期刊文献+
共找到228篇文章
< 1 2 12 >
每页显示 20 50 100
日粮中添加乳杆菌属培养物对肉鸡生长性能、小肠消化酶以及肠道与粪便中细菌酶活性的影响
1
作者 王恒月 《饲料研究》 CAS 北大核心 2019年第2期31-34,共4页
试验旨在了解嗜酸乳杆菌培养物和12株乳杆菌菌株混合培养物对肉仔鸡生长性能、小肠内容物中淀粉水解酶、蛋白水解酶、脂肪酶活性以及对在粪便和肠内容物中的β-葡萄糖醛酸苷酶和β-葡萄糖苷酶活性的影响。试验选择180只1日龄健康肉仔鸡... 试验旨在了解嗜酸乳杆菌培养物和12株乳杆菌菌株混合培养物对肉仔鸡生长性能、小肠内容物中淀粉水解酶、蛋白水解酶、脂肪酶活性以及对在粪便和肠内容物中的β-葡萄糖醛酸苷酶和β-葡萄糖苷酶活性的影响。试验选择180只1日龄健康肉仔鸡,随机分为3组,即基础日粮组(对照组)、基础日粮+1%嗜酸乳杆菌培养物组、基础日粮+1%12株乳杆菌菌株混合培养物组,试验期为40 d。结果表明,与对照组比较,嗜酸乳杆菌培养物组或乳杆菌混合菌株培养物组均能显著提高肉鸡末重(P<0.05),降低料肉比(P<0.05),提高淀粉酶活性(P<0.05),降低肠道β-葡萄糖醛酸苷酶活性和粪便β-葡萄糖苷酶活性(P<0.05);嗜酸乳杆菌培养物物组对小肠内蛋白质水解酶和脂肪水解酶的活性没有影响(P>0.05)。 展开更多
关键词 乳杆菌 消化 Β-葡萄糖醛酸 Β-葡萄糖 活性
离子液[Bmim]Br中β-葡萄糖醛酸苷酶催化甘草酸选择性水解 预览
2
作者 陈桂玲 张玉然 +2 位作者 张晓 朱友双 赵全义 《生物学通报》 2019年第5期52-55,共4页
甘草酸可被β-葡萄糖醛酸苷酶选择性地催化水解为单葡萄糖醛酸甘草次酸(GAMG),GAMG具有较甘草酸更显著的抗癌、抗炎等药理作用.对5种不同溶剂体系中β-葡萄糖醛酸苷酶催化甘草酸的选择性水解反应进行考察,并对离子液的浓度、底物浓度、... 甘草酸可被β-葡萄糖醛酸苷酶选择性地催化水解为单葡萄糖醛酸甘草次酸(GAMG),GAMG具有较甘草酸更显著的抗癌、抗炎等药理作用.对5种不同溶剂体系中β-葡萄糖醛酸苷酶催化甘草酸的选择性水解反应进行考察,并对离子液的浓度、底物浓度、反应温度和反应时间对产率的影响进行探讨,旨在提高GAMG的产率,更好地应用于医药及工业生产.结果 表明,在离子液([Bmim]Br)体系中,甘草酸水解生成GAMG的产率高达99.6%,比常用磷酸缓冲液体系中高10%,且副产物少.在离子液浓度为0.01 mol/L~0.06 mol/L范围内,GAMG产率与离子液浓度呈线性关系,当[Bmim]Br浓度为0.06 mol/L,反应温度为45℃时,反应5h,甘草酸可被完全转化生成GAMG.离子液[Bmim] Br可提高β-葡萄糖醛酸苷酶的稳定性,可作为友好溶剂应用于甘草酸的选择性催化水解制备GAMG. 展开更多
关键词 离子液 Β-葡萄糖醛酸 甘草酸 GAMG
在线阅读 下载PDF
黄芩素在正常及早期肝纤维化模型小鼠体外肝、肠微粒体中Ⅱ相代谢差异 被引量:1
3
作者 李雪 李力 +1 位作者 黎赛 刘湘 《中南药学》 CAS 2018年第1期49-54,共6页
目的考察肝纤维化模型小鼠肝、肠微粒体对黄芩素体外葡萄糖醛酸化代谢影响和酶促反应动力学研究。方法小鼠每周3次灌胃20%CCl4油溶液,持续6周,检测血清肝功能指标ALT和AST,ELISA试剂盒检测血清中HA,天狼猩红染色和免疫组化染色α-SMA评... 目的考察肝纤维化模型小鼠肝、肠微粒体对黄芩素体外葡萄糖醛酸化代谢影响和酶促反应动力学研究。方法小鼠每周3次灌胃20%CCl4油溶液,持续6周,检测血清肝功能指标ALT和AST,ELISA试剂盒检测血清中HA,天狼猩红染色和免疫组化染色α-SMA评估肝纤维化模型。检测正常和肝纤维小鼠肠道内容物β-葡萄糖醛酸苷酶活性,同时建立小鼠肝、肠微粒体孵育体系对黄芩素葡萄糖醛酸化反应的酶促反应动力学进行研究,评估其代谢动力学类型,并对比在正常和肝纤维化模型中最大反应速率(Vmax)和米氏常数(Km)。结果经过6周CCl4诱导后,模型组的血清、病理和免疫组化检测结果显示肝纤维化模型复制成功。体外实验结果显示,黄芩素在小鼠肝微粒体中的代谢方式符合米氏方程,而在肠微粒体中属于底物抑制型。与正常组相比,黄芩素在肝纤维化后的肝微粒体中的代谢速率要显著提高(P〈0.01),而在肠微粒体中则相反,但差异无统计学意义,同时发现肝纤维化后肠道菌群中的β-葡萄糖醛酸苷酶活性要显著高于正常组(P〈0.01)。结论肝纤维化状态对葡萄糖醛酸苷转移酶等Ⅱ相代谢酶的活性带来显著的改变,这值得我们关注肝纤维化疾病状态下药物的代谢特征和临床疗效,促进安全合理用药。 展开更多
关键词 肝纤维化 黄芩素 葡萄糖醛酸转移 促反应动力学 Β-葡萄糖醛酸
酶解法结合HPLC测定鸢尾苷在小鼠体内的组织分布
4
作者 华晶 李雪 +2 位作者 唐仕炜 王凌 蒋学华 《华西药学杂志》 CAS CSCD 2018年第1期66-69,共4页
目的 采用酶解与HPLC相结合的方法测定灌胃鸢尾苷后,小鼠组织及血浆中的鸢尾黄素及其Ⅱ相代谢物葡萄糖醛酸结合物的浓度,并研究其组织分布。方法 生物样品经β-葡萄糖醛酸苷酶水解,用乙酸乙酯萃取后进样分析;色谱柱为Shimadzu VP-ODS(2... 目的 采用酶解与HPLC相结合的方法测定灌胃鸢尾苷后,小鼠组织及血浆中的鸢尾黄素及其Ⅱ相代谢物葡萄糖醛酸结合物的浓度,并研究其组织分布。方法 生物样品经β-葡萄糖醛酸苷酶水解,用乙酸乙酯萃取后进样分析;色谱柱为Shimadzu VP-ODS(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈-2%乙酸溶液(44∶10∶46),流速1.0 m L·min~(-1),柱温25℃,检测波长266 nm。予小鼠灌胃鸢尾苷,检测酶解前、后组织中的药物浓度。结果 鸢尾黄素在组织匀浆样品中,在标准曲线浓度范围内的线性关系良好,精密度及准确度均符合生物样品的测定要求。结论 所用的酶解与HPLC相结合的分析方法,适用于研究鸢尾黄素在小鼠体内的组织分布,给予小鼠灌胃鸢尾苷后,游离态和结合态鸢尾黄素在各组织中均有分布,且AUC0→∞大小的顺序为肾〉肝〉肺≈脾〉心。 展开更多
关键词 鸢尾 鸢尾黄素 Ⅱ相代谢物 Β-葡萄糖醛酸 解法 组织分布 高效液相色谱法 内标法
新型阴道分泌物五联检及常规镜检的临床价值分析 预览
5
作者 刘浏 柴蓓蓓 +2 位作者 王惠莹 罗加欢 张若鹏 《云南医药》 CAS 2018年第6期515-517,共3页
阴道分泌物(俗称白带)是女性生殖系统分泌的液体,主要由阴道粘膜、宫颈腺体及子宫内膜的分泌物混合而成.阴道分泌物可以评估女性生殖系统的健康状况.常规的白带镜检容易发生漏诊现象,影响检验的准确度.而国外妇产科学家KUAFMAN曾明确... 阴道分泌物(俗称白带)是女性生殖系统分泌的液体,主要由阴道粘膜、宫颈腺体及子宫内膜的分泌物混合而成.阴道分泌物可以评估女性生殖系统的健康状况.常规的白带镜检容易发生漏诊现象,影响检验的准确度.而国外妇产科学家KUAFMAN曾明确指出:“阴道炎所面临的问题不是难以治疗,而是医生常常急于治疗而没有首先确定病原微生物,这是导致治疗失败的最常见原因”.原阴道分泌物五联检多为检测“pH、过氧化氢、白细胞酯酶、唾液酸苷酶、脯氨酸苷酶、乙酰氨基葡萄糖苷酶”对标本进行分析,而本研究通过对比分析二代五联检试剂盒与常规湿片镜检检测白带的结果,从而为妇科疾病的诊断提供更精确的方法. 展开更多
关键词 阴道分泌物常规 过氧化氢 唾液酸 白细胞酯 Β-葡萄糖醛酸 凝固
在线阅读 下载PDF
柴胡疏肝散对ERCP术后胆总管结石患者胆汁成分的影响
6
作者 陈建林 陈锦锋 +1 位作者 韩宇斌 邓健敏 《新中医》 CAS 2018年第1期98-100,共3页
目的:观察柴胡疏肝散对经内镜逆行性胰胆管造影术(ERCP)后胆总管结石患者胆汁成分的影响。方法:选择肝胆气郁型胆总管结石患者,共60例,随机分为2组各30例。对照组给予ERCP取石治疗,治疗组予ERCP取石联合柴胡疏肝散中药治疗。留取ERC... 目的:观察柴胡疏肝散对经内镜逆行性胰胆管造影术(ERCP)后胆总管结石患者胆汁成分的影响。方法:选择肝胆气郁型胆总管结石患者,共60例,随机分为2组各30例。对照组给予ERCP取石治疗,治疗组予ERCP取石联合柴胡疏肝散中药治疗。留取ERCP术中及术后第3天、第7天鼻胆管引流出的胆汁,检测β-葡萄糖醛酸苷酶(β-Gase)活性、总胆汁酸(TBA)、总胆红素(TBil)、直接胆红素(DBil)和钙离子(Ca~(2+))水平的变化。结果:术后第3天、第7天胆汁成分与术中比较,2组TBA含量均升高,β-Gase、TBil、DBil和Ca~(2+)水平均降低,差异均有统计学意义(P〈0.01);术后第7天,治疗组TBA较对照组明显升高,β-Gase、TBil、DBil和Ca~(2+)水平较对照组均明显降低,差异均有统计学意义(P〈0.01)。结论:柴胡疏肝散可改善ERCP术后胆总管结石患者胆汁成分,从而有效预防结石复发。 展开更多
关键词 胆总管结石 经内镜逆行性胰胆管造影术 肝胆气郁 柴胡疏肝散 胆汁 Β-葡萄糖醛酸 直接胆红素 钙离子
肠道菌β-葡萄糖醛酸苷酶抑制剂的研究进展
7
作者 翁仔淼 吕珊珊 +2 位作者 葛广波 王平 侯洁 《药学进展》 CAS 2018年第3期177-186,共10页
β-葡萄糖醛酸苷酶(GUS)是肠道菌群产生的一类重要的水解酶,其可催化多种药物及内源研究显示肠道菌GUS可影响多种药物的药代动力学行为和效应的发挥。值得注意的是,某些药物(如伊立替康、吲哚美辛等)的葡萄糖醛酸化产物可被肠道菌... β-葡萄糖醛酸苷酶(GUS)是肠道菌群产生的一类重要的水解酶,其可催化多种药物及内源研究显示肠道菌GUS可影响多种药物的药代动力学行为和效应的发挥。值得注意的是,某些药物(如伊立替康、吲哚美辛等)的葡萄糖醛酸化产物可被肠道菌GUS快速水解为具有强毒性的苷元,后者在肠道局部累积可引发严重的胃肠不良反应。因此,肠道菌GUS已成为减缓伊立替康等药物胃肠不良反应的重要靶标之一,而开发安全、强效的肠道菌GUS抑制剂对于缓解临床药物引发的致死性腹泻具有重要意义。综述肠道菌GUS的结构及功能、GUS抑制剂的筛选方法及肠道菌GUS抑制剂的研究进展。 展开更多
关键词 Β-葡萄糖醛酸 抑制剂 肠道菌 药物诱导性腹泻
需氧菌性阴道炎、细菌性阴道病五项联合检测在阴道微生态评价中的应用价值 预览 被引量:4
8
作者 沈甍 《蚌埠医学院学报》 CAS 2017年第4期502-504,共3页
目的:探讨需氧菌性阴道炎(AV)、细菌性阴道病(BV)五项联合检测在阴道微生态评价中的应用价值.方法:选取2012年12月至2015年1月接受健康体检的女性110例,采用传统方法对受检女性的阴道分泌物进行阴道pH、革兰染色及清洁度检查,并... 目的:探讨需氧菌性阴道炎(AV)、细菌性阴道病(BV)五项联合检测在阴道微生态评价中的应用价值.方法:选取2012年12月至2015年1月接受健康体检的女性110例,采用传统方法对受检女性的阴道分泌物进行阴道pH、革兰染色及清洁度检查,并作阴道菌群分析;同时采用AV、BV五项联合检测进行测定.结果:110例受检者中传统方法检测阴道菌群正常42例(38.18%),阴道菌群异常68例(61.82%);阴道菌群异常的预成酶阳性率(除凝固酶外)均高于阴道菌群正常的预成酶阳性率(P〈0.05-P〈0.01).结论:AV、BV五项联合检测方法安全可靠,操作简单,其检测灵敏度高,结果较为准确,可作为临床快速筛查方法,更有效地评价阴道微生态情况. 展开更多
关键词 阴道炎 白细胞酯 唾液酸 过氧化氢 Β-葡萄糖醛酸 凝固
在线阅读 下载PDF
β-葡萄糖醛酸苷酶的重组表达及对黄芩苷的生物转化
9
作者 周琪 窦同意 +4 位作者 丁乐乐 曲明佳 翁仔淼 吴大畅 侯洁 《大连医科大学学报》 CAS 2017年第2期110-115,共6页
目的构建表达β-葡萄糖醛酸苷酶(β-glucuronidase,GUS)的重组菌株,得到高纯度β-葡萄糖醛酸酶,进而对黄芩苷进行生物转化获得黄芩素。方法以E.coli K12基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增GUS基因,经酶切后连接到表达载体p ET-28a中,获... 目的构建表达β-葡萄糖醛酸苷酶(β-glucuronidase,GUS)的重组菌株,得到高纯度β-葡萄糖醛酸酶,进而对黄芩苷进行生物转化获得黄芩素。方法以E.coli K12基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增GUS基因,经酶切后连接到表达载体p ET-28a中,获得重组表达载体p ET28a-GUS,将重组载体转化到感受态细胞BL21(DE3)中,对所得基因工程菌进行培养条件和表达条件的优化;后经分离纯化后得到高纯度β-葡萄糖醛酸酶。以黄芩苷为底物进行酶法转化生产黄芩素,并对反应条件进行优化。结果经测序,扩增的重组质粒目的基因序列与数据库中GUS基因序列一致。经IPTG(isopropy-β-D-thiogalactoside)诱导表达后,SDS-PAGE分析获得分子质量70 k Da的单一蛋白条带,工程菌最适培养条件为:37℃、pH7.2、IPTG浓度0.6μmol/L、诱导时间12 h。经过离心破碎、亲和层析、冻干后得到高纯度β-葡萄糖醛酸酶冻干粉。在该酶催化转化下,黄芩苷可转化为黄芩素,在40℃,pH 6.5,酶浓度60μg/m L条件下,反应2.5 h,黄芩苷转化率可达72.5%。结论成功构建了β-葡萄糖醛酸苷酶高表达菌株,并用于黄芩苷的定向水解制备黄芩素,为生物转化法生产黄芩素提供了新思路。 展开更多
关键词 黄芩素 黄芩 Β-葡萄糖醛酸
β-葡萄糖醛酸苷酶的研究进展
10
作者 黄希希 刘亚妮 师少军 《中国药师》 CAS 2017年第10期1834-1838,共5页
目的:综述β-葡萄糖醛酸苷酶结构、性质及其生物学功能研究进展.方法:查阅近年来国内外β-葡萄糖醛酸苷酶的相关文献报道,并进行归纳,分析,总结.结果:β-葡萄糖醛酸苷酶晶体结构由三个不同的结构域组成,其基因突变中最常见的为错义突... 目的:综述β-葡萄糖醛酸苷酶结构、性质及其生物学功能研究进展.方法:查阅近年来国内外β-葡萄糖醛酸苷酶的相关文献报道,并进行归纳,分析,总结.结果:β-葡萄糖醛酸苷酶晶体结构由三个不同的结构域组成,其基因突变中最常见的为错义突变,会造成相应酶活性改变,从而引发黏多糖贮积症Ⅶ型等系列病变,对其在抗体导向酶解前体药疗法、酶替代疗法等领域的研究也在不断深入.结论:β-葡萄糖醛酸苷酶作为人体重要酸性水解酶,可发生多种基因突变,其在医药领域及疾病诊断等方面发挥了重要的作用,已越来越成为研究的热点. 展开更多
关键词 Β-葡萄糖醛酸 晶体结构 基因突变 功能
β-葡萄糖醛酸苷酶荧光底物试卤灵葡萄糖醛酸苷的高效制备 预览 被引量:2
11
作者 王欣欣 吕侠 +6 位作者 葛广波 冯磊 辛红 李耀光 曹云峰 韩冠英 郭斌 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2015年第7期1321-1327,共7页
以猴肝微粒体(Cy LM)为酶源,采用生物制备法实现了荧光底物试卤灵(Resorufin)向试卤灵葡萄糖醛酸苷(Resorufinβ-D-glucuronide)的高效转化,同时借助新型色谱分离材料C18WAX及固相萃取技术实现了Resorufinβ-D-glucuronide的高效... 以猴肝微粒体(Cy LM)为酶源,采用生物制备法实现了荧光底物试卤灵(Resorufin)向试卤灵葡萄糖醛酸苷(Resorufinβ-D-glucuronide)的高效转化,同时借助新型色谱分离材料C18WAX及固相萃取技术实现了Resorufinβ-D-glucuronide的高效富集及选择性洗脱,最终获得纯度大于98%的目标产物.所得产物结构经LC-MS,1H NMR和13C NMR等手段进行了表征.在此基础上,以该葡萄糖醛酸产物为探针底物建立了β-葡萄糖醛酸苷酶活性检测及抑制剂高通量筛选的方法. 展开更多
关键词 试卤灵 试卤灵葡萄糖醛酸 固相萃取 Β-葡萄糖醛酸 抑制剂筛选
在线阅读 下载PDF
重组β-葡萄糖醛酸苷酶键选择性的半理性改造
12
作者 普鸿丽 吕波 +1 位作者 赵东旭 李春 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期1119-1128,共10页
为了提高Escherichia coli重组表达的β-葡萄糖醛酸苷酶(PGUS-E)的键选择性,本研究以PGUS-E结构与功能关系的推测为指导,选择了可能影响PGUS-E的键选择性的R329、T369、N467位点进行定点饱和突变,利用薄层层析(TLC)和高效液相色谱(... 为了提高Escherichia coli重组表达的β-葡萄糖醛酸苷酶(PGUS-E)的键选择性,本研究以PGUS-E结构与功能关系的推测为指导,选择了可能影响PGUS-E的键选择性的R329、T369、N467位点进行定点饱和突变,利用薄层层析(TLC)和高效液相色谱(HPLC)对键选择进行筛选,得到优势突变酶R329K、T369V。结果显示:与PGUS-E酶相比,突变酶R329K、T369V键选择性分别提高26.9%、34.3%。突变酶的酶学性质研究表明,突变酶的最适p H和温度与PGUS-E一致,但其酶催化效率下降。由此可见,R329、T369对酶催化的键选择性和酶的活性有显著影响。综上结果,本文应用饱和突变方法改善了PGUS-E的键选择性,为酶的结构和功能关系理解提供了实验依据。 展开更多
关键词 Β-葡萄糖醛酸 葡萄糖醛酸基甘草次酸 键专一性 定点饱和突变
唾液β-葡萄糖醛酸苷酶与慢性牙周炎相关性研究 预览 被引量:2
13
作者 黄满英 付云 刘瑜 《安徽医药》 2015年第2期337-339,共3页
目的:检测慢性牙周炎患者唾液β-葡萄糖醛酸苷酶(β-glucuronidase,β-G)水平,并与治疗后及健康人群对照,以期明确β-G与慢性牙周炎的关系,为牙周炎诊断及疗效监测提供有效参考。方法选择18名慢性牙周炎患者,采集牙周基础治疗... 目的:检测慢性牙周炎患者唾液β-葡萄糖醛酸苷酶(β-glucuronidase,β-G)水平,并与治疗后及健康人群对照,以期明确β-G与慢性牙周炎的关系,为牙周炎诊断及疗效监测提供有效参考。方法选择18名慢性牙周炎患者,采集牙周基础治疗前及治疗后全唾液并记录牙周临床指数;检测全唾液中β-G(比色法)水平,并分析与牙周临床参数之间的相关性。结果(1)基础治疗后,牙周临床参数改善明显(P<0.05);(2)治疗前实验组唾液β-G活性水平(2.845±0.72,10-3U· mL-1)与健康对照组(2.24±0.31,10-3 U· mL-1)差异有显著性(P<0.05),与平均牙周袋深度(r =0.485)、深袋数(r =0.540)、深袋构成比(r=0.598)之间明显相关(P<0.05);治疗后β-G酶活性水平(2.18±0.71,10-3 U· mL-1)明显下调(P<0.05),与对照组差异无显著性(P>0.05)。结论唾液β-G活性水平能在一定程度上反映当前牙周炎状态及控制程度,该指标可为牙周炎诊断和疗效监测提供参考。 展开更多
关键词 Β-葡萄糖醛酸 慢性牙周炎 唾液
在线阅读 下载PDF
β-葡萄糖醛酸苷酶键选择性高效筛选体系的构建与应用 预览 被引量:2
14
作者 吕波 冯旭东 李春 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第8期3189-3194,共6页
分子改造是提高β-葡萄糖醛酸苷酶(PGUS-E)在生产单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)过程中的键选择性的有效方法,但高通量筛选方法的缺失是限制其发展的重要瓶颈。为解决该问题,在大肠杆菌中构建了组成型表达β-葡萄糖醛酸苷酶(PGUS-... 分子改造是提高β-葡萄糖醛酸苷酶(PGUS-E)在生产单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)过程中的键选择性的有效方法,但高通量筛选方法的缺失是限制其发展的重要瓶颈。为解决该问题,在大肠杆菌中构建了组成型表达β-葡萄糖醛酸苷酶(PGUS-E),利用温度诱导表达噬菌体裂解酶SRRz实现原位裂解的一锅法(one-pot)甘草酸键选择性筛选体系(CELS);同时考察了启动子强度对PGUS-E外源表达的效果,优化了不同温度下裂解酶 SRRz 的表达对酶释放效率的影响。结果表明,CELS 筛选体系成功实现了集培养、产酶、裂解和反应于一体化工艺,并将其应用于PGUS-E的非理性改造,获得了一系列键选择性显著提高的突变酶。研究证明,TIM 桶状结构域中α螺旋结构的变化对甘草酸键选择性的改善有很大的影响。 展开更多
关键词 Β-葡萄糖醛酸 生物催化 分子生物学 优化设计 键选择性
在线阅读 下载PDF
理性设计提高β-葡萄糖醛酸苷酶的热稳定性 预览 被引量:1
15
作者 汤恒 黄申 +1 位作者 冯旭东 李春 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第6期2205-2211,共7页
采用同源序列比对策略和脯氨酸效应的设计策略,以同源建模的三维结构为基础,结合定点突变技术,对重组产紫青霉β-葡萄糖醛酸苷酶(PGUS-E)进行理性设计,获得了2个热稳定性明显提高的突变体PGUS-E I130V和PGUS-E G280P,再将突变位点进... 采用同源序列比对策略和脯氨酸效应的设计策略,以同源建模的三维结构为基础,结合定点突变技术,对重组产紫青霉β-葡萄糖醛酸苷酶(PGUS-E)进行理性设计,获得了2个热稳定性明显提高的突变体PGUS-E I130V和PGUS-E G280P,再将突变位点进行组合获得突变体PGUS-E I130V+G280P。相比PGUS-E,PGUS-E I130V、PGUS-E G280P和PGUS-E I130V+G280P在60℃下的半衰期T1/2分别比原始酶的23 min提高3.5倍,5倍和5.5倍,达到82 min,117 min和128min。突变体的动力学参数Kcat/Km值分别为1.534×107 mol-1·L·min-1,1.368×107mol-1·L·min-1和1.283×107 mol-1·L·min-1,与原始酶(1.316×107 mol-1·L·min-1)接近,对底物的亲和力基本不变。结果表明在蛋白质构象不稳定的区段中引入脯氨酸,以及在相应位置引入嗜热菌的氨基酸,均可提高蛋白质热稳定性。 展开更多
关键词 Β-葡萄糖醛酸 分子模拟 动力学 蛋白质稳定性 理性设计 同源比对 脯氨酸
在线阅读 下载PDF
糖基化改造β-葡萄糖醛酸苷酶的热稳定性 预览 被引量:4
16
作者 王小艳 樊艳爽 +2 位作者 韩蓓佳 冯旭东 李春 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第9期3669-3677,共9页
以N-糖基化提高毕赤酵母重组表达β-葡萄糖醛酸苷酶(PGUS-P)的热稳定性为目的,在PGUS-P模拟结构分析的基础上,半理性方法设计并通过定点突变引入具有EAS(enhanced aromatic sequence)序列特征的新N-糖基化位点,经毕赤酵母重组表达后... 以N-糖基化提高毕赤酵母重组表达β-葡萄糖醛酸苷酶(PGUS-P)的热稳定性为目的,在PGUS-P模拟结构分析的基础上,半理性方法设计并通过定点突变引入具有EAS(enhanced aromatic sequence)序列特征的新N-糖基化位点,经毕赤酵母重组表达后,获得了3个新糖基化的突变酶PGUS-P-26、PGUS-P-35和PGUS-P-259。反应动力学分析表明,与原始PGUS-P相比,突变酶PGUS-P-26、PGUS-P-35和PGUS-P-259催化甘草酸水解的Km变小,Kcat/Km增加,表明其对底物甘草酸的亲和力和催化效率均得到提高。热稳定性分析表明,PGUS-P-35和PGUS-P-259的热稳定性得到改善,在65℃下保温90 min,其热稳定性相对PGUS-P分别提高了13%和11%。研究表明在蛋白质的合适位点引入糖基修饰对提高蛋白的热稳定性具有促进作用。 展开更多
关键词 N-基化 Β-葡萄糖醛酸 热稳定性 分子模拟 动力学
在线阅读 下载PDF
重组β-葡萄糖醛酸苷酶转化甘草酸的定向性改造 预览
17
作者 矫丽媛 吕波 +1 位作者 王金娜 李春 《石河子大学学报:自然科学版》 CAS 2013年第5期640-644,共5页
为提高重组β-葡萄糖醛酸苷酶的底物特异性,通过易错PCR方法对其进行突变并构建突变体文库,利用薄层层析和高效液相色谱对突变文库进行筛选,获得了突变株PGUS(M51)E,其底物特异性提高了41%。突变酶的酶学特性研究发现,该突变酶... 为提高重组β-葡萄糖醛酸苷酶的底物特异性,通过易错PCR方法对其进行突变并构建突变体文库,利用薄层层析和高效液相色谱对突变文库进行筛选,获得了突变株PGUS(M51)E,其底物特异性提高了41%。突变酶的酶学特性研究发现,该突变酶的最适pH值和温度较PGUS-E无显著变化,酶活力下降了16.86%,T。值提高了5℃;序列分析结果表明:PGUS(M51)-E共发生5处突变,其中3处发生在糖基结合域。因此,利用定向进化策略能有效提高伊葡萄糖醛酸苷酶的底物识别特异性。 展开更多
关键词 Β-葡萄糖醛酸 易错PCR 甘草酸 底物特异性
在线阅读 免费下载
β葡萄糖醛酸苷酶与原发性胆总管结石的关系 被引量:1
18
作者 宋敏 吴杰 +1 位作者 王萍 黄晓东 《临床消化病杂志》 2013年第5期269-270,共2页
目的β葡萄糖醛酸苷酶(βGlucuronidase,βG)与原发性胆总管结石的关系。方法对原发性胆总管结石患者(实验组)91例和(对照组)84例行内镜下逆行胰胆管造影术(endoscopicretrogradecholangiopancreatography,ERCP),采用酶学比... 目的β葡萄糖醛酸苷酶(βGlucuronidase,βG)与原发性胆总管结石的关系。方法对原发性胆总管结石患者(实验组)91例和(对照组)84例行内镜下逆行胰胆管造影术(endoscopicretrogradecholangiopancreatography,ERCP),采用酶学比色法检测胆汁内、外源性βG含量。结果(1)原发性胆总管结石与对照组患者外源性13G比较无明显差异,然而内源性9G明显升高,具有统计学意义(P〈0.01);(2)不同类型原发性胆总管结石患者中,胆红素结石及混合性结石患者胆汁中内源性9G表达明显高于胆固醇结石组,具有统计学意义(P〈0.01),而外源性βG表达三组间无显著差异(P〉0.05)。结论内源性βG的表达上调可能在原发性胆总管结石的发生、发展中起着重要作用。 展开更多
关键词 原发性胆总管结石 胆汁 Β-葡萄糖醛酸
甘草酸的选择性水解及其与唾液酸形成分子复合物的初步研究 预览 被引量:2
19
作者 陈桂玲 赵全义 段瑞哲 《兰州大学学报:医学版》 CAS 2012年第1期 29-34,共6页
目的探讨甘草酸的选择性水解以及甘草酸的药理作用机理。方法从禽类动物肝脏中提取β-葡萄糖醛酸苷酶对甘草酸进行催化水解,用差热分析及光谱法研究甘草酸与唾液酸之间形成分子复合物的特征。结果甘草酸可高效选择水解为单葡萄糖醛酸甘... 目的探讨甘草酸的选择性水解以及甘草酸的药理作用机理。方法从禽类动物肝脏中提取β-葡萄糖醛酸苷酶对甘草酸进行催化水解,用差热分析及光谱法研究甘草酸与唾液酸之间形成分子复合物的特征。结果甘草酸可高效选择水解为单葡萄糖醛酸甘草次酸,同时甘草酸与唾液酸可在溶液中形成分子复合物。结论从禽类动物肝脏中提取β-葡萄糖醛酶水解甘草酸是制备单葡萄糖醛酸甘草次酸的一种切实可行的方法,分子复合物的形成为研究甘草酸的药理作用提供了依据。 展开更多
关键词 甘草酸 Β-葡萄糖醛酸 唾液酸 分子复合物
在线阅读 下载PDF
产紫青霉中β-葡萄糖醛酸苷酶的诱导表达 预览 被引量:1
20
作者 郭晓晓 王小艳 +1 位作者 冯世江 李春 《生物加工过程》 CAS CSCD 2012年第3期 28-32,共5页
针对产紫青霉(Penicillium purpurogenum)Li-3发酵生产β-葡萄糖醛酸苷酶存在的碳代谢阻遏现象,研究β-葡萄糖醛酸苷酶的高效诱导表达策略。在发酵条件优化的基础上,建立了新的产酶诱导工艺:葡萄糖的初始质量浓度5 g/L,在葡萄糖耗尽... 针对产紫青霉(Penicillium purpurogenum)Li-3发酵生产β-葡萄糖醛酸苷酶存在的碳代谢阻遏现象,研究β-葡萄糖醛酸苷酶的高效诱导表达策略。在发酵条件优化的基础上,建立了新的产酶诱导工艺:葡萄糖的初始质量浓度5 g/L,在葡萄糖耗尽时加入20%诱导剂(10 g/L GL+1.2%Tween80)进行诱导,每24 h添加1次诱导剂,诱导72 h后立即转到40℃摇床发酵48 h。采用该工艺进行发酵,菌体出现了"二次生长"现象,比酶活从647.99 U/mL提高至2 356 U/mL,提高了近3倍。 展开更多
关键词 C代谢 Β-葡萄糖醛酸 诱导 产紫青霉
在线阅读 免费下载
上一页 1 2 12 下一页 到第
使用帮助 返回顶部 意见反馈
新型冠状病毒肺炎防控与诊疗专栏