期刊文献+
共找到96篇文章
< 1 2 5 >
每页显示 20 50 100
基于Laravel框架的图书证自主激活系统设计研究 预览 被引量:2
1
作者 符荣鑫 蒋继平 韦刚 《电脑知识与技术:学术版》 2019年第2Z期71-73,共3页
为提高图书馆员工作效率,自主激活读者图书证,采用Laravel系统采用MVC模型,用MySQL设计底层数据库,划分前后端功能模块,规划自主激活系统流程,绘制系统数据流图,建立自主激活平台,实现邮箱验证、读者测试、试卷生成、试题评分、成绩分... 为提高图书馆员工作效率,自主激活读者图书证,采用Laravel系统采用MVC模型,用MySQL设计底层数据库,划分前后端功能模块,规划自主激活系统流程,绘制系统数据流图,建立自主激活平台,实现邮箱验证、读者测试、试卷生成、试题评分、成绩分析及证件激活等功能。读者在测试完毕后能够自主激活图书证借阅权限,提高读者服务质量。 展开更多
关键词 Laravel 自主激活 读者测试 MVC 系统设计
在线阅读 下载PDF
Multiple active components synergistically driven heteroatom-doped porous carbon as high-performance counter electrode in dye-sensitized solar cells 预览
2
作者 Hongyu Jing Danyang Wu +4 位作者 Suxia Liang Xuedan Song Yonglin An Ce Hao Yantao Shi 《能源化学:英文版》 SCIE EI CAS CSCD 2019年第4期89-94,共6页
A facile template-free in situ self-activation approach for the multiple active components synergistically driven porous carbon was presented via a feasible annealing process.The biomass-derived carbon without additio... A facile template-free in situ self-activation approach for the multiple active components synergistically driven porous carbon was presented via a feasible annealing process.The biomass-derived carbon without additional activation reagents was fabricated using K-rich pomelo peel (PP) as the carbon source,which possesses a high electric conductivity where abundant functional hetero-metal atoms are doped into the carbon framework that playing the role of catalytic graphitization.The K^+ that exists within the biomass can induce self-activation during pyrolysis apart from the activating gases during the pyrolysis process.The resulting electrocatalyst of PP-850 (PP was pyrolyzed at 850℃ in an N2 atmosphere) with abundant heteroatoms possesses a higher power conversion efficiency (PCE) of 7.81% as the counter electrode (CE) of dye-sensitized solar cells (DSCs) compared with the CEs calcinated at other temperatures and a similar PCE with Pt counterpart (8.24%) based on the liquid I3/I^- electrolyte.The better electrocatalytic performance is attributed to the synergistic effect between self-activation and the co-doping of nitrogen,sulfur and phosphorus all together in a carbon matrix.Due to the feasibility of large-scale production,rich heteroatom doping,the PP-derived carb on,which simplifies the procedure and decreases the cost,has a pote ntial application for an alter native electrocatalyst for high-performance photovoltaic devices. 展开更多
关键词 COUNTER ELECTRODE Self-activation Biomass-derived carbon ELECTROCATALYTIC performance
在线阅读 下载PDF
竹材微正压热解自活化制备高吸附性能活性炭的机制研究 预览
3
作者 孙昊 孙康 +2 位作者 蒋剑春 许伟 张燕萍 《林产化学与工业》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第5期19-25,共7页
以竹材加工剩余物为原料,在不添加活化剂的条件下,开展了微正压热解自活化制备活性炭的研究,通过热重-质谱分析、热解炭化和热解自活化对比,以及热解自活化尾气监测,探究热解过程中活性炭孔隙结构的形成机制。研究结果发现:热解过程产... 以竹材加工剩余物为原料,在不添加活化剂的条件下,开展了微正压热解自活化制备活性炭的研究,通过热重-质谱分析、热解炭化和热解自活化对比,以及热解自活化尾气监测,探究热解过程中活性炭孔隙结构的形成机制。研究结果发现:热解过程产生的水蒸气和二氧化碳可以与固相炭发生气化成孔反应,制得高吸附性能的竹材活性炭;热解气体、均匀活化、气-炭可逆反应平衡状态、活化剂的扩散速率及气-炭反应速率是竹材活性炭孔隙结构和吸附性能的主要影响机制;控制热解自活化压力为0.12MPa,在900℃(升温速率15℃/min)热解6h,制得活性炭得率为15.22%,BET比表面积(SBET)1108m^2/g,微孔容积(Vmic)为0.407cm^3/g,介孔容积(Vmes)为0.085cm^3/g,碘和亚甲基蓝的吸附值分别为1438和300mg/g,同时副产高H2、CO含量和高CO/CO2比例的费托合成原料气。 展开更多
关键词 竹活性炭 自活化 微正压 调控机制
在线阅读 下载PDF
海藻基含杂原子碳材料的制备及电化学性质 预览
4
作者 王昀 贲腾 《高等学校化学学报》 CSCD 北大核心 2018年第12期2627-2636,共10页
以天然海藻为原料,经条件优化制备了含杂原子的碳材料SarCW-900及LamCW-900,对其形貌、元素成分、孔性质和石墨化程度进行分析并讨论其活化机理.将2种材料作为电化学电容器及锂离子电池的电极材料活性物质,分别进行电化学性能测试.结果... 以天然海藻为原料,经条件优化制备了含杂原子的碳材料SarCW-900及LamCW-900,对其形貌、元素成分、孔性质和石墨化程度进行分析并讨论其活化机理.将2种材料作为电化学电容器及锂离子电池的电极材料活性物质,分别进行电化学性能测试.结果表明,SarCW-900及LamCW-900在被用作电化学电容器电极材料时,比电容分别为106 F/g及85 F/g,经5000次循环伏安稳定性测试,比电容值稳定在101 F/g及81 F/g,分别降低不到4%和5%,是理想的电容器电极材料;在被用作锂离子电池电极材料时,经100次循环比容量分别保持在100.3及33.9 mA·h/g,低于纯石墨的理论值,但具有较高的稳定性. 展开更多
关键词 海洋生物 含杂原子碳材料 自活化 电化学
在线阅读 下载PDF
海藻基微孔碳材料的储甲烷性能 预览
5
作者 王昀 贲腾 《高等学校化学学报》 CSCD 北大核心 2018年第10期2143-2153,共11页
以天然海藻为原料,通过自活化制备了碳材料SarCW-900-HF及LamCW-900-HF,并对其进行表征和储甲烷能力测试.其比表面积分别为812和671 m 2/g,孔体积分别为0.45和0.44 cm 3/g,孔分布的峰值均在1.1 nm,在室温及3.5 MPa压强下储甲烷的能力分... 以天然海藻为原料,通过自活化制备了碳材料SarCW-900-HF及LamCW-900-HF,并对其进行表征和储甲烷能力测试.其比表面积分别为812和671 m 2/g,孔体积分别为0.45和0.44 cm 3/g,孔分布的峰值均在1.1 nm,在室温及3.5 MPa压强下储甲烷的能力分别为272 mg/g(质量比21.3%)和246 mg/g(质量比19.4%),经20 MPa压强压片后吸附甲烷体积比达到274和449 cm 3(STP)/cm 3,超过美国能源部提出的吸附剂的指标[263 cm 3(STP)/cm 3]. 展开更多
关键词 羊栖菜 海带 自活化 高压甲烷储存
在线阅读 下载PDF
Ba4B11O20F蓝紫色荧光粉的高温固相法制备
6
作者 赵文武 《化学世界》 CAS CSCD 2017年第5期309-314,共6页
以BaCO3、BaF2和H3BO3为原料,采用易于工业化的高温固相反应法制备出了新型蓝紫色荧光材料Ba4B11O20F,并利用X射线衍射(XRD)、红外光谱(IR)、扫描电子显微镜(SEM)等对其进行了结构和形貌表征。通过荧光光谱分析手段研究了其激发... 以BaCO3、BaF2和H3BO3为原料,采用易于工业化的高温固相反应法制备出了新型蓝紫色荧光材料Ba4B11O20F,并利用X射线衍射(XRD)、红外光谱(IR)、扫描电子显微镜(SEM)等对其进行了结构和形貌表征。通过荧光光谱分析手段研究了其激发光谱和发射光谱,结果表明,Ba4B11O20F荧光粉在294nm激发条件下得到的发射光谱中存在三个发射峰分别位于367、402和470nm处,在紫外灯照射下成明亮的蓝紫色,推测是由于结构缺陷所导致的自激活发光。同时探讨了烧结温度及烧结时间对其荧光强度的影响,并得出Ba4B11O20F蓝紫色荧光粉的最佳制备工艺是在815℃烧结温度下烧结10h。 展开更多
关键词 硼酸盐 发光性能 高温固相反应 自激活
基于酵母双杂交的EgSmadE表达载体构建及自激活检测 被引量:2
7
作者 李静 李亮 +4 位作者 张传山 叶建蔚 毕晓娟 吕国栋 林仁勇 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第6期535-539,共5页
目的构建细粒棘球蚴SmadE(Echinococcos granulosus SmadE)基因的酵母双杂交真核表达载体,并检测其表达重组蛋白的毒性和自激活活性。方法以PCR技术获得EgSmadE基因片段,并克隆至酵母双杂交载体pGADT7及pGBKT7。应用PEG/LiAc法将重组... 目的构建细粒棘球蚴SmadE(Echinococcos granulosus SmadE)基因的酵母双杂交真核表达载体,并检测其表达重组蛋白的毒性和自激活活性。方法以PCR技术获得EgSmadE基因片段,并克隆至酵母双杂交载体pGADT7及pGBKT7。应用PEG/LiAc法将重组载体导入Y2HGold酵母感受态细胞,利用固体培养基表型筛选对其毒性和自激活活性进行检测。结果扩增EgSmadE基因全长1 129bp,与酵母双杂交重组载体连接后获得pGADT7-EgSmadE和pGBKT7-EgSmadE,经PCR、限制性内切酶双酶切和测序均正确;连接产物转化酵母菌后经培养基表型鉴定与对照组菌落大小一致,表明重组载体表达产物对酵母菌无毒性;SD/-Trp和SD/-Leu培养基均有白色菌落生长,而SD/-Leu/X/A和SD/-Trp/X/A无菌落生长,表明重组载体表达产物对下游报告基因无自激活活性。结论成功构建酵母双杂交载体pGADT7-EgSmadE及pGBKT7-EgSmadE,可用于鉴定EgSmadE蛋白质,为宿主与棘球蚴相互作用的分子机制研究奠定基础。 展开更多
关键词 细粒棘球蚴 EgSmadE 酵母双杂交 自激活 毒性检测
玉米ZmMPK5酵母双杂交诱饵载体的构建及自激活作用检测 预览 被引量:3
8
作者 马芳芳 王瑞云 蒋明义 《山西农业大学学报:自然科学版》 CAS 2016年第3期170-175,共6页
玉米中ZmMPK5参与了ABA诱导的抗氧化防护从而增强了植物对干旱、盐渍以及氧化胁迫的忍受能力,然而截至目前对其潜在的分子机制却知之甚少。为构建玉米ZmMPK5酵母双杂交诱饵表达载体,并检测其在宿主酵母菌MaV203中的自激活活性和毒性,利... 玉米中ZmMPK5参与了ABA诱导的抗氧化防护从而增强了植物对干旱、盐渍以及氧化胁迫的忍受能力,然而截至目前对其潜在的分子机制却知之甚少。为构建玉米ZmMPK5酵母双杂交诱饵表达载体,并检测其在宿主酵母菌MaV203中的自激活活性和毒性,利用gateway技术,以实验室保存的重组质粒pMD19T-ZmMPK5为模板,扩增得到带有attB位点的ZmMPK5基因的ORF片段,通过BP重组反应和LR重组反应,最终将该片段构建到诱饵表达空载体pDEST32上,PCR及测序鉴定结果表明,成功构建了阅读框方向和序列均正确的重组诱饵载体pDEST32-ZmMPK5。用PEG/LiAc法将重组诱饵质粒pDEST32-ZmMPK5转化酵母菌株MaV203感受态细胞,通过缺陷型平板表型分析以及X-gal分析实验检测诱饵载体表达的蛋白对宿主细胞是否具有毒性和自激活作用。最终结果表明构建的诱饵载体对宿主酵母菌MaV203既无毒性也无自激活活性,可用于后续研究,为进一步利用酵母双杂交方法从玉米cDNA文库中筛选与ZmMPK5相互作用蛋白奠定了基础。 展开更多
关键词 ZmMPK5 酵母双杂交 诱饵载体 MaV203 自激活
在线阅读 免费下载
柔嫩艾美耳球虫钙依赖蛋白激酶4酵母双杂交诱饵质粒的构建与检测 预览 被引量:1
9
作者 王自文 董辉 +7 位作者 赵其平 夏伟丽 朱顺海 门启婓 李聪 朱雪龙 韩红玉 黄兵 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2016年第1期62-69,共8页
为了筛选出柔嫩艾美耳球虫钙依赖蛋白激酶(Et CDPK4)在虫体内发挥作用时的作用受体即相互作用蛋白,构建了能够应用于筛选柔嫩艾美耳球虫子孢子酵母双杂交c DNA文库的诱饵重组质粒p GBKT7-Et CDPK4,本研究以柔嫩艾美耳球虫子孢子为材料... 为了筛选出柔嫩艾美耳球虫钙依赖蛋白激酶(Et CDPK4)在虫体内发挥作用时的作用受体即相互作用蛋白,构建了能够应用于筛选柔嫩艾美耳球虫子孢子酵母双杂交c DNA文库的诱饵重组质粒p GBKT7-Et CDPK4,本研究以柔嫩艾美耳球虫子孢子为材料,提取了总RNA,经反转录得到c DNA第一链,利用PCR的方法扩增获得了该基因大小为1660 bp的Et CDPK4的功能区片段,并将其连接于酵母BD诱饵p GBKT7载体上,经双酶切鉴定和序列分析,以及检测了p GBKT7-Et CDPK4在酵母双杂交系统中的自激活、细胞毒性和表达情况。结果显示,成功构建了酵母双杂交诱饵重组质粒p GBKT7-Et CDPK4,在酵母双杂交系统中没有自激活活性和细胞毒性,且在酵母细胞Y2HGold中能够进行表达。表明所构建的诱饵质粒p GBKT7-Et CDPK4可以应用于酵母双杂交系统中,用于筛选柔嫩艾美耳球虫子孢子酵母双杂交c DNA文库,获得可能与Et CDPK4具有相互作用的蛋白质。 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫 钙依赖蛋白激酶 诱饵质粒 自激活作用 细胞毒性
在线阅读 免费下载
自活化乌拉草基多孔碳的制备和电化学性质 预览 被引量:6
10
作者 王昀 贲腾 裘式纶 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2016年第6期1042-1049,共8页
以乌拉草为原料,采用直接碳化方法,通过热解过程中前驱体自活化(即利用自身包含的活化剂实现分子内的化学活化),并经过必要的除杂过程制备了多孔碳材料Ula C-950-HF.测试了该多孔碳的电化学性质,并与以几种常见的生物质为原料制备的... 以乌拉草为原料,采用直接碳化方法,通过热解过程中前驱体自活化(即利用自身包含的活化剂实现分子内的化学活化),并经过必要的除杂过程制备了多孔碳材料Ula C-950-HF.测试了该多孔碳的电化学性质,并与以几种常见的生物质为原料制备的多孔碳材料及商用活性炭的电化学性质进行对比.结果表明,乌拉草基多孔碳材料Ula C-950-HF的电容值为113 F/g,经过4000次循环后,材料的电容值仅降低了4 F/g,显示出用作超级电容器电极材料的潜力. 展开更多
关键词 生物质碳化 乌拉草 自身活化 电化学
在线阅读 下载PDF
蓝舌病病毒衣壳蛋白VP2、VP5、VP7酵母双杂交诱饵质粒的构建及鉴定 预览
11
作者 张继凯 孙恩成 +5 位作者 杨涛 徐青元 吕爽 王海秀 张沁 吴东来 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第1期39-44,共6页
蓝舌病病毒(bluetongue virus,BTV)的结构主要由3层衣壳蛋白组成,其中VP2、VP5蛋白构成了BTV的外层衣壳,VP7蛋白构成了BTV的中间衣壳,最内层衣壳则由VP3蛋白构成。VP2、VP5及VP7蛋白在BTV侵染宿主细胞的过程中起着非常重要的作用。为... 蓝舌病病毒(bluetongue virus,BTV)的结构主要由3层衣壳蛋白组成,其中VP2、VP5蛋白构成了BTV的外层衣壳,VP7蛋白构成了BTV的中间衣壳,最内层衣壳则由VP3蛋白构成。VP2、VP5及VP7蛋白在BTV侵染宿主细胞的过程中起着非常重要的作用。为了研究BTV与宿主细胞相互作用的分子机制,本研究将BTV的VP2、VP5、VP7基因分别克隆到pGBKT7载体中,成功构建了pGBKT7-VP2、pGBKT7-VP5与pGBKT7-VP7 3个诱饵质粒,且通过自激活和毒性验证,证明所构建的3个质粒均无自激活作用,对酵母细胞无毒性作用。本研究为今后利用酵母双杂交筛选VP2、VP5、VP7蛋白中与宿主细胞相互作用的蛋白做好了铺垫,为深入研究BTV与宿主细胞的相互作用奠定了基础。 展开更多
关键词 蓝舌病病毒 诱饵质粒 自激活作用 毒性作用
在线阅读 下载PDF
黄灯笼辣椒eIF4Es基因克隆及其酵母双杂交激活域载体构建
12
作者 张真 余乃通 +3 位作者 王健华 张秀春 武亚丹 刘志昕 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期2066-2070,共5页
通过对辣椒全基因组数据库分析获得黄灯笼辣椒eIF4E基因家族的四个基因,设计两端带有Eco RⅠ和XhoⅠ酶切位点的引物分别扩增四个基因的ORF,克隆到LexA-酵母双杂交系统的激活域载体pB42AD中,并构建pB42AD-eIF4E、pB42AD-eIF(iso)4E、pB42... 通过对辣椒全基因组数据库分析获得黄灯笼辣椒eIF4E基因家族的四个基因,设计两端带有Eco RⅠ和XhoⅠ酶切位点的引物分别扩增四个基因的ORF,克隆到LexA-酵母双杂交系统的激活域载体pB42AD中,并构建pB42AD-eIF4E、pB42AD-eIF(iso)4E、pB42AD-eIF4E-Xm、pB42AD-n CBP9090重组载体。将重组质粒导入酵母菌株EGY48(p8op-Lac Z)中,进行重组激活域载体的毒性检验和自激活验证。结果表明,扩增获得了正确的黄灯笼辣椒Cc-eIF4E、Cc-eIF(iso)4E、Cc-eIF4E-Xm、Cc-n CBP9090基因ORF,并成功克隆到pB42AD载体中,同时转化有激活域载体的EGY48(p8op-Lac Z)在SD/-Trp/-Ura营养缺陷型平板上生长良好,在SD/-His/-Ura平板上不生长,说明重组质粒表达产物对该酵母细胞无毒性,对下游报告基因无自激活作用。本研究结果证明pB42AD-eIF4E、pB42AD-eIF(iso)4E、pB42AD-eIF4E-Xm、pB42AD-n CBP9090重组载体可用于该系统的互作蛋白筛选,为下一步通过酵母双杂交系统筛选与黄灯笼辣椒eIF4E家族蛋白相互作用的病毒蛋白奠定基础。 展开更多
关键词 eIF4E家族 酵母双杂交 载体构建 自激活
细粒棘球蚴胰岛素受体(EgInsR)与人胰岛素(Huins)酵母双杂交载体的构建及自激活鉴定 被引量:3
13
作者 文丽梅 王建华 +3 位作者 卢帅 郑海亚 吕国栋 赵军 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2016年第9期821-824,共4页
目的构建细粒棘球蚴(Eg)胰岛素受体(InsR)与人胰岛素(Huins)酵母双杂交系统,检测表达蛋白对报告基因的自激活活性及对酵母菌的毒性。方法从Eg cDNA中扩增EgInsR基因和Huins编码序列,分别将EgInsR基因和Huins编码序列克隆入酵母双... 目的构建细粒棘球蚴(Eg)胰岛素受体(InsR)与人胰岛素(Huins)酵母双杂交系统,检测表达蛋白对报告基因的自激活活性及对酵母菌的毒性。方法从Eg cDNA中扩增EgInsR基因和Huins编码序列,分别将EgInsR基因和Huins编码序列克隆入酵母双杂交载体pGADT7和pGBKT7中并进行限制性酶切鉴定和测序鉴定,鉴定正确的重组载体采用PEG/LiAc法转化酵母菌,检测诱饵蛋白对酵母菌生长的自激活活性和毒性。结果扩增的EgInsR和Huins基因编码区全长分别为1 122bp和261bp。构建的pGADT7-EgInsR及pGBKT7-Huins两组重组质粒转化Y2HGold酵母菌表达的蛋白对Y2HGold无毒性及自激活作用。结论构建的EgInsR基因和Huins基因重组载体表达蛋白对Y2HGold酵母菌无毒性和自激活作用,为研究Eg与中间宿主的交互作用机制奠定了基础。 展开更多
关键词 EgInsR基因 Huins基因 酵母双杂交 自激活
乌拉草基碳材料的储气性能 预览 被引量:1
14
作者 王昀 贲腾 裘式纶 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2016年第5期801-809,共9页
在不添加外源性化学活化剂的条件下直接碳化乌拉草制备了多孔碳材料Ula C-950-HF.样品的碳含量高达93%,并且显示出部分石墨化的趋势.热重分析(TGA)结果显示样品具有很高的热稳定性(400℃前失重仅3%).N_2吸附-脱附测试结果表明样品... 在不添加外源性化学活化剂的条件下直接碳化乌拉草制备了多孔碳材料Ula C-950-HF.样品的碳含量高达93%,并且显示出部分石墨化的趋势.热重分析(TGA)结果显示样品具有很高的热稳定性(400℃前失重仅3%).N_2吸附-脱附测试结果表明样品的孔结构以微孔为主(峰值在1.1 nm),并有少量的介孔,总体的孔分布范围较窄,孔结构为有利于甲烷吸附的狭缝状.体积法测试结果表明,在298 K,3.5 MPa条件下,乌拉草基多孔碳材料Ula C-950-HF的甲烷储存能力达到208 mg/g(质量分数17%)或体积容量达到232 m L/m L.通过对产品的孔结构绘制模型并进行分析,从理论上初步解释了样品拥有较高的高压甲烷储存能力的原因. 展开更多
关键词 生物质碳化 乌拉草 自身活化 甲烷储存
在线阅读 下载PDF
香蕉束顶病毒nsp酵母双杂交诱饵质粒的构建及自激活验证 预览
15
作者 王祥 张秀春 +3 位作者 余乃通 梁洁 周朋 刘志昕 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期741-745,790共6页
香蕉束顶病毒(Banana bunchy top virus,BBTV)DNA6编码的核穿梭蛋白(nuclear shuttle protein,NSP)在病毒的侵染、复制、运输中起重要作用。为了利用酵母双杂交系统研究BBTV DNA6与寄主香蕉蛋白的互作,本实验利用两对引物的PCR扩增... 香蕉束顶病毒(Banana bunchy top virus,BBTV)DNA6编码的核穿梭蛋白(nuclear shuttle protein,NSP)在病毒的侵染、复制、运输中起重要作用。为了利用酵母双杂交系统研究BBTV DNA6与寄主香蕉蛋白的互作,本实验利用两对引物的PCR扩增得到BBTV nsp片段,混合各自PCR产物进行熔化退火可得到1/4两端含有EcoRⅠ和Bam HⅠ的酶切位点序列的DNA产物,将目的片段连接到酵母双杂交系统的p GBKT7诱饵载体中,成功获得p GBKT7-nsp,并将重组质粒p GBKT7-nsp转化入Y2H Gold酵母菌株中进行毒性检测和自激活验证。结果表明,p GBKT7-nsp没有自激活活性,同时对酵母细胞也无毒性,符合酵母双杂交诱饵质粒的要求,可用于下一步的蛋白互作实验。 展开更多
关键词 香蕉束顶病毒 nsp基因 酵母双杂交 诱饵载体 自激活
在线阅读 免费下载
弓形虫ROP2酵母双杂交诱饵表达载体构建及毒性和自激活活性检测
16
作者 赵桂华 王洪法 +5 位作者 仲维霞 刘功振 崔勇 肖婷 徐超 尹昆 《寄生虫病与感染性疾病》 CAS 2015年第4期179-183,共5页
目的为筛选弓形虫分泌毒性因子-棒状体蛋白2(ROP2)在终末宿主细胞内的互作因子,构建ROP2的酵母双杂交诱饵表达载体,并检测其表达蛋白对酵母菌生长的毒性作用及自激活活性。方法根据ROP2蛋白的特性选取1-561氨基酸、25-241氨基酸、242-... 目的为筛选弓形虫分泌毒性因子-棒状体蛋白2(ROP2)在终末宿主细胞内的互作因子,构建ROP2的酵母双杂交诱饵表达载体,并检测其表达蛋白对酵母菌生长的毒性作用及自激活活性。方法根据ROP2蛋白的特性选取1-561氨基酸、25-241氨基酸、242-561氨基酸作为目的片段,PCR扩增弓形虫基因组获得3片段,定向克隆到酵母表达载体pGBKT 7上,经测序正确后,将其转化到酵母菌Y187感受态细胞,在缺陷性培养基上观察3个诱饵表达载体在Y187中的表达情况,检测诱饵载体有无毒性作用和自激活功能。结果成功扩增出ROP2基因的3个目的片段,并将其克隆到诱饵表达载体pGBKT7中,经测序及酶切鉴定结果正确,转化到酵母Y187细胞中的诱饵表达载体无毒性和自激活作用。结论成功获得了对宿主酵母细胞无毒性且未自主激活活性的诱饵表达载体pG-BKT7-ROP2 1-561、pGBKT7-ROP2 242-561、pGBKT7-ROP2 25-241,可作为酵母双杂合系统中的"诱饵",为下一步利用酵母双杂交系统筛选ROP2在终末宿主细胞内的相互作用蛋白创造了条件。 展开更多
关键词 弓形虫 棒状体蛋白2 诱饵表达载体 毒性 自激活活性
杜氏盐藻环盒子1相互作用蛋白的酵母双杂交法筛选 预览
17
作者 许尧 张楠楠 +5 位作者 张彦婷 李庆华 杨露 朱相展 薛乐勋 关方霞 《郑州大学学报:医学版》 CAS 北大核心 2015年第3期326-331,共6页
目的:构建杜氏盐藻环盒子1(RBX1)的酵母双杂交诱饵载体p GBKT7-RBX1,筛选与RBX1相互作用的蛋白。方法:采用PCR技术扩增杜氏盐藻RBX1的开放阅读框,测序分析后插入酵母表达质粒,构建诱饵载体p GBKT7-RBX1。将酶切鉴定正确的诱饵载体用... 目的:构建杜氏盐藻环盒子1(RBX1)的酵母双杂交诱饵载体p GBKT7-RBX1,筛选与RBX1相互作用的蛋白。方法:采用PCR技术扩增杜氏盐藻RBX1的开放阅读框,测序分析后插入酵母表达质粒,构建诱饵载体p GBKT7-RBX1。将酶切鉴定正确的诱饵载体用PEG/Li Ac法分别转化到酵母菌Y187和AH109中,通过表型筛选检测RBX1对酵母菌有无自激活和毒性作用。转化诱饵质粒的Y187与文库菌AH109杂交,待三叶草形状的合子形成后用营养缺陷型培养基和α-半乳糖苷酶活性实验筛选阳性克隆并测序。结果:成功构建了p GBKT7-RBX1,它对Y187和AH109两种酵母菌既无自激活又无毒性作用。杂交后筛选得到两个阳性克隆,阳性克隆1与莱茵衣藻和拟南芥中氧化还原酶铁硫蛋白亚基的同源性为38%和39%,阳性克隆2与莱茵衣藻中转化抑制剂蛋白的同源性为57%。结论:诱饵载体p GBKT7-RBX1可用于酵母双杂交。成功筛选得到两个阳性克隆,可能是与RBX1相互作用的蛋白。 展开更多
关键词 酵母双杂交 杜氏盐藻 诱饵载体 自激活 环盒子1
在线阅读 免费下载
高温自生压活化制备高微孔率活性炭研究 预览 被引量:2
18
作者 孙康 蒋剑春 +2 位作者 卢辛成 陈超 贾羽洁 《林产化学与工业》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第4期53-58,共6页
以椰壳、杏核、油茶壳和杉木屑为原料,不外加活化剂,采用高温自生压活化法制备微孔发达的活性炭,研究了反应条件对活性炭孔结构和吸附性能的影响。结果表明,以椰壳原料,在自生压力下选择活化温度900℃并保温6 h,制得的活性炭得率13.8%,... 以椰壳、杏核、油茶壳和杉木屑为原料,不外加活化剂,采用高温自生压活化法制备微孔发达的活性炭,研究了反应条件对活性炭孔结构和吸附性能的影响。结果表明,以椰壳原料,在自生压力下选择活化温度900℃并保温6 h,制得的活性炭得率13.8%,微孔率达87.8%,比表面积1 194 m^2/g、总孔容积0.528 cm^3/g、碘吸附值1 280 mg/g和亚甲基蓝吸附值315 mg/g。自生压活化机理研究表明,木质原料热解产生的水蒸气和二氧化碳形成了良好的混合活化气氛,密闭反应器内产生的自生压力有效促进了气固活化反应的进行,明显提高微孔率。为活性炭生产提供了一种无污染,清洁方便,高得率的新型活化方法。 展开更多
关键词 活性炭 自生压 微孔 自活化
在线阅读 下载PDF
大黄鱼Wap65-2基因成熟肽区酵母双杂交诱饵载体的构建及鉴定 预览 被引量:1
19
作者 裘天休 李长红 陈炯 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期108-113,共6页
用大黄鱼Wap65-2基因成熟肽区构建酵母双杂交诱饵质粒,并对诱饵质粒进行自激活活性及毒性检测。从大黄鱼(Larimichthys crocea)肝组织c DNA中扩增Wap65-2基因成熟肽片段(Lc Wap65-2m),将其克隆至p GBKT7载体中,获得诱饵载体p GBKT7-... 用大黄鱼Wap65-2基因成熟肽区构建酵母双杂交诱饵质粒,并对诱饵质粒进行自激活活性及毒性检测。从大黄鱼(Larimichthys crocea)肝组织c DNA中扩增Wap65-2基因成熟肽片段(Lc Wap65-2m),将其克隆至p GBKT7载体中,获得诱饵载体p GBKT7-Lc Wap65-2m,经PCR、酶切和测序验证无误后,转化至酵母菌株Y187中,在营养缺陷培养基中观察重组蛋白的毒性作用和自激活活性,同时利用Western blot分析重组蛋白的表达。成功扩增Lc Wap65-2m,并克隆至p GBKT7载体中;Western blot检测结果表明,p GBKT7-Lc Wap65-2m在酵母细胞中表达诱饵蛋白Lc Wap65-2m;表型筛选结果显示,Lc Wap65-2m无毒性作用和自激活活性。成功构建了Lc Wap65-2m酵母双杂交诱饵载体,为进一步利用酵母双杂交技术筛选与Wap65-2相互作用的蛋白奠定基础。 展开更多
关键词 Wap65-2 酵母双杂交 表达 自激活 毒性
在线阅读 免费下载
弓形虫酵母双杂交cDNA文库构建及与Rop38相互作用蛋白的筛选 预览 被引量:1
20
作者 徐健 马秀英 +1 位作者 郑君 贾洪林 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期561-563,共3页
为筛选与弓形虫棒状体蛋白38基因(Rop38)相互作用的宿主细胞蛋白,本研究利用MatchmakerTM Gold酵母双杂交系统,构建了人成纤维细胞(HFF)和人T细胞(CEM.NKR)的c DNA文库,以构建的p GBKT7-Rop38作为诱饵质粒,采用PEG/Li Ac法转化酵... 为筛选与弓形虫棒状体蛋白38基因(Rop38)相互作用的宿主细胞蛋白,本研究利用MatchmakerTM Gold酵母双杂交系统,构建了人成纤维细胞(HFF)和人T细胞(CEM.NKR)的c DNA文库,以构建的p GBKT7-Rop38作为诱饵质粒,采用PEG/Li Ac法转化酵母菌株Y2H,利用表型筛选法检测Rop38的自激活作用并进行酵母双杂交筛选。结果表明,诱饵蛋白在酵母双杂交系统中无毒性和自激活作用,而且通过酵母双杂交筛选共获得29个与Rop38蛋白相互作用的宿主蛋白,其中HFF文库筛选到20个蛋白,CEM.NKR文库筛选到11个蛋白。本实验为进一步研究Rop38调节宿主细胞基因表达的信号通路奠定了基础。 展开更多
关键词 弓形虫 Rop38 酵母双杂交 自激活
在线阅读 下载PDF
上一页 1 2 5 下一页 到第
使用帮助 返回顶部 意见反馈