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氧化葡萄糖酸杆菌产2-酮基-D-葡萄糖酸的发酵过程优化 预览
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作者 蔡文 曾伟主 周景文 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期40-45,共6页
2-酮基- D -葡萄糖酸(2-keto-D-gluconic acid,2-KGA)可作为食品添加剂、照片显影剂、洗涤剂等,也是合成 D -异抗坏血酸的重要前体。为提高2-KGA的产量及转化率,对2-KGA发酵生产工艺条件进行优化。从5株野生菌株中筛选出最优菌株 Glucon... 2-酮基- D -葡萄糖酸(2-keto-D-gluconic acid,2-KGA)可作为食品添加剂、照片显影剂、洗涤剂等,也是合成 D -异抗坏血酸的重要前体。为提高2-KGA的产量及转化率,对2-KGA发酵生产工艺条件进行优化。从5株野生菌株中筛选出最优菌株 Gluconobacter japonicus CGMCC 1.49,在摇瓶上进行培养基以及培养条件的优化。在此基础上,在3 L发酵罐中进行发酵优化实验,提高2-KGA的产量。当葡萄糖质量浓度为100 g/L,玉米浆粉质量浓度为20 g/L,发酵温度为30 ℃时,摇瓶水平发酵产量为76.3 g/L,较优化前提高了120.0%。在3 L发酵罐上控制恒定pH值为6、溶氧浓度30%条件下,一次性补料发酵产量最高为122.1 g/L,较摇瓶水平提高了26.7%,转化率达75.5%。研究表明,发酵过程优化对提高野生菌株产2-KGA是一种行之有效的方法,优化结果可为后续的放大实验节省发酵成本,为氧化葡萄糖酸杆菌产2-KGA的工业化生产奠定了基础。 展开更多
关键词 氧化葡萄糖酸杆菌 2-酮基-D-葡萄糖酸 过程控制 发酵优化 补料发酵
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遗传算法优化CGXⅡ培养基提高谷氨酸棒状杆菌产L-精氨酸 预览
2
作者 王震 张豪 郑穗平 《中国酿造》 CAS 北大核心 2019年第3期149-153,共5页
L-精氨酸作为一种半必需氨基酸,在食品医药等行业有着极为重要的作用。培养基作为谷氨酸棒状杆菌(Corynebacterium glutamicum)生产L-精氨酸的基础,其成分及其成分之间的配比对L-精氨酸生产影响很大。利用遗传算法,以CGXⅡ初始培养基为... L-精氨酸作为一种半必需氨基酸,在食品医药等行业有着极为重要的作用。培养基作为谷氨酸棒状杆菌(Corynebacterium glutamicum)生产L-精氨酸的基础,其成分及其成分之间的配比对L-精氨酸生产影响很大。利用遗传算法,以CGXⅡ初始培养基为基础,不断优化培养基成分之间的配比,L-精氨酸的积累量从0.61g/L提高至2.37g/L,提高了288.5%。通过数据分析,发现遗传算法不断优化CGXⅡ培养基的成分比例的过程中,伴随着L-精氨酸产量的大幅提升,谷氨酸棒状杆菌的生长模式发生了改变。在进一步的代谢水平分析中,发现CGXⅡ培养基的成分优化导致了谷氨酸棒状杆菌的三羧酸循环(TCA)增强。 展开更多
关键词 谷氨酸棒状杆菌 L-精氨酸 遗传算法 发酵优化 代谢工程
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酵母浸粉对枯草芽孢杆菌发酵生产尿苷的影响 预览
3
作者 张悦 蒋帅 +2 位作者 吴鹤云 陈宁 徐庆阳 《发酵科技通讯》 CAS 2019年第1期29-32,共4页
尿苷用途广泛,发酵法是尿苷研究和生产的主流。以枯草芽孢杆菌F126为实验菌株,首先通过PB实验确定了培养基中影响尿苷产量的最显著因素是酵母浸粉。然后采用单因素实验的方法对不同厂家和型号的酵母浸粉进行了筛选,发现Springer公司所产... 尿苷用途广泛,发酵法是尿苷研究和生产的主流。以枯草芽孢杆菌F126为实验菌株,首先通过PB实验确定了培养基中影响尿苷产量的最显著因素是酵母浸粉。然后采用单因素实验的方法对不同厂家和型号的酵母浸粉进行了筛选,发现Springer公司所产的2506型号的酵母浸粉最有利于尿苷发酵,并确定其最佳的使用量为20 g/L。最后比较了酵母浸粉使用方法对尿苷发酵结果的影响,结果表明采用随糖流加酵母浸粉的方式更有利于尿苷的发酵生产,在最优条件下,枯草芽孢杆菌F126在5 L发酵罐上发酵40 h后可积累尿苷26.2 g/L,产量较出发条件提高了101.5%。研究结果可以为发酵法生产尿苷提供借鉴和指导。 展开更多
关键词 尿苷 枯草芽孢杆菌 酵母浸粉 PB实验 发酵优化
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重组酿酒酵母合成白藜芦醇的研究 预览
4
作者 于跃 郭辉力 +3 位作者 薛飞燕 彭程 姜梦嫣 马兰青 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2019年第5期184-190,150共8页
为了获得一种酵母快速合成白藜芦醇的体系,本研究分别从虎杖和烟草中克隆获得白藜芦醇合成途径的关键酶基因:芪合酶基因STS和4-香豆酰辅酶A连接酶基因4CL,引入3个连续重复的GSG作为连接肽,采用Overlap PCR扩增技术构建了融合基因4CL-(GS... 为了获得一种酵母快速合成白藜芦醇的体系,本研究分别从虎杖和烟草中克隆获得白藜芦醇合成途径的关键酶基因:芪合酶基因STS和4-香豆酰辅酶A连接酶基因4CL,引入3个连续重复的GSG作为连接肽,采用Overlap PCR扩增技术构建了融合基因4CL-(GSG)3-STS,进一步获得重组表达载体p ESC-TRP-4CL-(GSG)3-STS后转化至酿酒酵母中,之后利用HPLC分析检测重组酿酒酵母代谢产物,最后对重组菌合成白藜芦醇的诱导时间、底物添加浓度和添加方式进行了优化研究。结果表明:所构建的重组酿酒酵母菌体生长48 h后进行诱导表达,同时添加浓度为6 mg/L底物4-香豆酸,并且每隔2 h添加一次,8 h后白藜芦醇产量即可达7.01 mg/L。利用本体系合成白藜芦醇具有操作简单、生产周期短的特点,为进一步实现微生物大规模生产白藜芦醇提供了基础。 展开更多
关键词 融合基因 酿酒酵母 白藜芦醇 发酵优化
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产碱性β-甘露聚糖酶重组毕赤酵母发酵条件优化及酶学特性研究 预览
5
作者 钱娟娟 曹世源 +2 位作者 王克芬 王兴吉 刘文龙 《中国饲料添加剂》 2019年第5期11-14,20共5页
本研究通过对本公司一株表达β-甘露聚糖酶的毕赤酵母工程菌LD023,对其发酵条件和酶学特性进行研究,根据研究结果,其发酵诱导阶段最适pH为5.5、最适移种量为10%、最适碳源为甘油、最适诱导阶段前菌体湿重为220g/L,而该酶的最适反应pH范... 本研究通过对本公司一株表达β-甘露聚糖酶的毕赤酵母工程菌LD023,对其发酵条件和酶学特性进行研究,根据研究结果,其发酵诱导阶段最适pH为5.5、最适移种量为10%、最适碳源为甘油、最适诱导阶段前菌体湿重为220g/L,而该酶的最适反应pH范围为9.5~10.5、最适反应温度范围为45~50℃,并且具有良好的热稳定性。 展开更多
关键词 毕赤酵母 Β-甘露聚糖酶 耐碱 发酵优化
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芽胞杆菌属产α-淀粉酶的研究进展 预览
6
作者 徐挺亮 唐诗哲 +4 位作者 彭晶 陈行钢 朱玉玲 周凯燕 周洪波 《生命科学研究》 CAS CSCD 2019年第1期65-72,共8页
α-淀粉酶是一种重要的淀粉水解酶,可以从动物、植物或微生物中获得。但应用于工业生产的α-淀粉酶绝大多数来自芽胞杆菌。自α-淀粉酶工业化生产以来,研究人员针对其生产菌株芽胞杆菌进行了一系列的诱变选育和基因工程等分子生物学育种... α-淀粉酶是一种重要的淀粉水解酶,可以从动物、植物或微生物中获得。但应用于工业生产的α-淀粉酶绝大多数来自芽胞杆菌。自α-淀粉酶工业化生产以来,研究人员针对其生产菌株芽胞杆菌进行了一系列的诱变选育和基因工程等分子生物学育种,使得菌种的产酶能力不断得到提高。另外,优化芽胞杆菌发酵培养基及发酵参数也是提高α-淀粉酶工业化生产产量的重要方法。 展开更多
关键词 Α-淀粉酶 芽胞杆菌属 改良育种 发酵优化
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缬氨酸生产菌株的定向改造及发酵优化 预览
7
作者 石拓 刘晓倩 +1 位作者 范晓光 陈宁 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期19-24,共6页
缬氨酸是人体必需氨基酸之一,具有重要的生理生化作用。为进一步提高缬氨酸产量及优化发酵过程的温度控制,从谷氨酸棒杆菌细胞壁肽聚糖合成途径的2个关键基因murA(cgl0352)和murB(cgl0353)入手,从1株缬氨酸生产菌中敲除murA和murB基因... 缬氨酸是人体必需氨基酸之一,具有重要的生理生化作用。为进一步提高缬氨酸产量及优化发酵过程的温度控制,从谷氨酸棒杆菌细胞壁肽聚糖合成途径的2个关键基因murA(cgl0352)和murB(cgl0353)入手,从1株缬氨酸生产菌中敲除murA和murB基因构建出重组工程菌株C.glutamicumA301。摇瓶发酵结果显示,该菌株具有温度敏感性,在变温发酵的条件下,能从生长型状态转化为产酸型状态,促进缬氨酸的积累。在5L发酵罐中采用分段控温策略发酵,即前15h控温33℃,15h之后提温至39℃,重组工程菌株的缬氨酸产量达到35.5g/L,与全程33℃发酵相比提高了55.7%。研究为缬氨酸发酵过程温度控制提供了经验,同时对于谷氨酸棒杆菌的定向改造提供了一种思路。 展开更多
关键词 谷氨酸棒杆菌 缬氨酸 定向改造 发酵优化
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重组毕赤酵母生产β-葡萄糖苷酶发酵条件优化及固定化研究 预览
8
作者 汪飞 吴敬 陈晟 《食品科学技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期41-47,共7页
为了实现绿色木霉菌Trichoderma viride来源的β-葡萄糖苷酶在重组毕赤酵母中的高效表达,对重组菌P.pastorisKM71/pPIC9K-bgl1/pPICZA-pdi进行3.6L罐发酵培养条件优化。结果表明,当诱导温度28℃,初始诱导菌体浓度50g/L,诱导阶段甲醇体... 为了实现绿色木霉菌Trichoderma viride来源的β-葡萄糖苷酶在重组毕赤酵母中的高效表达,对重组菌P.pastorisKM71/pPIC9K-bgl1/pPICZA-pdi进行3.6L罐发酵培养条件优化。结果表明,当诱导温度28℃,初始诱导菌体浓度50g/L,诱导阶段甲醇体积分数1.0%时,酶活力最高,能达到1452U/mL。同时以壳聚糖为载体、戊二醛为交联剂,采用吸附交联法对β-葡萄糖苷酶进行固定化。结果表明,当壳聚糖质量浓度0.03g/mL,戊二醛质量浓度0.008g/mL,游离酶添加量400U/g(1g壳聚糖微球加酶量为400U),固定化吸附时间20h时,固定化酶酶活回收率最高,达到65.4%。以800g/L葡萄糖为底物,优化的转化条件下连续转化6次,低聚龙胆糖产率仍达到15.2%,显示出该固定化酶具有较好的持续利用性及较高的低聚龙胆糖生产能力。 展开更多
关键词 Β-葡萄糖苷酶 毕赤酵母 发酵优化 固定化 低聚龙胆糖
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重组果聚糖蔗糖酶的发酵优化及应用 预览
9
作者 唐煜 陈晟 +2 位作者 段绪果 吴敬 吴丹 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期97-103,共7页
为了研究不同条件下重组短小芽孢杆菌产果聚糖蔗糖酶的最适条件以及利用重组酶转化蔗糖-乳糖制备低聚乳果糖的最适转化条件。以前期构建的产果聚糖蔗糖酶重组短小芽孢杆菌Brevibacillus brevis/pNCMO2-lsc作为菌种,通过单因素试验以及... 为了研究不同条件下重组短小芽孢杆菌产果聚糖蔗糖酶的最适条件以及利用重组酶转化蔗糖-乳糖制备低聚乳果糖的最适转化条件。以前期构建的产果聚糖蔗糖酶重组短小芽孢杆菌Brevibacillus brevis/pNCMO2-lsc作为菌种,通过单因素试验以及正交试验确定其最适产酶的发酵培养基为:葡萄糖20 g/L、氮源(工业酵母粉∶棉籽粉=2∶1,质量比)为40 g/L、CaCl20.5 mmol/L,最适产酶温度30℃。在最优条件下发酵培养,果聚糖蔗糖酶的酶活可达62.1 U/mL,是优化前的3.69倍。利用该重组果聚糖蔗糖酶转化蔗糖-乳糖制备低聚乳果糖,在蔗糖和乳糖质量浓度均为200 g/L情况下,确定其最适转化条件:反应温度35℃,pH 6.0,加酶量为2 U/g底物,反应8 h后低聚乳果糖转化率可达39.1%。 展开更多
关键词 果聚糖蔗糖酶 发酵优化 低聚乳果糖
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面向工业生物技术的系统生物学
10
作者 郑小梅 郑平 孙际宾 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1955-1973,共19页
工业生物技术是以微生物细胞工厂利用可再生的生物原料来生产能源、材料与化学品等的生物技术,在解决资源、能源与环境等问题方面起着越来越重要的作用。系统生物学是全面解析微生物细胞工厂及其发酵过程从“黑箱”到“白箱”的重要研... 工业生物技术是以微生物细胞工厂利用可再生的生物原料来生产能源、材料与化学品等的生物技术,在解决资源、能源与环境等问题方面起着越来越重要的作用。系统生物学是全面解析微生物细胞工厂及其发酵过程从“黑箱”到“白箱”的重要研究方法。系统生物学借助基因组、转录组、蛋白质组、代谢组以及代谢流组等多组学数据,可解析微生物细胞工厂在RNA、蛋白与代谢物等不同水平上的变化规律与调控机制。目前,系统生物学在微生物细胞工厂的设计创建与发酵工艺优化中起着越来越重要的指导作用,许多成功应用实例不断涌现,推动着工业生物技术的快速发展。文中重点综述基因组、转录组、蛋白质组、代谢组与代谢流组以及基因组规模的网络模型等各组学技术的最新发展及其在工业生物技术尤其是菌株改造与发酵优化中的应用,并就工业生物技术中系统生物学的未来发展方向进行展望。 展开更多
关键词 工业生物技术 系统生物学 多组学 菌株设计 发酵优化
响应面法优化头孢菌素C发酵条件 预览
11
作者 李宁慧 李凌峰 金志华 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 2019年第4期426-431,共6页
目的研究顶头孢霉发酵制备头孢菌素C的过程,确定关键影响因素,优化发酵条件,提高发酵水平。方法采用Plackett-Burman方法对影响头孢菌素C发酵水平的11个因素进行考察,评估各因素的影响程度,筛查影响发酵水平的关键因素,再采用响应面方... 目的研究顶头孢霉发酵制备头孢菌素C的过程,确定关键影响因素,优化发酵条件,提高发酵水平。方法采用Plackett-Burman方法对影响头孢菌素C发酵水平的11个因素进行考察,评估各因素的影响程度,筛查影响发酵水平的关键因素,再采用响应面方法建立这些因素与发酵水平间的数学模型,为发酵条件的优化提供指导。结果Plackett-Burman实验发现,金枪鱼浸膏浓度和蛋氨酸浓度是对头孢菌素C发酵产量影响最显著的2个因素,经响应面方法优化后头孢菌素C的产量从32.59g/L提高到了35.99g/L,提高了10.4%。结论合适浓度的金枪鱼浸膏和蛋氨酸可提高头孢菌素C发酵产量,通过统计优化方法,可有效提高头孢菌素C发酵水平。 展开更多
关键词 头孢菌素C 顶头孢霉 PLACKETT-BURMAN设计 响应面法 发酵优化
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一株高ACE抑制活性乳杆菌的筛选鉴定、培养条件优化及其基因组分析
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作者 吴霖 葛洋 +2 位作者 张海坤 李岩 胡晓珂 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期2830-2847,共18页
【背景】乳杆菌是人体肠道益生菌,其发酵乳中可检测到血管紧张素转换酶(Angiotensin converting enzyme,ACE)抑制肽。海洋蕴藏着丰富的微生物种质资源,分布着大量的乳杆菌。【目的】从高通量测序结果中发现渤海沉积物中分布着乳杆菌资... 【背景】乳杆菌是人体肠道益生菌,其发酵乳中可检测到血管紧张素转换酶(Angiotensin converting enzyme,ACE)抑制肽。海洋蕴藏着丰富的微生物种质资源,分布着大量的乳杆菌。【目的】从高通量测序结果中发现渤海沉积物中分布着乳杆菌资源。为了进一步开发具有ACE抑制活性的海洋乳杆菌资源,提高乳杆菌发酵乳的ACE抑制活性,筛选瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)并对其特性进行研究。【方法】采用高通量测序技术从渤海沉积物中检测乳杆菌,并对其进行富集分离,对筛选出的乳杆菌进行16S rRNA基因鉴定和全基因组测序分析,测定该菌发酵乳的ACE抑制活性,并采用正交实验优化发酵条件。【结果】渤海沉积物中含有乳杆菌并成功筛选出一株瑞士乳杆菌GY-3,其发酵乳具有较高的ACE抑制活性。该菌在发酵温度37°C,接种量3%,且在脱脂乳培养基中添加1.0%葡萄糖,0.6%大豆蛋白胨,1.0%酵母浸粉,0.04%MnSO4·4H2O时,抑制活性最高,可达79.52%。通过对该菌基因组进行测序研究,发现其产ACE抑制肽涉及蛋白酶系统、多肽转运系统和肽酶系统。【结论】为扩大海洋源产ACE抑制肽的乳杆菌种质资源、开发高产ACE抑制活性的发酵菌株奠定了基础,进一步研究了如何提高乳杆菌产ACE抑制肽的水平,并对其基因组进行了研究,为今后生物学特性和ACE抑制活性机理的研究奠定了基础,并对降血压相关产品的开发具有重要意义。 展开更多
关键词 瑞士乳杆菌 ACE抑制活性 发酵优化
重组Bacillus subtilis产麦芽四糖淀粉酶的发酵优化及麦芽四糖制备 预览
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作者 杨亚楠 宿玲恰 吴敬 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期44-49,56共7页
麦芽四糖淀粉酶可水解淀粉或麦芽糊精生成麦芽四糖,在食品领域有着广泛应用。为降低生产成本,对前期构建的生产麦芽四糖淀粉酶的重组枯草芽孢杆菌进行发酵优化。通过对培养基的氮源和碳源进行优化,以5%的接种量,在33℃、200r/min条件下... 麦芽四糖淀粉酶可水解淀粉或麦芽糊精生成麦芽四糖,在食品领域有着广泛应用。为降低生产成本,对前期构建的生产麦芽四糖淀粉酶的重组枯草芽孢杆菌进行发酵优化。通过对培养基的氮源和碳源进行优化,以5%的接种量,在33℃、200r/min条件下发酵48h,发现以25g/L豆粕粉和25g/L工业蛋白胨为氮源,5g/L甘油为碳源时,重组酶酶活力最高可达236U/mL。利用发酵所得重组麦芽四糖淀粉酶制备麦芽四糖并进行酶反应条件优化,使用高效液相色谱检测产物含量。发现当酶转化反应温度为50℃,反应pH为7.0,加酶量为30U/g底物,底物麦芽糊精的质量浓度为250g/L时,反应12h,麦芽四糖转化率可达73.2%,为降低生产成本和工业制备麦芽四糖提供了理论依据。 展开更多
关键词 麦芽四糖淀粉酶 发酵优化 酶转化反应 麦芽四糖
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枯草芽孢杆菌LF17生物学特性研究
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作者 张武云 殷辉 +4 位作者 周建波 常芳娟 唐秀丽 吕红 赵晓军 《中国农技推广》 2019年第1期80-83,55共5页
枯草芽孢杆菌LF17是分离自苹果树枝干的1株对苹果树腐烂病具有良好防效的生防菌株,为研究其对环境的适应度,通过测量吸光度值,平板涂布等,测定菌株LF17对温度、pH的敏感度并筛选最佳培养基配方。结果表明:菌株LF17在35~85℃均生长良好,... 枯草芽孢杆菌LF17是分离自苹果树枝干的1株对苹果树腐烂病具有良好防效的生防菌株,为研究其对环境的适应度,通过测量吸光度值,平板涂布等,测定菌株LF17对温度、pH的敏感度并筛选最佳培养基配方。结果表明:菌株LF17在35~85℃均生长良好,致死温度为96℃、处理8 min;最适pH范围为6~7,致死pH为小于4或大于10;最佳产孢及成膜的培养基配方为牛肉膏5 g、蛋白胨10 g、NaCl 5 g、葡萄糖20 g、甘油10 g、MnCl2 5 mg。本研究可为菌株LF17生防菌剂产业化生产及田间应用等提供理论依据。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 生物学特性 发酵优化
乳糖诱导E.coli发酵生产FAD为辅基的葡萄糖脱氢酶 预览
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作者 张玲 宋祖坤 +2 位作者 林荣 王男 杨海麟 《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第4期1879-1886,共8页
黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)为辅基的葡萄糖脱氢酶(FAD-GDH,EC1.1.5.9),具有辅基结合紧密、催化效率高的优点,可替代目前诊断用葡萄糖氧化酶应用于血糖指标的临床生化检测。本文选取Burkholderia cepacia的葡萄糖脱氢酶基因(gdh)构建表达质... 黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)为辅基的葡萄糖脱氢酶(FAD-GDH,EC1.1.5.9),具有辅基结合紧密、催化效率高的优点,可替代目前诊断用葡萄糖氧化酶应用于血糖指标的临床生化检测。本文选取Burkholderia cepacia的葡萄糖脱氢酶基因(gdh)构建表达质粒pTrc99a-gdh,转化E. coli BL21(DE3)。异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导发酵,通过酶活测定及聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,获得可溶性表达的FAD-GDH,分子量约为60000。利用乳糖替代IPTG作为诱导剂,摇瓶水平初步探索诱导条件,酶活达到994U/L。7.5L发酵罐放大培养该菌,采用梯度流加补料策略,分阶段温度控制,并采用不同的乳糖流加速率进行诱导。当采用0.3mL/min的乳糖流加速率时,酶活达22200U/L,菌体量达69.48g/L。经过镍柱层析,最终获得纯酶的比酶活104.5U/mg。为医用诊断原料用酶葡萄糖脱氢酶新酶种的工业化生产提供借鉴。 展开更多
关键词 黄素腺嘌呤二核苷酸 葡萄糖脱氢酶 乳糖诱导 发酵优化 层析分离
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枯草芽孢杆菌Bs-W5的生防作用研究 预览
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作者 王琳 李璐璐 +1 位作者 刘瑞瑞 李志英 《陕西农业科学》 2019年第9期34-41,共8页
从植物根际土壤中分离到一株具有广泛抑菌谱的菌种,经鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),命名为Bs-W5.平板菌落对峙法和牛津杯法的抑菌试验表明,Bs-W5对苹果腐烂病菌(Valsa ambiens)、杨树溃疡病菌(Dothiorella gregaria)、腐皮镰... 从植物根际土壤中分离到一株具有广泛抑菌谱的菌种,经鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),命名为Bs-W5.平板菌落对峙法和牛津杯法的抑菌试验表明,Bs-W5对苹果腐烂病菌(Valsa ambiens)、杨树溃疡病菌(Dothiorella gregaria)、腐皮镰刀菌(Fusarim solani)、葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)等九种植物病原菌和常见的大肠杆菌(Escherichia Coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)均有不同程度的抑制作用.通过不同条件处理Bs-W5发酵液上清液,发现上清液中的拮抗物质不耐贮存、热稳定性较差、不耐酸碱,但是光照对其稳定性没有影响,Bs-W5连续10代的接种试验,表明其有着很好的遗传稳定性. 展开更多
关键词 生物防治 枯草芽孢杆菌 发酵优化 乳剂
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共表达N-乙酰转移酶提高Aspergillus nidulans α-葡糖苷酶在毕氏酵母中的表达研究
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作者 任莉琼 吴敬 陈晟 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期75-81,共7页
α-葡糖苷酶以低聚寡糖为底物,通过切割非还原末端α-1,4糖苷键以获得葡萄糖基,同时转苷生成α-1,6糖苷键,广泛应用于低聚异麦芽糖生产、代谢生理研究、疾病预防治疗等各个领域。Aspergillus nidulans来源的α-葡糖苷酶在毕氏酵母中外... α-葡糖苷酶以低聚寡糖为底物,通过切割非还原末端α-1,4糖苷键以获得葡萄糖基,同时转苷生成α-1,6糖苷键,广泛应用于低聚异麦芽糖生产、代谢生理研究、疾病预防治疗等各个领域。Aspergillus nidulans来源的α-葡糖苷酶在毕氏酵母中外源表达时存在酶活较低、蛋白质降解等问题,为进一步提高α-葡糖苷酶表达量,共表达N-乙酰转移酶(Mpr1)以降低发酵过程细胞受到的氧化胁迫,提高酶活。以实验室保藏的P.pastoris KM71/pPIC9K-AgbB为出发菌株,构建共表达菌株Pichia pastoris KM71/pPIC9K-AgbB/pPICZA-Mpr1,经过摇瓶发酵120h,α-葡糖苷酶转苷酶酶活和蛋白质含量可达22.56U/ml和0.52mg/ml,分别是出发菌株摇瓶产酶的1.92倍和1.27倍。在此基础上进行3.6L罐发酵温度和甲醇诱导浓度优化,在25℃,以1%的甲醇浓度诱导发酵最高酶活和蛋白质含量可达128.12U/ml和1.81mg/ml,分别是起始菌株上罐产酶的1.96倍和1.50倍。 展开更多
关键词 N-乙酰转移酶(Mpr1) Α-葡糖苷酶 毕氏酵母 共表达 发酵优化
一株香樟炭疽病拮抗菌的鉴定及其发酵条件优化
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作者 欧婷 江鸿森 +4 位作者 任慧爽 王飞 徐伟芳 王若琳 谢洁 《西南大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期43-52,共10页
为寻获香樟炭疽病生物防治的优良菌种资源,通过形态学观察、生理生化检测和基于16S rDNA系统发育分析,对一株香樟炭疽病拮抗菌SWUJ1进行了菌种鉴定;通过单因素试验优化该菌株产生抑菌活性物质的发酵条件,并釆用抑菌圈法检测其发酵液抑... 为寻获香樟炭疽病生物防治的优良菌种资源,通过形态学观察、生理生化检测和基于16S rDNA系统发育分析,对一株香樟炭疽病拮抗菌SWUJ1进行了菌种鉴定;通过单因素试验优化该菌株产生抑菌活性物质的发酵条件,并釆用抑菌圈法检测其发酵液抑菌活性;进而利用菌丝生长速率法测定该菌株的抑菌谱.菌种鉴定结果表明SWUJ1为革兰氏阳性杆状菌株、产芽孢,在LB固体培养基上菌落呈圆形、边缘整齐光滑、湿润、呈乳白色黏稠状,过氧化氢酶呈阳性且具运动性;基于16S rDNA序列的系统发育分析结果显示该菌株与登录号为NR116240的甲基营养型芽孢杆菌( Bacillus methylotrophicus )的亲缘关系最近,且处于系统发育树的同一分枝,故将SWUJ1菌株鉴定为甲基营养型芽孢杆菌,命名为 B. methylotrophicus SWUJ1;发酵条件优化结果表明该菌株产抑菌活性物质的最佳氮源为酵母粉,碳源为乳糖,无机盐离子为MgSO 4,初始pH值为5.0,培养温度为25 ℃,接种量为1.0%,发酵时间为96 h,优化后拮抗细菌 B. methylotrophicus SWUJ1等量发酵上清液对香樟炭疽病菌的拮抗作用显著提高,且其发酵上清液对核盘菌( Sclerotinia sclerotiorum )及旋孢腔菌( Cochiobolus sativus )等10余种常见植物病原菌具不同程度的抑制作用.研究结果表明, B. methylotrophicus SWUJ1菌株可作为开发香樟炭疽病生防制剂的候选菌株. 展开更多
关键词 香樟炭疽病 拮抗菌 鉴定 发酵优化
裂殖壶藻发酵过程中脂肪酸合成代谢规律及其影响因素探讨 预览
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作者 杨丽 曾娟 +2 位作者 吴正云 苏艳秋 张文学 《中国酿造》 CAS 北大核心 2019年第4期116-120,共5页
探究裂殖壶藻(Schizochytrium sp.)A3-9在不同发酵条件下生物量和脂肪酸含量的变化规律。结果显示,初始葡萄糖含量90g/L,碳氮比8时最有利于裂殖壶藻生物量积累,此时生物量可达38.12g/L,较对照组提高了104.59%;装液量220mL/500mL,柠檬酸... 探究裂殖壶藻(Schizochytrium sp.)A3-9在不同发酵条件下生物量和脂肪酸含量的变化规律。结果显示,初始葡萄糖含量90g/L,碳氮比8时最有利于裂殖壶藻生物量积累,此时生物量可达38.12g/L,较对照组提高了104.59%;装液量220mL/500mL,柠檬酸添加量1.6g/L,碳氮比23时总脂肪酸的积累可达47.16g/100g藻粉,较对照组提高了40.25%。不同发酵条件下裂殖壶藻胞内脂肪酸的代谢流量分布分析显示,初始葡萄糖含量90g/L,碳氮比8,装液量60mL/500mL,柠檬酸和苹果酸添加量1.6g/L时最有利于乙酰辅酶A(CoA)流入聚酮合酶(PKS)途径合成不饱和脂肪酸,此时不饱和脂肪酸与饱和脂肪酸含量之比可达1.15,相比对照组提高了21.28%;而当碳氮比14.75,装液量220mL/500mL时二十二碳六烯酸(DHA)与二十二碳五烯酸(DPA)含量之比可达6.82,较对照组提高了3.02%。 展开更多
关键词 裂殖壶藻 发酵优化 生物量 脂肪酸 二十二碳六烯酸 代谢分析
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探讨不同微生物组合发酵杏鲍菇菌糠及发酵条件优化 预览
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作者 郑晖 《种子科技》 2019年第12期24-25,共2页
随着我国对生态环境建设的重视程度不断提高,对工业和农业的废物废渣进行回收利用的要求也与日俱增,这就在很大程度上推进了相关栽培技术的改革创新。其中较为明显的进步在于食用菌代料栽培原料的节能化,在这一栽培过程中产生的菌糠经... 随着我国对生态环境建设的重视程度不断提高,对工业和农业的废物废渣进行回收利用的要求也与日俱增,这就在很大程度上推进了相关栽培技术的改革创新。其中较为明显的进步在于食用菌代料栽培原料的节能化,在这一栽培过程中产生的菌糠经合理发酵之后,具有较之以往更为丰富的营养价值,同时也推动了资源的节约和发酵技术的改进。这也就意味着菌糠产生后的市场潜力是通过较为科学的发酵过程来实现的,否则便会使自身价值得不到有效开发,因此,要加强对菌糠发酵的重视,优化菌糠发酵的综合条件,从而推动菌糠的广泛应用。以发酵杏鲍菇菌糠为出发点,对不同微生物组合发酵结果进行论述,进而阐述优化发酵条件的思路。 展开更多
关键词 微生物组合 杏鲍菇菌糠 发酵优化
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