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微滴数字聚合酶链反应法检测晚期肺腺癌患者血浆循环肿瘤DNA表皮生长因子受体基因突变的临床价值研究
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作者 马丽 吕嘉林 +7 位作者 李琨 王敬慧 杨新杰 李曦 张卉 张权 秦娜 张树才 《中华医学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第29期2336-2340,共5页
目的 探讨微滴数字聚合酶链反应法(ddPCR)检测晚期肺腺癌患者血浆循环肿瘤脱氧核糖核酸(ctDNA)中表皮生长因子受体(EGFR)基因突变的临床价值.方法 收集2015年5月至2017年4月在北京胸科医院确诊的初治晚期肺腺癌患者共136例,突变... 目的 探讨微滴数字聚合酶链反应法(ddPCR)检测晚期肺腺癌患者血浆循环肿瘤脱氧核糖核酸(ctDNA)中表皮生长因子受体(EGFR)基因突变的临床价值.方法 收集2015年5月至2017年4月在北京胸科医院确诊的初治晚期肺腺癌患者共136例,突变扩增系统(ARMS)检测肺癌肿瘤组织中EGFR基因突变情况;ddPCR和ARMS技术检测血浆中EGFR的基因突变情况.EGFR敏感突变患者均接受比较不同检测技术的符合率.EGFR敏感突变患者一线接受EGFR酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)口服治疗.通过生存分析比较不同技术检测EGFR基因突变患者无进展生存时间(PFS).结果 136例肺癌肿瘤组织样本中,共检测到111例EGFR敏感突变(81.6%),其中含Exon21 L858R突变48例(43.2%),含Exon19 del突变59例(53.2%),其他突变4例(3.6%).ARMS检测血浆EGFR基因突变的敏感度为58.6%,特异度为96.0%.ddPCR检测血浆EGFR突变的敏感度为79.3%,特异度为100%,与肿瘤组织检测的符合率达83.1%(Kappa=0.685,P〈0.001).Kaplan-Meier生存分析显示,在组织检测EGFR基因突变的亚组分析中,与单一技术检测阳性的病例相比,ddPCR和ARMS两种技术均为阳性的患者无进展生存时间最短(11.6个月比14.8个月,χ^2=2.517,P=0.026).结论 作为一种可靠的、高敏感度和特异度的技术,ddPCR有望应用于检测血浆ctDNA EGFR基因突变情况,血液检测EGFR基因突变可预测患者对EGFR-TKI的疗效. 展开更多
关键词 肺肿瘤 数字聚合酶链反应 表皮生长因子受体 基因突变 循环肿瘤 脱氧核糖核酸 突变扩增系统
微滴数字聚合酶链反应法检测晚期肺腺癌患者血浆循环肿瘤DNA表皮生长因子受体基因突变的临床价值研究 预览
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作者 马丽 吕嘉林 +7 位作者 李琨 王敬慧 杨新杰 李曦 张卉 张权 秦娜 张树才 《结核病与胸部肿瘤》 2018年第4期233-237,共5页
目的探讨微滴数字聚合酶链反应法(ddPCR)检测晚期肺腺癌患者血浆循环肿瘤脱氧核糖核酸(ctDNA)中表皮生长因子受体(EGFR)基因突变的临床价值。方法收集2015年5月至2017年4月在北京胸科医院确诊的初治晚期肺腺癌患者共136例,突变扩增系统(... 目的探讨微滴数字聚合酶链反应法(ddPCR)检测晚期肺腺癌患者血浆循环肿瘤脱氧核糖核酸(ctDNA)中表皮生长因子受体(EGFR)基因突变的临床价值。方法收集2015年5月至2017年4月在北京胸科医院确诊的初治晚期肺腺癌患者共136例,突变扩增系统(ARMS)检测肺癌肿瘤组织中EGFR基因突变情况;ddPCR和ARMS技术检测血浆中EGFR的基因突变情况。EGFR敏感突变患者均接受比较不同检测技术的符合率,EGFR敏感突变患者一线接受EGFR酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)口服治疗。通过生存分析比较不同技术检测EGFR基因突变患者无进展生存时间(PFS)。结果136例肺癌肿瘤组织样本中,共检测到111例EGFR敏感突变(81.6%),其中含Exon21 L858R突变48例(43.2%),含Exonl9 del突变59例(53.2%),其他突变4例(3.6%)。ARMS检测血浆EGFR基因突变的敏感度为58.6%,特异度为96.0%。ddPCR检测血浆EGFR突变的敏感度为79.3%,特异度为100%,与肿瘤组织检测的符合率达83.1%(Kappa=0.685,P<0.001).Kaplan-Meier生存分析显示,在组织检测EGFR基因突变的亚组分析中,与单一技术检测阳性的病例相比,ddPCR和ARMS两种技术均为阳性的患者无进展生存时间最短(11.6个月比14.8个月,Х^2=2.517,P=0.026).结论作为一种可靠的、高敏感度和特异度的技术,ddPCR有望应用于检测血浆ctDNA EGFR基因突变情况.血液检测EGFR基因突变可预测患者对EGFR-TKI的疗效. 展开更多
关键词 肺肿瘤 数字聚合酶链反应 表皮生长因子受体 基因突变 循环肿瘤脱氧核糖核酸 突变扩增系统
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BCR-ABL1候选参考物质的研制及测量不确定度评定 预览
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作者 于书平 袁丹丹 +2 位作者 崔明 景蓉蓉 王惠民 《检验医学》 CAS 2019年第8期752-757,共6页
目的构建慢性粒细胞白血病(CML)融合基因断裂点簇集区-埃布尔森小鼠白血病病毒癌基因1(BCR-ABL1)候选参考物质。方法采用分子克隆技术构建含有BCR-ABL1基因的重组质粒,测序验证后采用紫外分光光度法初步测定浓度,并采用数字聚合酶链反应... 目的构建慢性粒细胞白血病(CML)融合基因断裂点簇集区-埃布尔森小鼠白血病病毒癌基因1(BCR-ABL1)候选参考物质。方法采用分子克隆技术构建含有BCR-ABL1基因的重组质粒,测序验证后采用紫外分光光度法初步测定浓度,并采用数字聚合酶链反应(dPCR)进行浓度定值,实时荧光定量聚合酶链反应(RQ-PCR)进行均匀性和稳定性研究,最终应用《测量不确定度表示指南》评定测量不确定度。结果质粒候选参考物质拷贝数浓度为(2.50±0.35)×10^6拷贝/μL,有较好的均匀性和稳定性。结论建立了制备BCR-ABL1候选参考物质的方法,构建了均匀稳定的BCR-ABL1候选参考物质。 展开更多
关键词 断裂点簇集区-埃布尔森小鼠白血病病毒癌基因1 参考物质 测量不确定度 数字聚合酶链反应 紫外分光光度法
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