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LRP和GST-π表达与上皮性卵巢癌患者铂类耐药及预后的关系
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作者 张正茂 齐新颖 +12 位作者 窦晓梦 杨平芳 张文哲 张超 张风华 徐杰 贾新转 王娜 王令响 陈书成 刘月平 丁妍 单保恩 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期730-738,共9页
目的 :探讨肺耐药蛋白(lung resistance protein,LRP)和谷光甘肽S转移酶π(glutathione S-transferase-π,GST-π)表达与上皮性卵巢癌患者化疗耐药及预后的关系。方法 :选取66例河北医科大学第四医院妇科2007年1月—2010年1月收治的上... 目的 :探讨肺耐药蛋白(lung resistance protein,LRP)和谷光甘肽S转移酶π(glutathione S-transferase-π,GST-π)表达与上皮性卵巢癌患者化疗耐药及预后的关系。方法 :选取66例河北医科大学第四医院妇科2007年1月—2010年1月收治的上皮性卵巢癌患者的临床资料进行分析。所有患者均进行了全面分期手术或卵巢癌细胞减灭术,术后均完成了6~8个周期以铂类为基础的化疗。按照化疗疗效判定标准,分为敏感组及耐药组。采用免疫组织化学法检测66例上皮性卵巢癌组织中LRP及GST-π蛋白的表达,分析其与卵巢癌患者化疗耐药及生存的关系。结果 :66例上皮性卵巢癌组织中,LRP阳性者化疗有效率为61.2%(30/49),LRP阴性者化疗有效率为94.1%(16/17),2组间差异有统计学意义(P=0.011)。GST-π阳性者化疗有效率为61.7%(29/47),GST-π阴性者化疗有效率为94.7%(18/19),2组间差异有统计学意义(P=0.026)。在化疗耐药组中,LRP和GST-π阳性表达率分别为91.3%(21/23)和87.0%(20/23);在化疗敏感组中,LRP和GST-π阳性表达率分别为65.1%(28/43)和62.8%(27/43);2组间差异有统计学意义(P=0.020和P=0.039)。LRP阴性者中位生存期(overall survival,OS)长于阳性者(74个月vs 54个月,P <0.01),GST-π阴性者中位OS长于阳性者(66个月vs49个月,P <0.05)。结论 :LRP和GST-π的表达与上皮性卵巢癌患者的化疗耐药、疗效及OS有关。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 药物疗法 抗药性 肿瘤 肺耐药蛋白 谷光甘肽-S转移酶-π
细粒棘球绦虫重组GST蛋白的原核表达及生物信息学分析
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作者 倪旭健 孙芬芬 +2 位作者 冯婷婷 林奇泗 潘伟 《中国预防医学杂志》 CAS CSCD 2019年第7期565-568,共4页
目的原核表达细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,Eg)谷胱甘肽S-转移酶(Glutathione S-Transferase,GST)蛋白,分析其结构与功能特点。方法将EgGST基因亚克隆于PET-28b表达载体,转化至大肠埃希菌BL21中,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱... 目的原核表达细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,Eg)谷胱甘肽S-转移酶(Glutathione S-Transferase,GST)蛋白,分析其结构与功能特点。方法将EgGST基因亚克隆于PET-28b表达载体,转化至大肠埃希菌BL21中,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导蛋白表达;蛋白经Ni柱纯化后,用SDS-PAGE及Western-blot进行鉴定;并运用DNAstar软件及在线软件预测分析其结构与功能特点。结果重组EgGST蛋白以可溶性形式在大肠埃希菌中高效表达,其相对分子质量为45 000;该蛋白潜在B细胞表位区域为aa 26~33,89~97,116~124,147~158,201~215;潜在T细胞表位区域为aa 12~20,122~120,79~87,61~69,29~37,62~70。结论成功获得可溶性重组EgGST蛋白,该蛋白具有一定的免疫原性,具有成为细粒棘球蚴病疫苗分子潜力。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 谷胱甘肽S-转移酶 原核表达 生物信息分析 细胞表位 表位疫苗
阿维菌素对南瓜实蝇的不育作用及谷胱甘肽-S-转移酶活力的影响 被引量:1
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作者 何超 孔琼 +3 位作者 袁盛勇 沈登荣 谢昆 王传铭 《北方园艺》 CAS 北大核心 2019年第8期40-46,共7页
以南瓜实蝇为研究对象,采用人工饲料添加法,通过研究阿维菌素不同浓度处理下,南瓜实蝇产卵量、卵孵化率及谷胱甘肽-S-转移酶(GSTs)活性变化,评价阿维菌素对该虫的不育效果,以期为该虫的综合治理提供参考依据。结果表明:阿维菌素对南瓜... 以南瓜实蝇为研究对象,采用人工饲料添加法,通过研究阿维菌素不同浓度处理下,南瓜实蝇产卵量、卵孵化率及谷胱甘肽-S-转移酶(GSTs)活性变化,评价阿维菌素对该虫的不育效果,以期为该虫的综合治理提供参考依据。结果表明:阿维菌素对南瓜实蝇具有显著的不育效果。不同浓度处理后,南瓜实蝇单雌产卵量和卵孵化率均显著减少,各浓度不育效果依次为0.10 mg·L^-1>0.50 mg·L^-1>1.00 mg·L^-1>0.05 mg·L^-1>0.01mg·L^-1;且单独处理雌成虫不育效果>雌雄成虫均处理>单独处理雄成虫。各浓度处理南瓜实蝇雌雄成虫GSTs活力均随成虫日龄的增加而显著升高,其子代幼虫和蛹的GSTs的活力较对照均表现为不同程度的增加。阿维菌素对南瓜实蝇具有较好的不育作用,且对该虫子代产生了显著影响,为阿维菌素作为南瓜实蝇不育剂应用提供了参考依据。 展开更多
关键词 南瓜实蝇 阿维菌素 不育作用 谷胱甘肽-S-转移酶
血清中前列腺特异性抗原、谷胱甘肽S-转移酶水平与前列腺癌的相关性分析 预览
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作者 王鹏桥 郑人源 杨雷 《成都医学院学报》 CAS 2019年第5期597-600,共4页
目的探讨血清中前列腺特异性抗原(PSA)、谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)水平与前列腺癌的相关性分析。方法选择2015年1月至2018年12月在成都医学院第一附属医院进行治疗的前列腺癌患者90例为研究对象纳入试验组,另选同期在我院进行健康体检的... 目的探讨血清中前列腺特异性抗原(PSA)、谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)水平与前列腺癌的相关性分析。方法选择2015年1月至2018年12月在成都医学院第一附属医院进行治疗的前列腺癌患者90例为研究对象纳入试验组,另选同期在我院进行健康体检的志愿者50例为对照组。对两组受试者血清中PSA、GSTs水平进行检测对比,并将试验组患者按Gleason评分、临床分期不同分为各个亚组,比较各个亚组间患者PSA、GSTs水平。采用Pearson检验对前列腺癌患者血清中PSA、GSTs水平与Gleason评分、临床分期的相关性进行分析。结果试验组患者血清中PSA水平高于对照组,GSTs水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。试验组内随着患者Gleason评分的升高,患者血清中PSA水平均明显增加,而GSTs水平明显降低(P<0.05)。试验组随着患者临床分期加重,患者血清中PSA水平明显增加,而GSTs水平明显降低(P<0.05)。经Pearson相关性检验分析,血清中PSA水平与前列腺癌患者的Gleason评分呈正相关性,而GSTs水平与Gleason评分呈负相关性(P<0.05)。结论血清中PSA、GSTs水平与前列腺癌Gleason评分有相关性,提示PSA、GSTs水平变化与前列腺癌患者病情的发生、进展有关。前列腺癌患者PSA、GSTs水平检测,对疾病的诊断、病情及疗效评估有重要临床作用。 展开更多
关键词 前列腺癌 前列腺特异性抗原、谷胱甘肽S-转移酶 GLEASON评分 临床分期 相关性
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镉和铅联合作用对黑腹果蝇发育及抗氧化的影响 预览
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作者 王博 张春红 林欣大 《生态环境学报》 CSCD 北大核心 2019年第5期990-998,共9页
作为主要的重金属污染物,镉(Cd^2+)和铅(Pb^2+)对生物体具有不同影响和毒作用机制,然而当它们同时存在于机体内常会表现出不同的联合效应,因此研究以上两种重金属的联合作用极其重要。本研究以模式生物黑腹果蝇(Drosophilamelanogaster... 作为主要的重金属污染物,镉(Cd^2+)和铅(Pb^2+)对生物体具有不同影响和毒作用机制,然而当它们同时存在于机体内常会表现出不同的联合效应,因此研究以上两种重金属的联合作用极其重要。本研究以模式生物黑腹果蝇(Drosophilamelanogaster)为研究对象,采用原子吸收、发育实验、酶学测定以及荧光定量PCR评估Cd^2+和Pb^2+以及二者联合对果蝇的影响。向果蝇分别饲喂不同剂量的Cd^2+(0.05、0.1、0.3、0.5 mmol·L^-1)和Pb^2+(0.2、0.5、1.5、2.9 mmol·L^-1)以及Cd^2++Pb^2+(0.05+0.2、0.1+0.5、0.3+1.5、0.5+2.9 mmol·L^-1),测定果蝇成虫体内Cd^2+和Pb^2+积累量,以及化蛹率、羽化率、抗氧化能力、金属硫蛋白(metallothionein,MTNs)和谷胱甘肽S转移酶(glutathione S-transferase,GST)基因的表达水平。结果表明,果蝇中Cd^2+和Pb^2+浓度随着培养基中重金属浓度的上升而增加,当同时加入Cd^2+和Pb^2+后,二者积累量进一步增加。单独添加Pb^2+(0.2、0.5、1.5、2.9 mmol·L^-1)或共同添加Cd^2++Pb^2+(0.1+0.5、0.3+1.5、0.5+2.9 mmol·L^-1)显著降低果蝇化蛹率和羽化率,而Cd^2++Pb^2+联合处理较单独Cd^2+/Pb^2+处理表现出更强的效果,且这种效果随着Cd^2+/Pb^2+浓度的增加而增强。Cd^2++Pb^2+处理CAT活性较单独Cd^2+/Pb^2+处理显著提高。Cd^2++Pb^2+(0.05+0.2、0.1+0.5、0.3+1.5 mmol·L^-1)处理组SOD活性较单独Cd^2+/Pb^2+处理,SOD活性无明显变化,但在Cd^2++Pb2(+0.5+2.9 mmol·L^-1)处理组中SOD活性显著上升;Cd^2++Pb^2+(0.05+0.2 mmol·L^-1)处理组MDA含量较单独Cd^2+/Pb^2+处理显著提升,但在处理组Cd^2++Pb^2+(1+0.5、0.3+1.5、0.5+2.9mmol·L^-1)中MDA含量反而较单独的Cd^2+/Pb^2+处理有所下降。荧光定量PCR结果表明,在Cd^2+/Pb^2+处理下MTNs和Gsts表达水平显著升高。本研究表明重金属联合作用会对生物体产生不同的毒性效应,而MTNs和Gsts两类基因在生物体重金属胁迫下的解毒机制中发挥着至关重要的作用。 展开更多
关键词 黑腹果蝇 抗氧化能力 金属硫蛋白 谷胱甘肽S转移酶
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Cu^2+胁迫下福寿螺谷胱甘肽S转移酶基因表达分析
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作者 茅光耀 周鸿让 +7 位作者 黄芸 岳志远 段磊 许秋利 郭云海 党志胜 张仪 肖宁 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期213-217,231共6页
目的分析Cu^2+胁迫前后福寿螺谷胱甘肽S转移酶(PcGST)基因的表达规律,探讨福寿螺适应Cu^2+的相关机制。方法80只福寿螺随机分为4组,每组20只福寿螺,Cu^2+胁迫浓度分别为0、50、100、150μg/L。分别于Cu^2+胁迫后的0、1、7、14d,各组随机... 目的分析Cu^2+胁迫前后福寿螺谷胱甘肽S转移酶(PcGST)基因的表达规律,探讨福寿螺适应Cu^2+的相关机制。方法80只福寿螺随机分为4组,每组20只福寿螺,Cu^2+胁迫浓度分别为0、50、100、150μg/L。分别于Cu^2+胁迫后的0、1、7、14d,各组随机取3只福寿螺,分离其肝脏、鳃、肾脏组织,分别提取组织中的RNA,逆转录为cDNA,实时荧光定量PCR检测Cu^2+胁迫前后PcGSTmRNA的相对表达量。基于Cu^2+胁迫下的福寿螺基因转录组筛选获得PcGST基因,构建pET-28a-PcGST重组质粒,转化至大肠埃希菌(E.coil)BL21(DE3)感受态细胞中,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析重组蛋白表达情况。将转化菌株(含PcGST基因的E.coil)和非转化菌株(未转化的E.coil)等量分成6份,随机取3份作为Cu^2+胁迫组(含0.2mmol/L的CuSO4),另3份作为对照组(不含CuSO4),20℃、150r/min摇床培养。每隔1h测定一次菌液吸光度(A600)值,连续测定6h。采用t检验比较转化菌株和非转化菌株对Cu^2+的耐受能力。结果设定无Cu^2+胁迫下的福寿螺组织中PcGSTmRNA的相对表达量为1.0±0.0。肝脏组织中,50μg/L Cu^2+胁迫下,PcGSTmRNA的相对表达量于0~14d呈持续上升趋势,峰值为4.9±0.5;100μg/L、150μg/LCu^2+胁迫下,PcGSTmRNA的相对表达量先上升后下降,峰值均于7d出现,分别为13.0±3.0和12.2±2.2。鳃组织中,50μg/L、100μg/L Cu^2+胁迫下,PcGSTmRNA的相对表达量先上升后下降,峰值均于7d出现,分别为5.3±0.7和23.3±16.5;150μg/L Cu^2+胁迫下,PcGSTmRNA的相对表达量也呈现先上升后下降的趋势,峰值于1d出现,为9.8±3.3。肾脏组织中,50μg/L Cu^2+胁迫下,PcGSTmRNA的相对表达量随时间变化不显著;100μg/L Cu^2+胁迫下,PcGSTmRNA的相对表达量前期随时间变化不显著,于14d出现显著增加,为3.9±1.0;150μg/L Cu^2+胁迫下,PcGSTmRNA的相对表达量于0~14d呈持续上升趋势,峰值为18.0±0.8 展开更多
关键词 福寿螺 CU^2+胁迫 谷胱甘肽S转移酶 基因表达分析
血液病患者中GSTA1基因多态性分析及其对GST酶活性的影响(英文)
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作者 喻光燚 杨青山 +2 位作者 张国顺 谢茵 张丽锋 《中国药学:英文版》 CAS CSCD 2019年第6期393-401,共9页
谷胱甘肽硫转移酶(GSTs)是体内重要的药物代谢酶,且存在基因多态性的现象。本研究调查了170例血液病患者的GST酶活性和GSTA1基因多态性,并探讨了它们之间的关系。通过PCR-RFLP技术分析患者的GSTA1基因多态性,DNA测序仪确定启动子区域中... 谷胱甘肽硫转移酶(GSTs)是体内重要的药物代谢酶,且存在基因多态性的现象。本研究调查了170例血液病患者的GST酶活性和GSTA1基因多态性,并探讨了它们之间的关系。通过PCR-RFLP技术分析患者的GSTA1基因多态性,DNA测序仪确定启动子区域中的四个突变位点(-631,-567,-69和-52)的碱基序列;通过测量CDNB和GSH之间催化反应的速率来计算患者的GST酶活性。结果显示,男性和女性的平均GST活性分别为5.20±0.13和5.17±0.12 nmol/min/mL,差异不显著(P=0.91)。基因型GSTA1*A*A、GSTA1*A*B和GSTA1*B*B的频率分别为75.3%,22.9%和1.8%;等位基因GSTA1*A和*B频率为86.8%和13.2%。通过卡方检验,男性和女性之间的基因型频率分布没有显着差异(P=0.743)。杂合突变基因型的平均GST活性(4.83±0.76 nmol/min/mL)低于野生基因型(5.34±1.26 nmol/min/mL, P=0.018),高于纯合突变基因型(3.32±0.07 nmol/min/mL,P=0.022)。这些发现可能有助于改善血液病患者的个体化治疗,并促进血液病精准医学的发展。 展开更多
关键词 基因多态性 谷胱甘肽硫转移酶 血液病 酶活性 PCR
标签谷胱甘肽S-转移酶的二价亲和标记试剂的制备与应用 预览
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作者 卢进鹏 夏超 +4 位作者 周伟 李亚平 胡小蕾 廖飞 杨晓兰 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期402-413,共12页
设计合成融合表达标签谷胱甘肽S-转移酶(GST)的二价亲和标记试剂,用于功能化磁珠后位点选择性固定化标签GST,为磁分离筛选配体混合物库提供固定化融合靶蛋白的候选方案。为减少疏水配体在标签GST活性位点的结合,需同时占据标签GST双活... 设计合成融合表达标签谷胱甘肽S-转移酶(GST)的二价亲和标记试剂,用于功能化磁珠后位点选择性固定化标签GST,为磁分离筛选配体混合物库提供固定化融合靶蛋白的候选方案。为减少疏水配体在标签GST活性位点的结合,需同时占据标签GST双活性中心内疏水结合位点并发生共价修饰的二价亲和标记试剂。以双苯环为疏水定位基、溴乙酰基为巯基修饰基团、羧基为连接官能团得单价标记试剂,以二乙基三胺为连接臂将单价标记试剂与连接臂两端伯胺连接得标签GST的对称二价亲和标记试剂,再以线性三胺连接臂中间的氨基与羧基磁珠偶联得功能化磁珠。表征目标化合物对标签GST的标记动力学、结合比;功能化磁珠对标签GST的不可逆固定化动力学和固载容量,及将磁珠表面二价亲和标记试剂转变成还原型谷胱甘肽(GSH)加合物后对标签GST可逆固定化的效果;以碱性磷酸酶及疏水荧光配体为模型考察磁珠固定化标签GST后的非特异结合。目标化合物对标签GST半抑制浓度为(22±0. 2)μmol/L,其与GSH的饱和加合物半抑制浓度为(0. 41±0. 06)μmol/L,二者与标签GST二聚体结合比接近1∶1。功能化磁珠对标签GST不可逆及可逆固定化的容量均接近25 mg/g磁珠。偶联GST的磁珠对蛋白非特异吸附很弱,再进一步用单价亲和标记试剂和GSH加合物封闭固定化标签GST剩余的活性位点后对疏水小分子也无显著结合。结果表明,所设计二价亲和标记试剂功能化磁珠适合用于标签GST及其融合表达蛋白的位点选择性固定化。 展开更多
关键词 谷胱甘肽S-转移酶 亲和标记试剂 磁珠 固定化
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谷胱甘肽S-转移酶基因多态性与特发性男性不育患者氧化应激水平的关系 预览
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作者 李哲铭 刘冬冬 +4 位作者 陈攀 赵伊立 孙发 邢俊平 唐开发 《贵州医科大学学报》 CAS 2019年第11期1268-1272,共5页
目的:分析特发性男性不育患者谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)基因GSTT 1、GSTM 1及GSTP 1基因多态性与氧化应激水平及精子DNA氧化损伤的关系。方法:收集246例特发性男性不育患者的静脉血,提取全血基因组DNA,采用聚合酶链反应(PCR)对GSTT 1及GST... 目的:分析特发性男性不育患者谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)基因GSTT 1、GSTM 1及GSTP 1基因多态性与氧化应激水平及精子DNA氧化损伤的关系。方法:收集246例特发性男性不育患者的静脉血,提取全血基因组DNA,采用聚合酶链反应(PCR)对GSTT 1及GSTM 1基因进行分型,采用限制性片段长度多态性聚合酶链反应(PCR-RFLP)对GSTP 1基因进行分型;采集患者精液,酶联免疫吸附法(ELISA)检测精浆中丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)水平及总抗氧化能力(T-AOC),同法检测精子DNA中8-羟基脱氧鸟苷(8-OH-dG)水平。结果:GSTM 1(-)及GSTT 1(-)组中精浆NO及精子DNA中8-OH-dG水平分别显著高于GSTM 1(+)及GSTT 1(+)组(P<0.01),GSTM 1/GSTT 1(-/-)组精浆MDA、NO及精子DNA中8-OH-dG水平高于GSTM 1/GSTT 1(+/+)组(P<0.05),而精浆T-AOC低于GSTM 1/GSTT 1(+/+)组(P<0.05),GSTP 1(A/G+G/G)组中NO及精子DNA中8-OH-dG水平高于GSTP 1(A/A)组(P<0.05),而T-AOC显著低于GSTP 1(A/A)组(P<0.01)。结论:GSTs的GSTT 1、GSTM 1及GSTP 1基因突变可增加特发性男性不育患者精浆氧化应激水平,降低精浆总抗氧化能力,导致精子DNA氧化损伤。 展开更多
关键词 男性不育症 谷胱甘肽S-转移酶 基因多态性 氧化应激 精液 丙二醛 一氧化氮 8-羟基脱氧鸟苷
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Evaluation of phytochemical properties and larvicidal activities of Cynodon dactylon, Clerodendrum viscosum, Spilanthes acmella and Terminalia chebula against Aedes aegypti
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作者 Ananta Swargiary Manita Daimari +2 位作者 Mritunjoy Roy Dipanjali Haloi Bijit Ramchiary 《亚太热带医药杂志:英文版》 SCIE CAS 2019年第5期224-231,共8页
Objective: To investigate the phytochemical, antioxidant and larvicidal property of Cynodon dactylon, Clerodendrum viscosum, Spilanthes acmella and Terminalia chebula against Aedes aegypti.Methods: Antioxidant capacit... Objective: To investigate the phytochemical, antioxidant and larvicidal property of Cynodon dactylon, Clerodendrum viscosum, Spilanthes acmella and Terminalia chebula against Aedes aegypti.Methods: Antioxidant capacity of methanolic extract of the plants was studied by 2,2-Diphenyl-1-picryl-hydrazyl-hydrate(DPPH) assay, ferric reducing antioxidant power assay, 2,2’-azinobis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonate) assay(ABTS), thiobarbituric acid reactive substance(TBARS) assay, superoxide anion scavenging activity and total antioxidant activity assay following standard protocol.Total phenolic content, total flavonoid content, carbohydrate, and plant protein were also estimated following standard protocols.Larvicidal property of plant extracts were determined following World Health Organization standard protocol.Additionally, glutathione-s-transferase(GST) and acetylcholinesterase(AchE) inhibitory property was also tested biochemically.Results: Phytochemically, high protein, carbohydrate and phenolic were found in Terminalia chebula, while Cynodon dactylon showed high flavonoid contents.Similarly, high antioxidant activity was found in Terminalia chebula with IC50 values at 13.7, 2.9, 45.2 and 46.0 μg/mL in DPPH, ABTS, TBARS and superoxide anion scavenging activity, respectively.Larvicidal study showed strongest activity in Spilanthes acmella followed by Cynodon dactylon, and Clerodendrum viscosum and Terminalia chebula.GST and AchE of Aedes aegypti larvae showed reduced enzyme activity when pre-incubated with Cynadon dactylon and Spilanthes acmella.Conclusions: The methanolic crude extracts of Cynodon dactylon, Clerodendrum viscosum, Spilanthes acmella and Terminalia chebula possess strong antioxidant and larvicidal property against Aedes aegypti and therefore, may be further investigated for the molecular mode of action. 展开更多
关键词 LARVICIDE GLUTATHIONE S-TRANSFERASE ACETYLCHOLINESTERASE Udalguri district AEDES aegypti
镉胁迫对高低积累型水稻幼苗非蛋白巯基含量的影响 预览
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作者 李冬琴 王丽丽 +2 位作者 李智鸣 黎华寿 陈桂葵 《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期2697-2704,共8页
为研究镉胁迫对高低积累型水稻幼苗非蛋白巯基(Non-protein thiols, NPT)物质含量的动态变化影响规律,利用营养液沙培盆栽实验,设置镉浓度为50μmol·L-1,分别监测处理前(0 d)和处理后第1、3、5、7 d水稻的过氧化程度和非蛋白巯基... 为研究镉胁迫对高低积累型水稻幼苗非蛋白巯基(Non-protein thiols, NPT)物质含量的动态变化影响规律,利用营养液沙培盆栽实验,设置镉浓度为50μmol·L-1,分别监测处理前(0 d)和处理后第1、3、5、7 d水稻的过氧化程度和非蛋白巯基物质含量。结果表明:随镉胁迫时间的延长,两品种水稻的过氧化氢(Hydrogen peroxide,H2O2)和硫代巴比妥酸反应产物(Thiobarbituric acid reactive substances,TBARS)含量逐渐上升,且镉低积累型品种优I2009的H2O2和TBARS含量上升的幅度大于镉高积累型品种欣荣优2045,其中欣荣优2045地上部H2O2和TBARS含量上升的幅度分别为45%和74%,其根系上升的幅度分别为1.14倍和61%,而优I2009地上部H2O2和TBARS含量上升的幅度分别为78%和1.20倍,其根系上升的幅度分别为1.32倍和64%,说明镉低积累型品种优I2009遭受的氧化胁迫水平和膜脂过氧化程度大于镉高积累型品种欣荣优2045。欣荣优2045的还原型谷胱甘肽(Reduced glutathione,GSH)随镉胁迫时间的延长逐渐增加,而优I2009的GSH呈先升后降的趋势;两品种水稻的NPT、植物螯合肽(Phytochelatins,PCs)含量和谷胱甘肽硫转移酶(Glutathione S-transferase,GST)活性随镉胁迫时间的延长呈先升后降的趋势,且欣荣优2045合成的NPT含量和生成的GST活性更高。研究表明,镉高积累型水稻品种可以通过合成更多的含巯基的非蛋白化合物与镉络合来清除活性氧,进而增加对镉的耐性。 展开更多
关键词 镉胁迫 水稻 非蛋白巯基化合物 还原型谷胱甘肽 植物螯合肽 谷胱甘肽硫转移酶
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黏虫谷胱甘肽S-转移酶基因对两种杀虫剂的响应 预览
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作者 樊东 刘艳 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期44-51,共8页
谷胱甘肽S-转移酶是昆虫体内重要解毒酶,对昆虫抗药性具有重要作用。通过转录组测序获得黏虫谷胱甘肽S-转移酶cDNA序列,命名为MsGSTe1( GenBank登录号:MH700949)。 cDNA全长1082bp,包含一个651bp开放阅读框,编码216个氨基酸,氨基酸等电... 谷胱甘肽S-转移酶是昆虫体内重要解毒酶,对昆虫抗药性具有重要作用。通过转录组测序获得黏虫谷胱甘肽S-转移酶cDNA序列,命名为MsGSTe1( GenBank登录号:MH700949)。 cDNA全长1082bp,包含一个651bp开放阅读框,编码216个氨基酸,氨基酸等电点为4.75,分子质量为24.679ku,具有一个GSTN端结构域和一个GSTC端结构域。经不同剂量氯虫苯甲酰胺处理不同时间后,MsGSTe1基因表达量均显著下调。处理24和48h,谷胱甘肽S-转移酶活性显著提高。不同剂量高效氯氟氰菊酯处理不同时间后,MsGSTe1表达量和GST酶活性存在显著差异。处理24h,各剂量处理MsGSTe1基因表达量均显著上调,且酶活性提高。处理48h,与对照相比,各剂量处理酶活性显著提高,但基因表达量无显著差异,表明MsGSTe1参与黏虫对高效氯氟氰菊酯的解毒代谢。 展开更多
关键词 黏虫 谷胱甘肽S-转移酶 酶活性 表达
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拟环纹豹蛛谷胱甘肽S-转移酶基因的克隆及表达分析 预览
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作者 李长春 宁青 +3 位作者 戴余军 王立华 李国元 彭宇 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第5期1068-1074,共7页
为研究拟环纹豹蛛谷胱甘肽S-转移酶(GST)基因碱基序列及其对镉胁迫的响应,本研究在转录组测序的基础上,通过RT-PCR克隆了拟环纹豹蛛的GST基因(PpGST),用生物信息学方法对其序列特征进行分析,并采用荧光定量PCR检测了镉胁迫下PpGST基因... 为研究拟环纹豹蛛谷胱甘肽S-转移酶(GST)基因碱基序列及其对镉胁迫的响应,本研究在转录组测序的基础上,通过RT-PCR克隆了拟环纹豹蛛的GST基因(PpGST),用生物信息学方法对其序列特征进行分析,并采用荧光定量PCR检测了镉胁迫下PpGST基因的相对表达量。结果表明,克隆获得的PpGST(GenBank登录号为KY454857)基因编码区长654 bp,可编码1个217个氨基酸的蛋白质,该蛋白质理论分子量为24900,等电点为5.98,具有GST蛋白家族保守的N端结构域和C端结构域,与温室拟肥腹蛛(Parasteatoda tepidariorum)GST蛋白Delta型有较高的相似性(65%)。荧光定量PCR分析结果显示,镉胁迫下PpGST基因的表达量显著增加(P<0.05),暗示其在抵御镉胁迫中可能发挥了重要作用。 展开更多
关键词 拟环纹豹蛛 谷胱甘肽S-转移酶 基因克隆 表达分析
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人参总蛋白对帕金森病转基因果蝇模型的脑神经保护作用研究 被引量:1
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作者 宋岩 刘美辰 +4 位作者 赵雨 赵文学 孙智飏 郑丽娜 王思明 《中草药》 CSCD 北大核心 2018年第19期4602-4606,4613共6页
目的探讨人参总蛋白对帕金森病(PD)模型果蝇脑神经的保护作用及其可能机制。方法将α-突触核蛋白异常表达的果蝇(PD模型果蝇)分别饲养于正常培养基以及混合0.02、0.04、0.16 g/L人参总蛋白的含药培养基中,研究人参总蛋白对PD模型果... 目的探讨人参总蛋白对帕金森病(PD)模型果蝇脑神经的保护作用及其可能机制。方法将α-突触核蛋白异常表达的果蝇(PD模型果蝇)分别饲养于正常培养基以及混合0.02、0.04、0.16 g/L人参总蛋白的含药培养基中,研究人参总蛋白对PD模型果蝇的生存状态、寿命、爬行能力及氧化应激水平的影响。采用TBARS法检测果蝇脑部脂质过氧化物(LPO)含量,DTNB法测定谷胱甘肽(GSH)含量,CDNB法检测谷胱甘肽-S-转移酶(GST)活力,DNPH法检测蛋白质羰基(PC)含量。结果人参总蛋白能够改善PD模型果蝇存活率降低以及爬行能力异常的状态,并存在一定的浓度依赖性;与对照组比较,PD模型果蝇脑部LPO、GST、PC含量升高,GSH含量降低;人参总蛋白可显著降低PD模型果蝇脑部LPO(P〈0.01)、GST(P〈0.000 1)、PC(P〈0.000 1)含量,升高GSH(P〈0.000 1)含量。结论人参总蛋白能有效降低PD模型果蝇的病理症状,该作用可能是通过降低氧化应激压力实现的。 展开更多
关键词 人参 帕金森病 果蝇 氧化应激 脂质过氧化物 谷胱甘肽 谷胱甘肽-S-转移酶
水稻纹枯病菌谷胱甘肽S-转移酶基因的生物信息学及表达分析 预览 被引量:1
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作者 张云欢 郑文博 +3 位作者 赵美 王陈骄子 周而勋 舒灿伟 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2018年第1期45-51,共7页
通过生物信息学方法及表达分析对水稻纹枯病菌谷胱甘肽S转移酶基因(Rsgst)的功能进行探索。通过水稻纹枯病菌RSIADB基因组数据库查找Rsgst序列,确定该基因在水稻纹枯病菌基因组中的精确位置。利用生物信息学软件预测Rsgst编码蛋白氨... 通过生物信息学方法及表达分析对水稻纹枯病菌谷胱甘肽S转移酶基因(Rsgst)的功能进行探索。通过水稻纹枯病菌RSIADB基因组数据库查找Rsgst序列,确定该基因在水稻纹枯病菌基因组中的精确位置。利用生物信息学软件预测Rsgst编码蛋白氨基酸序列的基本信息,并使用MEGA 5.0软件构建同源蛋白的系统发育树,最后用qRT-PCR检测Rsgst在菌核发育过程中的基因表达量,同时测定GST的酶活性。结果表明,Rsgst全长1 207 bp,该基因共编码277个氨基酸残基,其编码蛋白分子量为30.90 ku,理论等电点为9.42。该蛋白二级结构中以α-螺旋为主,占41.52%。系统发育树表明,水稻纹枯病菌GST蛋白与担子菌类玉米丝黑穗病菌GST蛋白亲缘关系最近。qRT-PCR结果表明,Rsgst在水稻纹枯病菌菌核发育过程中表达量不断上调,基因最高表达量是在第60小时,为7.64,而Rsgst的最高酶活性是在第5天,其酶活为0.375 U/μg。结果可为预测水稻纹枯病菌中Rsgst基因的功能奠定基础。 展开更多
关键词 水稻纹枯病菌 谷胱甘肽S-转移酶 菌核发育 酶活测定 基因组定位
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梨小食心虫谷胱甘肽S-转移酶GmolGST6的基因克隆、原核表达和酶学特征 预览 被引量:3
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作者 李帅 苏丽 +3 位作者 李伯辽 李怡萍 李广伟 仵均祥 《昆虫学报》 CSCD 北大核心 2018年第4期398-409,共12页
【目的】克隆一种梨小食心虫Grapholita molesta触角中谷胱甘肽S-转移酶(glutathione Stransferase,GST)基因并分析其结构特征,明确其表达特点及该基因编码蛋白的酶学特征,以期为该基因的功能研究提供理论依据。【方法】根据梨小食心... 【目的】克隆一种梨小食心虫Grapholita molesta触角中谷胱甘肽S-转移酶(glutathione Stransferase,GST)基因并分析其结构特征,明确其表达特点及该基因编码蛋白的酶学特征,以期为该基因的功能研究提供理论依据。【方法】根据梨小食心虫雌虫触角转录组数据,利用RT-PCR克隆梨小食心虫GST基因;通过实时荧光定量PCR测定该基因在成虫触角、头(去触角)、胸、腹、足和翅中的转录水平;利用原核表达系统和Ni离子亲和层析技术表达和纯化梨小食心虫GST重组蛋白,并对重组蛋白的稳定性和酶促动力学参数进行分析。【结果】获得了梨小食心虫谷胱甘肽S-转移酶基因GmolGST6(GenBank登录号:MF503496)的完整编码序列,开放阅读框为645 bp,编码214个氨基酸,分子量为24.21 kD,理论等电点为5.10;进化树分析和三维结构模拟表明GmolGST6属于Delta亚家族。qPCR测定结果表明,GmolGST6基因在雌雄成虫触角中高丰度表达,且在雄虫触角中的表达量显著高于雌虫。重组蛋白GmolGST6具有催化通用底物CDNB的活性,并且在pH7.5,40℃时具有最高的酶活力。重组蛋白GmolGST6的米氏常数Km为0.21±0.06 mmol/L,最大反应速度Vmax为14.02±1.40μmol/min·mg。【结论】根据GmolGST6的表达特点及其重组酶对模式底物CDNB的催化活性,推测在触角中高丰度表达的GmolGST6具有参与降解外源物质、保护嗅觉系统免受外源性物质毒害的功能。 展开更多
关键词 梨小食心虫 谷胱甘肽S-转移酶 嗅觉 表达分析 酶活力
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GST基因多态性与新生儿黄疸的相关性
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作者 章乐 李征瀛 +1 位作者 王昌林 李雅雯 《江苏医药》 CAS 2018年第8期889-891,共3页
目的探讨谷胱甘肽硫基转移酶(GST)基因多态性(GSTM1和GSTT1)与新生儿黄疸的关系。方法新生儿黄疸150例作为病例组,其总胆红素大于256.5μmol/L;选择无新生儿黄疸100例作为对照组。采用PCR法评估GSTM1与GSTT1基因型。应用Logistic多... 目的探讨谷胱甘肽硫基转移酶(GST)基因多态性(GSTM1和GSTT1)与新生儿黄疸的关系。方法新生儿黄疸150例作为病例组,其总胆红素大于256.5μmol/L;选择无新生儿黄疸100例作为对照组。采用PCR法评估GSTM1与GSTT1基因型。应用Logistic多元回归分析两种基因突变对新生儿黄疸的影响。结果病例组GSTM1和GSTT1缺失型基因比例高于对照组(61.33%vs.47.00%和59.33%vs.46.00%)(P〈0.05)。GSTM1和GSTT1基因突变是新生儿黄疸发生的高危因素[OR(95%CI)=2.56(1.32~5.89)和OR(95%CI)=2.14(1.14~2.60),P〈0.05]。结论 GSTM1和GSTT1基因突变与新生儿黄疸的发病密切相关。 展开更多
关键词 新生儿黄疸 谷胱甘肽硫基转移酶 基因多态性
Ppgst基因的转录水平对纳米TiO2的指示作用研究
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作者 张智 张天任 +1 位作者 张建华 刘士德 《环境科学与技术》 CSCD 北大核心 2018年第8期66-70,共5页
纳米二氧化钛Ti O2(nTiO2)的大量使用与排放可能导致环境污染。因此有必要发展nTiO2的环境污染标志物。该研究用多种粒径(25、43、67 nm)nTiO2胁迫环境敏感型真菌多头绒泡菌,发现其谷胱甘肽酶(GST)总活性升高了8~44倍,活性高低与... 纳米二氧化钛Ti O2(nTiO2)的大量使用与排放可能导致环境污染。因此有必要发展nTiO2的环境污染标志物。该研究用多种粒径(25、43、67 nm)nTiO2胁迫环境敏感型真菌多头绒泡菌,发现其谷胱甘肽酶(GST)总活性升高了8~44倍,活性高低与nTiO2的胁迫浓度(5~15 mg/mL)呈现正相关;随后用PCR技术从被胁迫的该菌中克隆到1个谷胱甘肽转移酶(Ppgst)基因,进一步研究发现该基因会对nTiO2的胁迫产生显著的转录应答,其转录水平与nTiO2的胁迫浓度(5~15 mg/mL)呈正相关;该研究提示Ppgst基因可以作为生物标志物指示多种粒径nTiO2的环境污染,具有潜在的应用价值。 展开更多
关键词 谷胱甘肽转移酶 纳米二氧化钛 多头绒泡菌 生物标志物
Environmental Exposure Associated with Oxidative Stress Biomarkers in Children and Adolescents Residents in Brazilian Western Amazon 预览
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作者 Beatriz Fátima Alves de Oliveira Leandro Vargas Barreto de Carvalho +5 位作者 Dennys de Souza Mour?o Rita de Cássia Oliveira da Costa Mattos Hermano Albuquerque de Castro Paulo Artaxo Washington Leite Junger Sandra Hacon 《环境保护(英文)》 2018年第4期347-367,共21页
Oxidative stress is a biological process that occurs in response to an imbalance between prooxidant and antioxidant substances and has been described in the pathophysiology of more than 200 clinical disorders. In this... Oxidative stress is a biological process that occurs in response to an imbalance between prooxidant and antioxidant substances and has been described in the pathophysiology of more than 200 clinical disorders. In this study, we evaluate the relationship between genetic, demographic, social, environmental, and health factors and redox imbalance biomarkers in a group of children and adolescents environmentally exposed to atmospheric pollutants and mercury in the Brazilian Western Amazon. This is a cross-sectional study of the relationship between demographic, genetic, and socioenvironmental factors and serum concentrations of redox imbalance biomarkers (thiol groups, malondialdehyde, and glutathione S-transferase [GST]) in children and adolescents living in the municipality of Porto Velho, Rond?nia. The investigated factors were hierarchically organized into groups of variables and their relationship with redox imbalance biomarkers was estimated by a multiple linear regression model. Children and adolescents with asthma, with C-reactive protein values, with the polymorphic variant GSTP1, and exposed to indoor air pollution presented lower thiol serum concentrations when compared to those categorized in their respective reference groups. GST activity and malondialdehyde serum concentrations were positively related to weekly fish consumption and exposure to PM2.5. This study showed that enzymatic GST activity and malondialdehyde serum concentrations are positively associated with environmental factors, especially air pollution (β = 8.64 U/L for GST and β = 0.244 μmol/L for MDA in high exposure group;p-value < 0.01);while serum thiol concentrations presented an inversely proportional relationship with markers of general health status, such asthma (median: 0.45 mmol/L vs. 0.48 mmol/L;p-value < 0.05), acute inflammation (β = -0.25 mmol/L;p-value < 0.01), and positively with genetic factor (β = 0.12 mmol/L for Val/Val;p-value < 0.05). 展开更多
关键词 Redox IMBALANCE Glutathione S-TRANSFERASE THIOL Groups MALONDIALDEHYDE BRAZILIAN AMAZON
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谷胱甘肽硫转移酶基因多态性对肿瘤易感性及化疗作用影响的研究进展 预览
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作者 郭卫 李辰旭 魏强 《实用医药杂志》 2018年第7期654-657,661共5页
谷胱甘肽硫转移酶是体内重要的Ⅱ相解毒及抗氧化代谢酶,其基因多态性使酶活性降低,进而导致一些肿瘤细胞的易感性和化疗效果发生改变。故综述谷胱甘肽硫转移酶基因多态性与结直肠癌、食管癌、肺癌、宫颈癌易感性以及与化疗疗效、不良反... 谷胱甘肽硫转移酶是体内重要的Ⅱ相解毒及抗氧化代谢酶,其基因多态性使酶活性降低,进而导致一些肿瘤细胞的易感性和化疗效果发生改变。故综述谷胱甘肽硫转移酶基因多态性与结直肠癌、食管癌、肺癌、宫颈癌易感性以及与化疗疗效、不良反应和耐药性相关性的研究进展,旨在为明确谷胱甘肽硫转移酶基因多态性在肿瘤防治中的作用提供参考。 展开更多
关键词 谷胱甘肽硫转移酶 基因多态性 肿瘤易感性 化疗疗效
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