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进口转基因大豆品系检测及分析 认领 被引量:2
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作者 潘广 杨帆 +4 位作者 章桂明 刘新娇 卢小雨 向才玉 凌杏园 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期298-305,共8页
用17种大豆品系特异性检测方法对我国进口自美国、巴西、加拿大和阿根廷四个国家的41批转基因大豆进行检测。分析检测结果显示:在41批进口大豆中仅17个品系中的7种批准大豆品系被检出,分别是MON89788、GTS40-3-2、MON87701、MON87708、A... 用17种大豆品系特异性检测方法对我国进口自美国、巴西、加拿大和阿根廷四个国家的41批转基因大豆进行检测。分析检测结果显示:在41批进口大豆中仅17个品系中的7种批准大豆品系被检出,分别是MON89788、GTS40-3-2、MON87701、MON87708、A2704-12、A5547-127和FG72,检出率分别为90.24%、87.80%、43.90%、41.46%、36.59%、17.07%和2.44%;不同批次样品检出品系不同,其中6批样品检出1种品系,其余样品均能检出2~5种品系;各国大豆检出品系也不同,其中美国检出7种,而巴西、加拿大和阿根廷分别检出6、5和3种;尽管不同国家大豆检出品系和含量不同,但4大转基因大豆出口国均有GTS40-3-2和MON89788两种品系检出,且含量高。期待以上结果为我国进境转基因大豆检测提供参考,并作为进口转基因大豆安全监管的依据。 展开更多
关键词 进口大豆 转基因大豆 品系检测
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进口薯格中转基因成分的检测 认领
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作者 杨静 郑秋月 +3 位作者 王宏伟 韩慧 张公亮 曹际娟 《食品安全质量检测学报》 2015年第1期107-112,共6页
目的建立了一种快速检测进出口食品中转基因成分的方法。方法本实验采用DNA提取试剂盒对薯格中的DNA进行快速提取,接着用实时荧光PCR方法对其进行转基因成分和品系的鉴定。结果通过对食品标签进行初筛,发现其标识成分中含有未标明的转... 目的建立了一种快速检测进出口食品中转基因成分的方法。方法本实验采用DNA提取试剂盒对薯格中的DNA进行快速提取,接着用实时荧光PCR方法对其进行转基因成分和品系的鉴定。结果通过对食品标签进行初筛,发现其标识成分中含有未标明的转基因成分。进一步对所含转基因成分的品系进行鉴定,确定薯格的外包裹玉米粉中含有多种转基因成分,包括转基因玉米TC1507、NK603、MON810、59122、MON89034等5个品系。结论本文方法可以用于加工食品中转基因玉米成分及品系的定性检测,也可以作为常规PCR定性方法的确证试验方法。 展开更多
关键词 实时荧光PCR 转基因玉米 品系检测
酶连接探针杂交芯片特异性检测转基因水稻品系 认领 被引量:1
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作者 张明哲 陈吴健 +3 位作者 张晓峰 陈笑梅 陈曦 吴蓉 《食品科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期222-225,共4页
酶连接探针杂交芯片是一种基于连接酶催化的探针杂交芯片技术,其原理是采用硫代引物保护法,利用Lambda DNA外切酶将多重聚合酶链式反应产物切割成单链.在氨基修饰的芯片上固定5'端探针,并与制备的产物单链进行杂交,加入荧光修饰的第2... 酶连接探针杂交芯片是一种基于连接酶催化的探针杂交芯片技术,其原理是采用硫代引物保护法,利用Lambda DNA外切酶将多重聚合酶链式反应产物切割成单链.在氨基修饰的芯片上固定5'端探针,并与制备的产物单链进行杂交,加入荧光修饰的第2个探针与之前的探针进行酶连接反应,从而实现高特异性、高通量检测.结果表明:酶连接探针杂交芯片技术检测4种转基因水稻品系特异性好,灵敏度可达0.1%(m/m),可以应用于进出口检验检疫、食品安全监测等领域. 展开更多
关键词 酶连接探针杂交芯片 转基因水稻 品系检测
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利用多重PCR技术快速检测五个转基因大豆品系 认领 被引量:10
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作者 董立明 李葱葱 +4 位作者 邢珍娟 邵改革 夏蔚 闫伟 李飞武 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期1002-1007,共6页
转基因大豆305423、MON89788、CV127、GTS40-3—2、356043作为商品化应用最为广泛的大豆品系,种植面积占世界转基因大豆总种植面积的80%以上。根据大豆内标准基因Lectin和5种转基因大豆品系的边界序列设计特异性引物。通过验证引物的... 转基因大豆305423、MON89788、CV127、GTS40-3—2、356043作为商品化应用最为广泛的大豆品系,种植面积占世界转基因大豆总种植面积的80%以上。根据大豆内标准基因Lectin和5种转基因大豆品系的边界序列设计特异性引物。通过验证引物的适用性、特异性和灵敏度,优化多重PCR检测体系中不同引物的用量及反应退火温度,建立了能同时扩增大豆内源基因Lectin和5个转基因大豆品系的六重PCR检测体系。结果表明:确定的大豆内源基因和5个转基因大豆品系的引物具有很好的特异性,引物之间无交叉扩增和非特异性扩增,多重PCR方法的检测灵敏度达到0.1%。该方法可作为转基因大豆及其产品成分检测的辅助手段,快速检测转基因大豆及其产品中的相应品系。 展开更多
关键词 转基因大豆 多重PCR 品系特异性检测
转基因大豆MON89788实时荧光PCR检测方法的建立 认领 被引量:8
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作者 刘欣 张国丛 +2 位作者 周兴虎 祝长青 黄明 《食品科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期193-197,共5页
为实现转基因大豆MON89788的标识管理,针对转基因大豆MON89788的品系特异性序列设计引物和Taq Man探针,建立转基因大豆MON89788实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法,并对该方法的特异性、灵敏度和重复性进... 为实现转基因大豆MON89788的标识管理,针对转基因大豆MON89788的品系特异性序列设计引物和Taq Man探针,建立转基因大豆MON89788实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法,并对该方法的特异性、灵敏度和重复性进行检测。结果显示:建立的转基因大豆MON89788实时荧光PCR检测方法能扩增出127 bp的产物,特异性强,灵敏度达到0.1%,约为40个单倍体基因组拷贝,检测重复性好,可成功应用于实际样品检测。因此,建立的转基因大豆MON89788实时荧光PCR检测方法可以应用于转基因大豆MON89788大豆及其制品的检测。 展开更多
关键词 转基因大豆 MON89788品系 实时荧光PCR 品系特异性检测 转基因标识
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多重PCR-液相芯片技术检测13个品系转基因玉米 认领 被引量:5
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作者 傅凯 黄文胜 +3 位作者 邓婷婷 李富威 刘昊 陈颖 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第1期188-197,共10页
为建立多重PCR-液相芯片检测13个品系的转基因玉米的方法,针对BT11,BT176,Mon810,Mon863,T25,GA21,NK603,TC1507,Mon89034,Mir162,Mon88017,MIR604和BVLA430101这13种玉米品系的侧翼序列,设计合成了品系特异性引物/探针。在生物素标记的... 为建立多重PCR-液相芯片检测13个品系的转基因玉米的方法,针对BT11,BT176,Mon810,Mon863,T25,GA21,NK603,TC1507,Mon89034,Mir162,Mon88017,MIR604和BVLA430101这13种玉米品系的侧翼序列,设计合成了品系特异性引物/探针。在生物素标记的PCR扩增产物与固定在荧光编码微球上的品系特异探针杂交后,对微球进行流式检测。试验结果显示,13种转基因玉米的引物和探针具有较高的特异性,引物/探针相互之间无交叉扩增和非特异杂交,大部分转基因玉米品系的检测灵敏度达到0.1%水平,符合欧盟和其他国家有关转基因产品标识的要求。本方法的检测效率和准确性均高于传统方法,可作为进出口转基因产品和国内转基因检测的有效方法。 展开更多
关键词 液相芯片 转基因玉米 多重PCR 品系特异性检测
转基因玉米BT11品系环介导等温扩增(LAMP)检测方法的建立 认领 被引量:4
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作者 王清华 徐君怡 +2 位作者 曹冬梅 刘宇 曹际娟 《食品安全质量检测学报》 2013年第3期共5页
目的建立转基因玉米BT 11品系的环介导等温扩增(LAMP)检测方法。方法根据转基因玉米BT 11品系特有序列(AY123624.1和AY629236)设计引物,优化建立LAMP反应体系,对该体系进行特异性、灵敏度、稳定性分析。结果本研究设计的引物具有很好... 目的建立转基因玉米BT 11品系的环介导等温扩增(LAMP)检测方法。方法根据转基因玉米BT 11品系特有序列(AY123624.1和AY629236)设计引物,优化建立LAMP反应体系,对该体系进行特异性、灵敏度、稳定性分析。结果本研究设计的引物具有很好的特异性,可特异性检测出转基因玉米BT 11品系;检测灵敏度可达0.5%;经精密度实验分析,该方法的稳定性良好。结论 LAMP方法检测转基因玉米品系BT 11具有特异性高、稳定性好、快速灵敏、过程可视等优点,具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 转基因玉米BT 11 环介导等温扩增(LAMP) 品系鉴定检测
转基因玉米59122品系的特异性检测 认领 被引量:8
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作者 许文涛 杨蓉 +4 位作者 陆姣 张南 罗云波 何景 黄昆仑 《食品科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期139-142,共4页
使用反向聚合酶链式反应(PCR)技术克隆了转基因玉米59122的外源基因与玉米基因组之间的两段侧翼序列,并据其左侧侧翼序列设计了具品系特异性的引物,运用半巢式PCR技术建立了59122的品系特异性二重PCR检测方法,扩增片段100bp,横跨pat... 使用反向聚合酶链式反应(PCR)技术克隆了转基因玉米59122的外源基因与玉米基因组之间的两段侧翼序列,并据其左侧侧翼序列设计了具品系特异性的引物,运用半巢式PCR技术建立了59122的品系特异性二重PCR检测方法,扩增片段100bp,横跨pat终止子与转基因玉米侧翼基因之间。以转基因玉米59122、MON863、MON810、GA21、NK603,转基因大豆Roundup Ready和转基因油菜GT73等为材料,证明本方法与其他转基因作物具有高特异性。本方法在检测59122时,确定出连接体系中线性DNA的最佳质量浓度为1ng/μL左右,检出限达到0.1%,灵敏度为38个单倍体基因组拷贝数。因此可准确、快速、高效地检测转基因玉米及其产品,或作为常规PCR定性检测后的验证方法。 展开更多
关键词 转基因作物 品系特异性检测 半巢式聚合酶链式反应 反向聚合酶链式反应 二重聚合酶链式反应
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进口转基因玉米品系特异性检测 认领 被引量:4
9
作者 凌杏园 章桂明 +4 位作者 潘广 向才玉 康林 余道坚 郑耘 《植物检疫》 北大核心 2011年第5期40-44,共5页
从文献、网站和数据库中收集了14个转基因玉米品系特异性定量检测方法,将这些方法应用于从美国进口的近60万t转基因玉米的检测,检出了国家批准的11个转基因品系,还在全国首次从大宗原粮中检出国家未批准转基因玉米品系MON89034。这... 从文献、网站和数据库中收集了14个转基因玉米品系特异性定量检测方法,将这些方法应用于从美国进口的近60万t转基因玉米的检测,检出了国家批准的11个转基因品系,还在全国首次从大宗原粮中检出国家未批准转基因玉米品系MON89034。这为转基因玉米品系特异性检测标准的制定打下了基础。关键词转基因玉米;品系特异性检测;实时荧光PCR 展开更多
关键词 转基因玉米 品系特异性检测 实时荧光PCR
适于转基因油菜RT73品系特异性检测的标准分子构建及其适用性鉴定 认领 被引量:3
10
作者 李俊毅 李想 +5 位作者 褚庆华 吕蓉 张舒亚 潘良文 黄新 朱水芳 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期76-83,共8页
针对目前转基因产品检测标准物质缺乏的难题,构建适于转基因油菜RT73品系特异性检测的标准分子pEASY-RT73,其包含转基因油菜RT73品系3'端侧翼序列,油菜内标准基因HMG和PEP片段。对其在定性和定量检测中的适用性进行了实验室内部验证,... 针对目前转基因产品检测标准物质缺乏的难题,构建适于转基因油菜RT73品系特异性检测的标准分子pEASY-RT73,其包含转基因油菜RT73品系3'端侧翼序列,油菜内标准基因HMG和PEP片段。对其在定性和定量检测中的适用性进行了实验室内部验证,结果表明,标准分子pEASY-RT73高度特异于转基因油菜RT73品系。以标准分子为标准品的普通PCR扩增中,3个目标片段的检测下限(LOD)均为10拷贝。实时荧光PCR检测的LOD均为25拷贝,定量下限(LOQ)均为50拷贝。以标准分子为标准品构建的标准曲线反应效率介于0.96-1.02间,相关系数均大于0.999。分别以PEP和HMG为内标准基因对5个盲样的测试结果显示,测量值与设定值间偏差(Bias)介于-14.13%-14.29%间,SD小于0.20,RSD小于18.0%。因此,标准分子pEASY-RT73可很好地替代植物来源阳性标准品用于转基因油菜RT73及其来源产品品系特异性检测。 展开更多
关键词 PCR RT73 标准分子 品系特异性检测 实时荧光PCR
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转基因大豆、玉米、油菜和水稻品系特异性检测质粒标准分子的快速构建及应用 认领 被引量:9
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作者 吴永彬 肖维威 +5 位作者 张宝 蔡翠霞 康文杰 周琳华 刘唐书 马文丽 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期775-782,共8页
本文采用重叠延伸PCR技术快速构建了转基因大豆GTS40-3-2、玉米NK603、油菜RT73和水稻TT51-1的4种品系作物的质粒标准分子.经快速PCR鉴定及测序分析验证后,将构建的阳性质粒标准分子应用于实时荧光定量PCR标准曲线的构建,并建立其相应... 本文采用重叠延伸PCR技术快速构建了转基因大豆GTS40-3-2、玉米NK603、油菜RT73和水稻TT51-1的4种品系作物的质粒标准分子.经快速PCR鉴定及测序分析验证后,将构建的阳性质粒标准分子应用于实时荧光定量PCR标准曲线的构建,并建立其相应的荧光定量PCR检测体系,同时对该体系的扩增效率、精确度、灵敏度等指标进行了评估.结果显示,建立的实时荧光定量PCR检测体系中,目标序列的扩增效率均在97.434%~101.479%正常范围内(R2≥0.995),定量极限为20 copies,表明我们已成功构建了这4种转基因作物的品系质粒标准分子,并能有效应用于实时荧光定量PCR标准曲线的构建. 展开更多
关键词 转基因 重叠延伸PCR 质粒标准分子 品系特异性检测 实时荧光定量PCR
转基因延熟番茄“华番一号”的品系特异性检测方法 认领 被引量:7
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作者 黄文胜 陈红运 +3 位作者 赵文军 陈颖 徐宝梁 朱水芳 《植物检疫》 2005年第6期 321-325,共5页
本文使用反向PCR方法克隆了转基因延熟番茄"华番一号"(Bioscein)的外源基因和番茄基因组之间的一段边界序列,并依据此段序列设计了具有品系特异性的引物和荧光探针,以实时荧光PCR技术建立了华番一号的品系鉴定检测方法,扩增... 本文使用反向PCR方法克隆了转基因延熟番茄"华番一号"(Bioscein)的外源基因和番茄基因组之间的一段边界序列,并依据此段序列设计了具有品系特异性的引物和荧光探针,以实时荧光PCR技术建立了华番一号的品系鉴定检测方法,扩增片段长108bp,横跨在Nos启动子和番茄基因组之间.以转基因大豆(RR)、转基因玉米(Mon810)、转基因抗草甘膦油菜、转基因棉花(保龄棉)、非转基因番茄、马铃薯、茄子、大椒、大米、小麦、烟草等为试材,证明本方法同其它转基因作物及其它蔬菜无非特异性反应.本方法在检测华番一号番茄时,相对检测灵敏度可达到0.1%,绝对灵敏度达到20个拷贝.由于本方法的PCR扩增产物长度只有108bp,因此该方法也可以用于检测加工产品中的转基因成分,或作为常规PCR定性检测后的确证实验方法. 展开更多
关键词 品系特异性检测 实时荧光PCR 华番一号 转基因番茄 反向PCR
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