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不同培养方法对小鼠脂肪干细胞成骨分化的影响 预览
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作者 郝宇卉 李美宁 +2 位作者 张凯丽 杨丽红 刘志贞 《中国现代医学杂志》 CAS 2019年第3期8-14,共7页
目的比较组织块贴壁法及胶原酶消化法所得脂肪干细胞的成骨分化能力。方法分别采用组织块贴壁法及胶原酶消化法原代培养小鼠脂肪干细胞,观察细胞形态及细胞增殖情况,并进行细胞鉴定,比较两者成骨分化能力。结果两种方法所得脂肪干细胞... 目的比较组织块贴壁法及胶原酶消化法所得脂肪干细胞的成骨分化能力。方法分别采用组织块贴壁法及胶原酶消化法原代培养小鼠脂肪干细胞,观察细胞形态及细胞增殖情况,并进行细胞鉴定,比较两者成骨分化能力。结果两种方法所得脂肪干细胞在形态学上无差异,培养至第3代,细胞生长状态良好,生物学特性稳定,CD44、Sca-1表达率 >90%,CD31表达率<10%,具有较好的成脂、成骨分化能力;组织块贴壁法培养所得脂肪干细胞增殖率高于胶原酶消化法(P<0.05);组织块贴壁法培养所得脂肪干细胞矿化结节、ALP活性及钙离子浓度高于胶原酶消化法(P<0.05)。结论组织块贴壁法相对胶原酶消化法在脂肪干细胞培养及成骨诱导分化过程中更具优势。 展开更多
关键词 肪干细胞/干细胞 组织块贴壁法/细胞培养技术 胶原酶消化法/细胞培养技术 分化 分化 小鼠
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骨髓间充质干细胞成脂成骨平衡调控研究进展
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作者 占秀文 杨磊 +2 位作者 郑美蓉 汪鑫平 许晓源 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期400-404,共5页
骨质疏松症(OP)是一种全身性的骨代谢疾病,主要表现为骨量减少、骨质脆性增加、骨骼微结构退化。随着对骨质疏松症发病机制的深入研究,骨髓间充质干细胞(BMSCs)分化失衡(成骨分化减少,成脂分化增多)是引发骨质疏松症的关键。我们总结了B... 骨质疏松症(OP)是一种全身性的骨代谢疾病,主要表现为骨量减少、骨质脆性增加、骨骼微结构退化。随着对骨质疏松症发病机制的深入研究,骨髓间充质干细胞(BMSCs)分化失衡(成骨分化减少,成脂分化增多)是引发骨质疏松症的关键。我们总结了BMSCs成脂成骨分化相关的信号通路,充分理解这些信号通路,有利于更好的阐明骨质疏松症的发病机制,为临床医生有效地治疗骨质疏松症提供帮助。 展开更多
关键词 平衡调控 骨髓间充质干细胞 分化 分化 信号通路
长链非编码RNA在骨髓间充质干细胞成骨成脂分化中的作用及机制研究进展
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作者 任远中 姜雅萍 +3 位作者 丁珊珊 李涛 余永波 王英振 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1518-1523,共6页
随着高通量基因测序技术的不断发展和表观遗传学的深入研究,越来越多的研究表明长链非编码RNA (lncRNA)参与骨髓间充质干细胞(BMSCs)的成骨和成脂分化,是骨科研究领域热点.本文就lncRNA调控BMSCs成骨和成脂分化中作用及机制的研究进展... 随着高通量基因测序技术的不断发展和表观遗传学的深入研究,越来越多的研究表明长链非编码RNA (lncRNA)参与骨髓间充质干细胞(BMSCs)的成骨和成脂分化,是骨科研究领域热点.本文就lncRNA调控BMSCs成骨和成脂分化中作用及机制的研究进展予以综述. 展开更多
关键词 长链非编码RNA 骨髓间充质干细胞 分化 分化
维甲酸诱导骨质疏松模型大鼠骨髓间充质干细胞的特征 预览
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作者 龙燕鸣 谢梦生 +2 位作者 薛文利 黄加洁 李晓捷 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第17期2637-2643,共7页
背景:应用维甲酸直接体外干预骨髓间充质干细胞的研究较多,而维甲酸诱导骨质疏松模型大鼠骨髓间充质干细胞的相关研究尚未见报道。目的:建立维甲酸诱导的大鼠骨质疏松模型,观察模型大鼠骨髓间充质干细胞的体外特征。方法:将SD大鼠随机分... 背景:应用维甲酸直接体外干预骨髓间充质干细胞的研究较多,而维甲酸诱导骨质疏松模型大鼠骨髓间充质干细胞的相关研究尚未见报道。目的:建立维甲酸诱导的大鼠骨质疏松模型,观察模型大鼠骨髓间充质干细胞的体外特征。方法:将SD大鼠随机分为2组,实验组用维甲酸70mg/(kg·d)连续灌胃2周快速建立骨质疏松模型,对照组灌胃等体积生理盐水。采用全骨髓贴壁法体外培养两组大鼠骨髓间充质干细胞,观察两组细胞体外特征,包括细胞形态、生长曲线、成骨诱导后体外矿化能力和碱性磷酸酶分泌能力、成脂诱导后向脂肪细胞分化能力。结果与结论:①两组骨髓间充质干细胞各时期形态基本一致,第9天时实验组增殖能力强于对照组;②实验组碱性磷酸酶活力弱于对照组(P <0.05),茜素红染色、碱性磷酸酶染色亦支持碱性磷酸酶活力检测结果;③实验组脂滴数量和油红O吸光度值高于对照组(P <0.05);④结果表明,维甲酸灌胃法成功构建大鼠骨质疏松模型,其骨髓间充质干细胞成骨能力降低,成脂能力增强。 展开更多
关键词 维甲酸 骨质疏松模型 骨髓间充质干细胞 分化 分化 大鼠 广西自然科学基金
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Wnt10b与骨形态发生蛋白9诱导间充质干细胞成骨分化的关系 预览
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作者 胡莹 廖云鹏 +4 位作者 李福书 周娅 李沁 孙文娟 何百成 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1420-1428,共9页
目的研究Wnt10b与骨形态发生蛋白9(BMP9)诱导间充质干细胞(MSCs)骨向分化的关系,以及相关的分子机制。方法利用PCR、Westernblot、组织化学染色等方法,检测BMP9对Wnt10b表达的影响,以及Wnt10b对BMP9诱导的成骨分化的影响。同时,通过定量... 目的研究Wnt10b与骨形态发生蛋白9(BMP9)诱导间充质干细胞(MSCs)骨向分化的关系,以及相关的分子机制。方法利用PCR、Westernblot、组织化学染色等方法,检测BMP9对Wnt10b表达的影响,以及Wnt10b对BMP9诱导的成骨分化的影响。同时,通过定量PCR、Westernblot、油红O染色、流式细胞术等,分析Wnt10b影响BMP9成骨分化诱导作用的可能机制。结果Wnt10b在C3H10T1/2、C2C12、MEFs和MC3T3-E1细胞中均有表达,BMP9在C3H10T1/2细胞中上调Wnt10b的表达水平。Wnt10b增强BMP9在C3H10T1/2细胞中增加OCN蛋白水平和促进钙盐沉积的能力,沉默Wnt10b减弱BMP9的作用。Wnt10b并不改变BMP9对细胞周期的影响,但能增强BMP9诱导的Smad1/5/8磷酸化,沉默Wnt10b减弱BMP9对Smad1/5/8磷酸化的促进作用。此外,Wnt10b抑制BMP9在C3H10T1/2细胞中诱导的成脂分化,沉默Wnt10b则促进BMP9的成脂分化诱导作用。结论Wnt10b可以促进BMP9诱导的MSCs骨向分化,这种作用可能与增强BMP/Smad信号转导有关。 展开更多
关键词 骨形态发生蛋白9 Wnt10b 间充质干细胞 分化 BMP/Smad信号 分化
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中药干预骨髓间充质干细胞成骨和成脂分化及其机制的研究进展 预览
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作者 姚薇 张洁 +1 位作者 严小军 尚广彬 《江西中医药》 2019年第4期73-76,共4页
骨髓间充质干细胞(BMSCs)是来源于中胚层并具备多向分化潜力的多功能干细胞,是骨髓内成骨细胞和脂肪细胞的共同来源,且在成骨分化与成脂分化间维持着动态平衡。近年来的研究表明大量中药能够通过Wnt/β-catenin信号通路、Runx-2、ALP等... 骨髓间充质干细胞(BMSCs)是来源于中胚层并具备多向分化潜力的多功能干细胞,是骨髓内成骨细胞和脂肪细胞的共同来源,且在成骨分化与成脂分化间维持着动态平衡。近年来的研究表明大量中药能够通过Wnt/β-catenin信号通路、Runx-2、ALP等相关成骨因子和PPAR-γ途径有效调控BMSCs的成骨分化和成脂分化。本文就中药对BMSCs成骨及成脂分化的影响效应和机制进行简要概括。 展开更多
关键词 中药 骨髓间充质干细胞 分化 分化 综述
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木犀草素对3T3-L1细胞成脂分化不同阶段的影响 预览
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作者 张秋霞 刘健 《合肥工业大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2019年第3期427-432,共6页
为了研究木犀草素对3T3-L1前脂肪细胞成脂分化过程中各个阶段的作用,文章探讨相关的分子机制,在细胞分化的不同阶段添加20μmol/L木犀草素处理,通过油红O染色和定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测其对3T3-L1前脂肪... 为了研究木犀草素对3T3-L1前脂肪细胞成脂分化过程中各个阶段的作用,文章探讨相关的分子机制,在细胞分化的不同阶段添加20μmol/L木犀草素处理,通过油红O染色和定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测其对3T3-L1前脂肪细胞脂肪化过程的细节作用。3T3-L1前脂肪细胞成脂分化过程共需8d,结果表明,木犀草素从细胞分化开始处理8d可以显著降低其脂滴生成及脂肪化相关基因PPARγ、C/EBPα、Ap2和Fas等的表达,处理2、4、6 d对脂滴生成抑制效果不明显,但可以显著抑制脂肪化相关因子表达,说明木犀草素在3T3-L1细胞的前期分化和后期成熟过程都发挥了重要作用。 展开更多
关键词 木犀草素 3T3-L1细胞 分化 滴生 基因表达
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BADGE联合锂盐通过抑制PPARγ预防家兔激素性股骨头坏死
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作者 王耀清 潘振宇 陈帆 《武汉大学学报:医学版》 CAS 2019年第4期517-523,共7页
目的:研究双酚A二缩水甘油醚(BADGE)单独或与锂盐结合治疗对家兔骨髓间充质干细胞成脂分化和激素性股骨头坏死(ONFH)的预防作用及其可能机制。方法:分离家兔骨髓间充质干细胞并诱导成脂分化,油红O染色验证BADGE联合锂盐对成脂分化的抑... 目的:研究双酚A二缩水甘油醚(BADGE)单独或与锂盐结合治疗对家兔骨髓间充质干细胞成脂分化和激素性股骨头坏死(ONFH)的预防作用及其可能机制。方法:分离家兔骨髓间充质干细胞并诱导成脂分化,油红O染色验证BADGE联合锂盐对成脂分化的抑制作用。将兔随机分为4组,除对照组外,将甲强龙(MPS)造模的家兔分为3组:一组行BADGE联合锂盐(BL)治疗,另一组行BADGE单独治疗(B),最后一组行空白治疗(M)。2周采血检测血脂,4周后提取双侧股骨头做病理、μ-CT、荧光定量PCR检测。结果:BADGE处理抑制了兔骨髓间充质干细胞(BMSC)成脂分化,并抑制脂肪分化主要调节因子PPARγ和C/EBPα的表达,并且这些生物活性与锂盐结合得到进一步增强。在体内研究中,结果显示BADGE治疗可降低激素性ONFH发生率,减少骨髓肥胖,并且改善了骨密度及骨质量,而且这些效果在与锂盐联合得到增强。BADGE单独治疗或与锂盐结合增加了RUNX2和β-catenin的表达,并抑制了PPARγ和C/EBPα的表达,同时降低了血清总胆固醇(TC)和游离脂肪酸(FFA)水平。结论:通过抑制PPARγ,BADGE单独或与锂盐联合治疗有效预防了激素性股骨头坏死。 展开更多
关键词 分化 股骨头坏死 PPARΓ 激素
转录因子E2F1对脂肪间充质干细胞增殖及成脂分化的调控作用
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作者 仪臻 杨长春 +2 位作者 肖辉 吴毅平 吴敏 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期235-237,共3页
目的 探讨转录因子E2F1对脂肪间充质干细胞(ADSCs)增殖、分化的影响及其可能的作用机制。方法 选取6~8周龄野生型(WT)和E2F1基因敲除(E2F1-/-)小鼠,分离获取WT和E2F1-/-原代ADSCs,培养至第4代(P4),观察比较两组细胞形态及鉴定细胞表面... 目的 探讨转录因子E2F1对脂肪间充质干细胞(ADSCs)增殖、分化的影响及其可能的作用机制。方法 选取6~8周龄野生型(WT)和E2F1基因敲除(E2F1-/-)小鼠,分离获取WT和E2F1-/-原代ADSCs,培养至第4代(P4),观察比较两组细胞形态及鉴定细胞表面标志物。细胞计数试剂盒(CCK-8)检测两组细胞的增殖能力,并经14 d成脂诱导分化后行油红O染色,观察脂滴的形态及数目。Western blot检测两组细胞中过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)蛋白水平的表达。结果 成功获得稳定传代的ADSCs,体外观察两组细胞形态比较差异无统计学意义,细胞表面标志物CD29、CD44、CD90为阳性,而CD31为阴性。细胞计数试剂盒(CCK-8)结果显示,WT ADSCs较E2F1-/-ADSCs增殖能力强(1.85±0.03比1.32±0.20,t=16.641,P<0.05)。成脂诱导结果表明,WT ADSCs组脂滴较大较圆,且脂滴数目多于E2F1-/-ADSCs组(1 890±128比1 109±116,t=18.505,P<0.05)。Western blot结果表明,WT ADSCs组PPAR-γ蛋白表达水平较E2F1-/-ADSCs组高(0.81±0.02比0.44±0.01,t=3.040,P<0.05)。结论 转录因子E2F1通过促进PPAR-γ的表达从而增强ADSCs的增殖及成脂分化作用。 展开更多
关键词 肪间充质干细胞 E2F1 细胞增殖 分化 过氧化物酶体增殖物激活受体-Γ
一种自发胰岛素抵抗的3T3-L1脂肪细胞模型构建 预览
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作者 张凯艺 朱文娟 +2 位作者 谢宁 叶华琼 杨述林 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1475-1485,共11页
本研究旨在突变3T3-L1细胞葡萄糖转运蛋白4(GluT4)的基因序列,造成GluT4功能障碍,从而获得一种稳定、自发胰岛素抵抗的脂肪细胞模型。利用CRISPR/Cas9技术对3T3-L1细胞的GluT4编码区进行定向切割,通过流式细胞术和基因测序筛选稳定突变... 本研究旨在突变3T3-L1细胞葡萄糖转运蛋白4(GluT4)的基因序列,造成GluT4功能障碍,从而获得一种稳定、自发胰岛素抵抗的脂肪细胞模型。利用CRISPR/Cas9技术对3T3-L1细胞的GluT4编码区进行定向切割,通过流式细胞术和基因测序筛选稳定突变的细胞株;使用CCK-8法检测所筛选细胞株的增殖活力;对细胞进行成脂诱导分化,油红O染色以判断细胞成脂分化能力;以胰岛素刺激下葡萄糖摄入量确定细胞对胰岛素的抵抗程度;qPCR和Western blot检测胰岛素抵抗细胞成脂分化过程中关键基因的表达。结果表明:第九外显子处13 bp的缺失导致3T3-L1细胞GluT4蛋白功能障碍,这一突变不影响细胞的增殖活力;成脂诱导分化过程中,该细胞株表现出严重且稳定的自发胰岛素抵抗,葡萄糖摄取受阻,与成脂分化和脂质合成相关的基因表达显著或极显著下调(P<0.05或P<0.01)。综上所述,GluT4功能障碍阻碍了脂肪细胞响应胰岛素的葡萄糖摄取,从而造成脂肪细胞产生自发的胰岛素抵抗;本研究从多个角度对该胰岛素抵抗脂肪细胞模型进行检测分析,验证了其稳定性和有效性,为脂肪营养代谢和胰岛素抵抗相关研究提供了新材料。 展开更多
关键词 葡萄糖转运蛋白4 胰岛素抵抗 3T3-L1细胞 分化
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人脐带血来源间充质干细胞的成脂分化 预览
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作者 杨旭芳 冯华 +2 位作者 杨云芳 陈培 李福娟 《全科口腔医学杂志(电子版)》 2019年第1期146-147,共2页
目的本文利用Ficoll- Hypague法自人脐带血中分离、培养及扩增出人脐带血来源间充质干细胞(human umbilical cord blood-derived mesenchymal stem cells,hUCBMSCs);并对其成脂分化能力进行鉴定。方法显微镜下观察各代hUCBMSCs的形态学... 目的本文利用Ficoll- Hypague法自人脐带血中分离、培养及扩增出人脐带血来源间充质干细胞(human umbilical cord blood-derived mesenchymal stem cells,hUCBMSCs);并对其成脂分化能力进行鉴定。方法显微镜下观察各代hUCBMSCs的形态学特点;利用流式细胞术检测各代hUCBMSCs免疫学表型;取P3代细胞进行成脂肪分化,镜下观察细胞形态及是否出现脂滴。结果体外分离、培养出形态均一的hUCBMSCs;流式结果显示hUCBMSCs具有间充质干细胞的免疫学特征,即CD44、CD73、CD105阳性;成脂诱导后4天细胞形态发生变化,分别于诱导后1周、2周胞浆中出现明显脂滴。结论成功的从人脐带血中分离培养出了人脐带血来源间充质干细胞,其具有高效的成脂分化能力,未来在整形医学领域种子细胞的研究中将具有重要的意义。 展开更多
关键词 人脐带血来源间充质干细胞 分化
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骨碎补水煎液经Wnt/β-catenin通路对去卵巢骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞成脂分化的影响
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作者 李琰 李志航 +4 位作者 陈云刚 任维龙 薛海鹏 徐展望 谭国庆 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2019年第2期279-284,I0006-I0008共7页
目的:观察骨碎补水煎液经Wnt/β-Catenin信号通路对去卵巢骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向脂肪细胞分化的调节作用及大鼠体质量、骨密度、股骨骨髓脂肪细胞变化的影响。方法:24只6月龄雌性SD大鼠随机分为SHAM(假手术)、OVX(去势)... 目的:观察骨碎补水煎液经Wnt/β-Catenin信号通路对去卵巢骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向脂肪细胞分化的调节作用及大鼠体质量、骨密度、股骨骨髓脂肪细胞变化的影响。方法:24只6月龄雌性SD大鼠随机分为SHAM(假手术)、OVX(去势)、OVXDF(去势灌服骨碎补水煎液)3组并手术造模。适应性饲养4周后,灌胃12周,检测比较各组大鼠BMSCs成脂能力、Wnt通路和成脂分化相关mRNA表达水平及大鼠体质量、骨密度、股骨骨髓脂肪细胞等指标。结果:OVXDF组大鼠的体质量及其BMSCs成脂能力、PPARγ、LPL mRNA表达水平均低于OVX组,且高于SHAM组(P<0.05)。相反,其骨密度与BMSCs中Wnt10b、β-catenin、LRP5mRNA表达水平均高于OVX组,但低于SHAM组(P<0.05)。股骨骨髓切片显示,OVX组脂肪空泡数量、直径、面积比较SHAM组分别增高96.18%、58.44%、391.06%,差异有统计学意义;OVXDF组比OVX组分别降低28.79%、22.52%、53.47%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:灌服骨碎补水煎液可以抑制去卵巢大鼠BMSCs成脂分化,提高去卵巢骨质疏松大鼠的骨密度,缓解大鼠去卵巢后的体质量增加,同时能够减轻去卵巢骨质疏松大鼠股骨骨髓腔内脂肪细胞数量及体积,起到抗骨质疏松的作用,其机制可能与激活Wnt/β-catenin经典信号通路,抑制PPARγ、LPL mRNA的表达相关。 展开更多
关键词 骨碎补 骨髓间充质干细胞 分化 Wnt经典通路 去卵巢大鼠 骨髓肪细胞 HE染色 石蜡切片
PPAR-gamma信号通路对Hem-MSCs体外成脂分化的影响 预览
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作者 徐媛 郭遥 +3 位作者 袁斯明 王慜 陈海妮 沈卫民 《组织工程与重建外科》 2019年第1期1-4,9共5页
目的 研究PPAR-gamma信号通路对血管瘤来源的间充质干细胞(Hemangioma derivedmesenchymalstemcells,Hem-MSCs)成脂分化的影响。方法 本研究以不同的条件培养基培养Hem-MSCs,实验分5组:普通培养基组(A组)、普通培养基+罗格列酮组(B组)... 目的 研究PPAR-gamma信号通路对血管瘤来源的间充质干细胞(Hemangioma derivedmesenchymalstemcells,Hem-MSCs)成脂分化的影响。方法 本研究以不同的条件培养基培养Hem-MSCs,实验分5组:普通培养基组(A组)、普通培养基+罗格列酮组(B组)、成脂诱导分化培养基组(C组)、成脂诱导分化培养基+罗格列酮组(D组)及成脂诱导分化培养基+罗格列酮+GW9662拮抗剂组(E组)。光镜下观察各组Hem-MSCs的成脂分化过程,以油红O染色观察被诱导细胞中脂滴的面积和数量;采用Western-blot分析各组Hem-MSCs培养2周后的perilipin A表达量,以量化各组细胞脂肪分化程度;以实时定量PCR分析各组成脂分化相关基因(如CEBPA、LPL、PLIN1、PPARG等)在Hem-MSCs成脂诱导分化过程中不同时间点的表达情况。结果 油红O染色显示,成脂诱导分化培养基+罗格列酮组可促进Hem-MSCs的成脂分化过程;Western-blot证实罗格列酮能明显促进成脂诱导分化时perilipin A蛋白的表达;实时定量PCR进一步证实,在诱导分化的第1周及第2周时,罗格列酮对Hem-MSCs的成脂分化相关基因(CEBPA、LPL、PLIN1、PPARG等)的表达均有促进作用;而PPAR-gamma信号通路的拮抗剂GW9662能够阻断上述作用。结论 激活PPAR-gamma信号通路可促进Hem-MSCs在体外的成脂分化能力。 展开更多
关键词 婴幼儿血管瘤 血管瘤来源的间充质干细胞 分化 PPAR-gamma信号通路 罗格列酮
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丹酚酸B对骨髓间充质干细胞分化方向的影响 预览
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作者 李子怡 王娜 +1 位作者 薛鹏 李玉坤 《中国组织工程研究》 北大核心 2018年第25期4095-4100,共6页
背景:随着组织工程学的不断发展,骨髓间充质干细胞的多向分化潜能为多种疾病的治疗带来了新的希望。近年来的研究发现,丹参的主要有效成分丹酚酸B具有多种药理活性,可以影响骨髓间充质干细胞的定向分化。目的:综述丹酚酸B对骨髓间充质... 背景:随着组织工程学的不断发展,骨髓间充质干细胞的多向分化潜能为多种疾病的治疗带来了新的希望。近年来的研究发现,丹参的主要有效成分丹酚酸B具有多种药理活性,可以影响骨髓间充质干细胞的定向分化。目的:综述丹酚酸B对骨髓间充质干细胞分化方向的影响及具体机制。方法:分别以“丹酚酸B、骨髓间充质干细胞/骨髓基质干细胞、分化”“Salvianolic acid B,differentiation/osteogenic/adipogenesis,mesenchymal stem cells”为检索词,由第一作者检索2000年1月至2017年9月在中国期刊全文数据库、PubMed数据库及万方数据库发表的相关文章,其中中文102篇,英文136篇,最终选取具有代表性的49篇文献进行归纳总结。结果与结论:目前发现,丹酚酸B可以促进骨髓间充质干细胞成骨分化、成神经分化、成心肌细胞分化,抑制骨髓间充质干细胞成脂分化。丹酚酸B是否可以促进骨髓间充质干细胞向其他方向分化及在促进不同分化方向上的有效浓度仍有待于进一步研究。 展开更多
关键词 丹酚酸B 骨髓间充质干细胞 干细胞 分化 分化 分化 神经分化 心肌分化 河北省自然科学基金 丹参 骨髓 间质干细胞 细胞分化 综述 组织工程
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人脂肪组织来源血管周干细胞成骨、成脂、成软骨分化能力研究
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作者 张蕾 孟芝竹 张斌 《中国实用口腔科杂志》 CAS 2018年第7期420-425,共6页
目的研究从人脂肪组织中提取的血管周干细胞(human perivascular stem cells,hPSCs)的特点,并探讨其成骨、成脂及成软骨分化的能力。方法采用流式荧光细胞分选技术(FACS)在12例行吸脂手术患者的脂肪标本中分选出人基质血管成分(hum... 目的研究从人脂肪组织中提取的血管周干细胞(human perivascular stem cells,hPSCs)的特点,并探讨其成骨、成脂及成软骨分化的能力。方法采用流式荧光细胞分选技术(FACS)在12例行吸脂手术患者的脂肪标本中分选出人基质血管成分(human stromal vascular fraction,hSVF)和由周皮细胞(CD34^-、CD146^+、CD45^-)与外膜细胞(CD34^+、CD146^-、CD45^-)组成的hPSCs进行培养,比较其克隆增殖能力,然后将2种细胞进行成骨、成脂和成软骨诱导,诱导结束后分别进行茜素红染色、油红O染色和阿尔新蓝染色,并检测成骨诱导后的成骨相关基因mRNA表达。结果 hSVF和hPSCs均以纺锤形成纤维样细胞生长,hPSCs呈现出更快的融合趋势,且细胞形态更均一。hPSCs细胞相比于hSVF具有更强的克隆增殖能力(P〈0.05)。hPSCs细胞在成骨及成软骨方向比hSVF具有更强优势,而hSVF在成脂方向比hPSCs具有更强优势。成骨诱导后,hPSCs的成骨基因碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)和骨钙素(osteocalcin,OCN)的相对表达量要明显高于hSVF(P〈0.05)。结论 hPSCs细胞具有干细胞的多项分化潜能,且其在成骨方向具有很强优势,可成为骨组织工程学中理想的种子细胞来源。 展开更多
关键词 人血管周干细胞 人基质血管 分化 分化 软骨分化
化脓链球菌脂磷壁酸对人牙周膜干细胞分化能力的影响 预览
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作者 靳路远 朱文晶 夏登胜 《北京口腔医学》 CAS 2018年第1期1-4,共4页
目的 研究脂磷壁酸(LTA)对牙周膜干细胞(PDLSCs)分化能力的影响,从而探讨G+细菌毒素LTA对人牙周膜干细胞再生牙周组织的影响。方法 用0.1、1和10μg/ml的LTA作用于PDLSCs,采用MTT方法及流式细胞术检测细胞的增殖及凋亡情况,使用碱... 目的 研究脂磷壁酸(LTA)对牙周膜干细胞(PDLSCs)分化能力的影响,从而探讨G+细菌毒素LTA对人牙周膜干细胞再生牙周组织的影响。方法 用0.1、1和10μg/ml的LTA作用于PDLSCs,采用MTT方法及流式细胞术检测细胞的增殖及凋亡情况,使用碱性磷酸酶染色和茜素红染色对细胞的成骨分化能力进行比较;应用油红O染色鉴定成脂分化能力,实时定量PCR检测成骨成脂相关基因的变化,研究LTA在PDLSCs分化中的作用。结果 1μg/ml及10μg/ml LTA显著降低PDLSCs增殖率,细胞凋亡增加。ALP染色及活性结果表明,早期成骨能力各组之间没有显著差异;茜素红染色结果及钙离子浓度定量测定显示,随LTA浓度升高,PDLSCs晚期成骨能力降低,并具有LTA浓度依赖性。成骨相关基因Runx2表达表现相同变化趋势。油红O染色结果表明,随着LTA浓度的增加,PDLSCs的成脂分化能力升高,成脂相关基因PPARγ表达升高,具有LTA浓度依赖性。结论 LTA降低PDLSCs成骨分化能力,同时促进细胞成脂分化能力,表明LTA抑制PDLSCs介导的牙周组织再生。 展开更多
关键词 磷壁酸 人牙周膜干细胞 分化 分化
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罗格列酮与全反式维甲酸诱导小鼠胚胎成纤维细胞定向骨分化研究 预览
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作者 王涵 邵英 +6 位作者 朱茄慧 廖云鹏 马妍 任文艳 周林云 吴柯 何百成 《中国药理学通报》 CSCD 北大核心 2018年第10期1384-1391,共8页
目的 探讨罗格列酮(RSG)与全反式维甲酸(ATRA)对干细胞定向骨分化的影响,并初步解析这一作用的可能分子机制。方法 通过定量PCR、组织化学染色及Western blot等方法,检测相关成骨与成脂分化标志物的变化情况;利用荧光素酶报告质粒,检测R... 目的 探讨罗格列酮(RSG)与全反式维甲酸(ATRA)对干细胞定向骨分化的影响,并初步解析这一作用的可能分子机制。方法 通过定量PCR、组织化学染色及Western blot等方法,检测相关成骨与成脂分化标志物的变化情况;利用荧光素酶报告质粒,检测Runx2的转录水平以及BMP/Smad信号的激活情况。结果 在C2C12、C3H10T1/2和MEFs中,PPARγ以及RAR和RXR各亚型受体均有表达。单独使用RSG或ATRA均能增加MEFs细胞中碱性磷酸酶(ALP)的活性,且RSG能明显增加ATRA所诱导的ALP活性。RSG或ATRA单独应用不能诱导钙盐沉积,两者合用不但增加OPN和OCN的表达,而且还诱导钙盐沉积。RSG可诱导脂滴生成,ATRA不能诱导脂滴生成,且抑制RSG促进脂滴生成的作用。RSG在MEFs中促进C/EBPα表达,但ATRA能抑制RSG的这种作用。ATRA与RSG合用可促进MEFs中Runx2的蛋白表达。同时,ATRA与RSG合用增加了MEFs中BMP/Smad的转录和Smad1/5/8的磷酸化水平,同时也增加了Smad6的mRNA表达,但对Samd7的mRNA表达有抑制作用。结论 RSG与ATRA合用能诱导MEFs定向骨分化,该作用可能与ATRA抑制RSG诱导的成脂分化,并增加BMP/Smad信号转导活性有关。 展开更多
关键词 罗格列酮 全反式维甲酸 小鼠胚胎纤维细胞 分化 分化 BMP/Smad信号
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锌对人骨髓间充质干细胞体外增殖和成脂分化的影响 预览
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作者 朱晓宇 石军 《广西医学》 CAS 2018年第8期928-933,共6页
目的探讨锌对人骨髓间充质干细胞(h BM-MSC)体外增殖和成脂分化的影响。方法用密度梯度离心和贴壁培养的方法分离纯化h BM-MSC,对照组加入不含锌的低糖杜氏改良格尔(DMEM)完全培养基,其余5个锌处理组加入锌浓度分别为0.001 mmol/L、... 目的探讨锌对人骨髓间充质干细胞(h BM-MSC)体外增殖和成脂分化的影响。方法用密度梯度离心和贴壁培养的方法分离纯化h BM-MSC,对照组加入不含锌的低糖杜氏改良格尔(DMEM)完全培养基,其余5个锌处理组加入锌浓度分别为0.001 mmol/L、0.004 mmol/L、0.016 mmol/L、0.064 mmol/L、0.256 mmol/L的含锌低糖DMEM完全培养基,用细胞计数试验(CCK-8)法检测细胞活性以确定适宜h BM-MSC培养的锌浓度。用含有适宜浓度硫酸锌的成脂诱导培养基体外诱导h BM-MSC成脂分化,21 d后行油红O染色观察细胞内的脂滴,检测吸光度值评价成脂分化效率,并采用实时荧光定量PCR检测各组细胞过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)、脂肪酸结合蛋白4(FABP4)、CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)mRNA表达水平。结果 0.256 mmol/L锌处理组的细胞活性低于对照组(P〈0.05),0.004 mmol/L锌处理组和0.016 mmol/L锌处理组的细胞活性均高于对照组(P〈0.05),适宜h BM-MSC培养的锌浓度为0.001~0.064 mmol/L。0.001、0.004、0.016和0.064 mmol/L锌处理组油红O染色阳性的细胞数依次增多,各锌处理组细胞中的脂滴明显大于且多于对照组,成脂分化率以及PPAR-γ、C/EBPα、FABP4 mRNA表达水平均高于对照组(均P〈0.05)。结论一定浓度的锌能促进h BM-MSCs的增殖和成脂分化,这可能与锌作用于成脂基因有关。 展开更多
关键词 人骨髓间充质干细胞 增殖 分化 基因
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不同浓度细胞松弛素D对人脂肪源干细胞分化能力的影响
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作者 樊庭宇 曲戎梅 +5 位作者 冯雁婷 彭彦 张仔昂 欧阳钧 戴景兴 钟世镇 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第1期45-50,共6页
目的观察不同浓度细胞松弛素D(Cyto D)对人脂肪源干细胞(h ASC)成骨分化和成脂分化能力的影响。方法在生长培养基、成脂诱导培养基及成骨诱导培养基中分别加入0.05、0.1、0.2μg/ml的Cyto D处理h ASC,干扰肌动蛋白的延长,并在处理的... 目的观察不同浓度细胞松弛素D(Cyto D)对人脂肪源干细胞(h ASC)成骨分化和成脂分化能力的影响。方法在生长培养基、成脂诱导培养基及成骨诱导培养基中分别加入0.05、0.1、0.2μg/ml的Cyto D处理h ASC,干扰肌动蛋白的延长,并在处理的第1、4、7 d时分别进行油红O染色、ALP染色及CCK8等实验检测细胞性能的改变。结果 7 d时实验组0.2μg/ml的存活率相比于对照组下降了1/3。Cyto D能抑制h ASCs的存活和增殖,且浓度越大细胞的存活率越低。单纯的Cyto D既能促使h ASC胞内脂滴形成,又能改变细胞内成骨的基础状态。Cyto D与成脂诱导液联合使用后能极大的促进成脂,且不同的浓度具有不同的成脂效果,低浓度使脂滴数量增加,高浓度促进脂滴成熟;与成骨诱导液联合使用后Cyto D用药浓度和成骨效果成反比。结论细胞松弛素D能增强成骨或成脂诱导液效果,且低浓度细胞松弛素D能够促进成骨,低浓度和高浓度细胞松弛素D都能促进成脂。本实验探究了细胞松弛素D引起的肌动蛋白解聚对脂肪源干细胞的分化能力影响,为研究脂肪源干细胞的分化机制提供了重要生物学信息。 展开更多
关键词 肪源干细胞 分化 分化 肌动蛋白 细胞松弛素D
糖尿病大鼠骨髓间充质干细胞成骨和成脂分化的研究 预览
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作者 陈嘉 余文兰 +2 位作者 马晓莉 谢淑敏 刘永伦 《临床医学进展》 2018年第8期750-759,共10页
目的:研究糖尿病模型大鼠造模后不同时间段骨髓间充质干细胞(Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells, BMSCs)的成骨及成脂分化能力的改变,探讨糖尿病模型骨质疏松形成与BMSCs成骨及成脂分化能力的相关性。方法:利用链脲佐菌素(Streptozoto... 目的:研究糖尿病模型大鼠造模后不同时间段骨髓间充质干细胞(Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells, BMSCs)的成骨及成脂分化能力的改变,探讨糖尿病模型骨质疏松形成与BMSCs成骨及成脂分化能力的相关性。方法:利用链脲佐菌素(Streptozotocin, STZ)加高糖高脂饲料诱导制作大鼠糖尿病模型,正常大鼠作为对照组。分别于注射STZ液4、8、12周后,利用全骨髓贴壁法来扩增和纯化BMSCs,取生长良好的第3代细胞作为本实验的研究对象。用成骨诱导液诱导细胞分化,培养7 d后,检测碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase, ALP)活力,14 d后,进行茜素红染色及检测ALP和骨钙素(Osteocalcin, OC) mRNA含量。用成脂诱导液诱导细胞分化,诱导14 d后,进行油红O染色,计算脂肪细胞转化率;进行油红O染色定量分析;检测脂蛋白脂酶(Lipoprotein Lipase, LPL)和过氧化物酶增殖活化受体(Peroxisome Proliferator Activated Receptor, PPARγ2) mRNA含量。结果:注射STZ液8、12周后,糖尿病组ALP活力明显下降,与对照组比较,P <0.01。对照组钙化结节数量明显多于糖尿病组。ALP基因相对OD值,糖尿病组(0.26 ±177;0.05)低于对照组(0.42 ±177;0.09),P <0.01。OC基因相对OD值,糖尿病组(0.31 ±177;0.09)低于对照组(0.41 ±177;0.06),P <0.05。注射STZ液4、8、12周后,油红O染色,对照组、糖尿病组镜下观察可见有红色脂滴,对照组脂肪细胞转化率(25.16 ±177;5.03)明显低于糖尿病组(66.85 ±177;10.01),P <0.01。油红O染色定量分析结果(OD值),对照组(0.016 ±177;0.015)油红含量明显低于糖尿病组(0.058 ±177;0.016),P <0.01。LPL基因相对OD值,糖尿病组(0.89 ±177;0.05)高于对照组(0.22 ±177;0.05),P <0.01。PPARγ2基因相对OD值,糖尿病组(0.38 ±177;0.03)高于对照组(0.18 ±177;0.01),P <0.01。结论:注射STZ液4周以后,糖尿病大鼠BMSCs成脂分化能力增强;8周以后,成骨分化能力明显下降,可能与骨质疏松的形成有一定的关系。 展开更多
关键词 糖尿病 骨髓间充质干细胞 分化 分化 骨质疏松 大鼠
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