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融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM对B细胞淋巴瘤BJAB细胞杀伤作用及其机制研究
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作者 范冬梅 杨圆圆 +8 位作者 姜琳琳 熊冬生 杨铭 陶欣勇 周珊 刘红芹 屈浩 韩博文 石釧 《中国肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期54-60,共8页
[目的]探讨融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM对B细胞淋巴瘤细胞株BJAB细胞的杀伤作用及其机制研究。[方法]利用流式细胞分析技术(FACS)和激光共聚焦显微镜技术,检测融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM与BJAB细胞的结合活性。MTT法检测融合蛋白anti-C... [目的]探讨融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM对B细胞淋巴瘤细胞株BJAB细胞的杀伤作用及其机制研究。[方法]利用流式细胞分析技术(FACS)和激光共聚焦显微镜技术,检测融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM与BJAB细胞的结合活性。MTT法检测融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM对BJAB细胞的体外杀伤活性。彗星电泳实验检测融合蛋白anti-CD19 (Fab)-LDM对BJAB细胞DNA的损伤。FACS检测不同浓度融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM处理BJAB细胞后细胞周期的变化。[结果] FACS和激光共聚焦显微镜技术实验结果表明,融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM能与BJAB细胞结合。MTT法实验结果表明,融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM对BJAB细胞杀伤活性较单用力达霉素或阿霉素强,IC50值分别为(0.15±0.02)nmol/L、(0.38±0.03)nmol/L和(57.15±2.30)nmol/L。彗星电泳实验结果表明,用5pmol/L的融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM及力达霉素处理BJAB细胞后,可引起细胞不同程度的DNA损伤,由于融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM具有靶向性和细胞内化的特性,对DNA造成的损伤较力达霉素组明显。FACS结果显示,随着融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM浓度的增加,S期的比例从53.78%升高至77.29%,呈剂量依赖性。[结论]融合蛋白anti-CD19 (Fab)-LDM可以靶向杀伤B细胞淋巴瘤细胞株BJAB,引起细胞周期阻滞,在B细胞淋巴瘤生物治疗中具有潜在的应用价值。 展开更多
关键词 基因工程抗体 融合蛋白 力达霉素 B细胞淋巴瘤 细胞周期
基因工程抗体在微囊藻毒素检测分析中的应用研究 预览
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作者 徐重新 刘媛 +1 位作者 李建宏 刘贤金 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期372-378,共7页
微囊藻毒素是蓝藻水华过程中产生的一类小分子多肽生物毒素,能对人和动物的肝脏造成严重损伤,属于2B类致癌物质。由于全球性工业和生活废水的大量排放以及气候变暖等现实因素,蓝藻水华现象日趋频繁和加剧,使得微囊藻毒素在水体和土壤中... 微囊藻毒素是蓝藻水华过程中产生的一类小分子多肽生物毒素,能对人和动物的肝脏造成严重损伤,属于2B类致癌物质。由于全球性工业和生活废水的大量排放以及气候变暖等现实因素,蓝藻水华现象日趋频繁和加剧,使得微囊藻毒素在水体和土壤中大量蓄积,严重威胁生态环境和农产品质量安全。基于"抗体-抗原"识别原理的免疫学检测方法是当前生物毒素快速检测研究的热点,近年抗体创制技术突飞猛进,现已从传统的多克隆抗体和单克隆抗体逐渐发展到了新型的基因工程人工抗体创制阶段。该文系统阐述了微囊藻毒素产生的内外因素及其对生态系统、人和动物的主要危害风险;全面梳理了基因工程抗体创制技术及其在微囊藻毒素检测应用研究上的最新进展;并结合作者及所在科研团队最新研究成果,深入探讨了基因工程抗体在微囊藻毒素检测应用上的发展趋势、存在的问题以及拟解决的对策。 展开更多
关键词 基因工程抗体 微囊藻毒素 农产品 质量安全 免疫分析
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融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM对B细胞淋巴瘤BJAB细胞杀伤作用及其机制研究
3
作者 范冬梅 杨圆圆 +8 位作者 姜琳琳 熊冬生 杨铭 陶欣勇 周珊 刘红芹 屈浩 韩博文 石釧 《中国肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期220-226,共7页
[目的]探讨融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM对B细胞淋巴瘤细胞株BJAB细胞的杀伤作用及其机制研究。[方法]利用流式细胞分析技术(FACS)和激光共聚焦显微镜技术,检测融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM与BJAB细胞的结合活性。MTT法检测融合蛋白anti-C... [目的]探讨融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM对B细胞淋巴瘤细胞株BJAB细胞的杀伤作用及其机制研究。[方法]利用流式细胞分析技术(FACS)和激光共聚焦显微镜技术,检测融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM与BJAB细胞的结合活性。MTT法检测融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM对BJAB细胞的体外杀伤活性。彗星电泳实验检测融合蛋白anti-CD19 (Fab)-LDM对BJAB细胞DNA的损伤。FACS检测不同浓度融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM处理BJAB细胞后细胞周期的变化。[结果] FACS和激光共聚焦显微镜技术实验结果表明,融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM能与BJAB细胞结合。MTT法实验结果表明,融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM对BJAB细胞杀伤活性较单用力达霉素或阿霉素强,IC50值分别为(0.15±0.02)nmol/L、(0.38±0.03)nmol/L和(57.15±2.30)nmol/L。彗星电泳实验结果表明,用5pmol/L的融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM及力达霉素处理BJAB细胞后,可引起细胞不同程度的DNA损伤,由于融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM具有靶向性和细胞内化的特性,对DNA造成的损伤较力达霉素组明显。FACS结果显示,随着融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM浓度的增加,S期的比例从53.78%升高至77.29%,呈剂量依赖性。[结论]融合蛋白anti-CD19 (Fab)-LDM可以靶向杀伤B细胞淋巴瘤细胞株BJAB,引起细胞周期阻滞,在B细胞淋巴瘤生物治疗中具有潜在的应用价值。 展开更多
关键词 基因工程抗体 融合蛋白 力达霉素 B细胞淋巴瘤 细胞周期
基因药物对动物生长的影响 预览
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作者 张凤洪 黄艳兴 +2 位作者 李源 王立红 董惠峰 《兽医导刊》 2018年第5期75-76,共2页
一、基因药物基因药物也称DNA药物,是基因工程药物的一种。基因工程药物包括重组蛋白多肽药物、反义核酸药物、DNA药物和基因工程抗体等。它是将具有治疗意义的基因重组进真核表达载体,再直接转移到动物或人的细胞内,表达出具有治疗作... 一、基因药物基因药物也称DNA药物,是基因工程药物的一种。基因工程药物包括重组蛋白多肽药物、反义核酸药物、DNA药物和基因工程抗体等。它是将具有治疗意义的基因重组进真核表达载体,再直接转移到动物或人的细胞内,表达出具有治疗作用的多肽或蛋白质,从而达到预防疾病、治疗疾病、调节动物生长、生产性能等目的。它与传统的蛋白质工程药物不同,不需要在体外合成和表达蛋白质, 展开更多
关键词 基因药物 动物生长 基因工程药物 蛋白质工程 基因工程抗体 真核表达载体 治疗作用 多肽药物
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新型小分子纳米抗体药物与靶向治疗的研究进展 预览
5
作者 吴鹏 武文 《实用医药杂志》 2018年第5期458-461,466共5页
基因工程抗体研究通过抗体结构改造、抗体作用新靶点以及新型小分子抗体药物研发等方法 ,使抗体药物逐渐趋于人源化、小型化、高效化,已在临床诊断、治疗等方面得到广泛应用,是肿瘤靶向治疗的重要手段。故着重介绍一种小型化基因工程抗... 基因工程抗体研究通过抗体结构改造、抗体作用新靶点以及新型小分子抗体药物研发等方法 ,使抗体药物逐渐趋于人源化、小型化、高效化,已在临床诊断、治疗等方面得到广泛应用,是肿瘤靶向治疗的重要手段。故着重介绍一种小型化基因工程抗体——纳米抗体。纳米抗体由于其技术的先进性和独特性,与普通抗体药物相比,具有相对分子质量小、易于表达、在血液中半衰期相对较短、穿透力强、免疫原性弱等特点,在抗肿瘤、抗病毒等领域具有广阔前景。 展开更多
关键词 基因工程抗体 纳米抗体 靶向药物
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针对猪瘟病毒E2蛋白的嵌合猪源化单克隆抗体的表达及抗病毒活性鉴定
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作者 陈姝承 孙慧敏 +3 位作者 李素 刘平黄 马吉飞 仇华吉 《生物工程学报》 CSCD 北大核心 2017年第8期1235-1243,共9页
猪瘟(Classical swine fever,CSF)是严重危害养猪业的一种烈性传染病,常造成巨大的经济损失,是世界动物卫生组织要求必须申报的动物疫病之一。猪瘟的病原是猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV),CSFV的结构蛋白由衣壳蛋白(... 猪瘟(Classical swine fever,CSF)是严重危害养猪业的一种烈性传染病,常造成巨大的经济损失,是世界动物卫生组织要求必须申报的动物疫病之一。猪瘟的病原是猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV),CSFV的结构蛋白由衣壳蛋白(C)和囊膜糖蛋白(E~(rns)、E1、E2)构成。E2蛋白是CSFV主要的保护性抗原,可以诱导机体产生中和抗体,从而抵抗CSFV的感染。此前,本团队制备了一株针对CSFV E2蛋白的鼠源单克隆抗体HQ06。文中将HQ06抗体重链和轻链可变区基因与猪源恒定区基因嵌合后克隆至真核表达载体,利用中国仓鼠卵巢(CHO)细胞制备一株针对CSFV E2蛋白的嵌合猪源化单克隆抗体c HQ06。应用ELISA、Western blotting试验证实了c HQ06与CSFV E2蛋白具有良好的反应性;中和试验结果表明c HQ06可以中和CSFV。综上所述,本研究应用CHO细胞稳定表达了具有良好反应性和中和活性的针对CSFV E2蛋白的嵌合猪源化单克隆抗体c HQ06,为研究CSFV E2蛋白结构、功能以及开发新型的CSFV诊断和治疗制剂奠定基础。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 单克隆抗体 基因工程抗体 嵌合表达 悬浮培养
双特性抗体技术演进与作用模式的研究进展
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作者 吕一甫 王志明 《中国新药杂志》 CSCD 北大核心 2017年第20期2431-2438,共8页
双特异性抗体(Bs Ab)融合2种单抗的特异性,能够同时与不同的抗原或抗原表位结合,这种特殊的作用机制使其成为引人注目的治疗药物。经过多年的研究与发展,第一个双特异性抗体于2009年进入市场,另一个于2014年上市,还有众多双特异性抗... 双特异性抗体(Bs Ab)融合2种单抗的特异性,能够同时与不同的抗原或抗原表位结合,这种特殊的作用机制使其成为引人注目的治疗药物。经过多年的研究与发展,第一个双特异性抗体于2009年进入市场,另一个于2014年上市,还有众多双特异性抗体处于临床试验阶段。自然状态下不存在双特异性抗体,只能通过特殊方法进行制备。随着生命科学基础与应用研究的飞速发展,双特异性抗体的分子模式与制备技术在不断的演进,作用机制也在不断创新,应用范围更从肿瘤与炎症疾病,拓展到了遗传疾病。双特异性抗体有望成为未来抗体药物中的重要一员。 展开更多
关键词 双特异抗体 基因工程抗体 Fc区 T细胞 信号传导
单克隆抗体和基因工程抗体在感染性疾病病原体检测中的应用 被引量:5
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作者 赵笑 张冬梅 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2016年第8期I0003-I0004,F0003,F0004共4页
感染性疾病病原体的准确检测对于其有效防控极为重要,也是合理用药、有效治疗的前提。抗体因其高度的特异性和亲和力,已经成为免疫诊断中一个关键性的分子。其类型多样,从多克隆抗体到单克隆抗体,再发展到基因工程抗体,而基因工程... 感染性疾病病原体的准确检测对于其有效防控极为重要,也是合理用药、有效治疗的前提。抗体因其高度的特异性和亲和力,已经成为免疫诊断中一个关键性的分子。其类型多样,从多克隆抗体到单克隆抗体,再发展到基因工程抗体,而基因工程抗体又包括单链抗体、双特异性抗体和多特异性抗体等。各类型抗体在感染性疾病的免疫诊断方面均有应用。本文就单克隆抗体和基因工程抗体在感染性疾病免疫学诊断方面的应用作一综述。 展开更多
关键词 单克隆抗体 基因工程抗体 单链抗体 双特异性抗体 免疫诊断 感染性疾病 综述
靶向免疫检查点治疗肾细胞癌的进展 预览 被引量:1
9
作者 杨康 李魏芳 喻俊峰 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第7期1068-1069,共2页
肾细胞癌(renal cell carcinoma)是成年男性常见的泌尿生殖系肿瘤,发病率与死亡率不断上升。传统的放化疗对肾细胞癌患者无明显疗效。近些年,随着肿瘤分子机制深入研究,临床诊治肾癌患者逐渐向以识别肿瘤突变基因为靶点的个性化治疗转... 肾细胞癌(renal cell carcinoma)是成年男性常见的泌尿生殖系肿瘤,发病率与死亡率不断上升。传统的放化疗对肾细胞癌患者无明显疗效。近些年,随着肿瘤分子机制深入研究,临床诊治肾癌患者逐渐向以识别肿瘤突变基因为靶点的个性化治疗转变,然而机体肿瘤免疫反应的多变性及复杂性使治疗无法达到预期疗效。 展开更多
关键词 肾细胞癌 免疫检查 泌尿生殖系 免疫反应 预期疗效 靶向药物 突变基因 基因工程抗体 免疫逃逸 转移性黑色素瘤
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单链抗体的研究进展及其应用 被引量:9
10
作者 郭海涛 杨光勇 何光志 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第7期76-79,共4页
单链抗体(single chain Fv,ScFv)是继单克隆抗体之后的基因工程抗体,为第3代抗体,其分子质量小,穿透力强,与抗原结合能力较好。ScFv可应用于靶向治疗载体、影像诊断和生物检测等方面,展示出了广阔的应用空间,被誉为一次革命性的进展... 单链抗体(single chain Fv,ScFv)是继单克隆抗体之后的基因工程抗体,为第3代抗体,其分子质量小,穿透力强,与抗原结合能力较好。ScFv可应用于靶向治疗载体、影像诊断和生物检测等方面,展示出了广阔的应用空间,被誉为一次革命性的进展。相信不久的将来,ScFv将凭借自身的优势,在医学、食品卫生和农业等领域发挥巨大作用。文章综述了Sc Fv的研究进展及其应用。 展开更多
关键词 单链抗体(Sc Fv) 基因工程抗体 单链抗体 展示系统 表达 应用
治疗性单抗研究进展与抗体产业关键技术 预览
11
作者 刘伯宁 《中国医药技术经济与管理》 2014年第4期58-65,共8页
抗体技术历经动物血清多克隆抗体、杂交瘤单克隆抗体,以及重组基因工程抗体等不同发展时期,尤其是后者使得治疗性抗体的生产进入产业化阶段。在已上市的抗体药物中,人源化抗体、全人源抗体由于免疫原性小,临床药效好,目前已经成为... 抗体技术历经动物血清多克隆抗体、杂交瘤单克隆抗体,以及重组基因工程抗体等不同发展时期,尤其是后者使得治疗性抗体的生产进入产业化阶段。在已上市的抗体药物中,人源化抗体、全人源抗体由于免疫原性小,临床药效好,目前已经成为抗体药物的主流。随着抗体药物在癌症、免疫调节等治疗领域的广泛应用。抗体产业已经成为国际制药行业的主要组成部分。我国的抗体产业由于品种不足、技术落后,尚处于起步阶段,其行业发展受限于诸多技术瓶颈。 展开更多
关键词 多克隆抗体 产业化阶段 治疗性抗体 单抗 基因工程抗体 抗体药物 制药行业 单克隆抗体
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基因工程抗体在食品安全检测中应用进展研究 预览 被引量:6
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作者 何扩 张秀媛 +2 位作者 杜欣军 王俊平 王硕 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第8期124-128,共5页
基因工程抗体是近年来发展起来的一种新型抗体,将其应用于食品安全检测是目前食品学科领域研究的热点之一.因基因工程抗体具有分子小、免疫原性低、可塑性强、成本低以及可大批量生产等诸多优点,所以在食品污染物检测方面具有潜在的巨... 基因工程抗体是近年来发展起来的一种新型抗体,将其应用于食品安全检测是目前食品学科领域研究的热点之一.因基因工程抗体具有分子小、免疫原性低、可塑性强、成本低以及可大批量生产等诸多优点,所以在食品污染物检测方面具有潜在的巨大应用价值.本文综述了基因工程抗体的分类、对污染物的检测原理、展示技术以及目前基因工程抗体在食品污染物检测方面应用的一些最新进展和存在的不足之处. 展开更多
关键词 基因工程抗体 噬菌体抗体 食品污染物 SCFV
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利用基因工程抗体建立的新型双抗夹心 ELISA法检测Cry1Ac毒素 预览 被引量:1
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作者 张留圈 张霄 +6 位作者 刘媛 徐重新 张存政 谢雅晶 颜春荣 寇莉萍 刘贤金 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第3期634-639,共6页
为明确新型双抗夹心ELISA方法检测Cry1Ac毒素的效果,分别用纯化后的抗Cry1Ac单链抗体和an-ti-Cry1Ac兔多克隆血清(Anti-Cry1Ac-PAbs)作为捕获抗体和检测抗体,通过方阵滴定确定其最佳工作浓度,建立双抗夹心ELISA法。再用优化后的双抗夹... 为明确新型双抗夹心ELISA方法检测Cry1Ac毒素的效果,分别用纯化后的抗Cry1Ac单链抗体和an-ti-Cry1Ac兔多克隆血清(Anti-Cry1Ac-PAbs)作为捕获抗体和检测抗体,通过方阵滴定确定其最佳工作浓度,建立双抗夹心ELISA法。再用优化后的双抗夹心ELISA方法对检测Cry1Ac毒素的敏感性、特异性和回收率进行鉴定。结果表明,新型双抗夹心ELISA法最低检测限为0.91 ng/ml,线性检测范围为1.04 ng/ml~3.49μg/ml。5种稻米中Cry1Ac毒素的平均回收率为69.42%~87.95%,变异系数为1.19%~6.50%。 展开更多
关键词 基因工程抗体 Cry1Ac毒素
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基于基因突变的基因工程抗体亲和力成熟研究 预览 被引量:1
14
作者 邓龙 周思 郭新东 《生物技术进展》 2014年第6期400-404,共5页
基因工程重组抗体可通过对基因序列的分析、修饰与修改,从而改进抗体特性.对基于基因突变的基因工程抗体亲和力成熟的方法进行总结,主要包括小分子有机物-抗体相互作用机制分析、抗体序列数据库及计算机模拟技术,以及新兴的分子模拟与... 基因工程重组抗体可通过对基因序列的分析、修饰与修改,从而改进抗体特性.对基于基因突变的基因工程抗体亲和力成熟的方法进行总结,主要包括小分子有机物-抗体相互作用机制分析、抗体序列数据库及计算机模拟技术,以及新兴的分子模拟与对接技术. 展开更多
关键词 基因工程抗体 分子模拟 基因突变 亲和力成熟
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抗肿瘤抗体药物的研究进展 被引量:1
15
作者 陈琳 李官成 《国际病理科学与临床杂志》 CAS 2013年第2期155-159,共5页
随着生物科技的发展以及对抗体结构与功能的深入研究,抗肿瘤抗体药物历经了裸抗体、单克隆抗体及其衍生物、基因工程抗体三个时代的发展。本文概述了抗肿瘤抗体药物的发展历程及现状、抗肿瘤抗体药物的分类与特点,以及抗体药物治疗肿瘤... 随着生物科技的发展以及对抗体结构与功能的深入研究,抗肿瘤抗体药物历经了裸抗体、单克隆抗体及其衍生物、基因工程抗体三个时代的发展。本文概述了抗肿瘤抗体药物的发展历程及现状、抗肿瘤抗体药物的分类与特点,以及抗体药物治疗肿瘤的基本原理,并且对抗体药物由单一靶点向多靶点、抗体高效小型化、抗体组学与抗体组药物等方向的发展趋势进行了展望。 展开更多
关键词 肿瘤 抗体药物 单克隆抗体 基因工程抗体
嵌合抗体技术研究进展 预览 被引量:1
16
作者 周菁 《数理医药学杂志》 2013年第1期91-94,共4页
综述基因工程抗体中的重要组成部分———嵌合抗体的研究进展。基因工程抗体是第三代抗体,其应用日益受到重视,但是在临床治疗中人抗鼠抗体(HAMA)反应导致鼠源性抗体的应用受到了极大的限制。利用基因工程技术对鼠源性抗体进行改造,... 综述基因工程抗体中的重要组成部分———嵌合抗体的研究进展。基因工程抗体是第三代抗体,其应用日益受到重视,但是在临床治疗中人抗鼠抗体(HAMA)反应导致鼠源性抗体的应用受到了极大的限制。利用基因工程技术对鼠源性抗体进行改造,保留或增加天然抗体的特异性和主要生物学活性、减少鼠源成分,从而克服鼠源性单克隆抗体在临床应用方面的缺陷。 展开更多
关键词 基因工程抗体 人抗鼠抗体 嵌合抗体
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重组嵌合抗人CD22四价基因工程抗体在昆虫杆状病毒中的表达 预览 被引量:1
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作者 马玲 邵帅 +4 位作者 潘汉世 陈凤莲 黄红梅 石胜 吴健敏 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期314-318,共5页
重组嵌合抗人CD22四价基因工程抗体是由一条短肽链将两个鼠源抗CD22mAb的scFv连接起来,再与人IgG1的CH3片段连接所获得重组基因工程抗体(cRFB4-CH3),是目前开发治疗B细胞系淋巴瘤的人源化基因工程抗体。为探讨该重组基因工程抗体高效... 重组嵌合抗人CD22四价基因工程抗体是由一条短肽链将两个鼠源抗CD22mAb的scFv连接起来,再与人IgG1的CH3片段连接所获得重组基因工程抗体(cRFB4-CH3),是目前开发治疗B细胞系淋巴瘤的人源化基因工程抗体。为探讨该重组基因工程抗体高效表达技术,本研究利用DNA重组技术将含有人IgG1的CH3段的抗人CD22四价基因工程抗体基因克隆到含信号肽的重组杆状病毒载体pAcSG2中,构建重组质粒pAcSG2-cRFB4-CH3并转染到Sf9细胞中,构建携带有重组嵌合抗人CD22四价基因工程抗体基因的重组杆状病毒AcNPV-cRFB4-CH3。通过对该重组毒进行PCR和IFA鉴定,证实获得了可以稳定表达抗人CD22四价基因工程抗体的重组杆状病毒。以蚀斑试验进一步纯化病毒,经过3次病毒蚀斑克隆,获得毒价达到4.5×10^7pfu/mL重组病毒,为治疗白血病药物的开发和应用打下了基础。 展开更多
关键词 CD22 人源化 基因工程抗体 杆状病毒 表达
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基因工程抗体抗CD19(Fab)-LDM的制备及生物学活性研究 预览 被引量:4
18
作者 姜琳琳 张孝云 +4 位作者 马莉 颜次慧 齐怀丰 熊冬生 范冬梅 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1363-1368,共6页
目的构建及表达抗CD19(Fab)-LDP(LDP为LDM辅基蛋白)融合蛋白,制备强化融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM,进行体外生物活性的研究。方法采用基因克隆技术,构建基因重组质粒pAZYanti—CD19(Fab)-LDP,测序进行鉴定,转化至大肠杆菌... 目的构建及表达抗CD19(Fab)-LDP(LDP为LDM辅基蛋白)融合蛋白,制备强化融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM,进行体外生物活性的研究。方法采用基因克隆技术,构建基因重组质粒pAZYanti—CD19(Fab)-LDP,测序进行鉴定,转化至大肠杆菌进行表达,表达产物经ProteinG亲和层析柱纯化后,进行SDS—PAGE分析和Westernblot鉴定;采用流式细胞检测技术(FACS)和激光共聚焦显微镜技术,检测融合蛋白与B淋巴瘤Raji细胞的结合活性;采用间接免疫荧光法,检测CD19介导细胞内化的情况;采用MTT法检测强化融合蛋白anti—CD19(Fab)-LDM对CD19‘Raji细胞的靶向杀伤活性;采用彗星电泳的方法,检测强化融合蛋白对Raji细胞DNA的损伤程度。结果用基因工程方法成功的构建、表达融合蛋白anti—CD19(Fab).LDP,ProteinG亲和层析柱纯化后在SDS—PAGE上表现为相对分子质量约60ku蛋白条带,且融合蛋白可与Raji细胞特异结合,并能介导细胞的内化;强化融合蛋白对Raji细胞具有较强的细胞毒性,并能引起细胞DNA损伤。结论强化融合蛋白anti—CD19(Fab)-LDM可以靶向作用于B淋巴瘤细胞,并具有较强的抗肿瘤活性,在恶性B淋巴瘤生物治疗中具有潜在的应用价值。 展开更多
关键词 CD19 力达霉素 B性恶性淋巴瘤 基因工程抗体 DNA损伤 强化融合蛋白
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多克隆抗体制备方法的研究进展 预览 被引量:9
19
作者 贾慧娜 罗海玲 《中国草食动物科学》 CAS 2012年第S1期66-69,共4页
【正】抗体作为一种研究工具,在目前的科研以及医学工作中起到举足轻重的作用,因此对抗体制备的要求水平越来越高。近年来,针对抗体制备过程中抗体的分类、抗原制备、免疫动物及免疫方法选择的研究越来越多,本文旨在对以上几个方面的科... 【正】抗体作为一种研究工具,在目前的科研以及医学工作中起到举足轻重的作用,因此对抗体制备的要求水平越来越高。近年来,针对抗体制备过程中抗体的分类、抗原制备、免疫动物及免疫方法选择的研究越来越多,本文旨在对以上几个方面的科研进展进行综述。1抗体的分类抗体分为天然抗体、单克隆抗体、多克隆抗体及基因工程抗体4类。1975年英国剑桥大学米尔修塔博士把淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合产生杂交瘤细胞,杂交瘤细胞克服淋巴 展开更多
关键词 抗体制备 杂交瘤细胞 基因工程抗体 抗体特异性 骨髓瘤细胞 免疫方法 天然抗体 单克隆抗体 原核表达
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抗体技术研究进展(1):人源抗体技术 预览 被引量:3
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作者 向军俭 童吉宇 王宏 《暨南大学学报:自然科学与医学版》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期524-530,共7页
100年来,抗体的发现为人类疾病诊断、治疗和有害物质的分析检测发挥了巨大的作用.特别是1975年发明了单克隆抗体技术以及1986年发明基因工程抗体技术,为研制特异性高、大量均一并大量生产抗体成为了现实,也使嵌合抗体、全人源抗体... 100年来,抗体的发现为人类疾病诊断、治疗和有害物质的分析检测发挥了巨大的作用.特别是1975年发明了单克隆抗体技术以及1986年发明基因工程抗体技术,为研制特异性高、大量均一并大量生产抗体成为了现实,也使嵌合抗体、全人源抗体造福人类并产生巨大的经济效益.为了克服鼠源性单抗可诱发人抗鼠抗体(HA—MA),通过嵌合抗体、改构抗体、小分子抗体等技术和改良抗体与抗原结合的特异性,已成为抗体技术研究的主要发展方向,本文主要就抗体人源化及抗体分子小型化,抗体功能复合化两个部分的进展进行综述. 展开更多
关键词 抗体 人源化抗体 基因工程抗体 抗体库技术 小分子抗体
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