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不同人乳腺肿瘤细胞系中Jagged1基因和蛋白的表达水平 预览
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作者 何妍彦 孙舟彤 张红艳 《现代肿瘤医学》 CAS 2018年第17期2653-2656,共4页
目的:研究Jagged1蛋白和m RNA在人乳腺癌细胞系中的表达。方法:分别使用蛋白印迹法及实时定量聚合酶链式反应检测Jagged1蛋白和基因在人乳腺癌细胞系中的表达情况。结果:Jagged1在不同的人乳腺肿瘤细胞系中蛋白和基因的表达水平不同... 目的:研究Jagged1蛋白和m RNA在人乳腺癌细胞系中的表达。方法:分别使用蛋白印迹法及实时定量聚合酶链式反应检测Jagged1蛋白和基因在人乳腺癌细胞系中的表达情况。结果:Jagged1在不同的人乳腺肿瘤细胞系中蛋白和基因的表达水平不同。结论:Jagged1蛋白在人乳腺癌细胞系ZR-75-30和MDAMB-231中高表达,Jagged1基因在人乳腺癌细胞系MDA-MB-231,HCC 1937中高表达,Jagged1可能是在人乳腺癌的发展进程中发挥着重要的作用。 展开更多
关键词 JAGGED1 乳腺癌 免疫印迹分析
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Notch1—Jagged1信号在变应性鼻炎中的表达及意义
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作者 焦沃尔 魏金凤 +4 位作者 续珊 孔勇刚 许昱 陶泽璋 陈始明 《中华耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CSCD 北大核心 2018年第10期733-739,共7页
目的 探讨Notch1-Jagged1信号在变应性鼻炎(AR)模型小鼠各发病阶段鼻黏膜及AR患者血清中的表达及意义.方法 将36只小鼠分为正常对照组、卵清蛋白(OVA)基础致敏组及OVA/AR组,每组12只.造模后对各组小鼠进行AR症状评分,苏木精-伊红(H... 目的 探讨Notch1-Jagged1信号在变应性鼻炎(AR)模型小鼠各发病阶段鼻黏膜及AR患者血清中的表达及意义.方法 将36只小鼠分为正常对照组、卵清蛋白(OVA)基础致敏组及OVA/AR组,每组12只.造模后对各组小鼠进行AR症状评分,苏木精-伊红(HE)染色法观察小鼠鼻黏膜中嗜酸粒细胞浸润情况;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测外周血中总IgE水平;流式细胞术检测脾脏中调节性T细胞(Treg细胞)比例变化;Western blot法检测鼻黏膜中Notch1、Jagged1的表达水平;多重液相蛋白定量技术(cytometric bead array,CBA)检测脾脏淋巴细胞中Th1/Th2/Th17相关细胞因子水平.收集2017年6-10月期间就诊于武汉大学人民医院耳鼻咽喉头颈外科的50例AR患者和30例对照组人群的血清,ELISA法检测血清中Notch1、Jagged1的表达情况.多组间比较采用单因素方差分析,两组间比较采用LSDt检验;应用Pearson相关分析评价Notch1与各细胞因子相关性.结果 与正常对照组比较,基础致敏组小鼠的症状、鼻黏膜嗜酸粒细胞浸润情况及血清总IgE水平的差异无统计学意义;OVA/AR组小鼠的症状、鼻黏膜嗜酸粒细胞浸润情况及血清总IgE水平明显升高[(6.11±0.78)分((x)±s,下同)比(0.67±0.50)分,(77.67 ±5.61)个比(10.33±0.82)个,(106.80±11.91) pg/ml比(82.45±19.80) pg/ml,t值分别为19.471、34.848、2.542,P值均<0.05].与正常对照组比较,基础致敏组小鼠脾脏中Treg细胞比例上升,OVA/AR组Treg细胞比例下降[(10.29±0.47)%比(9.28±0.16)%,(8.49±0.15)%比(9.28±0.16)%,t值分别为5.838、4.540,P值均<0.01].与正常对照组比较,基础致敏组与OVA/AR组小鼠鼻黏膜中的Notch1表达均上升(1.04±0.05比0.71 ±0.05,1.83 ±0.10比0.71 ±0.05,t值分别为9.293、31.363,P值均<0.01);OVA/AR组Jagged1表达上升(0.41±0.04比0.21±0.01,t=13.472,P<0.01).相关分析发现Notch1与IL-6、IL-10表达� 展开更多
关键词 NOTCH1 JAGGED1 鼻炎 变应性 小鼠
KDM2A对人卵巢癌顺铂耐药细胞株A2780增殖和凋亡的影响及机制研究 被引量:1
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作者 卢丹华 洪莉 +2 位作者 杨将 高利昆 曾婉玲 《现代生物医学进展》 CAS 2018年第16期3001-3006,3011共7页
目的:探讨赖氨酸脱甲基酶2A(Lysine-specific demethylase 2A,KDM2A)对顺铂(cisplatin,DDP)耐药的人卵巢癌细胞A2780细胞增殖和凋亡的影响及其可能作用机制。方法:通过构建慢病毒载体转染A2780/DDP,分为A2780、A2780/DDP、A2780/D... 目的:探讨赖氨酸脱甲基酶2A(Lysine-specific demethylase 2A,KDM2A)对顺铂(cisplatin,DDP)耐药的人卵巢癌细胞A2780细胞增殖和凋亡的影响及其可能作用机制。方法:通过构建慢病毒载体转染A2780/DDP,分为A2780、A2780/DDP、A2780/DDP/KDM2A(转染KDM2A)、A2780/DDP/Jagged1(转染Jagged1)以及A2780/DDP/NC(转染病毒载体)组。采用Western blot检测3组KDM2A、Jagged1、Bcl2和BAX蛋白表达,CCK8和平板克隆形成实验检测细胞对顺铂的敏感性,流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果:A2780/DDP细胞KDM2A和Jagged1的蛋白表达水平均显著高于A2780细胞(P〈0.05),且A2780/DDP/KDM2A细胞中KDM2A和Jagged1的蛋白表达均低于A2780/DDP以及阴性对照组A2780/DDP/NC(P〈0.05);A2780/DDP/Jagged1细胞的Jagged1蛋白表达低于A2780/DDP以及A2780/DDP/NC(P〈0.05),而其KDM2A蛋白的表达比较差异无统计学意义(P〉0.05)。不同浓度DDP处理的A2780/DDP/KDM2A细胞的生长抑制率均显著高于A2780/DDP/NC和A2780/DDP细胞(P〈0.05),A2780/DDP/KDM2A细胞克隆形成数量亦明显高于A2780/DDP/NC和A2780/DDP细胞(P〈0.05)。A2780/DDP/KDM2A细胞凋亡率为(25.84±3.27)%,明显高于A2780/DDP细胞[(14.29±1.96)%](P〈0.05)和A2780/DDP/NC细胞[(12.46±2.15)%](P〈0.05)。A2780/DDP/KDM2A细胞中Bcl-2蛋白表达明显低于A2780/DDP细胞(P〈0.05),而A2780/DDP/KDM2A细胞Bax的表达水平却高于A2780/DDP细胞(P〈0.05)。结论:KDM2A可能通过上调Jagged1的表达,促进人卵巢癌细胞A2780的增殖并抑制其凋亡,进而降低人卵巢癌耐药细胞A2780的顺铂敏感性。 展开更多
关键词 卵巢癌 A2780细胞 KDM2A JAGGED1 顺铂 耐药
冠心病患者血浆Jagged1与VEGF的关系 预览 被引量:3
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作者 刘存存 杨国杰 +3 位作者 李栋博 李国栋 秦鹏 魏子寒 《郑州大学学报:医学版》 北大核心 2018年第1期121-124,共4页
目的:测定冠心病患者血浆Jagged1与血管内皮生长因子(VEGF)水平,分析二者的关系并探讨其临床意义。方法:采用酶联免疫吸附法测定85例冠心病患者(稳定性心绞痛30例、不稳定性心绞痛29例、急性心肌梗死26例)以及30例对照(冠状动脉... 目的:测定冠心病患者血浆Jagged1与血管内皮生长因子(VEGF)水平,分析二者的关系并探讨其临床意义。方法:采用酶联免疫吸附法测定85例冠心病患者(稳定性心绞痛30例、不稳定性心绞痛29例、急性心肌梗死26例)以及30例对照(冠状动脉造影未见异常)血浆Jagged1和VEGF水平,并分析Jagged1与VEGF的关系。结果:稳定性心绞痛组、不稳定性心绞痛组和急性心肌梗死组血浆Jagged1和VEGF水平均高于对照组,且血浆Jagged1和VEGF的水平在稳定性心绞痛组、不稳定性心绞痛组和急性心肌梗死组逐渐升高(P均〈0.05)。冠心病患者血浆Jagged1与VEGF水平呈正相关(r=0.708,P〈0.01)。结论:Jagged1与冠心病关系密切。 展开更多
关键词 冠心病 JAGGED1 血管内皮生长因子
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Jagged1-STAT3信号轴对卵巢癌细胞A2780迁移能力的影响 被引量:1
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作者 卢丹华 洪莉 +3 位作者 杨将 周敏 李素庭 王琳琳 《中国计划生育和妇产科》 2017年第8期72-76,共5页
目的探讨Jagged1调控STAT3对卵巢癌A2780细胞迁移能力的影响。方法Notch信号特异性阻断剂γ-分泌酶抑制剂(N-[N-(3,5-difluorophenacetyl)-1-alanyl]-S-phenylglycine t—butyl ester,DAPT)以浓度梯度的方式(0μM、2.5μM、5μM... 目的探讨Jagged1调控STAT3对卵巢癌A2780细胞迁移能力的影响。方法Notch信号特异性阻断剂γ-分泌酶抑制剂(N-[N-(3,5-difluorophenacetyl)-1-alanyl]-S-phenylglycine t—butyl ester,DAPT)以浓度梯度的方式(0μM、2.5μM、5μM、10μM、20μM和40μM)处理卵巢癌A2780细胞,通过CCK-8和平板克隆实验分析细胞增殖能力,Transwell迁移实验和体外划痕实验检测A2780细胞迁移能力,Western blot检测Jagged1、STAT3和P—STAT3的蛋白表达。结果实验组细胞的平板克隆形成能力均低于对照组细胞,且随浓度升高呈逐级递减趋势,且10μM DAPT处理后的细胞下降最明显(P〈0.05)。实验组的迁移能力明显低于对照组,且呈时间梯度和浓度梯度的方式降低(P〈0.05)。卵巢癌A2780细胞中Jagged1下调p-STAT3表达以浓度和时间依赖的方式,DAPT浓度大于10μM有明显抑制作用(P〈0.05);STAT3蛋白表达的作用变化无明显差异(P〉0.05)。结论抑制Jagged1可下调STAT3导致卵巢癌A2780细胞活力、增殖和迁移能力降低,Jagged1可能成为卵巢癌治疗的潜在新靶点。 展开更多
关键词 卵巢癌 JAGGED1 STAT 3 p—STAT 3 迁移
血府逐瘀胶囊调控血管新生中Jagged1/Notch信号的作用机制
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作者 王一铮 林凡 +2 位作者 蔡飞 胡雅琼 高冬 《中国实验方剂学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第22期132-136,共5页
目的:探讨Jagged1/Notch信号通路在血府逐瘀胶囊调控血管新生中的作用。方法:以2.5%的血府逐瘀胶囊含药血清和空白血清分别干预人微血管内皮细胞(HMEC-1),通过实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测药物处理细胞12,24,36,48 h时Jagg... 目的:探讨Jagged1/Notch信号通路在血府逐瘀胶囊调控血管新生中的作用。方法:以2.5%的血府逐瘀胶囊含药血清和空白血清分别干预人微血管内皮细胞(HMEC-1),通过实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测药物处理细胞12,24,36,48 h时Jagged1 mRNA水平的表达,通过蛋白免疫印迹法(Western blot)检测药物处理细胞12,24,48 h时Jagged1在蛋白质水平的表达;在血府逐瘀胶囊促血管新生最佳药效条件下,使用γ-分泌酶抑制剂(3,5-二氟苯乙酰基)-L-丙氨酰基-L-2-苯基甘氨酸叔丁酯(DAPT)阻断Notch信号通路,设置DAPT处理组,二甲基亚砜(DMSO)溶剂组和空白组,通过体外成血管实验检测抑制Jagged1/Notch信号对药物诱导HMEC-1体外成血管能力的影响。结果:血府逐瘀胶囊含药血清干预内皮细胞12 h能上调Jagged1在mRNA水平表达(P〈0.01),药物干预细胞24 h能同时上调Jagged1在mRNA和蛋白水平表达(P〈0.05);DAPT阻断Notch信号后,药物促体外成血管能力下降。结论:血府逐瘀胶囊可通过调控Jagged1表达,影响Jagged1/Notch信号通路,从而调控血管新生。 展开更多
关键词 血府逐瘀胶囊 血管新生 JAGGED1 NOTCH
失答剌知丸对脑缺血再灌注大鼠海马区Notch1和Jagged1含量的影响 被引量:3
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作者 苏丹 贾孟辉 +4 位作者 李占涛 于凌志 左艳丽 黑晓英 李宏伟 《辽宁中医杂志》 北大核心 2017年第5期1087-1089,共3页
目的:观察失答剌知丸对脑缺血再关注大鼠海马区Notch1和Jagged1含量的影响。方法:将102只SD大鼠随机分为17组,每组6只,分别为:空白组,假手术组,模型组,尼莫地平组,失荅剌知丸高剂量组、中剂量组和低剂量组,其中后5组分别依据再灌注... 目的:观察失答剌知丸对脑缺血再关注大鼠海马区Notch1和Jagged1含量的影响。方法:将102只SD大鼠随机分为17组,每组6只,分别为:空白组,假手术组,模型组,尼莫地平组,失荅剌知丸高剂量组、中剂量组和低剂量组,其中后5组分别依据再灌注时间的不同分为1 d、3 d、7 d组。以上各组除空白、假手术组外,均采用线栓法制备局灶性脑缺血再灌注模型(MCAO)。其中空白组、假手术组、模型组均用生理盐水灌胃;尼莫地平组给予浓度为1.08 g/L灌胃;失荅剌知丸组则以浓度分别为4.5 g/m L、3.0 g/m L和1.5 g/m L灌胃;以上各组每天同一时间灌胃,2次/d。各组分别在缺血再灌注1 d、3 d、7 d各时间点取材,检测Notch1和Jagged1水平。结果:(1)空白组与假手术组对比没有统计学意义(P〉0.05);(2)模型组和各药物组相较于空白组、假手术组均有统计学意义(P〈0.05);(3)各药物组相较于模型组均有统计学意义(P〈0.05);(4)尼莫地平组与失荅剌知丸低剂量组对比有统计学意义(P〈0.05),与失荅剌知丸中剂量组对比没有统计学意义(P〉0.05),与失荅剌知丸高剂量组对比差异性显著(P〈0.01);(5)失荅剌知丸低、中、高剂量组,随着1 d、3 d、7 d时间点的延长,Notch1和Jagged1表达量依次呈上升趋势,其中尤以7 d组表达量最高。结论:失答剌知丸治疗脑缺血可能与自身药效和促进海马区Notch1和Jagged1表达水平有关。 展开更多
关键词 失答剌知丸 脑缺血 NOTCH1 JAGGED1
Jagged1/Notch3信号通路蛋白在人三阴乳腺癌中的表达及临床意义 被引量:1
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作者 王晓珊 李芳华 +2 位作者 张晓 曹丹 罗锋 《肿瘤预防与治疗》 2017年第1期23-27,共5页
目的:研究Jagged1/Notch3在TNBC患者中的表达水平及临床意义,探讨Jagged1和Notch3异常表达对TNBC患者的预后影响。方法:Ventana免疫组化法检测Jagged1、Notch3在石蜡标本的蛋白表达,分析其与临床病理及复发转移的关系。结果:Jagged1... 目的:研究Jagged1/Notch3在TNBC患者中的表达水平及临床意义,探讨Jagged1和Notch3异常表达对TNBC患者的预后影响。方法:Ventana免疫组化法检测Jagged1、Notch3在石蜡标本的蛋白表达,分析其与临床病理及复发转移的关系。结果:Jagged1和Notch3在TNBC组织中的阳性表达率分别为35.7%(25/70)和40.0%(28/70)。Jagged1在无淋巴结转移患者中表达高,Notch3则在4个以上淋巴结转移和Ⅲ期患者中的表达更高。结论:TNBC患者中Jagged1/Notch3蛋白的异常表达与淋巴结转移和分期相关。 展开更多
关键词 JAGGED1 NOTCH3 预后 三阴乳腺癌
Notch1信号通路对人牙周膜干细胞应力分化过程的调控 预览
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作者 周述作 秦凡 +2 位作者 崔嘉玺 董立 周继祥 《局解手术学杂志》 2017年第4期240-243,共4页
目的 探究Notch1信号通路在人牙周膜干细胞(PDLSCs)应力分化过程中的调控作用。方法 体外分离培养鉴定PDLSCs,以化学药物方式调控Notch1通路;进行体外细胞应力试验并检测Notch1通路关键指标Notch蛋白胞内段(NICD)以及早期成骨标志... 目的 探究Notch1信号通路在人牙周膜干细胞(PDLSCs)应力分化过程中的调控作用。方法 体外分离培养鉴定PDLSCs,以化学药物方式调控Notch1通路;进行体外细胞应力试验并检测Notch1通路关键指标Notch蛋白胞内段(NICD)以及早期成骨标志物碱性磷酸酶(ALP)、骨形成蛋白2(BMP2)。应力参数为形变率0~12%,频率0.1 Hz;加载时间分组为0 h、6 h、12 h、24 h。结果 激活Notch1通路,ALP、BMP2的表达呈下降趋势(P〈0.05);抑制Notch1通路,ALP、BMP2的表达水平随加力时间明显升高(P〈0.05)。结论 激活Notch1信号通路将抑制人PDLSCs应力分化。 展开更多
关键词 NOTCH1 人牙周膜干细胞 JAGGED1 DAPT 动态张应力 成骨分化
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F:lole of Jaggedl-Heyl Signal in Angiotensin II-induced Impairment of Myocardial Angiogenesis
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作者 Ai-Li Guan Tao He +7 位作者 Yi-Bing Shao Yi-Fan Chi Hong-Yan Dai Yan Wang Li Xu Xuan Yang Hua-Min Ding Shang-Lang Cai 《中华医学杂志:英文版》 SCIE CAS CSCD 2017年第3期328-333,共6页
关键词 血管紧张素II 血管生成 心肌肥大 信号通路 诱导 海尔 免疫组织化学法 血管紧张素Ⅱ
Jagged1 Notch1与NF-κB蛋白在寻常型银屑病中的表达 预览 被引量:1
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作者 杨羽 黎官印 +1 位作者 熊霞 赵菊花 《西部医学》 2017年第3期330-334,共5页
目的 检测寻常型银屑病患者皮肤组织中Jagged1、Notch1与NF-κB蛋白的表达,探讨Notch信号通路的异常激活与银屑病发病机制的关系。方法 收集2012年7月~2014年7月年西南医科大学附属医院皮肤科寻常型银屑病40例患者的病理标本(病例组)... 目的 检测寻常型银屑病患者皮肤组织中Jagged1、Notch1与NF-κB蛋白的表达,探讨Notch信号通路的异常激活与银屑病发病机制的关系。方法 收集2012年7月~2014年7月年西南医科大学附属医院皮肤科寻常型银屑病40例患者的病理标本(病例组)及40例正常人的皮肤标本(对照组),采用免疫组织化学法分别检测银屑病患者皮损区、非皮损区及对照组皮肤标本的Jagged1、Notch1与NF-κB表达。结果 Jagged1、Notch1与NF-κB在银屑病皮损区组比其他两组表达明显升高,差异有统计学意义(P〈0.05);非皮损区组与对照组表达相似,差异无统计学意义(P〉0.05)。且银屑病皮损区组Jagged1、Notch1和NF-κB三者间阳性表达呈正相关(P〈0.01)。结论Jagged1、Notchl、NF-κB蛋白在寻常型银屑病患者中均呈现高表达,且银屑病皮损区Jagged1、Notch1和NF-κB三者阳性表达呈正相关,因此Jagged1、Notchl、NF-κB蛋白可能在银屑病的发病机制中占有重要地位。 展开更多
关键词 银屑病 JAGGED1 NOTCH1 NF-ΚB 免疫组化
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藏医白脉疗法对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑损伤的保护作用及对海马齿状回Jagged1表达的影响 预览 被引量:1
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作者 祝日荣 任小巧 +6 位作者 毛萌 王明强 郭慧娟 仁青加 葛东宇 李根茂 郑丽娟 《环球中医药》 CAS 2016年第6期645-649,共5页
目的探讨白脉疗法对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑损伤的保护作用及对海马齿状回Jagged1表达的影响。方法线栓法制作局灶性脑缺血再灌注大鼠模型。随机分为假手术组、模型组、白脉疗法组,脑缺血1.5小时,分别再灌注7天、14天,通过氯化三苯基... 目的探讨白脉疗法对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑损伤的保护作用及对海马齿状回Jagged1表达的影响。方法线栓法制作局灶性脑缺血再灌注大鼠模型。随机分为假手术组、模型组、白脉疗法组,脑缺血1.5小时,分别再灌注7天、14天,通过氯化三苯基四氮唑(triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色观察脑梗死面积,苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)染色观察皮层细胞形态变化,并应用免疫组化法检测各组大鼠海马齿状回Jagged1阳性细胞数量。结果 (1)TTC染色观察到正常脑组织呈鲜红色,梗死区脑组织呈苍白色,并且随着再灌注时间的延长可见梗死区扩大,白脉疗法组的脑梗死体积小于模型组,且14天时与模型组比较有显著性差异(P〈0.05)。(2)HE染色表明白脉疗法组脑缺血大鼠皮层神经元的损伤程度低于模型组。(3)白脉疗法可以上调脑缺血大鼠海马齿状回SGZ的Jagged1表达,术后7天、14天Jagged1阳性细胞数高于模型组、假手术组,且有显著性差异(P〈0.05)。结论白脉疗法对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑损伤有一定的保护作用,且可促进大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后海马齿状回区Jagged1的表达,Jagged1的表达增加可能是白脉疗法通过Notch通路促进脑缺血损伤后内源性神经干细胞增殖分化的分子机制之一。 展开更多
关键词 白脉疗法 JAGGED1 海马齿状回 局灶性脑缺血再灌注模型
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补肾中药对绝经后骨质疏松症大鼠肾组织Notch信号通路的影响 预览
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作者 苏麒麟 孙鑫 +1 位作者 邓洋洋 郑洪新 《世界科学技术:中医药现代化》 2015年第12期2522-2526,共5页
目的:本研究旨在观察去卵巢骨质疏松症大鼠模型肾组织Hes1、Jagged1和Notch1mRNA及其编码蛋白HES1、Jagged1和Notch1的活性变化,探究补肾中药防治骨质疏松症的分子生物学机制。方法:将75只雌性SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型... 目的:本研究旨在观察去卵巢骨质疏松症大鼠模型肾组织Hes1、Jagged1和Notch1mRNA及其编码蛋白HES1、Jagged1和Notch1的活性变化,探究补肾中药防治骨质疏松症的分子生物学机制。方法:将75只雌性SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、补肾复方组、福善美组,模型组采用切除雌性SD大鼠双侧卵巢的方式建立骨质疏松症模型,补肾复方组运用补肾复方对模型大鼠治疗8周,用福善美作为阳性药物对照组。8周后采用ELISA法检测各组肾组织HES1、Jagged1以及Notch1含量;RT-PCR检测各组Hes1、Jagged1和Notch1相对表达量。结果:与正常组相比,模型组肾组织Hes1、Jagged1和Notch1及其编码蛋白表达明显减少(P〈0.01);与模型组相比,补肾复方组和福善美组肾组织Hes1、Jagged1和Notch1及其编码蛋白的表达均明显增加(P〈0.01);结论:骨质疏松症的发生机制与Notch信号传导通路有关;补肾复方通过激活Notch信号传导通路,可以促进成骨细胞分化,抑制破骨细胞活性,起到防止骨质疏松症的作用。 展开更多
关键词 骨质疏松症 补肾 NOTCH1 JAGGED1 HES1
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人Notch信号通路中Jagged1基因的克隆与真核表达 被引量:3
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作者 叶健斌 陈中标 +4 位作者 梁来妹 杨宜 宁立军 宁云山 李妍 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期437-441,共5页
[目的]克隆人Notch信号通路中配体Jagged1基因并进行真核表达。[方法]采用RT-PCR的方法从Hela细胞总RNA中获取Jagged1基因,并克隆至携带FLAG标签的真核表达载体pCMV-Tag4。经酶切、PCR和测序鉴定后,将重组质粒Jagged1-pCMV-Tag4瞬时转染... [目的]克隆人Notch信号通路中配体Jagged1基因并进行真核表达。[方法]采用RT-PCR的方法从Hela细胞总RNA中获取Jagged1基因,并克隆至携带FLAG标签的真核表达载体pCMV-Tag4。经酶切、PCR和测序鉴定后,将重组质粒Jagged1-pCMV-Tag4瞬时转染HEK 293T细胞,通过Q-PCR和Western blot检测目的蛋白的表达。[结果]成功构建了真核表达质粒Jagged1-pCMV-Tag4并在HEK 293T细胞中瞬时表达。[结论]Jagged1在HEK 293T细胞中实现瞬时表达,为稳定表达和进一步研究Jagged1/Notch信号通路奠定基础。 展开更多
关键词 NOTCH信号通路 真核表达 JAGGED1 pCMV-Tag4
肝癌组织DLK1和Jagged1表达临床意义探讨 被引量:3
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作者 欧阳合意 张艳丽 +2 位作者 陈小伍 王卫东 康凯夫 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2015年第8期610-613,共4页
目的探讨DLK1和Jagged1在原发性肝细胞性肝癌组织中的表达情况,深入分析两者与肝癌临床病理资料的关系及其临床意义。方法收集2001-01-01-2009-10-30顺德第一人民医院病理科采用免疫组化SP法检查10例正常肝组织、50例肝炎、50例肝硬化和... 目的探讨DLK1和Jagged1在原发性肝细胞性肝癌组织中的表达情况,深入分析两者与肝癌临床病理资料的关系及其临床意义。方法收集2001-01-01-2009-10-30顺德第一人民医院病理科采用免疫组化SP法检查10例正常肝组织、50例肝炎、50例肝硬化和150例肝细胞性肝癌组织中DLK1和Jagged1的表达情况。结果 DLK1阳性表达率在正常肝组织为0(0/10)、肝炎组为6.00%(3/50)、肝硬化组为28.00%(14/50)、肝癌组为46.67%(70/150),四组间阳性率比较差异有统计学意义,χ2=34.38,P〈0.05。正常肝组织和肝炎组,正常肝组织和肝硬化组,正常肝组织和肝癌组,肝硬化和肝癌组两两比较差异均无统计学意义,P值均〉0.05。肝炎和肝硬化组(χ2=8.575,P=0.003),肝炎和肝癌组(χ2=26.757,P〈0.001)两两比较差异均有统计学意义。Jagged1阳性表达率在正常肝组织中为40.00%(4/10)、肝炎组为40.00%(20/50)、肝硬化组为62.00%(31/50)、肝癌组为71.33%(107/150),四组间阳性率比较差异有统计学意义,χ2=17.92,P〈0.05。正常肝组织和肝炎组,正常肝组织和肝硬化组,正常肝组织和肝癌组,肝炎组和肝硬化组,肝硬化组和肝癌组,两两比较差异均无统计学意义,P值均〉0.05。肝炎组和肝癌组比较差异有统计学意义,χ2=15.885,P〈0.001。DLK1表达与年龄有关(χ2=15.01,P〈0.05),Jagged1表达与年龄(χ2=7.94,P〈0.05)、分化程度(χ2=14.79,P〈0.05)、HBsAg(χ2=4.53,P〈0.05)和预后(χ2=3.92,P〈0.05)有关。DLK1和Jagged1在肝细胞癌组织中表达密切相关,χ2=12.79,P〈0.05。结论 DLK1和Jagged1的异常表达与肝癌的发生、发展和分化密切相关。 展开更多
关键词 DLK1 JAGGED1 肝细胞性肝癌 分化 免疫组织化学
黄芪甲苷和齐墩果酸对体外神经干细胞增殖和Jagged1mRNA表达的影响 被引量:6
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作者 刘柏炎 俞悦 +2 位作者 易健 陈雪梅 蔡光先 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 2015年第9期1033-1036,共4页
目的观察黄芪甲苷和齐墩果酸对体外神经干细胞增殖和相关基因Jagged1表达的影响。方法采用机械吹打法从胎鼠脑内获得神经干细胞,随机分组,分别给予不同浓度(10^-6,5×10^-7,10^-7,5×10^-8,10^-8,5×10^-9,10^-9 mol·... 目的观察黄芪甲苷和齐墩果酸对体外神经干细胞增殖和相关基因Jagged1表达的影响。方法采用机械吹打法从胎鼠脑内获得神经干细胞,随机分组,分别给予不同浓度(10^-6,5×10^-7,10^-7,5×10^-8,10^-8,5×10^-9,10^-9 mol·L^-1)的黄芪甲苷、齐墩果酸进行干预,72 h后用WST法检测细胞的增殖情况,PCR检测Jagged1表达水平。结果黄芪甲苷对体外神经干细胞增殖影响不显著,高剂量尚存在细胞毒性。齐墩果酸能促进神经干细胞增殖,且呈一定的剂量效应关系,与对照组和黄芪甲苷组比较均有显著差异(P〈0.05)。细胞未分化状态下Jagged1基因存在一定的表达,增殖率越高Jagged1表达水平越高;与同浓度黄芪甲苷组比较,齐墩果酸显著上调Jagged1表达(P〈0.05)。结论不同浓度的黄芪甲苷和齐墩果酸对体外培养神经干细胞增殖和Jagged1表达的影响不同;齐墩果酸作用优于黄芪甲苷。 展开更多
关键词 神经干细胞 增殖 黄芪甲苷 齐墩果酸 JAGGED1
Dlkl、Jaggedl基因在大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞增殖及转分化中的作用 被引量:2
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作者 祝晓溪 王超云 +3 位作者 朱国青 高瑞伟 马金帅 刘秀香 《中华实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期687-693,共7页
目的研究Notch的配体Dlkl和Jaggedl分别激活Notch信号通路后对大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)转分化及增殖的影响。方法在细胞培养体系中,分别加入重组蛋白Dlkl和重组人核转录因子-κB(rhNF-κB)(Jaggedl激活剂),正常组加入含120m... 目的研究Notch的配体Dlkl和Jaggedl分别激活Notch信号通路后对大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)转分化及增殖的影响。方法在细胞培养体系中,分别加入重组蛋白Dlkl和重组人核转录因子-κB(rhNF-κB)(Jaggedl激活剂),正常组加入含120mL/L胎牛血清的DMEM培养基作为对照,光镜和电镜下观察48、72、96h时间点AECⅡ增殖和转分化状况。血细胞计数器计数细胞;四甲基偶氮唑盐(M1Tr)比色法检测细胞增殖能力;免疫荧光双标法检测AECII特异性肺泡表面活性蛋白C(SP-C)及肺泡Ⅰ型上皮细胞(AECI)特异性水通道蛋白5(AQP5)的表达;时实荧光定量PCR检测转分化前后各时间点Notch配体Dlkl和Jaggedl、通路活化标志Notchl、靶基因Hesl及转分化标志物SP-C、AQP5mRNA的表达变化。结果细胞数及增殖能力:与正常组比较,Dlkl组细胞数及增殖能力明显提高[细胞数(×10^9/L)9.05±0.45比7.95±0.65,11.68±0.43比8.68±0.52,11.55±0.17比8.73±0.48,P均〈0.05;MTT结果(A值)0.699±0.050比0.462±0.080,0.912-t-O.080比0.535±0.040,0.726±0.050比0.540±0.020,P均〈0.05],转分化速度减慢;rhNF-κB组细胞数及增殖能力降低[细胞数(×10^9/L)4.95±0.33比7.95±0.65,4.73±0.71比8.68±0.52,4.04±0.11比8.73±0.48,P均〈0.05;细胞增殖能力0.398±0.030比0.462±0.080,0.402±0.070比0.535±0.040,0.380±0.110比0.540±0.020,P均〈0.05],转分化速度加快;单因素方差分析3组细胞之间的差别有统计学意义(细胞数:F=486.73,P=0.02;细胞增殖能力:F=37.16,P=0.02)。mRNA表达:与正常组比较,Dlkl组SP-CmRNA表达明显增多(P〈0.05),AQPSmRNA表达延迟且明显减少(P〈0.05),JaggedlmRNA始终呈弱表达或不表达,Dlkl、NotchlmRNA表达增多(P〈0.05),HeslmRNA表达减少(P〈 展开更多
关键词 肺泡Ⅱ型上皮细胞 NOTCH DLK1 JAGGED1 新生儿呼吸窘迫综合征
Jagged1活化Notch通路促进破骨细胞分化并抑制其增殖 被引量:3
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作者 王汝杰 邓小军 +7 位作者 刘复州 邱浩 邹传奇 陈培 王洪凯 张莹 初同伟 周跃 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1980-1982,共3页
目的 观察Jagged1通过活化Notch通路对人外周血CD14+单核细胞破骨分化、增殖的影响.方法 免疫组织化学法检测Jagged1在肺癌骨转移标本中的表达,Ficoll法联合磁珠分选法分离人外周血CD14+单核细胞,分别加入Jagged1重组蛋白、Jagged1重... 目的 观察Jagged1通过活化Notch通路对人外周血CD14+单核细胞破骨分化、增殖的影响.方法 免疫组织化学法检测Jagged1在肺癌骨转移标本中的表达,Ficoll法联合磁珠分选法分离人外周血CD14+单核细胞,分别加入Jagged1重组蛋白、Jagged1重组蛋白及γ-分泌酶抑制剂(DAPT)分组培养,采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测组织蛋白酶K(CK)、抗酒石酸性磷酸酶(TRAP)、降钙素受体(CTR)及Notch靶基因发状分裂相关增强子-1(HES-1)、HES相关YRPW主题-1(HEY-1)mRNA的表达,TRAP染色鉴定破骨细胞,扫描电镜检测破骨细胞溶骨功能.细胞计数法(CCK-8)检测CD14+单核细胞增殖.结果 Jagged1在肺癌骨转移标本中高表达,癌旁组织无或低表达;Jagged1组TRAP、CK、CTR及HES-1、HEY-1 mRNA的表达、TRAP+细胞数较对照组及DAPT组明显升高(P<0.05),而DAPT组与对照组比较均无明显变化;细胞培养48 h,Jagged1组细胞增殖较对照组及DAPT组明显抑制.结论 Jagged1通过活化Notch通路促进破骨前体细胞分化、抑制其增殖. 展开更多
关键词 JAGGED1 破骨细胞 NOTCH 细胞分化 细胞增殖
融合蛋白TRX-hJagged1原核表达载体的构建及其在BL21中的表达 预览
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作者 李国辉 范玉贞 +6 位作者 黄斯勇 刘强 尹郸丹 刘利 陈任安 郝淼旺 梁英民 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期807-811,共5页
本研究旨在构建原核表达载体并原核表达Notch配体Jagged1。构建不同长度但均包含DSL区的原核表达载体pET-hJagged1,将构建重组原核表达载体pET—hJagged1转化大肠杆菌BL21后,予以IPTG诱导,优化诱导条件,使目的蛋白TRX—hJagged1在... 本研究旨在构建原核表达载体并原核表达Notch配体Jagged1。构建不同长度但均包含DSL区的原核表达载体pET-hJagged1,将构建重组原核表达载体pET—hJagged1转化大肠杆菌BL21后,予以IPTG诱导,优化诱导条件,使目的蛋白TRX—hJagged1在上清中有较大量表达。诱导工程菌并以镍柱纯化对可溶性的目的蛋白进行纯化。结果表明,成功构建了原核表达载体pET—ldaggedl(Bg1Ⅱ)、pET—hJagged1(Hind1)及pET-hJagged1(stuI),但仅pET—hJagged1(StuI)表达可溶性的TRX—hJagged1。通过镍柱纯化获得了较单一的TRX—Jagged1蛋白,WesternBlot证实了其为目的蛋白。结论:成功地构建了原核表达载体pET—hJagged1,并在原核表达系统表达了TRX-Jagged1融舍蛋白,为进一步研究Jagged1在淋巴造血系统中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 NOTCH JAGGED1 融合蛋白 原核表达
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缺氧对人脐静脉内皮细胞NOTCH信号通路的影响
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作者 唐桂菊 吴媛媛 +5 位作者 刘海意 龚洵 石鑫玮 李宇琪 吴行飞 乔福元 《中国优生与遗传杂志》 2013年第4期17-19,共3页
目的探讨缺氧条件下Jagged1/Notchl在人脐静脉内皮细胞中的变化。方法利用实时荧光定量PCR(RT—qPCR)技术检测二氯化钴(CoCl2)化学缺氧状态下人脐静脉内皮细胞株中Notchl及Jagged1mRNA的表达情况。结果与正常对照组相比,缺氧条件... 目的探讨缺氧条件下Jagged1/Notchl在人脐静脉内皮细胞中的变化。方法利用实时荧光定量PCR(RT—qPCR)技术检测二氯化钴(CoCl2)化学缺氧状态下人脐静脉内皮细胞株中Notchl及Jagged1mRNA的表达情况。结果与正常对照组相比,缺氧条件下脐静脉内皮细胞细胞Notchl mRNA及Jagged1 mRNA表达量均明显降低,差异具有统计学意义(P〈n05)。结论缺氧条件下脐静脉内皮细胞Notchl及Jagged1表达降低,提示Notch信号通路可能参与脐静脉内皮细胞功能调控。 展开更多
关键词 NOTCH1 JAGGED1 缺氧 脐静脉内皮细胞
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