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A Single-Tube, Functional Marker-Based Multiplex PCR Assay for Simultaneous Detection of Major Bacterial Blight Resistance Genes Xa21, xa13 and xa5 in Rice 预览
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作者 S.K. Hajira R.M. Sundaram +14 位作者 G.S.Laha A.Yugander S.M.Balachandran B.C.Viraktamath K.Sujatha C.H.Balachiranjeevi K.Pranath M.Amla S.Bhaskar V.Abhilash H.K.Mahadevaswamy M.Kousik T.DilipKumar G.Harika G.Rekha 《水稻科学:英文版》 CSCD 2016年第3期144-151,共8页
In marker-assisted breeding for bacterial blight (BB) resistance in rice, three major resistancegenes, viz., Xa21, xa13 and xa5, are routinely deployed either singly or in combinations. As elfficient andfunctional mar... In marker-assisted breeding for bacterial blight (BB) resistance in rice, three major resistancegenes, viz., Xa21, xa13 and xa5, are routinely deployed either singly or in combinations. As elfficient andfunctional markers are yet to be developed for xa13 and xa5, we have developed simple PCR-basedfunctional markers for both the genes. For xa13, we designed a functional PCR-based marker,xa13-prom targeting the InDel polymorphism in the promoter of candidate gene Os8N3 located onchromosome 8 of rice. With respect to xa5, a multiplex-PCR based functional marker system, named xa5FM, consisting of two sets of primer pairs targeting the 2-bp functional nucleotide polymorphism in the exon II of the gene TFHAr5 (candidate for xa5), has been developed. Both xa13-prom and xa5FM can differentiate the resistant and susceptible alleles for xa13 and xa5, respectively, in a co-dominant fashion. Using these two functional markers along with the already reported functional PCR-based marker for Xa21 (pTA248), we designed a single-tube multiplex PCR based assay for simultaneous detection of all the three major resistance genes and demonstrated the utility of the multiplex marker system in a segregating population. 展开更多
关键词 RICE BACTERIAL blight resistance xa5 xa13 XA21 FUNCTIONAL MARKER multiplex PCR
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水稻无选择标记Xa21转基因系CX8621的获得与遗传分析 预览 被引量:2
2
作者 夏志辉 刘鹏程 +5 位作者 高利芬 刘栋峰 姜丽 江光怀 郭乐群 翟文学 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期10-16,共7页
无选择标记和转基因稳定遗传是转基因作物安全应用的基本要求。按照我国转基因作物安全评价指南,利用双右边界T-DNA载体系统将广谱抗白叶枯病基因Xa21转入水稻恢复系明恢86。通过抗性鉴定、PCR分析和Southern杂交,跟踪了外源Xa21基因在... 无选择标记和转基因稳定遗传是转基因作物安全应用的基本要求。按照我国转基因作物安全评价指南,利用双右边界T-DNA载体系统将广谱抗白叶枯病基因Xa21转入水稻恢复系明恢86。通过抗性鉴定、PCR分析和Southern杂交,跟踪了外源Xa21基因在转基因后代植株的遗传,并在T3代获得了无选择标记和载体骨架序列的单拷贝抗病纯合系CX8621。多年的观察和鉴定表明转基因恢复系CX8621具有稳定的白叶枯病抗性。目前CX8621已经稳定遗传至T16,并已通过小规模的田间试验(环境释放)和大规模的田间试验(生产性试验)的安全评价。 展开更多
关键词 转基因水稻 白叶枯病 XA21 无选择标记 稳定遗传
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水稻转基因系CX8621中Xa21的整合和表达
3
作者 高利芬 刘鹏程 +5 位作者 夏志辉 赵纪莹 史佳楠 江光怀 刘国振 翟文学 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1255-1263,共9页
农杆菌介导的转基因技术在植物中已被广泛应用,而目的基因能否发挥功能受到多种因素的影响。前期,通过农杆菌介导的转化,实验室创制了无选择标记、无载体骨架残留的水稻转Xa21基因系CX8621。截止目前,CX8621已稳定遗传16代,依然保持着... 农杆菌介导的转基因技术在植物中已被广泛应用,而目的基因能否发挥功能受到多种因素的影响。前期,通过农杆菌介导的转化,实验室创制了无选择标记、无载体骨架残留的水稻转Xa21基因系CX8621。截止目前,CX8621已稳定遗传16代,依然保持着对水稻白叶枯病的优良抗性。在此基础上,本研究对外源基因Xa21在CX8621中的整合和表达情况进行了分析。首先,通过在转化载体p BXa21的左右边界与Xa21基因序列设计嵌套引物,确定Xa21被完整地整合到CX8621中。随后,利用改良的Tail-PCR方法体外克隆了整合位点的边界序列,明确了Xa21被整合在CX8621的2号染色体上。然后,通过RT-PCR分析了Xa21在CX8621中不同时期和不同组织的表达情况,结果表明Xa21在CX8621中能稳定表达,其表达量的变化与之前报道的抗病性反应吻合。此外,还制备了天然XA21蛋白的抗体,对CX8621不同时期、不同组织中XA21蛋白的表达量进行了检测,结果发现在种子中检测不到XA21蛋白。由此,通过对外源基因Xa21的整合和表达分析,为CX8621的转基因生物安全评价提供了部分科学依据。 展开更多
关键词 转基因水稻 XA21 抗白叶枯病 T-DNA整合 表达分析
白叶枯病抗病基因Xa21与Xa23的聚合育种研究 被引量:5
4
作者 赵天龙 范玉龙 +4 位作者 王艺洁 姜达 李明容 翟文学 夏志辉 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期513-517,共5页
由黄单胞细菌引起的水稻白叶枯病是水稻的三大病害之一,而广谱持久抗病品种的培育是控制该病害最经济有效的措施。本研究利用Xa21的优化功能标记与苗期白叶枯病抗病鉴定,将目前抗谱最广、抗性最强的两个位于同一染色体上的显性基因Xa21... 由黄单胞细菌引起的水稻白叶枯病是水稻的三大病害之一,而广谱持久抗病品种的培育是控制该病害最经济有效的措施。本研究利用Xa21的优化功能标记与苗期白叶枯病抗病鉴定,将目前抗谱最广、抗性最强的两个位于同一染色体上的显性基因Xa21与Xa23聚合到杂交稻重要恢复系明恢86,从2138株F2分离后代里,最终得到9株Xa21及Xa23基因的聚合植株。本研究可为紧密连锁的基因聚合提供了新的思路。 展开更多
关键词 水稻 白叶枯病 XA21 XA23 基因聚合
An XA21-Associated Kinase (OsSERK2) Regulates Immunity Mediated by the XA21 and XA3 Immune Receptors
5
作者 Xuewei Chena Shimin Zuo +9 位作者 Benjamin Schwessinger Mawsheng Chern Patrick E. Canlas Deling Ruan Xiaogang Zhou Jing Wang Arsalan Daudi Christopher J. Petzold Joshua L. Heazlewood Pamela C. Ronald 《分子植物:英文版》 SCIE CAS CSCD 2014年第5期874-892,共19页
米饭 XA21 有免疫力的受体 kinase 和在结构上联系了 XA3 受体授与免疫到 Xanthomonas oryzae pv。oryzae (Xoo ) ,细菌的叶老家的原因的代理人。这里,我们报导 OsSERK2 的隔离(米饭体的 embryogenesis receptorkinase 2 ) 并且证明 O... 米饭 XA21 有免疫力的受体 kinase 和在结构上联系了 XA3 受体授与免疫到 Xanthomonas oryzae pv。oryzae (Xoo ) ,细菌的叶老家的原因的代理人。这里,我们报导 OsSERK2 的隔离(米饭体的 embryogenesis receptorkinase 2 ) 并且证明 OsSERK2 断然调整免疫由 XA21 和 XA3 以及米饭免疫者 receptorFLS2 (OsFLS2 ) 调停了。为 OsSerk2 显示的瑞斯植物 silenced 改变了形态学并且把敏感归结为荷尔蒙 brassinolide。OsSERK2 在酵母与每有免疫力的受体的 intracellulardomains 交往以一种 kinase 活动依赖者方式的二混血儿的系统。OsSERK2 在 vitro 与 XA21 经历 bidirectionaltransphosphorylation 并且在 vivo 与 XA21 形成组成的建筑群。这些结果在三米饭免疫者受体的功能为 OsSERK2 表明一个必要角色并且建议和米饭免疫者受体的 thatdirect 相互作用为他们的功能是批评的。一起拿,我们的调查结果建议米饭 XA21, XA3,和 FLS2 的反省 OsSERK2 的规定的 thatthe 机制不同于 AtSERK3/BAK1-mediated regulationof Arabidopsis FLS2 和 EFR.Key 词的: 展开更多
关键词 受体介导 XA21 受体激酶 调控机制 免疫力 酵母双杂交系统 细菌性叶枯病 体细胞胚发生
Xa21全生育期表达载体的构建 预览
6
作者 曹玉鑫 花龙 +2 位作者 赵天龙 李明容 夏志辉 《热带生物学报》 2013年第2期133-137,145共6页
利用PCR技术,以水稻品种明恢63基因组DNA与携Xa21完整基因组片段的载体pDBXa21作为模板,分别克隆了RSuS1启动子(RSP)、Xa21的开放阅读框至终止子的片段,并构建了RSP驱动水稻广谱抗白叶枯病基因Xa21的转基因表达载体。实时荧光定量PCR... 利用PCR技术,以水稻品种明恢63基因组DNA与携Xa21完整基因组片段的载体pDBXa21作为模板,分别克隆了RSuS1启动子(RSP)、Xa21的开放阅读框至终止子的片段,并构建了RSP驱动水稻广谱抗白叶枯病基因Xa21的转基因表达载体。实时荧光定量PCR技术证实,水稻蔗糖合酶基因1(rice sucrose synthase gene 1,RSuS1)在水稻种子中低表达,在叶鞘与叶中全生育期高效表达。 展开更多
关键词 XA21 蔗糖合酶基因启动子 白叶枯病 水稻 全生育期
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五个WRKY转录因子在水稻叶片生长和抗病反应中的表达研究 被引量:7
7
作者 徐文静 缪刘杨 +6 位作者 李莉云 刘钊 刘雨萌 江光怀 杨凤环 何晨阳 刘国振 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2013年第4期356-364,共9页
WRKY是植物基因组中最大的转录因子家族之一,它们在抗病及其他信号转导途径中发挥着重要的调控作用.为了解水稻WRKY的功能,我们选择了5个WRKY转录因子,用免疫印迹技术调查了它们在水稻叶片生长和在Xa21介导的白叶枯病抗性反应中的表达... WRKY是植物基因组中最大的转录因子家族之一,它们在抗病及其他信号转导途径中发挥着重要的调控作用.为了解水稻WRKY的功能,我们选择了5个WRKY转录因子,用免疫印迹技术调查了它们在水稻叶片生长和在Xa21介导的白叶枯病抗性反应中的表达丰度变化.结果表明,OsWRKY13、23和71在叶片中表达,且随叶片生长而逐步增加,至成熟期略有下降,但在叶片中检测不到OsWRKY45和OsWRKY53的表达信号.在Xa21介导的白叶枯病抗性反应中,OsWRKY45、53和71均受诱导表达,而OsWRKY13和OsWRKY23蛋白质的表达没有可见的变化.进一步比较OsWRKY45、OsWRKY53和OsWRKY71在抗、感和对照(Mock)反应中的表达,发现它们在抗、感反应中均发生相似变化.上述结果说明,OsWRKY13和OsWRKY23可能在叶片正常生长过程中发挥作用,OsWRKY45和OsWRKY53可能在水稻-白叶枯病菌互作过程中发挥作用,而OsWRKY71在二种条件下均有功能. 展开更多
关键词 WRKY 水稻 XA21 白叶枯病菌 转录因子
水稻类钙调磷酸酶亚基B蛋白质在叶片生长和白叶枯病抗性反应中的表达 被引量:7
8
作者 刘雨萌 兰金苹 +5 位作者 曹英豪 刘钊 刘丽娟 李莉云 曹振伟 刘国振 《植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期483-490,共8页
钙信号介导植物对多种外部刺激的反应并参与调控广泛的生理学过程。钙离子结合蛋白质,如类钙调磷酸酶亚基B蛋白质(calcineurinB.1ikeprotein,CBL),对感受和传递钙信号具有重要作用。根据基因组测序及注释分析,水稻(Oryzasativa... 钙信号介导植物对多种外部刺激的反应并参与调控广泛的生理学过程。钙离子结合蛋白质,如类钙调磷酸酶亚基B蛋白质(calcineurinB.1ikeprotein,CBL),对感受和传递钙信号具有重要作用。根据基因组测序及注释分析,水稻(Oryzasativa)基因组中有10个CBL家族成员。采用基于抗体的蛋白质组学策略,利用免疫印迹方法研究了水稻CBL蛋白质在叶片生长不同时期的表达,揭示了其在正常发育过程中的表达模式。然后对Xa21介导的水稻白叶枯病抗性反应不同时间点的蛋白质表达进行检测,发现OsCBL.1、OsCBL.3、OsCBL.5、OsCBL-931]OsCBL-10这5个蛋白质的表达发生了变化:进一步比较它们在抗病、感病和对照处理中的表达情况,发现其在不同反应间的表达也有区别,提示了CBL蛋白质在水稻-白叶枯病菌互作过程中的功能。该研究为深入了解水稻CBL蛋白质的功能提供了有价值的线索。 展开更多
关键词 白叶枯病菌 类钙调磷酸酶亚基B蛋白质 水稻 Xa21
水稻白叶枯病菌无毒因子Ax21研究进展 预览 被引量:1
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作者 郑勇 孙梅好 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2012年第10期105-108,共4页
白叶枯病是仅次于稻瘟病的水稻第二大病害,Xa21是最早发现的白叶枯病抗性基因,其无毒基因ax21(ac—tivator of XA2I—mediated immunity)在2009年底才被确定。Ax21为194个氨基酸的蛋白质,包含外泌信号肽,活性17肽,后续多肽链3个... 白叶枯病是仅次于稻瘟病的水稻第二大病害,Xa21是最早发现的白叶枯病抗性基因,其无毒基因ax21(ac—tivator of XA2I—mediated immunity)在2009年底才被确定。Ax21为194个氨基酸的蛋白质,包含外泌信号肽,活性17肽,后续多肽链3个部分。推测其活性17肽与水稻细胞膜上的Xa21蛋白LRR结构域结合,启动水稻细胞下游磷酸化反应,引发水稻抗性。Ax21是革兰氏阴性菌中发现的首个介导调控运动、生物膜形成和毒力相关基因表达的群体感应因子。综述了近2年Ax21的结构、表达调控和生物学功能等方面的研究结果。 展开更多
关键词 XA21 Ax21 多基因调控 群体感应 生物学功能
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利用分子标记辅助选择育成的高产抗病杂交稻新组合益丰优218 被引量:1
10
作者 彭应财 甘朝洪 +1 位作者 周应林 傅藕娟 《杂交水稻》 CSCD 北大核心 2012年第3期 79-81,共3页
益丰优218是中国水稻研究所用含Xa21白叶枯病抗性基因的中晚籼恢复系中恢218,与江西大众种业有限公司选育的印水型高异交率不育系益丰A配组育成的中晚兼用型杂交水稻新组合,表现产量高、稳产性能好,耐肥抗倒,米质较好,抗性较强,适应性广... 益丰优218是中国水稻研究所用含Xa21白叶枯病抗性基因的中晚籼恢复系中恢218,与江西大众种业有限公司选育的印水型高异交率不育系益丰A配组育成的中晚兼用型杂交水稻新组合,表现产量高、稳产性能好,耐肥抗倒,米质较好,抗性较强,适应性广,制种产量高。2010年3月通过江西省品种审定。 展开更多
关键词 杂交水稻 益丰优218 XA21 分子标记辅助选择 选育
高产抗病杂交水稻新组合天优2180 被引量:1
11
作者 彭应财 甘朝洪 +1 位作者 李传国 梁世胡 《杂交水稻》 CSCD 北大核心 2012年第4期83-85,共3页
天优2180是中国水稻研究所用采用分子标记辅助选择技术培育的含白叶枯病抗性基因Xa21的强优恢复系中恢218与广东省农科院水稻研究所选育的野败型优质不育系天丰A配组育成的中晚兼用型杂交水稻新组合,表现株叶型好,高产、稳产,耐肥抗倒,... 天优2180是中国水稻研究所用采用分子标记辅助选择技术培育的含白叶枯病抗性基因Xa21的强优恢复系中恢218与广东省农科院水稻研究所选育的野败型优质不育系天丰A配组育成的中晚兼用型杂交水稻新组合,表现株叶型好,高产、稳产,耐肥抗倒,米质较优,抗性较强,适应性好,比较耐寒。2011年1月通过浙江省品种审定,2012年2月通过江西省引种认定。 展开更多
关键词 杂交水稻 天优2180 分子标记辅助选择(MAS) XA21 选育
水稻类Tubby蛋白质在叶片生长和白叶枯病抗性反应中的表达 被引量:4
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作者 魏健 李莉云 +5 位作者 曹英豪 刘雨萌 巩校东 刘丽娟 张园园 刘国振 《植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期 525-533,共9页
类Tubby蛋白质(Tubby-like protein,TLP)在动植物中广泛存在,暗示其在生命过程中发挥重要的作用。水稻(Oryza sativa)基因组中有14个TLP家族成员,首先制备了这些蛋白质的抗体,用免疫印迹方法检测了它们在水稻叶片不同生长时期的表... 类Tubby蛋白质(Tubby-like protein,TLP)在动植物中广泛存在,暗示其在生命过程中发挥重要的作用。水稻(Oryza sativa)基因组中有14个TLP家族成员,首先制备了这些蛋白质的抗体,用免疫印迹方法检测了它们在水稻叶片不同生长时期的表达情况,揭示其表达模式;然后对Xa21介导的水稻白叶枯病抗性反应不同时间点进行检测,发现OsTLP2、OsTLP7、OsTLP8和OsTLP9等4个蛋白质的表达发生了变化;进一步比较它们在抗病、感病反应和对照处理中的表达情况,发现不同反应间的表达也有区别。该研究结果为阐释水稻TLP在叶片生长过程中的功能,尤其是在水稻-白叶枯病菌互作过程中的作用提供了重要线索。 展开更多
关键词 白叶枯病菌 水稻 类Tubby蛋白质 免疫印迹 XA21
Plasma Membrane Localization and Potential Endocytosis of Constitutively Expressed XA21 Proteins in Transgenic Rice 被引量:1
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作者 Fang Chen Ming-Jun Gao +6 位作者 Yan-Song Miao Yue-Xing Yuan Mu-Yang Wang Qun Li Bi-Zeng Mao Li-Wen Jiang Zu-Hua He 《分子植物:英文版》 SCIE CAS CSCD 2010年第5期917-926,共10页
米饭模式识别受体(PRR ) XA21 由细菌的老家 Xathomonas oryzae pv 在叶感染授与赛跑特定的抵抗。oryzae (Xoo ) ,并且被显示对 endoplasmic 蜂窝胃主要局部性(嗯) 当在原物与它的本国的倡导者或 overexpressed 一起表示了时。然而,当... 米饭模式识别受体(PRR ) XA21 由细菌的老家 Xathomonas oryzae pv 在叶感染授与赛跑特定的抵抗。oryzae (Xoo ) ,并且被显示对 endoplasmic 蜂窝胃主要局部性(嗯) 当在原物与它的本国的倡导者或 overexpressed 一起表示了时。然而,当 overexpressed 尚待被鉴别时,蛋白质是否仍然是在未经触动的房间的嗯本地化。这里,我们显示出那 XA21,它的 kinase 死了的变异的 XA21PK736EP,和熔化主要是的三倍的 autophosphorylation 异种 XA21PS686A/T688A/S699A GFP 对血浆膜(下午) 局部性什么时候在未经触动的转基因的米饭房间的 overexpressed,并且对在转基因的原物的 ER 也局部性。组成地表示野类型的 XA21 或它的 GFP 熔化的转基因的植物在成年人和幼苗阶段显示了赛跑特定的抵抗到 Xoo。XA21 和 XA21PK736EP 能在原物经由流氓积极的早 endosomal 分隔空间可能被使内在化,建议 XA21 可能是开始在病原体感染期间的抵抗回答的 endocytosed。我们也建立了一个根感染系统并且表明了那 XA21 对在根的 Xoo 的也调停的赛跑特定的抵抗回答。我们的当前的学习用根房间系统提供卓见进调停 XA21 的电阻和一条实际途径的性质进一步把在 riceXoo 相互作用期间的 PRR 的细胞的发信号。 展开更多
关键词 XA21基因 转基因水稻 组成型表达 蛋白质 定位 内吞作用 抗白叶枯病 水稻白叶枯病菌
Application of Functional Markers to Identify Genes for Bacterial Blight Resistance in Oryza rufipogon 预览 被引量:1
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作者 XIA Zhi-hui HAN Fei +4 位作者 GAO Li-fen YUAN Qian-hua ZHAI Wen-xue LIU Di LUO Yue-hua 《水稻科学:英文版》 2010年第1期 73-76,共4页
Field resistances of nine accessions of common wild rice(Oryza rufipogon Griff.) and one rice variety(IR24) were evaluated by using nine strains of bacterial blight pathogen(Xanthomonas oryzae pv.oryzae) from the Phil... Field resistances of nine accessions of common wild rice(Oryza rufipogon Griff.) and one rice variety(IR24) were evaluated by using nine strains of bacterial blight pathogen(Xanthomonas oryzae pv.oryzae) from the Philippines.IR24 was highly susceptible to all the strains,and six common wild rice accessions resisted all the nine strains,with a resistance frequency of 67%.The accessions Yulin and Wanning were only susceptible to PXO280 and PXO71,respectively.The accession Gaozhou was susceptible to the three strains PXO79,PXO99 and PXO339,whereas resistant to the other six strains.It could be concluded that there is at least one resistance gene in each common wild rice accession.The functional markers of the genes xa5,xa13,Xa21 and Xa27 were used to detect the presence of these resistance genes in the nine tested wild rice accessions,and it was found that four wild rice accessions contained heterozygous xa13.Among the nine common wild rice accessions,five were homozygous for Xa27 and three homozygous for xa27,and the accession Laibin contained neither xa27 nor Xa27.In addition,there were no xa5 and Xa21 in all of these accessions. 展开更多
关键词 水稻白叶枯病菌 普通野生稻 抗性基因 标记技术 水稻品种 XA21 田间抗性 评价利用
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利用竞争性PCR筛选无标记Xa21转基因水稻
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作者 夏志辉 高利芬 +3 位作者 罗越华 邓晓建 李仕贵 翟文学 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期605-610,共6页
PCR是一种简单、迅速、灵敏的检测方法,但假阳性与假阴性却影响了它在常规应用中的准确性。本研究利用竞争性PCR解决无标记‰2J转基因水稻PCR检测中的假阳性与假阴性问题。标记基因潮霉素基因(Hygromycin phosphotransferase,hpf)... PCR是一种简单、迅速、灵敏的检测方法,但假阳性与假阴性却影响了它在常规应用中的准确性。本研究利用竞争性PCR解决无标记‰2J转基因水稻PCR检测中的假阳性与假阴性问题。标记基因潮霉素基因(Hygromycin phosphotransferase,hpf)的竞争模板是外加的日本晴hpt转基因植株基因组DNA,抗白叶枯病基因Xa21的竞争模板是待测水稻内源的位于第11染色体上的Xa21同源基因序列。利用这一方法对双右边界T-DNA载体转化产生的转基因T1代植株进行分析,可以有效地减少或排除假阳性或假阴性样品,选出真正的转基因阳性植株。与常规PCR相比竞争性PCR提高了无标记Xa21转基因植株筛选的准确性。对获得的无标记Xa21转基因植株进行白叶枯抗病鉴定与潮霉素抗性鉴定证实了该方法的可靠性。 展开更多
关键词 竞争性PCR 假阳性 假阴性 无标记转基因水稻 XA21
OsWRKY62 is a Negative Regulator of Basal and Xa21-Mediated Defense against Xanthomonas orvzae pv. orvzae in Rice 被引量:2
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作者 Ying Peng Laura E. Bartley +5 位作者 Xuewei Chen Christopher Dardick Mawsheng Chern Randy Ruan Patrick E. Canlas Pamela C. Ronald 《分子植物:英文版》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第3期446-458,共13页
关键词 大米 基因 植物 抵抗力 病虫害防治
杂交水稻新品种国稻6号的选育及栽培技术 预览 被引量:1
17
作者 曹立勇 沈希宏 +3 位作者 占小登 陈深广 吴伟明 程式华 《农业科技通讯》 2008年第3期 55-56,共2页
国稻6号(内2优6号)是中国水稻研究所利用分子标记辅助育种技术选育出携带抗白叶枯病基因Xa21的恢复系中恢8006,再与香型不育系内香2A配组选育的杂交中稻新组合。参加国家南方稻区区试、江西省区试及各地试种示范,表现高产稳产、中... 国稻6号(内2优6号)是中国水稻研究所利用分子标记辅助育种技术选育出携带抗白叶枯病基因Xa21的恢复系中恢8006,再与香型不育系内香2A配组选育的杂交中稻新组合。参加国家南方稻区区试、江西省区试及各地试种示范,表现高产稳产、中抗白叶枯病、米质优、适应性广等特点。2006年通过国家审定(编号:国审稻2006034),2007年通过重庆市审定(编号:渝审稻2007007),目前正在大面积进行推广应用。 展开更多
关键词 国稻6号 分子标记辅助选择 选育 XA21 栽培技术
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Adapting rice anther culture to gene transformation and RNA interference
18
作者 CHEN Caiyan XIAO Han ZHANG Wenli WANG Aiju XIA Zhihui LI Xiaobing ZHAI Wenxue CHENG Zhukuan ZHU Lihuang 《中国科学:生命科学英文版》 SCIE CAS 2006年第5期414-428,共15页
Anther culture offers a rapid method of generating homozygous lines for breeding program and genetic analysis. To produce homozygous transgenic lines of rice (Oryza sativa L.) in one step, we developed an efficient pr... Anther culture offers a rapid method of generating homozygous lines for breeding program and genetic analysis. To produce homozygous transgenic lines of rice (Oryza sativa L.) in one step, we developed an efficient protocol of anther-callus-based transformation mediated by Agrobacterium after optimizing several factors influencing efficient transformation, including callus induction and Agrobacterium density for co-cultivation. Using this protocol, we obtained 145 independent green transformants from five cultivars of japonica rice by transformation with a binary vector pCXK1301 bearing the rice gene, Xa21 for resistance to bacterial blight, of which 140 were further confirmed by PCR and Southern hybridization analysis, including haploids (32.1%), diploids (62.1%)and mixoploids (7.5%). Fifteen diploids were found to be doubled haploids, which accounted for 10.7% of the total positive lines. Finally, by including 28 from colchicine induced or spontaneous diploidization of haploids later after transformation, a total of 43 doubled haploids (30.7%) of Xa21transgenic lines were obtained. We also generated two RNAi transgenic haploids of the rice OsMADS2 gene, a putative redundant gene of OsMADS4 based on their sequence similarity, to investigate its possible roles in rice flower development by this method. Flowers from the two OsMADS2RNAi transgenic haploids displayed obvious homeotic alternations, in which lodicules were transformed into palea/lemma-like tissues, whereas identities of other floral organs were maintained. The phenotypic alternations were proved to result from specific transcriptional suppression of OsMADS2gene by the introduced RNAi transgene. The results confirmed that OsMADS2 is involved in lodicule development of rice flower and functionally redundant with OsMADS4 gene. Our results demonstrated that rice anther culture could be adapted to gene transformation and RNAi analysis in rice. 展开更多
关键词 RICE (Oryza sativa L.) ANTHER callus AGROBACTERIUM-MEDIATED transformation RNA interference Xa21 OsMADS2.
转Xa21基因杂交水稻选育和评价 预览 被引量:3
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作者 杨剑波 倪大虎 +5 位作者 吴家道 许传万 贾士荣 唐益雄 Claude Fauquet 张世平 《分子植物育种》 CAS CSCD 2006年第2期 174-180,共7页
通过基因枪转基因方法和双质粒共转化体系将Xa21基因转入优良恢复系明恢63,得到转基因系M12和M22,并进一步做田间试验、新品种选育和食用安全性评价。结果显示:M12和M22对中国的所有白叶枯病小种都表现出高度抗性,但与原受体品种明... 通过基因枪转基因方法和双质粒共转化体系将Xa21基因转入优良恢复系明恢63,得到转基因系M12和M22,并进一步做田间试验、新品种选育和食用安全性评价。结果显示:M12和M22对中国的所有白叶枯病小种都表现出高度抗性,但与原受体品种明恢63相比,农艺性状上有许多变异,主要表现在:结实率、千粒重等农艺性状变差,与珍汕97A的配合力显著降低;但与温敏不育系(X07S、056S)配组的F1有较好的田间表现。通过多代回交和分子标记辅助选择,成功地将Xa21基因从M12株系转到保持系80-4B和不育系80-4A中,得到抗白叶枯病的皖21B和皖21A。并利用皖21A不育系选育出优良杂交组合抗优97(皖21Ax R-18),该组合在两年区域试验和一年生产试验中产量表现突出,米质优良。对不同世代和不同遗传背景的转基因品系进行白叶枯病鉴定和Southern分析表明:Xa21基因都能稳定遗传和正常表达,连续16代的种植并没使其白叶枯病的抗性减弱或丧失,而且不论Xa21基因是纯合的还是杂合的都有相同的抗性表现。对大鼠和小鼠的饲喂试验表明:转基因大米实质上等同于非转基因大米,是安全无害的。 展开更多
关键词 转基因水稻 XA21 白叶枯病抗性 田间试验 育种 食用安全
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无选择标记和载体骨干序列的Xa21转基因水稻的获得 预览 被引量:10
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作者 夏志辉 李晓兵 +4 位作者 陈彩艳 范海阔 江光怀 朱立煌 翟文学 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期 204-210,共7页
利用双右边界T-DNA载体通过根癌农杆菌介导法将水稻白叶枯病广谱抗性基因Xa21导入杂交稻重要恢复系C418中。T0代共获得27个独立转基因株系,通过田间抗性鉴定与PCR分析,有17个株系的Xa21基因分子鉴定为阳性,且对白叶枯病原菌P6生理小... 利用双右边界T-DNA载体通过根癌农杆菌介导法将水稻白叶枯病广谱抗性基因Xa21导入杂交稻重要恢复系C418中。T0代共获得27个独立转基因株系,通过田间抗性鉴定与PCR分析,有17个株系的Xa21基因分子鉴定为阳性,且对白叶枯病原菌P6生理小种具有抗性。通过对17个株系的后代植株进行田间抗性鉴定,分子标记辅助选择及Southem杂交分析,结果显示4个株系的T1代植株中能分离出无潮霉素标记基因的Xa21转基因植株。无选择标记Xa21转基因株系的获得率为15%。PCR检测还表明.这些无选择标记的Xa21转基因植株不带有载体骨架序列。通过对转基因后代进一步的抗性鉴定与PCR辅助选择,获得了无选择标记和载体骨架序列的转基因Xa21纯合的抗白叶枯病水稻。 展开更多
关键词 转基因水稻 XA21 白叶枯病抗性 无选择标记 无载体骨干 双右边界T-DNA载体
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