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Characterization of Angiotensin-? Converting Enzyme Inhibiting Peptide from Venerupis philippinarum with Nano-Liquid Chromatography in Combination with Orbitrap Mass Spectrum Detection and Molecular Docking 预览
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作者 SHI Lei WU Tizhi +4 位作者 SHENG Naijuan YANG Li WANG Qian LIU Rui WU Hao 《中国海洋大学学报:英文版》 SCIE CAS CSCD 2017年第3期473-478,共6页
从蛋白质 hydrolysates 的肽混合的复杂性和差异使他们的描述困难。在这研究,把 nano LC-MS/MS 与分子的停靠相结合的一个方法被用于与血管收缩素识别并且描绘肽 -- 变换从 Venerupis 禁止活动的酶(ACE-I ) philippinarum hydrolysate... 从蛋白质 hydrolysates 的肽混合的复杂性和差异使他们的描述困难。在这研究,把 nano LC-MS/MS 与分子的停靠相结合的一个方法被用于与血管收缩素识别并且描绘肽 -- 变换从 Venerupis 禁止活动的酶(ACE-I ) philippinarum hydrolysate。第一, V 的乙醇上层清液。philippinarum hydrolysate 在联合与象离子交换层析和高效液体层析那样的色析法的方法被分开成活跃部分。然后,从活跃部分的七肽根据 MS/MS 的寻找的结果被识别对蛋白质数据库的系列。肽被综合并且使试金遭到了到 ACE-I-inhibition。肽 NTLTLIDTGIGMTK 与 5.75 的 IC50 显示出最高的力量摩尔 L <sup>1</sup> 。分子的停靠分析证明禁止肽 NTLTLIDTGIGMTK 的 ACE-I 与残余结合 ACE-I 的 Glu123, Glu403, Arg522, Glu376, Gln281 和 Asn285。因此,活跃的肽能与现在的方法而非传统的纯化和鉴定策略被识别。识别有方法的另外的酶和受体目标在这开发了学习的另外的导出食物的肽可能也是可行的。 展开更多
关键词 ACE-I 禁止者 禁止肽的 ACE-I 描述 nano-LC-MS/MS 分子的停靠 Venerupis philippinarum
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冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)蛋白结构特性分析
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作者 匡志新 柴博雅 +7 位作者 李春艳 孙宏亮 朱美宣 熊晋峰 谢冰丽 王帆 解辉 邹勇 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第4期375-379,共5页
目的分析冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)蛋白的结构特性。方法 SDS-PAGE电泳分离4批冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)原液,电泳条带经nano LC-MS/MS进行蛋白鉴定,Native-PAGE分析病毒颗粒的完整性,并分析蛋白相对分子质量。同时进行N-末端... 目的分析冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)蛋白的结构特性。方法 SDS-PAGE电泳分离4批冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)原液,电泳条带经nano LC-MS/MS进行蛋白鉴定,Native-PAGE分析病毒颗粒的完整性,并分析蛋白相对分子质量。同时进行N-末端氨基酸序列分析。结果 SDS-PAGE分析可见5个主条带,分别为狂犬病毒G、M、N、P蛋白及G蛋白二聚体(G-1),经nano LC-MS/MS鉴定,确定相对分子质量分别为74 000、21 885、57 287、40 934及141 067,各结构蛋白均包含在病毒颗粒中,M、N、P、G蛋白的N-末端起始氨基酸序列为分别为MNFLR、MDADR、MSKIF、MVPQA,与预期一致。结论 4批冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)原液所含结构蛋白源于狂犬病病毒。 展开更多
关键词 狂犬病疫苗 结构蛋白 SDS-PAGE分析 nano LC-MS/MS 氨基酸序列分析 VERO细胞
湖南永州尖吻蝮蛇蛇毒的蛋白组分及毒性分析 预览
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作者 肖纲 刘俊琦 +2 位作者 夏雨 张志阳 孙志良 《湖南农业大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期541-547,共7页
采用Nano–LC–ESI–MS/MS蛋白鉴定技术对湖南永州尖吻蝮蛇蛇毒蛋白组分进行质谱分析,应用常规体外试管法对尖吻蝮蛇蛇毒体外溶血值进行检测,采用改良寇式法对尖吻蝮蛇蛇毒LD50进行测定。结果显示:尖吻蝮蛇蛇毒含有50种蛋白,蛋白相对分... 采用Nano–LC–ESI–MS/MS蛋白鉴定技术对湖南永州尖吻蝮蛇蛇毒蛋白组分进行质谱分析,应用常规体外试管法对尖吻蝮蛇蛇毒体外溶血值进行检测,采用改良寇式法对尖吻蝮蛇蛇毒LD50进行测定。结果显示:尖吻蝮蛇蛇毒含有50种蛋白,蛋白相对分子质量集中在1.0×104~2.0×104(46.9%)、4.0×104~5.0×104(22.4%)、2.0×104~3.0×104(10.6%)和7.0×104~8.0×104(7.6%),其中代表性的高丰度蛋白有蛇毒金属蛋白酶A(11.7%)、蛇毒金属蛋白酶H1(9.8%)、蕲蛇类凝血酶–2(7.3%)、抗凝血酶A–A亚基(6.8%),低丰度蛋白(<0.1%)有Ecto–5'–核苷酸酶、碱性磷脂酶A2 DAV–N6、生长分化因子11;蛇毒引起红细胞溶血的最低质量浓度为60.00μg/mL,尖吻蝮蛇蛇毒对KM小鼠的LD50为7.179 6 mg/kg,攻毒小鼠出现呼吸急促、躁动不安、注射部位出现奇特瘙痒和大面积溃烂,至死亡。 展开更多
关键词 尖吻蝮蛇蛇毒 SDS–PAGE NanoLC–ESI–MS/MS 蛇毒金属蛋白 半数致死量 湖南永州
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大豆种子蛋白质组样品制备方法研究 被引量:1
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作者 林杨杰 赵明 +1 位作者 杨生超 潘映红 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期810-817,共8页
以中黄13大豆成熟种子为材料,采用苯酚甲醇醋酸铵法、三氯乙酸丙酮法和尿素硫脲法进行了蛋白质初提与复提,并利用纳升级液相色谱串联质谱技术(NanoLC-MS/MS)分析比较了尿素硫脲法初提和尿素硫脲法初提后苯酚甲醇醋酸铵法复提的样... 以中黄13大豆成熟种子为材料,采用苯酚甲醇醋酸铵法、三氯乙酸丙酮法和尿素硫脲法进行了蛋白质初提与复提,并利用纳升级液相色谱串联质谱技术(NanoLC-MS/MS)分析比较了尿素硫脲法初提和尿素硫脲法初提后苯酚甲醇醋酸铵法复提的样品,以及一维电泳预分离的尿素硫脲法初提样品,旨在构建能有效提高蛋白质提取率和鉴定率的样品制备方法。结果表明:尿素硫脲法初提结合苯酚甲醇醋酸铵法复提的蛋白得率最高,分别达到29.18%与4.08%;尿素硫脲法初提与尿素硫脲法初提后苯酚甲醇醋酸铵法复提样品中共鉴定到2246个蛋白质组,初提和复提样品之间差异十分明显;每次独立制备的尿素硫脲法初提样品平均可鉴定到1167个蛋白质组,经一维电泳预分离后平均可鉴定到1868个蛋白质组。研究表明,采用适当的蛋白质样品制备和预分离方法,能有效提高大豆种子蛋白质的提取率和鉴定率。 展开更多
关键词 大豆种子 蛋白质组学 样品制备 纳升级液相色谱串联质谱
小麦叶片蛋白质组的2D-LC分离及Nano LC-MS/MS分析 预览 被引量:8
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作者 刘静 潘映红 +3 位作者 徐琴 罗继 徐世昌 赵奎军 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期772-780,共9页
【目的】二维液相色谱(2D-LC)与双向电泳(2-DE)技术具有互补性,本文旨在探讨利用2D-LC和纳升级液相色谱串联质谱(Nano LC-MS/MS)技术分离鉴定小麦叶片蛋白质组的新方法。【方法】小麦叶片蛋白经提取、脱盐后,进行第一维阴离子交... 【目的】二维液相色谱(2D-LC)与双向电泳(2-DE)技术具有互补性,本文旨在探讨利用2D-LC和纳升级液相色谱串联质谱(Nano LC-MS/MS)技术分离鉴定小麦叶片蛋白质组的新方法。【方法】小麦叶片蛋白经提取、脱盐后,进行第一维阴离子交换分离;收集洗脱组分进行SDS-PAGE分析,并对非高丰度蛋白组分进行第二维反相液相色谱分离;随机选择含较低吸收峰的部分组分经胰蛋白酶水解后进行Nano LC-MS/MS分析;将串联质谱数据通过MASCOT搜索NCBInr和EST数据库,并对二级质谱获得的蛋白序列进行MSBLAST分析。【结果】经第一维阴离子交换色谱分离,收集得到15个组分,其中第15组分包含小麦叶片丰度最高的蛋白——1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(RuBisCO);其余14个组分经反相液相色谱分离,共收集1551个组分,获得1867个色谱峰;随机对其中6个含较低吸收峰的收集组分酶解和Nano LC-MS/MS检测,9种蛋白得到鉴定。【结论】结果初步表明,利用2D-LC和Nano LC-MS/MS技术可有效地分离和鉴定小麦叶片蛋白质组,为更深入全面地研究小麦叶片蛋白质组奠定基础。 展开更多
关键词 蛋白质组学 小麦叶片 二维液相色谱 纳升级液相色谱串联质谱
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