期刊文献+
共找到61篇文章
< 1 2 4 >
每页显示 20 50 100
高等植物中DELLA蛋白的研究进展
1
作者 王倩 杨凤萍 +2 位作者 张秀海 肖伟 董然 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期3231-3240,共10页
在赤霉素(GA)信号传导过程中,有一类起着负调控作用的蛋白——DELLA蛋白,是GRAS家族的亚家族,因其N端含有DELLA结构域而命名。该蛋白对种子萌发、茎的伸长、下胚轴伸长以及花发育等起着重要的调控作用。本研究主要讲述了DELLA蛋白如何... 在赤霉素(GA)信号传导过程中,有一类起着负调控作用的蛋白——DELLA蛋白,是GRAS家族的亚家族,因其N端含有DELLA结构域而命名。该蛋白对种子萌发、茎的伸长、下胚轴伸长以及花发育等起着重要的调控作用。本研究主要讲述了DELLA蛋白如何参与多种信号传导,分析了模式植物拟南芥中5种DELLA蛋白对植物生长发育的作用,分别介绍了DELLA蛋白的保守结构域及其作用,总结了目前已知DELLA蛋白的克隆及表达情况,最后对今后DELLA蛋白的研究进行展望,以期更好地揭示DELLA蛋白的调控机制。 展开更多
关键词 DELLA蛋白 基因克隆表达 植物激素 信号传导
半滑舌鳎稚鱼脂肪分解关键酶基因的克隆及饲料中脂肪水平对其表达的调控 预览 被引量:2
2
作者 艾庆辉 袁禹惠 +4 位作者 麦康森 李松林 徐玮 张彦娇 周慧慧 《中国海洋大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期65-71,共7页
克隆了半滑舌鳎脂肪分解关键酶基因即激素敏感脂肪酶(Hormone-sensitive lipase,HSL)和脂肪甘油三酯脂肪酶(Adipose triglyceride lipase,ATGL)cDNA部分序列,并探讨了饲料中脂肪水平对半滑舌鳎稚鱼HSL及ATGL基因表达的影响。克隆所... 克隆了半滑舌鳎脂肪分解关键酶基因即激素敏感脂肪酶(Hormone-sensitive lipase,HSL)和脂肪甘油三酯脂肪酶(Adipose triglyceride lipase,ATGL)cDNA部分序列,并探讨了饲料中脂肪水平对半滑舌鳎稚鱼HSL及ATGL基因表达的影响。克隆所得到的HSL和ATGL片段长度分别为589bp和581bp,序列和系统进化分析表明半滑舌鳎的HSL和ATGL与大部分鱼类具有较高的同源性。采用不同水平的鱼油配制成5种不同脂肪水平(6.68%、9.84%、13.47%、17.89%和21.88%干物质)的等氮饲料,饲养35日龄半滑舌鳎稚鱼30d,养殖过程中每天饱食投喂5次,养殖实验结束后采用实时荧光定量PCR分别测定各处理稚鱼内脏团的HSL及ATGL mRNA相对表达量。结果表明,高脂饲料组(21.88%)显著促进了半滑舌鳎稚鱼内脏团HSL基因的表达(P〈0.05),但饲料脂肪水平对于半滑舌鳎稚鱼内脏团的ATGL表达量未产生显著影响(P〉0.05)。 展开更多
关键词 激素敏感脂肪酶 脂肪甘油三酯脂肪酶 基因克隆表达 半滑舌鳎 脂肪水平
在线阅读 下载PDF
对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒衣壳蛋白基因的克隆表达及抗体制备 预览 被引量:2
3
作者 彭小莉 刘棠 +5 位作者 徐维佳 王群力 陈伟玲 陈双雅 王景明 谢明星 《台湾海峡》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期 37-42,共6页
本文根据GenBank登录的对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)的全基因组序列(NC-002190),设计出主要结构蛋白基因的相应引物,从厦门发病的对虾中,提取DNA,以此为模板,利用PCR扩增目的基因.再将目的基因分别与pGEX-6p1载体... 本文根据GenBank登录的对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)的全基因组序列(NC-002190),设计出主要结构蛋白基因的相应引物,从厦门发病的对虾中,提取DNA,以此为模板,利用PCR扩增目的基因.再将目的基因分别与pGEX-6p1载体和pET-28a载体连接,构建重组表达载体pGEX-Ⅳ、pET-Ⅳ,重组子经酶切和测序鉴定后导入表达型大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达,SDS—PAGE检测,大小约为62KDa和41KDa,与预测大小一致.将pET-Ⅳ表达重组蛋白经纯化,免疫小鼠,Western免疫印迹反应结果表明其抗体均可与pGEX-Ⅳ和pET-Ⅳ表达的蛋白发生特异性反应.本研究的结果为对虾IHHNV的快速检测及其免疫提供了研究基础. 展开更多
关键词 传染性皮下造血组织坏死病毒 衣壳蛋白 基因克隆表达 蛋白质纯化 Western免疫印迹 对虾
在线阅读 下载PDF
赵新泰博士在哈作学术报告 预览
4
作者 初秀 《畜牧兽医科技信息》 1996年第8期11-11,共1页
应中国农业科学院哈尔滨兽医研究所的邀请,上海肿瘤研究所赵新泰博士于1996年7月19日在该所作了“细小病毒基因克隆及表达”和“乙肝病毒的基因转录与调控”的报告。然后与会专家和学者进行了座谈。
关键词 基因克隆表达 1996年7月19日 乙肝病毒 学术报告 新泰 细小病毒 基因转录 中国农业科学院 兽医研究所 肿瘤研究
在线阅读 下载PDF
全国血吸虫病防治对策研讨会
5
作者 李久一 袁桂清 《中华医学信息导报》 1994年第9期7-7,共1页
由中国科协主办,中华医学会牵头,联合16个全国性学会、协会、研究会、12个省市、自治区科协及卫生部召开的全国血吸虫病防治对策研讨会,1993年12月7~12日在厦门市召开。会议云集了我国医学、预防医学、动物、生态、微生物、环境、药... 由中国科协主办,中华医学会牵头,联合16个全国性学会、协会、研究会、12个省市、自治区科协及卫生部召开的全国血吸虫病防治对策研讨会,1993年12月7~12日在厦门市召开。会议云集了我国医学、预防医学、动物、生态、微生物、环境、药学、化工、林业、农业、水利、畜牧、兽医、造纸等多学科专家83人,就我国血吸虫病防治现状及对策进行了研讨,会议共收到论文202篇。 展开更多
关键词 血吸虫病防治 对策研讨 血清抗原 日本血吸虫感染 现状对策 特异性 预防医学 基因克隆表达 等位基因酶谱 PCR扩增
茶树CsLHTs亚家族基因的克隆与表达分析 预览
6
作者 郭玲玲 张芬 +5 位作者 张亚真 成浩 韦康 阮丽 吴立赟 王丽鸳 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期280-288,共9页
氨基酸是茶叶的重要品质成分和氮素贮存形式,因此开展茶树体内氨基酸转运蛋白的研究尤为重要。本研究从茶树转录组中筛选得到5条茶树LHTs(Lysine histidine transporters,赖氨酸/组氨酸转运蛋白)家族基因序列,并从龙井43中成功克隆获得... 氨基酸是茶叶的重要品质成分和氮素贮存形式,因此开展茶树体内氨基酸转运蛋白的研究尤为重要。本研究从茶树转录组中筛选得到5条茶树LHTs(Lysine histidine transporters,赖氨酸/组氨酸转运蛋白)家族基因序列,并从龙井43中成功克隆获得4个茶树LHTs基因,分别命名为CsLHT1、CsLHT6、CsLHT8.1和CsLHT8.2。对该亚家族编码的氨基酸序列的理化性质和功能结构进行预测,结果显示CsLHTs亚家族含有9~11个跨膜区;且含有与氨基酸转运相关的结构域。为了明确在不同茶树品种和氮素水平间CsLHTs基因的表达差异,本研究选用3个茶树品种的扦插苗为试验材料,水培条件下氮饥饿两周后,分别用0.2、2、10mmol·L^-1的NH4NO3进行处理。利用qRT-PCR分析了CsLHTs在不同组织间的表达情况,结果表明4个基因在茶树营养组织中均有表达。经氮素处理后,CsLHTs基因在3个氮素水平和3个品种中呈现出不同的变化规律。CsLHT1、CsLHT6和CsLHT8.2在品种间的表达差异程度高于不同氮素水平间的基因表达差异。CsLHT8.1对氮素处理有明显的响应,尤其经0.2mmol·L^-1和10mmol·L^-1的NH4NO3处理72h后,在氮高效品种中茶302根中呈上调表达,表明CsLHT8.1可能参与氨基酸由根部向地上部的转运过程。 展开更多
关键词 茶树 LHTs 氮素 基因克隆表达
在线阅读 下载PDF
重组草酸青霉生淀粉糖化酶的酶学特性鉴定 预览
7
作者 徐强胜 闫语丝 冯家勋 《广西科学》 CAS 2017年第1期83-91,共9页
【目的】了解在毕赤酵母中表达的来源于草酸青霉(Penicillium oxalicum)GXU20的重组生淀粉糖化酶的酶学特性。【方法】用3,5-二硝基水杨酸法测定pH值、温度、金属离子和化学试剂对纯化的重组生淀粉糖化酶的活力的影响,同时测定酶的底... 【目的】了解在毕赤酵母中表达的来源于草酸青霉(Penicillium oxalicum)GXU20的重组生淀粉糖化酶的酶学特性。【方法】用3,5-二硝基水杨酸法测定pH值、温度、金属离子和化学试剂对纯化的重组生淀粉糖化酶的活力的影响,同时测定酶的底物特异性、酶对生淀粉的吸附能力以及酶对不同生淀粉的水解效率等,用高效液相色谱法对该酶水解生木薯淀粉的产物进行分析鉴定,用扫描电子显微镜观察重组酶对不同生淀粉颗粒的水解方式。【结果】重组生淀粉糖化酶rPoGA15A的最适pH值为4.5,最适温度为65℃,在pH值为2.010.0时,重组酶具有较好的pH耐受性,温度小于50℃时,酶的稳定性好。除Ag+、Cu2+和SDS之外,其他大部分金属离子和化学试剂对重组酶的酶活力影响不大。重组生淀粉糖化酶对大米和玉米生淀粉的活性较高,对木薯和马铃薯生淀粉的活性次之,重组生淀粉糖化酶rPoGA15A对不同生淀粉的吸附能力与其对相应不同生淀粉的水解活性大小呈正相关。扫描电子显微镜观察表明重组生淀粉糖化酶对不同生淀粉颗粒的降解作用明显,水解方式各有特点。高效液相色谱分析表明该重组生淀粉糖化酶水解生木薯淀粉的产物仅有葡萄糖。重组生淀粉糖化酶rPoGA15A在40℃下对大米和玉米生淀粉水解72h后水解率分别达到86.5%和71.9%。【结论】重组生淀粉糖化酶具有广泛的pH耐受性,对生淀粉具有高水解活性,在生淀粉的水解和生料同步糖化发酵生产酒精中有一定的应用潜力。 展开更多
关键词 草酸青霉 生淀粉糖化酶 基因克隆表达 酶学性质
在线阅读 免费下载
黄鳝性逆转过程中Gsdf基因cDNA片段的克隆和表达分析
8
作者 潘丽莎 荣萍 +2 位作者 吴昊伟 王倩 曲宪成 《生命科学研究》 CAS CSCD 2017年第2期149-153,共5页
通过RT-PCR法从黄鳝性腺中首次克隆获得黄鳝Gsdf(gonadal soma-derived factor)基因的片段序列,该片段序列长218 bp,编码72个氨基酸。氨基酸序列分析表明黄鳝Gsdf基因片段与其他物种的相似性在61%~76%之间,其中与舌齿鲈(Dicentrarchu... 通过RT-PCR法从黄鳝性腺中首次克隆获得黄鳝Gsdf(gonadal soma-derived factor)基因的片段序列,该片段序列长218 bp,编码72个氨基酸。氨基酸序列分析表明黄鳝Gsdf基因片段与其他物种的相似性在61%~76%之间,其中与舌齿鲈(Dicentrarchus labrax)GsdfⅠ型、舌齿鲈GsdfⅡ型同源性最高,均为76%;系统进化树显示,黄鳝Gsdf与尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)Gsdf基因聚成一支,与鲈形目鱼类亲缘关系较近。此外,不同性腺组织的基因检测结果显示,黄鳝Gsdf在卵巢和间期性腺的表达量很低,两者没有显著性差异(P〉0.05);在精巢组织中的表达量显著高于卵巢、间期性腺组织的表达量(P〈0.05)。上述结果表明Gsdf基因可能在黄鳝的性腺尤其是精巢的分化和发育过程中起着重要的作用。 展开更多
关键词 黄鳝 性逆转 Gsdf 基因克隆表达 实时荧光定量PCR
深黄被孢霉苹果酸酶基因的克隆和表达
9
作者 崔锦锦 李凌彦 +3 位作者 季秀玲 林连兵 魏云林 张琦 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期129-133,共5页
为了克隆与表达深黄被孢霉(Mortierella isabellina)M6-22苹果酸酶基因,根据深黄被孢霉M6-22转录组测序结果,以其c DNA为模板PCR扩增苹果酸酶基因编码序列,经测序验证分析后将扩增片段连接到表达载体pET-32a(+)中构建重组表达质粒p... 为了克隆与表达深黄被孢霉(Mortierella isabellina)M6-22苹果酸酶基因,根据深黄被孢霉M6-22转录组测序结果,以其c DNA为模板PCR扩增苹果酸酶基因编码序列,经测序验证分析后将扩增片段连接到表达载体pET-32a(+)中构建重组表达质粒pET32a MIME2并进一步转化入大肠杆菌BL21中进行诱导表达,经镍柱亲和纯化目的蛋白和酶活分析确定其为苹果酸酶.PCR扩增得到全长为1 815 bp的cDNA序列,序列分析表明该序列具有一个编码604个氨基酸的开放阅读框,预测编码蛋白分子量(Mr)为66.4×10^3.预测的氨基酸序列与已报道的苹果酸酶同样具有保守的2个二核苷酸结合结构域和1个二价金属离子结合结构域,因此是一个新的苹果酸酶基因序列,命名为MIME2,Gen Bank序列号为KU097323.将该序列转化大肠杆菌BL21中进行诱导表达,SDS-PAGE电泳检测到1条约67×10^3的蛋白条带表达,经镍柱纯化和酶活分析表明所纯化蛋白能催化苹果酸脱氢生成丙酮酸,同时生成NADPH,具有苹果酸酶的特性,其酶活大小为177.46 U/mg.以上结果证明所克隆的cDNA序列MIME2为1个新的苹果酸酶基因,基因编码蛋白具有苹果酸酶活性,可为深入研究苹果酸酶的结构和功能关系以及进一步应用奠定基础. 展开更多
关键词 深黄被孢霉 苹果酸酶 基因克隆表达 NADPH
KIF11结构域在真核细胞的表达及其对细胞增殖的影响 预览 被引量:1
10
作者 郑桂玉 黄振强 +1 位作者 顾巍 林立 《汕头大学医学院学报》 2013年第2期85-88,F0002共5页
目的:研究不同KIF11蛋白结构域对细胞增殖的影响,并检测对人HEK293T细胞增殖的抑制效果。方法:PCR扩增全长KIF11编码的mRNA,将含有HA抗原表位的KIF11-motor、-tail等结构域克隆到真核表达载体中。观察这些结构域在HEK293T中的表达... 目的:研究不同KIF11蛋白结构域对细胞增殖的影响,并检测对人HEK293T细胞增殖的抑制效果。方法:PCR扩增全长KIF11编码的mRNA,将含有HA抗原表位的KIF11-motor、-tail等结构域克隆到真核表达载体中。观察这些结构域在HEK293T中的表达和对细胞增殖的影响。结果:表达载体转染后,KIF11-motor、-tail能在细胞内有效表达,且都能抑制细胞增殖。结论:KIF11-tail抑制细胞增殖的能力比KIF11-motor更有效。 展开更多
关键词 KIF11蛋白结构域 基因克隆表达 细胞增殖
在线阅读 免费下载
长野芽胞杆菌(Bacillus naganoensis)普鲁兰酶在大肠杆菌中的活性表达与分泌调控 被引量:11
11
作者 严伟 聂尧 徐岩 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期145-153,共9页
【目的】从长野芽胞杆菌(Bacillus naganoensis)JNB-1中克隆出普鲁兰酶基因并在大肠杆菌系统中表达,通过优化诱导条件和使用化学添加剂提高了胞外酶活。【方法】采用PCR方法,从B.naganoensis基因组中扩增出普鲁兰酶基因pul,构建重组菌... 【目的】从长野芽胞杆菌(Bacillus naganoensis)JNB-1中克隆出普鲁兰酶基因并在大肠杆菌系统中表达,通过优化诱导条件和使用化学添加剂提高了胞外酶活。【方法】采用PCR方法,从B.naganoensis基因组中扩增出普鲁兰酶基因pul,构建重组菌E.coli BL21/pET-20b-pul。通过优化,确定优化后的IPTG诱导条件以及甘氨酸、Na+的最佳添加参数。【结果】普鲁兰酶在大肠杆菌中得到有效表达,其相对分子质量为119kDa。在优化后的诱导条件(诱导温度20℃,IPTG终浓度0.4 mmol/L,在菌体OD600至1.2时诱导)下,普鲁兰酶的总酶活达到10.8 U/mL。添加甘氨酸和Na+均能有效促进普鲁兰酶的分泌。在诱导时添加终浓度0.08 mol/L的甘氨酸和0.2 mol/L Na+,胞外酶活提高至8.1 U/mL,是不加任何添加剂的10.3倍。【结论】该重组菌的构建为普鲁兰酶制剂的工业生产提供了有价值的菌株,对化学添加剂促进分泌的研究也为重组酶的高水平胞外生产提供了有效的方法。 展开更多
关键词 普鲁兰酶 基因克隆表达 诱导条件 优化 化学添加剂 分泌
二氯喹啉酸诱导的稗草转录因子EcMYB1基因的克隆与表达 预览
12
作者 李岗 王强 +3 位作者 蔡磊明 吴声敢 赵学平 吴长兴 《农业生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1166-1175,共10页
稗草(Echinochloa crus-galli)是稻田恶性杂草,二氯喹啉酸(quinclorac)是防治稗草的特效药,但长期使用出现了抗药性稗草.为揭示稗草对二氯喹啉酸的抗药性机制,本研究采用cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE... 稗草(Echinochloa crus-galli)是稻田恶性杂草,二氯喹啉酸(quinclorac)是防治稗草的特效药,但长期使用出现了抗药性稗草.为揭示稗草对二氯喹啉酸的抗药性机制,本研究采用cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术从抗二氯喹啉酸的稗草中克隆了一个MYB转录因子基因,命名为EcMYBl (GenBank登录号:JX518599),其cDNA全长为1 844 bp,开放阅读框为1 527 bp,编码508个氨基酸,理论分子量为55.4 kD,等电点为8.6.EcMYB1蛋白含有3个保守的MYB结构域,属于植物中不常见的R1R2R3-MYB类型.基于蛋白质序列的系统进化分析表明,EcMYB1与禾本科植物玉米(Zea mays)、高梁(Sorghum bicolor)的同源序列有较近的亲缘关系.采用整株量效实验,测定了二氯喹啉酸敏感和抗性的两种稗草近等基因系的抗药性水平,敏感生物型的GR50(growth reduction by 50%,抑制生长50%时的浓度)值为158.3 g·AI(active ingredient)/hm2,抗性生物型的GR50值为858.0 g·AI/hm2,抗性指数为5.4.以稗草EcActin (GenBank登录号:HQ395760)作为内参的Real-time PCR实验,测定EcMYB1在抗、感稗草生物型的苗期叶、根和成株期根、茎、叶和种子中的表达,结果表明,EcMYB1在抗、感生物型的各组织中均有表达,相对表达量分别是26.22~52.50和6.85~34.62,其中在抗药性稗草苗期叶中的相对表达量最高为52.50,而在敏感稗草成株叶中的相对表达量最低为6.85,抗性稗草比敏感稗草高1.22~4.78倍.受二氯喹啉酸诱导后,其表达量在抗、感稗草中均升高,相对表达量分别为189.66~395.45和61.91~144.29,其中在抗性稗草苗期根中的相对表达量最高为395.45,而在敏感稗草的成株茎中的相对表达量最低为61.91,抗性稗草比敏感稗草高2.46~4.06倍.抗、感稗草生物型的EcMYBl mRNA水平差异表达暗示它可能参与了稗草对二氯喹啉酸的抗药性.这为后续该基因在稗草抗药性的功能研� 展开更多
关键词 抗药性稗草 二氯喹啉酸诱导基因 EcMYB1基因克隆表达
在线阅读 下载PDF
一个橡胶树咖啡酸甲基转移酶基因(COMT)的克隆和表达分析 预览 被引量:3
13
作者 戚继艳 方永军 +1 位作者 龙翔宇 唐朝荣 《农业生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期838-846,共9页
咖啡酸甲基转移酶(COMT)是木质素合成途径的关键酶,在植物抗逆反应中发挥重要作用。本研究基于本实验室已建立的橡胶树Heveabrasiliensis)胶乳EST数据库,对组装后序列(Contig)检索并设计引物,利用PCR技术克隆到一个橡胶树COMT... 咖啡酸甲基转移酶(COMT)是木质素合成途径的关键酶,在植物抗逆反应中发挥重要作用。本研究基于本实验室已建立的橡胶树Heveabrasiliensis)胶乳EST数据库,对组装后序列(Contig)检索并设计引物,利用PCR技术克隆到一个橡胶树COMT基因,命名为HbCOMTl(GenBank登录号为GI:443908530)。该基因全长1926bp,由4个外显子和3个内含子组成,编码368个氨基酸,预测蛋白的分子量为40.58kD,等电点为5.46,具有植物O一甲基转移酶的典型特征。系统进化分析显示HbCOMTl蛋白与蓖麻(Ricinuscommunis)~[1葡萄(Vitisvinifera)的COMT聚为一组,其他11种植物的COMT则另成一组。基因表达分析显示HbCOMTl在胶乳中的表达量最高,其次是叶片和树皮,花、芽中的表达量较低,种子中几乎不表达。同时,HbCOMTl基因在胶乳中的表达量随割次增加明显上升,显著受伤害诱导,受死皮调控,但对乙烯利应答不明显。本研究首次从橡胶树中克隆了一个COMT基因,了解了其基因结构与表达特性,推测该基因可能参与乳管的胁迫应答和排胶调控,为深入揭示该基因功能提供基础资料。 展开更多
关键词 橡胶树 咖啡酸甲基转移酶 基因克隆表达特性 胁迫应答
在线阅读 下载PDF
植物类黄酮O-甲基转移酶研究进展 预览 被引量:6
14
作者 张传丽 仲月明 +1 位作者 沈丹红 陈鹏 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期1274-1281,共8页
植物类黄酮O-甲基转移酶(flavonoid0-methyltransferase,FOMT)属转移酶类的甲基转移酶家族,是一类可催化S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosybL-methionine,SAM)中的-CH3基团转移到类黄酮-0H上的蛋白质酶。甲基化是类黄酮物质最基本、最主... 植物类黄酮O-甲基转移酶(flavonoid0-methyltransferase,FOMT)属转移酶类的甲基转移酶家族,是一类可催化S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosybL-methionine,SAM)中的-CH3基团转移到类黄酮-0H上的蛋白质酶。甲基化是类黄酮物质最基本、最主要的修饰反应之一,不仅可以降低类黄酮的化学反应活性,而且增加了其脂溶性,赋予了类黄酮更多的生理生化特性。该文对近年来国内外有关类黄酮甲基化对植物中FOMT催化的生理生化代谢反应、FOMT的分类、FOMT酶蛋白结构域、生物学功能以及FOMT基因克隆与表达调控等方面的研究进展进行综述,为植物类黄酮更广泛、更深入的研究提供新的思路与途径。 展开更多
关键词 类黄酮O-甲基转移酶 分类 结构域 基因克隆表达 生物学功能
在线阅读 下载PDF
泥蚶(Tegillarcagranosa)精氨酸激酶的基因克隆与表达 预览 被引量:2
15
作者 李松伟 李晔 +2 位作者 李成华 李太武 苏秀榕 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期119-123,共5页
利用PCR扩增技术,从泥蚶的cDNA文库中克隆出了精氨酸激酶(argininekinase)基因,并进行了原核表达。精氨酸激酶是调节能量代谢的重要酶类,在无脊椎动物体内能量平衡过程中起重要作用。结果表明,泥蚶的精氨酸激酶全长160Ibp,包括5... 利用PCR扩增技术,从泥蚶的cDNA文库中克隆出了精氨酸激酶(argininekinase)基因,并进行了原核表达。精氨酸激酶是调节能量代谢的重要酶类,在无脊椎动物体内能量平衡过程中起重要作用。结果表明,泥蚶的精氨酸激酶全长160Ibp,包括5’非翻译区(5'-UTR)序列332bp,3’非翻译区(3'-UTR)序列246bp、1023bp的开放阅读框序列(ORF),编码340个氨基酸,具有精氨酸激酶典型的酶活性部位氨基酸序列(CPTNLGT)。构建了原核表达质粒AK—pET-28a(+)转化表达菌株,经IPTG诱导表达后,获得了与预期的分子量大小一致的表达产物。利用该目的蛋白制备了泥蚶精氨酸激酶的特异性多克隆抗体,经Westernblot证明该蛋白为精氨酸激酶。 展开更多
关键词 泥蚶 精氨酸激酶 基因克隆表达 克隆抗体
在线阅读 下载PDF
产纤维素酶菌株选育技术研究进展 预览 被引量:2
16
作者 蒋倩婷 宋斌 闫文娟 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2011年第6期 584-587,共4页
综述了产纤维素酶菌株选育技术的研究进展,包括常规理化诱变、原生质体融合技术、基因工程技术、原生质体诱变技术和基因组改组技术等方面。
关键词 纤维素酶 诱变 原生质体 基因克隆表达 基因组改组
在线阅读 下载PDF
松鼠胰腺型核糖核酸酶A基因的克隆与表达 预览
17
作者 董安康 徐宏博 +2 位作者 陶凤云 王旭颖 赵伟 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期134-138,共5页
核糖核酸酶A(ribonucleases A,RNases A)构成一个大家族,其成员表现出不同程度的水解RNA的酶活性。一些成员还表现出特殊的生物学活性。旨在克隆松鼠核糖核酸酶A的基因,利用原核细胞系统表达重组蛋白,并进行初步的酶学性质的研究。结... 核糖核酸酶A(ribonucleases A,RNases A)构成一个大家族,其成员表现出不同程度的水解RNA的酶活性。一些成员还表现出特殊的生物学活性。旨在克隆松鼠核糖核酸酶A的基因,利用原核细胞系统表达重组蛋白,并进行初步的酶学性质的研究。结果表明,所克隆的基因属于核糖核酸酶A家族,保留了核糖核酸酶A家族酶活性必要的保守序列。进化分析表明,该基因属于松鼠胰腺型核糖核酸酶基因,与其它啮齿类动物胰腺型酶一样,重组的核糖核酸酶具有酶活性,为进一步进行啮齿类动物核糖核酸酶的宿主防卫功能研究打下了基础。 展开更多
关键词 松鼠 胰腺型核糖核酸酶 基因克隆表达
在线阅读 免费下载
圆斑星鲽MHCⅠα基因的克隆与组织表达分析 预览 被引量:4
18
作者 王娟 王宏伟 +4 位作者 刘星 李宏俊 苏浩 高祥刚 赫崇波 《水产科学》 CAS 北大核心 2011年第8期 457-462,共6页
采用表达序列标签法和cDNA末端快速扩增(RACE)技术,成功获得了圆斑星鲽主要组织相容性复合体MHCⅠα的全长cDNA序列。该cDNA全长2171 bp,5′UTR为20 bp,3′UTR为1053bp,开放阅读框(ORF)长度为1098 bp,可编码365个氨基酸,包含信号肽... 采用表达序列标签法和cDNA末端快速扩增(RACE)技术,成功获得了圆斑星鲽主要组织相容性复合体MHCⅠα的全长cDNA序列。该cDNA全长2171 bp,5′UTR为20 bp,3′UTR为1053bp,开放阅读框(ORF)长度为1098 bp,可编码365个氨基酸,包含信号肽、抗原结合域(α1、α2),IGC类似区(α3),连接肽(跨膜区)和胞质区5个结构域。同源分析表明,圆斑星鲽MHCⅠα氨基酸序列与其他硬骨鱼具有31%~74%的同源性,与人的相似性较低。利用荧光定量PCR分析组织表达发现MHCⅠα基因在健康圆斑星鲽9种组织中均有表达,但表达量存在差异,肾的表达量最高,肌肉和皮的表达量最低。 展开更多
关键词 圆斑星鲽 MHCⅠα 基因克隆表达
在线阅读 下载PDF
人白细胞介素32基因的克隆表达及其生物学活性的研究 被引量:1
19
作者 田兆菊 江新泉 +4 位作者 陈强 徐希柱 马玉红 焦凤萍 叶文静 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期 1284-1287,共4页
目的:克隆人白细胞介素32(hIL-32)基因,构建高效稳定的hIL-32大肠杆菌表达菌株,并对纯化的目的蛋白进行生物学活性的初步测定。方法:将人外周血单个核细胞(PBMC)经刀豆素A(ConA)刺激60h后提取细胞的总RNA,通过逆转录聚合酶... 目的:克隆人白细胞介素32(hIL-32)基因,构建高效稳定的hIL-32大肠杆菌表达菌株,并对纯化的目的蛋白进行生物学活性的初步测定。方法:将人外周血单个核细胞(PBMC)经刀豆素A(ConA)刺激60h后提取细胞的总RNA,通过逆转录聚合酶链式反应(RT—PCR)从刺激的PBMC中扩增出hIL-32的基因,通过基因克隆技术,构建hIL-32在pET-30a(+)中的重组质粒pET30a-hIL32,用IPTG进行诱导,得到hIL-32的原核表达蛋白;采用Ni^2+-NTA亲和层析方法纯化目的蛋白;应用ELISA方法检测纯化蛋白诱导人PBMC产生IL-6的情况。结果:序列测定表明,hIL-32基因核昔酸长度为567bp,编码189个氨基酸。重组质粒pET30-hIL32转化至大肠杆菌BL2I(DE3),重组菌菌体裂解物SDS—PAGE可检测到相对分子质量(Mr)为28000的重组蛋白,表达的重组蛋白IL-32可促进人PBMC产生IL-6,浓度达到(127±4.8)ng/L,而对照组IL-6的浓度仅为(25±2.3)ng/L。结论:成功克隆了hIL-32基因并构建了高效且稳定表达hIL-32基因的大肠杆菌菌株,且表达的目的蛋白能诱导IL-6细胞因子的产生。 展开更多
关键词 白细胞介素-32 基因克隆表达 大肠杆菌 生物学活性
中国林蛙Onconase样核糖核酸酶的基因克隆和表达 预览 被引量:1
20
作者 徐宏博 王天航 +2 位作者 董安康 陶凤云 赵伟 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期 130-134,共5页
Onconase是从美洲豹蛙卵中提取的一种核糖核酸酶,由于其抗肿瘤活性而具有潜在的临床应用价值。以中国林蛙基因组为模板,克隆了一个新的RNase基因,并由此推导出了成熟林蛙RNase的氨基酸顺序。该酶是由103个氨基酸残基组成的,它保留了RNas... Onconase是从美洲豹蛙卵中提取的一种核糖核酸酶,由于其抗肿瘤活性而具有潜在的临床应用价值。以中国林蛙基因组为模板,克隆了一个新的RNase基因,并由此推导出了成熟林蛙RNase的氨基酸顺序。该酶是由103个氨基酸残基组成的,它保留了RNase A家族成员酶催化活性必须的组氨酸和赖氨酸残基,以及CKXXNTF的序列特征,与Onconase具有73%的氨基酸顺序的相似性。林蛙酶比Onconase少一个氨基酸,成为迄今为止发现的RNaseA家族中的最小成员;并且,林蛙酶拥有的精氨酸和酪氨酸残基比Onconase多3个。此外,在利用原核表达系统对林蛙RNase基因进行表达的过程中,表达产物对宿主显示出一定的细胞毒性。 展开更多
关键词 中国林蛙 核糖核酸酶 基因克隆表达
在线阅读 免费下载
上一页 1 2 4 下一页 到第
使用帮助 返回顶部 意见反馈