测定复方罗布麻片Ⅰ中8个活性成分的含量
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作者 杨晶 夏新华 张雁 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1433-1442,共10页
目的:建立同时测定复方罗布麻片Ⅰ中8个活性成分含量的一测多评法(QAMS)。方法:采用HPLC法,以氢氯噻嗪为内参物,分别计算其与金丝桃苷、粉防己碱、防己诺林碱、绿原酸、蒙花苷、盐酸异丙嗪、硫酸双肼屈嗪的相对校正因子,通过相对校正因... 目的:建立同时测定复方罗布麻片Ⅰ中8个活性成分含量的一测多评法(QAMS)。方法:采用HPLC法,以氢氯噻嗪为内参物,分别计算其与金丝桃苷、粉防己碱、防己诺林碱、绿原酸、蒙花苷、盐酸异丙嗪、硫酸双肼屈嗪的相对校正因子,通过相对校正因子计算复方罗布麻片Ⅰ中7个活性成分的含量(计算值),同时采用外标法测定8个活性成分的含量(实测值),比较计算值与实测值的差异。色谱柱为Kromasil C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.5%磷酸溶液(梯度洗脱),流速0.7 mL·min^-1,检测波长260 nm(氢氯噻嗪、盐酸异丙嗪、硫酸双肼屈嗪、金丝桃苷)、280 nm(粉防己碱、防己诺林碱)、325 nm(绿原酸、蒙花苷),柱温30℃,进样量10μL。结果:金丝桃苷、粉防己碱、防己诺林碱、绿原酸、蒙花苷、氢氯噻嗪、盐酸异丙嗪、硫酸双肼屈嗪检测质量浓度的线性范围分别为1.082~19.48、3.016~54.29、1.350~24.30、1.102~19.84、1.623~29.21、19.49~350.8、11.04~198.7、13.03~234.5μg·m L^-1(r为0.999 5~0.999 8);平均加样回收率分别为98.3%、99.1%、98.3%、97.5%、97.9%、96.5%、96.3%、97.8%(RSD<2.0%,n=9);检测下限分别为3.05、2.96、4.25、3.21、2.62、2.95、3.26、4.08 ng,定量下限分别为9.18、8.94、12.95、9.71、7.95、8.81、9.86、12.24 ng;精密度、重复性、稳定性(48 h)试验的RSD<2.0%(n=6)。金丝桃苷、粉防己碱、防己诺林碱、绿原酸、蒙花苷、盐酸异丙嗪、硫酸双肼屈嗪的相对校正因子分别为0.662、1.253、1.548、1.190、0.979、1.236、1.654,其计算值和实测值之间无显著性差异。结论:该方法简单、有效,结果准确,节约成本,可用于复方罗布麻片Ⅰ中上述8个活性成分的同时测定。 展开更多
关键词 高效液相色谱-一测多评法 复方罗布麻片Ⅰ 金丝桃苷 粉防己 防己诺林 绿原酸 蒙花苷 氢氯噻嗪 盐酸异丙嗪 硫酸双肼屈嗪
HPLC波长切换法同时测定苍柏祛痛胶囊中的6种成分
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作者 吴晶 刘鸿雁 +1 位作者 于博 贾忠 《华西药学杂志》 CAS CSCD 2019年第2期165-168,共4页
目的采用HPLC波长切换法同时测定苍柏祛痛胶囊中盐酸黄柏碱、龙胆苦苷、芍药苷、粉防己碱、盐酸小檗碱、丹皮酚等6种成分的含量。方法色谱柱为Waters Xselect CSH-C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱(0... 目的采用HPLC波长切换法同时测定苍柏祛痛胶囊中盐酸黄柏碱、龙胆苦苷、芍药苷、粉防己碱、盐酸小檗碱、丹皮酚等6种成分的含量。方法色谱柱为Waters Xselect CSH-C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱(0~15 min、10%→18%A,15~30 min、18%→50%A,30~35 min、50%→10%A),流速为1.0 m L·min^-1,波长为284 nm(0~7 min,盐酸黄柏碱)、274 nm(7~10 min,龙胆苦苷)、230 nm(10~14 min,芍药苷)、274 nm(14~35 min,粉防己碱、盐酸小檗碱、丹皮酚),进样量10μL。结果盐酸黄柏碱、龙胆苦苷、芍药苷、粉防己碱、盐酸小檗碱、丹皮酚进样量分别在0.150~1.504、0.768~7.680、1.096~10.960、0.220~2.200、0.296~2.956、0.0345~0.345μg时与峰面积呈良好的线性关系;平均回收率分别为98.3%、99.2%、98.8%、98.8%、99.1%、98.2%,RSD分别为1.32%、1.46%、1.08%、1.31%、1.26%、1.21%(n=6)。结论所用方法可同时测定制剂中的多种成分,操作简便、准确,重复性好,可用于复方苍柏祛痛胶囊的质量控制。 展开更多
关键词 高效液相色谱法 苍柏祛痛胶囊 波长切换 同时测定 盐酸黄柏 龙胆苦苷 芍药苷 粉防己 质量控制
高效液相色谱法同时测定防己药材中粉防己碱和防己诺林碱含量 预览
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作者 杨帆 吴梦丽 +3 位作者 高慧 闫国跃 何秋梅 谢阳姣 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期2545-2551,共7页
【目的】建立同时测定防己药材中粉防己碱和防己诺林碱含量的高效液相色谱方法(HPLC),为防己药材质量检测提供有效方法。【方法】用2%盐酸甲醇常温超声30 min提取粉防己碱和防己诺林碱,采用HPLC对江西、安徽、浙江、湖南、福建和广东等... 【目的】建立同时测定防己药材中粉防己碱和防己诺林碱含量的高效液相色谱方法(HPLC),为防己药材质量检测提供有效方法。【方法】用2%盐酸甲醇常温超声30 min提取粉防己碱和防己诺林碱,采用HPLC对江西、安徽、浙江、湖南、福建和广东等不同产地防己药材进行测定。色谱条件:色谱柱Agilent ZORBAX Extend-C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.08%三乙胺(75∶25),等度洗脱,进样量8μL,流速1.0 mL/min,柱温25℃,检测波长282 nm,运行时间20 min。【结果】粉防己碱和防己诺林碱的线性范围分别为0~6000μg/mL(R^2=1.0000)和0~3000μg/mL(R^2=0.9999),平均回收率分别为104.99%和90.13%,相对标准偏差(RSD)分别为1.75%和2.70%;粉防己碱和防己诺林碱的稳定性RSD分别为1.06%和0.62%、精密度RSD分别为1.57%和0.06%、重复性RSD分别为1.04%和1.45%。不同产地防己药材中粉防己碱的含量变化范围为0.836%~5.999%,最高的是江西金桥乡株系3,最低的是浙江苏庄株系4;防己诺林碱的含量变化范围为0.507%~2.993%,最高的是广东天子地株系4,最低的是湖南贯塘株系1,RSD均小于5%。【结论】建立的HPLC测定方法简单、稳定性好、精密度高且运行时间短,可同时测定防己药材中粉防己碱和防己诺林碱含量,可考虑作为防己药材质量检测的方法。 展开更多
关键词 防己 粉防己 防己诺林 含量 高效液相色谱法(HPLC)
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亚砷酸钠联合粉防己碱对乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖抑制作用及机制研究 预览
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作者 于博文 樊英怡 +1 位作者 郭鱼波 裴晓华 《现代肿瘤医学》 CAS 2019年第4期546-551,共6页
目的:探讨亚砷酸钠联合粉防己碱对乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖抑制作用。方法:MTT法检测细胞活力,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,Hoechst33258染色观察细胞染色质固缩情况,碘化丙啶PI单染法检测细胞周期,Westernblot检测p-GSK3β... 目的:探讨亚砷酸钠联合粉防己碱对乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖抑制作用。方法:MTT法检测细胞活力,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,Hoechst33258染色观察细胞染色质固缩情况,碘化丙啶PI单染法检测细胞周期,Westernblot检测p-GSK3β、GSK3β及凋亡相关蛋白PARP、bcl-2的表达。结果:不同浓度的亚砷酸钠或粉防己碱单用均可抑制MDA-MB-231细胞增殖(P<0.01);与单独用药相比,两药联合使用可显著增强细胞增殖抑制效果(P<0.0001)。两药联用可显著诱导MDA-MB-231细胞凋亡(P<0.01),细胞凋亡率呈现浓度依赖性递增,并出现细胞核染色质固缩。联合用药浓度为亚砷酸钠10μmol/L+粉防己碱4μg/ml时,S期细胞所占百分比显著增高(P<0.05);联合用药浓度为亚砷酸钠15μmol/L+粉防己碱4.5μg/ml时,G2/M期细胞所占百分比显著增高(P<0.001)。联合用药后,凋亡相关蛋白PARP的表达显著上调(P<0.0001);bcl-2的表达显著下调(P<0.05);p-GSK3β、GSK3β蛋白表达均显著上调(P<0.0001)。结论:亚砷酸钠联合粉防己碱对乳腺癌MDA-MB-231细胞具有增殖抑制作用,其机制与诱导细胞周期S期、G2/M期阻滞、GSK3β蛋白水平上调及促进细胞凋亡有关,促凋亡作用与bcl-2蛋白水平下调、PARP蛋白水平上调有关。 展开更多
关键词 乳腺癌 亚砷酸钠 粉防己 增殖抑制 凋亡
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治疗创伤后应激障碍的粉防己碱鼻用温敏凝胶研究
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作者 庞璐璐 高艳 +5 位作者 张丽花 马金秋 朱思庆 朱林 杜丽娜 金义光 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1680-1687,共8页
创伤后应激障碍(post-traumatic stress disorder, PTSD)以传统全身给药方式起效慢,不良反应明显。本文制备了粉防己碱鼻用温敏凝胶(intranasal tetrandrine temperature-sensitive gel, TTG),鼻内给药治疗小鼠PTSD。以泊洛沙姆为基质制... 创伤后应激障碍(post-traumatic stress disorder, PTSD)以传统全身给药方式起效慢,不良反应明显。本文制备了粉防己碱鼻用温敏凝胶(intranasal tetrandrine temperature-sensitive gel, TTG),鼻内给药治疗小鼠PTSD。以泊洛沙姆为基质制备TTG,胶凝温度合适(低于32℃)、胶凝时间短(1.32 min),流变学考察表明TTG具有温度敏感性,小动物活体成像证明TTG鼻腔滞留时间长,蟾蜍上腭纤毛毒性实验表明制剂安全性高。所有动物实验经军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所伦理委员会批准且实验均按照相关指导原则和规定进行。用单次延长应激(single prolonged stress, SPS)、足底电击方法建立小鼠PTSD模型,使其产生焦虑、恐惧行为。用高架十字迷宫评价SPS模型小鼠,其中开臂进入次数百分比(percentages of open arm entry numbers, OE)、开臂进入潜伏期(latency of open arm entries, OL)及开臂滞留时间(residence time of open arm entries, OT)均表明模型建立成功。TTG鼻腔给药7天后, SPS小鼠的OE和OT明显增加, OL明显降低;TTG还可明显减少条件恐惧箱中足底电击模型小鼠的不动时间。苏木精-伊红病理切片与c-fos免疫组化结果表明, TTG能明显改善PTSD模型小鼠海马、前额叶皮层及杏仁核部位的病理变化。因此, TTG是一种使用方便、安全有效的抗PTSD药物,为PTSD临床治疗提供新选择。 展开更多
关键词 创伤后应激障碍 粉防己 温敏凝胶 鼻腔给药 行为学
粉防己碱临床应用研究进展
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作者 季宇彬 鹿丽 +1 位作者 汝鑫 于淼 《亚太传统医药》 2019年第3期201-203,共3页
粉防己碱又名汉防己甲素,是一类从防己科植物粉防己的根块中提取出的双苄基异喹啉类生物碱,具有镇痛、抗炎、抗抑郁、抑制纤维化等作用。通过查阅国内外相关文献报道,发现粉防己碱在临床上可用于治疗呼吸系统、神经系统、循环系统、运... 粉防己碱又名汉防己甲素,是一类从防己科植物粉防己的根块中提取出的双苄基异喹啉类生物碱,具有镇痛、抗炎、抗抑郁、抑制纤维化等作用。通过查阅国内外相关文献报道,发现粉防己碱在临床上可用于治疗呼吸系统、神经系统、循环系统、运动系统及其他系统相关疾病,但主要用于减轻症状,需要与相关药物联用,才能更好地发挥临床效果。对粉防己碱的临床应用及剂型的研究进展进行综述,旨在为粉防己碱的进一步开发利用提供科学依据和理论指导。 展开更多
关键词 粉防己 临床应用 系统疾病
粉防己碱对神经母细胞瘤细胞增殖和迁移、侵袭能力的影响及其机制研究 预览
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作者 邓香 《中国药房》 CAS 北大核心 2019年第2期211-216,共6页
目的:探讨粉防己碱(TET)对神经母细胞瘤细胞增殖和迁移、侵袭能力的影响及其作用机制。方法:以人神经母细胞瘤细胞系IMR-32细胞、SH-SY5Y细胞为研究对象,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)方法检测浓度分别为0(空白对照)、2.5、5、10、15、20μmo... 目的:探讨粉防己碱(TET)对神经母细胞瘤细胞增殖和迁移、侵袭能力的影响及其作用机制。方法:以人神经母细胞瘤细胞系IMR-32细胞、SH-SY5Y细胞为研究对象,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)方法检测浓度分别为0(空白对照)、2.5、5、10、15、20μmol/L的TET对细胞增殖的影响;采用Transwell小室迁移实验和侵袭实验,考察正常对照组(TET浓度为0μmol/L)和TET组(10μmol/L,IMR-32细胞;15μmol/L,SH-SY5Y细胞)的细胞跨膜情况;采用Western blotting法检测按上述浓度TET处理后的IMR-32细胞和SH-SY5Y细胞中金属基质蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9、β-catenin、糖原合成激酶3β(GSK3β)、磷酸化GSK3β(p-GSK3β)的蛋白表达水平。结果:5、10、15、20μmol/L的TET可显著降低IMR-32细胞和SH-SY5Y细胞的存活率(P<0.05或P<0.01),其半数抑制浓度分别为10.148、14.461μmol/L。细胞迁移实验和侵袭实验结果显示,与正常对照组比较,TET组跨膜细胞数均显著减少(P<0.01);Western blotting法检测结果显示,与正常对照组比较,TET组细胞中MMP-2、MMP-9、β-catenin、p-GSK3β蛋白表达均显著降低(P<0.01)。结论:TET对神经母细胞瘤细胞的增殖和迁移、侵袭能力具有明显的抑制作用,其机制与下调细胞中MMP-2、MMP-9蛋白表达及抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。 展开更多
关键词 粉防己 神经母细胞瘤 IMR-32 细胞 SH-SY5Y细胞 增殖 迁移 侵袭
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粉防己碱对甲状腺癌TP-1细胞的促凋亡作用及其机制
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作者 薛磊 韩家凯 +2 位作者 庞妩燕 苏东月 刘莲叶 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第20期2620-2622,共3页
目的 研究粉防己碱对甲状腺癌TP-1细胞增殖、凋亡的影响及其相关机制。方法 TP-1细胞分为4组:对照组和低、中、高剂量实验组。低、中、高剂量实验组分别予以0. 5,10,20μg·m L^-1粉防己碱,对照组予以等量0. 9%氯化钠。用Annexin V-... 目的 研究粉防己碱对甲状腺癌TP-1细胞增殖、凋亡的影响及其相关机制。方法 TP-1细胞分为4组:对照组和低、中、高剂量实验组。低、中、高剂量实验组分别予以0. 5,10,20μg·m L^-1粉防己碱,对照组予以等量0. 9%氯化钠。用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测各组TP-1细胞凋亡情况,蛋白免疫印迹法检测细胞YAP、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、Survivin、基质金属蛋白酶(MMP)蛋白表达。结果 给药48 h后,对照组和低、中、高剂量实验组TP-1细胞细胞凋亡率分别为(9. 02±1. 33)%,(13. 69±1. 58)%,(22. 16±1. 47)%,(36. 85±2. 05)%;YAP蛋白相对表达量分别为1. 56±0. 23,0. 94±0. 11,0. 62±0. 10,0. 53±0. 13;Caspase-3蛋白相对表达量分别为0. 35±0. 15,0. 65±0. 11,0. 85±0. 10,0. 98±0. 06;Survivin蛋白相对表达量分别1. 32±0. 25,0. 89±0. 16,0. 52±0. 07,0. 33±0. 10;MMP蛋白相对表达量分别为0. 98±0. 06,0. 81±0. 03,0. 45±0. 12,0. 23±0. 06;差异均有统计学意义(均P <0. 05)。结论 粉防己碱可诱导甲状腺癌TP-1细胞凋亡,其作用机制可能与调控YAP、Caspase-3、Survivin、MMP等凋亡相关蛋白表达相关。 展开更多
关键词 甲状腺癌 TP-1细胞 粉防己 增殖 凋亡
粉防己碱对神经母细胞瘤干细胞增殖和干性基因表达的影响及作用机制 预览
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作者 谢东可 何霞 廖凯男 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第5期729-733,共5页
背景:研究发现粉防己碱能通过下调β-catenin表达抑制神经胶质瘤干细胞特性,然而其对神经母细胞瘤干细胞的影响未见报道。目的:探讨粉防己碱对神经母细胞瘤干细胞增殖及干性标志物表达的影响,并探究其分子机制。方法:使用无血清悬浮法... 背景:研究发现粉防己碱能通过下调β-catenin表达抑制神经胶质瘤干细胞特性,然而其对神经母细胞瘤干细胞的影响未见报道。目的:探讨粉防己碱对神经母细胞瘤干细胞增殖及干性标志物表达的影响,并探究其分子机制。方法:使用无血清悬浮法从神经母细胞瘤SK-N-SH细胞中获取肿瘤干细胞,给予粉防己碱干预,通过MTT法检测粉防己碱对神经母细胞瘤干细胞的增殖抑制作用,细胞免疫荧光染色检测粉防己碱干预后Nestin蛋白水平变化,克隆球形成实验检测粉防己碱干预后肿瘤干细胞成球能力变化,qRT-PCR法检测粉防己碱干预后CD133、Oct-4、NestinmRNA表达,Westernblot检测粉防己碱干预后CD133、Oct-4、Nestin、p-GSK3β和β-catenin蛋白表达。结果与结论:与未干预组比较,粉防己碱干预后SK-N-SH干细胞增殖能力降低(P<0.05),CD133、Oct-4和NestinmRNA表达降低(P<0.05),Nestin蛋白荧光强度减弱,克隆球形成能力减弱(P<0.05),CD133、Oct-4、Nestin、p-GSK3β和β-catenin蛋白减少(P<0.05)。结果表明,粉防己碱抑制神经母细胞瘤干细胞增殖并降低干性标志物表达,可能与其抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。 展开更多
关键词 神经母细胞瘤 肿瘤干细胞 粉防己 细胞增殖 CD133 OCT-4 NESTIN Wnt/β-catenin信号通路 苄异喹啉类 组织工程
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汉防己甲素衍生物HL-49协同顺铂或多柔比星促进三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞的凋亡
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作者 汤长宁 吴翱兰 +4 位作者 刘金河 张望明 杨爽 何志旭 刘杰麟 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期151-163,共13页
目的:研究汉防己甲素衍生物HL-49协同顺铂(cisplatin,DDP)或多柔比星(adriamycin,ADM)对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖及凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:用不同浓度的HL-49、DDP、ADM单药以及HL-49联合DDP或ADM处理MDA-MB-... 目的:研究汉防己甲素衍生物HL-49协同顺铂(cisplatin,DDP)或多柔比星(adriamycin,ADM)对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖及凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:用不同浓度的HL-49、DDP、ADM单药以及HL-49联合DDP或ADM处理MDA-MB-231细胞;采用MTT法检测细胞的增殖抑制率并计算Q值,平板克隆实验检测细胞的集落形成能力,FCM法检测细胞的凋亡率并计算Q值;蛋白质印迹法检测细胞中Bloom综合征解旋酶(Bloom’s symdrome helicase,BLM)、乳腺癌易感基因1(breast cancer susceptibility gene 1,BRCA1)和DNA修复关键酶Rad51以及凋亡相关蛋白caspase 3、caspase 8、 caspase 10、Bax、p53和Bcl-2蛋白的表达水平。结果:与HL-49、DDP和ADM单药组相比,HL-49(1或2μmol/L)联合DDP(5或10μmol/L)或ADM(2或5μmol/L)组MDA-MB-231细胞的增殖抑制率均明显提高(P值均<0,05),其中HL-49联合DDP(单药浓度两两组合)4个浓度组的Q值分别为2,04、1.88、1.87和1.83,HL-49联合ADM的Q值分别为1.37、1.21、1.36和1.23,两药联用均具有协同效应。在平板克隆形成实验中,联合用药组细胞的集落形成数均较单药组明显减少(P值均<0.05)。HL-49(1或2μmol/L)联合DDP(5或10μmol/L)或ADM(2或5μmol/L)组MDA-MB-231细胞的凋亡率均高于单药组(P值均<0.05),其中HL-49联合DDP的Q值分别为1.20、1.35、1.70和2.06,HL-49联合ADM的Q值分别为1.48、1.17、1.99和2.13,提示两药联用有协同作用。HL-49联合DDP或ADM用药组MDA-MB-231细胞中的caspase 3、caspase 8、caspase 10和Bax蛋白的表达水平均较单药组明显上调(P值均<0.05),Rad51、BRCA1、BLM、p53和Bcl-2蛋白表达水平均明显下调(P值均<0.05)。结论:汉防己甲素衍生物HL-49与DDP或ADM联合用药均具有协同作用,且其联用抗肿瘤活性可能与诱导三阴性乳腺癌细胞凋亡相关。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 粉防己 抗肿瘤联合化疗方案 细胞增殖 细胞凋亡
粉防己碱对激素非依赖性人前列腺癌细胞株PC-3增殖和凋亡影响的研究
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作者 刘锦裕 谢锦来 +1 位作者 谢建兵 李永生 《国际泌尿系统杂志》 2019年第2期200-203,共4页
目的探讨粉防己碱(TET)对激素非依赖性人前列腺癌细胞株PC-3细胞增殖抑制和凋亡作用及其机制。方法应用CCK法观察不同浓度TET(1、2、4、8μg/mL)对人前列腺癌细胞株PC-3生长的抑制作用;用Annexin-V与PI双染法流式细胞术分析TET对PC-3细... 目的探讨粉防己碱(TET)对激素非依赖性人前列腺癌细胞株PC-3细胞增殖抑制和凋亡作用及其机制。方法应用CCK法观察不同浓度TET(1、2、4、8μg/mL)对人前列腺癌细胞株PC-3生长的抑制作用;用Annexin-V与PI双染法流式细胞术分析TET对PC-3细胞凋亡的影响;RT-PCR检测TET对人前列腺癌细胞株PC-3IL-8表达水平的影响。结果TET对前列腺癌PC-3细胞株增殖有抑制作用,其抑制效应呈剂量依赖性。不同浓度TET作用48h后,前列腺癌PC-3细胞株的凋亡率随着浓度的增高而升高,差异具有统计学意义(P<0.01)。不同浓度TET作用48h后IL-8mRNA表达水平随着浓度的增加而降低,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论TET能抑制人前列腺癌细胞株PC-3细胞增殖,并促进人前列腺癌细胞株PC-3的细胞凋亡,其作用机制可能与其下调IL-8mRNA表达有关。 展开更多
关键词 前列腺肿瘤 粉防己 细胞增殖 细胞凋亡
高效液相色谱法同时测定复方罗布麻片Ⅰ中7个成分的含量 被引量:1
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作者 徐硕 姜文清 +3 位作者 金鹏飞 邝咏梅 徐文峰 吴学军 《药物分析杂志》 CSCD 北大核心 2018年第11期1931-1938,共8页
目的:应用高效液相色谱技术,建立同时测定复方罗布麻片I中绿原酸、氢氯噻嗪、金丝桃苷、防己诺林碱、粉防己碱、蒙花苷和盐酸异丙嗪含量的方法。方法:采用Waters XBridge C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.2... 目的:应用高效液相色谱技术,建立同时测定复方罗布麻片I中绿原酸、氢氯噻嗪、金丝桃苷、防己诺林碱、粉防己碱、蒙花苷和盐酸异丙嗪含量的方法。方法:采用Waters XBridge C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.2%磷酸水溶液,梯度洗脱,流速0.5 mL·min-1,柱温30℃,检测波长为210、256、325 nm。结果:7个化学成分分离度良好,绿原酸、氢氯噻嗪、金丝桃苷、防己诺林碱、粉防己碱、蒙花苷、盐酸异丙嗪质量浓度分别在1.814~45.36μg·mL-1(r=1.000)、48.64~1 216μg·mL-1(r=0.999 8)、4.14~103.5μg·mL-1(r=1.000)、3.338~83.46μg·mL-1(r=1.000)、6.68~167μg·mL-1(r=1.000)、0.710 4~17.76μg·mL-1(r=1.000)和3.128~78.2μg·mL-1(r=1.000)与峰面积呈良好的线性关系;精密度良好,相对标准偏差(RSD)小于0.90%;回收率良好,3个加样浓度的平均回收率(n=3)为98.5%~101.0%,RSD为0.38%~1.8%;稳定性良好,7个成分在24 h内保持稳定,RSD小于0.80%。8批样品中绿原酸、氢氯噻嗪、金丝桃苷、防己诺林碱、粉防己碱、蒙花苷、盐酸异丙嗪的含量测定结果分别为0.056 88~0.237 5、1.447~1.582、0.065 48~0.147 7、0.055 33~0.103 7、0.124 2~0.233 1、0.013 74~0.045 01和0.916 0~1.041 mg·片-1。结论:该方法经方法学验证,可同时测定复方罗布麻片I中7个化学成分的含量,可用于该药品的质量控制。 展开更多
关键词 复方罗布麻片Ⅰ 绿原酸 氢氯噻嗪 金丝桃苷 防己诺林 粉防己 蒙花苷 盐酸异丙嗪 高效液相色谱 质量控制
反相高效液相色谱法测定防己黄芪汤中6种活性成分的含量 预览 被引量:2
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作者 关皎 张颖 +5 位作者 费雪 孙宇慧 王黎明 郝乘仪 冯波 朱鹤云 《吉林医药学院学报》 2018年第5期321-325,共5页
目的 建立反相高效液相色谱法测定防己黄芪汤中粉防己碱、防己诺林碱、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、甘草苷、甘草酸和白术内酯Ⅰ的含量。 方法 采用Diamonsil C 18 (2)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为0.2 mol/L乙酸铵0.1%甲... 目的 建立反相高效液相色谱法测定防己黄芪汤中粉防己碱、防己诺林碱、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、甘草苷、甘草酸和白术内酯Ⅰ的含量。 方法 采用Diamonsil C 18 (2)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为0.2 mol/L乙酸铵0.1%甲酸溶液(A)-乙腈(B);流速为1.0 mL/min;柱温为30 ℃;进样量为20 μL。测定粉防己碱、防己诺林碱、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、甘草苷和甘草酸时采用梯度洗脱(0-5 min,15%-20%B;5- 10 min ,20%-30%B;10-15 min,30%-35%B;15-20 min,35%-45%B, V/V ),平衡时间为10 min,检测波长为254 nm;测定白术内酯Ⅰ时采用等度洗脱(0-8 min,80%-80%B, V/V ),检测波长为220 nm。 结果 粉防己碱、防己诺林碱、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、甘草苷和甘草酸分别在5-250 mg/L( R =0.999 9)、1-50 mg/L( R =0.999 9)、1-50 mg/L( R =0.999 6)、5-250 mg/L( R =0.999 6)、5-250 mg/L( R =0.999 9)浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率(n=9)分别为99.3%、98.7%、97.5%、99.1%和99.2%。白术内酯Ⅰ在0.05-2.5 mg/L( R =0.999 6)浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率(n=9)为97.6%。 结论 方法结果准确,操作简便,具有良好的重现性和稳定性,可用于防己黄芪汤的质量控制。 展开更多
关键词 防己黄芪汤 粉防己 防己诺林 毛蕊异黄酮葡萄糖苷 甘草苷 甘草酸 白术内酯Ⅰ 反相高效液相色谱
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粉防己碱对胡蜂毒素致多器官功能障碍综合征大鼠的保护作用
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作者 杨敬宁 张燕 +3 位作者 王敏 许刚 孙钰文 杨贤义 《中国工业医学杂志》 CAS 2018年第5期330-331,F0003共3页
将30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、胡蜂毒素低剂量组和高剂量组,根据预试验结果拟定的毒素剂量,分别皮下注射等体积生理盐水和胡蜂毒素100、 200 mg/kg,以制备胡蜂毒素致多器官功能障碍综合征(MODS)动物模型。另取30只雄性SD大鼠... 将30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、胡蜂毒素低剂量组和高剂量组,根据预试验结果拟定的毒素剂量,分别皮下注射等体积生理盐水和胡蜂毒素100、 200 mg/kg,以制备胡蜂毒素致多器官功能障碍综合征(MODS)动物模型。另取30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、 MODS组和粉防己碱组。MODS组和粉防己碱组大鼠皮下注射胡蜂毒素200 mg/kg,粉防己碱组同时给予粉防己碱0.2 mg/kg。以ELISA法检测大鼠血清肌钙蛋白T (cTnT)、丙氨酸转氨酶(ALT)、胱抑素c (Cys-c)及神经元烯醇化酶(NSE)水平。组织损伤情况采用HE染色进行分析。结果显示,与正常对照组和胡蜂毒素低剂量组比较,胡蜂毒素高剂量组血清cTnT、ALT、 Cys-c及NSE水平显著升高,符合MODS诊断标准。与MODS组比较,粉防己碱组血清cTnT、 ALT、 Cys-c及NSE水平均明显降低(P〈0.05)。HE染色分析表明, MODS组肝、肾、心和海马组织炎性细胞浸润,组织损伤明显,粉防己碱组组织炎性细胞浸润减少、损伤减轻。提示粉防己碱对胡蜂毒素导致的MODS有干预作用,可用于重度胡蜂蜇伤MODS的预防和治疗。 展开更多
关键词 粉防己 胡蜂毒素 MODS
气相色谱法测定羟基喜树碱-粉防己碱脂质体中氯仿残留量
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作者 双若男 王梦弟 平欲晖 《亚太传统医药》 2018年第7期50-52,共3页
目的:采用气相色谱法检测羟基喜树碱-粉防己碱脂质体内氯仿残留量。方法:采用KB-50型毛细管柱(30m×0.25mm,0.25μm),ECD检测器,以二氯甲烷为内标物,测定羟基喜树碱-粉防己碱脂质体中氯仿的残留量。结果:氯仿在0.59-23.68μg&#... 目的:采用气相色谱法检测羟基喜树碱-粉防己碱脂质体内氯仿残留量。方法:采用KB-50型毛细管柱(30m×0.25mm,0.25μm),ECD检测器,以二氯甲烷为内标物,测定羟基喜树碱-粉防己碱脂质体中氯仿的残留量。结果:氯仿在0.59-23.68μg·mL-1浓度范围内与其峰面积积分线性关系良好,平均加样回收率均≥95.14%,测得三批样品的氯仿残留量均符合规定。结论:经方法学验证,该检测方法准确可靠,适用于羟基喜树碱-粉防己碱复方脂质体中氯仿残留量的测定。 展开更多
关键词 羟基喜树 粉防己 脂质体 氯仿
WGA修饰柔红霉素和粉防己碱脂质体中主药含量的测定
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作者 程岚 肖瑶 +3 位作者 王鑫 宋晓黎 刘爽 李学涛 《辽宁中医杂志》 2018年第4期791-794,共4页
目的:建立WGA(麦胚凝集素)修饰的柔红霉素和粉防己碱脂质体中柔红霉素和粉防己碱的含量测定方法,对制剂进行有效的质量控制。方法:采用薄膜分散法和硫酸铵梯度法制备WGA修饰柔红霉素和粉防己碱脂质体;通过方法学考察,建立高效液相... 目的:建立WGA(麦胚凝集素)修饰的柔红霉素和粉防己碱脂质体中柔红霉素和粉防己碱的含量测定方法,对制剂进行有效的质量控制。方法:采用薄膜分散法和硫酸铵梯度法制备WGA修饰柔红霉素和粉防己碱脂质体;通过方法学考察,建立高效液相色谱法测定WGA修饰柔红霉素和粉防己碱脂质体中柔红霉素和粉防己碱含量的方法。结果:本色谱条件下,WGA修饰的空白脂质体对主药含量的测定无干扰。WGA修饰的柔红霉素和粉防己碱脂质体中柔红霉素和粉防己碱分别在2.75~55μg/m L和17~170μg/m L范围内线性关系良好;回收率均在95%以上,RSD均小于1.0%;脂质体中柔红霉素和粉防己碱的含量为(290.87±0.40)μg/m L和(341.51±3.64)μg/m L。结论:本法准确、可靠、简便、可用于WGA修饰柔红霉素和粉防己碱脂质体中药物含量的质量控制。 展开更多
关键词 柔红霉素 粉防己 脂质体 含量测定 高效液相色谱法
粉防己碱抗支原体分子机制研究 预览
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作者 丁亦男 魏健 王光野 《生物化工》 2018年第5期156-158,共3页
粉防己碱属双苄基异喹啉类化合物,研究资料表明粉防己碱抗支原体分子机制具有抑制细胞因子的致纤维化作用、抗脂质过氧化损伤以及对血管内皮剥脱后再狭窄的分子机制。
关键词 粉防己 抗支原体分子机制 致纤维化 抗脂质过氧化损伤
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