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荭草花提取物对H2O2诱导的HUVEC细胞氧化损伤的保护作用研究 被引量:4
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作者 吴琼 刘香香 +4 位作者 陆定艳 李月婷 孙佳 兰燕宇 刘亭 《中国中药杂志》 CSCD 北大核心 2018年第5期1008-1013,共6页
该文首先建立了人脐静脉内皮细胞(HUVEC)过氧化氢(H2O2)氧化损伤模型,并筛选了荭草花提取物的低、中、高给药剂量来评价荭草花提取物对H2O2所致HUVEC细胞氧化损伤的保护作用并探讨其机制。采用MTS法检测HUVEC细胞活力;生化试剂盒... 该文首先建立了人脐静脉内皮细胞(HUVEC)过氧化氢(H2O2)氧化损伤模型,并筛选了荭草花提取物的低、中、高给药剂量来评价荭草花提取物对H2O2所致HUVEC细胞氧化损伤的保护作用并探讨其机制。采用MTS法检测HUVEC细胞活力;生化试剂盒检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)漏出量,细胞内丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活力;qRT-PCR和Westernblot法分别测定Bcl-2,Bax的mRNA及蛋白水平;Westernblot法测定cleaved caspase-3的蛋白水平。结果表明,120μmol·L^-1H2O2作用0.5h后,HUVEC细胞存活率下降至55%左右,并且使HUVEC细胞的LDH漏出量、MDA含量增加,SOD及CAT活性降低。此外,H2O2还能上调HUVEC细胞中促凋亡蛋白cleavedeaspase-3蛋白水平和Bax的mR-NA及蛋白水平,下调凋亡抑制蛋白Bcl-2的mRNA及蛋白水平。与H2O2模型组相比,50~200mg·L^-1荭草花提取物预处理24h能明显增加氧化损伤后细胞存活率,降低LDH漏出量、MDA含量,提高SOD及CAT活性,下调促凋亡蛋白cleavedcaspase-3蛋白水平和Bax的mRNA及蛋白水平,并上调凋亡抑制蛋白Bcl-2的mRNA及蛋白水平。实验结果提示,荭草花提取物对H2O2所致的HUVEC细胞氧化损伤具有一定的保护作用,其机制可能与增强细胞清除自由基能力及抑制细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 荭草花提取物 氧化损伤 细胞凋亡 HUVEC细胞
荭草花提取物对H9c2心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用 被引量:1
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作者 刘亭 吴琼 +4 位作者 刘香香 陆定艳 薛维娜 兰燕宇 李月婷 《中药材》 北大核心 2018年第1期184-188,共5页
目的:探究荭草花提取物对H9c2心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用。方法:利用氯化钴(CoCl2)建立缺氧复氧损伤H9c2细胞模型,实验分正常对照组、模型组及荭草花提取物不同浓度组。应用MTS检测细胞存活率;生化试剂盒检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)... 目的:探究荭草花提取物对H9c2心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用。方法:利用氯化钴(CoCl2)建立缺氧复氧损伤H9c2细胞模型,实验分正常对照组、模型组及荭草花提取物不同浓度组。应用MTS检测细胞存活率;生化试剂盒检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)释放量及细胞内丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)水平;Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞仪检测细胞凋亡情况;Western blot测定cleaved Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果:利用800μmol/L CoCl2缺氧22h,复氧2h可建立缺氧复氧损伤心肌细胞模型。与模型组比较,荭草花提取物能显著升高心肌细胞存活率,降低LDH、CK释放量及细胞内MDA含量,提高细胞内SOD、CAT活性,并呈浓度依赖性抑制CoCl2诱导的缺氧复氧损伤。荭草花提取物能下调促凋亡蛋白cleaved Caspase-3、Bax的表达,上调凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达,减少心肌细胞凋亡。结论:荭草花提取物对心肌细胞缺氧复氧损伤具有一定的保护作用,其机制可能与增强细胞清除自由基能力及抑制细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 荭草花提取物 缺氧复氧 H9C2心肌细胞
基于UHPLC-Q-TOF-MS分析荭草花提取物在H9c2心肌细胞中效应物质 被引量:5
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作者 向文英 梅朝叶 +6 位作者 孙慧园 覃小丽 谢玉敏 巩仔鹏 郑林 李月婷 黄勇 《中国实验方剂学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第12期90-95,共6页
目的:利用H9c2心肌细胞和UHPLC-Q-TOF-MS技术筛选荭草花抗心肌缺血作用的活性成分。方法:用心肌细胞选择性地结合荭草花提取液中的活性成分,洗去未结合的其他成分后,使细胞靶点失活,被结合的活性成分从心肌细胞中释放出来,采用Eclipse... 目的:利用H9c2心肌细胞和UHPLC-Q-TOF-MS技术筛选荭草花抗心肌缺血作用的活性成分。方法:用心肌细胞选择性地结合荭草花提取液中的活性成分,洗去未结合的其他成分后,使细胞靶点失活,被结合的活性成分从心肌细胞中释放出来,采用Eclipse Plus C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),流动相0.1%甲酸水溶液(A)-0.1%甲酸乙腈溶液(B)梯度洗脱(0-2 min,95%-79%A;2-5 min,79%A;5-6.5 min,79%-60%A;6.5-7.5 min,60%-55%A;7.5-9.5 min,55%-0%A;9.5-10 min,0%-95%A),电喷雾离子源(ESI)正、负离子模式下扫描采集数据,通过采用对照品比对及二级碎片离子对化学成分进行鉴定。结果:检测出荭草花提取物中可与心肌细胞结合的17个成分,采用对照品比对后,确定8个色谱峰所表征的化学成分,依次为原儿茶酸,儿茶素,山柰素-3-O-β-D-葡萄糖苷,槲皮素3-O-α-L-鼠李糖苷,山柰素-3-O-α-L-鼠李糖苷,N-p-香豆酰酪胺,槲皮素和山柰酚。结论:通过分析心肌细胞破碎液中与活性细胞相结合的成分,筛选出了荭草花提取物中能与心肌细胞有相互作用的成分,为明确荭草花的药效物质基础提供了科学依据。 展开更多
关键词 UHPLC-Q-TOF-MS 荭草花提取物 活性成分 山柰素-3-O-β-D-葡萄糖苷 山柰素-3-O-α-L-鼠李糖苷 药效物质基础
荭草花提取物中5种成分在大鼠体内的肠吸收动力学 预览 被引量:5
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作者 谢玉敏 杨武 +3 位作者 陆苑 郑林 陈思颖 黄勇 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期770-776,共7页
目的研究荭草花Polygonum orientale L.提取物中原儿茶酸、花旗松素、山柰素-葡萄糖苷、槲皮苷、山柰素-鼠李糖苷在大鼠体内的肠吸收动力学特征。方法采用在体肠灌流模型,超高效液相色谱-电喷雾-串联质谱(UPLCESI-MS/MS)法测定这5种... 目的研究荭草花Polygonum orientale L.提取物中原儿茶酸、花旗松素、山柰素-葡萄糖苷、槲皮苷、山柰素-鼠李糖苷在大鼠体内的肠吸收动力学特征。方法采用在体肠灌流模型,超高效液相色谱-电喷雾-串联质谱(UPLCESI-MS/MS)法测定这5种成分质量浓度。结果这些成分对p H值均不敏感,可能不是药物转运蛋白P-gp的底物;原儿茶酸、山柰素-葡萄糖苷、槲皮苷和山柰素-鼠李糖苷在高质量浓度下存在饱和现象;胆汁对原儿茶酸的吸收具有抑制作用,而对山柰素-葡萄糖苷的吸收具有促进作用。结论荭草花提取物中这5种成分在整个肠段都有吸收,而且小肠优于结肠,符合一级动力学特征。 展开更多
关键词 荭草花提取物 原儿茶酸 花旗松素 山柰素-葡萄糖苷 槲皮苷 山柰素-鼠李糖苷 肠吸收动力学 UP-LC-MS/MS
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荭草花醇提物对H2O2诱导的H9c2细胞氧化损伤的保护作用机制研究 预览 被引量:3
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作者 刘亭 吴琼 +4 位作者 刘香香 陆定艳 黄文炫 李月婷 李勇军 《天然产物研究与开发》 CSCD 北大核心 2018年第2期299-303,共5页
研究荭草花醇提物对H9c2心肌细胞氧化损伤的保护作用机制。采用200μmol/L H 2O 2作用H9c2细胞0.5 h,建立H9c2细胞氧化损伤模型。将细胞分为正常对照组、H9c2细胞氧化损伤模型组、不同浓度荭草花醇提物(20、40、80μg/mL)预处理组。采用... 研究荭草花醇提物对H9c2心肌细胞氧化损伤的保护作用机制。采用200μmol/L H 2O 2作用H9c2细胞0.5 h,建立H9c2细胞氧化损伤模型。将细胞分为正常对照组、H9c2细胞氧化损伤模型组、不同浓度荭草花醇提物(20、40、80μg/mL)预处理组。采用MTS法检测细胞存活率;生化试剂盒检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放量,细胞内丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活力;Western blot测定cleavedcaspase-3、Bcl-2、Bax、p-AKT和AKT的表达。与模型组比较,荭草花醇提物能明显增加心肌细胞存活率,降低LDH释放量和MDA含量,提高SOD及CAT活性,并呈剂量依赖性抑制H 2O 2诱导的氧化应激损伤。荭草花醇提物下调cleaved caspase-3和Bax的蛋白水平,上调Bcl-2的表达,减少心肌细胞凋亡;增加细胞中p-AKT的表达,且这种表达可被PI3Ks抑制剂LY294002抵消。表明荭草花醇提物可减轻H 2O 2诱导的H9c2心肌细胞氧化应激损伤,其机制可能与减少细胞凋亡,平衡氧化应激产物有关,且部分依赖于磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K/Akt)通路。 展开更多
关键词 荭草花醇提物 氧化应激损伤 H9C2心肌细胞 PI3K/Akt
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荭草花中五种成分在Caco-2细胞中的吸收特性研究 预览
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作者 陈浩 覃小丽 +4 位作者 夏涛 李月婷 巩仔鹏 李勇军 郑林 《中国药理学通报》 CSCD 北大核心 2018年第6期764-769,共6页
目的 利用Caco-2单层细胞模型研究荭草花提取物的吸收摄取特性。方法 采用UPLC-MS/MS考察荭草花提取物在不同浓度、时间、温度、pH、P-糖蛋白抑制剂(维拉帕米)和环孢菌素A条件下Caco-2细胞的吸收差异。结果 荭草花提取物在Caco-2... 目的 利用Caco-2单层细胞模型研究荭草花提取物的吸收摄取特性。方法 采用UPLC-MS/MS考察荭草花提取物在不同浓度、时间、温度、pH、P-糖蛋白抑制剂(维拉帕米)和环孢菌素A条件下Caco-2细胞的吸收差异。结果 荭草花提取物在Caco-2细胞中的吸收具有浓度和时间依赖性,其中槲皮素等5个成分在摄取90min后逐渐降低;且在37℃条件下吸收最好;槲皮素pH为5条件下,利于其吸收,其余成分均在pH为6有利于吸收;加入P-糖蛋白抑制剂维拉帕米和环孢菌素A后发现,槲皮素和山奈酚受P-糖蛋白抑制剂维拉帕米影响,摄取量明显增加。结论 荭草花提取物中槲皮素等5种成分的吸收机制主要表现为被动扩散,P-糖蛋白参与其槲皮素和山奈酚的摄取过程。 展开更多
关键词 荭草花提取物 CACO-2细胞 P-糖蛋白抑制剂 吸收机制 UPLC-MS/MS 摄取
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