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神经发育毒性检测方法研究进展
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作者 宋秋楠 郑玉建 +2 位作者 马艳 马潘红 王坤 《职业与健康》 CAS 2019年第6期858-860,864共4页
发育中的生物体长期暴露于有毒有害环境中,即使是较小剂量,也会对脑组织造成不可逆转的损伤,引起神经发育性疾病。检测神经发育毒性能够早期预防神经性疾病,目前神经发育毒性检测方法主要有动物实验、体外实验、人体观察以及一些新方法... 发育中的生物体长期暴露于有毒有害环境中,即使是较小剂量,也会对脑组织造成不可逆转的损伤,引起神经发育性疾病。检测神经发育毒性能够早期预防神经性疾病,目前神经发育毒性检测方法主要有动物实验、体外实验、人体观察以及一些新方法的提出。动物实验常用的方法主要是对实验动物进行行为和学习记忆能力的测试,体外实验是基于动物实验的基础上对其组织、细胞进行体外培养检测,人体观察通常指流行病学调查研究,近年来发展较快的高通量、高内涵、有害结局通路等方法也在不断完善。本文分别综述了几种方法的优势以及现阶段应用方法。 展开更多
关键词 神经发育 动物实验 体外实验 流行病学研究
油菜籽来源抗氧化物质研究进展 预览
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作者 马芝丽 陈文超 +3 位作者 祝香芝 黄凤洪 邓乾春 万霞 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期998-1006,共9页
油菜籽中含有多种具有抗氧化活性的物质,为抵御机体的氧化损伤起到了积极作用。本文综述了油菜籽来源的诸多抗氧化活性成分及抗氧化活性的评价方法。油菜籽主要的抗氧化成分有肽类、多酚类、多糖类、生育酚和其它抗氧化成分,其中的肽类... 油菜籽中含有多种具有抗氧化活性的物质,为抵御机体的氧化损伤起到了积极作用。本文综述了油菜籽来源的诸多抗氧化活性成分及抗氧化活性的评价方法。油菜籽主要的抗氧化成分有肽类、多酚类、多糖类、生育酚和其它抗氧化成分,其中的肽类主要有三种产生方式:非消化酶酶解、消化酶酶解和发酵。针对油菜籽来源的活性物质抗氧化活性的评价方法,包括体外测定方法(化学检测)和细胞内抗氧化实验和动物实验。综述还探讨了油菜籽抗氧化活性成分研究中存在的问题和解决方法,旨在为油菜籽活性成分的开发和利用提供参考。 展开更多
关键词 油菜籽 抗氧化活性 成分 多肽 评价方法 体外实验 体内实验
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硫酸钙链霉素的颗粒体外缓释性能的研究 预览
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作者 陈勇忠 卫秀洋 +1 位作者 翁少煌 刘永平 《中国现代医生》 2019年第1期40-43,共4页
目的了解载结核药链霉素的硫酸钙缓释颗粒在体外的药物缓释性能。方法实验组,将链霉素与医用硫酸钙混合制备成载药颗粒,将其置于模拟体液中,取1d、2d、3d、1周、2周、4周、6周、8周、10周时缓冲液为样本,高效液相色谱法(HPLC)检测其中... 目的了解载结核药链霉素的硫酸钙缓释颗粒在体外的药物缓释性能。方法实验组,将链霉素与医用硫酸钙混合制备成载药颗粒,将其置于模拟体液中,取1d、2d、3d、1周、2周、4周、6周、8周、10周时缓冲液为样本,高效液相色谱法(HPLC)检测其中链霉素药物的浓度,绘制药物缓释曲线。空白组,医用硫酸钙制备成未载药颗粒。结果医用硫酸钙5cc与链霉素1g为最佳配比。载链霉素硫酸钙颗粒在模拟体液中浸泡,缓释颗粒3d时累计释放量15.33%。在8周前的样本液中,药物浓度均较高;至8周时链霉素的释出浓度、仍达到的最小抑菌浓度,之后逐渐降低。未载链霉素的硫酸钙颗粒在有效检测时间内药物出峰时间处未见波峰出现。结论硫酸钙链霉素颗粒具有效缓释性能。8周内模拟体液中释出药物的浓度均可达到抑制结核分枝杆菌的浓度。 展开更多
关键词 硫酸钙 链霉素 缓释 体外实验
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索拉菲尼抑制肿瘤细胞PKM2蛋白表达 预览
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作者 次旦旺久 林坤 +2 位作者 卢再鸣 赵相轩 王晓明 《现代肿瘤医学》 CAS 2019年第22期3973-3976,共4页
目的:探讨索拉菲尼对肿瘤细胞中PKM2蛋白表达的影响。方法:以人肝癌细胞HepG2、人胆管癌细胞QBC939、人肺癌细胞NCI-H446、人宫颈癌细胞Hela为研究对象,体外培养上述肿瘤细胞;光镜下观察不同肿瘤细胞经不同浓度索拉菲尼处理后细胞形态... 目的:探讨索拉菲尼对肿瘤细胞中PKM2蛋白表达的影响。方法:以人肝癌细胞HepG2、人胆管癌细胞QBC939、人肺癌细胞NCI-H446、人宫颈癌细胞Hela为研究对象,体外培养上述肿瘤细胞;光镜下观察不同肿瘤细胞经不同浓度索拉菲尼处理后细胞形态学改变;CCK-8法检测索拉菲尼对上述肿瘤细胞增殖的影响。用Western blot检测索拉菲尼对上述细胞的PKM2表达变化。结果:光镜下观察可见随着索拉菲尼浓度的增加,肿瘤细胞离巢、凋亡,并且随着浓度的增加而增加。细胞增殖实验可见,索拉菲尼显著抑制HepG2、QBC939、NCI-H446、Hela细胞的增殖,不同浓度(2.5μmol/L、5.0μmol/L、10.0μmol/L、20.0μmol/L)的索拉菲尼处理上述细胞48 h后,各药物处理组与对照组比较(P均<0.01),呈剂量效应关系;索拉菲尼处理上述肿瘤细胞48 h的IC50分别为10.61μmol/L、13.88μmol/L、15.66μmol/L、12.86μmol/L。Western blot检测结果显示,不同浓度的索拉非尼显著抑制HepG2、QBC939、NCI-H446、Hela细胞的PKM2的蛋白表达,并且表达与浓度呈剂量关系。蛋白表达半定量分析可见,各肿瘤细胞经过索拉菲尼处理后与对照组比较,蛋白表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论:索拉菲尼能抑制人多种肿瘤细胞增殖并显著抑制PKM2蛋白表达。 展开更多
关键词 索拉菲尼 肿瘤细胞 体外实验
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科普纵览 预览
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《科技传播》 2019年第2期15-16,共2页
脑卒中是老年病?流言:脑卒中是老年病,跟年轻人并没有多大关系。真相:任何年龄的人都可能得脑卒中,发病也无关性别。如今脑卒中患者有年轻化的趋势,因而中青年人群体也应引起足够重视,特别是有心脑血管疾病史或有家族史的年轻人。年轻... 脑卒中是老年病?流言:脑卒中是老年病,跟年轻人并没有多大关系。真相:任何年龄的人都可能得脑卒中,发病也无关性别。如今脑卒中患者有年轻化的趋势,因而中青年人群体也应引起足够重视,特别是有心脑血管疾病史或有家族史的年轻人。年轻人发生脑卒中的大部分原因是自身先天性疾病,或是外部伤害导致血管壁损伤。 展开更多
关键词 葡萄籽 白内障 体外实验 抗氧化 氧自由基 糖尿病 胃结石 晶状体 癌细胞 脑卒中 提取物
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灯盏乙素参与线粒体膜通透性转换对抗β淀粉样蛋白毒性的体外实验
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作者 伍棋 王宁慧 +1 位作者 于燕妮 郭莉莉 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期394-396,共3页
目的观察灯盏乙素(Scu)对β淀粉样蛋白(Aβ)1-42诱导的细胞模型中线粒体通透性转换的几个病理因素的影响,探讨其对抗Aβ毒性损害的作用机制。方法选用神经母细胞瘤细胞分为对照组、Scu处理组、Aβ处理组和Scu+Aβ处理组,用蛋白印迹方法... 目的观察灯盏乙素(Scu)对β淀粉样蛋白(Aβ)1-42诱导的细胞模型中线粒体通透性转换的几个病理因素的影响,探讨其对抗Aβ毒性损害的作用机制。方法选用神经母细胞瘤细胞分为对照组、Scu处理组、Aβ处理组和Scu+Aβ处理组,用蛋白印迹方法检测各组细胞腺嘌呤核苷酸转位酶2(ANT2)的表达水平;用激光共聚焦显微镜观察各组细胞线粒体膜电位和Ca2+浓度的变化;用生物化学法检测各组细胞活性氧和三磷酸腺苷(ATP)含量;用流式细胞仪测定各组细胞的凋亡率。结果与对照组和Scu处理组相比,Aβ处理组细胞中ANT2的蛋白表达下调,ATP含量减少,细胞线粒体膜电位下降,活性氧水平升高,胞质内Ca2+浓度及细胞凋亡率升高;Scu+Aβ处理组上述指标的变化与Aβ处理组相比正好相反。结论Scu能够改善ATP代谢和钙超载,调节细胞内活性氧水平和线粒体膜电位异常,上调ANT2的蛋白表达,可能通过介导线粒体膜通透性转换孔的开放来抑制凋亡的发生,减轻Aβ毒性所致的细胞损伤。 展开更多
关键词 线粒体通透性转换 线粒体膜电位 β淀粉样蛋白 毒性损害 灯盏乙素 体外实验 对抗 细胞内活性氧
慢病毒介导IL2基因感染MSCs对胰腺癌PANC-1治疗效应
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作者 姚志新 商振宁 +3 位作者 林峰 姜丹 李惠 肖轶群 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期3853-3856,共4页
为了评价慢病毒介导IL2基因感染间充质干细胞(MSCs)对胰腺癌PANC-1增殖和迁移体外模型中的效应,本研究在体外分离、培养和鉴定了MSCs后,采用Gateway技术构建IL-2表达载体,采用HEK293细胞产生慢病毒颗粒,感染细胞后采用免疫印迹法进行鉴... 为了评价慢病毒介导IL2基因感染间充质干细胞(MSCs)对胰腺癌PANC-1增殖和迁移体外模型中的效应,本研究在体外分离、培养和鉴定了MSCs后,采用Gateway技术构建IL-2表达载体,采用HEK293细胞产生慢病毒颗粒,感染细胞后采用免疫印迹法进行鉴定。通过Transwll小室实验,采用IL-2/MSCs进行处理后,观察肿瘤的凋亡情况。此外,本研究还采用Caspase抑制剂及IL-2单抗对IL2/MSC促肿瘤凋亡的机制进行明确。研究结果表明,成功分离的间充质干细胞,经流式鉴定后为CD34、CD45不表达,CD29、CD44和CD90高表达。体外实验的结果显示IL-2/MSCs能够显著增加肿瘤的凋亡。IL-2/MSCs能够通过活化Casapase相关的信号发挥抗凋亡效应。研究结论初步表明,IL-2/MSC具有一定的胰腺癌治疗效应,其主要是通过活化Caspase来发挥对肿瘤的杀伤作用。 展开更多
关键词 白介素-2 间充质干细胞 胰腺癌 体外实验
葛根水提液及葛根发酵液的体外抗氧化及抗衰老功效评价 预览 被引量:2
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作者 吴迪 刘平平 +3 位作者 李萌 王昌涛 赵丹 张佳婵 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2019年第12期285-290,294共7页
本实验以葛根为研究对象,通过水提取法及微生物发酵法得到葛根水提液(pueraria water extracts,PWE)及葛根发酵液(pueraria fermentation broth,PFB),对其进行有效成分的提取、化学水平清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基能力测... 本实验以葛根为研究对象,通过水提取法及微生物发酵法得到葛根水提液(pueraria water extracts,PWE)及葛根发酵液(pueraria fermentation broth,PFB),对其进行有效成分的提取、化学水平清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基能力测定以及细胞水平过氧化氢酶(catalase,CAT)活力、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase)活力、基质金属蛋白酶1(matrix metalloproteinase-1,MMP-1)酶活力和I型胶原(Collagen I,COL I)含量分析。结果表明,葛根水提液、葛根发酵液中主要的活性成分为黄酮类物质,葛根水提液黄酮含量为(3.47±0.23) mg/mL,葛根发酵液黄酮含量为(4.80±0.32) mg/mL;二者均具有较为明显的DPPH自由基清除能力,葛根发酵液清除率DPPH自由基的IC50为2.98 mg/mL,葛根水提液清除率DPPH自由基的IC50为3.51 mg/mL,在质量浓度在2.67~4.44 mg/mL间,相同质量浓度下葛根发酵液清除DPPH的作用更为显著(p<0.05);葛根水提液、葛根发酵液在0.05~5.00 mg/mL范围内,对人皮肤成纤维细胞均未表现出强烈的细胞毒性,细胞活力均在85%以上;两种样品刺激细胞后,细胞中过氧化氢酶活力、谷胱甘肽过氧化物酶活力显著(p<0.05)增高,其中葛根水提液比葛根发酵液作用效果更为显著(p<0.05),两种样品刺激细胞后,均能降低细胞内MMP-1的含量,增加细胞中I型胶原的含量,而葛根发酵液相较于葛根水提液,降低MMP-1含量及增加I型胶原含量的作用更为显著(p<0.05)。综上,葛根发酵液的抗氧化性及抗衰老功效强于葛根水提液。 展开更多
关键词 葛根 发酵 体外实验 抗氧化活性 抗衰老活性
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益气养阴方含药血清联合化疗药物对KG1α细胞增殖的影响 预览
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作者 周琦浩 李双双 +1 位作者 朱里洁 童向民 《中国中医药科技》 CAS 2019年第5期658-661,共4页
目的:观察益气养阴方含药血清联合化疗药物(阿糖胞苷、喜树碱、紫杉醇)对KG1a细胞增殖作用的影响。方法:予Wistar大鼠中药制剂灌胃制备含药血清;实验分为空白血清组,5%、10%、15%、20%含药血清组,化疗药单用组,含药血清联合化疗药组;各... 目的:观察益气养阴方含药血清联合化疗药物(阿糖胞苷、喜树碱、紫杉醇)对KG1a细胞增殖作用的影响。方法:予Wistar大鼠中药制剂灌胃制备含药血清;实验分为空白血清组,5%、10%、15%、20%含药血清组,化疗药单用组,含药血清联合化疗药组;各组细胞培养12、24、48、72 h,采用CCK8检测KG1a细胞增殖抑制率。结果:15%含药血清组12 h对KG1α细胞增殖抑制效果最为明显,随着时间的推移,抑制效果稍有所减弱,与空白血清组比较差异具有统计学意义(P <0. 01)。阿糖胞苷、紫杉醇对于KG1α细胞的抑制效果不明显;但在含药血清的协同作用下,对KG1α细胞的抑制作用明显增加,12 h即表现出明显的抑制作用,与空白血清组及单用化疗药组比较有显著统计学意义(P <0. 01)。喜树碱对KG1α细胞的抑制作用明显,并随着时间增加而增强;在含药血清的作用下,抑制效果进一步增强。结论:中药益气养阴方含药血清可增加KG1α细胞对化疗药的敏感性,增加细胞生长的抑制率。 展开更多
关键词 益气养阴方 血清药理学 KG1α细胞 细胞增殖 阿糖胞苷 喜树碱 紫杉醇 体外实验
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茯苓酸对TNF-α诱导SH-SY5Y细胞炎症氧化应激反应和凋亡的拮抗作用研究 预览
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作者 秦劭晨 王爱梅 李若瑜 《中国中医药科技》 CAS 2019年第6期854-858,共5页
目的:探讨茯苓酸对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导SH-SY5Y细胞炎症、氧化应激损伤和凋亡的作用机制。方法:体外培养SH-SY5Y细胞,用TNF-α诱导SH-SY5Y造模,将细胞分为正常组、模型组、茯苓酸组、依达拉奉组。采用噻唑蓝比色(MTT)法检测细胞... 目的:探讨茯苓酸对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导SH-SY5Y细胞炎症、氧化应激损伤和凋亡的作用机制。方法:体外培养SH-SY5Y细胞,用TNF-α诱导SH-SY5Y造模,将细胞分为正常组、模型组、茯苓酸组、依达拉奉组。采用噻唑蓝比色(MTT)法检测细胞增殖能力,用比色法检测乳酸脱氢酶(LDH),超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-1β(IL-1β)的含量;用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测B淋巴细胞瘤-2基因(BCL-2)、Bcl-2相关X蛋白(BAX)、磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)和核因子E2相关因子2(nuclear Nrf2)的蛋白表达。结果:在50 mg/L浓度时,TNF-α对SH-SY5Y细胞有明显的抑制作用(P<0.01)。与模型组比较,茯苓酸组和依达拉奉组SH-SY5Y细胞的LDH、MDA和IL-6、IL-1β的含量及BAX,p-ERK和nuclear Nrf2的表达显著减少(P<0.05或P<0.01),而SOD含量和BCL-2表达显著增加(P<0.05或P<0.01)。结论:茯苓有效成分茯苓酸具有抑制TNF-α诱导SH-SY5Y的炎症和氧化应激损伤作用,可能是通过下调ERK/Nrf2信号通路的Nrf2进入细胞核达到抑制细胞凋亡的作用机制。 展开更多
关键词 茯苓酸 肿瘤坏死因子 SH-SY5Y细胞 炎症 氧化应激 ERK/Nfr2通路 凋亡 体外实验
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冬凌草甲素对肝癌细胞增殖的抑制作用及其对E-cadherin、Vimentin表达的影响 预览
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作者 史国军 叶兴涛 +3 位作者 屠小龙 施航 董晶 陆宁 《中国中医药科技》 CAS 2019年第4期526-529,共4页
目的:观察冬凌草甲素对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞的增殖抑制作用并探讨其作用机制。方法:采用不同浓度的冬凌草甲素作用于人肝癌SMMC-7721细胞,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力,免疫组化法检测E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)... 目的:观察冬凌草甲素对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞的增殖抑制作用并探讨其作用机制。方法:采用不同浓度的冬凌草甲素作用于人肝癌SMMC-7721细胞,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力,免疫组化法检测E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)、波形蛋白(Vimentin)的表达。荧光定量PCR检测上游基因mRNA的表达。结果:MTT法检测结果显示不同浓度的冬凌草甲素可抑制人肝癌SMMC-7721细胞的增殖,抑制作用呈时间和剂量依赖性。免疫组化法显示,人肝癌SMMC-7721细胞的E-cad蛋白随冬凌草甲素浓度增加而表达增加,Vimentin蛋白随药物浓度增加而表达下降。荧光定量PCR结果显示,冬凌草甲素可上调人肝癌细胞E-cad上游基因mRNA的表达,抑制Vimentin上游基因mRNA的表达。结论:冬凌草甲素能抑制人肝癌SMMC-7721细胞增殖,其机制与上调E-cad蛋白及mRNA的表达,降低Vimentin蛋白及mRNA的表达有关。 展开更多
关键词 冬凌草甲素 肝肿瘤 上皮细胞间充质转化 E-钙黏蛋白 波形蛋白 体外实验
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衢枳壳黄酮组分抑制脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症反应的作用机制研究 预览
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作者 徐霄 汪洋 +2 位作者 王思为 钟松阳 楼丽君 《中国中医药科技》 CAS 2019年第4期529-532,共4页
目的:研究衢枳壳黄酮组分(the flavonoids from Quzhiqiao,TFQ)对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的RAW264. 7细胞的抗炎作用机制。方法:LPS(1 mg·L^-1)诱导RAW264. 7细胞建立细胞炎症模型。四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测不同浓... 目的:研究衢枳壳黄酮组分(the flavonoids from Quzhiqiao,TFQ)对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的RAW264. 7细胞的抗炎作用机制。方法:LPS(1 mg·L^-1)诱导RAW264. 7细胞建立细胞炎症模型。四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测不同浓度TFQ对RAW264.7细胞活性的影响,RT-PCR法检测细胞炎性因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素1β(IL-1β) mRNA表达情况,Western blot法和免疫荧光法分别检测细胞核因子-κB(NF-κB p65)表达情况和入核情况。结果:TFQ在10~100 mg·L^-1时,对RAW264. 7细胞活性无影响。RT-PCR结果表明,TFQ能够降低LPS诱导的RAW264. 7细胞炎性因子TNF-α、IL-6和IL-1β表达,以TFQ 100 mg·L^-1作用显著(P <0. 05);Western blot法和免疫荧光结果表明,TFQ能够显著抑制p65蛋白表达与入核。结论:TFQ具有抑制LPS诱导的RAW264. 7细胞炎症反应的作用,其机制可能与抑制p65活化减少炎性因子表达有关。 展开更多
关键词 衢枳壳 黄酮组分 RAW264.7 炎性因子 NF-κB 体外实验
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固体药物制剂的体外溶出度的统计学评价分析 预览
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作者 汪利琴 施杰刚 +1 位作者 苏玉珍 钱胜华 《全科口腔医学杂志(电子版)》 2019年第10期139-140,共2页
目的探讨固体药物制剂的体外溶出计算方法。方法溶出度评价方法常用有5种方法:机率单位法、Weibull法和Gompertz法、对数曲线法和指数模式法。本研究在缓蚀剂研制过程中对三种不同的处方进行计算,选择同一品种的国外制剂作为对照药品完... 目的探讨固体药物制剂的体外溶出计算方法。方法溶出度评价方法常用有5种方法:机率单位法、Weibull法和Gompertz法、对数曲线法和指数模式法。本研究在缓蚀剂研制过程中对三种不同的处方进行计算,选择同一品种的国外制剂作为对照药品完成体外溶出度计算。结果 1号药物相似因子在50以下;2号药物、3号药物在50~100之间。结论体外溶出度能准确的反映药物的药理动力学、药物的生物利用度,能为临床合理用药提供依据,值得推广应用。 展开更多
关键词 溶出度 体外实验 相似因子法
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低氧促进结肠癌细胞中Lin28A mRNA表达的体外实验研究 预览
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作者 李永立 刘鹏 +3 位作者 苗晶 李晓琳 于耀岐 李威 《世界最新医学信息文摘》 2019年第77期31-31,33共2页
目的研究体外低氧条件下结肠癌细胞中Lin28AmRNA表达增高的情况。方法 2017年6月至2018年12月我院展开的三项实验研究的资料进行回顾性分析,从而验证'低氧诱导结肠癌细胞中Lin28A表达增加'的假说。结果我们发现肿瘤细胞随着肿... 目的研究体外低氧条件下结肠癌细胞中Lin28AmRNA表达增高的情况。方法 2017年6月至2018年12月我院展开的三项实验研究的资料进行回顾性分析,从而验证'低氧诱导结肠癌细胞中Lin28A表达增加'的假说。结果我们发现肿瘤细胞随着肿瘤的生长逐渐处于低氧状态,Lin28A会因为肿瘤细胞被诱导,表达出转录产物mRNA表达。结论低氧诱导结肠癌细胞中Lin28A表达增加。 展开更多
关键词 结肠癌细胞 低氧状态 Lin28A MRNA表达 体外实验 基因转录
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扶正利湿抗癌方含药血清对前列腺癌PC-3细胞增殖的影响及机制研究 预览
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作者 王鹏 王毅东 赵文兵 《中国中医药科技》 CAS 2019年第3期339-343,共5页
目的:探讨扶正利湿抗癌方含药血清对前列腺癌细胞株PC-3体外增殖能力的影响及其作用机制。方法:应用CCK-8法测定不同浓度扶正利湿抗癌方含药血清对PC-3细胞生长抑制情况,流式细胞仪检测其对PC-3细胞凋亡及细胞周期的影响,并以Westernblo... 目的:探讨扶正利湿抗癌方含药血清对前列腺癌细胞株PC-3体外增殖能力的影响及其作用机制。方法:应用CCK-8法测定不同浓度扶正利湿抗癌方含药血清对PC-3细胞生长抑制情况,流式细胞仪检测其对PC-3细胞凋亡及细胞周期的影响,并以Westernblot分析扶正利湿抗癌方含药血清对PC-3细胞凋亡调控蛋白bcl-2和bax蛋白表达的影响。结果:扶正利湿抗癌方含药血清对PC-3细胞体外增殖抑制作用明显,呈浓度及时间依赖性。流式结果显示,扶正利湿抗癌方含药血清可诱导PC-3细胞凋亡,并能够增加G2/M期细胞比例,降低S期细胞比例,呈浓度依赖性。Westernblot结果显示,扶正利湿抗癌方含药血清可下调bcl-2蛋白的表达,而上调bax蛋白的表达,呈浓度依赖性。结论:扶正利湿抗癌方含药血清可以通过调节bcl-2和bax蛋白的表达发挥体外抑制PC-3细胞增殖的作用。 展开更多
关键词 前列腺癌 扶正利湿抗癌方含药血清 细胞增殖 细胞周期 凋亡 体外实验
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前列腺癌PC3细胞靶向纳米微泡造影剂的制备及体外寻靶研究 预览
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作者 凌茜 袁韵 江峰 《齐齐哈尔医学院学报》 2019年第1期4-6,共3页
目的制备前列腺癌PC3细胞的纳米级靶向超声造影剂,观测其物理性质,并检测体外寻靶能力。方法采用旋转蒸发法、机械震荡法制成普通纳米微泡和生物素化纳米微泡,通过生物素-亲和素法将生物素化抗6次跨膜前列腺上皮抗原(six transmembrane ... 目的制备前列腺癌PC3细胞的纳米级靶向超声造影剂,观测其物理性质,并检测体外寻靶能力。方法采用旋转蒸发法、机械震荡法制成普通纳米微泡和生物素化纳米微泡,通过生物素-亲和素法将生物素化抗6次跨膜前列腺上皮抗原(six transmembrane epithelial antigen of the prostate,STEAP-1)抗体与生物素化纳米微泡连接制成靶向前列腺癌PC3细胞的纳米微泡造影剂,并利用免疫荧光观察结合情况;观察及检测微泡的形态、分布、粒径及一周内粒径的变化情况;利用显微镜观察纳米靶向微泡对前列腺癌PC3细胞的体外靶向效果。结果成功制备空白纳米造影剂及载STEAP-1抗体的靶向纳米微泡造影剂;两种超声纳米微泡呈圆形,分布均匀,无聚集;一周后两种微泡粒径的变化无显著性差异(P>0.05)。体外寻靶实验中,靶向纳米微泡聚集在前列腺癌PC3细胞表面,预先用生物素化STEAP-1抗体处理的PC3细胞表面没有靶向纳米微泡聚集。结论通过旋转蒸发法、机械震荡法和生物素-亲和素法可成功制备载STEAP-1抗体的靶向纳米微泡造影剂,此造影剂能够在体外与前列腺癌PC3细胞特异性靶向结合。 展开更多
关键词 纳米脂质微泡 前列腺癌 靶向超声造影剂 体外实验
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清肝明目丸抗炎抗菌作用研究 预览
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作者 石敏娟 何侃亮 +7 位作者 李博 甘雪峰 袁秋贞 任啸 宋瑞 李芳 王卫峰 姜姗姗 《陕西中医》 2019年第9期1158-1161,共4页
目的:探讨清肝明目丸的抗炎抗菌作用。方法:采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型和冰醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性亢进模型,观察清肝明目丸的抗炎作用;通过体外抗菌实验,观察清肝明目丸的抗菌作用。结果:二甲苯致小鼠耳肿胀实验,清肝明目丸... 目的:探讨清肝明目丸的抗炎抗菌作用。方法:采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型和冰醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性亢进模型,观察清肝明目丸的抗炎作用;通过体外抗菌实验,观察清肝明目丸的抗菌作用。结果:二甲苯致小鼠耳肿胀实验,清肝明目丸组、模型组的耳肿胀度分别是(5.78±2.57)mg、(8.75±2.15)mg,清肝明目丸对二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀有明显的抑制作用。冰醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性亢进实验,清肝明目丸组、模型组的OD值分别为(0.221±0.049)、(0.303±0.051),清肝明目丸能减轻冰醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性亢进的炎症反应;体外抑菌实验显示其对多种细菌有抗菌作用,抗菌效果依次为:金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌>白色假丝酵母菌>铜绿假单胞菌、大肠埃希氏菌。体内抗菌实验显示清肝明目丸对金黄色葡萄球菌致死小鼠具有明显的保护作用,MIC为7.81mg/ml,MBC为15.63mg/ml。结论:清肝明目丸具有一定的抗炎、抗菌作用。 展开更多
关键词 清肝明目丸 耳肿胀 毛细血管通透性 抗炎 体外实验 抗菌
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根瘤菌多糖的发酵优化及抗肿瘤活性 预览
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作者 贾玉香 耿晓琦 +3 位作者 黄正梅 杜鹏 郑宇 宋佳 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第20期144-148,共5页
优化根瘤菌(Rhizobium NG10)产多糖的培养条件,提高胞外多糖(extracelluar polysaccharides of Rhizobium,REPS)产量,并探究其抗肿瘤活性。通过单因素实验、Plackett-Burman实验和Box-Behnken实验等对根瘤菌产胞外多糖发酵培养基配方进... 优化根瘤菌(Rhizobium NG10)产多糖的培养条件,提高胞外多糖(extracelluar polysaccharides of Rhizobium,REPS)产量,并探究其抗肿瘤活性。通过单因素实验、Plackett-Burman实验和Box-Behnken实验等对根瘤菌产胞外多糖发酵培养基配方进行优化,并采用MTT法检测多糖对人肝癌细胞的抑制作用。最终优化得到的最优培养基配方为:麦芽糖22.5 g/L,大豆蛋白胨9.5 g/L,MgSO 4·7H 2O 0.2 g/L,KH 2PO 4 0.41 g/L,NaCl 0.1 g/L,此时胞外多糖产量为5.05 g/L,相比原始提高了45.95%;REPS对肝癌细胞Hep G2的抑制呈一定的量效关系,培养时间为48 h时IC 50为393.3μg/mL,肝癌细胞抑制率达到56.74%。 展开更多
关键词 根瘤菌 胞外多糖 培养基优化 体外实验 抗肿瘤活性
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富血小板血浆对脂多糖诱导的星形胶质细胞炎性反应的作用
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作者 施琳颖 李艳辉 +4 位作者 郭梓璇 丁慧意 周谋 林放 单桂秋 《中国输血杂志》 CAS 2019年第11期1097-1102,共6页
目的了解富血小板血浆(PRP)对脂多糖诱导(LPS)的星形胶质细胞活化、增殖及炎症相关因子释放的影响。方法无菌条件下取10只出生1-3d SD大鼠乳鼠,处死并取大脑皮质,使用胰酶消化大脑皮质组织,清洗、离心并过滤后得到原代大鼠星形胶质细胞... 目的了解富血小板血浆(PRP)对脂多糖诱导(LPS)的星形胶质细胞活化、增殖及炎症相关因子释放的影响。方法无菌条件下取10只出生1-3d SD大鼠乳鼠,处死并取大脑皮质,使用胰酶消化大脑皮质组织,清洗、离心并过滤后得到原代大鼠星形胶质细胞。使用胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫荧光染色鉴定所得细胞是否为大鼠星形胶质细胞。建立LPS诱导的星形胶质细胞炎症体外模型,分为5组:空白对照(BC)及LPS、LPS+2.5% PRP、LPS+5% PRP以及LPS+10% PRP组,各LPS组均以终浓度为1μg/mL LPS预处理24 h后,加不同浓度PRP处理24 h。提取各组大鼠星形胶质细胞细胞蛋白,以WB法检测大鼠星形胶质细胞GFAP蛋白含量、CCK-8法检测细胞存活率,Griess法检测细胞NO释放量,ELISA法检测细胞炎症因子TNF-α和IL-6表达量。结果1)GFAP(抗体)标记的阳性细胞数>95%,说明所培养的细胞为SD大鼠星形胶质细胞。2)5组GFAP表达水平(灰度值):LPS组(3.49±0.15)较BC组(1.23±0.18)明显增加(P<0.05),而3个LPS+(2.5%、5%、10%)PRP组(2.77±0.32、1.83±0.14、1.78±0.24)较LPS组明显降低(P<0.05)。3)细胞增殖率(%):LPS(组)诱导12、24、48 h(125.47±5.4、144.72±6.5、151.49±7.1)后较BC组(100±6.2、100±5.2、100±8.0)明显上升(P<0.05);而加入2.5%、5%、10%PRP处理12 h(113.04±7.4、94.41±4.2、90.06±2.1)、24 h(108.21±7.9、93.44±7.4、83.59±4.1)和48 h(98.02±9.3、78.22±9.4、70.1±8.4)后较LPS组明显下降(P<0.05)。4)5组细胞上清液中的NO含量(μmol/L):LPS组(13.28±0.58)较BC组(3.01±0.15)明显上升(P<0.05);而加入2.5%、5%、10%PRP(组)处理(9.98±0.72、7.19±0.91、6.82±0.46)后较LPS组明显降低(P<0.05)。5)TNF-α和IL-6表达(ng/L):LPS(组)处理后(TNF-α为4.204±0.04、IL-6为0.483±0.02)较BC组(TNF-α为1.763±0.05、IL-6为0.296±0.02)均明显上升(P<0.05);而加入2.5%、5%、10%PRP(组)处理后(TNF-α为3.234±0.09、3.496±0.05、3.260±0.17,IL-6为0.403±0.01、0.381±0.01、0.386±0.02)� 展开更多
关键词 富血小板血浆 脂多糖 星形胶质细胞 炎症 体外实验
血液灌流吸附材料组织相容性和有效性的体外实验
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作者 郭翔 李培茂 +3 位作者 张艳芳 何坚 林辉 郭美琼 《中华劳动卫生职业病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期848-851,共4页
目的通过体外实验方法探索血液灌流中常用的吸附材料(活性炭和吸附树脂)对血常规和生化指标的影响和对血中毒死蜱及其代谢产物的清除效果。方法采集志愿者外周静脉血分别与活性炭和吸附树脂吸附剂混合孵育,检测其中的血常规和生化指标... 目的通过体外实验方法探索血液灌流中常用的吸附材料(活性炭和吸附树脂)对血常规和生化指标的影响和对血中毒死蜱及其代谢产物的清除效果。方法采集志愿者外周静脉血分别与活性炭和吸附树脂吸附剂混合孵育,检测其中的血常规和生化指标的变化情况,评价吸附材料的组织相容性。采集志愿者外周静脉血加入毒死蜱及其代谢产物后分别与活性炭和吸附树脂吸附剂混合孵育,检测其中毒死蜱及其代谢产物的变化情况,评价吸附材料的有效性。结果活性炭和吸附树脂吸附剂降低血小板、葡萄糖、白蛋白、尿酸、肌酐、三碘甲腺原氨酸、游离三碘甲腺原氨酸的含量(F=3.671、10.564、5.239、7.175、23.673、11.161、10.256,均P<0.05),对其他血常规和生化指标无明显影响。活性炭和吸附树脂吸附剂均可以降低血中毒死蜱及其代谢产物的浓度(F=798.110、1495.212,P<0.01)。结论在体外实验条件下活性炭和吸附树脂对大多数血常规、生化指标无明显影响,均具有良好的组织相容性,活性炭和吸附树脂均可有效清除毒死蜱及其代谢产物。 展开更多
关键词 血液灌流 吸附材料 毒死脾 体外实验
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