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淫羊藿苷对H2O2诱导HUVECs细胞氧化损伤的保护作用 预览
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作者 张荔 黄德红 +1 位作者 孙付军 李贵海 《中国药物警戒》 2019年第10期581-587,共7页
目的观察淫羊藿苷(ICA)对H2O2诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)氧化损伤的保护作用及可能机制。方法 H2O2体外诱导HUVECs,构建氧化应激损伤模型,加入不同浓度的淫羊藿苷(12.5μg·mL^-1, 25μg·mL^-1, 50μg·mL^-1),噻唑蓝... 目的观察淫羊藿苷(ICA)对H2O2诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)氧化损伤的保护作用及可能机制。方法 H2O2体外诱导HUVECs,构建氧化应激损伤模型,加入不同浓度的淫羊藿苷(12.5μg·mL^-1, 25μg·mL^-1, 50μg·mL^-1),噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞活力,生化法测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性和上清液中乳酸脱氢酶(LDH)释放量,荧光实时定量PCR(RT-PCR)检测细胞中MCP-1和ICAM-1 mRNA的表达。结果与模型组相比,不同浓度的淫羊藿苷能显著提高受损细胞的细胞活力和SOD活性,减少上清液中LDH释放,下调ICAM-1和MCP-1 mRNA表达,且均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论淫羊藿苷能改善受损细胞氧化指标,降低动脉粥样硬化相关细胞因子表达,改善动脉粥样硬化等血管疾病的进程。 展开更多
关键词 淫羊藿苷 HUVECS H2O2 动脉粥样硬化 MCP-1 ICAM-1
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肠胃清抑制人脐静脉内皮细胞血管生成的实验研究 预览
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作者 吴瑞影 许建华 《中医药临床杂志》 2019年第11期2116-2119,共4页
目的:研究肠胃清对人脐静脉内皮细胞血管生成的影响,并探讨其作用机理。方法:通过体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),采用细胞划痕实验、transwell迁移实验、小管形成实验检测肠胃清含药血清对HUVECs的迁移、管腔形成能力的影响。采用... 目的:研究肠胃清对人脐静脉内皮细胞血管生成的影响,并探讨其作用机理。方法:通过体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),采用细胞划痕实验、transwell迁移实验、小管形成实验检测肠胃清含药血清对HUVECs的迁移、管腔形成能力的影响。采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测肠胃清含药血清对HUVECs内血管内皮生长因子A(VEGF-A)、碱性成纤维生长因子(bFGF)、基质金属蛋白酶2/9(MMP2/9)mRNA表达的影响。结果:细胞划痕、transwell迁移实验显示肠胃清含药血清抑制HUVECs的迁移(P<0.01)。小管形成实验显示肠胃清含药血清抑制HUVECs的成管能力(P<0.01)。RT-PCR结果显示肠胃清下调HUVECs内VEGF-A、bFGF、MMP2、MMP9 mRNA的表达(P<0.01),呈浓度依赖性。结论:肠胃清能抑制人脐静脉内皮细胞血管生成,可能与降低HUVECs内血管生成因子VEGF-A、bFGF、MMP2、MMP9的mRNA表达有关。 展开更多
关键词 肠胃清 肿瘤血管生成 人脐静脉内皮细胞
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丹参茎叶提取物及其主要成分对人脐静脉内皮细胞的保护作用及机制研究
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作者 孙成静 曾慧婷 +5 位作者 宿树兰 项想 朱悦 顾俊菲 唐志书 段金廒 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第14期3357-3367,共11页
目的探讨丹参茎叶提取物及其主要成分对氧化应激和高糖损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的保护作用及机制。方法建立HUVECs氧化应激与高糖损伤模型,分别给予不同剂量的丹参茎叶醇提物(CJ)、丹参茎叶水提物(SJ)、丹参根醇提物(CG)、丹参... 目的探讨丹参茎叶提取物及其主要成分对氧化应激和高糖损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的保护作用及机制。方法建立HUVECs氧化应激与高糖损伤模型,分别给予不同剂量的丹参茎叶醇提物(CJ)、丹参茎叶水提物(SJ)、丹参根醇提物(CG)、丹参根水提物(SG)及迷迭香酸、丹酚酸B、芦丁、异槲皮苷、隐丹参酮等,MTT法检测细胞活力,检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、一氧化氮(NO)、内皮素(ET-1)、细胞黏附因子(ICAM-1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平。结果与对照组比较,HUVECs经H2O2处理后,GSH-Px、CAT和NO含量降低(P<0.01),ET-1含量升高(P<0.01);HUVECs经高糖处理后,ICAM-1和TNF-α含量升高(P<0.01),NO含量降低(P<0.01)。与模型组比较,CJ、CG、SJ、SG组GSH-Px、CAT和NO含量升高,ET-1、ICAM-1、TNF-α含量降低(P<0.05、0.01)。迷迭香酸、丹酚酸B、芦丁等的高、中剂量组,异槲皮苷、隐丹参酮高剂量组均能显著提高GSH-Px、CAT和NO含量(P<0.05、0.01),降低ET-1含量(P<0.05、0.01),丹酚酸B、异槲皮苷和芦丁的高剂量组及迷迭香酸的高、中剂量组均可显著降低ICAM-1含量(P<0.01),除氨基胍给药组外,其他给药组TNF-α含量相比模型组明显降低(P<0.05、0.01)。除氨基胍和异槲皮苷低剂量组,其他给药组NO含量均明显升高(P<0.05、0.01)。结论一定质量浓度范围内的丹参茎叶与丹参根醇提物及水提物、迷迭香酸、丹酚酸B、芦丁、异槲皮苷对H2O2和高糖引起的HUVECs细胞损伤具有明显保护作用,其作用机制与抑制细胞间黏附分子的表达,调节NO和TNF-α生成密切相关。本研究将为丹参药材生产过程产生的非药用部位茎叶的资源价值发现及转化利用提供参考。 展开更多
关键词 丹参 茎叶 人脐静脉内皮细胞 资源价值发现 资源化利用 迷迭香酸 丹酚酸B 芦丁 异槲皮苷 隐丹参酮
沉默VCAM-1基因降低ox-LDL诱导的HUVECs氧化损伤和凋亡 预览
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作者 刘刚 郭山岭 +1 位作者 胡永寸 刘慧 《基础医学与临床》 CSCD 2019年第10期1423-1426,共4页
目的探讨血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)氧化损伤及凋亡的影响。方法将体外培养的HUVECs随机分为对照组、ox-LDL组(加入100μg/mL ox-LDL培养24 h)、siRNA-NC组和siRNA-VCAM-1干... 目的探讨血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)氧化损伤及凋亡的影响。方法将体外培养的HUVECs随机分为对照组、ox-LDL组(加入100μg/mL ox-LDL培养24 h)、siRNA-NC组和siRNA-VCAM-1干预组。在Lipofectamine 2000介导下将siRNA-NC或siRNA-VCAM-1转染HUVECs。Western blot检测VCAM-1蛋白水平,MTT法检测细胞活性,流式细胞计量术检测细胞凋亡率和活性氧(ROS)活性,试剂盒检测丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平。结果VCAM-1在ox-LDL诱导的HUVECs表达量上调(P<0.05);siRNA-VCAM-1显著降低在ox-LDL诱导的HUVECs VCAM-1蛋白水平(P<0.05);下调VCAM-1能够增加细胞活性(P<0.05),降低凋亡率和ROS及MDA水平(P<0.05),升高SOD活性(P<0.05)。结论下调VCAM-1可增加HUVECs活性、降低凋亡及抑制氧化应激反应。 展开更多
关键词 血管细胞黏附分子-1 氧化性低密度脂蛋白 人脐静脉内皮细胞 氧化应激
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氧化型低密度脂蛋白/β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体复合物促进人脐静脉内皮细胞活性氧生成并诱导其凋亡
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作者 陈芋丹 周红 +6 位作者 何超 王婷 张贵婷 张鹏 王韧 吴倩倩 姚雨叶 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期223-229,共7页
目的探讨氧化型低密度脂蛋白/β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体(oxLDL/β2GPI/aβ2GPI)复合物对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡的影响以及ROS活性氧(ROS)在其中的作用。方法分别用β2GPI、 aβ2GPI、β2GPI/aβ2GPI复合物、 oxLDL、 oxLDL/β2... 目的探讨氧化型低密度脂蛋白/β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体(oxLDL/β2GPI/aβ2GPI)复合物对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡的影响以及ROS活性氧(ROS)在其中的作用。方法分别用β2GPI、 aβ2GPI、β2GPI/aβ2GPI复合物、 oxLDL、 oxLDL/β2GPI复合物、 oxLDL/β2GPI/兔IgG(R-IgG)复合物、 oxLDL/β2GPI/aβ2GPI复合物刺激HUVEC,利用Western blot法检测凋亡相关蛋白BAX、 Bcl2和裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)的蛋白水平;异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双标记结合流式细胞术检测细胞凋亡率、二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)标记结合流式细胞术检测细胞ROS水平;CCK-8法检测各处理组对HUVEC活力的影响;采用抗氧化剂罗布麻宁(apocynin)或二苯基碘氯化物(DPI)预处理后观察ROS水平的改变以及对oxLDL/β2GPI/aβ2GPI复合物诱导的HUVEC凋亡的影响。结果 oxLDL/β2GPI/aβ2GPI复合物能显著降低HUVEC的活力,增加细胞BAX、 c-caspase-3蛋白水平,降低Bcl2蛋白水平,促进HUVEC凋亡;oxLDL/β2GPI/aβ2GPI复合物引起细胞ROS水平升高,抗氧化剂处理后,细胞内ROS水平降低,细胞凋亡减少。结论 oxLDL/β2GPI/aβ2GPI复合物可以通过提高ROS来诱导HUVEC凋亡。 展开更多
关键词 氧化型低密度脂蛋白β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体(oxLDL/β2GPI/aβ2GPI)复合物 活性氧(ROS) 人脐静脉内皮细胞(HUVEC) 凋亡
Connexin43 Modulates X-Ray-Induced Pyroptosis in Human Umbilical Vein Endothelial Cells 预览
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作者 LI Chen TIAN Mei +2 位作者 GOU Qiao JIA Yong Rui SU Xu 《生物医学与环境科学:英文版》 SCIE CAS CSCD 2019年第3期177-188,共12页
Objective Pyroptosis is an inflammatory form of programmed cell death. This phenomenon has been recently reported to play an important role in radiation-induced normal tissue injury. Connexin43 (Cx43) is a gap junctio... Objective Pyroptosis is an inflammatory form of programmed cell death. This phenomenon has been recently reported to play an important role in radiation-induced normal tissue injury. Connexin43 (Cx43) is a gap junction protein that regulates cell growth and apoptosis. In this study, we investigated the effect of Cx43 on X-ray-induced pyroptosis in the human umbilical vein endothelial cells (HUVECs). Methods HUVECs, Cx43 overexpression, and Cx43 knockdown strains were irradiated with 10 Gy. Proteins were detected using western blot analysis. Cell pyroptosis was evaluated using the fluorescence-labeled inhibitor of caspase assay (FLICA) and propidium iodide staining through flow cytometry and confocal microscopy. Cell morphology and cytotoxicity were detected by scanning electron microscopy and lactate dehydrogenase release assay, respectively. Results Irradiation with 10 Gy X-ray induced pyroptosis in the HUVECs and reduced Cx43 expression. The pyroptosis in the HUVECs was significantly attenuated by overexpression of Cx43 as it decreased the level of active caspase-1. However, interference of Cx43 expression with siRNA significantly promoted pyroptosis by increasing the active caspase-1 level. Pannexin1 (Panx1), a gap junction protein regulates pyroptosis, and its cleaved form is used to evaluate channel opening and active state. The level of cleaved Panx1 in the HUVECs and Cx43 knockdown strains increased in the presence of X-ray, but decreased in the Cx43 overexpression strains. Furthermore, interference of Panx1 with siRNA alleviated the upregulation of pyroptosis caused by Cx43 knockdown. Conclusion Results suggest that single high-dose X-ray irradiation induces pyroptosis in the HUVECs. In addition, Cx43 regulates pyroptosis directly by activating caspase-1 or indirectly by cleaving Panx1. 展开更多
关键词 X-RAY CONNEXIN43 HUVECS PYROPTOSIS
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葡萄糖溶液缓解急性高原反应的细胞模型探索 预览
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作者 郭桅 张琳琳 《高原科学研究》 CSCD 2019年第2期59-64,共6页
目的:研究高浓度葡萄糖干预对血管内皮细胞氧化应激损伤以及炎症反应有何作用。方法:分别用过氧化氢(H2O2)和脂多糖(LPS)处理细胞,模拟细胞的急性氧化应激损伤和炎症反应,分别用高浓度葡萄糖、皮质醇或者二者联合的培养液对细胞进行不... 目的:研究高浓度葡萄糖干预对血管内皮细胞氧化应激损伤以及炎症反应有何作用。方法:分别用过氧化氢(H2O2)和脂多糖(LPS)处理细胞,模拟细胞的急性氧化应激损伤和炎症反应,分别用高浓度葡萄糖、皮质醇或者二者联合的培养液对细胞进行不同时间和方案的预处理,主要观察高浓度葡萄糖对血管内皮细胞氧化应激损伤的作用模式以及炎症致血管内皮细胞分泌血管内皮生长因子(VEGF)的影响。结果:高浓度葡糖的作用可明显减轻H2O2对HUVEC的损伤,皮质醇(50μM)本身对HUVEC的影响不大,但是将高浓度葡萄糖和皮质醇联合在一起作用于血管内皮细胞时,高糖对细胞的保护作用显著减弱了。高浓度葡萄糖显著上调血管内皮细胞内BETA-ARRESTIN1蛋白的表达,但皮质醇却部分抑制了BETA-ARRESTIN1的上调。LPS刺激血管内皮细胞分泌VEGF,但高浓度葡萄糖存在时这种作用被抑制。结论:一定时间内高浓度葡萄糖的干预可以明显减轻氧化应激所致的血管内皮细胞损伤,皮质醇同时存在时效果削弱;高浓度葡萄糖还可以抑制LPS诱导的血管内皮细胞分泌VEGF。这些细胞实验结果从新的视角部分解释了,为什么紧张焦虑会(皮质醇水平增加)加重急性高原反应,而实际生活中大量服用葡萄糖溶液可以明显缓解初到高原时的急性高原反应症状。 展开更多
关键词 葡萄糖 过氧化氢 脂多糖 血管内皮细胞 急性高原反应
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DENV-2作用于HUVECs和人巨噬细胞对黏附分子表达的影响 预览
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作者 罗玉 左丽 +3 位作者 来涛 张妮 周恩正 陈俊豪 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第15期1802-1807,共6页
目的:研究登革Ⅱ型病毒(DENV-2)感染人脐静脉内皮细胞(HUVECs)和人巨噬细胞,且感染后共培养对主要黏附分子表达的影响。方法:水平密度梯度离心法提取浓缩白细胞中的外周血单核细胞(PBMC),贴壁分离单核细胞,用巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF... 目的:研究登革Ⅱ型病毒(DENV-2)感染人脐静脉内皮细胞(HUVECs)和人巨噬细胞,且感染后共培养对主要黏附分子表达的影响。方法:水平密度梯度离心法提取浓缩白细胞中的外周血单核细胞(PBMC),贴壁分离单核细胞,用巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)刺激5~7 d,流式细胞术鉴定细胞表面CD14和CD11b分子。用10 3 TCID50 DENV-2分别感染HUVECs和人巨噬细胞,且感染后两者共培养,qRT-PCR检测细胞内不同时间点DENV NS1、VCAM-1、ICAM-1和E-selectin mRNA相对表达量。双抗体夹心ELISA法分别检测不同时间点各组培养上清液中可溶性分子ICAM-1、VCAM-1和E-selectin的表达水平变化。结果:流式细胞术鉴定人巨噬细胞纯度为(92.15±1.24)%。DENV-2感染HUVECs后病毒基因NS1的相对表达量呈先升后降趋势,在24 h达到峰值后下降,DENV-2感染人巨噬细胞的DENV NS1基因相对表达量呈先递减后增加趋势,共培养组HUVECs的NS1 mRNA各时间点表达水平均高于HUVECs单独感染组。DENV-2感染巨噬细胞后,ICAM-1 mRNA相对表达量于4、8 h高于巨噬细胞未感染组,12、24、48、72 h相对表达水平与未感染组相比差异无统计学意义;E-selectin mRNA相对表达量于4 h明显高于巨噬细胞未感染组,8 h与未感染组相比表达量无统计学意义差异,12、24、48、72 h与未感染组相比表达量下调;但未检测到VCAM-1 mRNA的表达。共培养组HUVECs的ICAM-1和VCAM-1 mRNA相对表达量与HUVECs单独感染组相比8 h后均上调,且均在24 h达峰值。感染后的HUVECs E-selectin mRNA于4 h表达水平最高,且各组相对表达量均低于共培养组。共培养组中感染DENV-2的HUVECs培养上清液中ICAM-1表达量均高于HUVECs单独感染组;共培养组中感染DENV-2的HUVECs中E-selectin表达量随时间呈先增后降趋势,且在24 h表达量达峰值;但未检测到培养上清液中VCAM-1的表达。结论: DENV-2能在HUVECs和人巨噬细胞中复制且能激活内皮细胞,被DENV-2感染 展开更多
关键词 登革病毒 人脐静脉内皮细胞 人巨噬细胞 黏附分子
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牵张力作用下瘢痕疙瘩间充质干细胞通过旁分泌作用促进血管生成
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作者 周哲 宋海峰 +4 位作者 曹天宇 刘涛 任建军 叶艳 张衍国 《中国皮肤性病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期869-874,共6页
目的研究牵张力作用下瘢痕疙瘩间充质干细胞(keloid-derived mesenchymal stem cells,KD-MSCs)培养上清对人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)生物活性的影响。方法采用CCK-8法、平板划痕实验及Transw... 目的研究牵张力作用下瘢痕疙瘩间充质干细胞(keloid-derived mesenchymal stem cells,KD-MSCs)培养上清对人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)生物活性的影响。方法采用CCK-8法、平板划痕实验及Transwell小室法检测牵张力作用下KD-MSCs培养上清对HUVECs的增殖、细胞迁移情况的影响,并通过RT-PCR检测其整合素(integrin)αv、β3、VEGF、TGF-β、PDGF基因表达的变化。结果牵张力作用下KD-MSCs培养上清刺激HUVECs后其细胞生物活性有明显差异;CCK-8分析结果显示牵张力组HUVECs的增殖高于无牵张力组和空白对照组(P<0.05);平板划痕实验和Transwell小室实验结果显示牵张力组HUVECs的迁移能力明显强于无牵张力组和空白对照组(P<0.05);同时RT-PCR检测结果表明牵张力组HUVECs中整合素αv、β3mRNA表达显著低于无牵张力组(P<0.05);VEGF mRNA表达显著高于无牵张力组(P<0.05);TGF-β、PDGF无明显变化。结论牵张力作用下KD-MSCs可能通过旁分泌促进HUVECs增殖和迁移,其中整合素αv、β3和VEGF参与该生物学过程从而可能在瘢痕疙瘩的发生发展中发挥作用。 展开更多
关键词 瘢痕疙瘩 间充质干细胞 牵张力 人脐静脉血管内皮细胞
缺氧诱导血管内皮细胞损伤的机制研究 预览
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作者 李亚博 王佩 +1 位作者 陈一 杨松柏 《中国实验诊断学》 2019年第5期871-873,共3页
心肌功能障碍可由于心肌缺氧诱导的内皮细胞凋亡造成,常见的有心力衰竭、心肌梗塞(MI)等[1]。因此,研究缺氧时血管内皮细胞(VEC)在机体中的作用机制,对人类心血管疾病的诊治具有重要意义。内皮细胞在缺氧的情况下会产生应激反应,包括细... 心肌功能障碍可由于心肌缺氧诱导的内皮细胞凋亡造成,常见的有心力衰竭、心肌梗塞(MI)等[1]。因此,研究缺氧时血管内皮细胞(VEC)在机体中的作用机制,对人类心血管疾病的诊治具有重要意义。内皮细胞在缺氧的情况下会产生应激反应,包括细胞增殖、迁移、炎症和凋亡[2]。 展开更多
关键词 血管内皮细胞 SP 缺氧诱导 HUVECS α蛋白 细胞增殖
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调脂通脉颗粒含药血清对HUVECs黏附分子的影响
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作者 李璐 杨惠民 +3 位作者 郭杨志 王淑艳 赵睿学 王潇 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期785-787,共3页
目的探讨调脂通脉颗粒含药血清对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)黏附分子的影响。方法采用SPF级雄性SD大鼠40只,随机分为正常组、调脂通脉颗粒组,每组20只,制备含药血清。通过ELISA和Western Blot法,观察调脂通脉颗粒对LPS(1μg/ml)刺激HUVEC... 目的探讨调脂通脉颗粒含药血清对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)黏附分子的影响。方法采用SPF级雄性SD大鼠40只,随机分为正常组、调脂通脉颗粒组,每组20只,制备含药血清。通过ELISA和Western Blot法,观察调脂通脉颗粒对LPS(1μg/ml)刺激HUVECs中ICAM-1、VCAM-1的影响。结果①上清液:与正常组比较,模型组ICAM-1、VCAM-1水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,PDTC组、调脂通脉颗粒低剂量组、调脂通脉颗粒中剂量组、调脂通脉颗粒高剂量组中ICAM-1、VCAM-1水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。②细胞:与正常组比较,模型组HUVECs中ICAM-1蛋白表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,PDTC组、调脂通脉颗粒低剂量组、调脂通脉颗粒中剂量组、调脂通脉颗粒高剂量组ICAM-1蛋白表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论调脂通脉颗粒能有效抑制LPS损伤所致的HUVECs黏附分子表达增加。 展开更多
关键词 调脂通脉颗粒 人脐静脉内皮细胞 细胞黏附分子
NFκB通路与长链非编码RNA NONHSAG057461.1在PM2.5诱导人脐静脉内皮细胞炎症反应中的作用
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作者 周彩兰 谭艺 +5 位作者 王钰钰 邹云锋 廖芳萍 王秋玲 彭苏娟 彭晓武 《环境与健康杂志》 CAS 北大核心 2019年第4期288-292,共5页
目的研究lncRNAs在大气PM2.5诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)炎症反应中的作用及其分子机制。方法HUVECs经100、300μg/ml的PM2.5染毒48 h后,经过非长链非编码RNA测序得到与炎症相关的lncRNAs,用实时荧光定量PCR分析法(RT-qPCR)验证测... 目的研究lncRNAs在大气PM2.5诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)炎症反应中的作用及其分子机制。方法HUVECs经100、300μg/ml的PM2.5染毒48 h后,经过非长链非编码RNA测序得到与炎症相关的lncRNAs,用实时荧光定量PCR分析法(RT-qPCR)验证测序结果。运用胞浆胞核分离试剂盒进行NONHSAG057461.1基因亚细胞定位。采用RNA干扰技术敲低HUVECs中NONHSAG057461.1的表达后,以RT-qPCR检测干扰后IL-1β的表达水平,用NFκB特异性阻断剂BAY11-7082(10μmol/L)处理细胞后检测NONHSAG057461.1的表达水平。结果验证测序结果表明PM2.5可以诱导HUVECs中NONHSAG057461.1上调,且与染毒剂量有一定的剂量-效应关系;干扰NONHSAG057461.1后再用PM2.5染毒,IL-1βmRNA的水平下降。BAY11-7082(10μmol/L)预处理细胞后,发现NONHSAG057461.1的m RNA表达下降,说明NFκB能够调控该基因的表达。结论 NFκB通路可能参与长链非编码RNA-NONHSAG057461.1介导的暴露于PM2.5的人脐静脉内皮细胞炎症反应,具体的机制尚需进一步探索。 展开更多
关键词 lncRNA 人脐静脉内皮细胞 PM2.5 炎症反应
The toxicity of hydroxylated and carboxylated multi-walled carbon nanotubes to human endothelial cells was not exacerbated by ER stress inducer
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作者 Zhen Li Ting Liu +4 位作者 Jimin Long Yang Wu Biao Yan Ping Ma Yi Cao 《中国化学快报:英文版》 SCIE CAS CSCD 2019年第3期582-586,共5页
Hydroxylated multi-walled carbon nanotubes(h-MWCNTs) and carboxylated MWCNTs(c-MWCNTs)have potential applications in biomedicine, but their toxicity to human endothelial cells under stressed conditions associated with... Hydroxylated multi-walled carbon nanotubes(h-MWCNTs) and carboxylated MWCNTs(c-MWCNTs)have potential applications in biomedicine, but their toxicity to human endothelial cells under stressed conditions associated with chronic diseases was less studied in vitro. This study stressed human umbilical vein endothelial cells(HUVECs) with ER stress inducer thapsigargin(TG), and investigated the toxicity of h-MWCNTs and c-MWCNTs to normal and stressed HUVECs. h-MWCNTs and c-MWCNTs modestly reduced cellular viability, significantly promoted soluble ICAM-1(sICAM-1),soluble VCAM-1(sVCAM-1) as well as intracellular ROS, and decreased the expression of transcription factor KLF2 and KLF4. Pre-treatment with TG significantly reduced cellular viability, promoted IL-6 and THP-1 monocyte adhesion, and increased the expression of a panel of ER stress genes. ANOVA indicated no interaction between MWCNTs and TG pre-treatment on most of the endpoints. It was concluded that the toxicity of h-MWCNTs and c-MWCNTs to HUVECs might not be exacerbated by ER stress inducer. 展开更多
关键词 Multi-walled carbon nanotubes (MWCNTs) Human UMBILICAL vein endothelial cells (HUVECs) ER stress Kruppel-like factor (KLF) TOXICITY
三七总皂苷对血管紧张素Ⅱ致脐静脉内皮细胞损伤的保护作用 被引量:1
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作者 王钢 陈琼芳 +2 位作者 俞献文 唐丽清 杨秀芬 《中华中医药学刊》 北大核心 2018年第3期591-595,I0017共6页
目的:研究三七总皂苷(血塞通)对血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)致脐静脉内皮细胞(HUVECS)损伤的保护作用。方法:体外培养HUVECS细胞,采用CCK8法,采用不同浓度的血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)干预正常HUVECS细胞,然后得到损伤条件为10~(-6) mo... 目的:研究三七总皂苷(血塞通)对血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)致脐静脉内皮细胞(HUVECS)损伤的保护作用。方法:体外培养HUVECS细胞,采用CCK8法,采用不同浓度的血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)干预正常HUVECS细胞,然后得到损伤条件为10~(-6) mol·L~(-1),24 h。对于损伤后的HUVECS给予不同浓度的三七总皂苷(血塞通)进行保护治疗,设置100、50、25 mg·L-1为高、中、低剂量组,10~(-4)、10~(-5)、10~(-6)mol·L~(-1)氯沙坦为阳性对照组。按对照组、模型组、氯沙坦高、中、低剂量组,三七总皂苷高、中、低剂量组进行实验。对LDH、NO、NOS、eNOS、ET-1、PGI2、TX-B2、t-PA、PAI-1指标进行检测。结果:三七总皂苷对Ang Ⅱ损伤的细胞可以降低LDH、ET-1、TXB2、PAI-1的分泌,增加NO、NOS、eNOS、PGI2、t-PA的分泌。结论:三七总皂苷对Ang Ⅱ损伤的脐静脉内皮细胞具有保护作用,并可促进内皮细胞分泌扩血管物质和抗血栓物质。 展开更多
关键词 三七总皂苷 HUVECS 血管紧张素Ⅱ 保护作用
川崎病并发冠脉损伤患儿血清PAI-1水平对血管内皮细胞活力的影响 预览
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作者 余淋 陈明群 徐敏 《河北医学》 CAS 2018年第11期1761-1765,共5页
目的:探讨川崎病(KD)并发冠脉损伤(CALs)患儿血清纤溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)水平对血管内皮细胞活力的影响。方法:收集川崎病患儿52例,其中冠脉损伤组患儿25例,非冠脉损伤组患儿27例,另收集健康对照组儿童21例,收集临床资料... 目的:探讨川崎病(KD)并发冠脉损伤(CALs)患儿血清纤溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)水平对血管内皮细胞活力的影响。方法:收集川崎病患儿52例,其中冠脉损伤组患儿25例,非冠脉损伤组患儿27例,另收集健康对照组儿童21例,收集临床资料检测KD-CALs高危及出凝血指标,制备血清标本。RT-qPCR和ELISA法检测血清PAI-1水平。各组血清分别处理人脐静脉内皮细胞(HUVECs) 24h后,RT-qPCR法检测HUVECs中PAI-1表达,CCK-8法检测细胞活力。结果:川崎病并发冠脉损伤组患儿血小板(Platelet)、白细胞(WBC)、红细胞沉降率(ESR)以及凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)和纤维蛋白原降解产物(FDP)水平明显高于对照组。川崎病并发冠脉损伤组Platelet、ESR、PT、APTT和FDP水平较非冠脉损伤组明显增高(P〈0.05),但FIB水平明显降低,提示KD并发CALs时患儿体内出现明显凝血功能障碍。RT-q PCR和ELISA检测结果显示,与对照组比较,川崎病并发冠脉损伤组和非冠脉损伤组血清PAI-1 mRNA和蛋白水平显著升高,其中并发冠脉损伤组水平增高最显著。细胞实验结果显示,与对照组比较,川崎病并发冠脉损伤组血清处理后,HUVECs中PAI-1表达明显升高,然而HUVECs活力却显著降低。结论:川崎病并发冠脉损伤患儿机体处于严重高凝状态,其患儿血清高水平PAI-1可诱导HUVECs中PAI-1水平明显升高,从而抑制HUVECs活力。 展开更多
关键词 川崎病 冠状动脉损伤患儿 组织纤溶酶原激活物和纤溶酶原激活物抑制剂-1 人脐静脉内皮细胞
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TNF-α诱导人脐静脉血管内皮细胞凋亡和炎症机制研究 被引量:6
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作者 陈铁龙 祝光礼 +2 位作者 张旭栋 孟伟康 汪禹 《中华全科医学》 2018年第2期184-187,共4页
目的观察肿瘤坏死因子α(tumournecrosisfactoralpha,TNF-α)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡及炎症反应的影响,并探讨其损伤血管内皮细胞的可能机制。方法常规培养的HUVECs至第三代,随机分为对照组和TNF.0l组。对照组常规方法... 目的观察肿瘤坏死因子α(tumournecrosisfactoralpha,TNF-α)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡及炎症反应的影响,并探讨其损伤血管内皮细胞的可能机制。方法常规培养的HUVECs至第三代,随机分为对照组和TNF.0l组。对照组常规方法培养作为对照,TNF-仪组应用200ng/ml的TNF—α刺激HUVECs6h后,采用流式细胞法检测HUVECs的凋亡率,Westernblot法检测ICAM-1、VCAM-1、E-selectin和eNOS的蛋白表达水平;流式细胞术和Westernblot法进一步评价核因子-kB(NF—KB)、激活蛋白-1(AP-1)的表达激活情况。结果与对照组相比,200ng/mlTNF-α能明显增加HUVECs的凋亡率(P〈0.05),同时上调ICAM-1、VCAM-1、E—selectin炎症因子在HUVECs中的表达(P〈0.05),TNF-α抑制eNOS的释放(P〈0.05),并激活NF—KB、AP-1的表达(P〈0.05)。结论TNF—α能显著增加HUVECs的凋亡和炎症因子表达,其损伤机制可能是通过激活NF—kB、AP-1途径,并抑制eNOS的释放有关。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子α 内皮细胞 细胞凋亡 ICAM-1 VCAM-1 E-SELECTIN eNOS NF-κB AP-1
p38 MAPK信号通路在尼古丁诱导的血管内皮细胞自噬中的作用 预览
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作者 王瑞玲 刘雯霞 +2 位作者 刘彩红 郭蕊 王亚静 《中国医学创新》 CAS 2018年第26期41-45,共5页
目的:探讨丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路在尼古丁诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)自噬中的作用。方法:不同浓度尼古丁(6×10~(-9)、6×10~(-8)、6×10~(-7)、6×10~(-6) mol/L)处理HUVECs,采用CCK-8和LD... 目的:探讨丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路在尼古丁诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)自噬中的作用。方法:不同浓度尼古丁(6×10~(-9)、6×10~(-8)、6×10~(-7)、6×10~(-6) mol/L)处理HUVECs,采用CCK-8和LDH试剂盒检测尼古丁对血管内皮细胞增殖和活性的影响,运用蛋白免疫印迹(Western blot)技术检测尼古丁作用下Beclin-1和LC3Ⅱ的表达及ERK1/2、JNK、p38 MAPK的磷酸化水平。结果:与正常对照组相比,较高浓度尼古丁(≥6×10~(-7) mol/L)抑制HUVECs的增殖能力(P〈0.01),增加上清中LDH的活性(P〈0.05),且在尼古丁浓度为6×10-6 mol/L时作用最明显。与正常对照组相比,尼古丁(6×10~(-6) mol/L)作用下LC3Ⅱ表达显著增加(P〈0.01),而Beclin-1的表达减少(P〈0.05);同时尼古丁磷酸化MAPK信号,其中ERK1/2和p38 MAPK的磷酸化水平分别增加了0.77倍和2.91倍(P〈0.01),而JNK的磷酸化水平没有明显变化。与尼古丁组相比,SB+尼古丁组中LC3Ⅱ与Beclin-1蛋白表达均增加(P〈0.05)。结论:尼古丁可导致人脐静脉内皮细胞损伤并抑制细胞自噬,此过程中p38MAPK信号通路可能起了重要作用。 展开更多
关键词 人脐静脉内皮细胞 尼古丁 自噬 心血管疾病 MAPK
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原花青素对人脐静脉内皮细胞功能及miR-221表达的影响 预览 被引量:1
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作者 邹燕 吴斐 +2 位作者 季昳弛 何雪梅 周翔宇 《解放军医学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第2期120-125,共6页
目的 探讨原花青素(PC)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖、迁移的影响,初步探讨PC作用机制。方法体外培养HUVECs,采用不同浓度(5、25、50、75、100μg/ml)PC处理细胞24h后,用CCK-8法筛选出50μg/ml PC做后续实验,继续用细胞划痕实... 目的 探讨原花青素(PC)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖、迁移的影响,初步探讨PC作用机制。方法体外培养HUVECs,采用不同浓度(5、25、50、75、100μg/ml)PC处理细胞24h后,用CCK-8法筛选出50μg/ml PC做后续实验,继续用细胞划痕实验法检测细胞迁移能力;利用实时荧光定量PCR检测HUVECs内miR-221的表达变化;miRWalk数据库预测miR-221靶基因并对靶基因行GO分析和KEGG Pathway分析。结果 PC处理HUVECs 24h后,与对照组相比,PC 5μg/ml组细胞增殖活性变化不明显(P〉0.05),而PC 25、50、75、100μg/ml组细胞增殖活性与PC呈浓度依赖性下降(P〈0.01);与对照组相比,PC 50μg/ml组迁移能力明显减弱(P〈0.01);与对照组相比,50μg/ml组miR-221的表达明显升高(P〈0.01)。GO分析发现miR-221的靶基因主要与细胞的增殖、迁移、基因的翻译等相关,与细胞增殖、迁移有关的靶基因有ADAM17、KIT、PDGFD等。KEGG Pathway分析发现miR-221的靶基因富集FoxO、PI3K-Akt等5条信号通路。结论 低浓度PC对HUVECs增殖活性无明显影响,一定浓度PC可以抑制HUVECs的增殖和迁移,其机制可能涉及miR-221的上调及FoxO、PI3K-Akt等信号通路的参与。 展开更多
关键词 原花青素 人脐静脉内皮细胞 MI R-221
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间歇性低氧诱导人脐静脉内皮细胞损伤机制研究 预览
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作者 邬春晓 张京春 +5 位作者 刘玥 马林沁 乔羽 毛婷 雷舒雁 郑乔仙 《医学研究杂志》 2018年第11期23-28,共6页
目的 建立人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的间歇性低氧(IH)模型,探讨IH损伤血管内皮细胞的机制.方法 通过低氧气体循环灌注低氧舱,建立HUVECs的IH模型.实验分为正常对照组(CON),间歇性低氧(IH)2、4、6、8、10、12、14、16次循环组,IH+P38 MAP... 目的 建立人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的间歇性低氧(IH)模型,探讨IH损伤血管内皮细胞的机制.方法 通过低氧气体循环灌注低氧舱,建立HUVECs的IH模型.实验分为正常对照组(CON),间歇性低氧(IH)2、4、6、8、10、12、14、16次循环组,IH+P38 MAPK阻断剂组(INH)以及持续性缺氧组(SH).采用定量PCR技术(QPCR)检测细胞间黏附因子(intercellular adhesion molecule 1,ICAM-1)、E选择素(E-selectin)、白介素1(interleukin-1,IL-1)、白介素6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)基因表达量;Western blot法检测P38 MAPK/NF-κB通路关键靶标蛋白表达量;细胞免疫荧光技术观察NF-κB P65核移位变化,同时检测细胞黏附功能.结果 (1)与CON组比较,IH刺激下炎性反应相关因子IL-1、IL-6、TNF-α基因表达量升高(P<0.05).(2)与CON组比较,IH组HUVECs的p-P38 MAPK蛋白表达水平升高,NF-κB通路靶标蛋白p-IκB、NF-κB P65核蛋白表达水平均升高,而INH组变化不明显.IH组的NF-κB P65出现核移位变化.(3)细胞黏附实验结果显示IH组人单核细胞系(human acute monocytic leukemia cell line,THP-1)与HUVECs的黏附能力较CON组增强(P<0.05).结论 IH能够体外诱发HUVECs炎性反应,其机制与激活P38 MAPK/NF-κB信号通路相关. 展开更多
关键词 间歇性低氧 人脐静脉内皮细胞 P38 MAPK NF-ΚB
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黄芪苷Ⅳ对微囊泡损伤的大鼠胸主动脉环舒张功能的保护作用 预览
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作者 李烨仪 尚曼 +7 位作者 张琨玮 韦苏 刘超 祝倩 赵俊玉 吴艳娜 宋君秋 刘艳霞 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期164-168,共5页
目的:以缺氧/复氧诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)释放的微囊泡(H/R-EMVs)处理大鼠胸主动脉环,造成其舒张功能损伤,探究黄芪苷Ⅳ(AST)对大鼠胸主动脉环舒张功能的影响及相关机制。方法:采用缺氧12h/复氧4 h的方法诱导体外培养的HU... 目的:以缺氧/复氧诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)释放的微囊泡(H/R-EMVs)处理大鼠胸主动脉环,造成其舒张功能损伤,探究黄芪苷Ⅳ(AST)对大鼠胸主动脉环舒张功能的影响及相关机制。方法:采用缺氧12h/复氧4 h的方法诱导体外培养的HUVECs产生MVs,H/R-EMVs保存于D-Hank’s液中备用。雄性Wistar大鼠开胸取出胸主动脉,制备3~4 mm宽、内皮完整的胸主动脉环。实验分为6组:H/R-EMVs组,在孵育胸主动脉环的培养基中加入H/R-EMVs,使其终浓度为10μg/ml;不同剂量AST组分别采用10、20、40、60 mg/L AST与10μg/ml H/R-EMVs共同孵育胸主动脉环;对照组给予等体积的D-Hank’s溶液。孵育时间为4 h,每组各测定5个血管环。观察AST对舒张功能的影响,检测一氧化氮(NO)含量及t-eNOS、p-eNOS、t-Akt、p-Akt、ERK1/2和p-ERK1/2蛋白质水平。结果:H/R-EMVs对大鼠胸主动脉环舒张功能有明显的抑制作用(P〈0.01)。与H/R-EMVs组相比,AST20、40和60 mg/L组剂量依赖性地提高大鼠胸主动脉环的舒张率(P〈0.01),使NO含量增加(P〈0.05,P〈0.01);t-eNOS、t-Akt和ERK1/2蛋白质水平不变,p-eNOS、p-Akt和p-ERK1/2蛋白质水平增高(P〈0.01)。结论:AST可显著改善H/R-EMVs损伤的大鼠胸主动脉环的舒张功能,其机制与提高NO含量及增加p-eNOS、p-Akt和pERK1/2蛋白质水平有关。 展开更多
关键词 黄芪苷Ⅳ 微囊泡 缺氧/复氧 人脐静脉内皮细胞 胸主动脉环 大鼠
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