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甲基莲心碱对腰椎间盘退变大鼠的影响
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作者 刘洋 贾宇涛 +2 位作者 孙天威 田融 李广 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第15期1648-1651,共4页
目的研究甲基莲心碱对髓核细胞生长、髓核组织胶原蛋白变性和免疫反应对椎间盘退变的修复作用。方法(1)细胞实验:将髓核细胞分为4组:空白对照组、加药组、诱导损伤组和损伤加药组。空白对照组细胞正常培养,诱导损伤组和损伤加药组细胞... 目的研究甲基莲心碱对髓核细胞生长、髓核组织胶原蛋白变性和免疫反应对椎间盘退变的修复作用。方法(1)细胞实验:将髓核细胞分为4组:空白对照组、加药组、诱导损伤组和损伤加药组。空白对照组细胞正常培养,诱导损伤组和损伤加药组细胞加10μg·mL^-1白细胞介素-1β(IL-1β),加药组和损伤加药组细胞用20μg·mL^-1甲基莲心碱处理。以细胞计数试剂盒(CCK-8)检测髓核细胞存活率,以蛋白质印迹检测细胞增殖标记物(Ki67)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)的表达。(2)动物实验:按照体重将大鼠随机分成4组:正常组、健康给药组、模型组和模型给药组,每组10只;健康给药组和模型给药组大鼠腹腔注射甲基莲心碱20 mg·kg^-1,每天1次;另外2组大鼠腹腔注射等量0. 9%Na Cl,连续6周。用纤维环穿刺法建立椎间盘退变模型,以酶联免疫吸附法检测IL-1β、肿瘤坏死因子(TNF-α)和诱导性一氧化氮合酶(i NOS)的表达。结果(1)细胞结果:空白对照组、加药组、诱导损伤组和损伤加药组的细胞存活率分别为(100. 00±0. 00)%,(100. 00±0. 00)%,(32. 69±9. 09)%和(84. 35±8. 37)%;上述这4组Ki67的表达量分别为0. 38±0. 05,0. 40±0. 06,0. 07±0. 03和0. 30±0. 05;上述这4组Caspase-3的表达水平分别为0. 05±0. 01,0. 04±0. 01,0. 33±0. 06和0. 10±0. 02;诱导损伤组与空白对照组相比,细胞存活率、Ki67表达量显著降低,Caspase-3的表达水平显著升高,差异均有统计学意义(均P <0. 01);损伤加药组的上述指标与诱导损伤组相比,差异均有统计学意义(均P <0. 01)。(2)动物结果:正常组、健康给药组、模型组和模型给药组IL-1β的水平分别为(17. 92±8. 27),(14. 78±6. 12),(89. 21±17. 22)和(32. 37±12. 34) pg·mg^-1;上述这4组TNF-α的水平分别为(30. 24±5. 11),(27. 93±5. 20),(108. 67±9. 89)和(45. 93±7. 19)pg·mg^-1;上述这4组i NOS的水平分别为(54. 19±5. 44),(49. 06±5. 77),(175. 97±22. 13) 展开更多
关键词 甲基莲心 髓核细胞 胶原蛋白 免疫紊乱 腰椎间盘
大孔吸附树脂法纯化甲基莲心碱的工艺研究 预览
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作者 吕晶 金磊 +6 位作者 王润东 王祯 李枝旺 薛舒婷 刘小宇 赵乃璇 陈长兰 《哈尔滨商业大学学报:自然科学版》 CAS 2019年第5期522-525,共4页
筛选适用于分离纯化甲基莲心碱的大孔吸附树脂.考察吸附性能较好的HPD-600、D101、AB-8三种大孔吸附树脂对甲基莲心碱的解吸附能力及洗脱参数,并用HPLC-UV定量分析甲基莲心碱的含量.D101树脂对甲基莲心碱有较好的吸附分离效果.莲子心提... 筛选适用于分离纯化甲基莲心碱的大孔吸附树脂.考察吸附性能较好的HPD-600、D101、AB-8三种大孔吸附树脂对甲基莲心碱的解吸附能力及洗脱参数,并用HPLC-UV定量分析甲基莲心碱的含量.D101树脂对甲基莲心碱有较好的吸附分离效果.莲子心提取液调节pH值至11,经大孔吸附树脂吸附后,分别用4BV的蒸馏水、5BV的60%乙醇洗脱,洗脱率为83.11%,收率为34.6%,甲基莲心碱纯度从16.8%提高到70.0%,纯度提高了约3.3倍.该工艺简单可行,分离效果好,适合甲基莲心碱的分离纯化. 展开更多
关键词 莲子心 生物 甲基莲心 大孔吸附树脂 纯化 工艺优化
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甲基莲心碱通过影响微小RNA抑制鼻咽癌细胞侵袭转移的机制研究
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作者 何香兰 李维 +2 位作者 谭国林 宋业勋 马艳红 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1417-1423,共7页
本文以鼻咽癌CNE-1和5-8F细胞为研究对象,检测甲基莲心碱(neferine, Nef)抑制鼻咽癌侵袭转移的作用,探讨其抑制侵袭转移的机制。CCK-8法检测鼻咽癌细胞活性;划痕实验、Transwell细胞体外迁移侵袭实验观察Nef对鼻咽癌CNE-1、5-8F细胞侵... 本文以鼻咽癌CNE-1和5-8F细胞为研究对象,检测甲基莲心碱(neferine, Nef)抑制鼻咽癌侵袭转移的作用,探讨其抑制侵袭转移的机制。CCK-8法检测鼻咽癌细胞活性;划痕实验、Transwell细胞体外迁移侵袭实验观察Nef对鼻咽癌CNE-1、5-8F细胞侵袭、迁移能力的影响;Western blot法检测上皮-间质转化(epithelial to mesenchymal transition, EMT)相关蛋白及其转录因子表达水平;miRNA基因芯片检测Nef处理过的5-8F细胞与对照组miRNA差异基因表达谱,对差异表达基因进行生物信息学分析及筛选,同时研究其表达与鼻咽癌侵袭转移的相关性。实验结果显示:30μmol·L^-1 Nef对鼻咽癌CNE-1、5-8F细胞活性无明显影响, Nef能显著抑制鼻咽癌细胞的侵袭与转移,Western blot结果显示Nef使鼻咽癌CNE-1、5-8F细胞中神经型钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)表达下调,上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)表达上调, Twist、Snail、Slug转录因子无显著表达差异;miRNA基因芯片结果显示Nef作用后的5-8F鼻咽癌细胞与对照组相比共10个miRNA有2倍以上表达差异,其中hsa-let-7c-5p与hsa-miR-423-5p表达差异最显著,分别下调至30.6%、28.6%。生物信息分析显示hsa-let-7c-5p与hsa-miR-423-5p有共同的下游靶基因:小细胞膜蛋白3 (small integral membrane protein 3, SMIM3)、神经生长因子(nerve growth factor, NGF)。鼻咽癌5-8F细胞转染hsa-let-7c-5p mimic与hsa-miR-423-5p mimic后增强其侵袭与转移能力, SMIM3、NGF表达下调。以上研究结果表明, Nef可能通过抑制hsa-let-7c-5p与hsa-miR-423-5p的表达,作用于下游靶基因SMIM3、NGF,抑制EMT相关蛋白的表达,从而抑制鼻咽癌细胞的侵袭转移。研究结果为Nef抑制肿瘤侵袭转移提供实验依据。 展开更多
关键词 甲基莲心 鼻咽癌 侵袭转移 作用机制
转铁蛋白修饰的甲基莲心碱纳米脂质体的研制及脑靶向性考察
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作者 江力 谈弋 王军 《中国药师》 CAS 2019年第3期447-450,共4页
目的:制备转铁蛋白(Tf)修饰的甲基莲心碱(Nef)纳米脂质体(NefNL),并考察其脑部靶向性。方法:以二硬脂酰基磷脂酰胆碱(DSPC)、胆固醇、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000(DSPE-PEG2000)及二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-羧基(DSPE-P... 目的:制备转铁蛋白(Tf)修饰的甲基莲心碱(Nef)纳米脂质体(NefNL),并考察其脑部靶向性。方法:以二硬脂酰基磷脂酰胆碱(DSPC)、胆固醇、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000(DSPE-PEG2000)及二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-羧基(DSPE-PEG200-COOH)为成膜材料,采用薄膜分散法制备NefNL,并将Tf共价结合于DSPE-PEG200-COOH的COO-上制备Tf修饰的NefNL(Tf-NefNL)。HPLC法测定小鼠中血浆及脑部Nef浓度。以同剂量的NefNL为对照,测定Tf-NefNL给药后不同时间点小鼠血浆及脑部的Nef浓度,并利用DAS2.0软件计算主要药动学参数,并用相对摄取率(re)、靶向效率(te)及峰浓度比(Ce) 3个指标评价其脑靶向性。结果:与同剂量的NefNL相比,Tf-NefNL在小鼠脑组织中的峰浓度(Cmax)及曲线下面积(AUC)明显增加,达峰时间(Tmax)缩短(P<0.05),re、te、Ce分别为1.90、1.37、2.0。结论:Tf修饰的纳米脂质体可显著增加Nef在小鼠脑部的浓度,加快达峰,具有明显的脑靶向性。 展开更多
关键词 甲基莲心 纳米脂质体 转铁蛋白 小鼠 脑靶向
甲基莲心碱抗肿瘤药理作用及其分子机制研究进展 预览
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作者 李琦玮 张甘霖 +1 位作者 孙旭 王笑民 《中国药房》 CAS 北大核心 2019年第8期1134-1138,共5页
目的:了解甲基莲心碱(Nef)抗肿瘤的药理作用及其分子机制研究进展,为该生物碱的进一步开发利用提供依据。方法:以“甲基莲心碱”“肿瘤”“Neferine”“Anti-tumor”“Cancer”等中英文为关键词,在中国知网、万方数据、PubMed等数据库... 目的:了解甲基莲心碱(Nef)抗肿瘤的药理作用及其分子机制研究进展,为该生物碱的进一步开发利用提供依据。方法:以“甲基莲心碱”“肿瘤”“Neferine”“Anti-tumor”“Cancer”等中英文为关键词,在中国知网、万方数据、PubMed等数据库中组合查询发表于2000年-2018年9月的文献,对Nef抗肿瘤的药理作用及分子机制进行综述。结果:共检索到文献84篇,其中有效文献34篇。结果与结论:Nef是一种提取自莲子心的双苄基异喹啉类生物碱,具有多重抗肿瘤药理活性。Nef可通过诱导肿瘤细胞凋亡、阻滞肿瘤细胞周期、影响肿瘤细胞的自噬过程,从而抑制肿瘤细胞增殖;可通过提高肿瘤细胞对化疗药物的敏感性(如影响肿瘤细胞线粒体功能、抑制炎症相关信号通路、阻碍上皮间质性转化进程、协同抗肿瘤药物)、降低化疗药物(如阿霉素、顺铂等)的毒性起到减毒增效的作用。近年来,有关Nef的基础研究逐渐增多,但主要集中在体外分子机制研究,而基于体内实验的安全性评价及药理研究十分缺乏。多数研究关注于Nef在细胞水平内与炎症通路、自噬过程、氧化应激反应的关系,但对引起这类反应的上游肿瘤相关靶点的研究仍有待深入开展。此外,Nef要从基础研究到临床应用仍有相当的距离,如何优化药物剂型、提高有效成分生物利用度,是今后亟需解决的问题。 展开更多
关键词 甲基莲心 抗肿瘤 药理作用 分子机制 自噬 凋亡 氧化应激 炎症通路 减毒增效
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对《中国药典》2015年版一部莲子心含量测定方法的改进 预览
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作者 石炳娟 荆汉卫 《中国药品标准》 CAS 2018年第4期245-251,共7页
目的:改进并优化莲子心中有效组分莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱的含量测定方法。方法:80%乙醇浸泡30 min,超声处理30 min进行提取,采用TSKgel ODS-100V(4.6 mm×250 mm,5μm)柱;流动相为乙腈-0.015 mol·L^-1十二烷基磺酸... 目的:改进并优化莲子心中有效组分莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱的含量测定方法。方法:80%乙醇浸泡30 min,超声处理30 min进行提取,采用TSKgel ODS-100V(4.6 mm×250 mm,5μm)柱;流动相为乙腈-0.015 mol·L^-1十二烷基磺酸钠溶液(取十二烷基磺酸钠0.41 g,加水100 mL使溶解)-冰醋酸(54∶45∶1);流速1.0 mL·min^-1;检测波长230 nm,柱温35℃。异莲心碱、甲基莲心碱含量以莲心碱计。结果:莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱能得到较好分离。进样量在0.050 04-1.251μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=1.000 0(n=7),平均回收率为88.6%,RSD=1.5%(n=6)。修改后方法对莲心碱的提取率是药典方法的192%。结论:本法比药典方法提取率高,所用试剂毒性小且操作简便,HPLC图谱分离好,测定准确、稳定、重复性好,可用于市售莲子心的质量评价。 展开更多
关键词 莲子心 高效液相色谱法 含量测定 莲心 莲心 甲基莲心 改进
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甲基莲心碱与荷叶碱作用HepG2细胞对其上清液中LDH、TGF-β1、VEGF的比较 预览
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作者 李娜 宋金春 《药学与临床研究》 2018年第2期89-93,共5页
目的:比较莲中甲基莲心碱与荷叶碱分别体外刺激HepG2细胞相同时间段上清液中的乳酸脱氢酶(LDH)、转化生长因子(TGF-β1)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达情况。方法:通过Cell Counting Kit-8(CCK-8)法分别测定甲基莲心碱和荷叶碱对... 目的:比较莲中甲基莲心碱与荷叶碱分别体外刺激HepG2细胞相同时间段上清液中的乳酸脱氢酶(LDH)、转化生长因子(TGF-β1)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达情况。方法:通过Cell Counting Kit-8(CCK-8)法分别测定甲基莲心碱和荷叶碱对人肝癌HepG2细胞的生长增殖活力的影响;乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测两种生物碱分别干预HepG2细胞后细胞上清液中的乳酸脱氢酶(LDH)活力;酶联免疫吸附(ELISA)法测定甲基莲心碱和荷叶碱分别干预HepG2细胞后细胞上清中的转化生长因子β1(TGF-β1)和血管内皮生长因子(VEGF)的浓度表达。结果:甲基莲心碱和荷叶碱均能抑制HepG2细胞的增殖活力,与对照组相比,呈浓度-时间依赖性(P<0.05)。在相同干预时间段,同等浓度下的Nef组比Nuci组对HepG2细胞生长增殖活力抑制作用更显著;随药物剂量增大,两种生物碱组分别处理的细胞上清液的LDH活力亦随之增大,但甲基莲心碱组处理后的细胞上清液中的LDH活力比同等浓度荷叶碱组处理后上调更加明显(P<0.01);与对照组比较,两组分泌的TGF-β1和VEGF的浓度分别随药物浓度增大而下调,与荷叶碱组相比,同等浓度下的甲基莲心碱组细胞上清液中的TGF-β1和VEGF的浓度下调能力更显著,其中TGF-β1下调变化极其显著(P<0.01)。结论:同等浓度的甲基莲心碱比荷叶碱对HepG2细胞上清液中的LDH、TGF-β1和VEGF的浓度上调或下调变化更显著。 展开更多
关键词 甲基莲心 荷叶 LDH TGF-Β1 VEGF
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甲基莲心碱在氧化应激中的作用机制研究 预览
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作者 刘向东 李慧 +2 位作者 王成志 赵焕东 肖平 《中国现代医学杂志》 2018年第17期31-36,共6页
目的探究甲基莲心碱(Nef)抗氧化应激作用及其机制。方法体外培养大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK-52E),分为对照组、高渗组、高糖组、Nef组、锌原卟啉Ⅸ(Zn P)组和HO-1抑制剂组。采用CCK-8法检测细胞活力,Western blot检测血红素加氧... 目的探究甲基莲心碱(Nef)抗氧化应激作用及其机制。方法体外培养大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK-52E),分为对照组、高渗组、高糖组、Nef组、锌原卟啉Ⅸ(Zn P)组和HO-1抑制剂组。采用CCK-8法检测细胞活力,Western blot检测血红素加氧酶1(HO-1)和P67蛋白的表达,DCFH-DA探针检测活性氧(ROS),化学氧化酶标法检测HO-1酶活性,TBA法检测丙二醛(MDA)。结果与对照组比较,高糖组的氧化应激指标P67表达增加,ROS和MDA含量升高,细胞活力下降(P〈0.05);与高糖组比较,Nef组HO-1蛋白表达和酶活性增加,P67表达降低,ROS和MDA含量减少,细胞活力上升(P〈0.05);HO-1抑制剂组较Nef组上述作用减弱(P〈0.05)。结论 Nef通过诱导HO-1表达并增加其酶活性,从而减轻高糖培养的NRK-52E细胞氧化应激损伤。 展开更多
关键词 甲基莲心 血红素加氧酶1 大鼠近端肾小管上皮细胞 氧化应激
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甲基莲心碱对增生性瘢痕成纤维细胞Bcl-2、Bax及Caspase-3表达影响的研究 预览
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作者 蒋朝龙 史高峰 +1 位作者 李虎 高凤山 《中国美容医学》 CAS 2018年第3期107-110,共4页
目的:研究曱基莲心碱对增生性瘢痕成纤维细胞中Be卜2、Bax及Caspase-3中mRNA和蛋白表达的影响。方法:体外培养增生性瘢痕成纤维细胞及正常皮肤组织,随机分为4组:对照组、甲基莲心碱低、中、高剂量组(5、10、20ng/ml)。各组分别加入不同... 目的:研究曱基莲心碱对增生性瘢痕成纤维细胞中Be卜2、Bax及Caspase-3中mRNA和蛋白表达的影响。方法:体外培养增生性瘢痕成纤维细胞及正常皮肤组织,随机分为4组:对照组、甲基莲心碱低、中、高剂量组(5、10、20ng/ml)。各组分别加入不同浓度药物培养24h后,采用RT-PCR检测Bcl-2、Bax及Caspase-3 mRNA的表达,并运用Western Blot检测Bcl-2、Bax及Caspase-3蛋白的表达。结果:与对照组相比,低剂量组Bcl-2、Bax及Caspase-3 mRNA表达量均无明显变化(P>0.05);中、高剂量组Be卜2 mRNA表达量明显降低,Bax及Caspase-3 mRNA表达量明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,低剂量组Bcl-2蛋白表达量无明显变化,中、高剂量组Bcl-2蛋白表达量明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);低、中、高剂量组Bax及Caspase-3蛋白表达量均明显增加,差异有统计学意义(P<0.05).结论:甲基莲心碱能上调增生性瘢痕成纤维细胞中Bax、Caspase-3的表达,同时下调Bcl-2的表达。 展开更多
关键词 甲基莲心 增生性瘢痕成纤维细胞 BCL-2 BAX CASPASE-3
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甲基莲心碱抗乳腺癌MCF-7细胞的研究
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作者 温海燕 李娜 +2 位作者 侯亚婷 戴谆 宋金春 《现代生物医学进展》 CAS 2018年第18期3425-3430,共6页
目的:观察甲基莲心碱对乳腺癌细胞系MCF-7增殖和凋亡的影响,并探讨其诱导乳腺癌细胞系MCF-7凋亡的可能作用机制。方法:采用体外培养人乳腺癌细胞系MCF-7,CCK-8实验检测不同浓度甲基莲心碱对MCF-7细胞增殖抑制作用;乳酸脱氢酶(LDH)... 目的:观察甲基莲心碱对乳腺癌细胞系MCF-7增殖和凋亡的影响,并探讨其诱导乳腺癌细胞系MCF-7凋亡的可能作用机制。方法:采用体外培养人乳腺癌细胞系MCF-7,CCK-8实验检测不同浓度甲基莲心碱对MCF-7细胞增殖抑制作用;乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒(微板法)检测细胞上清液LDH含量;流式细胞术分析甲基莲心碱对MCF-7细胞周期及凋亡的影响;实时定量PCR(RT-PCR)检测线粒体凋亡相关基因Bax和Bcl-2的表达水平。结果:CCK-8、LDH结果显示甲基莲心碱以时间、浓度依耐性的方式抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖及促进细胞毒性的增加;流式细胞术结果表明不同甲基莲心碱作用下MCF-7的平均凋亡率分别为(15.44±0.52)、(18.81±2.24)、(24.26±2.84)、(36.90±3.15)、(59.27±5.86),且使其周期阻滞于G0/G1期;RT-PCR检测结果证明甲基莲心碱可上调乳腺癌细胞中促凋亡基因Bax的表达,而下调抑制凋亡基因Bcl-2。结论:甲基莲心碱以时间和浓度依赖的方式抑制乳腺癌细胞增殖、细胞毒性增加,导致细胞周期于G0/G1阻滞并促进癌细胞凋亡。甲基莲心碱抗乳腺癌的可能作用机制是激活线粒体凋亡途径。 展开更多
关键词 甲基莲心 乳腺癌 增殖 凋亡
甲基莲心碱对人肝星状细胞共培养条件下的人肝癌细胞中的转化生长因子(TGF-β1)的影响 被引量:1
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作者 李娜 宋金春 《中国医院药学杂志》 北大核心 2018年第2期157-160,共4页
目的:研究甲基莲心碱对人肝星状细胞LX-2细胞株共培养条件下的人肝癌细胞HepG2细胞株中的转化生长因子(TGF-β1)的影响。方法:Transwell建立HepG2细胞和LX-2细胞共培养系统,同时设置阴性对照组和单独的HepG2细胞培养组;倒置显微镜... 目的:研究甲基莲心碱对人肝星状细胞LX-2细胞株共培养条件下的人肝癌细胞HepG2细胞株中的转化生长因子(TGF-β1)的影响。方法:Transwell建立HepG2细胞和LX-2细胞共培养系统,同时设置阴性对照组和单独的HepG2细胞培养组;倒置显微镜下观察甲基莲心碱诱导肝星状细胞共培养条件下的肝癌细胞的凋亡形态变化;酶联免疫(ELISA)检测上清液中分泌的转化生长因子(TGF-β1)的浓度;Western Blot和实时定量PCR分别从蛋白水平和mRNA水平测定TGF-β1的表达情况。结果:甲基莲心碱作用共培养条件的HepG2细胞48 h,给药组相较于对照组细胞数目减少,形态皱缩,但没有单独的HepG2细胞组凋亡形态明显;TGF-β1经ELISA、Western Blot和实时定量PCR检测,其表达水平均随着药物剂量的增大而下调,与对照组比较,差异有统计学意义(P〈0.05),但没有单独的HepG2细胞组TGF-β1水平下调明显。结论:甲基莲心碱能够下调肝星状细胞LX-2细胞株共培养条件下的肝癌细胞HepG2细胞株的TGF-β1的表达来诱导细胞凋亡,并呈现出剂量依赖性,但肝星状LX-2细胞对甲基莲心碱诱导共培养下的HepG2细胞的凋亡有一定地抑制作用。 展开更多
关键词 甲基莲心 HEPG2细胞 LX-2细胞 共培养 TGF-Β1
甲基莲心碱促进骨肉瘤143B细胞凋亡的相关研究
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作者 周思齐 李皓桓 +2 位作者 张宇标 施家奇 蔡伟松 《现代生物医学进展》 CAS 2018年第19期3612-3617,共6页
目的:研究不同浓度甲基莲心碱对骨肉瘤143B细胞增值迁移的影响及其诱导凋亡的相关机制。方法:不同浓度甲基莲心碱处理骨肉瘤143B之后,CCK-8法检测甲基莲心碱对骨肉瘤143B细胞的增值抑制作用;细胞划痕实验检测不同浓度甲基莲心碱对骨肉... 目的:研究不同浓度甲基莲心碱对骨肉瘤143B细胞增值迁移的影响及其诱导凋亡的相关机制。方法:不同浓度甲基莲心碱处理骨肉瘤143B之后,CCK-8法检测甲基莲心碱对骨肉瘤143B细胞的增值抑制作用;细胞划痕实验检测不同浓度甲基莲心碱对骨肉瘤143B细胞迁移的影响;流式细胞术检测甲基莲心碱对癌细胞的凋亡率和周期分布;Western Blot检测甲基莲心碱对癌细胞相关蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果:CCK-8显示甲基莲心碱能抑制骨肉瘤143B细胞的增值且以浓度和时间依赖的方式(P〈0.05);给药组(20, 40, 60μmol·L^-1)24 h细胞迁移率分别为(62.35±4.15)%,(40.74±4.80)%,(25.10±5.52)%,较对照组(75.89±5.24)%明显降低(P〈0.05);流式细胞术结果显示甲基莲心碱能使骨肉瘤143B细胞周期阻滞于G0/G1期,且呈剂量依赖性诱导癌细胞凋亡(P〈0.05);Western Blot证明甲基莲心碱可促进癌细胞中促凋亡蛋白Bax的表达,而降低抑制凋亡蛋白Bcl-2的表达(P〈0.05)。结论:甲基莲心碱可能通过激活线粒体凋亡相关蛋白的表达,发挥抗骨肉瘤143B的作用。 展开更多
关键词 甲基莲心 骨肉瘤 增殖 凋亡
甲基莲心碱对肝缺血再灌注损伤模型小鼠氧化应激和炎症反应的影响 预览 被引量:3
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作者 郑伟 海军 +2 位作者 宋晓雪 常虎林 杜立学 《中国药房》 北大核心 2018年第15期2068-2072,共5页
目的:考察甲基莲心碱对小鼠肝缺血再灌注(I/R)损伤的保护作用及机制。方法:将40只小鼠随机分为假手术组(生理盐水)、模型组(生理盐水)和甲基莲心碱低、中、高剂量组(10、30、60 mg/kg),每组8只。每天灌胃给药1次,连续给药7 d。给药结束... 目的:考察甲基莲心碱对小鼠肝缺血再灌注(I/R)损伤的保护作用及机制。方法:将40只小鼠随机分为假手术组(生理盐水)、模型组(生理盐水)和甲基莲心碱低、中、高剂量组(10、30、60 mg/kg),每组8只。每天灌胃给药1次,连续给药7 d。给药结束后,除假手术组外,其余各组小鼠均采用夹闭肝蒂60 min后再灌注6 h复制肝I/R损伤模型。造模结束后,检测各组小鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)水平,苏木精-伊红染色后观察肝组织病理学变化并进行炎症评分,检测肝组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、TNF-αmRNA、IL-6 mRNA及核转录因子κB p65(NF-κB p65)蛋白表达情况。结果:与假手术组比较,模型组小鼠血清中ALT、AST、TNF-α、IL-6以及肝组织中MDA、SOD、TNF-αmRNA、IL-6 mRNA和NF-κB p65蛋白表达水平均显著升高(P<0.05);肝组织间质有大量炎症细胞浸润、肝细胞坏死,炎症评分显著升高(P<0.05)。与模型组比较,除甲基莲心碱低剂量组小鼠血清中ALT、TNF-α和肝组织中TNF-αmRNA、MDA、NF-κB p65蛋白表达水平以及肝组织炎症评分降低不显著外,其余各组小鼠上述指标水平均显著降低(P<0.05);甲基莲心碱中、高剂量组小鼠肝小叶结构完整,肝细胞形态基本正常,病理损伤得到显著改善。结论:甲基莲心碱对肝I/R损伤模型小鼠具有保护作用,且呈剂量相关性;其作用机制可能与减轻氧化应激、抑制炎症反应和降低肝组织中NF-κB p65蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 甲基莲心 肝缺血再灌注损伤 小鼠 炎症反应 氧化应激 核转录因子ΚB P65
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甲基莲心碱减轻D-半乳糖胺/脂多糖诱导的小鼠急性肝损伤作用研究 预览 被引量:1
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作者 王念 魏纯玲 +2 位作者 蒋世双 陶武 唐泽 《实用肝脏病杂志》 CAS 2018年第4期545-548,共4页
目的研究甲基莲心碱对D-半乳糖胺/脂多糖诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用。方法将80只小鼠随机分为4组(n=20),在正常组和模型组小鼠给予生理盐水灌胃,而在另两实验组则分别给予小剂量(100 mg.kg-1)和大剂量(300 mg.kg-1)甲基莲心碱灌胃... 目的研究甲基莲心碱对D-半乳糖胺/脂多糖诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用。方法将80只小鼠随机分为4组(n=20),在正常组和模型组小鼠给予生理盐水灌胃,而在另两实验组则分别给予小剂量(100 mg.kg-1)和大剂量(300 mg.kg-1)甲基莲心碱灌胃。然后在实验组给予D-半乳糖胺/脂多糖诱导制备急性肝损伤模型。每组选择10只小鼠取血,分别检测血清ALT、AST、SOD、MDA、GSH、TNF-α、IL-6和IL-10水平,并取肝组织,行病理学检查,另10只小鼠用于观察存活期。结果模型组小鼠血清ALT和AST水平分别为(272.4±42.8)U/L和(497.2±62.1)U/L,甲基莲心碱处理组小鼠血清ALT和AST水平均显著降低,差异有统计学意义(P<0.05),而以大剂量甲基莲心碱处理组为明显;模型组小鼠血清SOD和GSH水平分别为(37.5±6.2)U/mL和(11.8±2.7)μmol/L,血清MDA水平为(9.2±1.4)mol/L,甲基莲心碱处理组小鼠血清SOD和GSH水平显著高于模型组,而血清MDA水平显著低于模型组(P<0.05);模型组小鼠血清TNF-α、IL-6和IL-10水平分别为(587.6±48.9)pg/ml、(153.4±18.0)pg/ml和(96.4±9.7)pg/ml,甲基莲心碱处理组小鼠血清TNF-α和IL-6水平显著降低,血清IL-10水平显著升高(P<0.05),而大剂量甲基莲心碱处理组小鼠血清TNF-α、IL-6和IL-10水平与小剂量甲基莲心碱处理组比,差异无统计学意义(P>0.05);模型组小鼠12 h存活率为60.0%,24 h存活率为10.0%,小剂量甲基连心碱处理组小鼠12 h存活率为80.0%,24 h存活率为50.0%,而大剂量甲基莲心碱处理组小鼠12 h存活率为90.0%,24 h存活率为70.0%,组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论甲基莲心碱可缓解D-半乳糖胺/脂多糖诱导的小鼠急性肝损伤,其机制可能与抑制氧化应激反应有关。 展开更多
关键词 急性肝损伤 甲基莲心 氧化应激 D-半乳糖胺 脂多糖 小鼠
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发展基于活细胞的FlexStation3高通量钙荧光方法及筛选TRPV3通道抑制剂(英文)
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作者 孙晓梅 卫宁宁 +1 位作者 孙晓颖 王克威 《中国药学:英文版》 CAS CSCD 2017年第9期675-683,共9页
为了建立高通量筛选TRPV3通道调节剂的方法,本研究利用FlexStation3酶标仪,针对瞬时转染TRPV3通道的HEK293T细胞的密度、Cal-520染料的浓度及染料孵育时间进行了条件优化。结果显示,40 000个细胞/孔、5.0%的Cal-520染料浓度及1.5 h的染... 为了建立高通量筛选TRPV3通道调节剂的方法,本研究利用FlexStation3酶标仪,针对瞬时转染TRPV3通道的HEK293T细胞的密度、Cal-520染料的浓度及染料孵育时间进行了条件优化。结果显示,40 000个细胞/孔、5.0%的Cal-520染料浓度及1.5 h的染料孵育时间为最佳实验条件。应用该筛选方法,筛选并发现来源于睡莲科植物的有效成分甲基莲心碱(neferine)能够抑制TRPV3通道,该抑制作用经全细胞膜片钳实验证实并测得其IC_(50)为24.5±4.1μM(n=6)。对其它TRPV通道成员的选择性电生理学评价结果显示,甲基莲心碱对TRPV1和TRPV4通道无抑制作用。总之,实验数据显示,Flex Station3高通量钙荧光筛选可以用于发现TRPV3以及其他TRP通道的调节剂,筛选发现的天然产物甲基莲心碱可以作为TRPV3通道的工具药研究通道的药理学功能。 展开更多
关键词 TRPV3通道抑制剂 甲基莲心 FlexStation3 全细胞膜片钳 钙离子
甲基莲心碱对UV致人皮肤成纤维细胞氧化损伤的影响
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作者 曹瑾 杨壮群 +4 位作者 Abidullah Khan 舒茂国 温绣蔺 王瑞 白转丽 《中国皮肤性病学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第8期830-833,共4页
目的 探讨甲基莲心碱抗光老化的作用机制,为防治皮肤光老化性疾病提供实验依 据。方法 建立中长波紫外线辐射人皮肤成纤维细胞光老化模型,实验分为对照组、模型组 (单纯UVA+UVB照射)和药物组(UVA+UVB照射后加0.4μmol/L,0.8μmol/L... 目的 探讨甲基莲心碱抗光老化的作用机制,为防治皮肤光老化性疾病提供实验依 据。方法 建立中长波紫外线辐射人皮肤成纤维细胞光老化模型,实验分为对照组、模型组 (单纯UVA+UVB照射)和药物组(UVA+UVB照射后加0.4μmol/L,0.8μmol/L,1.6μmol/L甲基 莲心碱干预),检测细胞内ROS的水平和SOD和GPx的活力及MDA的含量。结果 与模型组相比, 甲基莲心碱可以降低ROS水平及MDA含量(P〈0.05),同时提高SOD及GPx的活力 (P〈0.05)。结论 适当浓度的甲基莲心碱能降低光老化细胞内ROS引起的氧化损 伤,增加细胞内抗氧化酶的活性,减轻细胞膜脂质过氧化作用,延缓了皮肤光老化的进程。 展开更多
关键词 光老化 紫外线 甲基莲心
甲基莲心碱对LPS诱导人脐血管内皮细胞损伤中NF-κB信号通路及相关因子表达的影响 预览 被引量:1
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作者 戴谆 宋金春 《中国药物警戒》 2017年第3期129-132,共4页
目的观察甲基莲心碱对LPS诱导的与平滑肌细胞共培养的人脐血管内皮细胞中NF-κB信号通路及相关黏附因子的表达的影响,探讨甲基莲心碱抗动脉粥样硬化的分子机制.方法Tmnswell板建立人脐血管内皮细胞及平滑肌细胞共培养体系后,通过脂多糖... 目的观察甲基莲心碱对LPS诱导的与平滑肌细胞共培养的人脐血管内皮细胞中NF-κB信号通路及相关黏附因子的表达的影响,探讨甲基莲心碱抗动脉粥样硬化的分子机制.方法Tmnswell板建立人脐血管内皮细胞及平滑肌细胞共培养体系后,通过脂多糖(LPS)建立损伤模型,分别用含梯度浓度(0、0.1、0.3、1、3μmol ·L^-1)甲基莲心碱的培养液培养24h.采用免疫印迹法(Westernblot)检测人脐血管内皮细胞(HUVECs)内NF-κB信号通路相关蛋白表达的变化;采用实时荧光定量PCR方法检测黏附因子TNF-α和细胞间黏附因子-1(ICAM-1)mRNA的相对表达.结果在甲基莲心碱干预LPS诱导损伤的VEC-SMC共培养体系后,降低了NF-κBP65的表达,提高IκB-α的表达;下调TNF-α和ICAM-1相关炎性因子的表达,且成-定的浓度依赖性.结论甲基莲心碱通过抑制血管内皮细胞NF-κB信号通路,下调相关炎性因子的表达,减少炎症反应,从而抗动脉粥样硬化. 展开更多
关键词 甲基莲心 脂多糖 人脐血管内皮细胞 NF-aB信号通路 炎性因子
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甲基莲心碱对HepG2细胞增殖及凋亡的影响
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作者 李娜 宋金春 《中国药师》 CAS 2017年第11期1957-1961,共5页
目的:研究甲基莲心碱对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响。方法:采用CCK-8法观察甲基莲心碱对人肝癌细胞HepG2细胞生长增殖的影响;Hoechst33258染色观察甲基莲心碱作用HepG2细胞后细胞形态的变化;测定乳酸脱氢酶(LDH)释放率观察He... 目的:研究甲基莲心碱对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响。方法:采用CCK-8法观察甲基莲心碱对人肝癌细胞HepG2细胞生长增殖的影响;Hoechst33258染色观察甲基莲心碱作用HepG2细胞后细胞形态的变化;测定乳酸脱氢酶(LDH)释放率观察HepG2细胞受损程度;Annexin V—PI双染测定甲基莲心碱对HepG2细胞凋亡率的影响;PL/RNase单染检测不同浓度的甲基莲心碱对其凋亡周期的影响。结果:甲基莲心碱对体外培养的人肝癌HepG2细胞的生长具有抑制作用,且呈剂量、时间依赖性;细胞膜的受损程度随着药物剂量的增大逐步提高;Hoechst33258及流式结果表示,甲基莲心碱可使HepG2细胞阻滞于G0/G1期,细胞凋亡率随药物浓度的增大亦呈增长趋势。结论:甲基莲心碱可显著抑制肝癌HepG2细胞的生长增殖,并在一定的范围内呈剂量、时间依赖性,诱导其阻滞于G0/G1期,发生晚期凋亡。 展开更多
关键词 甲基莲心 HEPG2细胞 增殖 细胞凋亡
甲基莲心碱和异莲心碱对5α-还原酶抑制作用的研究 被引量:1
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作者 杨小青 宋金春 侯孝晨 《中国药师》 CAS 2016年第3期495-498,共4页
目的:观察甲基莲心碱和异莲心碱对5α-还原酶的抑制作用,为开发5α-还原酶抑制药提供参考依据。方法:设置不同反应管和对照管,将肝脏匀浆液、还原性辅酶Ⅱ(NADPH)、睾酮、待测样品、阳性对照药及缓冲液分别加入到96孔板中,借助酶标... 目的:观察甲基莲心碱和异莲心碱对5α-还原酶的抑制作用,为开发5α-还原酶抑制药提供参考依据。方法:设置不同反应管和对照管,将肝脏匀浆液、还原性辅酶Ⅱ(NADPH)、睾酮、待测样品、阳性对照药及缓冲液分别加入到96孔板中,借助酶标仪,测定340 nm处1 h内NADPH的吸光度变化值,空白对照组与实验组比较,计算受试药物对5α-还原酶的抑制率大小。结果:在实验设定的6个浓度梯度(2~40 mg·ml(-1))中,甲基莲心碱和异莲心碱最佳的抑制作用浓度均为10 mg·ml(-1),抑制率分别为(25.00±1.030)%和(29.90±2.410)%;与空白组相比,甲基莲心碱和异莲心碱表现出明显的5α-还原酶抑制作用(P〈0.05);同浓度(10 mg·ml(-1))下,甲基莲心碱和异莲心碱对5α-还原酶抑制作用低于阳性对照组(P〈0.05);与甲基莲心碱相比,异莲心碱对5α-还原酶抑制作用更显著(P〈0.05)。结论:甲基莲心碱和异莲心碱对5α-还原酶有较强抑制作用,在治疗良性前列腺增生疾病方面,有一定的应用前景。 展开更多
关键词 甲基莲心 莲心 5Α-还原酶 抑制作用 前列腺增生
莲心碱与甲基莲心碱在大鼠体内的药动学研究 预览
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作者 丰攀峰 樊攀 +2 位作者 范胜军 原慧萍 李宝馨 《中国科技论文》 CAS 北大核心 2016年第12期1372-1377,共6页
采用高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)法测定莲心碱与甲基莲心碱在大鼠体内的血药浓度,并对2种生物碱的药动学及体内分布进行研究,比较2种生物碱在大鼠体内的药动学和组织分布差异。结果表明:建立的RP-HPL... 采用高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)法测定莲心碱与甲基莲心碱在大鼠体内的血药浓度,并对2种生物碱的药动学及体内分布进行研究,比较2种生物碱在大鼠体内的药动学和组织分布差异。结果表明:建立的RP-HPLC适用于2种生物碱的体内药物浓度分析;莲心碱静脉注射给药后在大鼠血浆中的药物浓度-时间曲线符合二室模型;2种生物碱静脉注射给药后,均主要分布于大鼠的心、肝、脾、肺和肾,浓度依次为肾〉肺〉心〉肝〉脾,而在脑组织中均未检测到两种生物碱。本实验所建立的大鼠血浆和组织中莲心碱与甲基莲心碱含量的HPLC法具有专属、准确、简单及灵敏度等特点,适用于大鼠体内的药动学和组织分布学研究;静脉注射给药后,2种生物碱在大鼠体内均符合二室模型代谢;组织分布学研究表明,2种生物碱给药后均能分布于心、肝、脾、肺和肾等主要脏器但不能穿透血脑屏障。 展开更多
关键词 药理学 莲心 甲基莲心 药动学 高效液相色谱法 血浆 组织分布
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