期刊文献+
共找到3篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
猪流感病毒H1N1亚型HA蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
1
作者 朱和超 范桂芳 +3 位作者 朱莉莉 彭忠 华琳 吴斌 《畜牧与兽医》 北大核心 2019年第6期81-85,共5页
为获得H1N1亚型猪流感病毒(SIV)血凝素(HA)蛋白的单克隆抗体(McAb),选取A/swine/NanChang/H1N1/2009毒株,病毒经增殖、超速离心后,收集病毒粒子作为免疫原,将SIV粒子包被建立了间接ELISA方法。将免疫4次的BALB/c小鼠,经间接ELISA测定小... 为获得H1N1亚型猪流感病毒(SIV)血凝素(HA)蛋白的单克隆抗体(McAb),选取A/swine/NanChang/H1N1/2009毒株,病毒经增殖、超速离心后,收集病毒粒子作为免疫原,将SIV粒子包被建立了间接ELISA方法。将免疫4次的BALB/c小鼠,经间接ELISA测定小鼠血清效价,将效价高的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞(sp2/0)进行融合。采用间接ELISA的方法筛选效价高的阳性细胞孔,采用有限稀释法进行3轮亚克隆,得到了5株杂交瘤细胞株,分别命名为2C6、5G5、1D5、3G3、4F11。随后对5株杂交瘤细胞的亚型进行鉴定,显示2C6、1D5、4F11为IgM亚型,5G5、3G3为IgG1亚型,5株杂交瘤的L链均为k链。间接免疫荧光(IFA)和Western blot检测表明,5G5能够与HA蛋白发生特异性的结合。本研究为进一步建立H1亚型SIV的相关检测方法及对HA蛋白的功能研究奠定基础。 展开更多
关键词 流感病毒 流感病毒血凝素蛋白 杂交瘤细胞 单克隆抗体
利用两种真核昆虫表达系统表达可溶性甲型H1N1血凝素蛋白 被引量:2
2
作者 王浩 马驰 +2 位作者 崔莲仙 巴德年 何维 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期345-349,共5页
目的利用两种昆虫杆状病毒表达系统表达甲型H1N1血凝素(haemegglutinin,HA)蛋白,进而获得具有生物学活性的目的蛋白。方法选取中国内地第1例2009甲型H1N1确诊病例病毒株A/Sichuan/1/2009(H1N1),人工合成完整HA基因序列;分别... 目的利用两种昆虫杆状病毒表达系统表达甲型H1N1血凝素(haemegglutinin,HA)蛋白,进而获得具有生物学活性的目的蛋白。方法选取中国内地第1例2009甲型H1N1确诊病例病毒株A/Sichuan/1/2009(H1N1),人工合成完整HA基因序列;分别利用杆状病毒表达系统BaculoGoldsystem和Bac—to-Bacsystem,在昆虫细胞中表达日的基因HA;经亲和层析纯化及Westernblot搭定,红细胞血凝试验检测ttA蛋门的生物学活性。结果获得测序正确的HA基因,分别克隆到pAcGP67B(Baculo Goldsystem)和pFASTBacl(Bac-to-Bacsystem)载体,经杆状病毒同源重组后转染Sf9细胞,Westernblot鉴定硅示,BaculoGoldsystem表达HA蛋白是分泌型的,而Bac—to—Bacsystem是胞内表达且表达效果优于前者;血凝试验证实,这两种表达系统表达的HA蛋白均具有生物学活性。结论利用杆状病毒表达系统成功表达出具有生物学活性的HA蛋白,Bac—to-Bacsystem更适合表达HA蛋白,为流感病毒的相关研究提供了保障。 展开更多
关键词 流感病毒血凝素蛋白 昆虫杆状病毒表达系统 BaculoGold system BAC-TO-BAC sys-tern 血凝试验
绿色荧光蛋白-流感病毒血凝素蛋白-宫颈癌细胞特异性穿膜肽融合蛋白的表达及其体外穿膜活性分析
3
作者 王琥 柳长柏 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期183-187,共5页
目的获得具备从内含体逃逸的宫颈癌特异性穿膜肽GFP—HA-PTP融合蛋白,探讨其在宫颈癌细胞中的靶向穿膜效应。方法构建pET15b-GFP—HA-PTP融合原核表达质粒,并转化大肠杆菌B121,经IPTG诱导和NI-NTA树脂纯化得到融合蛋白。经Westernblo... 目的获得具备从内含体逃逸的宫颈癌特异性穿膜肽GFP—HA-PTP融合蛋白,探讨其在宫颈癌细胞中的靶向穿膜效应。方法构建pET15b-GFP—HA-PTP融合原核表达质粒,并转化大肠杆菌B121,经IPTG诱导和NI-NTA树脂纯化得到融合蛋白。经Westernblotting分析确认后,于荧光显微镜下观察GFP-HA-PTP的靶向穿膜活性。结果大肠杆菌高效表达了经Westemblot鉴定正确的FP-HA-PTP融合蛋白,且此融合蛋白能够靶向宫颈癌细胞株Siha和Caski,并高效地从内含体中逃逸进入胞浆。结论GFP—HA-PTP融合蛋白能够高效靶向穿膜进入培养宫颈癌细胞。 展开更多
关键词 细胞膜穿透肽 流感病毒血凝素2蛋白 宫颈癌 靶向导入
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部 意见反馈