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野生型小鼠慢性根尖周炎模型PLCγ2的表达 预览 被引量:2
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作者 杨淳贺 仉红 +2 位作者 董明 王丽娜 牛卫东 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第7期1057-1062,共6页
背景:研究表明,抑制BTK-PLCγ2-Ca^2+信号通路,破骨细胞的形成和功能受到抑制,说明PLCγ2参与了破骨细胞的形成和分化。目的:通过建立野生型小鼠慢性根尖周炎模型,观察PLCγ2在小鼠实验性根尖周炎组织中的表达。方法:选用20只C57BL/6L... 背景:研究表明,抑制BTK-PLCγ2-Ca^2+信号通路,破骨细胞的形成和功能受到抑制,说明PLCγ2参与了破骨细胞的形成和分化。目的:通过建立野生型小鼠慢性根尖周炎模型,观察PLCγ2在小鼠实验性根尖周炎组织中的表达。方法:选用20只C57BL/6L野生型雄性小鼠,随机选取16只为实验组行双侧下颌第1磨牙开髓术,并将开髓后的髓腔暴露于口腔环境,诱导形成根尖周炎病损。分别于开髓后1,2,3和4周各随机处死4只小鼠,分离下颌骨。剩余4只不开髓作为空白对照,0周时处死后分离下颌骨。制作冰冻切片后用苏木精-伊红染色方法观察小鼠根尖组织炎症情况,免疫组织化学染色检测PLCγ2的表达与分布情况,酶组织化学染色检测根尖组织炎症区域破骨细胞的表达。结果与结论:①苏木精-伊红染色结果:对照组小鼠下颌第1磨牙牙周组织几乎无炎性细胞浸润;实验组1-4周,下颌第1磨牙牙周组织炎性细胞浸润范围越来越大,牙槽骨破坏也逐渐增多,说明成功建立了小鼠根尖周炎模型;②免疫组织化学染色结果:发现PLCγ2在小鼠根尖周炎的0-4周都有表达;对照组根尖周组织中仅有少量PLCγ2的表达;实验组1-4周PLCγ2阳性表达随炎症细胞浸润范围的逐渐扩大而增长(P<0.05);③TRAP染色结果:对照组根尖牙周组织中几乎不能观察到破骨细胞;实验组1周,可观察到少量的多核破骨细胞;实验组2周,破骨细胞的数量持续增多;实验组3周达到峰值;实验组4周破骨细胞数量逐渐减少;与对照组相比差异均有显著性意义(P<0.05);④相关性分析:TRAP阳性细胞计数值和PLCγ2阳性细胞计数之间有显著相关性(r=0.627,P<0.001);⑤结果说明,PLCγ2在小鼠根尖周组织中有表达,提示其可能与根尖周炎症反应和骨吸收作用相关。 展开更多
关键词 PLCγ2 尖周炎 小鼠慢性根尖周炎模型 破骨细胞 组织构建 磷脂酶Cγ 根尖周炎 组织工程
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粪肠球菌脂磷壁酸作用的炎症微环境下磷脂酶 Cγ表达研究 预览
2
作者 史东梅 徐慧君 +5 位作者 左美娜 仉红 张咪 吴赛璇 董明 牛卫东 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2019年第11期1084-1088,共5页
目的:研究在粪肠球菌脂磷壁酸(lipoteichoic acid,LTA)作用的炎症微环境下,成骨和破骨细胞中磷脂酶Cγ(phospholipase c-gamma,PLCγ)和活化T细胞核因子1(nuclear factor-activated T cell 1,NFATC1)mRNA的表达。方法:将小鼠RAW264.7及M... 目的:研究在粪肠球菌脂磷壁酸(lipoteichoic acid,LTA)作用的炎症微环境下,成骨和破骨细胞中磷脂酶Cγ(phospholipase c-gamma,PLCγ)和活化T细胞核因子1(nuclear factor-activated T cell 1,NFATC1)mRNA的表达。方法:将小鼠RAW264.7及MC3T3-E1分别诱导为破骨细胞和成骨细胞。免疫荧光观察LTA作用破骨细胞及成骨细胞后PLCγ和NFATC1的定位。实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative Real-time PCR)检测LTA作用破骨细胞和成骨细胞后PLCγ和NFATC1 mRNA的表达。细胞增殖及毒性检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测LTA作用破骨细胞和成骨细胞后的增殖活性。结果:破骨和成骨细胞诱导成功。免疫荧光检测可见PLCγ定位在胞质,NFATC1定位在胞核;Real-time PCR结果发现LTA刺激后成骨细胞中PLCγ和NFATC1 mRNA表达量明显减少(P<0.05);LTA刺激后破骨细胞中PLCγ和NFATC1 mRNA表达量明显增高(P<0.05);10 mg/L LTA组可抑制成骨细胞增殖,促进破骨细胞增殖(P<0.05)。结论:PLCγ和NFATC1可能在难治性根尖周炎的炎症反应和骨破坏中发挥一定的作用。 展开更多
关键词 破骨细胞 成骨细胞 脂磷壁酸 粪肠球菌 磷脂酶Cγ
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应激抑郁发生中糖皮质激素对BDNF信号通路的影响 被引量:4
3
作者 马学萍 陈慧彬 安书成 《生命科学》 CSCD 2014年第8期835-839,共5页
脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)是一个关键性的神经营养因子,它既影响突触的形成和重构,又可以通过突触前和突触后机制改变突触传递的效能,从而对神经结构和功能可塑性发挥调节作用。BDNF主要通过结合T... 脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)是一个关键性的神经营养因子,它既影响突触的形成和重构,又可以通过突触前和突触后机制改变突触传递的效能,从而对神经结构和功能可塑性发挥调节作用。BDNF主要通过结合TrkB受体激活细胞内信号系统来发挥它积极的生物学效应。研究表明,中枢神经系统BDNF表达或功能的变化与抑郁症的发生相关,而应激引起糖皮质激素(glucocorticoid,GC)的增加也是导致抑郁发生的重要原因之一。值得注意的是,GCs的增加会影响BDNF,一方面GCs降低BDNF的表达,另一方面GCs受体GR与BNDF受体TrkB相互作用。过多的GCs干扰了BDNF信号,使BDNF功能受到影响,导致抑郁患者脑内,尤其是海马结构的损害。就抑郁发生中糖皮质激素对BDNF功能影响的研究进展作一介绍。 展开更多
关键词 糖皮质激素 脑源性神经营养因子 糖皮质激素受体 酪氨酸激B受体 磷脂酶Cγ 有丝分裂原活化蛋白激 细胞外信号调节蛋白激
磷脂酶Cγ的分子生物学研究进展 被引量:1
4
作者 陈启 白丽 《国际免疫学杂志》 CAS 2012年第2期 103-106,共4页
磷脂酶Cγ(PLCγ)是磷脂酶C(PLC)的一种,而磷脂酶C又是磷脂酰肌醇信号通路的关键酶,在机体内分布极为广泛。许多细胞外因子,如细胞表面抗原、免疫球蛋白、细胞因子、生长因子等都可以借助PLC的生化途径激活磷脂酰肌醇特异性途径... 磷脂酶Cγ(PLCγ)是磷脂酶C(PLC)的一种,而磷脂酶C又是磷脂酰肌醇信号通路的关键酶,在机体内分布极为广泛。许多细胞外因子,如细胞表面抗原、免疫球蛋白、细胞因子、生长因子等都可以借助PLC的生化途径激活磷脂酰肌醇特异性途径作用于细胞,调控细胞代谢。PLCγ在B淋巴细胞的整个发育过程以及在其他生命活动中都起着重要的作用。 展开更多
关键词 磷脂酶Cγ 信号转导 结构域
VEGF165对血管内皮细胞内Mg^2+浓度调节机制的研究 预览 被引量:3
5
作者 洪炳哲 王丽萍 +4 位作者 李胜范 朴海南 高立建 李婉秋 曹平安 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期86-90,共5页
目的:探讨血管内皮生长因子165(VEGF165)对人脐带静脉内皮细胞(HLNECs)内游离镁离子浓度([Mg^2+]i)的调节机制.方法:采用荧光指示剂mag-fura-2及运用PTi阳离子测定系统动态检测HUVECs的[Mg^2+].结果:经酪氨酸激酶阻断剂(try... 目的:探讨血管内皮生长因子165(VEGF165)对人脐带静脉内皮细胞(HLNECs)内游离镁离子浓度([Mg^2+]i)的调节机制.方法:采用荧光指示剂mag-fura-2及运用PTi阳离子测定系统动态检测HUVECs的[Mg^2+].结果:经酪氨酸激酶阻断剂(tryrphostin A23和genistein),磷脂酰3激酶阻断剂(wortmannin和LY294002),磷脂酶Cγ阻断剂(U73122)预处理,均显著阻断VEGF165诱导的[Mg^2+]i增加.但经磷脂酶C阻断剂无活性的类似物(U73343)和增殖激活蛋白激酶阻断剂(SB202190和PD9S059)预处理,不能阻断VEGF165诱导的[Mg^2+]i增加:结论:VEGF165通过酪氨酸激酶/磷脂酰3激酶/磷脂酶口信号转导途径使细胞内的Mg^2+库释和Mg^2+,从而增加HUVECs的[Mg^2+]i. 展开更多
关键词 血管内皮生长因子 酪氨酸激 磷脂酰3激 磷脂酶Cγ
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bFGF激活tyrosine kinase/PI3K/PLCγ增加血管内皮细胞[Mg^2+]i的研究 预览 被引量:3
6
作者 洪炳哲 王丽萍 +5 位作者 高立建 谢同杰 朴海南 李婉秋 刘学田 李胜范 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期 50-53,共4页
目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)对人脐带静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)内游离镁离子浓度([Mg^2+]i)的调节机制研究。方法 我们采用荧光指示剂mag—fur... 目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)对人脐带静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)内游离镁离子浓度([Mg^2+]i)的调节机制研究。方法 我们采用荧光指示剂mag—fura-2,运用阴阳离子测定系统动态测HUVECs的[Mg^2+]i。结果 经酪氨酸激酶阻断剂(tyrphostin A23和genistein)、3-磷脂酰肌醇激酶阻断剂(wortmannin和LY294002)、磷脂酶Cγ阻断剂(U73122)预处理,能阻断bF-GF诱导的[Mg^2+].增加。但经磷脂酶Cγ阻断剂无活性的类似物(U73343)和丝裂原活化蛋白激酶阻断剂(SB202190和PD98059)预处理,不能阻断bFGF诱导的[Mg^2+]i增加。结论 bFGF通过酪氨酸激酶/3-磷脂酰肌醇激缈磷脂酶Cγ信号传递途径使细胞内的Mg^2+库释放Mg^2+,从而增加HUVECs的[Mg^2+]i。 展开更多
关键词 碱性成纤维细胞生长因子 酪氨酸激 3-磷脂酰肌醇激 磷脂酶Cγ
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磷脂酶Cγ-2对B细胞的作用及临床应用 预览
7
作者 张亚玲 牛卓娅 +3 位作者 王世伟 贾乾 姚智燕 刘伟 《转化医学电子杂志》 2018年第4期54-57,共4页
受体编辑是B细胞免疫耐受发展的主要机制。大量研究表明,受体编辑异常与恶性肿瘤、自身免疫性疾病和免疫缺陷病的发病机制有关,其中磷脂酶Cγ-2(PLCγ2)是前BCR和BCR受体转导途径的重要分子,对B细胞及受体编辑起调节作用。因此,明确磷脂... 受体编辑是B细胞免疫耐受发展的主要机制。大量研究表明,受体编辑异常与恶性肿瘤、自身免疫性疾病和免疫缺陷病的发病机制有关,其中磷脂酶Cγ-2(PLCγ2)是前BCR和BCR受体转导途径的重要分子,对B细胞及受体编辑起调节作用。因此,明确磷脂酶Cγ-2对受体编辑的作用可为相关疾病的早期临床诊断和治疗提供理论依据。 展开更多
关键词 磷脂酶Cγ-2 受体编辑 自身免疫病 肿瘤
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黄连素通过抑制PLCγ1活性阻止肝癌细胞的侵袭 被引量:6
8
作者 王娟 谢波 +5 位作者 刘英 陈萍 汪选斌 李洪亮 刘明 曹风军 《湖北医药学院学报》 CAS 2015年第1期23-25,30,F0002共5页
目的:研究黄连素(Berberine,BBR)对人肝癌细胞侵袭的阻止作用,并探讨其机制是否与抑制PLCγ1有关。方法:人肝癌SMMC-7721消化接种于用Matrigel胶包被的Transwell小室,在不同浓度的黄连素及JX401(p38抑制剂)、U0126(Erk抑制剂)、... 目的:研究黄连素(Berberine,BBR)对人肝癌细胞侵袭的阻止作用,并探讨其机制是否与抑制PLCγ1有关。方法:人肝癌SMMC-7721消化接种于用Matrigel胶包被的Transwell小室,在不同浓度的黄连素及JX401(p38抑制剂)、U0126(Erk抑制剂)、SU5416(VEGF抑制剂)作用24 h后,结晶紫染色并计数Transwell下室的细胞数;用Western-blot法检测不同浓度黄连素作用下p-PLCγ1的表达。结果:BBR对肝癌细胞SMMC-7721的侵袭有明显阻止作用,与SU5416(VEGF抑制剂)作用类似。Westernblot结果显示黄连素抑制了SMMC-7721的p-PLCγ1表达。结论:黄连素具有阻止肝癌细胞侵袭的作用,其机制可能与抑制肿瘤侵袭相关信号VEGF/PLCγ1的活性有关。 展开更多
关键词 黄连素 人肝癌细胞 侵袭 磷脂酶Cγ1
大鼠PLCG2基因的pHBAd-MCMV-GFP真核表达载体构建及鉴定
9
作者 陈晓光 吕琼霞 +1 位作者 王静 周秀清 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期515-519,共5页
[目的]构建大鼠PLCG2(rPLCG2)的pHBAd-MCMV-GFP真核重组质粒,为进一步构建rPLCG2高表达腺病毒载体奠定基础。[方法]以合成的rPLCG2-pUC57质粒为模板,PCR扩增获得r PLCG2基因,并克隆至真核表达载体pHBAd-MCMV-GFP中。转化DH5α感受态,... [目的]构建大鼠PLCG2(rPLCG2)的pHBAd-MCMV-GFP真核重组质粒,为进一步构建rPLCG2高表达腺病毒载体奠定基础。[方法]以合成的rPLCG2-pUC57质粒为模板,PCR扩增获得r PLCG2基因,并克隆至真核表达载体pHBAd-MCMV-GFP中。转化DH5α感受态,菌液PCR阳性克隆鉴定,并对阳性样本进行测序。[结果]成功构建了真核重组质粒pHBAd-MCMV-GFP-rPLCG2。[结论]pHBAd-MCMV-GFP-rPLCG2真核表达载体的成功构建为后续rPLCG2高表达腺病毒载体的构建及其功能的研究奠定基础。 展开更多
关键词 大鼠 磷脂酶Cγ2(PLCG2)基因 pHBAd-MCMV-GFP 真核重组载体
磷脂酶参与的花生四烯酸12-LOX代谢通路在喉鳞状细胞癌中的作用及临床意义 被引量:2
10
作者 王嘉 李晓明 +1 位作者 徐鸥 单春光 《临床耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS 北大核心 2013年第24期1355-1359,共5页
目的:研究磷脂酶(PL)Cγ-2、花生四烯酸(AA)以及脂加氧酶-12(12-LOX)在喉鳞状细胞癌中的表达情况,探讨脂质代谢与喉鳞状细胞癌的关系。方法:选取30例喉癌组织以及癌旁组织(均经病理检查为正常组织),以免疫组织化学法(SP法... 目的:研究磷脂酶(PL)Cγ-2、花生四烯酸(AA)以及脂加氧酶-12(12-LOX)在喉鳞状细胞癌中的表达情况,探讨脂质代谢与喉鳞状细胞癌的关系。方法:选取30例喉癌组织以及癌旁组织(均经病理检查为正常组织),以免疫组织化学法(SP法)检测PLCγ—2和12-LOX的表达,以气相色谱联合质谱法检测AA的含量。结果:喉癌组织中PLCγ-2和12-LOX的表达高于正常组织(P%0.05),而AA含量低于正常组织(P%0.05);PLCγ-2和12-LOX与喉癌的临床分期、病理分化以及淋巴结转移有密切关系(P〈0.05);AA与喉癌的临床分期、病理分化以及淋巴结转移无关(P〉0.05);PLCγ-2、AA以及12-LOX与年龄无关(P〉0.05)。结论:PLCγ—2、AA和12-LOX三者与喉癌关系密切,阻断此通路,可能对喉癌的治疗有一定的意义。 展开更多
关键词 喉肿瘤 磷脂酶Cγ2 脂加氧-12 花生四烯酸
软骨细胞迁徙能力与自体细胞软骨移植中整合的相关性 预览 被引量:1
11
作者 陆一鸣 桂鉴超 +3 位作者 徐扬 尹昭伟 杨晓斐 蒋逸秋 《中国组织工程研究》 CSCD 2013年第44期7721-7728,共8页
背景:在关节外科中常用自体细胞软骨移植技术修复软骨缺损,整合不良是导致修复失败的原因之一。软骨细胞迁徙能力被证明和整合有相关性,某些通路如Src-磷酸化磷脂酶Cγ1-细胞外调节蛋白激酶1/2已经被证实和软骨细胞的迁徙能力相关,... 背景:在关节外科中常用自体细胞软骨移植技术修复软骨缺损,整合不良是导致修复失败的原因之一。软骨细胞迁徙能力被证明和整合有相关性,某些通路如Src-磷酸化磷脂酶Cγ1-细胞外调节蛋白激酶1/2已经被证实和软骨细胞的迁徙能力相关,但是否和整合相关还是个未知数。目的:阐明软骨细胞迁徙通路在自体细胞软骨移植中和整合之间的相关性。方法:将来源于猪膝关节的软骨细胞分成4组,为Src、磷酸化磷脂酶Cγ1、细胞外调节蛋白激酶1/2抑制组以及正常组,通过博伊登小室来量化4组软骨细胞的迁徙能力。将处理后的软骨细胞与软骨环建立共培养模型培养28 d后,进行组织学、生物化学、生物力学、免疫蛋白印迹以及细胞示踪等分析来观察正常组与抑制组之间的差异。结果与结论:当用抑制剂处理软骨细胞后,软骨细胞的迁徙能力明显下降。在软骨细胞软骨环共培养28 d后,免疫印迹蛋白分析表明通路抑制剂一直存在于整个培养周期中。同时正常组迁徙到整合区域中的软骨细胞数量和距离以及分泌的胶原、基质和力学强度明显高于其他3个抑制组。说明可以通过Src-磷酸化磷脂酶Cγ1-细胞外调节蛋白激酶1/2通路调节软骨细胞的迁徙能力从而影响软骨的整合能力。 展开更多
关键词 器官移植 细胞移植 SRC 磷酸化磷脂酶Cγ1 细胞外调节蛋白激1/2 软骨细胞 迁徙 整合 自体软骨细胞移植 省级基金
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磷脂酶Cγ2对自身反应性B细胞的调控作用 预览
12
作者 何颖红 赵文珍 +1 位作者 杨勇琴 王一心 《昆明医学院学报》 2012年第6期8-12,共5页
目的应用基因敲除小鼠模型研究磷脂酶Cγ2对无能B细胞产生的调节机制.方法采用流式细胞术分析野生型和PLCγ2缺失型小鼠无能B细胞的表型;同时用末端转移酶标记技术检测无能B细胞凋亡;溴脱氧尿嘧啶核苷掺入标记技术研究无能B细胞增殖情况... 目的应用基因敲除小鼠模型研究磷脂酶Cγ2对无能B细胞产生的调节机制.方法采用流式细胞术分析野生型和PLCγ2缺失型小鼠无能B细胞的表型;同时用末端转移酶标记技术检测无能B细胞凋亡;溴脱氧尿嘧啶核苷掺入标记技术研究无能B细胞增殖情况.结果 PLCγ2缺失小鼠与PLCγ2野生小鼠相比,无能B细胞数量显著减少(P〈0.01),无能B细胞凋亡率显著增加(P〈0.01),而无能B细胞增殖率无明显差异(P〉0.05).结论 PLCγ2信号提供了存活信号,PLCγ2参与了无能B细胞的调控过程. 展开更多
关键词 磷脂酶Cγ2 无能B细胞 自身反应性B细胞 小鼠
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磷脂酶Cγ2与B淋巴细胞 被引量:2
13
作者 张云操 白丽 《国际免疫学杂志》 CAS 北大核心 2009年第5期372-375,共4页
磷脂酶Cγ2是B淋巴细胞分化发育信号传导中的关键分子,尤其在前BCR和BCR形成过程中起着重要的信号传导作用,它的缺陷会影响B淋巴细胞的发育成熟和B淋巴细胞功能。因而明确磷脂酶Cγ2在B淋巴细胞分化发育中的作用十分必要,有利于阐明... 磷脂酶Cγ2是B淋巴细胞分化发育信号传导中的关键分子,尤其在前BCR和BCR形成过程中起着重要的信号传导作用,它的缺陷会影响B淋巴细胞的发育成熟和B淋巴细胞功能。因而明确磷脂酶Cγ2在B淋巴细胞分化发育中的作用十分必要,有利于阐明与B淋巴细胞相关的体液免疫缺陷病的分子机制,并为临床诊治提供理论基础。 展开更多
关键词 磷脂酶Cγ2 B淋巴细胞 分化发育 体液免疫缺陷病
胰岛素作用对胰岛β细胞磷脂酶Cγ1表达的影响 预览 被引量:4
14
作者 李广文 焦凯 《第四军医大学学报》 北大核心 2009年第19期1944-1946,共3页
目的:观察胰岛素对大鼠胰岛β细胞内磷脂酶Cγ1(PLCγ1)表达的影响.方法:大鼠胰岛分离纯化.通过HE染色观察纯化胰岛的形态特征,采用免疫组织化学方法并结合激光扫描共聚焦显微镜和图像分析技术对胰岛β细胞表达不同时间(0,30,60,12... 目的:观察胰岛素对大鼠胰岛β细胞内磷脂酶Cγ1(PLCγ1)表达的影响.方法:大鼠胰岛分离纯化.通过HE染色观察纯化胰岛的形态特征,采用免疫组织化学方法并结合激光扫描共聚焦显微镜和图像分析技术对胰岛β细胞表达不同时间(0,30,60,120,240min)内的PLCγ1进行半定量分析.结果:PLCγ1在胰腺的内外分泌部均有表达.与0min比较,胰岛素作用30,60min时胰岛β细胞表达的PLCγ1荧光强度有明显降低(P〈0.05);而在240min时PLCγ1荧光强度与0min比较无明显差别.结论:胰岛素作用60min内可使PLCγ1表达下调;胰岛素-PLCγ1途径参与了胰岛素的信息传递. 展开更多
关键词 磷脂酶Cγ1 胰岛素 胰岛 Β细胞
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电针大鼠胃经穴的血清对胃黏膜细胞表皮生长因子受体后信息物质表达的影响 预览 被引量:7
15
作者 严洁 杨宗保 +3 位作者 常小荣 易受乡 林亚平 钟艳 《中西医结合学报》 CAS 2007年第3期 338-342,共5页
目的:探讨电针大鼠胃经穴后提取的血清对胃黏膜细胞表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)后信息物质磷脂酶Cγ-1(phospholipase Cγ-1,PLCγ-1)、蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)和c-myc表达的影响。 ... 目的:探讨电针大鼠胃经穴后提取的血清对胃黏膜细胞表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)后信息物质磷脂酶Cγ-1(phospholipase Cγ-1,PLCγ-1)、蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)和c-myc表达的影响。 方法:60只大鼠随机分为正常组、胃经组、胆经组、胃经+PD153035组和胆经+PD153035组,采用水浸束缚法制作胃黏膜损伤大鼠模型,链霉蛋白酶消化法分离胃黏膜细胞,分别用EGFR抑制剂PD153035和血清孵育胃黏膜细胞,应用酶联免疫吸附法检测PLCγ-1活性,同位素掺入法检测PKC活性,逆转录聚合酶链反应法检测c-myc的表达水平。 结果:正常组大鼠胃黏膜细胞PLCγ-1、PKC和c-myc有微弱表达;胃经组和胆经组大鼠胃黏膜细胞PLCγ-1、PKC和c-myc呈现较强表达,其中胃经组大鼠表达最强烈,两组相比,差异有统计学意义(P〈0.01);胃经+PD153035组和胆经+PD153035组大鼠胃黏膜细胞PLCγ-1、PKC和c-myc的表达较弱,胃经组与胃经+PD153035组相比,差异有统计学意义(P〈0.01)。 结论:电针胃经穴后提取的血清能诱导大鼠胃黏膜细胞EGFR后信息物质的活化,提示存在经脉-脏腑的特异性联系。 展开更多
关键词 电针 表皮生长因子受体 PD153035 磷脂酶Cγ-1 蛋白激C C-MYC
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稳定表达PLCγ1siRNA慢病毒的构建及对人大肠癌细胞凋亡的影响 预览 被引量:1
16
作者 谭丽 罗深秋 林骏 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期 255-258,共4页
目的制备在人大肠癌系LoVo中稳定抑制磷脂酶C(PLC)γ1的重组慢病毒。建立PLCγ1表达降低的细胞系,以便客观研究该基因的作用。方法制备产生PLCγ1siRNA分子的重组慢病毒。在慢病毒感染LoVo细胞后以杀稻瘟菌素筛选稳定表达细胞系。应... 目的制备在人大肠癌系LoVo中稳定抑制磷脂酶C(PLC)γ1的重组慢病毒。建立PLCγ1表达降低的细胞系,以便客观研究该基因的作用。方法制备产生PLCγ1siRNA分子的重组慢病毒。在慢病毒感染LoVo细胞后以杀稻瘟菌素筛选稳定表达细胞系。应用Western—blot和RT-PCR对细胞中PLCγ1的蛋白和mRNA表达水平进行分析。应用流式细胞仪分析PLCγ1siRNA对细胞凋亡的影响。结果和结论PLCγ1siRNA显著下调了LoVo细胞中PLCγ1的表达。所构建的重组慢病毒导入的siRNA有较高的沉默效率,显著增加了5-FU诱导的凋亡。 展开更多
关键词 磷脂酶Cγ1 慢病毒 LOVO细胞 小干扰RNA 凋亡
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磷脂酶Cγ1在大肠癌细胞中的信号转导机制 预览 被引量:1
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作者 李秀梅 华亮 罗深秋 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期 1146-1148,共3页
目的研究磷脂酶Cγ1(PLCγ1)在大肠癌细胞中的信号转导机制。方法采用凝胶迁移率变动分析(EMSA),免疫细胞化学,酶谱分析及RT-PCR等技术,分析了大肠癌细胞LoVo中,PLCγ1在表皮生长因子(EGF)刺激下对相关信号分子核因子-KappaB... 目的研究磷脂酶Cγ1(PLCγ1)在大肠癌细胞中的信号转导机制。方法采用凝胶迁移率变动分析(EMSA),免疫细胞化学,酶谱分析及RT-PCR等技术,分析了大肠癌细胞LoVo中,PLCγ1在表皮生长因子(EGF)刺激下对相关信号分子核因子-KappaB(NF-κB)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和组织金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)的活性与表达的影响。结果与对照组相比,EGF处理组胞核阳性率显著增高,从26.91%±2.84%升高至40.83%±4.36%,而2.5μmol/L U73122处理组中胞核的阳性率则降低至12.20%±1.89%。同时,EGF刺激前若以2.5μmol/L U73122预处理,胞核阳性的细胞与只用EGF处理组相比也显著减少,从40.83%±4.36%降至18.21%±1.34%。EMSA结果显示,EGF处理细胞后可以增强NF-κB的活性,而U73122则可部分抑制其活性。RT-PCR结果表明,EGF处理细胞后,PLCγ1和NF-κB对于MMP-2与TIMP-2在mRNA水平的表达无显著影响。酶谱分析结果同时表明EGF处理细胞后,PLCγ1和NF-κB对于MMP-2酶原的表达及激活也无显著影响。结论在大肠癌细胞LoVo中,EGF可作为PLCγ1的上游刺激物,NF-κB作为其下游分子参与PLCγ1作用的发挥,而MMP-2、TIMP-2则不参与PLCγ1信号通路。 展开更多
关键词 磷脂酶Cγ1 信号传导 NF-ΚB 明胶A
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磷脂酰乙醇胺N-甲基转移酶2过表达抑制磷脂酶Cγ1磷酸化及转位 被引量:2
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作者 李亚丽 邵彦华 +2 位作者 刘之力 夏泉 马克里 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期 514-516,共3页
目的探讨转染磷脂酰乙醇胺N-甲基转移酶2(PEMT2)基因抑制大鼠肝癌CBRH-7919细胞增殖的机制。方法采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blot方法,观察转染PEMT2基因对大鼠肝癌CBRH-7919细胞磷脂酶Cγ1(PLCγ1)磷酸化及... 目的探讨转染磷脂酰乙醇胺N-甲基转移酶2(PEMT2)基因抑制大鼠肝癌CBRH-7919细胞增殖的机制。方法采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blot方法,观察转染PEMT2基因对大鼠肝癌CBRH-7919细胞磷脂酶Cγ1(PLCγ1)磷酸化及在细胞内转位的影响;同时观察转染PEMT2基因对肝细胞生长因子受体(c—Met)自身磷酸化活化的影响。结果转染PEMT2后,质膜结合的PLCγ下降,为对照组的45%,膜结合的磷酸化PLCγ1约为对照组细胞的27%,同时c—Met磷酸化程度显著下降,约为对照组细胞的32%。结论转染PEMT2基因可抑制细胞PLCγ1磷酸化及由胞浆向质膜转位,抑制c-Met自身磷酸化活化,从而下调CBRH-7919细胞c—Met/PLCγ1信号转导途经。 展开更多
关键词 肝细胞 大鼠 磷脂酰乙醇胺N-甲基转移2 磷脂酶Cγ1
磷脂酶Cγ1及NF-kB在结直肠癌细胞与基质黏附中的作用及信号转导机制 预览 被引量:1
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作者 李秀梅 白晓春 +2 位作者 邓凡 陆地 罗深秋 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期 465-470,共6页
目的:研究磷脂酶Cγ1(PLCγ1)及NF-kB在结直肠癌细胞与细胞外基质黏附中的作用及其信号转导机制。方法:PLC抑制剂U73122用于研究PLCγ1在高转移的人结肠癌细胞LoVo和低转移的SW480细胞中对于细胞一基质黏附的影响。吡咯二硫氨基甲酸酯... 目的:研究磷脂酶Cγ1(PLCγ1)及NF-kB在结直肠癌细胞与细胞外基质黏附中的作用及其信号转导机制。方法:PLC抑制剂U73122用于研究PLCγ1在高转移的人结肠癌细胞LoVo和低转移的SW480细胞中对于细胞一基质黏附的影响。吡咯二硫氨基甲酸酯(PDTC)用于研究NF-kB在结直肠癌细胞与基质黏附中的作用。PLCγ1在结直肠癌细胞中作用的信号转导机制采用蛋白质印迹及凝胶迁移率变动分析(EMSA)。结果:抑制PLCγ1对SW480细胞与基质的黏附无明显影响。但在LoVo细胞中,PLCγ1和NF-kB的抑制均可显著降低细胞与基质的黏附(P<0.05)并呈剂量依赖性,且抑制作用可被EGF部分恢复。蛋白质印迹分析显示EGF可刺激PLCγ1的磷酸化。EMSA结果显示,抑制PLCγ1可以抑制EGF刺激的NF-kB的激活。结论:EGF-PLCγ1—NF-kB信号通路在高转移的结肠癌细胞与基质的黏附中发挥重要作用。 展开更多
关键词 磷脂酶Cγ1 结肠直肠肿瘤 黏附 表皮生长因子 NF-KB
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阻断磷脂酶C-γ1信号通路对卵巢癌细胞凋亡的影响
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作者 姚佳 《临床合理用药杂志》 2017年第13期53-55,共3页
目的 观察阻断磷脂酶C(PLC)-γ1信号通路对卵巢癌细胞凋亡的影响。方法 用化学阻断剂U73122处理卵巢癌细胞,光镜观察细胞形态学改变,MTT法评价细胞生长抑制水平,流式细胞仪分析细胞周期变化及细胞凋亡率。结果 磷脂酶C信号通路被阻断... 目的 观察阻断磷脂酶C(PLC)-γ1信号通路对卵巢癌细胞凋亡的影响。方法 用化学阻断剂U73122处理卵巢癌细胞,光镜观察细胞形态学改变,MTT法评价细胞生长抑制水平,流式细胞仪分析细胞周期变化及细胞凋亡率。结果 磷脂酶C信号通路被阻断后,卵巢癌细胞出现明显的细胞凋亡形态学改变,细胞存活率显著下降,流式细胞仪检测到凋亡细胞,与浓度及时间呈一定关系。结论 阻断磷脂酶C-γ1能启动卵巢癌细胞的凋亡。 展开更多
关键词 磷脂酶C-Γ1 U73122 卵巢癌 凋亡
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