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A mimetic peptide ofα2,6-sialyllactose promotes neuritogenesis 预览
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作者 Shuang-Xi Chen Jia-Hui He +3 位作者 Yong-Jian Mi Hui-Fan Shen Melitta Schachner Wei-Jiang Zhao 《中国神经再生研究:英文版》 SCIE CAS CSCD 2020年第6期1058-1065,共8页
Oxidative stress contributes to the pathogenesis of neurodegenerative diseases.With the aim to find reagents that reduce oxidative stress,a phage display library was screened for peptides mimicking a2,6-sialyllactose(... Oxidative stress contributes to the pathogenesis of neurodegenerative diseases.With the aim to find reagents that reduce oxidative stress,a phage display library was screened for peptides mimicking a2,6-sialyllactose(6'-SL),which is known to beneficially influence neural functions.Using Sambucus nigra lectin,which specifically binds to 6'-SL,we screened a phage display library and found a peptide comprising identical sequences of 12 amino acids.Mimetic peptide,reverse peptide and scrambled peptide were tested for inhibition of 6'-SL binding to the lectin.Indeed,lectin binding to 6'-SL was inhibited by the most frequently identified mimetic peptide,but not by the reverse or scrambled peptides,showing that this peptide mimics 6'-SL.Functionally,mimetic peptide,but not the reverse or scrambled peptides,increased viability and expression of neural cell adhesion molecule L1 in SK-N-SH human neuroblastoma cells,and promoted survival and neurite outgrowth of cultured mouse cerebellar granule neurons challenged by H_20_2-induced oxidative stress.The combined results indicate that the 6'-SL mimetic peptide promotes neuronal survival and neuritogenesis,thus raising hopes for the treatment of neurodegenerative diseases.This study was approved by the Medical Ethics Committee of Shantou University Medical College,China(approval No.SUMC 2014-004)on February 20,2014. 展开更多
关键词 central nervous system cerebellar granule neurons mimetic peptide neural cell adhesion molecule L1 NEURITOGENESIS neurodegenerative disease neuronal survival oxidative stress phage display Sambucus nigra lectin α2 6-sialyllactose
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一株宽谱裂解性溶藻弧菌噬菌体ФV170的分离鉴定及生物学特性 被引量:1
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作者 付汉清 林茂 +3 位作者 翟少伟 李忠琴 王淑红 程聪 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期819-828,共10页
【背景】溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)是水产养殖中重要的条件致病菌,对海水养殖业造成了极大的危害。传统的抗生素疗法引发的耐药问题已经成为全球面临的严峻挑战之一,而作为可替代抗生素的噬菌体疗法已被证实能够有效治疗弧菌病。... 【背景】溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)是水产养殖中重要的条件致病菌,对海水养殖业造成了极大的危害。传统的抗生素疗法引发的耐药问题已经成为全球面临的严峻挑战之一,而作为可替代抗生素的噬菌体疗法已被证实能够有效治疗弧菌病。【目的】深入研究溶藻弧菌噬菌体ФV170的生物学特性,为该菌株在水产动物病害控制中的应用提供数据支持。【方法】以溶藻弧菌V170为宿主菌,采用斑点法从凡纳滨对虾养殖水体中筛选噬菌体,并以双层平板法对噬菌体进行纯化、生长、效价等方面的研究;利用电镜观察噬菌体形态;通过酶切方法分析噬菌体的基因组大小及其类型。【结果】分离得到一株宽谱裂解性噬菌体ФV170,其噬菌斑边缘整齐且通透,12 h直径达1.5 mm。鉴定结果显示,噬菌体ФV170头部为正廿面体的立体对称结构,直径为60 nm-65 nm,尾部长为65 nm-75 nm,宽14 nm-18 nm,核酸类型为dsDNA,基因组大小约为45 kb,对氯仿不敏感,属于有尾噬菌体目(Caudovirales)肌尾噬菌体科(Myoviridae)。此外,噬菌体ФV170可裂解15株溶藻弧菌中的7株,属于种内宽谱;最佳感染复数为0.01;一步生长曲线显示潜伏期为10 min,裂解量为101.3;对65°C以上温度敏感。【结论】分离得到一株宽谱裂解性溶藻弧菌噬菌体,该噬菌体具有治疗海水养殖过程中溶藻弧菌病的潜力。 展开更多
关键词 噬菌体 溶藻弧菌 噬菌体治疗 凡纳滨对虾 生物学特性
噬菌体控制主要肠杆菌感染的研究进展 预览
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作者 任宏宇 李振 +4 位作者 李晓宇 耿慧君 王丽丽 李淑英 徐永平 《国外医药:抗生素分册》 CAS 2019年第5期430-435,共6页
肠杆菌科病原菌是临床上分离量最高的细菌,常引起肠道、腹腔、泌尿道、生殖道和呼吸道等多种感染,临床治疗通常以抗生素为主。然而,随着抗生素的广泛使用,在肠杆菌科产生了大量的耐药性菌株,对临床治疗带来了极大地困扰。如今,肠杆菌科... 肠杆菌科病原菌是临床上分离量最高的细菌,常引起肠道、腹腔、泌尿道、生殖道和呼吸道等多种感染,临床治疗通常以抗生素为主。然而,随着抗生素的广泛使用,在肠杆菌科产生了大量的耐药性菌株,对临床治疗带来了极大地困扰。如今,肠杆菌科细菌的耐药问题越来越引起世界医疗卫生机构的关注与重视,相关研究人员开始致力于寻找并开发能够替代抗生素的治疗方式,其中,噬菌体作为一种天然抗菌生物,再次成为人们关注的热点。本文就我国临床上分离量最高的三种肠杆菌(大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌)的噬菌体治疗进行总结,阐述噬菌体在控制主要肠杆菌感染的相关研究进展。 展开更多
关键词 噬箘体 肠杆菌感染 噬箘体疗法 细菌耐药性
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基于纳米抗体的酶联免疫吸附法检测食品中金黄色葡萄球菌肠毒素B 预览
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作者 郭鹏利 路云龙 +5 位作者 李想 李丽华 任孝茹 陈利莉 张敢为 季艳伟 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第20期250-255,共6页
在前期已获得抗金黄色葡萄球菌肠毒素B(Staphylococcal enterotoxin B,SEB)纳米抗体的基础上,建立一种用于检测食品中SEB的酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA),为食品及农产品质量监管提供技术支持。优化表达条件... 在前期已获得抗金黄色葡萄球菌肠毒素B(Staphylococcal enterotoxin B,SEB)纳米抗体的基础上,建立一种用于检测食品中SEB的酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA),为食品及农产品质量监管提供技术支持。优化表达条件后,通过大肠杆菌原核表达获得抗SEB的纳米抗体B7;以纳米抗体B7作为捕获抗体,以噬菌体展示的抗SEB纳米抗体B6为检测识别元件,建立夹心ELISA方法;以牛奶、牛肉及西瓜汁为样本对其进行方法学评价。结果显示,纳米抗体B7在大肠杆菌中成功表达,表达量为6.2 mg/L;该方法在16~1 024 ng/mL具有良好的线性关系(R^2=0.990 4),最低检出限为(9.58±0.07)ng/mL;该方法与SEC有42.18%的交叉,与SEA及另外3株金黄色葡萄球菌无明显交叉;牛奶、牛肉和西瓜汁的加标回收率分别为87.26%~108.43%,79.36%~106.56%和83.81%~99.43%。该方法以纳米抗体作为识别元件,可应用于实际食品及农产品中的SEB高灵敏检测,具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌肠毒素B 纳米抗体 噬菌体 酶联免疫吸附法 高特异性
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Bacteriophages Isolated in China for the Control of Pectobacterium carotovorum Causing Potato Soft Rot in Kenya
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作者 Peter Muturi Junping Yu +3 位作者 Alice Nyambura Maina Samuel Kariuki Frantis B.Mwaura Hongping Wei 《中国病毒学:英文版》 CAS CSCD 2019年第3期287-294,共8页
Soft rot is an economically significant disease in potato and one of the major threats to sustainable potato production.This study aimed at isolating lytic bacteriophages and evaluating methods for and the efficacy of... Soft rot is an economically significant disease in potato and one of the major threats to sustainable potato production.This study aimed at isolating lytic bacteriophages and evaluating methods for and the efficacy of applying phages to control potato soft rot caused by Pectobacterium carotovorum.Eleven bacteriophages isolated from soil and water samples collected in Wuhan,China,were used to infect P.carotovorum host strains isolated from potato tubers showing soft rot symptoms in Nakuru county,Kenya.The efficacy of the phages in controlling soft rot disease was evaluated by applying individual phage strains or a phage cocktail on potato slices and tubers at different time points before or after inoculation with a P.carotovorum strain.The phages could lyse 20 strains of P.carotovorum,but not Pseudomonas fluorescens control strains.Among the 11 phages,Pectobacterium phage Wc5r,interestingly showed cross-activity against Pectobacterium atrosepticum and two phage-resistant P.carotovorum strains.Potato slice assays showed that the phage concentration and timing of application are crucial factors for effective soft rot control.Phage cocktail applied at a concentration of 1×10^9 plaque-forming units per milliliter before or within an hour after bacterial inoculation on potato slices,resulted in>90%reduction of soft rot symptoms.This study provides a basis for the development and application of phages to reduce the impact of potato soft rot disease. 展开更多
关键词 PECTOBACTERIUM carotovorum POTATO soft ROT BACTERIOPHAGES PHAGE resistance
Identifying peptides that specifically bind to MDA-MB-468 breast cancer cells 预览
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作者 Xiaoli Dai Qing Zhang +1 位作者 Huili Zhang Hongtao Xu 《肿瘤学与转化医学:英文版》 2019年第3期119-122,共4页
Objective To use phage display technique to screen for small polypeptides that specifically bind to MDA-MB-468 cells.Methods A random heptapeptide phage display library was used for in vitro screening against target M... Objective To use phage display technique to screen for small polypeptides that specifically bind to MDA-MB-468 cells.Methods A random heptapeptide phage display library was used for in vitro screening against target MDA-MB-468 cells.SC1180 cells were used for subtractive selection.High-affinity phage DNA was extracted,and peptides were sequenced.Results(1)The original library capacity of the polypeptide library was 2×10^13 pfu/mL,and phage titer was determined over 4 rounds.The average library capacity was 1.8×10^13 pfu/mL.(2)Subtractive screening showed that the phage library volume of each round was 1.8×10^12 pfu/mL,and that there was an enrichment effect in each subsequent round.Screening was stopped after the fourth round.(3)PCR results showed that the size of 39 products(78.0%)and 11 products(22%),were 300 bp and 258 bp,respectively.Thirty positive phages were selected for DNA extraction and sequencing,and the corresponding amino acid sequence was LMTRXSK.The sequence had no homology with known genes or proteins.Conclusion Using the phage display technique,we identified that the short polypeptide,LMTRXSK,specifically binds MDA-MB-468 human breast cancer cells. 展开更多
关键词 PHAGE BREAST cancer specific binding PEPTIDE
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病毒基因工程药物研究进展 预览
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作者 李远远 王鋆坦 +1 位作者 李彩霞 徐钟 《国外医药:抗生素分册》 CAS 2019年第4期323-328,共6页
随着病原微生物耐药性日趋严重,以及疑难病症的个性化治疗需求增多,利用活体微生物药物进行疾病治疗越来越被关注。采用现代生物技术和合成生物学手段,将具有疾病治疗作用的效应物分子的合成基因导入微生物中,创造具有靶向治疗效果的活... 随着病原微生物耐药性日趋严重,以及疑难病症的个性化治疗需求增多,利用活体微生物药物进行疾病治疗越来越被关注。采用现代生物技术和合成生物学手段,将具有疾病治疗作用的效应物分子的合成基因导入微生物中,创造具有靶向治疗效果的活体微生物药物这是前沿性研究领域。本文阐述以病毒为治疗载体的活体药物的研究进展,包括用于疾病治疗的病毒的种类和所携带效应物的表达调控,为抗生素类小分子药物替代治疗提供借鉴方法。 展开更多
关键词 噬菌体 载体 靶向治疗 药物
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噬菌体在鲑鳟鱼细菌病治疗中的应用研究进展 预览
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作者 曹永生 李绍戊 +2 位作者 王荻 卢彤岩 牟振波 《水产学杂志》 CAS 北大核心 2019年第4期1-8,共8页
噬菌体是一种营细菌生存的病毒,具有感染和裂解细菌的特性,且杀菌的高度特异性与细菌耐药无关,是可取代抗生素控制鲑鳟鱼细菌性疾病的新宠。本文通过介绍噬菌体的生物学特性,综述鲑鳟鱼致病菌相关的噬菌体研究新进展,结合鲑鳟鱼致病菌... 噬菌体是一种营细菌生存的病毒,具有感染和裂解细菌的特性,且杀菌的高度特异性与细菌耐药无关,是可取代抗生素控制鲑鳟鱼细菌性疾病的新宠。本文通过介绍噬菌体的生物学特性,综述鲑鳟鱼致病菌相关的噬菌体研究新进展,结合鲑鳟鱼致病菌的特性探讨了噬菌体研究的问题及应对措施,以期为噬菌体在鲑鳟鱼细菌病防治中的应用提供参考。 展开更多
关键词 噬菌体 鲑鳟鱼 细菌性疾病
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副溶血性弧菌广谱裂解性噬菌体的筛选及其在海产品安全控制中的应用 预览
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作者 郑小双 高璐 +2 位作者 张辉 饶胜其 杨振泉 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第10期141-148,共8页
以致病性副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,Vp)菌株作为宿主,从污水样品中分离裂解性噬菌体,并对其生物学特性及其在模拟污染黄鱼中Vp的抑菌作用进行研究。结果获得5株广谱裂解性噬菌体,形态鉴定属于肌尾噬菌体科(Myoviridae)、长... 以致病性副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,Vp)菌株作为宿主,从污水样品中分离裂解性噬菌体,并对其生物学特性及其在模拟污染黄鱼中Vp的抑菌作用进行研究。结果获得5株广谱裂解性噬菌体,形态鉴定属于肌尾噬菌体科(Myoviridae)、长尾噬菌体科(Siphoviridae)和盖噬菌体科(Corticoviridae),裂解谱结果显示单噬菌体分别可以对5~24株不同来源的Vp菌株产生裂解效应,由5株噬菌体构成的混合物VppMIX能裂解所有Vp菌株(42株)。噬菌体分离株在60℃和pH 4~10条件下具有良好的裂解活性。单噬菌体不敏感突变频率(bacteriophage insensitive mutant frequency,BIMF)在10-3~10-5范围内,但VppMIX能够显著降低的BIMF值达到10^-6。应用Vp模拟污染黄鱼片作为模型研究VppMIX的抑菌效果,结果显示在25℃恒温保藏12 h后,不同剂量VppMIX处理的黄鱼样品中Vp载量比对照组(未处理)降低了1.41~4.98(lg(CFU/g))(P<0.01)。本研究为海产品中致病性Vp的控制提供了新型生物抑菌剂。 展开更多
关键词 副溶血性弧菌 噬菌体 广谱 抑菌作用
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乳酸乳球菌噬菌体与宿主相互作用研究进展 预览
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作者 赵慧莹 李言郡 +3 位作者 陈苏 欧凯 王健 何国庆 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2019年第12期331-334,340共5页
发酵乳制品主要依靠乳酸菌对牛奶酸化并形成独特的风味。然而,乳酸菌因易受噬菌体感染而导致乳制品发酵缓慢甚至失败,这对乳制品行业造成巨大的经济损失。乳酸乳球菌是发酵乳制品行业中应用十分广泛的一种乳酸菌,目前其宿主上的受体分... 发酵乳制品主要依靠乳酸菌对牛奶酸化并形成独特的风味。然而,乳酸菌因易受噬菌体感染而导致乳制品发酵缓慢甚至失败,这对乳制品行业造成巨大的经济损失。乳酸乳球菌是发酵乳制品行业中应用十分广泛的一种乳酸菌,目前其宿主上的受体分子和相应噬菌体受体结合蛋白结构分析方面的研究已经取得一定进展。这些乳酸乳球菌模型系统对加深其他乳酸菌噬菌体-宿主相互作用的认识、揭示不同乳酸菌噬菌体-宿主相互作用机制的异同提供理论依据。本文综述了目前所发现的乳酸乳球菌噬菌体及其宿主之间的相互作用,探讨受体主要成分与编码受体结合蛋白基因的研究,为研究其他乳酸菌噬菌体种群及防治措施提供一定的理论基础。 展开更多
关键词 乳酸乳球菌 噬菌体 受体 受体结合蛋白
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噬菌体在饲料中的应用及研究进展 预览
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作者 袁玉玉 丛聪 +4 位作者 渠坤丽 李晓宇 王丽丽 李淑英 徐永平 《国外医药:抗生素分册》 CAS 2019年第5期425-429,共5页
细菌耐药性是目前全球最紧迫的公共卫生问题之一,主要原因是抗生素的滥用特别是在畜牧养殖和水产养殖的滥用。随着饲用抗生素的限制使用亟待寻求一种新的抗菌制剂以替代抗生素。噬菌体能特异性裂解细菌,且无毒无害、安全高效。可开发为... 细菌耐药性是目前全球最紧迫的公共卫生问题之一,主要原因是抗生素的滥用特别是在畜牧养殖和水产养殖的滥用。随着饲用抗生素的限制使用亟待寻求一种新的抗菌制剂以替代抗生素。噬菌体能特异性裂解细菌,且无毒无害、安全高效。可开发为一种生态友好的抗菌药。本文对噬菌体治疗畜禽细菌性疾病的相关研究进行总结,以及噬菌体作为饲料添加剂在畜牧养殖和水产养殖的应用效果和相关专利进行综述,并对噬菌体作为饲料添加剂的应用前景进行展望。以期为噬菌体及其制剂在保障动物性食品安全和养殖业抗生素替代品的研究提供一定的参考。 展开更多
关键词 噬菌体 饲料 应用
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Improvement in affinity and thermostability of a fully human antibody against interleukin-17A by yeast-display technology and CDR grafting
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作者 Wei Sun Zhaona Yang +5 位作者 Heng Lin Ming Liu Chenxi Zhao Xueying Hou Zhuowei Hu Bing Cuin 《药学学报:英文版》 CSCD 2019年第5期960-972,共13页
Monoclonal antibodies(m Abs) are widely used in many fields due to their high specificity and ability to recognize a broad range of antigens. IL-17 A can induce a rapid inflammatory response both alone and synergistic... Monoclonal antibodies(m Abs) are widely used in many fields due to their high specificity and ability to recognize a broad range of antigens. IL-17 A can induce a rapid inflammatory response both alone and synergistically with other proinflammatory cytokines. Accumulating evidence suggests that therapeutic intervention of IL-17 A signaling offers an attractive treatment option for autoimmune diseases and cancer. Here, we present a combinatorial approach for optimizing the affinity and thermostability of a novel anti-h IL-17 A antibody. From a large na?ve phage-displayed library, we isolated the anti-IL-17 A m Ab 7 H9 that can neutralize the effects of recombinant human IL-17 A. However, the modest neutralization potency and poor thermostability limit its therapeutic applications. In vitro affinity optimization was then used to generate 8 D3 by using yeast-displayed random mutagenesis libraries.This resulted in four key amino acid changes and provided an approximately 15-fold potency increase in a cell-based neutralization assay. Complementarity-determining regions(CDRs) of 8 D3 were further grafted onto the stable framework of the hu Fv 4 D5 to improve thermostability. The resulting hybrid antibody9 NT/S has superior stabilization and affinities beyond its original antibody. Human fibrosarcoma cellbased assays and in vivo analyses in mice indicated that the anti-IL-17 A antibody 9 NT/S efficiently inhibited the secretion of IL-17 A-induced proinflammatory cytokines. Therefore, this lead anti-IL-17 A m Ab might be used as a potential best-in-class candidate for treating IL-17 A related diseases. 展开更多
关键词 Monoclonal ANTIBODY ANTIBODY maturation Phage DISPLAY YEAST surface DISPLAY CDR GRAFTING ANTIBODY engineering
小肠结肠炎耶尔森氏菌噬菌体的分离鉴定及在鲜切蔬菜中的靶向抑菌作用 预览
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作者 张羽嘉 薛宇 +3 位作者 高璐 欧阳敏 肖丽霞 杨振泉 《美食研究》 北大核心 2019年第2期43-47,共5页
为研发食品中小肠结肠炎耶尔森氏菌(Y. enterocolitica,Ye)的生物抑菌剂,对从动物粪便样品中分离纯化的1株Ye噬菌体Yep-YZU 01进行生物学特性、p H、热稳定性分析,并探究Yep-YZU 01在鲜切蔬菜模型中的靶向抑菌效果。透射显微电镜结果表... 为研发食品中小肠结肠炎耶尔森氏菌(Y. enterocolitica,Ye)的生物抑菌剂,对从动物粪便样品中分离纯化的1株Ye噬菌体Yep-YZU 01进行生物学特性、p H、热稳定性分析,并探究Yep-YZU 01在鲜切蔬菜模型中的靶向抑菌效果。透射显微电镜结果表明:Yep-YZU 01头部呈现正六面体结构,具有带尾鞘的尾巴,形态归属于肌尾噬菌体科;Yep-YZU 01具有跨种裂解特性,能同时裂解Ye及福氏志贺氏菌;一步生长曲线测定结果显示Yep-YZU 01潜伏期约为10 min,爆发期约为120 min;在p H为7~10条件下Yep-YZU 01存活率较高,最适温度在40℃以下。应用培养基及鲜切蔬菜作为模型测定Yep-YZU 01靶向抑菌效果,结果能使鲜切莴苣中Ye总数下降2. 10 lg CFU/g。获得的噬菌体Yep-YZU 01具有广谱高效的裂解特性,在鲜切蔬菜中Ye的生物控制中具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 小肠结肠炎耶尔森氏菌 噬菌体 鲜切蔬菜 抑菌 生物控制 烹饪卫生
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侵染3株模式豆科根瘤菌的噬菌体生物学特性
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作者 刘俊杰 刘株秀 +3 位作者 于浩 姚钦 于镇华 王光华 《应用生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期2775-2782,共8页
豆科作物根瘤菌被噬菌体浸染后,在一定程度上会引起根瘤菌数目和结瘤量的降低,进而导致共生固氮作用弱化和作物产量的显著下降.然而,目前关于根瘤菌噬菌体的相关研究报道较少.本研究以3株模式根瘤菌,即慢生型大豆根瘤菌、中华大豆根瘤... 豆科作物根瘤菌被噬菌体浸染后,在一定程度上会引起根瘤菌数目和结瘤量的降低,进而导致共生固氮作用弱化和作物产量的显著下降.然而,目前关于根瘤菌噬菌体的相关研究报道较少.本研究以3株模式根瘤菌,即慢生型大豆根瘤菌、中华大豆根瘤菌和中华苜蓿根瘤菌为宿主,于黑土农田土壤中采用双层平板培养法从每个宿主细菌分离3株噬菌体,共分离获得9株根瘤菌噬菌体,对其形态结构及生物学特征进行综合分析.结果表明:侵染苜蓿根瘤菌噬菌体(SMM)和慢生型根瘤菌噬菌体(BDM)属于肌尾噬菌体科,而侵染中华根瘤菌噬菌体(SSS)隶属于长尾噬菌体科.9株噬菌体的最佳感染复数均在0.001~1.0的变化范围内.一步生长曲线结果显示,BDM的潜伏期和爆发期明显长于SMM和SSS,但获得的裂解量最小.根瘤菌噬菌体在30~40℃和中性pH条件下侵染活性最大.对比发现,侵染同一宿主的噬菌体生物学特征虽存在一定差异,但分异度远小于不同宿主噬菌体间的差异. 展开更多
关键词 根瘤菌 噬菌体 生物学特性 豆科
Generation of Monoclonal Antibody to Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus GP4 Protein and Identification of Its Minic Epitopes 预览
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作者 Liu Peng Yuan Qing +7 位作者 Li Wei-qun Yin Xue-ting Ghulam Abbas Li Peng-chong Zhang Chao-fan Huang Xiao-dan Zhang Rui-li Li Guang-xing 《东北农业大学学报:英文版》 CAS 2019年第2期49-59,共11页
Porcine reproductive and respiratory syndrome virus(PRRSV)GP4 protein was prokaryotically expressed,and used as an antigen to immunize six-week-old BALB/c female mice.With conventional cell fusion method,an anti-PRRSV... Porcine reproductive and respiratory syndrome virus(PRRSV)GP4 protein was prokaryotically expressed,and used as an antigen to immunize six-week-old BALB/c female mice.With conventional cell fusion method,an anti-PRRSV GP4 protein monoclonal antibody(Mab)5F12 was successfully prepared.It was identified as IgG2b subclass and had better stability and specificity,which not only responded with recombinant PRRSV GP4 protein,but also with PRRSV.Phage display technique had varieties of applications,in particular,the identification of key antigen epitopes for the development of therapeutic and diagnostic reagents and vaccines.In this study,Mab-5F12 was used as the target for biopanning a 12-mer phage random peptide library.After four rounds of biopanning,two phage-displayed peptides,named P-A and P-G(AKFEVCSPVVLG and GVNQENMLHFSF)were identified that recognized Mab-5F12 specifically.Sequence analysis showed that one or more of the peptides exhibited partial sequence similarity to the native GP4 protein sequence,which corresponded to 69-80 and 84-95 aa segments of the HP-PRRSV GP4 protein.Furthermore,real-time quantitative RT-PCR and indirect immunofluorescence assay indicated consistently the abilities of P-A and P-G to block viral infection in Marc-145 cells and they could function as antiviral agents for PRRSV. 展开更多
关键词 PORCINE REPRODUCTIVE and respiratory syndrome virus(PRRSV) GP4 protein MONOCLONAL antibody PHAGE display technique viral infection
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大肠埃希菌CRISPRs间隔序列的来源研究
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作者 梁文娟 崔聪聪 +5 位作者 段广才 刘慧莹 徐亚珂 郗园林 杨海燕 陈帅印 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2019年第2期137-140,共4页
目的研究大肠埃希菌全基因组中规律成簇的间隔短回文重复序列(CRISPRs)的间隔序列分布及来源规律。方法通过BLAST、CRISPRs finder、ClustalX和CRISPRTarget分析CRISPR/Cas、间隔序列及其来源。结果 203株大肠埃希菌中74.4%含有I-E CRIS... 目的研究大肠埃希菌全基因组中规律成簇的间隔短回文重复序列(CRISPRs)的间隔序列分布及来源规律。方法通过BLAST、CRISPRs finder、ClustalX和CRISPRTarget分析CRISPR/Cas、间隔序列及其来源。结果 203株大肠埃希菌中74.4%含有I-E CRISPR/Cas,9.4%含有I-F CRISPR/Cas,17.2%存在CRISPR3-4;CRISPR1,CRISPR2,CRISPR3和CRISPR4的间隔序列数目范围分别为1-25、1-27、4-7和2-22;其独特间隔序列数目分别为339、346、57和66。CRISPRTarget分析I-E和I-F CRISPR/Cas的间隔序列分别匹配816条质粒和293条噬菌体,2 428条质粒和139条噬菌体,差异有统计学意义(χ~2=319.30,P<0.01)。结论大肠埃希菌中CRISPR/Cas分布广泛,I-E和I-F CRISPR/Cas可能发挥不同的免疫功能。 展开更多
关键词 规律成簇的间隔短回文重复序列 间隔序列 噬菌体 质粒 大肠埃希菌
溶藻弧菌烈性噬菌体分离鉴定及其抑菌作用研究 预览
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作者 欧阳敏 高璐 +2 位作者 高亚军 饶胜其 杨振泉 《扬州大学学报:农业与生命科学版》 CAS 北大核心 2019年第4期74-79,88共7页
溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus, VA)是水产品中普遍存在的人兽共患病原菌。为研制水产品中VA的生物抑菌剂,以溶藻弧菌VAf 211为宿主菌,应用双层平板法从扬州农贸市场的宰鱼污水中分离纯化获得裂解性噬菌体,研究其微观形态、最佳感染复... 溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus, VA)是水产品中普遍存在的人兽共患病原菌。为研制水产品中VA的生物抑菌剂,以溶藻弧菌VAf 211为宿主菌,应用双层平板法从扬州农贸市场的宰鱼污水中分离纯化获得裂解性噬菌体,研究其微观形态、最佳感染复数、一步生长曲线、裂解谱等生物学特征,并在鱼汁模型中测定噬菌体对VA的抑菌效应以及对VA生物被膜形成的影响。结果分离到1株溶藻弧菌烈性噬菌体,将其命名为VAPf211,透射电镜观察显示其形态归属于肌尾噬菌体科,最佳感染复数为0.01,潜伏期约为10 min,裂解期为50 min,平均裂解量为34.80 PFU·细胞^-1。温度和pH稳定性试验结果显示VAPf211在温度40~60℃、pH值4.0~9.0范围内活性稳定。抑菌试验结果显示噬菌体VAPf211能显著抑制宿主菌在鱼汁中的增长,并能抑制VA生物被膜的形成。这一研究提示VAPf211具有良好的应用前景,为水产食品中溶藻弧菌的减除提供了新型生物减菌剂。 展开更多
关键词 溶藻弧菌 生物被膜 噬菌体 生物防治
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噬菌体在多重耐药菌创伤性感染治疗中的作用 预览
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作者 褚国煜 李晓宇 +2 位作者 王丽丽 李淑英 徐永平 《国外医药:抗生素分册》 CAS 2019年第5期441-444,共4页
细菌的抗生素耐药性日渐成为人类生存的一大威胁。抗生素在人类和动植物中的过度使用,使细菌的耐药性由单一的发展成多重的。目前常用的抗生素已经无法抑制多重耐药菌的生长繁殖。新型药物的开发需要的周期较长,投入成本高,因此噬菌体... 细菌的抗生素耐药性日渐成为人类生存的一大威胁。抗生素在人类和动植物中的过度使用,使细菌的耐药性由单一的发展成多重的。目前常用的抗生素已经无法抑制多重耐药菌的生长繁殖。新型药物的开发需要的周期较长,投入成本高,因此噬菌体治疗再次得到学者们的关注。目前,在美国已有一例通过静脉施用噬菌体联合抗生素治愈多重耐药的鲍曼不动杆菌的成功案例,为噬菌体治疗开辟了新思路。 展开更多
关键词 多重耐药细菌 噬菌体 抗生素 耐药性
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Specific and Selective Bacteriophages in the Fight against Multidrugresistant Acinetobacter baumannii
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作者 Natalia Baginska Anna Pichlak +1 位作者 Andrzej Gorski Ewa Jonczyk-Matysiak 《中国病毒学:英文版》 CAS CSCD 2019年第4期347-357,共11页
Acinetobacter baumannii causes serious infections especially in immunocompromised and/or hospitalized patients.Several A.baumannii strains are multidrug resistant and infect wounds,bones,and the respiratory tract.Curr... Acinetobacter baumannii causes serious infections especially in immunocompromised and/or hospitalized patients.Several A.baumannii strains are multidrug resistant and infect wounds,bones,and the respiratory tract.Current studies are focused on finding new effective agents against A.baumannii.Phage therapy is a promising means to fight this bacterium and many studies on procuring and applying new phages against A.baumannii are currently being conducted.As shown in animal models,phages against multidrug-resistant A.baumannii may control bacterial infections caused by this pathogen and may be a real hope to solve this dangerous health problem. 展开更多
关键词 ACINETOBACTER BAUMANNII BACTERIOPHAGES PHAGE therapy MULTIDRUG resistance(MDR)
噬菌体AB3及其裂解酶作用于鲍曼不动杆菌生物被膜的体外研究
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作者 张劼 李秀娟 《国际呼吸杂志》 2019年第1期8-12,共5页
目的比较鲍曼不动杆菌噬菌体AB3、裂解酶LysAB3及抗生素在降解鲍曼不动杆菌生物被膜效率的差异。方法扩增LysAB3基因序列前端的354bp(118aa),以pET28a(+)为载体构建重组质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,纯化后命名为裂解酶蛋白LysAB3。... 目的比较鲍曼不动杆菌噬菌体AB3、裂解酶LysAB3及抗生素在降解鲍曼不动杆菌生物被膜效率的差异。方法扩增LysAB3基因序列前端的354bp(118aa),以pET28a(+)为载体构建重组质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,纯化后命名为裂解酶蛋白LysAB3。用结晶紫法及噻唑蓝(MTT)法测定经噬菌体AB3、LysAB3及各抗生素组处理后,鲍曼不动杆菌生物被膜及被膜菌的差异;并用激光共聚焦显微镜观察各组生物被膜形态及厚度的变化。结果噬菌体AB3及LysAB3处理24h后,鲍曼不动杆菌生物被膜明显降解,被膜活菌数量明显下降。结论噬菌体AB3及其编码的裂解酶LysAB3在体外实验中,可有效降解鲍曼不动杆菌生物被膜及被膜菌。 展开更多
关键词 裂解酶类 鲍氏不动杆菌 噬菌体 生物被膜
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