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中性粒细胞趋化因子3可影响神经干细胞的存活和增殖 预览
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作者 孙耐 王大力 +5 位作者 张君 曹金明 仇福成 刘惠苗 李冬 顾平 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2020年第1期118-123,共6页
背景:课题组前期研究首次发现骨髓基质细胞可以分泌中性粒细胞趋化因子3,且在骨髓基质细胞调控神经干细胞分化为神经元的过程中中性粒细胞趋化因子3的表达上调1.5倍,提示中性粒细胞趋化因子3可能具有促进神经干细胞增殖与分化的作用。目... 背景:课题组前期研究首次发现骨髓基质细胞可以分泌中性粒细胞趋化因子3,且在骨髓基质细胞调控神经干细胞分化为神经元的过程中中性粒细胞趋化因子3的表达上调1.5倍,提示中性粒细胞趋化因子3可能具有促进神经干细胞增殖与分化的作用。目的:观察中性粒细胞趋化因子3对新生大鼠海马来源神经干细胞存活和增殖的影响。方法:体外分离培养新生SD大鼠海马神经干细胞,将培养3代的神经干细胞分为对照组和中性粒细胞趋化因子3组,通过MTS法检测细胞存活率,细胞生长曲线及活/死细胞染色观察细胞存活及增殖情况,通过免疫荧光染色法及Real-time PCR检测神经干细胞中Nestin的表达来观察神经干细胞增殖情况。结果与结论:①随着中性粒细胞趋化因子3质量浓度从1μg/L增加至20μg/L,神经干细胞存活率逐渐增加,当质量浓度为10μg/L时,神经干细胞存活率最高且细胞活力最好,再增至20μg/L时,神经干细胞存活率无显著增加;②中性粒细胞趋化因子3组Nestin染色阳性率明显高于对照组(P<0.05);③中性粒细胞趋化因子3组的Nestin mRNA表达量明显高于对照组(P<0.05);④结果表明,中性粒细胞趋化因子3对海马来源神经干细胞具有促进存活和增殖的作用。 展开更多
关键词 中性粒细胞趋化因子3 海马 神经干细胞 细胞存活 细胞增殖 巢蛋白
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双硫仑联合铜离子对人骨肉瘤细胞增殖与凋亡的影响 预览
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作者 徐朝健 张龙 +2 位作者 程才统 孙晓娟 吕智 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2020年第1期124-129,共6页
背景:研究表明双硫仑本身具有抗肿瘤活性,可联合铜(Cu)离子在体内外水平对多种肿瘤发挥抑癌作用,但关于双硫仑对骨肉瘤细胞增殖和凋亡作用的影响尚未阐明。目的:探讨双硫仑-Cu在体内外水平对骨肉瘤增殖与凋亡能力的影响以及可能的作用... 背景:研究表明双硫仑本身具有抗肿瘤活性,可联合铜(Cu)离子在体内外水平对多种肿瘤发挥抑癌作用,但关于双硫仑对骨肉瘤细胞增殖和凋亡作用的影响尚未阐明。目的:探讨双硫仑-Cu在体内外水平对骨肉瘤增殖与凋亡能力的影响以及可能的作用机制。方法:实验方案经山西医科大学动物实验伦理委员会批准(批准号为2017LL077)。①体外实验:配置双硫仑在进入人体后的转换物二乙基二硫代氨基甲酸钠(diethyldithiocarbamate,DDTC)和Cu离子的复合物DDTC-Cu(0.5,1,2,3和5μmol/L),设置DDTC单药(5μmol/L)、Cu单药(5μmol/L)和空白对照组。药物处理人骨肉瘤细胞Saos-2细胞和MG-63细胞,CCK8法检测不同浓度DDTC-Cu对Saos-2细胞和MG-63细胞的增殖抑制作用;采用AnnexinV-FITC/PI双染法检测DDTC-Cu对Saos-2细胞凋亡水平变化;②体内实验:取4周龄BALB/c-nu/nu雌性裸鼠共10只,随机分为DDTC-Cu组和对照组。采用异位移植方法,在裸鼠右侧背部皮下注射Saos-2细胞和Matrigel混悬液(1∶1混合),注射量400μL/只;接种2周后,对照组裸鼠腹腔注射地塞米松(0.5mg/kg,隔日1次),DDTC-Cu组裸鼠腹腔注射地塞米松(0.5mg/kg,隔日1次)和DDTC-Cu复合物(10nmol/g,隔日1次);观察两组荷瘤小鼠移植瘤生长情况,绘制瘤体生长曲线。接种5周后麻醉下处死动物,完整取出瘤体,免疫组织化学检测瘤体石蜡切片组织中ki67蛋白的表达水平,Westernblot检测瘤体组织中细胞增殖和凋亡蛋白的表达及JNK通路蛋白表达的变化。结果与结论:①体外实验结果:DDTC-Cu组对骨肉瘤细胞的增殖抑制作用明显高于其他3组;CCK-8实验结果显示DDTC-Cu对骨肉瘤细胞增殖抑制呈剂量依赖性,两株细胞的24h药物半抑制浓度分别为0.337μmol/L和0.487μmol/L;流式细胞学检测结果显示DDTC-Cu可呈剂量依赖性促进Saos-2细胞的凋亡;②体内实验结果:DDTC-Cu组裸鼠移植瘤的体积和质量均小于对照组;免疫组织化学 展开更多
关键词 双硫仑 骨肉瘤 增殖 凋亡 JNK通路
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原儿茶酸可减轻退变软骨细胞的损伤 预览
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作者 占龙 孟农钦 +3 位作者 农桔安 李小峰 杨渊 余雪 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2020年第8期1149-1154,共6页
背景:已有研究表明多种抗氧化剂由于对炎性因子存在抑制作用而表现出抗关节炎作用,但是原儿茶酸虽具有抗氧化和抗炎作用,但其是否也对骨关节炎有治疗作用,尚无相关报道。目的:探讨原儿茶酸在体外对白细胞介素1β诱导炎症的软骨细胞的生... 背景:已有研究表明多种抗氧化剂由于对炎性因子存在抑制作用而表现出抗关节炎作用,但是原儿茶酸虽具有抗氧化和抗炎作用,但其是否也对骨关节炎有治疗作用,尚无相关报道。目的:探讨原儿茶酸在体外对白细胞介素1β诱导炎症的软骨细胞的生物学包括表型和细胞代谢的影响,为骨关节炎疾病提供一种潜在的药物保护手段。方法:收集乳鼠股骨软骨细胞,以10 mg/L的白细胞介素1β干预建立退变模型,以10,30和50 mg/L原儿茶酸对细胞进行治疗。实验于2017年10月经广西医科大学动物实验伦理委员会批准,批准号201710008。结果与结论:10-50 mg/L原儿茶酸可促进软骨细胞的增殖,其中30 mg/L原儿茶酸对关节软骨细胞的保护作用最强,对退变的关节软骨细胞具有促进增殖的作用,同时原儿茶酸有效促进软骨细胞生长,细胞外基质的合成和聚集蛋白聚糖、Ⅱ型胶原和Sox9的mRNA表达,同时下调炎症相关基因基质金属蛋白酶13的表达。表明原儿茶酸可促进软骨细胞增殖和维持软骨细胞表型,为进一步研究其在体内进行骨关节炎治疗和关节软骨退变损伤修复提供依据。 展开更多
关键词 原儿茶酸 软骨细胞 骨关节炎 Ⅱ型胶原 增殖 抗炎 软骨保护剂 软骨细胞表型
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Claudin-15 overexpression inhibits proliferation and promotes apoptosis of Schwann cells in vitro 预览
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作者 Jian-Nan Li Zhan Zhang +2 位作者 Guang-Zhi Wu Deng-Bing Yao Shu-Sen Cui 《中国神经再生研究:英文版》 SCIE CAS CSCD 2020年第1期169-177,共9页
Our previous experiments have discovered that Claudin-15 was up-regulated in Schwann cells of the distal nerve stumps of rat models of sciatic nerve injury.However,how Claudin-15 affects Schwann cell function is still... Our previous experiments have discovered that Claudin-15 was up-regulated in Schwann cells of the distal nerve stumps of rat models of sciatic nerve injury.However,how Claudin-15 affects Schwann cell function is still unknown.This study aimed to identify the effects of Claudin-15 on proliferation and apoptosis of Schwann cells cultured in vitro and explore the underlying mechanisms.Primary Schwann cells were obtained from rats.Claudin-15 in Schwann cells was knocked down using siRNA(siRNA-1 group)compared with the negative control siRNA transfection group(negative control group).Claudin-15 in Schwann cells was overexpressed using pGV230-Claudin-15 plasmid(pGV230-Claudin-15 group).The pGV230 transfection group(pGV230 group)acted as the control of the pGV230-Claudin-15 group.Cell proliferation was analyzed with EdU assay.Cell apoptosis was analyzed with flow cytometric analysis.Cell migration was analyzed with Transwell inserts.The mRNA and protein expressions were analyzed with quantitative polymerase chain reaction assay and western blot assay.The results showed that compared with the negative control group,cell proliferation rate was up-regulated;p-AKT/AKT ratio,apoptotic rate,p-c-Jun/c-Jun ratio,mRNA expression of protein kinase C alpha,Bcl-2 and Bax were down-regulated;and mRNA expression of neurotrophins basic fibroblast growth factor and neurotrophin-3 were increased in the siRNA-1 group.No significant difference was found in cell migration between the negative control and siRNA-1 groups.Compared with the pGV230 group,the cell proliferation rate was down-regulated;apoptotic rate,p-c-Jun/c-Jun ratio and c-Fos protein expression increased;mRNA expression of protein kinase C alpha and Bax decreased;and mRNA expressions of neurotrophins basic fibroblast growth factor and neurotrophin-3 were up-regulated in the pGV230-Claudin-15 group.The above results demonstrated that overexpression of Claudin-15 inhibited Schwann cell proliferation and promoted Schwann cell apoptosis in vitro.Silencing of Claudin-15 had the re 展开更多
关键词 apoptosis Bax cell PROLIFERATION c-Jun Claudin-15 NERVE regeneration peripheral NERVE injury protein kinase C alpha Schwann cells Wallerian DEGENERATION
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Bone Marrow Cells Obtained from Old Animals Differ from the Young Animals Cells in Their Ability to Divide and in Response to the Presence of Liver Fibrosis in Primary Culture 预览
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作者 S. L. Ohiienko A. I. Bozhkov +2 位作者 A. Yu. Bondar E. G. Ivanov I. A. Ionov 《老年问题研究(英文)》 2019年第1期14-27,共14页
Dynamics of bone marrow cells number (BMC) in the primary culture isolated from young (3 months) and old (20 months) Wistar rats was investigated. Proliferative activity of BMC of old animals was 2 times higher than t... Dynamics of bone marrow cells number (BMC) in the primary culture isolated from young (3 months) and old (20 months) Wistar rats was investigated. Proliferative activity of BMC of old animals was 2 times higher than that of young animals in the primary culture. Such superiority of the proliferative activity of BMC in the primary culture obtained from old animals is associated with the ability to actively divide lymphocytes and longer “lifespan” of segmented neutrophils obtained from old animals. It should be noted, that the lymphocytes of young animals did not proliferate in the primary culture. The content of intracellular calcium in BMC in the cells of old animals was 3 times higher compared with cells of young animals, which revealed the relationship of intracellular calcium and proliferative activity of BMC. Induction of liver fibrosis led to an increase in the lymphocyte content in young animals by 167%, and in old ones only by 26%, while the lymphocytes of young animals acquired the ability to proliferate in the primary culture. It has been suggested that such differences in the behavior of BMC in primary culture obtained in young and old animals reflect differences in the BMC microenvironment of young and old animals, which leads to changes in the epigenetic-metabolic characteristics of BMC. 展开更多
关键词 Bone MARROW Aging Proliferation LYMPHOCYTE INTRACELLULAR Ca2+
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Linearity Comparison of Three Colorimetric Cytotoxicity Assays 预览
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作者 Maria Papadimitriou Eleana Hatzidaki Ioannis Papasotiriou 《癌症治疗(英文)》 2019年第7期580-590,共11页
Cell viability assays, including techniques to assess the proliferation of cancer cell lines, constitute a rapid, inexpensive and sensitive screening method to pre-clinically evaluate the activity of a potential drug ... Cell viability assays, including techniques to assess the proliferation of cancer cell lines, constitute a rapid, inexpensive and sensitive screening method to pre-clinically evaluate the activity of a potential drug or substance. This study investigates and compares seeding densities and linearity of three such methods: MTT ((3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide), SRB (sulforhodamine B) and CVE (crystal violet elution) assays. SRB and CVE are staining assays for proteins, while MTT measures the mitochondrial activity of living cells. Assays were performed on five cancer cell lines, A375, PC3, DU145, HCT116 and COR-L105, and the coefficient of determination (R2) was employed to determine fit into a linear regression model. The results show that CVE is the most linear assay at fixed time points. SRB at 515 nm is better for measurements over time. Seeding densities between 9000 and 12,000 were the optimum. However, seeding densities and doubling times should be taken into consideration when designing an experiment. 展开更多
关键词 LINEARITY CYTOTOXICITY PROLIFERATION METABOLISM CANCER
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吴茱萸碱对人胃癌BGC-823细胞增殖的影响及分子机制研究
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作者 张涵妮 祝文浩 +3 位作者 王慧茹 郭云良 葛科立 王亚男 《亚太传统医药》 2019年第4期19-23,共5页
目的:研究观察吴茱萸碱对胃癌BGC-823细胞增殖的影响及其可能的分子机制。方法:采用CCK-8法检测吴茱萸碱对胃癌BGC-823细胞的增殖抑制作用;采用倒置显微镜观察细胞形态学变化,PI单染、Annexin V/APC+7AAD双染流式细胞术分析吴茱萸碱对胃... 目的:研究观察吴茱萸碱对胃癌BGC-823细胞增殖的影响及其可能的分子机制。方法:采用CCK-8法检测吴茱萸碱对胃癌BGC-823细胞的增殖抑制作用;采用倒置显微镜观察细胞形态学变化,PI单染、Annexin V/APC+7AAD双染流式细胞术分析吴茱萸碱对胃癌BGC-823细胞周期和细胞凋亡的影响;采用Western-blot检测细胞周期相关蛋白和凋亡相关蛋白表达变化。结果:CCK-8结果表明,与对照组相比,吴茱萸碱能显著抑制胃癌BGC-823细胞的增殖活性,并且呈时间-剂量依赖性;流式细胞术分析显示10μM吴茱萸碱处理细胞24h后,能显著地将其阻滞于G2/M期,诱导BGC-823细胞凋亡,并且主要是早期凋亡。Westernblot结果显示,吴茱萸碱处理BGC-823细胞后能下调细胞周期,促进蛋白Cdc25C的表达,促进细胞周期抑制蛋白p53的表达水平上升,并能上调细胞凋亡相关蛋白cleaved caspase-3、cleaved caspase-8、cleaved caspase-9和cleaved PARP-1的表达,且呈时间依赖性。结论:吴茱萸碱可能是通过下调Cdc25C的表达和促进p53的表达使细胞周期阻滞于G2/M期,又通过上调cleaved caspase-3、cleaved caspase-8、cleaved caspase-9和cleaved PARP-1的表达诱导细胞凋亡,抑制胃癌BGC-823细胞增殖。 展开更多
关键词 吴茱萸碱 BGC-823细胞 增殖 细胞周期 细胞凋亡
特异性蛋白1(SP1)上调FOXP4-AS1促进结直肠癌细胞增殖
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作者 宋慧胜 邱惠思 +5 位作者 吴华振 王馨 汤锐明 潘辉林 李志英 冯正富 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期304-309,共6页
大量的证据表明,长链非编码RNAs (long non-coding RNAs)在结直肠癌发生发展中发挥重要作用。有迹象表明,lncRNA FOXP4-AS1推动结直肠癌的进程。本文通过数据库信息分析发现,FOXP4-AS1在结直肠癌中高表达且与患者较差的预后正相关。实... 大量的证据表明,长链非编码RNAs (long non-coding RNAs)在结直肠癌发生发展中发挥重要作用。有迹象表明,lncRNA FOXP4-AS1推动结直肠癌的进程。本文通过数据库信息分析发现,FOXP4-AS1在结直肠癌中高表达且与患者较差的预后正相关。实时荧光定量PCR方法也证实,FOXP4-AS1在结直肠癌细胞和组织中的表达量均高于正常细胞和组织。其中,FOXP4-AS1在结肠癌细胞LOVO中表达量最高,是正常结直肠细胞的13倍。生物信息学预测结合双荧光素酶报告基因实验和染色质沉淀研究结果表明,特异性蛋白1(specificity protein 1,SP1)可直接结合在FOXP4-AS1启动子上,上调其活性。过表达FOXP4-AS1,可下调p16和p18表达,同时上调CDK4、CDK6和细胞周期蛋白D1表达,最终促进结直肠癌细胞增殖。相反,敲低FOXP4-AS1将上调p16和p18表达,抑制CDK4、CDK6和细胞周期蛋白D1,获得相反的结果。总之,特异性蛋白1(SP1)上调FOXP4-AS1,促进结直肠癌细胞增殖。 展开更多
关键词 长链非编码RNA FOXP4-AS1 结直肠癌 增殖 特异性蛋白1(SP1)
风湿祛痛胶囊对TNF-α诱导的人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞功能的影响 被引量:1
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作者 何莲花 李逸群 +5 位作者 王靖霞 孙丛丛 刘春芳 荆宇 苗艳东 林娜 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期116-121,共6页
目的:研究风湿祛痛胶囊(FSQTC)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的人类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞增殖、迁移、黏附、侵袭和分泌功能的影响。方法:TNF-α(20μg·L^-1)体外诱导RA患者成纤维样滑膜细胞(MH7A),加入不同浓度FSQTC(0... 目的:研究风湿祛痛胶囊(FSQTC)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的人类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞增殖、迁移、黏附、侵袭和分泌功能的影响。方法:TNF-α(20μg·L^-1)体外诱导RA患者成纤维样滑膜细胞(MH7A),加入不同浓度FSQTC(0.02,0.1,0.5μg·L^-1)作用后,分别采用噻唑蓝(MTT)比色法,转移小室(transwell)迁移、黏附及侵袭实验检测MH7A细胞的增殖活性、迁移、黏附及侵袭能力,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测细胞上清中白细胞介素(IL)-1β及血管内皮细胞生长因子(VEGF)的含量。结果:与空白组比较,TNF-α(20μg·L^-1)能显著增加MH7A细胞的增殖、迁移、黏附、侵袭能力及分泌IL-1β和VEGF的含量(P<0.01);与TNF-α组比较,FSQTC(0.02,0.1,0.5μg·L^-1)作用24h对TNF-α诱导的MH7A细胞增殖活性没有明显影响,作用48h能浓度依赖地降低TNF-α诱导增加的MH7A细胞增殖活性(P<0.05,P<0.01),作用24h还能显著降低TNF-α诱导升高的MH7A细胞迁移、黏附、侵袭能力及分泌IL-1β和VEGF的含量(P<0.05,P<0.01)。结论:FSQTC可降低MH7A细胞增殖、迁移、黏附、侵袭及分泌IL-1β和VEGF的能力。 展开更多
关键词 风湿祛痛胶囊 成纤维样滑膜细胞(MH7A) 增殖 迁移 侵袭 黏附
下调微小RNA-146b表达对甲状腺癌细胞增殖与凋亡的影响
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作者 曲鑫 邸旭 +2 位作者 王佳鑫 张海超 李彩霞 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期626-628,共3页
目的探讨下调微小RNA(miRNA,miR)-146b表达对甲状腺癌细胞增殖与凋亡的影响。方法应用Lipofectamine^TM 3000将miR-146b inhibitor、miR-146b NC转染到甲状腺癌细胞SW579,并测定miR-146b表达量,细胞活力,细胞凋亡,细胞周期及B细胞淋巴瘤... 目的探讨下调微小RNA(miRNA,miR)-146b表达对甲状腺癌细胞增殖与凋亡的影响。方法应用Lipofectamine^TM 3000将miR-146b inhibitor、miR-146b NC转染到甲状腺癌细胞SW579,并测定miR-146b表达量,细胞活力,细胞凋亡,细胞周期及B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax),细胞周期素D1(Cyclin D1)、细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)蛋白表达量及核转录因子-κB(NF-κB) p65磷酸化水平。结果miR-146b inhibitor组(0.38±0.05)miR-146b表达量低于miR-146b NC组(1.00±0.09)(P<0.05)。miR-146b inhibitor组(0.36±0.04)细胞活力低于miR-146b NC组(0.59±0.06)(P<0.05)。miR-146b inhibitor组细胞凋亡率(34.58±3.50)%高于miR-146b NC组(4.28±0.43)%(P<0.05),miR-146b inhibitor组细胞周期G1期(44.32±4.43)%长于miR-146b NC组(34.08±3.42)%(P<0.05)。miR-146b inhibitor组中bcl-2、Cyclin D1、CDK4蛋白表达量及NF-κB p65磷酸化水平低于miR-146b NC组(P<0.05),miR-146b inhibitor组中bax表达量高于miR-146b NC组(P<0.05)。结论下调miR-146b可能通过阻断NF-κB信号通路抑制SW579甲状腺癌细胞的增殖,并诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 微小RNA-146b 甲状腺癌 增殖 凋亡
UBE2T基因对结直肠细胞增殖和凋亡的影响
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作者 刘瑞廷 侯亚莉 +5 位作者 白继荣 王国荣 邱冷健 阎立昆 李小军 王小强 《现代生物医学进展》 CAS 2019年第15期2834-2838,共5页
目的:探讨人类泛素结合酶E2T(Ubiquitin-conjugating enzyme E2T,UBE2T)基因对结肠细胞增殖和凋亡的影响。方法:体外培养人正常结直肠粘膜细胞FHC,采用将UBE2T基因慢病毒质粒转染至FHC细胞48 h后,通过MTT法检测细胞增殖情况,western blo... 目的:探讨人类泛素结合酶E2T(Ubiquitin-conjugating enzyme E2T,UBE2T)基因对结肠细胞增殖和凋亡的影响。方法:体外培养人正常结直肠粘膜细胞FHC,采用将UBE2T基因慢病毒质粒转染至FHC细胞48 h后,通过MTT法检测细胞增殖情况,western blotting检测细胞中增殖相关蛋白UBE2T蛋白、Ki67、促凋亡蛋白Bax和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果:与转染空质粒的FHC细胞相比,UBE2T基因慢病毒质粒转染FHC细胞48 h后,细胞增殖能力显著上调(P<0.05),UBE2T蛋白明显增加,Ki67的表达明显增加(P<0.05),细胞凋亡率显著降低(P<0.05),且Bax的表达明显下调而Bcl-2的表达上调(P<0.05)。结论:UBE2T基因能够促进正常结肠粘膜细胞的增殖,并抑制其凋亡。 展开更多
关键词 UBE2T 结直肠癌 增殖 凋亡
罗格列酮对人结肠癌细胞增殖、侵袭的机制研究
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作者 黄鸿武 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第18期2079-2081,共3页
目的研究罗格列酮对人结肠癌细胞增殖、侵袭的调控及其作用机制。方法将人结肠癌HCT116细胞分为低、中、高剂量实验组(0. 1,1,10μmol·L-1罗格列酮)、低、中、高剂量GW9662组(0. 2,1,5μmol·L-1GW9662)和对照组(等量生理盐水)... 目的研究罗格列酮对人结肠癌细胞增殖、侵袭的调控及其作用机制。方法将人结肠癌HCT116细胞分为低、中、高剂量实验组(0. 1,1,10μmol·L-1罗格列酮)、低、中、高剂量GW9662组(0. 2,1,5μmol·L-1GW9662)和对照组(等量生理盐水)。24 h后于光学倒置显微镜下观察细胞形态,以噻唑蓝(MTT)法和Transwell小室实验检测细胞增殖和侵袭能力,以蛋白质印迹(WB)法检测细胞过氧化物酶体增殖激活γ受体(PRARγ)蛋白表达情况,以免疫组化法检测结肠癌及正常结肠组织中PRARγ蛋白表达。结果低、中、高剂量实验组人结肠癌HCT116细胞增殖抑制率分别为(25. 24±1. 43)%,(36. 44±1. 75)%,(52. 45±2. 21)%,低、中、高剂量GW9662组对人结肠癌HCT116细胞未产生抑制作用。对照组和低、中、高剂量实验组和低、中、高剂量GW9662组相对侵袭指数分别为(1. 00±0. 00)%,(76. 42±0. 08)%,(62. 60±0. 07)%,(51. 08±0. 05)%,(1. 10±0. 06)%,(1. 14±0. 07)%,(1. 22±0. 04)%;PRARγ蛋白相对表达量分别为0. 96±0. 06,0. 78±0. 09,0. 62±0. 07,0. 36±0. 11,0. 39±0. 08,0. 65±0. 07,1. 36±0. 13,组间差异均有统计学意义(均P <0. 05)。PRARγ在正常结肠组织中和结肠癌患者的结肠病理标本中的阳性表达率分别为24. 00%(12例/50例)和64. 00%(32例/50例)。结论罗格列酮可抑制人结肠癌细胞增殖,调控细胞侵袭,与其可降低PRARγ表达有关。 展开更多
关键词 结肠癌 罗格列酮 过氧化物酶体增殖激活γ受体 增殖 侵袭
双肾上腺素样激酶1不同剪接体通过激活JNK通路增强胰腺癌细胞的增生能力 预览
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作者 张媛媛 葛洋 安广宇 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第2期179-185,共7页
目的研究双肾上腺素样激酶1(doublecortin-like kinase 1,DCLK1)长、短亚型对人胰腺癌增生能力的影响,并探讨其分子机制。方法分别将空载(PCMV6-AC-GFP)、DCLK1亚型1和DCLK1亚型4真核表达质粒转染胰腺癌PANC-1细胞,G418筛选法构建DCLK1... 目的研究双肾上腺素样激酶1(doublecortin-like kinase 1,DCLK1)长、短亚型对人胰腺癌增生能力的影响,并探讨其分子机制。方法分别将空载(PCMV6-AC-GFP)、DCLK1亚型1和DCLK1亚型4真核表达质粒转染胰腺癌PANC-1细胞,G418筛选法构建DCLK1不同亚型稳定过表达的细胞系;通过定量实时聚合酶链式反应(quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)和Western blotting法鉴定DCLK1长、短亚型的表达情况;实时无标记细胞分析仪(real-time cell analysis,RTCA)技术检测DCLK1长、短亚型表达对PANC-1细胞增生能力的影响;Western blotting法检测DCLK1对丝裂原活化蛋白激酶(mitogenactivated protein kinase,MAPK)通路的影响;利用c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)通路特异性抑制剂SP600125处理DCLK1稳转细胞,检测JNK通路抑制对胰腺癌细胞增生能力的影响。结果 DCLK1长、短亚型的过表达显著促进胰腺癌细胞的增生能力(P <0. 05),并且促进MAPK通路中JNK的磷酸化水平以及JNK通路靶分子CMYC、CD44和Cyclin D1的表达(P<0. 05),而对MAPK通路中细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)和p38的磷酸化无明显影响(P>0. 05);SP600125抑制JNK的磷酸化,可以显著降低DCLK1对JNK通路的激活以及对胰腺癌细胞的促增生能力(P <0. 05)。结论DCLK1长、短亚型均可以通过激活JNK通路促进胰腺癌细胞的增生能力。 展开更多
关键词 胰腺癌 双肾上腺素样激酶1长、短亚型 增生 JNK通路
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LncRNA AC006449.2抑制卵巢癌细胞增殖
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作者 张晓君 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期310-315,共6页
长链非编码RNAs(long non-coding RNAs, lncRNAs)是一类无蛋白质编码功能的RNAs。多项研究表明,lncRNAs在肿瘤的发生发展中发挥重要的作用。GEPIA数据库结合qRT-PCR结果提示,lncRNA AC006449.2在卵巢癌组织中的表达量显著低于正常组织,... 长链非编码RNAs(long non-coding RNAs, lncRNAs)是一类无蛋白质编码功能的RNAs。多项研究表明,lncRNAs在肿瘤的发生发展中发挥重要的作用。GEPIA数据库结合qRT-PCR结果提示,lncRNA AC006449.2在卵巢癌组织中的表达量显著低于正常组织,且其在卵巢癌细胞中的水平也低于正常卵巢上皮细胞。进一步分析发现,lncRNA AC006449.2的表达量与卵巢癌患者较差的预后负相关,与瘤体大小和远端转移密切相关,而与卵巢癌患者年龄、淋巴结转移及TNM分期无关。细胞功能研究发现,上调AC006449.2,卵巢癌细胞的增殖和平板克隆能力降低;而下调AC006449.2之后,该细胞的增殖和平板克隆能力显著增加。深入的机制研究发现,AC006449.2可上调细胞周期相关蛋白p21和p27的表达量,上调促凋亡蛋白Bax的表达,而下调抗凋亡蛋白Bcl2的表达量,最终抑制卵巢癌细胞的增殖。上述研究结果推测,lncRNA AC006449.2在卵巢癌细胞中可能发挥抑癌因子的作用。 展开更多
关键词 长链非编码RNA AC006449. 2 卵巢癌 细胞增殖 平板克隆
长链非编码RNA LINC00473对人胃癌细胞增殖和迁移能力的影响 预览
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作者 朱虹 张玮 +2 位作者 刘国倩 孟红霞 邵世和 《临床检验杂志》 CAS 2019年第5期383-388,共6页
目的探讨LINC00473在人胃癌细胞系中的表达水平及其对胃癌细胞生物学行为的影响。方法采用实时荧光定量PCR检测胃癌细胞中LINC00473的表达水平;转染靶向LINC00473的siRNA片段或LINC00473过表达载体以构建敲减或过表达的胃癌细胞系;通过C... 目的探讨LINC00473在人胃癌细胞系中的表达水平及其对胃癌细胞生物学行为的影响。方法采用实时荧光定量PCR检测胃癌细胞中LINC00473的表达水平;转染靶向LINC00473的siRNA片段或LINC00473过表达载体以构建敲减或过表达的胃癌细胞系;通过CCK-8细胞增殖实验、平板克隆形成实验、Transwell迁移实验、western blot实验检测细胞的增殖和迁移能力以及EMT相关蛋白标志物表达水平的变化。结果与GES-1细胞相比,LINC00473在胃癌细胞中的表达水平明显降低(P<0.05)。与siNC转染对照组相比,敲减LINC00473表达后,靶细胞的增殖能力(F=163.10,P<0.01)、克隆形成(t=3.29,P<0.05)和迁移能力(t=4.68,P<0.05)明显增加;E-cadherin表达减弱(t=4.08,P<0.05),N-cadherin(t=5.06,P<0.01)、Snail(t=7.69,P<0.01)和Vimentin(t=3.82,P<0.05)蛋白的表达水平升高。与Vector转染对照组相比,上调LINC00473表达后靶细胞的增殖能力(F=186.00,P<0.01)、克隆形成(t=3.22,P<0.05)和迁移能力(t=5.52,P<0.01)明显下降;E-cadherin表达升高(t=2.90,P<0.05),N-cadherin(t=7.44,P<0.01)、Snail(t=2.78,P<0.05)和Vimentin(t=4.64,P<0.01)蛋白的表达水平降低。结论敲减LINC00473的表达可促进胃癌细胞的增殖、迁移的能力,可能通过调控EMT参与胃癌细胞的迁移。 展开更多
关键词 胃癌 长链非编码RNA LINC00473 增殖 迁移
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双氢青蒿素阻断核因子-κB信号通路对宫颈癌细胞的增殖抑制作用
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作者 许浩 丁渊 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第14期1463-1466,共4页
目的研究双氢青蒿素对宫颈癌细胞的增殖抑制作用及对核因子-κB(NF-κB)信号通路的影响。方法将处于对数期的宫颈癌Si Ha细胞分为对照组(生理盐水处理)和低、中、高剂量实验组(50,200,400μmol·L^-1的双氢青蒿素处理),37℃下以5%CO... 目的研究双氢青蒿素对宫颈癌细胞的增殖抑制作用及对核因子-κB(NF-κB)信号通路的影响。方法将处于对数期的宫颈癌Si Ha细胞分为对照组(生理盐水处理)和低、中、高剂量实验组(50,200,400μmol·L^-1的双氢青蒿素处理),37℃下以5%CO2培养24 h后观察各组细胞形态变化,以噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况,以Hoechst 33258核染色法检测细胞凋亡,以蛋白免疫印迹法(WB)检测细胞NF-κB信号通路及自噬相关蛋白的表达。结果培养24 h,对照组及低、中、高剂量实验组Si Ha细胞存活率分别为(98. 45±0. 12)%,(88. 36±2. 05)%,(90. 15±2. 24)%,(84. 14±3. 23)%;培养48 h细胞存活率分别为(99. 34±0. 21)%,(78. 63±1. 63)%,(80. 46±2. 54)%,(76. 32±2. 31)%;培养72 h,细胞存活率分别为(98. 14±0. 34)%,(68. 26±2. 07)%,(72. 48±2. 14)%,(66. 54±2. 16)%。培养48 h,对照组和低、中、高剂量实验组凋亡细胞比例分别为(8. 76±1. 75)%,(19. 54±3. 63)%,(28. 11±3. 65)%,(50. 26±3. 98)%,NF-κB p65蛋白相对表达量为0. 71±0. 11,0. 57±0. 05,0. 32±0. 04,0. 13±0. 02,微管相关蛋白轻链3B (LC3B)蛋白相对表达量为0. 27±0. 06,0. 39±0. 06,0. 52±0. 02,0. 72±0. 04,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。结论双氢青蒿素可抑制宫颈癌细胞的增殖,促进其凋亡,其作用机制可能与阻断NF-κB信号通路进而诱导自噬的发生有关。 展开更多
关键词 宫颈癌 双氢青蒿素 增殖 凋亡 核因子-ΚB 自噬
P21活化激酶1在结直肠癌中的表达及临床病理意义 预览
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作者 熊振芳 谢洪 +2 位作者 颜雪 熊秋迎 涂露霞 《江西医药》 CAS 2019年第10期1196-1199,共4页
目的探讨P21活化激酶1(PAK1)在结直肠癌组织中的表达,分析其与结直肠癌患者临床病理特征及预后的关系。方法应用免疫组化SP法检测250例结直肠癌组织中PAK1的表达状态,并对患者进行随访,获得随访资料。结果PAK1阳性率为48%(120/250),在... 目的探讨P21活化激酶1(PAK1)在结直肠癌组织中的表达,分析其与结直肠癌患者临床病理特征及预后的关系。方法应用免疫组化SP法检测250例结直肠癌组织中PAK1的表达状态,并对患者进行随访,获得随访资料。结果PAK1阳性率为48%(120/250),在有淋巴结转移和肝转移的病例中,PAK1阳性率明显高于无淋巴结转移病例(57.6%vs42.4%)和无肝转移病例(60.0%vs44.3%),差异有统计学意义(P<0.05)。单因素生存分析显示PAK1阳性患者的生存时间较PAK1阴性者显著缩短,差异有统计学意义(P<0.05)。在单因素生存分析中,PAK1与不良预后有关。此外,结果还显示肿瘤浸润深度、淋巴结转移和肝转移与生存期相关;多因素生存分析同样显示PAK1是预后的不利因素。并且,肿瘤浸润深度、淋巴结转移、肝转移与患者的预后相关,是延长生存期的不良因素。结论在结直肠癌中,PAK1存在过度表达状态。PAK1阳性病例更易发生淋巴结转移和肝转移。PAK1的表达差异与总体生存期相关,PAK1阳性患者的生存期较PAK1阴性者显著降低,PAK1可作为独立的判断结直肠癌患者的预后指标。 展开更多
关键词 结直肠癌 PAK1 增殖 侵袭 转移 靶向治疗
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不同组分的稀有人参皂苷对牙髓细胞增殖作用的实验研究 预览
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作者 杨松涛 杨禾丰 +2 位作者 佘睿 雷雅燕 杨帆 《昆明医科大学学报》 CAS 2019年第10期6-10,共5页
目的 探讨稀有人参皂苷不同组分对牙髓细胞增殖的影响,为稀有人参皂苷应用于牙髓病临床治疗提供理论依据。方法 改良组织块法培养人牙髓细胞并鉴定。取3~5代牙髓细胞,采用不同浓度稀有人参皂苷Rd、Rh1,浓度分别为0.125μg/mL,0.25μg/mL... 目的 探讨稀有人参皂苷不同组分对牙髓细胞增殖的影响,为稀有人参皂苷应用于牙髓病临床治疗提供理论依据。方法 改良组织块法培养人牙髓细胞并鉴定。取3~5代牙髓细胞,采用不同浓度稀有人参皂苷Rd、Rh1,浓度分别为0.125μg/mL,0.25μg/mL,0.5μg/mL,1μg/mL进行干预培养。采用CCK8检测稀有人参皂苷不同组分(Rd,Rh1)对人牙髓细胞增殖的影响。结果 通过组织块培养法,于原代培养后5d见细胞从组织块周围爬出,免疫荧光显示细胞表面波形丝蛋白阳性表达。CCK8检测结果显示0.125μg/mL稀有人参皂苷Rd,Rh1组OD值与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 0.125μg/mL的稀有人参皂苷Rd、Rh1对牙髓细胞的增殖无明显的抑制作用。 展开更多
关键词 稀有人参皂苷 牙髓细胞 增殖
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PLK1和DNAPKcs在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达及临床意义
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作者 张国君 张欢 +3 位作者 陈念慈 张彩霞 魏雪婷 刘卓刚 《解剖科学进展》 2019年第3期232-236,共5页
目的探讨PLK1和DNAPKcs在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中的临床意义及对DLBCL细胞增殖的影响。方法收集50例DLBCL患者的临床资料,并通过对其病理组织标本进行免疫组化检测PLK1和DNAPKcs的表达水平,分析它们的表达相关性及与DLBCL临床病理... 目的探讨PLK1和DNAPKcs在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中的临床意义及对DLBCL细胞增殖的影响。方法收集50例DLBCL患者的临床资料,并通过对其病理组织标本进行免疫组化检测PLK1和DNAPKcs的表达水平,分析它们的表达相关性及与DLBCL临床病理特征之间的关系。通过siRNA干扰PLK1和DNAPKcs,采用EdU实验观察DLBCL细胞增殖能力的变化。敲减PLK1的表达,Western blot实验检测DLBCL细胞DNAPKcs的表达变化。结果 PLK1和DNAPKcs表达水平在DLBCL病人和两种细胞系FARAGE和OCI-Ly3中显著高于正常人外周血单核细胞(P<0.05),促进DLBCL肿瘤细胞的增殖,与Ann Arbor分期、患者是否出现B症状、IPI评分正相关(P<0.05),与DLBCL患者年龄、性别无相关性;敲减PLK1后DNAPKcs的表达水平显著降低。结论 PLK1和DNAPKcs可作为DLBCL诊断和预后判断的重要指标。 展开更多
关键词 弥漫性大B细胞淋巴瘤 PLK1 DNAPKcs 增殖
miR-510通过打靶c-MYC抑制肝细胞癌的发展 预览
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作者 王子文 刘兆玉 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期300-304,共5页
目的探讨miR-510对肝细胞癌的调节作用。方法通过基因芯片分析得到肝细胞癌组织与癌旁组织中差异性表达的miRNAs。用实时PCR检测miR-510在肝细胞癌组织与癌旁组织中的表达情况。通过miRDB软件预测miR-510的靶向蛋白,荧光素酶报告基因实... 目的探讨miR-510对肝细胞癌的调节作用。方法通过基因芯片分析得到肝细胞癌组织与癌旁组织中差异性表达的miRNAs。用实时PCR检测miR-510在肝细胞癌组织与癌旁组织中的表达情况。通过miRDB软件预测miR-510的靶向蛋白,荧光素酶报告基因实验检测HepG2细胞中miR-510对c-MYC的靶向作用。通过Western blotting检测miR-510对HepG2细胞中c-MYC表达的影响。用MTT和Transwell实验检测miR-510对HepG2细胞增殖和迁移的影响。结果基因芯片筛选与实时PCR结果显示miR-510在肝细胞癌中的表达显著低于癌旁组织。miRDB软件分析发现miR-510可以与c-MYC的3’UTR区域结合,荧光素酶报告基因实验发现miR-510与c-MYC可以直接结合。Western blotting显示miR-510可以抑制HepG2细胞中c-MYC的表达。MTT和Transwell实验结果显示miR-510可以抑制HepG2细胞的增殖和迁移。结论miR-510可以通过抑制c-MYC的表达抑制肝细胞癌的发展。 展开更多
关键词 miR-510 肝细胞癌 C-MYC 增殖 迁移
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