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风湿祛痛胶囊对VEGF诱导的人脐静脉内皮细胞功能的影响 被引量:3
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作者 李逸群 何莲花 +5 位作者 刘春芳 王靖霞 孙丛丛 荆宇 苗艳东 林娜 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期119-125,共7页
目的:观察风湿祛痛胶囊对血管内皮细胞生长因子(VEGF)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的增殖、迁移、黏附、侵袭和管腔形成能力的影响,以及对VEGF受体2(VEGFR2)的干预作用。方法:VEGF体外诱导HUVEC,加入风湿祛痛胶囊低、中、高质量浓度(0... 目的:观察风湿祛痛胶囊对血管内皮细胞生长因子(VEGF)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的增殖、迁移、黏附、侵袭和管腔形成能力的影响,以及对VEGF受体2(VEGFR2)的干预作用。方法:VEGF体外诱导HUVEC,加入风湿祛痛胶囊低、中、高质量浓度(0. 02,0. 1,0. 5μg·L-1)作用后,分别采用噻唑蓝(MTT)比色法、转移小室(transwell)法、黏附实验、细胞侵袭及管腔形成实验检测HUVEC的增殖活性、迁移、黏附、侵袭及管腔形成能力,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞中VEGFR2磷酸化水平和蛋白含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测VEGFR2 mRNA表达水平。结果:与正常组比较,VEGF诱导24,48 h后均能显著升高HUVEC的增殖活性(P <0. 01),诱导24 h能明显升高HUVEC的迁移、黏附、侵袭和管腔形成能力(P <0. 01),显著升高HUVEC中VEGFR2磷酸化及蛋白和mRNA表达水平(P <0. 01);与VEGF组比较,风湿祛痛胶囊低、中、高质量浓度组作用48 h均能明显抑制HUVEC增殖活性(P <0. 05,P <0. 01),作用24 h对VEGF诱导的HUVEC迁移、黏附、侵袭和管腔形成能力有明显抑制作用(P <0. 05),也能下调VEGFR2磷酸化及蛋白和mRNA表达水平(P <0. 05)。结论:风湿祛痛胶囊能降低VEGF诱导的HUVEC细胞增殖、迁移、黏附、侵袭及管腔形成能力,这一作用可能与其抑制VEGFR2的磷酸化、蛋白和mRNA表达水平有关。 展开更多
关键词 风湿祛痛胶囊 静脉内皮细胞(HUVEC) 增殖 迁移 侵袭 黏附
氧化型低密度脂蛋白/β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体复合物促进人脐静脉内皮细胞活性氧生成并诱导其凋亡
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作者 陈芋丹 周红 +6 位作者 何超 王婷 张贵婷 张鹏 王韧 吴倩倩 姚雨叶 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期223-229,共7页
目的探讨氧化型低密度脂蛋白/β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体(oxLDL/β2GPI/aβ2GPI)复合物对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡的影响以及ROS活性氧(ROS)在其中的作用。方法分别用β2GPI、 aβ2GPI、β2GPI/aβ2GPI复合物、 oxLDL、 oxLDL/β2... 目的探讨氧化型低密度脂蛋白/β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体(oxLDL/β2GPI/aβ2GPI)复合物对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡的影响以及ROS活性氧(ROS)在其中的作用。方法分别用β2GPI、 aβ2GPI、β2GPI/aβ2GPI复合物、 oxLDL、 oxLDL/β2GPI复合物、 oxLDL/β2GPI/兔IgG(R-IgG)复合物、 oxLDL/β2GPI/aβ2GPI复合物刺激HUVEC,利用Western blot法检测凋亡相关蛋白BAX、 Bcl2和裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)的蛋白水平;异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双标记结合流式细胞术检测细胞凋亡率、二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)标记结合流式细胞术检测细胞ROS水平;CCK-8法检测各处理组对HUVEC活力的影响;采用抗氧化剂罗布麻宁(apocynin)或二苯基碘氯化物(DPI)预处理后观察ROS水平的改变以及对oxLDL/β2GPI/aβ2GPI复合物诱导的HUVEC凋亡的影响。结果 oxLDL/β2GPI/aβ2GPI复合物能显著降低HUVEC的活力,增加细胞BAX、 c-caspase-3蛋白水平,降低Bcl2蛋白水平,促进HUVEC凋亡;oxLDL/β2GPI/aβ2GPI复合物引起细胞ROS水平升高,抗氧化剂处理后,细胞内ROS水平降低,细胞凋亡减少。结论 oxLDL/β2GPI/aβ2GPI复合物可以通过提高ROS来诱导HUVEC凋亡。 展开更多
关键词 氧化型低密度脂蛋白β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体(oxLDL/β2GPI/aβ2GPI)复合物 活性氧(ROS) 静脉内皮细胞(HUVEC) 凋亡
新藤黄酸体外抗肺癌血管生成的作用机制研究
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作者 程卉 王云龙 +2 位作者 苏婧婧 胡容峰 李庆林 《中国中药杂志》 CSCD 北大核心 2018年第21期4311-4316,共6页
为了观察新藤黄酸(gambogenic acid,GNA)对肺癌血管生成的影响及初步的作用机制。该实验以新藤黄酸处理肺腺癌A549细胞的条件培养基培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),建立非直接接触型细胞共培养体系;应用Matrigel胶建立HUVEC的二维培养模型... 为了观察新藤黄酸(gambogenic acid,GNA)对肺癌血管生成的影响及初步的作用机制。该实验以新藤黄酸处理肺腺癌A549细胞的条件培养基培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),建立非直接接触型细胞共培养体系;应用Matrigel胶建立HUVEC的二维培养模型,观察新藤黄酸对血管生成的影响;DAPI染色倒置荧光显微镜下观察新藤黄酸对HUVEC细胞凋亡的影响;Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术分析新藤黄酸对HUVEC凋亡率的影响;Western blot法检测新藤黄酸对HUVEC中PI3K,p-PI3K,Akt,p-Akt,VEGF蛋白表达的影响;采用PTEN-siRNA转染细胞后,RT-PCR法检测PI3K,Akt基因的表达水平。结果表明,新藤黄酸能明显抑制血管生成,其抑制效果与剂量相关;DAPI染色荧光显微镜下可见HUVEC可出现凋亡形态特征;Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术检测结果显示新藤黄酸诱导HUVEC细胞凋亡;Western blot法检测结果表明新藤黄酸下调了p-PI3K,p-Akt蛋白的表达水平,而对PI3K,Akt蛋白表达影响不明显。RT-PCR法检测表明PTEN-siRNA转染入细胞后,能上调PI3K,Akt mRNA基因的表达。体外研究表明新藤黄酸能抑制肺癌血管生成,抑制血管生成的机制可能与PI3K/Akt信号通路有关。 展开更多
关键词 新藤黄酸 静脉内皮细胞(HUVEC) 肺癌A549 血管生成 细胞凋亡
氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对人脐静脉内皮细胞(H-UVEC)孤儿核受体NOR1表达的影响 预览
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作者 张东献 陶俊良 +1 位作者 张伟 满永宏 《吉林医学》 CAS 2017年第7期1243-1245,共3页
目的:探讨氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)孤儿核受体NOR1表达的影响。方法:采用ox-LDL建立人脐静脉内皮细胞损伤模型,将细胞分为空白组、ox-LDL高、中、低剂量组(25μg/ml、50μml、100μg/ml、200μg/ml)... 目的:探讨氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)孤儿核受体NOR1表达的影响。方法:采用ox-LDL建立人脐静脉内皮细胞损伤模型,将细胞分为空白组、ox-LDL高、中、低剂量组(25μg/ml、50μml、100μg/ml、200μg/ml),采用CCK8法检测HUVEC活性,采用实时荧光定量PCR分析NOR1转录水平变化,采用Western-Blot分析NOR1蛋白表达的变化。结果:在HUVEC中加入不同浓度ox-LDL共同培养12h后,CCK8值与ox-LDL呈现明显的剂量反应关系,与空白对照组相比具有显著性差异(P〈0.01)。Ox-LDL能够诱导NOR1 mRNA转录和蛋白表达,NOR1 mRNA峰值出现在ox-LDL共同培养后的3h,NOR1蛋白质最大值出现在ox-LDL共同培养后的6 h。结论:ox-LDL能够损伤HUVEC,并能诱导NOR1的表达上调,其在内皮细胞损伤和动脉粥样硬化炎性反应中的作用有待进一步研究。 展开更多
关键词 氧化低密度脂蛋白(ox-LDL) 静脉内皮细胞(HUVEC) NOR1
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oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物促进人脐静脉内皮细胞黏附分子表达的机制 被引量:5
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作者 张贵婷 周红 +4 位作者 何超 陈芋丹 欧阳航 张鹏 王韧 《细胞与分子免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第11期1472-1478,共7页
目的探讨氧化型低密度脂蛋白/β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体(oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体)复合物对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)表达黏附分子的影响,以及Toll样受体4(TLR4)信号通路在其中发挥的作用。方法用单纯培养基、oxLDL、oxLDL/β... 目的探讨氧化型低密度脂蛋白/β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体(oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体)复合物对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)表达黏附分子的影响,以及Toll样受体4(TLR4)信号通路在其中发挥的作用。方法用单纯培养基、oxLDL、oxLDL/β2GPI复合物、oxLDL/抗β2GPI抗体复合物、oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物、LPS分组刺激HUVEC,收集总RNA和蛋白,利用实时定量PCR和Western blot法检测细胞间黏附分子1(ICAM-1)、血管黏附分子1(VCAM-1)和冯·维勒布兰德因子(v WF)的mRNA和蛋白水平;采用TLR4阻断剂TAK-242(5μmol/L)或p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)阻断剂SB203580(10μmol/L)预处理的方式,探索阻断TLR4通路后,oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物对HUVEC黏附分子表达的影响,通过THP-1细胞黏附实验检测oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物对HUVEC黏附能力的影响。结果与培养基对照组相比,oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物能够显著提高HUVEC的ICAM-1、VCAM-1和v WF表达,并且能够增强HUVEC对THP-1细胞的黏附,TAK-242或SB203580处理能够抑制该过程。结论 oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物能够增强HUVEC的黏附分子表达和对THP-1细胞的黏附,TLR4和p38MAPK与该过程密切相关。 展开更多
关键词 oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物 Toll样受体4(TLR4) 静脉内皮细胞(HUVEC) 黏附分子
人脐静脉内皮细胞通过Wnt/β-catenin信号通路响应低切应力刺激 被引量:1
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作者 生欣 刘月华 +2 位作者 王俊华 李晓琼 束波 《细胞与分子免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第12期1657-1661,共5页
目的研究不同切应力对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中Wnt/β联蛋白(β-catenin)信号通路的影响及其与动脉粥样硬化的关系。方法采用切应力加载装置对HUVEC分别加载(0、1、15)达因/cm2切应力6、12、18、24 h后,采用实时定量PCR检测该... 目的研究不同切应力对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中Wnt/β联蛋白(β-catenin)信号通路的影响及其与动脉粥样硬化的关系。方法采用切应力加载装置对HUVEC分别加载(0、1、15)达因/cm2切应力6、12、18、24 h后,采用实时定量PCR检测该信号通路β-catenin和蓬乱蛋白2(Dvl2)的mRNA水平,免疫荧光技术检测β-catenin、Dvl2的表达和细胞定位。结果低切应力不仅能够促进Dvl2在胞质中的募集,而且能够促进其β-catenin发生核转移。相反,层流切应力能够抑制Dvl2的表达、细胞定位以及β-catenin的核转移。结论 Wnt信号通路参与血管内皮细胞对低切应力的响应。 展开更多
关键词 血流切应力 静脉内皮细胞(HUVEC) WNT/Β-CATENIN信号通路 β联蛋白(β-catenin) 蓬乱蛋白2(Dvl2)
pLXSN-Tum-5致人脐静脉内皮细胞凋亡作用及机制 被引量:1
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作者 唐泽波 温娜 +2 位作者 齐玲 历春 盖晓东 《中国公共卫生》 CSCD 北大核心 2017年第9期1360-1363,共4页
目的 探讨pLXSN-Tum-5病毒颗粒对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的生长抑制和诱导凋亡作用及机制。方法 采用不同浓度的pLXSN-Tum-5病毒颗粒作用HUVEC,利用噻唑蓝法和Hoechst-33342染色法检测细胞生长及其形态变化;RT-PCR和Western blott... 目的 探讨pLXSN-Tum-5病毒颗粒对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的生长抑制和诱导凋亡作用及机制。方法 采用不同浓度的pLXSN-Tum-5病毒颗粒作用HUVEC,利用噻唑蓝法和Hoechst-33342染色法检测细胞生长及其形态变化;RT-PCR和Western blotting方法检测细胞中Bax、Bcl-2、caspase-3 mRNA和蛋白表达变化。结果 与对照组(pLXSN)比较,pLXSN-Tum-5病毒颗粒转染组HUVEC的存活率明显降低,呈剂量效应关系;细胞内可见凋亡小体;对照组HUVEC内Bcl-2和caspase-3 mRNA和蛋白表达分别为(0.721±0.041)、(0.654±0.034)和(0.956±0.032)、(0.356±0.054);与对照组比较,20 μmol/L pLXSN-Tum-5病毒颗粒转染组HUVEC内Bcl-2和caspase-3 mRNA和蛋白水平[分别为(1.134±0.0524)、(1.012±0.0641)和(1.612±0.067)、(0.712±0.0647)]明显上调(P〈0.05)。结论 Tum-5可抑制HUVEC增殖,诱导HUVEC凋亡,其机制可能与上调Bax/Bcl-2和caspase-3表达有关。 展开更多
关键词 肿瘤抑素(tumstatin) Tum-5 细胞凋亡 静脉内皮细胞(HUVEC) 抗血管生成
立普妥对高糖诱导的HUVEC凋亡及PI3K/AKT/eNOS信号通路的影响 预览 被引量:4
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作者 刘志辉 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第3期58-63,共6页
目的探讨立普妥对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的凋亡及对磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/内皮型一氧化氮(e NOS)信号通路的影响。方法实验分为正常组,模型组(33.3 mol/L葡萄糖),立普妥组(33.3 mol/L葡萄糖+0... 目的探讨立普妥对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的凋亡及对磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/内皮型一氧化氮(e NOS)信号通路的影响。方法实验分为正常组,模型组(33.3 mol/L葡萄糖),立普妥组(33.3 mol/L葡萄糖+0.1,1,10μmol/L);MTT法检测各组HUVEC活力;倒置显微镜拍照检测各组HUVEC形态;Annexin V-FITC/PI流式双染法检测各组HUVEC凋亡;Gries法检测各组HUVEC上清NO含量;Western blot分析PI3K/AKT激活状况及e NOS的表达情况。结果与正常组比较,高糖组中HUVEC皱缩,变圆变亮,细胞活力降低,细胞早期凋亡和晚期凋亡率显著提高,NO含量及e NOS、PI3K表达量及AKT磷酸化程度降低,差异均具有显著性(P〈0.05);与模型组比较,1,10μmol/L立普妥组中HUVEC形态恢复,细胞活力上升,PI3K表达量提高,差异均具有显著性(P〈0.05);0.1,1,10μmol/L立普妥组HUVEC凋亡程度下降,NO含量、e NOS表达量提高,AKT磷酸化水平上升,差异均具有显著性(P〈0.05)。结论立普妥可抵抗高糖诱导的HUVEC凋亡,是通过激活PI3K/AKT/e NOS信号通路实现的。 展开更多
关键词 立普妥 静脉内皮细胞(HUVEC) 凋亡 PI3K/AKT/eNOS信号通路
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过氧化氢处理的脐静脉血管内皮细胞miR-125b-5p水平降低但Smad4表达增加 被引量:2
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作者 魏明 甘露 +3 位作者 杨晓梅 姜向阳 刘佳红 陈丽宏 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1088-1093,共6页
目的探讨miR-155、miR-125b-5p、miR-210及其靶基因蛋白在氧化应激血管内皮细胞中的表达和作用。方法分离人脐静脉内皮细胞(HUVEC)并通过免疫荧光染色法检测内皮细胞Ⅷ因子相关抗原、流式细胞术检测CD31的表达进行鉴定;将分离的HUVE... 目的探讨miR-155、miR-125b-5p、miR-210及其靶基因蛋白在氧化应激血管内皮细胞中的表达和作用。方法分离人脐静脉内皮细胞(HUVEC)并通过免疫荧光染色法检测内皮细胞Ⅷ因子相关抗原、流式细胞术检测CD31的表达进行鉴定;将分离的HUVEC进行原代培养,采用子痫前期患者血清和H2O2建立氧化应激的血管内皮细胞的模型,实验分为正常妊娠血清组、子痫前期血清组、0μmol/LH202组、100μmol/LH202组;实时定量PCR检测造模后24h细胞内miR-155、miR-125b-5p、miR-210的水平;Westernbla法检测细胞内miR-125b-5p靶基因Smad4蛋白的水平;免疫荧光染色法检测细胞内Smad4蛋白的表达;异硫氰酸荧光素标记的膜联素V/碘化丙啶(annexinV—FITC/PI)双染色结合流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果与0μmol/LH2O2组相比,100μmol/LH2O2处理的内皮细胞miR-125b-5p显著降低、Smad4蛋白显著增加、细胞凋亡率和坏死率显著增加。与正常孕妇血清组相比,子痫前期血清处理的内皮细胞凋亡率和坏死率显著增加,但miR-125b-5p及Smad4蛋白变化不明显。结论H202处理的HUVECmiR-125b-5p降低,Smad4蛋白增加。 展开更多
关键词 静脉内皮细胞(HUVEC) 氧化应激 miR-125b-5p SMAD4
组蛋白去甲基化酶含Jumonji结构域蛋白3(JMJD3)抑制人脐静脉内皮细胞增殖及侵袭和迁移 被引量:1
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作者 李玉芳 胡萍萍 +5 位作者 陈旭 席文锦 王微 霍毅 杨安钢 王涛 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期493-496,500共5页
目的分析组蛋白特异性去甲基化酶含Jumonji结构域蛋白3(JMJD3)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的细胞周期、凋亡和迁移的影响。方法合成JMJD3的小干扰RNA(siRNA)、构建JMJD3过表达载体;阴性对照siRNA、si JMJD3或质粒p MSCV-PIG、p MSC... 目的分析组蛋白特异性去甲基化酶含Jumonji结构域蛋白3(JMJD3)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的细胞周期、凋亡和迁移的影响。方法合成JMJD3的小干扰RNA(siRNA)、构建JMJD3过表达载体;阴性对照siRNA、si JMJD3或质粒p MSCV-PIG、p MSCV-JMJD3转染HUVEC 48 h后,通过荧光实时定量PCR检测JMJD3 mRNA的水平;流式细胞术检测各转染组HUVEC的细胞周期与凋亡的变化;TranswellTM实验和划痕实验检测转染后的HUVEC侵袭和迁移能力的变化。结果 HUVEC转染si JMJD3 48 h后JMJD3的表达水平下降,S期细胞增加、而G1期细胞明显减少。下调JMJD3后HUVEC的增殖能力增强,细胞凋亡减少,细胞侵袭、迁移能力增强。而在HUVEC转染JMJD3过表达质粒MSCV-JMJD3 48 h后,细胞内JMJD3水平增加,S期细胞显著减少,而G1期细胞则明显增加,同时HUVEC的增殖能力受到抑制,细胞凋亡增多,细胞侵袭和迁移能力减弱。结论 JMJD3具有抑制HUVEC增殖、侵袭和迁移,促进细胞凋亡的作用。 展开更多
关键词 含Jumonji结构域蛋白3(JMJD3) 静脉内皮细胞(HUVEC) 细胞增殖 细胞凋亡 侵袭 迁移
LncRNA MALAT1对人脐静脉内皮细胞HUVEC增殖与凋亡影响 被引量:1
11
作者 陈海英 孟涛 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1340-1342,共3页
目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)肺腺癌相关转录本1(MALAT1)对人脐静脉内皮细胞HUVEC增殖和凋亡的影响。方法 构建MALAT1-RNAi质粒载体,应用脂质体法转染人脐静脉内皮细胞HUVEC细胞;设空白细胞对照组、阴性对照组和MALAT1-RNAi转染... 目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)肺腺癌相关转录本1(MALAT1)对人脐静脉内皮细胞HUVEC增殖和凋亡的影响。方法 构建MALAT1-RNAi质粒载体,应用脂质体法转染人脐静脉内皮细胞HUVEC细胞;设空白细胞对照组、阴性对照组和MALAT1-RNAi转染组,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测各实验组细胞中MALAT1的表达水平;CCK8法检测细胞的增殖情况,流式细胞术Annexin V-FITC/PI双染检测各组细胞的凋亡能力。结果 qRT-PCR检测结果显示,MALAT1-RNAi转染组人脐静脉内皮细胞HUVEC中MALAT1的相对表达量为(0.051±0.03),均低于空白细胞对照组和阴性对照组(均P〈0.01);CCK8检测结果显示,MALAT1-RNAi转染组培养48和72h的吸光度(A)值分别为(0.072±0.087)和(1.115±0.077),均低于空白细胞对照组和阴性对照组(均P〈0.05);AnnexinⅤ-FITC/PI双染流式细胞术检测结果显示,MALAT1-RNAi转染组HUVEC细胞凋亡率为(14.08±1.05)%,均高于空白细胞对照组和阴性对照组(均P〈0.01)。结论 MALAT1-RNAi可抑制人脐静脉内皮细胞HUVEC的增殖能力,并促进其凋亡。 展开更多
关键词 长链非编码RNA(lncRNA) 肺腺癌相关转录本1(MALAT1) 静脉内皮细胞(HUVEC) 增殖 凋亡
多器官功能障碍综合征患者血清对内皮细胞氧化损伤的影响及还原型谷胱甘肽的保护作用 被引量:10
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作者 张哲英 张蓓 +2 位作者 秦静 甄玲玲 马莉 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期38-43,共6页
目的探讨多器官功能障碍综合征(multiple organ dysfunction syndrome,MODS)患者血清对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)氧化损伤的影响及外源性还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)的保... 目的探讨多器官功能障碍综合征(multiple organ dysfunction syndrome,MODS)患者血清对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)氧化损伤的影响及外源性还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)的保护作用。方法选择MODS患者20例,用其血清对HUVEC进行干预,建立体外细胞损伤模型,同时以健康血清组和胎牛血清组作对照,将细胞分为正常对照组(A组)、健康血清组(B组)、MODS血清损伤组(MODS患者m清浓度分别为C1组5%、C2组10%、C3组20%)和GSH干预组(10%MODS患者血清细胞培养基中GSH终浓度分别为D1组0.064mmol/L、D2组0.32mmoL/L、D3组1.6mmol/L、D4组8.0mmol,/L、D5组40mmol/L)。采用MTTr法检测各组细胞生存率;荧光倒置显微镜下观察B组和C2组HUVEC形态学变化;分别检测B组、C2组和D3组药物干预24、48、72h后细胞上清液超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—Px)活力和总抗氧化能力(T—AOC)水平,同时用流式细胞仪检测细胞内活性氧簇(ROS)水平。结果①B组细胞生存率与A组比较差异无统计学意义(P〉0.05),C1、C2、C3组细胞生存率较B组明显下降(P〈0.05),D2、D3、D4组细胞生存率较C2组明显升高(P〈0.05);②C2组HUVEC显微镜下可见损伤性改变,细胞变大变圆、界限模糊、胞体碎裂、部分细胞脱落;③C2组细胞培养上清液SOD、CAT、GSH—Px活力及T—AOC水平较B组下降,而D3组各时间点较C2组均明显升高,其中以药物干预72h后升高更明显;④C2组细胞内ROS水平较B组明显升高,D3组各时间点ROS水平较C2组明显降低,其中以药物干预72h后下降最明显。结论MODS患者血清可造成内皮细胞损伤,GSH可通过提高SOD、CAT、GSH—Px活力及T—AOC水平,降低细胞内ROS水平,从而发挥内皮细胞保护作用,减轻血管内皮细� 展开更多
关键词 多器官功能障碍综合征(MODS) 氧化应激 还原型谷胱甘肽(GSH) 静脉内皮细胞(HUVEC)
子痫前期患者血浆对HUVEC凋亡和增殖的影响及其与LPA受体的关系 预览
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作者 倪茗 张婧 《海南医学院学报》 CAS 2014年第1期28-31,共4页
目的:探讨子痫前期(pre-eclampsia,PE)患者血浆对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡和增殖的影响,并进一步分析其与溶血磷脂酸(lyso-phosphotidic acid,LPA)受体的关系,为其临床研究提供可参考依据。方法:收集2012年1月~2013年6月7... 目的:探讨子痫前期(pre-eclampsia,PE)患者血浆对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡和增殖的影响,并进一步分析其与溶血磷脂酸(lyso-phosphotidic acid,LPA)受体的关系,为其临床研究提供可参考依据。方法:收集2012年1月~2013年6月70例我院确诊的PE孕妇,其中轻度PE 38例,重度PE 32例,同时随机抽取30例正常孕妇作为对照组。所有孕妇空腹抽取静脉血,分别配成不同成分培养液对健康产妇分娩后的HUVEC进行培养,应用MTT比色法检测HUVEC的凋亡和增殖,采用免疫组化检测LPA受体Edg4、Edg7的表达。结果:重度PE组细胞增殖抑制率(IR)及LPA水平均高于轻度PE组及对照组,轻度PE组IR及LPA水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P〈0.05)。PE孕妇HUVEC由长梭形变为圆(椭圆)形,细胞间隙增大,且细胞排列疏松,而重度PE组上述情况更明显。重度PE组Edg4阳性例数、mRNA表达及Edg7阳性例数、mRNA表达均高于轻度PE组及对照组,轻度PE组Edg4阳性例数、mRNA表达及Edg7阳性例数、mRNA表达均高于对照组,差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论:内皮细胞损伤是PE发生的原因之一,且血浆LPA水平升高及其受体Edg4、Edg7表达增加可能参与了PE孕妇血管内皮细胞损伤的发生、发展过程。 展开更多
关键词 子痫前期(PE) 静脉内皮细胞(HUVEC) 溶血磷脂酸(LPA) 凋亡 增殖
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RBP4诱导HUVEC炎症反应作用机制的研究 预览 被引量:2
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作者 付鑫 张彦红 邹慕蔚 《中国医药导刊》 2013年第3期524-525,共2页
目的:探讨血清视黄醇结合蛋白4(RBP4)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)炎症的作用机制。方法:采用MTT还原法检测细胞活性,通过DCFH-DA检测活性氧的生成,Western blotting分析相关蛋白的表达,凝胶滞留法(EMSA)分析NF-kB的DNA结合活... 目的:探讨血清视黄醇结合蛋白4(RBP4)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)炎症的作用机制。方法:采用MTT还原法检测细胞活性,通过DCFH-DA检测活性氧的生成,Western blotting分析相关蛋白的表达,凝胶滞留法(EMSA)分析NF-kB的DNA结合活性。结果:RBP4处理后,MTT检测发现人脐静脉内皮细胞存活率显著低于对照组,流式细胞仪的结果表明活性氧的水平也显著升高。结论:RBP4可诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)毒性及炎症反应。 展开更多
关键词 血清视黄醇结合蛋白4(RBP4) 静脉内皮细胞(HUVEC) 作用机制
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桔梗中皂苷类组分物质抑制血管生成作用实验研究 预览 被引量:3
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作者 袁野 于红艳 +3 位作者 孙婷婷 赵凤丽 刘墨祥 李吉萍 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期1068-1070,共3页
目的研究桔梗中皂苷类组分物质对血管生成的影响。方法采用人脐静脉内皮细胞(HUVEC)和鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)模型来研究桔梗中皂苷类组分物质抑制血管生成作用。结果桔梗中皂苷类组分物质25、50、100μg/mL剂量组对HUVEC增殖和CAM血... 目的研究桔梗中皂苷类组分物质对血管生成的影响。方法采用人脐静脉内皮细胞(HUVEC)和鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)模型来研究桔梗中皂苷类组分物质抑制血管生成作用。结果桔梗中皂苷类组分物质25、50、100μg/mL剂量组对HUVEC增殖和CAM血管生成均有抑制作用。与模型组比较,对HUVEC增殖的抑制率分别为6.31%、15.45%、31.12%;对CAM的抑制率分别为7.99%、13.49%、26.08%。结论桔梗中皂苷类组分物质具有良好的血管生成抑制作用,并呈剂量依赖性关系。 展开更多
关键词 桔梗中皂苷类组分物质 静脉内皮细胞(HUVEC) 鸡胚绒毛尿囊膜(CAM) 血管生成
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人工麝香对HUVEC增殖及功能的影响 预览 被引量:1
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作者 李海涛 穆融融 《现代中药研究与实践》 CAS 2012年第5期34-37,共4页
目的观察人工麝香对体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖及功能的影响。方法体外培养HUVEC,采用MTT比色法测定不同浓度人工麝香溶液对HUVEC增殖的作用;WesternBlot检测HUVEC中p-ERK和p-P38蛋白的表达水平;RT-PCR法测定HUVEC中eNOS... 目的观察人工麝香对体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖及功能的影响。方法体外培养HUVEC,采用MTT比色法测定不同浓度人工麝香溶液对HUVEC增殖的作用;WesternBlot检测HUVEC中p-ERK和p-P38蛋白的表达水平;RT-PCR法测定HUVEC中eNOS、VEGFR1和VEGFR2 mRNA表达水平。结果 0.3、1μg/ml的人工麝香溶液具有促进HUVEC增殖的效应,其中1μg/ml作用显著(P〈0.01);人工麝香可浓度依赖性地促进ERK和P38的磷酸化,且效应强于对照药硝酸甘油组;人工麝香溶液亦可浓度依赖性地促进HUVEC中eNOS和VEGFR2的mRNA表达,但对VEGFR1的mRNA表达没有影响。结论人工麝香可通过促进HUVEC增殖,一定程度上代偿性地起到抗心肌缺血的作用。 展开更多
关键词 静脉内皮细胞(HUVEC) 工麝香 增殖 血管内皮生长因子
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改良内皮抑素对人脐静脉内皮细胞抑制作用的实验研究
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作者 肖楠 田霈 +3 位作者 罗鑫 齐东华 倪双 刘平 《现代生物医学进展》 CAS 2012年第14期 2632-2637,2641,共7页
目的:探讨改良内皮抑素(RGDRGD-ES)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的抑制作用,摸索RGDRGD-ES对HUVEC细胞抑制作用的相对最佳作用浓度和时间。方法:通过快速定点诱变PCR方法获得含有RGDRGD膜序的改良人内皮抑素基因,并构建其原核表达... 目的:探讨改良内皮抑素(RGDRGD-ES)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的抑制作用,摸索RGDRGD-ES对HUVEC细胞抑制作用的相对最佳作用浓度和时间。方法:通过快速定点诱变PCR方法获得含有RGDRGD膜序的改良人内皮抑素基因,并构建其原核表达载体。表达、纯化改良内皮抑素(RGDRGD-ES),运用MTT法和流式细胞仪检测RGDRGD-ES对人脐静脉内皮细胞的抑制作用。结果:1.诱变了ES基因,获得了改良的RGDRGD-ES基因,并成功构建其原核表达载体。2.获得了RGDRGD-ES蛋白。3.改良的RGDRGD-ES能够有效抑制人脐静脉内皮细胞的生长(P〈0.01);抑制率随着药物浓度(10μg/ml、20μg/ml、30μg/ml)的增加和作用时间(24 h、48 h、72 h)的延长而逐渐增加,具有浓度和时间依赖性(P〈0.01);而30μg/ml与40μg/ml、50μg/ml组间、72 h与96 h组间无明显差异(P〉0.05)。4.细胞凋亡率(作用24 h)具有药物浓度(10μg/ml、20μg/ml、30μg/ml)依赖性(P〈0.01),30μg/ml与40μg/ml、50μg/ml组间凋亡率无明显差异(P〉0.05)。结论:成功构建了改良RGDRGD-ES基因的原核表达载体,RGDRGD-ES蛋白在30μg/ml浓度作用72小时条件下能够有效抑制人脐静脉内皮细胞的生长,改良内皮抑素(RGDRGD-ES)对HUVEC的抑制作用较ES明显提高。 展开更多
关键词 改良内皮抑素(RGDRGD-ES) 内皮抑素(ES) 静脉内皮细胞(HUVEC) 角膜新生血管(CNV)
蒜氨酸对肿瘤坏死因子诱导的炎症抑制作用研究 预览
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作者 高甜 柴惠 沃兴德 《求医问药:下半月刊》 2012年第2期527-528,共2页
目的:本研究目的在于探讨在人脐静脉内皮细胞和大鼠胸大动脉平滑肌细胞中,蒜氨酸对肿瘤坏死因子-α诱导引起的炎症是否具有抑制作用。方法:将细胞分成六组:对照组(不经任何药物处理)、肿瘤坏死因子-α组(1μg/L或10μg/L)、蒜氨... 目的:本研究目的在于探讨在人脐静脉内皮细胞和大鼠胸大动脉平滑肌细胞中,蒜氨酸对肿瘤坏死因子-α诱导引起的炎症是否具有抑制作用。方法:将细胞分成六组:对照组(不经任何药物处理)、肿瘤坏死因子-α组(1μg/L或10μg/L)、蒜氨酸组(10mg/L)、肿瘤坏死因子-α(1μg/L或10μg/L)+蒜氨酸(5mg/L、10mg/L、30mg/L)组,分别培养16h。提取mRNA,反转录成cDNA,用普通PCR,荧光定量PCR测定ICAM-1mRNA的表达水平;用虎红染色法检测人单核细胞对人脐静脉内皮细胞单分子层的粘附性;用MTT增殖和细胞迁移实验分别检测蒜氨酸对平滑肌细胞的增殖和迁移作用的影响。结果:蒜氨酸预处理能有效阻止肿瘤坏死因子-α诱导的ICAM-1表达量的增高;并可以减弱由肿瘤坏死因子-α导致的人单核细胞对人脐静脉内皮细胞的粘附性增加;蒜氨酸还能抑制由肿瘤坏死因子-α诱导的平滑肌细胞的迁移作用和增殖作用。结论:蒜氨酸能够有效地抑制炎症反应的发生,以此推断其可能在抗动脉粥样硬化方面存在潜在的治疗作用。 展开更多
关键词 蒜氨酸(alliin) 肿瘤坏死因子(TNF-α) 静脉内皮细胞(HUVEC) 细胞间粘附分子(ICAM-1) 炎症
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原子力显微镜研究高乌甲素对人脐静脉内皮细胞形态的影响 预览 被引量:1
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作者 邢晓波 盛良翮 +2 位作者 尹洪民 金花 蔡继业 《激光生物学报》 CAS CSCD 2011年第4期448-454,共7页
在纳米量级上探测药物对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的抑制作用对于揭示药物的功效及肿瘤的有效治疗十分重要。通过高分辨率的原子力显微镜研究了不同浓度的高乌甲素培养的HUVEC的形貌特征,包括整个细胞的形貌和超微结构的表面膜的差异... 在纳米量级上探测药物对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的抑制作用对于揭示药物的功效及肿瘤的有效治疗十分重要。通过高分辨率的原子力显微镜研究了不同浓度的高乌甲素培养的HUVEC的形貌特征,包括整个细胞的形貌和超微结构的表面膜的差异。从形貌学方面探讨了高乌甲素对HUVEC的抑制作用,可为临床应用高乌甲素提供依据。结果表明,我们可以通过HUVEC的形貌参数(例如细胞的峰谷差、平均表面粗糙度)来判断药物的功效,以及评估治疗效果。 展开更多
关键词 原子力显微镜 静脉内皮细胞(HUVEC) 高乌甲素
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阿魏酸钠对氧化低密度脂蛋白拮抗作用 被引量:3
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作者 李丽 张东献 +1 位作者 阮岚 毕勇毅 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期689-691,共3页
目的在体外培养条件下,探讨阿魏酸钠(SF)拮抗氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)的作用机制。方法在体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中分别和同时加入SF和Ox-LDL,采用基因芯片技术分析内皮细胞中白细胞介素-1β(IL-1β)的基因表达改变;... 目的在体外培养条件下,探讨阿魏酸钠(SF)拮抗氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)的作用机制。方法在体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中分别和同时加入SF和Ox-LDL,采用基因芯片技术分析内皮细胞中白细胞介素-1β(IL-1β)的基因表达改变;用实时PCR技术(RT-PCR)检测IL-1βmRNA表达,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测IL-1β蛋白表达。结果基因芯片检测结果显示,HUVEC受Ox-LDL诱导后,IL-1β基因表达上调,比空白对照组高2.4倍;而采用SF+Ox-LDL处理后,IL-1β基因表达下调,是Ox-LDL组的2.6倍。RT-PCR与ELISA结果显示,Ox-LDL组与空白对照组比较,IL-1βmRNA及蛋白表达均明显增高;SF+Ox-LDL组与空白对照组比较,IL-1βmRNA表达差异无统计学意义;蛋白表达则明显降低。结论结论 Ox-LDL可诱导内皮细胞的IL-1β表达明显增强,阿魏酸钠能够抑制Ox-LDL活性,下调IL-1β的mRNA表达,可减少IL-1β对血管内皮细胞的损害。 展开更多
关键词 阿魏酸钠(SF) 氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL) 静脉内皮细胞(HUVEC) 细胞介素-1β(IL-1β) 动脉粥样硬化(AS)
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