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四种石油分散液对栉孔扇贝和刺参的急性毒性研究
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作者 周媛媛 林雨霏 +3 位作者 石晓勇 韩秀荣 李志林 吴老五 《海洋环境科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期353-360,共8页
选择栉孔扇贝(Chlamys farreri)和刺参(Apostichopus japonicus)作为受试生物,采用半静态试验法测定了原油、燃料油分散液(WAF)以及添加消油剂后的乳化液(DWAF)对两种生物的毒性效应。采用概率单位算法并利用SPSS 13.0进行数据处理,计算... 选择栉孔扇贝(Chlamys farreri)和刺参(Apostichopus japonicus)作为受试生物,采用半静态试验法测定了原油、燃料油分散液(WAF)以及添加消油剂后的乳化液(DWAF)对两种生物的毒性效应。采用概率单位算法并利用SPSS 13.0进行数据处理,计算出96h-LC50。结果表明,4种石油烃对栉孔扇贝和刺参的96h-LC50为:DWAF燃料油(1.14 mg/L,0.16 mg/L)>DWAF原油(1.39 mg/L,0.74 mg/L)>WAF燃料油(1.80 mg/L,4.10 mg/L)>WAF原油(3.40 mg/L,6.44 mg/L)。4种石油分散液对两种生物均有明显致毒效应;轻质油(燃料油)的毒性效应较重质油(原油)大;加入消油剂后石油烃毒性增强,并且对刺参的毒性增强更明显,建议使用栉孔扇贝和刺参共同评估海洋溢油生态损害。 展开更多
关键词 石油 消油剂 扇贝 刺参 96h-LC50
c-Myc基因在栉孔扇贝年周期发育性腺中的表达特征 预览
2
作者 杨丹丹 邓春 +2 位作者 杨乾坤 秦贞奎 张志峰 《中国海洋大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期55-62,共8页
c-MYC在高等脊椎动物的细胞增殖、细胞分化和癌症发生中具有重要的调控作用。本研究克隆了栉孔扇贝c-Myc基因的全长cDNA序列,分析了其在性腺年周期发育和配子发生过程中的表达特征。栉孔扇贝c-MyccDNA全长2943bp,可编码397个氨基酸,推... c-MYC在高等脊椎动物的细胞增殖、细胞分化和癌症发生中具有重要的调控作用。本研究克隆了栉孔扇贝c-Myc基因的全长cDNA序列,分析了其在性腺年周期发育和配子发生过程中的表达特征。栉孔扇贝c-MyccDNA全长2943bp,可编码397个氨基酸,推导的氨基酸序列中除了包含MYC家族的保守结构域外,还具有c-MYC蛋白所特有的Myc-N转录激活区。qRT-PCR结果显示,栉孔扇贝卵巢中的c-MycmRNA水平随着卵巢的发育和成熟显著升高;精巢中的表达水平在成熟期之前(休止期至生长期)逐渐升高,但在成熟期精巢中的表达水平显著低于增殖期和生长期。原位杂交和免疫组织化学结果显示,c-MycmRNA及c-MYC蛋白的阳性信号均可在栉孔扇贝精巢的精原细胞和精母细胞以及卵巢的所有生殖细胞中检测到,推测其可能与栉孔扇贝的性腺发育和配子发生过程有关。 展开更多
关键词 扇贝 C-MYC 配子发生 性腺发育
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栉孔扇贝高多态基因筛查及其表达特征分析 预览
3
作者 夏雨 李语丽 +6 位作者 刘晶 李亚娟 姚立杰 杨志辉 刘雅然 包振民 王师 《中国海洋大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期41-48,共8页
双壳贝类经历了几亿年的进化过程,在复杂多变的海洋环境中展现出了非凡的环境适应能力,而基因组的高多态性被认为与其环境适应性有关。本研究利用栉孔扇贝基因组重测序数据、早期发育及成体转录组数据分析了基因的多态性与表达特征。在... 双壳贝类经历了几亿年的进化过程,在复杂多变的海洋环境中展现出了非凡的环境适应能力,而基因组的高多态性被认为与其环境适应性有关。本研究利用栉孔扇贝基因组重测序数据、早期发育及成体转录组数据分析了基因的多态性与表达特征。在栉孔扇贝基因组中共鉴定到了1186个高多态基因,这些基因在染色体上呈现非均匀分布,并且在胚胎发育时期和成体组织中呈现出独特的表达特征。功能富集分析显示这些多态基因可能为扇贝胚胎发育的可塑性和成体的环境适应性提供了分子基础。研究还发现2个多拷贝基因——mucin和C1qDC具有显著的高多态性,可能在免疫系统防御和清除病原的过程中发挥了重要作用。本研究对高多态基因的表达特征和多态性进行了联合分析,为解析扇贝适应性进化的分子机制提供了线索。 展开更多
关键词 扇贝 单核苷酸多态性 高多态基因 适应性进化
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溢油污染物在栉孔扇贝不同组织的富集特异性及生物放大效应的初步研究 预览
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作者 景玉婷 李志林 +2 位作者 张传松 石晓勇 张海波 《生态毒理学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期135-143,共9页
本文采用半静态暴露实验法,研究了栉孔扇贝(Chlamys farreri)的不同组织对船舶常用燃料油0#柴油分散液和乳化液的富集及其在食物链传递过程中的生物放大效应。结果表明:(1)在不同浓度柴油分散液和柴油乳化液中,扇贝暴露8d后不同软组织... 本文采用半静态暴露实验法,研究了栉孔扇贝(Chlamys farreri)的不同组织对船舶常用燃料油0#柴油分散液和乳化液的富集及其在食物链传递过程中的生物放大效应。结果表明:(1)在不同浓度柴油分散液和柴油乳化液中,扇贝暴露8d后不同软组织对柴油的生物富集系数BCF均表现为鳃(889.40~127.92mL·g^-1、830.80~123.43mL·g^-1)>内脏团(293.80~58.46mL·g^-1、184.00~130.53mL·g^-1)>肌肉(147.60~39.68mL·g^-1、149.80~62.40mL·g^-1),腮和内脏对石油的富集能力强于肌肉,各组织对柴油分散液的富集能力强于柴油乳化液;(2)用石油烃(TPH)浓度分别为1.74×10^-10mg·cell^-1、4.44×10^-10mg·cell^-1的三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum Bohlin)喂养扇贝后,扇贝体内石油烃(TPH)浓度随时间的延长和藻体浓度的上升都表现出增加的趋势,到第8天实验结束时扇贝体内TPH浓度达到7.79mg·kg^-1和9.61mg·kg^-1,表明TPH通过浮游植物的摄食在扇贝体内造成累积,通过食物链进行了传递。 展开更多
关键词 柴油 消油剂 扇贝 毒性 生物富集
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不同许氏平鮋与栉孔扇贝养殖系统水-气界面CO2通量及其主要影响因子
5
作者 张东旭 田相利 +2 位作者 董双林 王明阳 刘龙镇 《应用生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期2447-2456,共10页
本试验建立了4组中型实验生态系统,即空白对照系统、许氏平鮋单养系统、栉孔扇贝单养系统和许氏平鮋-栉孔扇贝混养系统,利用静态箱-气相色谱法对各养殖系统水-气界面CO2通量进行观测,并测定养殖水体物理、化学和生物指标.结果表明:试验... 本试验建立了4组中型实验生态系统,即空白对照系统、许氏平鮋单养系统、栉孔扇贝单养系统和许氏平鮋-栉孔扇贝混养系统,利用静态箱-气相色谱法对各养殖系统水-气界面CO2通量进行观测,并测定养殖水体物理、化学和生物指标.结果表明:试验期间,空白对照系统表现为稳定的对大气CO2的源,平均通量为12.42 mg·m^-2·h^-1.扇贝单养系统在试验前期和中期为CO2的源,后期为CO2的汇,试验期间整体为CO2的源,平均通量为10.95 mg·m^-2·h^-1.许氏平鮋单养系统和许氏平鮋-栉孔扇贝混养系统在试验前期表现为CO2源,实验中后期为CO2的汇,试验期间平均通量分别为-3.53和-10.49 mg·m^-2·h^-1,整体上均为对大气CO2的汇.回归分析结果显示,水体pH是水-气界面CO2通量较好的预测因子,pH=8.25是系统水-气界面碳源/汇功能发生转变的临界值.线性混合模型分析结果显示,水体净初级生产力是影响各系统水-气界面CO2通量的主要因子,表明浮游植物是调控系统水-气界面CO2通量的主要生物内动力.在本试验混养密度条件下的栉孔扇贝能一定程度上促进浮游植物生物量和水体初级生产力,从而增强系统水-气界面CO2的碳汇功能. 展开更多
关键词 CO2通量 水-气界面 养殖系统 许氏平鮋 扇贝
0#柴油分散液和乳化液对栉孔扇贝的急性毒性效应及富集差异性分析
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作者 景玉婷 李志林 +1 位作者 张传松 石晓勇 《海洋环境科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期898-904,共7页
本文以我国船舶常用燃料油0#柴油作为实验油品,以常用作海洋污染物指示的栉孔扇贝为受试生物,采用半静态暴毒实验法分别开展了栉孔扇贝对0#柴油分散液和柴油乳化液的急性毒性效应、富集与释放特征的对比研究。结果表明:(1)石油烃对栉孔... 本文以我国船舶常用燃料油0#柴油作为实验油品,以常用作海洋污染物指示的栉孔扇贝为受试生物,采用半静态暴毒实验法分别开展了栉孔扇贝对0#柴油分散液和柴油乳化液的急性毒性效应、富集与释放特征的对比研究。结果表明:(1)石油烃对栉孔扇贝具有较强的毒性效应,栉孔扇贝在柴油分散液中的96 h-LC50为2.68 mg/L,在柴油乳化液中的96 h-LC50为1.74 mg/L,二者均为高毒物质,消油剂的使用增加了柴油对扇贝的毒性;(2)栉孔扇贝在柴油乳化液中的稳态生物富集系数BCF1为404.6~91.75 mg/L,动力学生物富集系数BCF2为1973.80~327.06 mL/g,动力学吸收速率常数ku为8.89~0.71 mL/(g·h),均大于同浓度下在柴油分散液中BCF(292.2~49.6 mL/g、1412.4~106.5 mL/g)和ku(6.92~0.48 mL/(g·h)),表明栉孔扇贝对柴油乳化液有更强的富集能力与富集速率。 展开更多
关键词 柴油 消油剂 扇贝 毒性效应 富集与释放
青岛农大等完成紫扇贝基因组测序 预览
7
《水产科技情报》 2018年第3期174-175,共2页
青岛农业大学教授王春德课题组与合作者完成紫扇贝基因组的测序和分析,这是我国继虾夷扇贝和栉孔扇贝之后完成的世界第三个扇贝基因组,相关成果日前在线发表于开放获取期刊Giga Science。此次测序为从分子水平解析紫扇贝及其杂交扇贝的... 青岛农业大学教授王春德课题组与合作者完成紫扇贝基因组的测序和分析,这是我国继虾夷扇贝和栉孔扇贝之后完成的世界第三个扇贝基因组,相关成果日前在线发表于开放获取期刊Giga Science。此次测序为从分子水平解析紫扇贝及其杂交扇贝的生长、抗逆性、育性和寿命等重要性状的决定机制及分子育种打下了基础。 展开更多
关键词 基因组测序 扇贝 青岛 农业大学 虾夷扇贝 GIGA 分子水平 分子育种
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虾夷扇贝EST-SSR标记在栉孔扇贝中的通用性研究 预览 被引量:1
8
作者 张广明 孙秀俊 +5 位作者 吴彪 杨爱国 刘志鸿 周丽青 刘寒苗 赵庆 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2018年第4期139-146,共8页
为研究虾夷扇贝(Patinopecten yessoensis)和栉孔扇贝(Chlamys farreri)的群体遗传多样性并分析其亲缘关系,对在虾夷扇贝中开发的60个EST-SSR位点在栉孔扇贝中的通用性进行了研究。结果显示,21个位点可在栉孔扇贝中扩增出特异性条带... 为研究虾夷扇贝(Patinopecten yessoensis)和栉孔扇贝(Chlamys farreri)的群体遗传多样性并分析其亲缘关系,对在虾夷扇贝中开发的60个EST-SSR位点在栉孔扇贝中的通用性进行了研究。结果显示,21个位点可在栉孔扇贝中扩增出特异性条带,通用性比例达35.00%,其中,17个位点具有多态性,多态性比例达28.33%。在虾夷扇贝和栉孔扇贝群体中,平均等位基因数(Na)分别为2.7647和2.3529;平均有效等位基因数(Ne)分别为1.9487和1.6350;平均观测杂合度(Ho)为0.6314和0.3333;平均期望杂合度(He)为0.4569和0.3139;平均多态信息含量(PIC)为0.3726和0.2597;Nei's(1973)基因多样性指数(I)分别为0.4493和0.3087;Shannon信息指数分别为0.7176和0.5041;固定指数(Fis)检测发现,7个位点偏离了Hardy-Weinberg平衡;遗传分化系数(Fst)为0.2398。本研究开发的21对通用性EST-SSR标记,为进一步开展虾夷扇贝和栉孔扇贝遗传多样性分析、分子辅助育种、基因发掘和种质资源评价奠定了基础。 展开更多
关键词 虾夷扇贝 扇贝 EST-SSRS 微卫星 多态性 通用性
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栉孔扇贝♀×海湾扇贝♂受精细胞学观察及杂交后代生长发育的观察
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作者 张哲 于瑞海 +3 位作者 李玲蔚 马培振 刘星宇 赵振业 《海洋湖沼通报》 CSCD 北大核心 2018年第4期58-65,共8页
本文采用DAPI染色荧光显微方法连续观察了栉孔扇贝♀×海湾扇贝♂的受精细胞学过程,发现海湾扇贝精子可以正常入卵,并能完成后续的发育过程获得杂交后代。同时进行栉孔扇贝♀×海湾扇贝♂杂交组及栉孔扇贝、海湾扇贝自交组3组实... 本文采用DAPI染色荧光显微方法连续观察了栉孔扇贝♀×海湾扇贝♂的受精细胞学过程,发现海湾扇贝精子可以正常入卵,并能完成后续的发育过程获得杂交后代。同时进行栉孔扇贝♀×海湾扇贝♂杂交组及栉孔扇贝、海湾扇贝自交组3组实验,对各组的受精率、卵裂率、D形幼虫孵化率、幼虫生长速度、幼虫存活率进行统计分析,实验结果表明:杂交组的受精率为92.77%,卵裂率为81.46%,D形幼虫孵化率为51.23%,杂交组幼虫在培育到第7天时全部死亡,栉孔扇贝和海湾扇贝自交组的幼虫可正常发育到眼点幼虫,杂交组幼虫在其存活阶段的生长和2自交组无显著性差异,但成活率差异显著。 展开更多
关键词 扇贝 海湾扇贝 杂交 自交 荧光显微观察 生长发育
桑沟湾海域栉孔扇贝健康苗种繁育技术
10
作者 马贵范 《齐鲁渔业》 2018年第4期16-18,共3页
近年来,由于水质污染、种质退化,虾夷扇贝、栉孔扇贝、海湾扇贝等双壳贝类幼虫面盘解体病频发,健康苗种繁育工作面临前所未有的挑战[1-4]。一方面,受人类养殖行为的干扰,扇贝养殖区浮游生物量骤减,加剧了亲贝性腺发育不良、软体... 近年来,由于水质污染、种质退化,虾夷扇贝、栉孔扇贝、海湾扇贝等双壳贝类幼虫面盘解体病频发,健康苗种繁育工作面临前所未有的挑战[1-4]。一方面,受人类养殖行为的干扰,扇贝养殖区浮游生物量骤减,加剧了亲贝性腺发育不良、软体部消瘦、雌雄同体比例增加的现象。另一方面,水粘性增大,容易阻塞面盘幼虫鳃纤毛的运动,极易发生幼虫面盘解体病,导致苗种繁育工作的失败。对此,笔者以桑沟湾为例. 展开更多
关键词 苗种繁育技术 扇贝 桑沟湾 健康 面盘解体病 海域 面盘幼虫 水质污染
栉孔扇贝foxl2基因在卵子发生中的必要性 预览
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作者 刘晓玲 刘军 +3 位作者 王振东 王振华 李彦伸 崔龙波 《海洋科学》 CSCD 北大核心 2018年第4期127-131,共5页
采用RNAi技术研究了栉孔扇贝(Chlamys farreri)foxl2基因在卵子发生和卵巢功能维持中的作用。使用体外合成的栉孔扇贝foxl2双链RNA(dsRNA),以每只50μg/次的剂量注射进闭壳肌中,连续注射2次(第一次注射后7天,再进行第二次注射);以注射... 采用RNAi技术研究了栉孔扇贝(Chlamys farreri)foxl2基因在卵子发生和卵巢功能维持中的作用。使用体外合成的栉孔扇贝foxl2双链RNA(dsRNA),以每只50μg/次的剂量注射进闭壳肌中,连续注射2次(第一次注射后7天,再进行第二次注射);以注射相同体积PBS(相同注射方法)的扇贝作为阴性对照组,以不注射扇贝作为空白对照组。qRT-PCR检测干扰组扇贝卵巢中的foxl2 mRNA表达量较空白对照组下降了62%,Western blotting检测该蛋白在卵巢中的含量也明显下降,显示靶基因的表达水平被有效地敲降。组织学观察发现,栉孔扇贝foxl2干扰后的卵巢中卵母细胞形态异常、细胞核固缩,卵子发生明显受阻。表明该基因在栉孔扇贝卵子发生中起重要作用。 展开更多
关键词 扇贝 卵巢 卵子发生 FOXL2 RNAI
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氟苯尼考浸泡栉孔扇贝后各组织中含量的测定 预览 被引量:2
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作者 周飞飞 李志林 +2 位作者 苏荣国 石晓勇 韩秀荣 《中国海洋大学学报:自然科学版》 CSCD 北大核心 2018年第4期48-56,共9页
以栉孔扇贝(Chlamysfarreri)为对象,研究了其不同组织对氟苯尼考的蓄积与消除规律。氟苯尼考对栉孔扇贝的96h半致死浓度LC50为213.1mg·L-1,安全浓度为21.3mg·L-1。将栉孔扇贝分别暴露于氟苯尼考含量在安全浓度以上(40mg&#... 以栉孔扇贝(Chlamysfarreri)为对象,研究了其不同组织对氟苯尼考的蓄积与消除规律。氟苯尼考对栉孔扇贝的96h半致死浓度LC50为213.1mg·L-1,安全浓度为21.3mg·L-1。将栉孔扇贝分别暴露于氟苯尼考含量在安全浓度以上(40mg·L-1,A组)、安全浓度水平(20mg·L-1,B组)和安全浓度以下(10mg·L-1,C组)进行8天的蓄积实验,从第9天开始将栉孔扇贝转移至洁净的海水中进行5天的消除实验。研究表明:蓄积阶段,栉孔扇贝各组织中氟苯尼考含量随海水中氟苯尼考浓度的升高而增加;而同一时间的生物蓄积系数(BCF)则随海水中氟苯尼考浓度的升高而逐渐降低,表明在低剂量浓度条件下,栉孔扇贝更容易对氟苯尼考产生富集作用。各组织中氟苯尼考浓度大小顺序为:内脏团>外套膜>闭壳肌,其中,内脏团与外套膜中氟苯尼考含量大约是闭壳肌的2~7倍,表明氟苯尼考主要富集在栉孔扇贝的内脏团及外套膜中,闭壳肌中含量较少。消除阶段,氟苯尼考的日均消除速率大小顺序为内脏团>外套膜>闭壳肌,且A组>B组>C组,说明作为主要食用部位的闭壳肌对氟苯尼考的消除速率相对较慢。在较高浓度氟苯尼考下,闭壳肌需要经过一段时间的净化才能使氟苯尼考含量降至低于0.1mg·kg-1以下。研究结果为在栉孔扇贝养殖中合理施用氟苯尼考提供参考。 展开更多
关键词 氟苯尼考 扇贝 蓄积 消除
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基于长片段PCR扩增的牡蛎疱疹病毒基因组高通量测序 预览 被引量:1
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作者 史杰 白昌明 +2 位作者 李晨 蔡生力 王崇明 《水产学报》 CSCD 北大核心 2018年第2期216-225,共10页
为获取2001年低温冻存栉孔扇贝感染牡蛎疱疹病毒(Os HV-1)变异株(ZK2001)基因组序列,并分析ZK2001与其他Os HV-1变异株的序列差异和系统发育关系,利用基于长片段PCR的基因组DNA的扩增和富集技术,获取2001年栉孔扇贝感染Os HV-1变异... 为获取2001年低温冻存栉孔扇贝感染牡蛎疱疹病毒(Os HV-1)变异株(ZK2001)基因组序列,并分析ZK2001与其他Os HV-1变异株的序列差异和系统发育关系,利用基于长片段PCR的基因组DNA的扩增和富集技术,获取2001年栉孔扇贝感染Os HV-1变异株的基因组DNA;再使用Illumina Hiseq 2500 PE250高通量测序平台对其测序。最后分析ZK2001与Os HV-1其他变异株基因组的序列差异和系统发育关系。测序数据组装后获得8个Scaffold。基因组变异分析结果显示,ZK2001与参考基因组相比存在328个SNP位点,SNP和序列插入/缺失变异是导致Os HV-1基因组序列变异的主要变异类型。系统发育分析结果显示,ZK2001变异株与分离自我国的Os HV-1变异株亲缘关系最近,与分离自欧洲的Os HV-1μvar及其相关变异株的亲缘关系最远,说明中国和欧洲分布Os HV-1间存在因地理隔离导致的遗传分化。研究表明,基于长片段PCR的DNA富集技术,可以有效地扩增和富集冷冻样本中Os HV-1基因组DNA,并应用于高通量测序。Os HV-1不同变异株基因组序列数据的获取和积累,将为其基因组尺度的基因变异、株系演化和系统发育关系等研究提供重要基础。 展开更多
关键词 扇贝 高通量测序 长片段PCR 牡蛎疱疹病毒
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栉孔扇贝心脏细胞的体外培养 预览
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作者 季爱昌 王华 +1 位作者 晏萌 张志峰 《中国水产科学》 CSCD 北大核心 2018年第2期346-353,共8页
体外培养细胞对研究生物的资源保护、功能基因及病害发生机理与防治等均具有重要意义。然而,目前海洋双壳贝类中可以长期存活的组织细胞是有限的。本研究采用植块法启动栉孔扇贝(Chlamys farreri)心脏细胞的原代培养,通过优化培养基的方... 体外培养细胞对研究生物的资源保护、功能基因及病害发生机理与防治等均具有重要意义。然而,目前海洋双壳贝类中可以长期存活的组织细胞是有限的。本研究采用植块法启动栉孔扇贝(Chlamys farreri)心脏细胞的原代培养,通过优化培养基的方法,建立了可使其长期存活的原代培养体系。根据组织块迁出细胞的数量和细胞存活时间,确定L-15是3个培养基(L-15,M199,L-15+M199)中最适宜栉孔扇贝心脏细胞的基础培养基。通过三因子三水平正交实验,得出栉孔扇贝心脏细胞适宜的添加物组合:L-15基础培养基中添加5%胎牛血清、50 mmol/L牛磺酸和6 mmol/L Ca2+。原代培养产物中以心肌细胞为主要的细胞类型,其中部分心肌细胞在原代培养14 d内可进行节奏性搏动;部分细胞可局部形成心肌束和肌管样结构;心肌细胞在体外存活时间达2个月。本研究将为栉孔扇贝基础生物学和功能基因的研究提供细胞平台。 展开更多
关键词 扇贝 心脏细胞 体外培养 正交实验
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栉孔扇贝Foxl2蛋白的原核表达、纯化及多克隆抗体制备与检测 预览 被引量:1
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作者 刘晓玲 王振东 +3 位作者 孙涵甜 王振华 赵振军 李忌 《海洋渔业》 CSCD 北大核心 2018年第4期447-453,共7页
以栉孔扇贝(Chlamys farreri)卵巢cDNA为模板,采用PCR扩增Foxl2(forkhead box l2)基因,通过双酶切与pET-28a构建重组质粒表达载体,转化大肠杆菌感受态细胞DH5α,筛选鉴定阳性克隆,经测序鉴定后提取质粒转化大肠杆菌感受态细胞BL21,... 以栉孔扇贝(Chlamys farreri)卵巢cDNA为模板,采用PCR扩增Foxl2(forkhead box l2)基因,通过双酶切与pET-28a构建重组质粒表达载体,转化大肠杆菌感受态细胞DH5α,筛选鉴定阳性克隆,经测序鉴定后提取质粒转化大肠杆菌感受态细胞BL21,以IPTG诱导Foxl2蛋白表达,用SDS-PAGE鉴定表达情况,经镍柱纯化表达蛋白,通过免疫新西兰白兔(New Zealand white rabbits)制备多克隆抗体,以ELISA测定抗体效价,最后用WB(Western Blot)检测抗体特异性。结果表明,重组载体转化BL21后经1.0 mmol L^(-1)IPTG于37℃诱导6 h可产生大量Foxl2蛋白,主要以包涵体形式表达。经镍柱柱纯化可得到纯度较高的Foxl2蛋白,浓度达800 ug·mL^(-1)。免疫新西兰白兔获得多克隆抗体,效价大于1∶128 000。WB检测显示:该抗体能特异识别扇贝卵巢中的Foxl2蛋白,同时发现Foxl2蛋白在卵巢中强表达,而在精巢中几乎不表达,揭示栉孔扇贝中该蛋白具雌性性别相关性。研究成功获得效价高且能特异识别天然Foxl2的多克隆抗体,为后续深入研究Foxl2在栉孔扇贝卵巢中的功能提供了分子工具。 展开更多
关键词 扇贝 Foxl2蛋白 原核表达 镍柱纯化 多克隆抗体
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硫化物对栉孔扇贝线粒体的损伤研究 预览
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作者 关杨 王宇翔 +2 位作者 毕愿坤 葛顺 张立涛 《生物学通报》 2018年第6期51-53,共3页
硫化物是含有-2价硫离子化合物的统称,会抑制复合体IV活性,是水产养殖中常见的有毒物质。以水产养殖动物栉孔扇贝为研究对象,评估硫化物对线粒体的损伤。研究结果显示硫化物能显著降低栉孔扇贝各组织线粒体活力和SOD酶活,增加线粒体的... 硫化物是含有-2价硫离子化合物的统称,会抑制复合体IV活性,是水产养殖中常见的有毒物质。以水产养殖动物栉孔扇贝为研究对象,评估硫化物对线粒体的损伤。研究结果显示硫化物能显著降低栉孔扇贝各组织线粒体活力和SOD酶活,增加线粒体的肿胀度和MDA含量,影响线粒体的功能,造成线粒体的损伤,进而对栉孔扇贝产生毒害作用。 展开更多
关键词 硫化物 线粒体 扇贝
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日照市北部浅海养殖发展现状及对策研究 预览
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作者 郝志凯 朱秀晶 姚守和 《水产养殖》 CAS 2018年第6期39-41,共3页
日照北部浅海养殖共涉20余个沿海渔村,近400个养殖单位、户,总养殖面积约20万×667 m2,该区域浅海养殖经历了三个发展高峰时期,一是海带发展高峰时期,从1958年开始到20世纪70年代中期,在石臼、秦楼海域发展海带养殖,最大面积达286.7... 日照北部浅海养殖共涉20余个沿海渔村,近400个养殖单位、户,总养殖面积约20万×667 m2,该区域浅海养殖经历了三个发展高峰时期,一是海带发展高峰时期,从1958年开始到20世纪70年代中期,在石臼、秦楼海域发展海带养殖,最大面积达286.7 hm2,产量2 550 t,其间兼养部分贻贝;二是扇贝发展高峰时期,从1986年开始到1996年,栉孔扇贝成为浅海养殖的主要品种. 展开更多
关键词 浅海养殖 养殖发展 日照市 海带养殖 扇贝 养殖面积 最大面积
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栉孔扇贝精巢组织细胞的体外培养及特征分析 预览
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作者 房莎 刘丹雯 +2 位作者 李茜茜 秦贞奎 张志峰 《海洋通报》 CSCD 北大核心 2018年第4期424-429,共6页
本研究建立了一个栉孔扇贝精巢组织细胞的原代培养体系,鉴定了原代细胞的功能基因表达特征。结果显示,原代培养体系中的精巢细胞以圆形细胞为主,直径为4~11μm,其在体外已存活9个月以上。使用栉孔扇贝vasa基因(生殖细胞标记基因)的地... 本研究建立了一个栉孔扇贝精巢组织细胞的原代培养体系,鉴定了原代细胞的功能基因表达特征。结果显示,原代培养体系中的精巢细胞以圆形细胞为主,直径为4~11μm,其在体外已存活9个月以上。使用栉孔扇贝vasa基因(生殖细胞标记基因)的地高辛RNA探针和原位杂交技术检测,约98%的原代细胞呈阳性。利用免疫组化技术鉴定了栉孔扇贝SCP3、KLF4、PIWI、C-MYC、SOX9和SOX17在这些细胞中的表达特征,发现这些靶蛋白在精巢原代细胞中的表达特征与栉孔扇贝精巢中的细胞定位基本一致。上述结果表明,本实验所获得的原代细胞以生殖细胞为主,它们保留了栉孔扇贝雄性生殖细胞原有的基因表达特征,可以用于贝类精子发生和性别相关的功能基因研究。 展开更多
关键词 扇贝 精巢 原代培养 基因表达
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石油烃暴露对栉孔扇贝组织Wnt4基因表达的影响
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作者 任加云 夏江宝 +1 位作者 李学平 苗晶晶 《海洋湖沼通报》 CSCD 北大核心 2018年第5期100-108,共9页
采用荧光定量PCR的方法测定了不同浓度石油烃暴露下栉孔扇贝各组织Wnt4基因相对表达量的变化,结果表明,栉孔扇贝各组织Wnt4基因表达量在不同浓度石油烃影响下变化程度具有明显差异,对照组表达量大小顺序为精巢>卵巢>鳃丝>消化... 采用荧光定量PCR的方法测定了不同浓度石油烃暴露下栉孔扇贝各组织Wnt4基因相对表达量的变化,结果表明,栉孔扇贝各组织Wnt4基因表达量在不同浓度石油烃影响下变化程度具有明显差异,对照组表达量大小顺序为精巢>卵巢>鳃丝>消化盲囊;在浓度为0.1mg·L^-1石油烃影响下,除鳃丝Wnt4基因表达量有上升趋势之外,其余各组织均无显著变化(P>0.05);而在0.3mg·L^-1及以上石油烃浓度组,四种组织Wnt4基因表达量随暴露时间均出现明显上升或者被抑制的现象(P<0.05),各组织Wnt4基因被激活和被抑制的时间和程度均有不同,受石油烃暴露影响的程度为鳃丝>卵巢>精巢>消化盲囊。本研究认为0.3mg·L^-1及以上浓度石油烃暴露对栉孔扇贝各组织特别是鳃丝Wnt4基因表达量的影响较大,对栉孔扇贝的生长发育影响明显;各组织Wnt4基因表达量在不同浓度石油烃的影响下呈现一定的规律性,其变化跟各组织解毒指标的变化具有一定相似性,是较好的反映栉孔扇贝在石油烃暴露下其生长发育变化程度的生物学指标。 展开更多
关键词 石油烃 扇贝 Wnt4 基因表达
栉孔扇贝胚胎和幼虫中的17β-HSD8表达分析
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作者 季爱昌 刘建国 +1 位作者 刘丹雯 张志峰 《海洋湖沼通报》 CSCD 北大核心 2018年第5期125-129,共5页
17β-羟类固醇脱氢酶8(17β-HSD8)广泛分布在脊椎动物体内的多种组织中,调节类固醇激素代谢和脂肪酸代谢。本文采用荧光定量RT-PCR和原位杂交技术,对栉孔扇贝胚胎和幼虫中17β-HSD8mRNA的时空表达进行了分析。研究结果表明,栉孔扇贝17β... 17β-羟类固醇脱氢酶8(17β-HSD8)广泛分布在脊椎动物体内的多种组织中,调节类固醇激素代谢和脂肪酸代谢。本文采用荧光定量RT-PCR和原位杂交技术,对栉孔扇贝胚胎和幼虫中17β-HSD8mRNA的时空表达进行了分析。研究结果表明,栉孔扇贝17β-HSD8在未受精卵中高水平表达,受精卵和卵裂期胚胎中表达量显著下降,囊胚中的表达量显著提高。提示栉孔扇贝17β-HSD8是一个母源表达的基因,其合子基因在囊胚时期开始表达。原位杂交结果显示,17β-HSD8mRNA阳性信号在各发育阶段的胚胎和担轮幼虫中均匀分布,在D形幼虫中主要定位在内脏团附近,提示17β-HSD8可能参与起始器官发生。 展开更多
关键词 扇贝 17β-HSD8 早期发育 胚胎和幼虫
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