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反相高效液相色谱与离子交换色谱测定牛肉中肌肽含量的对比研究
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作者 戴璐瑶 朱仙娜 +3 位作者 陈玉燕 张一斐 郭姣 陈梅兰 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期805-812,共8页
目的:考察反相高效液相色谱(RP-HPLC)紫外检测与离子交换色谱(IEC)电导检测2种方法对牛肉中肌肽检测的一致程度。方法:RP-HPLC色谱条件:Agilent TC-C18色谱柱(5μm,4.6 mm×250 mm);流动相为乙腈-水(15∶85);柱温35℃;流速1.00 mL&#... 目的:考察反相高效液相色谱(RP-HPLC)紫外检测与离子交换色谱(IEC)电导检测2种方法对牛肉中肌肽检测的一致程度。方法:RP-HPLC色谱条件:Agilent TC-C18色谱柱(5μm,4.6 mm×250 mm);流动相为乙腈-水(15∶85);柱温35℃;流速1.00 mL·min^-1;进样体积25μL;检测波长210 nm。IEC色谱条件:Dionex AminoPac^TM PA-10(2 mm×50 mm)保护柱和Dionex AminoPac^TM PA-10(2 mm×250 mm)分析柱分离,金电极检测,直流安倍电位,检测波形为"Amino Acids(Reference)"。以70%超纯水和30%醋酸钠溶液(100 mmol)为淋洗液;Dionex AminoPacTMPA-10柱流速为0.25 mL·min^-1,进样体积均为25μL。分别对2种方法的检测下限、精密度、加样回收率等进行考察,并对2种方法测得牛肉样品的结果进行显著性检验(F检验和t检验)。结果:RP-HPLC法线性范围为0.20~5.00μg·mL^-1 (R^2=0.999 7),检测下限和定量下限分别为0.032和0.11μg·mL^-1,方法精密度(RSD)为1.2%(n=11),样品回收率为97.7%;IEC法峰形对称,线性范围为0.20~8.00μg·mL^-1 (R2=0.999 0),检测下限和定量下限分别为0.005 0和0.017μg·mL^-1,方法精密度(RSD)为1.2%(n=11),样品回收率为92.2%。对测定结果的F检验(方法精密度)表明两者无显著性差异,但t检验(方法系统误差)表明两者有显著差异。结论:2种方法均能较好地对样品中的肌肽进行定性和定量分析,但两者存在系统误差,原因需进一步探索。 展开更多
关键词 反相高效液相色谱 离子交换色谱 肌肽 牛肉 F检验 T检验
抗EGFR单克隆抗体稳定性的影响因素研究
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作者 裴朝玉 贠琳 +1 位作者 袁萍 郭宇 《化学试剂》 CAS 北大核心 2019年第9期963-966,共4页
探讨了影响单克隆抗体稳定性的物理和化学因素。蛋白质浓度影响抗体稳定性,蛋白质浓度增加到一定值时,聚集体和降解片段含量都会增加,样品中高含量的聚集体会进一步促进抗体聚集。制剂p H影响抗体的稳定性,组氨酸缓冲液更有利于保持抗E... 探讨了影响单克隆抗体稳定性的物理和化学因素。蛋白质浓度影响抗体稳定性,蛋白质浓度增加到一定值时,聚集体和降解片段含量都会增加,样品中高含量的聚集体会进一步促进抗体聚集。制剂p H影响抗体的稳定性,组氨酸缓冲液更有利于保持抗EGFR单克隆抗体制剂稳定性。制剂中聚山梨醇酯20可有效抑制聚集。结果表明:抗EGFR单克隆抗体稳定性的影响因素有蛋白质浓度、样品纯度、环境温度、缓冲液类型、溶液离子强度、溶液p H、表面活性剂。 展开更多
关键词 抗EGFR单克隆抗体 体积排阻色谱 离子交换色谱 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) 表面电荷异质性
人血清转铁蛋白标准物质纯化
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作者 孔金隆 全灿 +4 位作者 王启迪 罗坚 周俊波 孙永跃 李增兰 《过程工程学报》 CSCD 北大核心 2018年第2期387-392,共6页
建立了一种从Cohn血浆分离副产物组分IV中纯化高纯度转铁蛋白(Tf)标准物质的技术,对Cohn组分IV进行复溶、离心和过滤,采用Capto DEAE阴离子交换色谱进行初分离,再通过穿透式Octyl-Sepharose 4 Fast Flow疏水色谱进一步精制;对纯化产... 建立了一种从Cohn血浆分离副产物组分IV中纯化高纯度转铁蛋白(Tf)标准物质的技术,对Cohn组分IV进行复溶、离心和过滤,采用Capto DEAE阴离子交换色谱进行初分离,再通过穿透式Octyl-Sepharose 4 Fast Flow疏水色谱进一步精制;对纯化产品进行了结构、纯度、活性等表征,采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱、高效液相色谱及酶联免疫吸附法对Tf标准物质进行了分析.结果表明,Tf产品纯度大于99%,收率为79%;圆二色光谱分析显示Tf的二级结构未发生改变,铁离子结合能力实验表明Tf可结合2个铁离子,保持活性. 展开更多
关键词 人血清转铁蛋白 标准物质 离子交换色谱 疏水色谱 Cohn组分Ⅳ 纯化
离子色谱法测定水果中的有机酸 预览 被引量:2
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作者 郭柏坤 周垚 《发酵科技通讯》 CAS 2018年第3期170-174,共5页
研究了离子交换色谱法同时测定水果中乳酸、草酸、酒石酸、柠檬酸和苹果酸含量的条件,并对分离条件进行了优化,在流速为1mL/min的0.8-30mmol/L KOH淋洗液梯度洗脱下,5种有机酸的检出限范围均为10-330μg/L。结果表明:实验考察的3种水... 研究了离子交换色谱法同时测定水果中乳酸、草酸、酒石酸、柠檬酸和苹果酸含量的条件,并对分离条件进行了优化,在流速为1mL/min的0.8-30mmol/L KOH淋洗液梯度洗脱下,5种有机酸的检出限范围均为10-330μg/L。结果表明:实验考察的3种水果在贮藏期间有机酸含量先增后减,主要表现为柠檬酸的消耗,并以此判断水果的新鲜度。 展开更多
关键词 离子交换色谱 有机酸 贮藏 水果
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重组蛋白药物电荷异质性的分析技术研究进展
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作者 刘娴 茹莉莉 +1 位作者 杨大军 吴京雷 《药物生物技术》 CAS 2018年第5期461-466,共6页
电荷异质性是重组蛋白类药物的关键质量属性,对重组蛋白类药物的稳定性、溶解性、免疫原性、体内外生物学活性、药物动力学功能发挥具有重要的影响。选择一种灵敏度高、特异性强的电荷异质性检测分析方法,是控制和稳定重组蛋白药物生产... 电荷异质性是重组蛋白类药物的关键质量属性,对重组蛋白类药物的稳定性、溶解性、免疫原性、体内外生物学活性、药物动力学功能发挥具有重要的影响。选择一种灵敏度高、特异性强的电荷异质性检测分析方法,是控制和稳定重组蛋白药物生产质量的有效手段。该文章对电荷异质性的3种主要分析方法,即平板胶等电聚焦电泳、离子交换色谱、毛细管等电聚焦电泳等技术特点及近年的研究进展进行综述介绍。 展开更多
关键词 电荷异质性 重组蛋白 平板胶等电聚焦电泳 离子交换色谱 毛细管等电聚焦电泳
凝胶过滤/离子交换全二维液相色谱系统的构建与评价 预览 被引量:2
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作者 张政 唐涛 +3 位作者 杨三东 孙元社 李彤 张维冰 《色谱》 CSCD 北大核心 2017年第5期526-532,共7页
基于蛋白质的尺寸及带电性质,将凝胶过滤色谱( GFC)与离子交换色谱( IEC)两种分离模式结合,采用双捕 集柱接口构建了 GFC/2XIEC二维液相色谱(2-D LC)分离系统,同时考虑离子交换色谱分离蛋白质对等电点范围 的限制,进一步结合中心... 基于蛋白质的尺寸及带电性质,将凝胶过滤色谱( GFC)与离子交换色谱( IEC)两种分离模式结合,采用双捕 集柱接口构建了 GFC/2XIEC二维液相色谱(2-D LC)分离系统,同时考虑离子交换色谱分离蛋白质对等电点范围 的限制,进一步结合中心切割平行柱的方法实现对蛋白质的全二维分离.为与后续蛋白质在线酶解、多肽分离及 质谱鉴定匹配,系统中采用常规柱以保证蛋白质质谱鉴定对样品量的要求,3种常规分离柱分别选用凝胶过滤色谱 柱 TSK-GEL G3000SWa (300 mm×7. 8 mm,5 μm)、强阴离子交换色谱柱 Hypersil SAX(100 mm×4. 6 mm,10μm)和强阳离子交换色谱柱Hypersil SCX(100 mm×4. 6 mm,10 μm).最终以酵母细胞蛋白质提取液为样品,对 构建的二维系统加以评价,在总蛋白质浓度13. 5 mg/mL、上样体积100 μL 的条件下,将第-维分离等时间切割17 次,并将切割馏分全部导入第二维继续分离,二维系统在148 m in内获得的总峰容量达到884.说明所构建的系统 可以用于蛋白质的在线全二维分离. 展开更多
关键词 全二维液相色谱 凝胶过滤色谱 离子交换色谱 强阴离子交换 强阳离子交换 蛋白质 酵母
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胞磷胆碱钠原料药的一致性评价研究 被引量:1
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作者 范文静 杜卫群 +1 位作者 邱蔚然 周长林 《药物生物技术》 CAS 2017年第3期224-229,共6页
对不同厂家及批次胞磷胆碱钠原料药质量进行研究,并与日本胞磷胆碱钠样品对照,进行一致性评价。采用红外光谱法和紫外光谱法进行了结构鉴别,探讨紫外光谱法在胞磷胆碱钠鉴别过程中的重要性;分别采用2015年版《中国药典》与《日本药... 对不同厂家及批次胞磷胆碱钠原料药质量进行研究,并与日本胞磷胆碱钠样品对照,进行一致性评价。采用红外光谱法和紫外光谱法进行了结构鉴别,探讨紫外光谱法在胞磷胆碱钠鉴别过程中的重要性;分别采用2015年版《中国药典》与《日本药局方》(第17版)中记载的方法测定有关物质和含量,分析两种测定方法的优缺点;分别以国内胞磷胆碱钠标准品与日本品为对照,测定胞磷胆碱钠含量,比较两者质量差异;采用显微摄影法检测胞磷胆碱钠原料药晶型。结果表明南通秋之友生物科技有限公司生产的胞磷胆碱钠原料药与日本对照品含量相近,有关物质总量及胞苷酸含量相当,晶型与结构一致;紫外光谱法能明显区分胞磷胆碱钠与其脱氨后产物(尿苷酸及其衍生物);《中国药典》检测出有关物质的数量多于《日本药典》,且检测时间更短;以国内标准品作对照测得胞磷胆碱钠含量偏高,在105%左右,而以日本品为对照测得含量在规定范围内98%-102%。由此可知南通秋之友生物科技有限公司生产的胞磷胆碱钠原料药质量与日本对照品质量一致;紫外光谱法可作为红外鉴别方法的补充,提升定性分析的准确度与可靠性;《中国药典》对于胞磷胆碱钠原料药中有关物质的检出更灵敏;国内标准品含量与日本品相比偏低,应加以控制。 展开更多
关键词 胞磷胆碱钠 质量 一致性评价 反相色谱 离子交换色谱 紫外 有关物质
一种单克隆抗体的电荷异质体分析 被引量:1
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作者 陈捷敏 郑欣桐 +2 位作者 周芳 马红霞 林军 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2017年第8期828-832,共5页
目的 对抗程序性死亡受体-1(programmed death-1,PD-1)单克隆抗体的电荷异质体进行结构鉴别及生物学功能分析。方法 通过检测抗PD-1单克隆抗体经专一性蛋白酶(唾液酸酶及羧肽酶)酶切前后的变化,初步确认电荷异质体的种类。采用阳离... 目的 对抗程序性死亡受体-1(programmed death-1,PD-1)单克隆抗体的电荷异质体进行结构鉴别及生物学功能分析。方法 通过检测抗PD-1单克隆抗体经专一性蛋白酶(唾液酸酶及羧肽酶)酶切前后的变化,初步确认电荷异质体的种类。采用阳离子交换色谱对电荷异质体进行分离和收集,经联用液相色谱-质谱(LC-MS)法分析电荷异质体各组分的组成;通过抑制抗原与配体相互作用影响NFAT荧光素酶报告基因表达的方法确定电荷异质体的生物学功能。结果 碱性异质体含量较少,主要变化为重链N-末端谷氨酰胺未环化;酸性异质体主要变化为重链N383脱氨化和糖链末端唾液酸化。各异质体的生物学活性为89%~102%。结论 抗PD-1单克隆抗体电荷异质体大部分修饰位点均远离互补决定区(complementary determining region,CDR),且在体外生物学活性方面差异较小。 展开更多
关键词 单克隆抗体 电荷异质体 离子交换色谱 联用液相色谱-质谱法 生物学活性
治疗性单克隆抗体电荷异质性分析方法比较
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作者 王文波 武刚 +7 位作者 于传飞 张峰 刘春雨 李萌 陈伟 郭莎 高凯 王兰 《药物分析杂志》 CSCD 北大核心 2017年第8期1383-1388,共6页
目的:对4种常用的单抗电荷异质性分析方法进行比对研究。方法:以重组抗TNFα全人源单克隆抗体为例,分别利用离子交换色谱(IEC)、毛细管区带电泳(CZE)、毛细管等电聚焦电泳(CIEF)和成像毛细管等电聚焦电泳(iCIEF)4种方法对该... 目的:对4种常用的单抗电荷异质性分析方法进行比对研究。方法:以重组抗TNFα全人源单克隆抗体为例,分别利用离子交换色谱(IEC)、毛细管区带电泳(CZE)、毛细管等电聚焦电泳(CIEF)和成像毛细管等电聚焦电泳(iCIEF)4种方法对该抗体的电荷异质性进行分析;利用CIEF和iCIEF 2种方法对抗体主峰等电点(pI)进行分析。结果:4种方法能够对重组抗TNFα全人源单克隆抗体的电荷异构体进行有效的分离和定量,其中IEC和CZE 2种方法检测的电荷异构体峰面积百分比(酸性峰、主峰和碱性峰)较为一致,4种方法检测的碱性峰比例较一致,CIEF和iCIEF检测的主峰与酸性峰比例较其他方法偏高。CIEF和iCIEF检测抗体主峰等电点具有一定差异,其中,聚焦时间长短和pI Marker的选择是影响单抗pI值检测的主要因素。结论:通过抗体电荷异质性分析方法的比较研究可见,在单抗电荷异构体比例和主峰pI测定上4种方法具有一定的差异。对单抗的质控应结合产品特性和表征研究,合理选择电荷异质性分析方法。 展开更多
关键词 单克隆抗体 电荷异质性 等电点 质量控制 毛细管电泳 离子交换色谱
硅胶基质聚天冬氨酸固定相的合成及对多肽的分离 预览
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作者 林纯 陈俊 +3 位作者 范军 张晶 喻丽 章伟光 《华南师范大学学报:自然科学版》 北大核心 2017年第2期43-48,共6页
分别将不同分子量的聚琥珀酰亚胺(PSI)化学键合到氨丙基硅胶表面得到4种键合聚天冬氨酸(YCSiP)的固定相材料(即YCSiP-Ⅰ、-Ⅱ、-Ⅲ和-Ⅳ),采用红外光谱、热重分析、扫描电镜和Zeta电位测定等方法进行表征,研究硅胶孔径、PSI的相... 分别将不同分子量的聚琥珀酰亚胺(PSI)化学键合到氨丙基硅胶表面得到4种键合聚天冬氨酸(YCSiP)的固定相材料(即YCSiP-Ⅰ、-Ⅱ、-Ⅲ和-Ⅳ),采用红外光谱、热重分析、扫描电镜和Zeta电位测定等方法进行表征,研究硅胶孔径、PSI的相对分子质量、流动相pH和离子强度等因素对分离多肽的影响.结果表明,在红外光谱中3 072、1 720和1 030 cm-1等处吸收峰对应于v(N—H)、v(C=O)和v(Si—O—Si)的伸缩振动峰,说明聚琥珀酰亚胺结合到硅胶上;YCSiP分离多肽主要受底物与固定相之间的静电作用影响;由小孔径的硅胶和低相对分子质量的聚琥珀酰亚胺制备得到的固定相YCSi P对多肽表现更好的分离性能;随着流动相的离子强度增大,多肽在固定相上的保留均显著减弱,在离子强度为50 mmol/L的流动相中,6种多肽在固定相上的分离效果最好.该研究丰富了硅胶基质聚天冬氨酸固定相材料在多肽分离中的应用. 展开更多
关键词 聚天冬氨酸固定相 多肽分离 离子交换色谱 制备 离子强度
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反离子对部分电荷中和的聚乙烯亚胺接枝介质的蛋白质色谱行为的影响 预览
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作者 翟秋红 余林玲 孙彦 《化工学报》 CSCD 北大核心 2017年第11期4178-4185,共8页
前期研究表明部分电荷中和的聚乙烯亚胺接枝琼脂糖介质FF-PEI-R440具有较高静态吸附容量和快速传质速率。本文选取硫氰酸根离子、氯离子、磷酸氢根离子以及硫酸根离子这4种反离子,在离子强度为0.03、0.06mol·L^-1下,研究其对FF-PEI... 前期研究表明部分电荷中和的聚乙烯亚胺接枝琼脂糖介质FF-PEI-R440具有较高静态吸附容量和快速传质速率。本文选取硫氰酸根离子、氯离子、磷酸氢根离子以及硫酸根离子这4种反离子,在离子强度为0.03、0.06mol·L^-1下,研究其对FF-PEI-R440吸附与洗脱行为的影响。结果表明:在两种离子强度下,饱和吸附容量的增加顺序均为SCN-〈SO4^2-〈HPO4^2-〈Cl^-;在低离子强度下,除SCN^-外,反离子种类对传质速率和动态结合容量没有显著影响;在高离子强度下,传质速率的增加顺序为SCN-SO4^2-≈Cl^-〈HPO4^2-,而动态结合容量的增加顺序与饱和吸附容量序列一致;两种离子强度下Cl^-均保持最高的动态结合容量;反离子种类对蛋白质洗脱行为没有显著影响。上述结果说明反离子主要影响FF-PEI-R440的吸附性能,而不影响洗脱,且流动相中选择Cl^-为反离子最利于FF-PEI-R440的实际柱色谱操作。 展开更多
关键词 离子交换色谱 聚合物接枝 离子 吸附平衡 动力学 动态结合容量 线性梯度洗脱
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氨基己酸为配基的新型弱阳离子交换/疏水双功能色谱固定相对蛋白质的分离纯化 预览
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作者 王建山 夏红军 +2 位作者 万广平 刘家玮 白泉 《色谱》 CSCD 北大核心 2016年第12期1228-1233,共6页
以硅胶为基质、氨基己酸为配基制备了一种新型弱阳离子交换/疏水(WCX/HIC)双功能混合模式色谱固定相。该固定相配基具有一定的疏水性且含有羧基,在高盐浓度下表现为HIC的性质,可作为HIC固定相使用;在低盐浓度条件下表现为离子交换的性... 以硅胶为基质、氨基己酸为配基制备了一种新型弱阳离子交换/疏水(WCX/HIC)双功能混合模式色谱固定相。该固定相配基具有一定的疏水性且含有羧基,在高盐浓度下表现为HIC的性质,可作为HIC固定相使用;在低盐浓度条件下表现为离子交换的性质,可作为WCX固定相使用。分别考察了该介质在WCX和HIC两种模式下对标准蛋白质的分离性能,并与商品柱进行比较。结果表明,所合成的WCX/HIC双功能固定相在WCX和HIC两种模式下对蛋白质均有较高的分离度和选择性,且分离能力与商品柱相当,两种模式下标准蛋白质的质量和活性回收率均大于93%,表明该柱具有"一柱二用"的功能,适于生物大分子的分离纯化。基于此双功能色谱柱构建的在线单柱二维液相色谱(2DLC-1C)可在60 min内实现8种蛋白质的快速分离。在70 min内完成了对蛋清中溶菌酶的二维纯化,纯度可达到98.3%。该技术中一根色谱柱可当作两根色谱柱使用,对蛋白质组学研究和重组蛋白药物的生产具有重要的应用价值。 展开更多
关键词 固定相 混合模式色谱 离子交换色谱 疏水色谱 二维液相色谱
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翻译后修饰蛋白质组学分离方法的研究进展 预览 被引量:1
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作者 许静静 刘幸 周虎 《色谱》 CSCD 北大核心 2016年第12期1199-1205,共7页
蛋白质翻译后修饰(PTMs)是调节细胞内生理活动的重要途径。该文总结了近年来PTMs蛋白质组学相关的分离方法,包括反相(RP)色谱法、离子交换(IEX)色谱法、亲水相互作用色谱(HILIC)法、多孔石墨化碳(PGC)色谱法、毛细管电泳(CE... 蛋白质翻译后修饰(PTMs)是调节细胞内生理活动的重要途径。该文总结了近年来PTMs蛋白质组学相关的分离方法,包括反相(RP)色谱法、离子交换(IEX)色谱法、亲水相互作用色谱(HILIC)法、多孔石墨化碳(PGC)色谱法、毛细管电泳(CE)法及分子筛色谱(SEC)法等。这些新方法为磷酸化、乙酰化、糖基化等PTM肽段或蛋白质的鉴定提供了更高的分离度和灵敏度。此外,该文也介绍了蛋白质领域其他重要分离方法的研究进展,这些方法可能被进一步应用于PTMs蛋白质组学的研究中。 展开更多
关键词 翻译后修饰 蛋白质组学 反相色谱 离子交换色谱 亲水相互作用色谱 多孔石墨化碳色谱 毛细管电泳
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Isolation and Purification of Enzymatic Hydrolysates of Yam (Dioscorea opposita Thunb. ) Proteins 预览
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作者 MengchenXU Ke DING +1 位作者 Ying LU Tao HAN 《农业生物技术:英文版》 CAS 2016年第1期19-21,24共4页
Using yam( Dioscorea opposita Thunb.) as the experimental material,enzymatic hydrolysates of yam proteins were prepared with alkaline protease,which were then isolated and purified by cellulose DE-52 anion exchange ch... Using yam( Dioscorea opposita Thunb.) as the experimental material,enzymatic hydrolysates of yam proteins were prepared with alkaline protease,which were then isolated and purified by cellulose DE-52 anion exchange chromatography Sephadex G-50 gel chromatography. According to the results,four absorption peaks were obtained by cellulose DE-52 anion exchange chromatography,and fractions at each absorption peak were collected. Specifically,the reducing ability of four peaks demonstrated a descending order of peak 2( P2) > peak 1( P1) > peak 3( P3) > peak 4( P4). By Sephadex G-50 gel chromatography,P1 and P2 were isolated and purified with distilled water and Tris-HCl buffer,and two absorption peaks were obtained,respectively. 展开更多
关键词 层析纯化 酶解产物 蛋白质 山药 分离 SEPHADEX 离子交换色谱 离子交换层析
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HPLC-ELSD测定注射用益气复脉(冻干)中钠离子含量 被引量:3
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作者 习斌斌 徐敏 +4 位作者 李德坤 周大铮 杨悦武 寇俊萍 鞠爱春 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1503-1507,共5页
目的:建立一种用于测定注射用益气复脉(冻干)中钠离子含量的HPLC-ELSD方法。方法:采用Sepherisorb SCX(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以0.05 mol·L^-1醋酸铵(醋酸调节p H 4.8)-乙腈(50∶50)为流动相,流速1.0 m L·... 目的:建立一种用于测定注射用益气复脉(冻干)中钠离子含量的HPLC-ELSD方法。方法:采用Sepherisorb SCX(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以0.05 mol·L^-1醋酸铵(醋酸调节p H 4.8)-乙腈(50∶50)为流动相,流速1.0 m L·min^-1,柱温30℃,蒸发光散射器漂移管温度80℃,气体压力241 k Pa,增益15。结果:钠离子进样量在14.799-123.325μg(r=0.999 5)范围内线性关系良好,平均回收率(n=9)为96.9%;样品中钠离子含量为19.05-20.67 mg·g^-1。结论:本法可为注射用益气复脉(冻干)生产中钠离子的控制提供实验方法。 展开更多
关键词 中药注射剂 注射用益气复脉(冻干) 离子 含量测定 生产工艺控制 离子交换色谱 高效液相色谱 蒸发光散射检测
离子交换配基密度对蛋白质吸附行为的影响 预览
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作者 杨小雁 李雯露 +3 位作者 孔英俊 王明林 张贵锋 苏志国 《生物学杂志》 CAS CSCD 2016年第2期39-43,68共6页
利用双偏振极化干涉测量仪(DPI)研究了离子交换配基密度对蛋白质吸附行为的影响。用N,N-二乙基-3-氨基丙基三甲氧基硅烷(DAPTMS)对DPI芯片进行修饰,利用X射线光电子能谱表征了芯片上配基密度的差异。以溶菌酶、细胞色素C、糜蛋白酶... 利用双偏振极化干涉测量仪(DPI)研究了离子交换配基密度对蛋白质吸附行为的影响。用N,N-二乙基-3-氨基丙基三甲氧基硅烷(DAPTMS)对DPI芯片进行修饰,利用X射线光电子能谱表征了芯片上配基密度的差异。以溶菌酶、细胞色素C、糜蛋白酶、牛血清白蛋白和免疫球蛋白为模型蛋白,利用DPI研究了5种蛋白质在不同配基密度界面上吸附量、吸附密度和空间形态。结果表明,随着配基密度的增加,蛋白在界面上的吸附量、吸附密度随之增加,起始吸附速率随之增大;蛋白的空间形态与配基密度密切相关,特别是免疫球蛋白,蛋白层厚度远小于其分子直径,空间形态发生变化。证明配基密度是影响界面上蛋白质吸附量、吸附密度和空间形态等吸附行为的关键因素。 展开更多
关键词 离子交换色谱 配基密度 吸附行为 双偏振极化干涉测量仪
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功能性乳清蛋白的分离纯化及产业化研究进展 预览
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作者 宋晓青 贾云虹 凌森 《中国奶牛》 2016年第5期42-45,共4页
牛乳中蛋白质种类丰富,除主体酪蛋白外,还包括一些功能性的乳清蛋白,如α-乳清蛋白、乳铁蛋白和免疫球蛋白等,各蛋白质具备的功能特性不同。本文对乳清蛋白分离纯化技术的研究进展作一综述,以期为分离、纯化乳蛋白的产业化提供技术参考。
关键词 α-乳清蛋白 免疫球蛋白 乳铁蛋白 离子交换色谱 径向流层析
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大米镉结合蛋白的分离纯化及纯度鉴定 预览 被引量:5
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作者 陈露 陈季旺 +2 位作者 蔡俊 丁文平 吴永宁 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第13期60-64,共5页
采用石墨炉原子吸收光谱法(graphite furnace atomic absorption spectrometry,GFAAS)测定不同品种、不同加工精度大米及大米4种蛋白质中的镉含量。选用镉含量较高的大米为实验原料,采用Osborne分级法提取大米中的4种蛋白质(清蛋白... 采用石墨炉原子吸收光谱法(graphite furnace atomic absorption spectrometry,GFAAS)测定不同品种、不同加工精度大米及大米4种蛋白质中的镉含量。选用镉含量较高的大米为实验原料,采用Osborne分级法提取大米中的4种蛋白质(清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白),以及超滤、离子交换色谱从镉含量较高的大米蛋白中分离纯化出均一纯度的大米镉结合蛋白(rice Cd-binding protein,RCBP),十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)鉴定RCBP的纯度及测定分子质量。结果表明:籼米中镉含量高于糯米及粳米;随着加工精度的增加,同种大米中的镉含量依次降低。4种大米蛋白中的镉含量分别为0.66、0.31、0.63、0.23μg/g,清蛋白中镉含量最高。超滤分离大米清蛋白(rice albumin,RA)得到大米超滤清蛋白(rice ultrafiltration albumin,RUA),离子交换色谱纯化RUA得到目标镉结合蛋白(组分c),SDS-PAGE鉴定组分c为单一条带,分子质量为14 k D。 展开更多
关键词 大米镉结合蛋白 分离纯化 离子交换色谱 分子质量
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离子交换色谱法测定10种热带水果中的葡萄糖、蔗糖和果糖 预览 被引量:4
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作者 于璐 周光明 +1 位作者 沈洁 余艳丽 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2016年第22期94-98,107共6页
建立了高效阴离子交换-脉冲安培检测(High performance anion exchange—pulsed amperometric detection,HPAE—PAD)测定火龙果、莲雾、牛油果等10种热带水果中葡萄糖、蔗糖和果糖的检测方法。热带水果申的多糖经超声萃取后,用METRO... 建立了高效阴离子交换-脉冲安培检测(High performance anion exchange—pulsed amperometric detection,HPAE—PAD)测定火龙果、莲雾、牛油果等10种热带水果中葡萄糖、蔗糖和果糖的检测方法。热带水果申的多糖经超声萃取后,用METROSEP CARB1(150mm×4.0mm)色谱柱进行分离,以30.0mmol/LNaOH为流动相,等度洗脱,用安培检测器检测,18rain可完成对样品多糖的分离和定量分析。经测定,葡萄糖和蔗糖的检出限分别为0.1209μg/mL和0.2827μg/mL,线性范围为1.0~70.0μg/mL;果糖的检出限为0.5501μg/mL,线性范围为5.0-80.0μg/mL。样品溶液连续5次进样,3种糖的相对标准偏差为0.67%~7.04%,平均回收率为78.70%-117.75%。该方法前处理简单、选择性好、灵敏度高.可用于热带水果中可溶性糖的测定。 展开更多
关键词 离子交换色谱 脉冲安培检测 热带水果 葡萄糖 蔗糖 果糖
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色谱研究的某些新动态 预览
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作者 刘虎威 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期1-3,共3页
作为分析化学重要的分支学科,色谱研究一直是一个很活跃的领域。本文依据2014年12月上旬Analytical Chemistry新录用和在线发表的有关论文,讨论色谱研究领域几个新的发展动态 1色谱相关的基础研究 采用单分子光谱来研究色谱机理是... 作为分析化学重要的分支学科,色谱研究一直是一个很活跃的领域。本文依据2014年12月上旬Analytical Chemistry新录用和在线发表的有关论文,讨论色谱研究领域几个新的发展动态 1色谱相关的基础研究 采用单分子光谱来研究色谱机理是目前色谱理论研究的前沿之一,Kisley 和Landes 两位学者最近就此写了一篇很好的综述[1]。他们从单分子光谱的原理和仪器以及对所分析样品的要求出发,讨论了共聚焦显微镜、全内反射荧光成像分析等单分子光谱及其在色谱机理研究中的应用,所涉及的色谱方法包括反相色谱、正相色谱、离子交换色谱。分离科学与单分子光谱结合可以从分子水平上深入了解色谱过程,而这方面还有很多问题需要研究。目前,参加这方面研究工作的科学家并不多,但随着单分子光谱的发展,色谱理论的研究会有新的突破。 展开更多
关键词 色谱理论 单分子光谱 共聚焦显微镜 离子交换色谱 分支学科 分析化学 基础研究 分析样品
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