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磁性靶向纳米粒体外多模态成像及对肝星状细胞的靶向作用 预览
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作者 李璇 鲁敏 +6 位作者 李明星 敖梦 唐琳梅 曾祯 胡经纬 黄志强 宣吉晴 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2020年第4期566-571,共6页
背景:近来年,分子成像结合医学影像技术和靶向分子探针逐渐成为研究的热点,其相互结合能够在分子水平对靶组织进行观察,从而实现对疾病的发生、发展实时无创成像。目的:制备载磁性颗粒靶向纳米粒探针,探讨其体外超声/CT/MRI成像效果,观... 背景:近来年,分子成像结合医学影像技术和靶向分子探针逐渐成为研究的热点,其相互结合能够在分子水平对靶组织进行观察,从而实现对疾病的发生、发展实时无创成像。目的:制备载磁性颗粒靶向纳米粒探针,探讨其体外超声/CT/MRI成像效果,观察其体外对大鼠肝星状细胞的靶向能力。方法:以高分子材料聚乳酸/羟基乙酸作为外壳、含有精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸序列环八肽作为配体,通过双步乳化法制备包载磁性颗粒和全氟辛溴烷的载磁性颗粒靶向纳米粒cRGD-PLGA-Fe3O4-PFOB,检测其理化性质。将载磁性颗粒靶向纳米粒以双蒸水稀释为不同质量浓度的混悬液,体外观察其超声、CT、MRI显影效果。通过碳二亚胺法连接精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸序列肽与载磁性颗粒靶向纳米粒,验证载磁性颗粒靶向纳米粒的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸序列连接情况和体外靶向能力。细胞毒性实验测定不同质量浓度载磁性颗粒靶向纳米粒对大鼠肝细胞BRL-3A的毒性作用。结果与结论:(1)载磁性颗粒靶向纳米粒分散度好,大小较均匀,单个纳米粒呈球形,数个黑色的铁颗粒分布于壳膜上,平均粒径为(221.5±60.3) nm,Fe3O4包封率为38%;(2)随着载磁性颗粒靶向纳米粒质量浓度的降低,样品的超声回声强度、CT值均逐渐降低;随着纳米粒中Fe3O4颗粒质量浓度的增加,MRIT2加权信号强度逐渐降低;(3)流式细胞仪检测显示,含有精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸序列环八肽与载磁性颗粒靶向纳米粒的连接率为94.13%;体外靶向实验显示,大部分载磁性颗粒靶向纳米粒聚集于大鼠肝星状细胞细胞HSC-T6周围;(4)不同质量浓度的载磁性颗粒靶向纳米粒对大鼠肝细胞BRL-3A活力无影响;(5)结果表明,载磁性颗粒靶向纳米粒探针不仅能作为多模态显像剂用于超声、CT、MRI,且在体外实验中对大鼠肝星状细胞有较强的靶向能力,对肝纤维化的早期 展开更多
关键词 纳米粒子 靶向 对比剂 多模态成像 肝纤维化 肝星状细胞 体外研究 分子探针
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光动力疗法治疗胃肠疾病的研究进展
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作者 王佳雯 洪阁 刘天军 《激光与光电子学进展》 CSCD 北大核心 2019年第4期9-20,共12页
综述了光动力疗法(PDT)在胃肠疾病治疗领域的应用。从体外研究、体内研究和临床实践三个角度归纳总结了国内外PDT的研究现状,探讨其对不同类型的胃肠疾病的治疗效果和应用前景,以期为PDT在胃肠疾病临床治疗领域的广泛应用提供必要的技... 综述了光动力疗法(PDT)在胃肠疾病治疗领域的应用。从体外研究、体内研究和临床实践三个角度归纳总结了国内外PDT的研究现状,探讨其对不同类型的胃肠疾病的治疗效果和应用前景,以期为PDT在胃肠疾病临床治疗领域的广泛应用提供必要的技术支持。 展开更多
关键词 医用光学 光动力疗法 胃肠疾病 体外研究 体内研究 临床实践
凝结芽孢杆菌对轻微肝性脑病患者粪便菌群及产氨影响的体外研究 预览
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作者 韩轶 王慕 《中国药物与临床》 CAS 2019年第14期2357-2358,共2页
轻微肝性脑病(minimalhepaticencephalopathy,MHE)是一种神经认知功能紊乱性疾病,属于一种代谢性疾病,体外发酵粪便能够更好的模拟人体的肠道菌群情况,为微生态治疗提供更好的依据[1]。本研究利用体外发酵方法对凝结芽孢杆菌对肝性脑病... 轻微肝性脑病(minimalhepaticencephalopathy,MHE)是一种神经认知功能紊乱性疾病,属于一种代谢性疾病,体外发酵粪便能够更好的模拟人体的肠道菌群情况,为微生态治疗提供更好的依据[1]。本研究利用体外发酵方法对凝结芽孢杆菌对肝性脑病患者粪便菌群的改善情况进行研究。1对象和方法1.1标本采集:收集山西省人民医院消化科2018年3月至7月就诊的符合纳入排除标准的18~60岁肝纤维化伴MHE患者新鲜粪便共10份,立即-80℃分装保存。准入标准:肝纤维化患者,诊断为MHE,无其他慢性疾病。排除标准:近3个月内服用益生菌、益生元或抗生素者。 展开更多
关键词 轻微肝性脑病 凝结芽孢杆菌 体外研究 肠道菌群 粪便 患者 功能紊乱性疾病 山西省人民医院
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长链非编码RNA AL136359.1通过上调AKR1B10的表达对胆管癌细胞增殖和迁移的影响
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作者 蔡民 许浏 +1 位作者 沈兰 张杰 《中国医师杂志》 CAS 2019年第4期532-535,共4页
目的检测AL136359.1在胆管癌组织及细胞中的表达改变,分析其对胆管癌细胞增殖和迁移的影响。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测8例胆管癌组织和4种胆管癌细胞株(QBC939、RBE、HCCC-9810和TFK-1)中AL136359.1的表达。在表达最低的胆管... 目的检测AL136359.1在胆管癌组织及细胞中的表达改变,分析其对胆管癌细胞增殖和迁移的影响。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测8例胆管癌组织和4种胆管癌细胞株(QBC939、RBE、HCCC-9810和TFK-1)中AL136359.1的表达。在表达最低的胆管癌细胞株转染携带AL136359. 1的质粒增加AL136359. 1的表达,qRT-PCR验证转染效率。qRT-PCR和Western blot检测醛酮还原酶1B10(AKR1B10)mRNA和蛋白的表达。细胞计数试剂盒(CCK-8)和Transwell迁移实验检测AL136359. 1高表达对胆管癌细胞增殖能力和迁移能力的影响。结果 AL136359. 1在胆管癌组织的表达(0. 41±0. 05)明显低于癌旁组织(2. 94±0. 44,P<0. 01),在胆管癌细胞株的表达明显低于人正常胆管上皮细胞(P<0. 01),在QBC939细胞的表达最低(P <0. 01)。AL136359. 1高表达可引起AKR1B10 mRNA和蛋白表达升高(P<0.01)。AL136359. 1高表达可明显抑制胆管癌细胞的增殖能力和迁移能力(P <0.01)。结论 AL136359.1在胆管癌组织和细胞株中表达减少,AL136359. 1高表达可上调AKR1B10基因的表达,参与抑制胆管癌QBC939细胞的增殖和迁移。 展开更多
关键词 胆管肿瘤 RNA 长链非编码 细胞增殖 细胞迁移 体外研究
利拉鲁肽对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞与单核细胞黏附的影响及作用机制
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作者 李虎 束庆 +2 位作者 杨贤 罗雪梅 严思敏 《中国医师杂志》 CAS 2019年第6期830-834,839共6页
目的探究利拉鲁肽对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞与单核细胞黏附的抑制作用及其机制。方法以高糖(20 mmol/L)诱导的内皮细胞为实验对象,加入不同浓度利拉鲁肽(0、0. 3、3、30 nmol/L)预孵育不同时间,将荧光染料标记的单核细胞与内皮细胞... 目的探究利拉鲁肽对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞与单核细胞黏附的抑制作用及其机制。方法以高糖(20 mmol/L)诱导的内皮细胞为实验对象,加入不同浓度利拉鲁肽(0、0. 3、3、30 nmol/L)预孵育不同时间,将荧光染料标记的单核细胞与内皮细胞共育1 h,随后用M199培养基洗去未黏附的细胞,并用荧光酶标仪检测内皮细胞和单核细胞的黏附状况;用qRT-PCR和ELISA法分别检测黏附分子VCAM-1、ICAM-1的mRNA和蛋白表达;用Western-blot法检测IκBα含量、磷酸化程度以及NF-κB p65亚基在细胞质和细胞核的分布情况;用GST-IκBα为底物检测IKK激酶活力。结果高糖刺激可显著增加内皮细胞与单核细胞的黏附(P <0. 01);显著增加内皮细胞黏附分子VCAM-1、ICAM-1的mRNA和蛋白表达(P <0. 05,P <0. 01);显著增加IKK激酶活力(P <0. 01)、IκBα的磷酸化(P <0. 01)以及NF-κB p65亚基在细胞核中的分布(P <0. 05),显著降低IκBα含量(P <0. 01)。利拉鲁肽可浓度依赖地抑制高糖刺激所产生的上述作用(P <0. 05,P <0. 01)。结论利拉鲁肽可能通过抑制IKK激酶的活性,阻断IκBα的磷酸化及NF-κB的质核移位,进而抑制内皮细胞黏附分子mRNA和蛋白的表达,从而影响内皮细胞和单核细胞的黏附。 展开更多
关键词 利拉鲁肽 内皮细胞 单核细胞 细胞黏附 体外研究
ERH基因对人膀胱癌T24和5637细胞迁移、侵袭的影响
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作者 庞昆 李美丽 +5 位作者 陈波 郝林 史振铎 周荣升 臧光辉 韩从辉 《中国医师杂志》 CAS 2019年第6期856-861,共6页
目的研究基本同源物增强子(ERH)对人膀胱癌T24和5637细胞迁移和侵袭作用的影响。方法将人膀胱癌T24和5637细胞的ERH敲除后,采用细胞划痕实验、Transwell细胞迁移实验、Transwell细胞侵袭实验验证其迁移和侵袭功能变化,Western blot检测... 目的研究基本同源物增强子(ERH)对人膀胱癌T24和5637细胞迁移和侵袭作用的影响。方法将人膀胱癌T24和5637细胞的ERH敲除后,采用细胞划痕实验、Transwell细胞迁移实验、Transwell细胞侵袭实验验证其迁移和侵袭功能变化,Western blot检测细胞迁移与侵袭相关蛋白的表达,并通过裸鼠尾静脉转移实验验证敲除ERH基因后在体内对膀胱癌细胞转移能力的影响。结果 (1)细胞划痕实验结果显示,敲除ERH基因后的人膀胱癌5637和T24细胞迁移率均明显降低(P <0. 05);(2)Transwell细胞迁移实验、Transwell细胞侵袭实验结果显示,敲除ERH基因后的人膀胱癌5637和T24细胞迁移细胞计数和侵袭细胞计数均明显减少(P <0. 05)。(3)Western blot实验结果显示,敲除ERH基因后的人膀胱癌5637细胞和T24细胞中E-Cadherin表达明显升高(P <0. 05),而Fibronectin、Twist、Vimentin、Snail2蛋白的表达明显降低(P <0. 05)。(4)裸鼠尾静脉转移实验显示,与ERH正常组相比,ERH敲除组小鼠肺转移灶明显减少。结论体外和体内实验均提示,ERH基因敲除影响人膀胱癌T24和5637细胞的迁移与侵袭。 展开更多
关键词 转录因子 细胞周期蛋白质类 膀胱肿瘤 细胞迁移分析 体外研究
β-谷甾醇诱导人胃癌细胞自噬与凋亡的作用及机制研究
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作者 孙玉成 刘晓巍 片光哲 《中国医师杂志》 CAS 2019年第6期866-871,共6页
目的从体内外两个方面研究β-谷甾醇诱导胃癌细胞自噬的作用及机制,为β-谷甾醇抗胃癌作用研究提供实验依据。方法体外培养人胃癌SGC-7901细胞,设对照组和实验组,对照组仅用磷酸盐缓冲液(PBS)处理,实验组以不同浓度β-谷甾醇处理。四唑... 目的从体内外两个方面研究β-谷甾醇诱导胃癌细胞自噬的作用及机制,为β-谷甾醇抗胃癌作用研究提供实验依据。方法体外培养人胃癌SGC-7901细胞,设对照组和实验组,对照组仅用磷酸盐缓冲液(PBS)处理,实验组以不同浓度β-谷甾醇处理。四唑盐比色法(MTT)检测β-谷甾醇对胃癌细胞的抑制作用,流式细胞术检测β-谷甾醇对胃癌细胞的促凋亡作用,绿色荧光蛋白标记法(GFP)检测β-谷甾醇对胃癌细胞自噬诱导作用,蛋白印迹法(Western-blot)检测信号通道蛋白磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)及磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)的表达。用SGC-7901细胞制造胃癌裸鼠模型,经腹胫注射β-谷甾醇,3 d给药1次,共42d,观察移植瘤重量体积变化,免疫组化法检测移植瘤组织LC3-Ⅱ、LC3-Ⅰ表达。结果实验组β-谷甾醇浓度达20μmol/L时可明显抑制SGC-7901细胞活力,促进SGC-7901凋亡,与对照组比较差异有统计学意义(P <0. 05或P <0. 01);β-谷甾醇诱导SGC-7901细胞发生自噬效应,(20、40、80、160μmol/L)实验组细胞自噬率(19. 32±2. 51、32. 25±3. 18、57. 45±4. 02、78. 93±4. 21)与对照组(7. 28±2. 83)比较,差异有统计学意义(P <0. 05,P <0. 01);实验组β-谷甾醇下调p-PI3K、p-AKT及mTOR表达,与对照组比较差异有统计学意义(P <0. 05);实验组抑瘤率为(69. 8±3. 6)%,移植瘤的重量和体积明显减轻变小,与对照组比较差异均有统计学意义(P <0. 05);实验组β-谷甾醇上调裸鼠移植瘤细胞LC3-Ⅱ表达,下调LC3-Ⅰ表达,使LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ(7. 76±0. 35)升高,与对照组(0. 32±0. 21)比较,差异有统计学意义(t=7. 28,P=0. 008)。结论β-谷甾醇能抑制胃癌细胞增殖并促进其凋亡,其抗癌机制可能与β-谷甾醇通过PI3K/AKT/m TOR通路诱导细胞自噬作用有关。 展开更多
关键词 Β-谷甾醇 胃肿瘤 自噬 细胞凋亡 体外研究
S100A4参与类风湿关节炎发病机制的研究进展 预览
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作者 徐武岩 查丁胜 +3 位作者 吴昊 阳华 林宏生 查振刚 《中国骨科临床与基础研究杂志》 2019年第2期116-122,共7页
类风湿关节炎(RA)是一种常见病、多发病,病情迁延反复,是造成我国人群劳动力丧失与致残的主要病因之一。S100钙结合蛋白A4(S100A4)是低分子量的S100家族成员之一,已被证实其过度表达与癌症进展相关,目前其在RA发病机制中的作用也受到广... 类风湿关节炎(RA)是一种常见病、多发病,病情迁延反复,是造成我国人群劳动力丧失与致残的主要病因之一。S100钙结合蛋白A4(S100A4)是低分子量的S100家族成员之一,已被证实其过度表达与癌症进展相关,目前其在RA发病机制中的作用也受到广泛关注。相关体外研究从分子水平揭示,S100A4可通过参与调节细胞凋亡和组织重塑、刺激细胞增殖以及促进新生血管形成过程,引起RA炎症、滑膜增殖、血管翳形成和组织破坏,进而加速RA的发生发展;动物在体研究也发现S100A4水平与RA的发生发展关系密切;S100A4在预测RA患者的疾病转归、治疗效果及疾病活动度方面,亦具有独特优势。本文简要介绍S100A4的生物学功能,重点对S100A4参与RA发病机制的体外、体内和临床研究进行综述,以期为RA的早期预防、诊断、治疗及特异性药物的开发提供依据。 展开更多
关键词 关节炎 类风湿 S100钙结合蛋白A4 滑膜 细胞凋亡 细胞增殖 基因 p53 基质金属蛋白酶类 血管内皮生长因子类 体外研究 模型 动物 预后 复发
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护心康对氧化型低密度脂蛋白刺激单核细胞Wnt1表达的影响
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作者 董晓斐 贺佳幸 +1 位作者 丁小玉 屈波 《中国医师杂志》 CAS 2019年第1期105-107,共3页
目的研究护心康对氧化型低密度脂蛋白(ox—LDL)刺激单核细胞无翅和整合素1(Wnt1)的影响,探讨其抗动脉粥样硬化的机制。方法采用TOLL样受体4(TLR4)基因敲除小鼠24只,随机分为正常组和护心康组,每组12只。分别以蒸馏水和护心康连续灌胃7 d... 目的研究护心康对氧化型低密度脂蛋白(ox—LDL)刺激单核细胞无翅和整合素1(Wnt1)的影响,探讨其抗动脉粥样硬化的机制。方法采用TOLL样受体4(TLR4)基因敲除小鼠24只,随机分为正常组和护心康组,每组12只。分别以蒸馏水和护心康连续灌胃7 d,末次灌胃1 h后采血并分离血清。培养小鼠外周静脉血单核细胞,随机分为正常组、模型组、对照组、护心康组、阿托伐他汀组、Wnt抑制剂。正常组不造模,其余各组均用OX—LDL刺激单核细胞复制高脂模型。正常组和模型组给予条件培养液,对照组给予正常小鼠血清,护心康组给予护心康含药血清,培养液血清终浓度均为15%;WIF终浓度为10μg/ml,阿托伐他汀终浓度为10μmol/L,干预24 h后用荧光定量PCR和Western blot分别测定Wnt1基因和蛋白的表达,分别进行6次独立实验。结果与正常组相比,模型组和对照组Wnt1 mRNA和蛋白表达升高(P<0.01);护心康组、阿托伐他汀组、WIF组Wnt1 mRNA和蛋白表达较模型组和对照组低(P<0.05)。结论高脂刺激可以诱导TLR-4基因敲除小鼠外周血单核细胞wnt1基因和蛋白表达升高,护心康可以有效降低这种表达。 展开更多
关键词 降血脂药(中药) 动脉粥样硬化 单核细胞 Wnt1蛋白质 体外研究
乳腺癌组织miRNAs的异常表达及犀黄丸对体外乳腺癌细胞候选miRNAs的表达影响
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作者 许涛 李萍 +3 位作者 庞国莲 易帆 曾召琼 谢小兵 《中国医师杂志》 CAS 2019年第7期979-983,共5页
目的研究乳腺癌组织中差异性表达的miRNAs以及犀黄丸提取液对体外乳腺癌细胞系候选miRNAs的表达影响。方法采用miRNAs表达谱芯片检测石蜡包埋(FFPE)乳腺癌组织、癌旁组织以及不同分子分型的癌组织之间的miRNAs差异性表达谱,非监督聚类... 目的研究乳腺癌组织中差异性表达的miRNAs以及犀黄丸提取液对体外乳腺癌细胞系候选miRNAs的表达影响。方法采用miRNAs表达谱芯片检测石蜡包埋(FFPE)乳腺癌组织、癌旁组织以及不同分子分型的癌组织之间的miRNAs差异性表达谱,非监督聚类分析软件分析芯片结果;利用实时荧光定量PCR(qPCR)技术检测106例乳腺癌组织、22例癌旁组织以及66例乳腺良性病变组织候选miRNAs的表达水平;犀黄丸提取液干预乳腺癌T-47D细胞及MDA-MB-231细胞,采用qPCR技术检测细胞中候选miRNAs的表达水平。结果 miRNAs表达谱芯片结果显示与癌旁组织相比,miR-130b在乳腺癌组织中呈现高表达(P <0. 05),miR-205在恶性程度更高的Basal-like型癌组织中表达显著低于Luminal型(P <0. 05);qPCR结果显示miR-130b在癌组织和癌旁组织中的表达均显著高于良性病变组织(t=6. 123,P=0. 000;t=-2. 073,P=0. 041),miR-205在癌组织中表达水平显著低于良性病变组织(t=-3. 375,P=0. 001);体外细胞实验显示,犀黄丸提取液干预后,miR-130b在T-47D细胞中表达降低(t=4. 341,P=0. 012),而miR-205在MDA-MB-231细胞中表达升高(t=-3. 266,P=0. 031)。结论 miR-130b的升高和miR-205的降低与乳腺癌的发生发展相关;miR-130b的升高和miR-205的降低可能是犀黄丸发挥抗癌作用途径之一。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 微RNAS 犀黄丸 肿瘤细胞 培养的 体外研究
长链非编码RNA LINC01204上调GPC5基因表达对膀胱癌恶性生物学行为的影响
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作者 张建东 李建文 +1 位作者 赵志平 张雁钢 《中国医师杂志》 CAS 2019年第5期700-704,共5页
目的探讨长链非编码RNA LINC01204对膀胱癌细胞磷脂酰肌醇蛋白聚糖-5(GPC5)基因表达的上调作用及对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法实时定量荧光聚合酶链反应(qRT-PCR)检测12例膀胱癌组织及癌旁组织、膀胱癌细胞株BIU-87、T24、... 目的探讨长链非编码RNA LINC01204对膀胱癌细胞磷脂酰肌醇蛋白聚糖-5(GPC5)基因表达的上调作用及对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法实时定量荧光聚合酶链反应(qRT-PCR)检测12例膀胱癌组织及癌旁组织、膀胱癌细胞株BIU-87、T24、J82、5637和正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1中LINC01204的表达量。以表达量最低的膀胱癌细胞为转染对象,用携带LINC01204的慢病毒颗粒转染细胞(观察组)和阴性对照慢病毒颗粒转染细胞(对照组),qRT-PCR检测两组细胞中LINC01204和GPC5 mRNA表达量。Western blot检测两组细胞中GPC5蛋白的表达。细胞计数试剂盒(CCK-8)、Transwell小室实验分别测定细胞增殖、迁移和侵袭能力。结果膀胱癌组织中LINC01204表达量(0.773±0.063)明显低于癌旁组织(3.665±0.330),差异有统计学意义(t=8.612,P<0.001)。膀胱癌细胞株BIU-87(0.320±0.034)、T24(0.515±0.056)、J82(0.644±0.039)、5637(0.147±0.018)中LINC01204表达水平均低于正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1(1.009±0.077),差异均有统计学意义(t=8.160,P<0.001;t=5.179,P=0.002;t=4.221,P=0.006;t=10.890,P<0.001),5637细胞表达量最低。观察组5637细胞中LINC01204表达量(11.000±1.028)明显高于对照组(1.019±0.119),差异均有统计学意义(t=9.651,P<0.001)。观察组GPC5 mRNA表达量(4.476±0.347)明显高于对照组(1.046±0.163),差异均有统计学意义(t=8.962,P<0.001)。Western blot结果显示,观察组5637细胞中GPC5蛋白表达上调。与对照组相比,观察组转染LINC01204后的5637细胞从第3天(0.686±0.044 vs 0.536±0.026,t=2.943,P=0.026)开始增殖能力明显降低。观察组5637细胞迁移数[(118.300±16.260)个]明显低于对照组[(208.200±22.930)个],差异均有统计学意义(t=3.198,P=0.019)。观察组5637细胞侵袭数[(50.390±5.368)个]明显低于对照组[(97.480±15.350)个],差异均有统计学意义(t=2.896,P=0.028)。结论 LINC01204可上调GPC5基因的表达,抑制膀胱癌细胞的增殖、迁移� 展开更多
关键词 RNA 长链非编码 磷脂酰肌醇蛋白聚糖类 膀胱肿瘤 细胞增殖 细胞迁移分析 体外研究
依折麦布与瑞舒伐他汀对平滑肌源性泡沫细胞小凹蛋白-1 mRNA表达的影响
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作者 李佳 申晓彧 《中国医师杂志》 CAS 2019年第4期513-515,520共4页
目的研究依折麦布联合瑞舒伐他汀对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的平滑肌源性泡沫细胞小凹蛋白-1(Caveolin-1)mRNA表达的影响。方法将大鼠胸主动脉VSMCs分为9个组,分别为空白对照组、泡沫细胞组、不同浓度的依折麦布组(3、10、30μmol... 目的研究依折麦布联合瑞舒伐他汀对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的平滑肌源性泡沫细胞小凹蛋白-1(Caveolin-1)mRNA表达的影响。方法将大鼠胸主动脉VSMCs分为9个组,分别为空白对照组、泡沫细胞组、不同浓度的依折麦布组(3、10、30μmol/L)、不同浓度的瑞舒伐他汀组(0.1、1.0、5.0μmol/L)、联合组(依折麦布30μmol/L+瑞舒伐他汀5.0μmol/L),油红O染色鉴定泡沫细胞模型,real-time PCR检测各组细胞Caveolin-1 mRNA表达。结果与空白对照组相比,泡沫细胞组Caveolin-1 mRNA表达降低[(0. 248 7±0. 042 0) vs (1. 004 1±0. 017 1)],差异有统计学意义(P<0.05);与泡沫细胞组相比,不同浓度的依折麦布组[(0.371 3±0.025 2)、(0.489 8±0. 027 9)、(0. 726 1±0. 029 1)]及瑞舒伐他汀组[(0. 460 2±0. 022 8)、(0. 623 7±0.028 8)、(0.751 8±0.043 1)]Caveolin-1 mRNA表达增加,各组间差异有统计学意义(P <0.05),且呈一定浓度依赖性(P<0. 05);且联合组(0. 937 6±0. 029 7)与单药组比较,Caveolin-1 mRNA表达增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论依折麦布及瑞舒伐他汀均促进平滑肌源性泡沫细胞中胆固醇的逆向转运(RCT),此过程可能通过上调Caveolin-1 mRNA的表达实现;且两者联合此作用更显著。 展开更多
关键词 依折麦布 瑞舒伐他汀钙 平滑 血管 窖蛋白1 体外研究
苦瓜Ⅰ型核糖体失活蛋白对膀胱癌迁移能力的影响及机制研究
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作者 庞昆 陈波 +4 位作者 郝林 史振铎 周荣升 臧光辉 韩从辉 《中国医师杂志》 CAS 2019年第2期184-188,共5页
目的研究苦瓜Ⅰ型核糖体失活蛋白(MAP30)对膀胱癌迁移能力的影响及机制。方法采用MTT法计算MAP30对人膀胱癌5637和T24细胞的半数抑制浓度(IC50)后,采用此浓度的MAP30通过细胞划痕迁移实验和Transwell细胞迁移实验来评估两种细胞的迁移能... 目的研究苦瓜Ⅰ型核糖体失活蛋白(MAP30)对膀胱癌迁移能力的影响及机制。方法采用MTT法计算MAP30对人膀胱癌5637和T24细胞的半数抑制浓度(IC50)后,采用此浓度的MAP30通过细胞划痕迁移实验和Transwell细胞迁移实验来评估两种细胞的迁移能力,并用Western blot分别检测两种肿瘤细胞加入MAP30后基质金属蛋白酶(MMPs)和黏附分子N-cadherin等蛋白的表达。结果细胞划痕迁移实验:5637细胞加药组和对照组在8 h和22 h迁移率比较差异均有统计学意义(P<0.05),T24细胞加药组和对照组间8 h迁移率差异无统计学意义(P>0.05),在22 h迁移率差异有统计学意义(P<0.05)。MAP30干预后,人膀胱癌5637细胞和T24细胞中Vimentin、Fibronectin、MMP-2、MMP-9、N-Cadherin蛋白的表达明显降低。人膀胱癌5637细胞E-Cadherin表达降低,但人膀胱癌T24细胞未检测到目的条带。结论苦瓜Ⅰ型核糖体失活蛋白MAP30通过抑制上皮-间质细胞转化(EMT)途径和抑制MMPs表达,可以有效抑制人膀胱癌5637和T24细胞的迁移能力。 展开更多
关键词 核糖体失活蛋白质类 1型 膀胱肿瘤 细胞迁移分析 上皮细胞-间质转化 体外研究
miR-99a高表达抑制肝癌HepG2细胞的增殖研究 预览
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作者 方志雄 方志红 +3 位作者 徐磊 张海明 林沙 贺朗秋 《现代医药卫生》 2019年第2期207-210,共4页
目的探讨微小RNA-99a(miR-99a)对肝癌HepG2细胞增殖的影响与机制,为阐明肝癌发病机制提供实验依据。方法将miR-99a导入肝癌HepG2细胞,采用细胞生长曲线与平皿克隆实验观察miR-99a高表达对HepG2细胞增殖的影响。结果miR-99a高表达后细胞... 目的探讨微小RNA-99a(miR-99a)对肝癌HepG2细胞增殖的影响与机制,为阐明肝癌发病机制提供实验依据。方法将miR-99a导入肝癌HepG2细胞,采用细胞生长曲线与平皿克隆实验观察miR-99a高表达对HepG2细胞增殖的影响。结果miR-99a高表达后细胞生长减慢,增殖能力降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论miR-99a高表达后HepG2细胞增殖抑制。 展开更多
关键词 肝肿瘤 微RNAS 细胞增殖 体外研究
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阿霉素通过两种方式诱导乳腺癌耐药细胞株的比较研究
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作者 李晓玲 张莉 《中国医师杂志》 CAS 2019年第2期194-196,共3页
目的通过两种不同方式诱导乳腺癌耐药细胞株(MCF-7/ADM),比较两种诱导方式的生物学特性。方法以乳腺癌MCF-7细胞株为亲本细胞,采用低浓度持续递增法和高浓度冲击递增法分别诱导乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADM1和MCF-7/ADM2;显微镜下观察细... 目的通过两种不同方式诱导乳腺癌耐药细胞株(MCF-7/ADM),比较两种诱导方式的生物学特性。方法以乳腺癌MCF-7细胞株为亲本细胞,采用低浓度持续递增法和高浓度冲击递增法分别诱导乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADM1和MCF-7/ADM2;显微镜下观察细胞形态,MTT法检测不同浓度ADM对MCF-7、MCF-7/ADM1和MCF-7/ADM2的抑制率,计算耐药指数(RI);绘制生长曲线,计算细胞倍增时间(Td);经不同浓度阿霉素(ADM)冻存后检测RI变化;流式细胞仪检测细胞周期。结果采用低浓度持续递增法和高浓度冲击递增法成功诱导了乳腺癌耐药细胞株,且对紫杉醇和顺铂产生了交叉耐药性;MCF-7/ADM1的RI高于MCF-7/ADM2(P<0.05);三种细胞株Td分别为:24.01、34.04、32.71 h。两种耐药细胞株冻存后RI变化不明显(P>0.05)。与亲本细胞比较,耐药细胞株S、G2/M期细胞减少,G0/G1期细胞增多。结论两种方式均可诱导耐药细胞株,且其耐药性相对稳定,并可对紫杉醇及顺铂产生交叉耐药,但其生物学特性有所差异,有待进一步研究其耐药机制及逆转靶点。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 抗药性 多柔比星 体外研究
评价一种新CYP2C9突变型对药物代谢的影响 预览
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作者 亢奋恒 张博文 +2 位作者 戴大鹏 李传宝 蔡剑平 《医学研究杂志》 2019年第6期54-59,共6页
目的在体外表达细胞色素P2C9(32T> C),构建酶促反应体系,检测其对甲苯磺丁脲(tolbutamide)的代谢活性.方法利用定向诱变技术,以细胞色素P2C9野生型的互补DNA为反义链,获得细胞色素P2C9*3以及细胞色素P2C9(32T>C)的complementary D... 目的在体外表达细胞色素P2C9(32T> C),构建酶促反应体系,检测其对甲苯磺丁脲(tolbutamide)的代谢活性.方法利用定向诱变技术,以细胞色素P2C9野生型的互补DNA为反义链,获得细胞色素P2C9*3以及细胞色素P2C9(32T>C)的complementary DNA,利用杆状病毒穿梭载体bacmid抽提试剂盒获得bacmid,转染伪黏虫卵巢细胞,充分表达后提取微粒体蛋白质,并用免疫印迹法检测其表达量.在体外条件下,测定各型细胞色素P2C9催化甲苯磺丁脲代谢的最大反应速率Vm和米氏常数Km,评价新突变体的催化功能.结果利用昆虫表达系统表达获得细胞色素P2C9 * 1、细胞色素P2C9*3和细胞色素P2C9(32T> C)3种微粒体蛋白质.免疫印迹结果显示,新变异型蛋白表达水平接近于野生型.体外代谢实验结果显示,细胞色素P2C9(32T> C)针对甲苯磺丁脲的体外清除率(Vm/Km)明显低于野生型,体外酶学活性为野生型的12.40%.结论在体外条件下,细胞色素P2C9(32T> C)对甲苯磺丁脲的代谢活性明显下降,提示携带有该基因型的患者服用细胞色素P2 C9的底物药时,体内代谢速率可能会有不同程度的降低,用药前需考虑调整剂量. 展开更多
关键词 细胞色素P2C9 新突变体 体外研究
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鲑鱼降钙素对磨损颗粒诱导后人巨噬细胞RANK/RANKL/OPG骨溶解通路的影响
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作者 冷屹 胡懿郃 +3 位作者 曾敏 汪龙 李明清 谢杰 《中国医师杂志》 CAS 2019年第1期64-68,共5页
目的通过检测经磨损颗粒刺激诱导后的人巨噬细胞在鲑鱼降钙素干预下骨溶解信号通路中核因子κB受体活化因子/核因子κB受体活化因子配体/骨保护素(RANK/RANKL/OPG)的mRNA表达,探讨鲑鱼降钙素对人巨噬细胞骨溶解通路的影响。方法从一例... 目的通过检测经磨损颗粒刺激诱导后的人巨噬细胞在鲑鱼降钙素干预下骨溶解信号通路中核因子κB受体活化因子/核因子κB受体活化因子配体/骨保护素(RANK/RANKL/OPG)的mRNA表达,探讨鲑鱼降钙素对人巨噬细胞骨溶解通路的影响。方法从一例髋关节假体松动患者的髋臼侧假体周围界膜组织中提取聚乙烯磨损颗粒,MTT法测出人巨噬细胞对聚乙烯磨损颗粒(浓度为0.1 mg/ml)的最佳反应细胞浓度并用于实验。用磨损颗粒刺激人的巨噬细胞,并用不同药物浓度的鲑鱼降钙素干预,将磨损颗粒及巨噬细胞随机分成五组,每组六份:A组为对照组;B组为颗粒组;C组为颗粒+鲑鱼降钙素(10^-8mol/L)组;D组为颗粒+鲑鱼降钙素(10^-10mol/L)组;E组为颗粒+鲑鱼降钙素(10^-12 mol/L)组,共同培养48 h后,qPCR方法检测巨噬细胞RANK、RANKL、OPG的mRNA表达。结果(1)RANK表达:颗粒刺激后B组较A组表达升高,鲑鱼降钙素干预后,C、D组RANK表达量下降。(2)RANKL表达:颗粒刺激后B钮表达较A组升高,药物干预后C、D、E组皆明显低于B组。(3)OPG表达:A组表达最高,颗粒刺激后B组表达下降,药物干预后C、D、E组表达有所上升。(4)RANKL/OPG:B组的RANKIJOPG比率最大,药物干预后,C、D、E组比率皆下降。结论(1)磨损颗粒刺激诱导前后的人巨噬细胞有RANK、RANKL、OPG表达;(2)磨损颗粒有诱导巨噬细胞向破骨细胞转化的作用;(3)鲑鱼降钙素干预后,可影响骨溶解通路各因子(RANK/RANKL/OPG)mRNA表达,阻止向破骨细胞转化。 展开更多
关键词 降钙素 巨噬细胞 核因子ΚB受体活化因子 RANK配体 骨保护素 骨质溶解 体外研究
人滑膜间充质干细胞向软骨诱导分化的基础研究
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作者 孙玉波 齐志明 +5 位作者 李晋 张爽 李作洪 宫良丰 吴国志 李庆 《中国医师杂志》 CAS 2019年第9期1390-1393,共4页
目的 探讨人滑膜间充质干细胞(SMSCs)向软骨诱导分化的条件及分子机制,为半月板组织工程修复提供基础。方法 选取膝关节创伤患者5例,关节镜下取滑膜组织4~8片,每片约1 mm×3 mm×1 mm,加入含10%胎牛血清的低糖培养基进行原代及... 目的 探讨人滑膜间充质干细胞(SMSCs)向软骨诱导分化的条件及分子机制,为半月板组织工程修复提供基础。方法 选取膝关节创伤患者5例,关节镜下取滑膜组织4~8片,每片约1 mm×3 mm×1 mm,加入含10%胎牛血清的低糖培养基进行原代及传代培养,以单克隆培养法获得纯化的滑膜间充质干细胞系,后采用流式细胞仪进行干细胞表型鉴定,并向完全培养基加转化生长因子-β1(TGF-β1)、地塞米松(DEX)、维生素C(VC)进行软骨诱导分化,采用免疫组化法检测诱导后Ⅱ型胶原(COLⅡ)的表达情况。结果 含10%胎牛血清的低糖DMEM培养基最有利于细胞生长,采用单克隆培养法可获得纯化较高的细胞;流式鉴定细胞表型:细胞表达CD44、CD90,不表达CD34、CD45;免疫组化法检测未经诱导的细胞形态基本保持梭形,而诱导14 d后逐渐由小梭形变为多角形,可见大量棕色颗粒,COLⅡ阳性表达。结论 人SMSCs优化生长条件:含10%胎牛血清的低糖DMEM培养基最有利于细胞生长,采用单克隆培养法可获得纯化较高细胞,且分离纯化的细胞免疫原性较低,适用于同种异基因体之间移植,可作为半月板组织工程修复的种子细胞。 展开更多
关键词 滑膜 间充质基质细胞 软骨 细胞分化 体外研究
IL-6、LPS激活巨噬细胞所得上清液对神经母细胞瘤细胞株Neuro2a增殖、凋亡及突起生长和Sez 6基因表达的影响 预览
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作者 徐武凤 杨静 +2 位作者 郝俊楠 杨堃 孙立荣 《精准医学杂志》 2019年第5期393-397,共5页
目的探讨IL-6、细菌脂多糖(LPS)激活巨噬细胞所得上清液(CM)对神经母细胞瘤细胞株Neuro2a细胞增殖、凋亡及细胞突起生长与Sez 6基因表达的影响。方法以IL-6和CM分别作用于Neuro2a细胞,采用MTT法、流式细胞术分别检测细胞的增殖、凋亡能... 目的探讨IL-6、细菌脂多糖(LPS)激活巨噬细胞所得上清液(CM)对神经母细胞瘤细胞株Neuro2a细胞增殖、凋亡及细胞突起生长与Sez 6基因表达的影响。方法以IL-6和CM分别作用于Neuro2a细胞,采用MTT法、流式细胞术分别检测细胞的增殖、凋亡能力;培养24 h后观察统计细胞突起生长变化,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法检测Sez 6基因的表达。结果与对照组比较,IL-6、CM刺激对Neuro2a细胞增殖、凋亡未见明显影响,但可增加细胞突起总长度、最长突起长度、突起数目,并且可促进Sez 6基因的表达(F=6.00~22.52,P<0.05)。结论IL-6、CM对Neuro2a细胞增殖、凋亡作用不明显,但可能通过上调Sez 6基因的表达促进细胞突起的生长。 展开更多
关键词 神经母细胞瘤 白细胞介素6 脂多糖类 巨噬细胞 细胞增殖 细胞凋亡 Sez 6基因 细胞突起 体外研究
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长链非编码RNA NEAT1对肾癌细胞增殖和侵袭能力影响的机制研究
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作者 龚化 周治军 +2 位作者 卢童 徐康 鲁文 《中国医师杂志》 CAS 2019年第3期356-359,363共5页
目的观察长链非编码RNA(LncRNA)NEAT1在肾癌组织和细胞株中的表达,并探究其对肾癌细胞恶性生物学行为的影响及可能的分子机制。方法采用qPCR法检测NEAT1在10例肾癌组织及癌旁组织、4种肾癌细胞株及正常肾小管上皮细胞中的表达。以阴性... 目的观察长链非编码RNA(LncRNA)NEAT1在肾癌组织和细胞株中的表达,并探究其对肾癌细胞恶性生物学行为的影响及可能的分子机制。方法采用qPCR法检测NEAT1在10例肾癌组织及癌旁组织、4种肾癌细胞株及正常肾小管上皮细胞中的表达。以阴性对照慢病毒(LV-NC)感染肾癌细胞株ACHN为对照组,以携带NEAT1基因的重组慢病毒(LV-NEAT1)感染ACHN细胞作为观察组。生物信息学预测NEAT1的靶向miRNA及下游基因。采用qPCR检测过表达NEAT1对miR-342-3p和细胞黏附分子1(CADM1)mRNA表达的影响,通过Western blot检测CADM1蛋白的表达,分别以噻唑蓝(MTT)法、Transwell侵袭实验检测高表达NEAT1对ACHN细胞增殖和侵袭的影响。结果NEAT1在肾癌组织中的表达水平低于癌旁组织(P<0.01)。NEAT1在肾癌细胞株中的表达均低于肾小管上皮细胞(P<0.01)。LV-NEAT1感染细胞后,NEAT1表达量显著升高(P<0.01),miR-342-3p表达降低(P<0.01),CADM1基因表达升高(P<0.01)。高表达NEAT1能明显抑制细胞增殖能力和侵袭能力(P<0.05)。结论LncRNA NEAT1在肾癌及细胞株中表达降低,高表达NEAT1可抑制ACHN细胞的增殖和侵袭,其分子机制可能是NEAT1通过互补结合miR-342-3p进而上调CADM1基因的表达。 展开更多
关键词 RNA 长链非编码 肾肿瘤 细胞增殖 肿瘤侵润 体外研究
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