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小鼠抗人B7-2单克隆抗体的制备及对8266细胞表面Fas及FasL的诱导作用
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作者 王玉玉 颜天铭 +2 位作者 王志遥 沈立军 邱玉华 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期50-56,共7页
目的制备鼠抗人B7-2单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb),研究其对表达该分子的肿瘤细胞表面的死亡相关分子的诱导作用。方法以转基因细胞L929-B7-2为免疫原,免疫BALB/c小鼠。经细胞融合、免疫荧光标记法多次筛选及连续亚克隆,获得能... 目的制备鼠抗人B7-2单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb),研究其对表达该分子的肿瘤细胞表面的死亡相关分子的诱导作用。方法以转基因细胞L929-B7-2为免疫原,免疫BALB/c小鼠。经细胞融合、免疫荧光标记法多次筛选及连续亚克隆,获得能分泌B7-2McAb的杂交瘤细胞株。采用Ig亚类鉴定试纸条、抗原位点竞争抑制试验、效价的测定及细胞膜型分子的识别作用对McAb进行生物学特性的分析。通过小鼠诱生腹水法制备McAb并经ProteinG亲和层析法进行纯化。以天然高表达B7-2分子的多发性骨髓瘤细胞8266为观察对象,加入McAb共同孵育,流式细胞仪(FCM)检测其对细胞表面死亡相关分子Fas及FasL的诱导作用。结果成功获得一株B7-2McAb,标记为12G4,其重链为IgG2b,轻链为κ。12G4McAb的效价为0.1μg/5×10^5个细胞,纯化后得到腹水型抗体的含量为1.61mg/ml。FCM结果显示,12G4McAb能很好地识别细胞膜型分子,其与8266细胞的阳性结合率为89.6%,当20μg/ml12G4McAb与细胞孵育12h,细胞表面Fas分子的平均值(mean)开始上调,48h达到最大值(62575.8),与IgG对照组(57135.4)比较差异有统计学意义(P<0.05)。20μg/ml12G4与细胞孵育12h,细胞表面FasL分子的表达也开始上调,48h达到最大值(7.98%),与IgG对照组(1.10%)比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论成功制备了B7-2McAb,其能诱导表达该分子的肿瘤细胞表面的部分死亡相关分子的表达。 展开更多
关键词 B7-2分子 杂交瘤细胞 单克隆抗体 FASL FAS
益气明目丸对视网膜色素变性大鼠视网膜Fas、FasL蛋白表达的影响
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作者 蒋鹏飞 王英 +3 位作者 潘坤 彭俊 徐剑 彭清华 《中医杂志》 CSCD 北大核心 2019年第4期327-332,共6页
目的探讨益气明目丸治疗视网膜色素变性的可能作用机制。方法 24只RCS大鼠随机分为空白组、模型组、益气明目丸组,每组8只。空白组RCS (rdy+/+,p+/+)大鼠(无视网膜色素变性)和模型组RCS (rdy-/,p-/-)大鼠(视网膜色素变性模型)均灌胃生... 目的探讨益气明目丸治疗视网膜色素变性的可能作用机制。方法 24只RCS大鼠随机分为空白组、模型组、益气明目丸组,每组8只。空白组RCS (rdy+/+,p+/+)大鼠(无视网膜色素变性)和模型组RCS (rdy-/,p-/-)大鼠(视网膜色素变性模型)均灌胃生理盐水12 ml/(kg·d),益气明目丸组RCS (rdy-/,p-/-)大鼠灌胃益气明目丸悬浊溶液7. 8 g/(kg·d)。灌胃30天后,HE染色观察各组大鼠视网膜各层结构,采用免疫组化法和Western blot法检测各组大鼠视网膜中Fas、FasL蛋白表达。结果HE染色显示,益气明目丸组大鼠视网膜厚度明显较模型组大鼠视网膜增厚,视网膜色素上皮条带部分可见,部分外核层光感受器感觉纤毛层部分可见,光感受器细胞核数目较模型组多,外从状层、外核层、视杆视锥层较模型组结构清晰且增厚。免疫组化法结果显示,与空白组比较,模型组Fas、FasL蛋白表达均明显升高(P <0. 01);与模型组比较,益气明目丸组Fas、FasL蛋白表达均明显下降(P <0. 05或P <0. 01),且与空白组比较差异均无统计学意义(P> 0. 05)。Western blot法结果显示,与空白组比较,模型组Fas、FasL蛋白表达均明显升高(P <0. 01);与模型组比较,益气明目丸组Fas蛋白表达差异无统计学意义(P>0. 05),FasL蛋白表达明显降低,但仍高于空白组(P <0. 01)。结论益气明目丸对视网膜色素变性大鼠视网膜的超微结构具有保护作用,其机制可能是通过抑制视网膜Fas、FasL蛋白表达,从而减轻视网膜感光细胞的凋亡,达到保护视细胞的目的。 展开更多
关键词 视网膜色素变性 益气明目丸 FAS FASL 细胞凋亡
正选择基因无启动子的供体质粒pN(CDS)(N2)-R的构建及应用
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作者 王英泽 曹晴晴 +4 位作者 马文惠 王凤利 薛巍 王晨晨 杜朝 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期465-472,共8页
为提高对发生基因编辑细胞的筛选效率,本研究构建了具备正负筛选功能的供体质粒pN(CDS)(N2)-R,其正选择基因是无启动子NeoR,负选择基因是能自主表达的RED。利用该质粒和CRISPR-Cas9系统对小鼠B16细胞FasL进行编辑。G418筛选2周,获得混... 为提高对发生基因编辑细胞的筛选效率,本研究构建了具备正负筛选功能的供体质粒pN(CDS)(N2)-R,其正选择基因是无启动子NeoR,负选择基因是能自主表达的RED。利用该质粒和CRISPR-Cas9系统对小鼠B16细胞FasL进行编辑。G418筛选2周,获得混合克隆。镜下观察显示,混合克隆质量较高。junction PCR结果表明,有基因编辑发生。DNA测序结果表明,NeoR准确插入靶位点。细胞杀伤实验表明,FasL功能被有效敲除。该供体质粒的多克隆位点,充分利用同尾酶酶切位点,因而具有广泛的适用性。综上所述,在对各种位点进行编辑时,使用该供体质粒有助于混和克隆的筛选。 展开更多
关键词 供体质粒 基因编辑 同源重组 FASL
热应激对猪睾丸死亡受体Fas及其配体FasL表达与定位的影响 预览
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作者 冀睿 范小瑞 +3 位作者 申慧 岳美杉 刘怡慧 贺俊平 《山西农业科学》 2019年第5期908-912,共5页
猪睾丸内精子发生与精液质量受高温影响,但相关分子机制的报道尚未给出完整定论。利用9头14月龄性成熟长白公猪随机建立3组热应激模型,每组3头,分别为对照组、环境热应激组、局部热应激组,其中,对照组不作任何处理,室温(20~25℃)圈养在... 猪睾丸内精子发生与精液质量受高温影响,但相关分子机制的报道尚未给出完整定论。利用9头14月龄性成熟长白公猪随机建立3组热应激模型,每组3头,分别为对照组、环境热应激组、局部热应激组,其中,对照组不作任何处理,室温(20~25℃)圈养在猪舍中,每天正常给水、喂食;环境热应激组每日将猪饲养在37~40℃猪舍中3h,结束后赶回室温猪舍,连续处理7d;局部热应激组的猪用自制的可控温加热垫覆盖在左侧睾丸阴囊表面(42℃加热1h)。各组猪睾丸处理结束后,迅速将猪睾丸组织摘取,一部分组织切成1.5cm^3的3小块置于Bouin液固定,用于石蜡组织切片的制作;剩余部分冻存于液氮,用于总RNA、总蛋白的提取。Fas,FasL通过qRT-PCR与Western Blotting检测mRNA与蛋白的相对表达量,通过免疫组织化学染色观察生殖细胞的定位。研究旨在探索环境高温和阴囊局部热刺激导致的死亡受体Fas及其配体FasL表达与定位的影响。结果表明,qRT-PCR检验结果显示,FasmRNA相对表达量与对照组相比,环境热应激组升高、局部加热组显著升高;与对照组相比,环境加热组中FasLmRNA相对表达量显著降低、局部加热组显著升高。Western Blotting检测结果显示,与对照组相比,Fas蛋白的相对表达量环境加热组与局部加热组均升高,其中,局部加热组显著升高;与对照组比较,FasL蛋白在环境加热组的相对表达量显著降低,局部加热组显著升高。免疫组织化学结果显示,Fas免疫反应阳性物主要定位在各级生精细胞,热应激导致其阳性表达增强,且局部加热组表达量最高;FasL主要定位在支持细胞、精母细胞以及圆形精子细胞,与对照组相比,局部加热导致其表达量升高,环境加热导致其表达量降低。结果说明,局部热刺激条件下,支持细胞FasL的表达量升高,以旁分泌的方式作用于邻近生精细胞膜上的膜受体Fas,引发细胞凋亡;环境热应激 展开更多
关键词 热应激 精子发生 睾丸 FAS FASL
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坤泰胶囊对卵巢早衰大鼠Fas、FasL蛋白及mRNA表达的影响
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作者 代春伶 高慧 +2 位作者 侯金萌 张晴 徐文君 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期123-128,共6页
目的:探讨坤泰胶囊对卵巢早衰大鼠的作用机制。方法:将12周龄SD雌性大鼠随机分为空白组、模型组、坤泰胶囊0.3、0.6、1.2g/kg组、结合雌激素片0.075mg/kg组。用75mg/kg雷公藤灌胃法建立卵巢早衰大鼠模型,于造模14天后各组分别灌胃给予... 目的:探讨坤泰胶囊对卵巢早衰大鼠的作用机制。方法:将12周龄SD雌性大鼠随机分为空白组、模型组、坤泰胶囊0.3、0.6、1.2g/kg组、结合雌激素片0.075mg/kg组。用75mg/kg雷公藤灌胃法建立卵巢早衰大鼠模型,于造模14天后各组分别灌胃给予相应药物,连续36天,实验过程中观察大鼠行为学改变及动情周期的变化。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测大鼠血清性激素水平;光镜下观察大鼠卵巢组织结构的变化;免疫组化法和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法分别检测大鼠卵巢组织相关因子Fas、FasL蛋白及mRNA表达水平的变化。结果:治疗组与模型组相比,大鼠体质量显著增加,血清性激素水平明显改善,Fas蛋白及mRNA表达明显升高、FasL蛋白及mRNA表达明显降低。结论:坤泰胶囊可纠正卵巢早衰大鼠紊乱的动情周期,调节大鼠体内的性激素水平,上调Fas蛋白及mRNA的表达,下调FasL蛋白及mRNA的表达,促进受损卵巢功能的修复,保护和改善卵巢功能。 展开更多
关键词 坤泰胶囊 卵巢早衰 FAS FASL
子宫内膜癌中Ki-67、FasL的表达与临床病理特征及预后的关系
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作者 周红丽 阮冠宇 《中国妇幼保健》 CAS 2019年第5期1003-1007,共5页
目的探讨子宫内膜癌中Ki-67、FasL的表达与临床病理特征及预后的关系,为子宫内膜癌的诊治及预后评估提供理论依据。方法随机选取2013年1月-2015年7月厦门大学附属第一医院收治的96例子宫内膜癌患者病理资料作为研究组,另取非子宫内膜癌... 目的探讨子宫内膜癌中Ki-67、FasL的表达与临床病理特征及预后的关系,为子宫内膜癌的诊治及预后评估提供理论依据。方法随机选取2013年1月-2015年7月厦门大学附属第一医院收治的96例子宫内膜癌患者病理资料作为研究组,另取非子宫内膜癌患者实施子宫切除患者的病理资料作为对照组,采用实时荧光定量检测Ki-67、FasL mRNA表达水平,采用免疫组化检测Ki-67、FasL蛋白表达水平,分析Ki-67、FasL与子宫内膜癌患者病理参数及预后的相关性。结果研究组患者子宫内膜组织中Ki-67表达水平显著高于对照组患者,差异有统计学意义(P<0. 05);Ki-67表达与患者年龄和肌层浸润均无明显相关性(P>0. 05),与组织学分级、临床病理分期及淋巴结转移均呈正性相关(P<0. 05)。研究组患者子宫内膜组织中FasL表达水平显著高于对照组患者,差异有统计学意义(P <0. 05);FasL表达与患者年龄和肌层浸润均无明显相关性(P>0. 05),与组织学分级、临床病理分期及淋巴结转移均呈正性相关(P<0. 05)。子宫内膜癌患者2年内生存率与患者年龄、肌层浸润均无明显相关性(P>0. 05),与组织学分级、临床病理分期、淋巴结转移及Ki-67和FasL的表达呈正相关性(P<0. 05)。组织学分级、临床病理分期、淋巴结转移及Ki-67和FasL的表达是影响子宫内膜癌患者预后的独立因素。结论 Ki-67和FasL在子宫内膜癌的发生发展中发挥重要的作用,临床通过检测Ki-67和FasL表达可有助于为子宫内膜癌的诊治及预后评估提供新的理论依据。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 KI-67 FASL 存活率
N-乙酰-5-羟色胺对视网膜缺血-再灌注损伤大鼠视网膜Fas、FasL蛋白表达的影响 预览 被引量:1
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作者 杨明 刘建晓 +4 位作者 徐宁 李光祖 王俊 王晓莉 赵岩松 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2019年第2期113-117,共5页
目的探讨N-乙酰-5-羟色胺(N-acetylserotonin,NAS)对视网膜缺血-再灌注损伤(retina ischemia-reperfusion injury,RIRI)大鼠视网膜Fas、FasL蛋白表达的影响。方法取健康成年Sprague Dawley大鼠54只,将大鼠随机分为正常组(6只)、RIRI组(2... 目的探讨N-乙酰-5-羟色胺(N-acetylserotonin,NAS)对视网膜缺血-再灌注损伤(retina ischemia-reperfusion injury,RIRI)大鼠视网膜Fas、FasL蛋白表达的影响。方法取健康成年Sprague Dawley大鼠54只,将大鼠随机分为正常组(6只)、RIRI组(24只)与NAS组(24只);采用高眼压法建立大鼠RIRI模型,依据造模后不同时间点将RIRI组与NAS组大鼠又分为6h、12h、24h及72h四个亚组。NAS组于造模前30min腹腔注射NAS(5mg·kg^-1),RIRI组腹腔注射等剂量的生理盐水。通过HE染色在光学显微镜下观察各组大鼠视网膜形态学变化,并记录各组大鼠视网膜厚度及视网膜神经节细胞数,采用免疫组织化学染色法检测NAS对RIRI大鼠视网膜Fas、FasL蛋白表达的影响。结果HE染色显示,正常组大鼠视网膜各层细胞分界清晰,形态正常,神经细胞排列整齐;RIRI组大鼠再灌注后6h视网膜各层出现水肿,以神经节细胞层及内核层较显著,神经节细胞数较正常组减少;随后视网膜水肿进一步加重,神经节细胞继续减少;NAS组大鼠在再灌注后6h、12h、24h视网膜水肿程度较RIRI组轻,NAS组在再灌注后72h视网膜厚度较RIRI组厚,NAS组各时间点神经节细胞数均较RIRI组多,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。免疫组织化学染色显示,正常组几乎未见Fas^+细胞。再灌注后6h,RIRI组视网膜神经节细胞及内核层开始出现少量Fas^+细胞;再灌注后12h,RIRI组视网膜Fas^+细胞表达逐渐增多;再灌注后24h视网膜Fas^+细胞数达到高峰,棕色阳性染色细胞分布在视网膜神经节细胞层、内丛状层、内核层及神经纤维层;再灌注后72h视网膜Fas^+细胞较再灌注后24h减少。NAS组在再灌注后6h、12h、24h、72h视网膜Fas^+细胞数均较RIRI组各时间点减少,再灌注后24h,Fas^+细胞数达较高水平,随后下降,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。正常组视网膜可见FasL全层低表达。RIRI组再灌注后6h,视网膜神经节细胞层和神经 展开更多
关键词 N-乙酰-5-羟色胺 视网膜缺血再灌注损伤 FAS FASL 大鼠
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细胞核增殖抗原和细胞凋亡调节蛋白在肝细胞癌组织中的表达及其临床意义
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作者 骆杨 霍亮 +3 位作者 许家亮 何婷玉 欧龙 胡伟 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期939-942,共4页
目的探讨肝细胞癌(HCC)中细胞核增殖抗原(Ki-67)和凋亡相关因子配体(FasL)的表达关系及临床意义。方法收集本院78例HCC组织及癌旁组织,同时取18例肝脏正常组织作为对照。链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)免疫组织化学法检测组织标本中... 目的探讨肝细胞癌(HCC)中细胞核增殖抗原(Ki-67)和凋亡相关因子配体(FasL)的表达关系及临床意义。方法收集本院78例HCC组织及癌旁组织,同时取18例肝脏正常组织作为对照。链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)免疫组织化学法检测组织标本中Ki-67和FasL表达;结合临床资料分析Ki-67、FasL与HCC患者临床病理特征及预后的关系。应用SPSS 20.0统计软件进行分析。结果SP免疫组织化学结果显示,Ki-67主要表达于HCC组织细胞核内,其在HCC组织中阳性表达率为89.74%,显著高于癌旁组织(47.44%,χ^2=32.402,P<0.05)和正常组织(5.56%,χ^2=53.820,P<0.05)。FasL主要表达于HCC组织细胞质内,其在HCC组织中阳性表达率为67.95%,显著高于癌旁组织(39.74,χ^2=12.484,P<0.05)和正常组织(11.11%,χ^2=19.309,P<0.05)。Ki-67、FasL表达强度与HCC患者的病理分级、淋巴结是否转移有关(P<0.05)。至随访结束,全部患者的中位生存时间为50.00个月,术后1、3、5年累积生存率分别为82.05%、60.26%、47.44%。Ki-67高表达患者术后1、3、5年的累积生存率分别为75.51%、48.98%、38.78%,Ki-67低表达患者分别为93.10%、79.31%、62.07%,两者生存率差异有统计学意义(P<0.05)。FasL高表达患者术后1、3、5年的累积生存率分别为71.88%、43.75%、31.25%,FasL低表达患者分别为89.13%、73.91%、58.70%,两者生存率的差异有统计学意义(P<0.05)。结论Ki-67和FasL表达水平与HCC的发生、发展明显相关。 展开更多
关键词 肝细胞癌 细胞核增殖抗原 细胞凋亡调节蛋白 免疫组织化学
夏枯草胶囊对自身免疫性甲状腺炎大鼠甲状腺组织及Fas、FasL表达的影响
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作者 余欣然 向楠 +2 位作者 曾明星 周广文 李家圆 《现代生物医学进展》 CAS 2018年第7期1239-1242,1271共5页
目的:探讨夏枯草胶囊对自身免疫性甲状腺炎(AITD)大鼠甲状腺组织病理学及Fas、FasL表达的影响。方法:将40只雌性SD大鼠按照随机数表法随机分为空白对照组、模型组、夏枯草胶囊组、硒酵母组,每组10只,空白对照组予以正常饲养,模... 目的:探讨夏枯草胶囊对自身免疫性甲状腺炎(AITD)大鼠甲状腺组织病理学及Fas、FasL表达的影响。方法:将40只雌性SD大鼠按照随机数表法随机分为空白对照组、模型组、夏枯草胶囊组、硒酵母组,每组10只,空白对照组予以正常饲养,模型组和药物组予以PTg皮下注射建立AITD模型,夏枯草胶囊组、硒酵母组分别给予夏枯草胶囊与硒酵母片的生理水溶液灌胃,药物干预6周后处死大鼠,取甲状腺组织,HE染色电镜下观察各组大鼠甲状腺组织形态,免疫组化法检测各组大鼠甲状腺组织Fas、FasL蛋白的表达。结果:1)模型组大鼠甲状腺组织滤泡大量破坏,形态不规则,胶质分布不均匀,滤泡间隙增大,可见大量淋巴细胞及浆细胞浸润。夏枯草胶囊组滤泡形态尚规则,胶质含量较空白组少,滤泡间有少量淋巴细胞浸润。与模型组对比,夏枯草胶囊组与硒酵母组滤泡破坏及淋巴细胞浸润有显著改善。2)对照组大鼠甲状腺组织中Fas、FasL蛋白仅呈少量表达,模型组大鼠甲状腺组织中Fas、FasL蛋白表达较对照组显著增加(P〈0.01),夏枯草胶囊组大鼠甲状腺组织中Fas、FasL蛋白表达较模型组及硒酵母组均显著减少(P〈0.01)。结论:夏枯草胶囊可能通过减少Fas、FasL的表达,抑制甲状腺滤泡细胞凋亡,从而减轻甲状腺滤泡上皮的破坏。 展开更多
关键词 自身免疫性甲状腺炎 FAS FASL 夏枯草胶囊
凋亡及凋亡相关因子在胎儿生长受限胎盘滋养细胞中的表达
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作者 姜丹 于晶功 +5 位作者 孙寒冰 于水 邹娜 刘远远 蒋奇 王梦瑶 《大连医科大学学报》 CAS 2018年第6期489-492,497共5页
目的研究胎儿生长受限(fetal growth restriction,FGR)胎盘滋养细胞的凋亡及凋亡相关因子Fas、Fasl的表达及意义。方法收集2014年3月至2017年3月大连市妇女儿童医疗中心剖宫产分娩的胎盘,正常妊娠晚期(对照组)、FGR(实验组),各50例。采... 目的研究胎儿生长受限(fetal growth restriction,FGR)胎盘滋养细胞的凋亡及凋亡相关因子Fas、Fasl的表达及意义。方法收集2014年3月至2017年3月大连市妇女儿童医疗中心剖宫产分娩的胎盘,正常妊娠晚期(对照组)、FGR(实验组),各50例。采用TUNEL法检测两组胎盘滋养细胞的凋亡,计算凋亡指数。采用免疫组化S-P法检测凋亡相关因子Fas、Fasl的表达。结果对照组、实验组均可见胎盘滋养细胞的凋亡,凋亡指数AI分别为(17.64±6.97)%及(56.48±7.98)%,差异有显著性意义(P<0.05)。实验组Fas表达高于对照组,实验组Fasl表达低于对照组,差异均有显著性意义(P<0.05)。实验组AI与Fas表达呈正相关(r=0.634,P=0.000),与Fasl呈负相关(r=-0.940,P=0.000)。结论凋亡相关因子Fas、Fasl可能共同通过诱导胎盘滋养细胞的凋亡参与FGR的发病。 展开更多
关键词 FGR 胎盘 滋养细胞 凋亡 Fas Fasl
七氟醚通过FAS-FASL通路致幼鼠学习记忆损伤的研究
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作者 刘俊丽 宋琼 +3 位作者 董铁立 刘嘉颖 石蕾 李保林 《医药论坛杂志》 2018年第8期11-14,共4页
目的研究七氟醚可致幼鼠神经细胞凋亡增加并导致其学习记忆障碍的具体机制。方法将60只野生型幼鼠分成四组进行试验,对照组15只(野生型幼鼠+纯氧)、七氟醚组15只(野生型幼鼠+七氟醚)、FAS基因敲除组15只(敲除FAS基因幼鼠+七氟... 目的研究七氟醚可致幼鼠神经细胞凋亡增加并导致其学习记忆障碍的具体机制。方法将60只野生型幼鼠分成四组进行试验,对照组15只(野生型幼鼠+纯氧)、七氟醚组15只(野生型幼鼠+七氟醚)、FAS基因敲除组15只(敲除FAS基因幼鼠+七氟醚)、FASL基因敲除组15只(敲除FASL基因幼鼠+七氟醚),暴露结束后4 h,从四组幼鼠中各取5只处死,取海马组织,用原位末端标记法(TUNEL)计算海马处的凋亡细胞数量,用WB方法检测FAS蛋白表达量。剩余的幼鼠在第30~34天进行水迷宫试验检测其学习记忆能力。结果吸入七氟醚的幼鼠FAS蛋白表达明显升高,与敲除FAS基因的幼鼠、敲除FASL基因的幼鼠相比,吸入七氟醚的野生型幼鼠可以观察到较多的原位末端标记法阳性的海马细胞。水迷宫实验表明,与敲除FAS基因的幼鼠、敲除FASL基因的幼鼠相比,吸入七氟醚的野生型幼鼠在逃避潜伏期及通过目标象限的次数均较长。结论这些结果表明,七氟醚可通过FAS-FASL信号通路导致幼鼠神经细胞凋亡增加并导致学习记忆损伤。 展开更多
关键词 七氟醚 神经凋亡 FAS FASL 海马
Fas/FasL在罗哌卡因致PC12细胞凋亡中的表达
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作者 罗昭 刘颖 +3 位作者 张杨 孙晓东 桑明 罗辉宇 《临床麻醉学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第4期372-375,共4页
目的检测Fas、FasL在罗哌卡因诱导PC12细胞凋亡中表达的变化,探讨罗哌卡因的神经毒性机制。方法采用不同浓度罗哌卡因(0.1、0.5、1、2、4 mmol/L)处理PC12细胞24 h以建立细胞的神经毒性模型,CCK-8法测定细胞活力。最终将细胞随机分为... 目的检测Fas、FasL在罗哌卡因诱导PC12细胞凋亡中表达的变化,探讨罗哌卡因的神经毒性机制。方法采用不同浓度罗哌卡因(0.1、0.5、1、2、4 mmol/L)处理PC12细胞24 h以建立细胞的神经毒性模型,CCK-8法测定细胞活力。最终将细胞随机分为三组:0.5 mmol/L组、2mmol/L组和正常对照组。各组细胞培养24 h后用光学显微镜观察细胞形态学变化(加上1 mmol/L组),流式细胞仪检测细胞凋亡,免疫荧光检测Fas、FasL表达。结果与正常对照组比较,0.5 mmol/L组和2 mmol/L组细胞活力明显降低(P〈0.05),细胞形态明显异常(包括1 mmol/L组),凋亡率明显升高(P〈0.05),Fas、FasL表达明显增强(P〈0.05);与0.5 mmol/L组比较,2 mmol/L组细胞凋亡率和Fas、FasL表达明显增加(P〈0.05)。结论罗哌卡因可诱导PC12细胞凋亡,其机制可能与Fas/FasL上调有关。 展开更多
关键词 罗哌卡因 PC12细胞 细胞凋亡 FAS FASL
绝经前后乳腺癌患者E2、ER的表达水平及其与FasL表达的关系 预览
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作者 李久平 张英峰 《中外医疗》 2018年第25期19-20,23共3页
目的研究绝经前后乳腺癌患者雌二醇(E2)、雌激素受体(ER)的表达水平及其与凋亡相关因子配体(FasL)表达的关系。方法 方便选取2014年1月—2017年1月在我该治疗的乳腺癌患者86例。其中绝经前患者45例为绝经前组;绝经后患者41例为绝... 目的研究绝经前后乳腺癌患者雌二醇(E2)、雌激素受体(ER)的表达水平及其与凋亡相关因子配体(FasL)表达的关系。方法 方便选取2014年1月—2017年1月在我该治疗的乳腺癌患者86例。其中绝经前患者45例为绝经前组;绝经后患者41例为绝经后组。检测并对比两组组织E2、ER及Fas L水平,绝经前组及绝经后组癌组织的E2、ER及Fas L的阳性表达,分析Fas L阳性表达与E2、ER阳性表达的相关性。结果绝经后组的组织E2(452.94±62.88)pmol/L、ER(173.21±32.64)pmol/L及Fas L(127.35±31.02)pmol/L表达水平均分别低于绝经前组(854.33±53.21)、(208.85±49.63)、(316.74±28.69)pmol/L,差异有统计学意义(t=32.045、3.894、29.415,P〈0.05)。根据SPearman法对相关性进行分析,绝经前癌组织的Fas L阳性表达与E2、ER阳性表达之间均呈正相关(r=0.734、0.688,P均〈0.05);绝经后癌组织的Fas L阳性表达与E2、ER阳性表达之间亦呈正相关(r=0.657、0.712,P〈0.05)。结论 绝经前后乳腺癌患者的组织E2、ER与Fas L水平均较高,且呈现出正相关关系,临床可考虑对此三者指标进行监测,从而更好地辅助诊断。 展开更多
关键词 绝经 乳腺癌 E2 ER 肿瘤因子 FASL
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微小RNA-21对脊髓缺血再灌注损伤后神经元细胞凋亡的影响
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作者 张涛 倪双飞 +2 位作者 郎野 吕红斌 胡建中 《中国脊柱脊髓杂志》 CSCD 北大核心 2018年第2期169-175,共7页
目的:探讨微小RNA-21(miR-21)能否抑制FASL的表达进而减少脊髓缺血再灌注损伤后神经元细胞的凋亡。方法:通过慢病毒载体转染PC-12细胞,测定最佳的感染复数(MOI)。分别转染不同的慢病毒载体建立并验证上调miR-21、下调miR-21和对... 目的:探讨微小RNA-21(miR-21)能否抑制FASL的表达进而减少脊髓缺血再灌注损伤后神经元细胞的凋亡。方法:通过慢病毒载体转染PC-12细胞,测定最佳的感染复数(MOI)。分别转染不同的慢病毒载体建立并验证上调miR-21、下调miR-21和对照的PC-12细胞体系,经过氧糖剥夺以及复糖复氧处理模拟脊髓损伤后缺血再灌注损伤过程。利用Hoechst/PI染色技术检测上调以及下调miR-21对PC-12细胞凋亡情况的影响:利用qRT—PCR技术以及Westernblot技术检测上调以及下调miR-21表达对PC-12细胞中FASL表达水平的影响。在293T细胞中,通过质粒转染技术分别建立miR-21/miR-21阴性对照和FASL野生型/FASL突变型/FASL阴性对照的共转染体系,利用双荧光素酶实验验证miR-21和FASL的靶向关系。结果:MOI=20为最佳的感染复数。在该条件下进行慢病毒转染72h后,荧光显微镜下可观测到绝大多数PC-12细胞中有明显的绿色荧光,通过qRT—PCR技术检测miR-21的水平发现:上调组的miR-21水平较对照组明显提高(P〈0.05);但是下调组miR-21水平和对照组相比却没有明显变化(P〉0.05)。转染三种不同慢病毒的PC-12细胞经过氧糖剥夺及复氧处理后,Hoechst/PI双染法检测结果证实上调组细胞凋亡较对照组明显减少(P〈0.05),而下调组的细胞凋亡比例较对照增高(P〈0.05)。另外,氧糖剥夺及复氧处理后,三组PC-12细胞中FASL表达水平均较处理前增高,而上调组的FASL水平较对照组均下降(P〈0.05),下调组的FASL水平较对照组有所升高(P〈0.05)。双荧光素酶实验结果发现miR-21在FASL野生型(3’UTR—WT)组间有显著差异(P〈0.05),而miR-21在FASL对照组以及FASL突变型组间无显著差异(P〉0.05)。结论:miR-21能够通过靶向抑制FASL表达,减少脊髓缺血再灌注损伤后神经元的凋亡。 展开更多
关键词 脊髓损伤 神经元 MIR-21 凋亡 FASL
肠道病毒EV71感染手足口病患儿外周血淋巴细胞Fas、FasL表达水平的研究 预览
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作者 庄帝钱 《临床医学工程》 2018年第8期1025-1026,共2页
目的探讨肠道病毒EV71感染手足口病患儿外周血淋巴细胞Fas、Fas L的表达水平。方法 40例EV71感染手足口病患儿依据临床分期标准分为出疹期组(20例)、神经系统受累期组(20例),并选取同期健康体检儿童20例为对照组。检测并比较三组的... 目的探讨肠道病毒EV71感染手足口病患儿外周血淋巴细胞Fas、Fas L的表达水平。方法 40例EV71感染手足口病患儿依据临床分期标准分为出疹期组(20例)、神经系统受累期组(20例),并选取同期健康体检儿童20例为对照组。检测并比较三组的外周血淋巴细胞亚群情况以及Fas、Fas L表达水平。结果随着手足口病病情的加重,患儿外周血CD3+T淋巴细胞、CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞、NK细胞比例及CD4+/CD8+比值逐渐降低(P〈0.05),外周血CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞、NK细胞的Fas、Fas L表达水平逐渐升高(P〈0.05)。结论 EV71感染可通过上调外周血淋巴细胞Fas、Fas L的表达水平,促进外周淋巴细胞凋亡,导致手足口病患儿细胞免疫功能紊乱,进而加重病情。 展开更多
关键词 肠道病毒EV71 手足口病 Fas FASL 细胞凋亡
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七方胃痛颗粒对胃癌细胞中Fas/FasL通路的影响 被引量:1
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作者 廖纬琳 陈国忠 +5 位作者 苏洪佳 刘锟荣 黄丽萍 谢卓恩 曾丽金 李兵 《时珍国医国药》 CSCD 北大核心 2018年第8期1804-1807,共4页
目的 探讨七方胃痛颗粒对胃癌细胞中Fas/Fas L通路的影响。方法 参照血清药理学方法制备七方胃痛颗粒含药血清,以10%、20%、30%浓度七方胃痛颗粒含药血清作用SGC-7901胃癌细胞后,MTT法检测七方胃痛颗粒对SGC-7901细胞的生长抑制作用; We... 目的 探讨七方胃痛颗粒对胃癌细胞中Fas/Fas L通路的影响。方法 参照血清药理学方法制备七方胃痛颗粒含药血清,以10%、20%、30%浓度七方胃痛颗粒含药血清作用SGC-7901胃癌细胞后,MTT法检测七方胃痛颗粒对SGC-7901细胞的生长抑制作用; Western Blot和RT-PCR法检测经七方胃痛颗粒干预前后胃癌细胞SGC-7901中Fas,Fas L,FADD,Caspase-3、Caspase-8因子的蛋白及mRNA表达变化。结果 与空白对照组相比,七方胃痛颗粒能抑制SGC-7901的增殖(P 〈0. 05),并呈浓度、时间依赖性;中药血清干预后人胃癌细胞株Fas,Fas L,FADD,Caspase-3、Caspase-8蛋白和mRNA表达升高,与空白对照组相比差异具有统计学意义(P 〈0. 05),并呈浓度、时间依赖性。结论 在体外试验中,七方胃痛颗粒能抑制SGC 7901的增殖并促进其凋亡,可能通过下调胃癌细胞Fas、Fas L、FADD、Caspase-3、Caspase-8蛋白的表达水平,从而达到抗癌作用。 展开更多
关键词 胃癌前病变 Fas FASL FADD Caspase-3 CASPASE-8 七方胃痛颗粒
组蛋白去乙酰化酶3通过抑制AICD维持T细胞自稳
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作者 王姗 田枫 +9 位作者 千晔 刘颖 李会婷 张爱红 侯志宏 刘亚楠 李娟 张艳淑 赵勇 郑全辉 《生物化学与生物物理进展》 CSCD 北大核心 2018年第1期79-90,共12页
为探讨组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)在T细胞自稳中的作用,采用Lox P-cd4cre酶系统在胸腺CD4~+CD8~+双阳性T细胞(DP)中敲除hdac3基因.hdac3基因敲除小鼠不影响T细胞在胸腺中的发育,但导致外周T细胞显著降低,而且,hdac3基因敲除的外周... 为探讨组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)在T细胞自稳中的作用,采用Lox P-cd4cre酶系统在胸腺CD4~+CD8~+双阳性T细胞(DP)中敲除hdac3基因.hdac3基因敲除小鼠不影响T细胞在胸腺中的发育,但导致外周T细胞显著降低,而且,hdac3基因敲除的外周T细胞主要以活化/效应/记忆表型为主.机制分析表明,hdac3基因敲除的外周T细胞凋亡增加并伴随细胞增殖加速,同时,Fas和Fas配体阳性细胞比率以及Fas配体的表达显著增加.体外TCR活化不影响正常外周T细胞的凋亡,但导致hdac3基因敲除的外周T细胞凋亡显著增加.实验结果表明,HDAC3通过抑制活化诱导的细胞凋亡维持外周T细胞自稳. 展开更多
关键词 外周T细胞 组蛋白去乙酰化酶3 活化诱导的细胞凋亡 FAS FAS配体
肝细胞癌中Ki-67和FasL的表达关系及临床意义 预览
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作者 霍亮 骆杨 许家亮 《肝脏》 2018年第12期1118-1122,共5页
目的探究肝细胞癌(HCC)中Ki-67和FasL的表达关系及临床意义。方法收集2008年6月至2012年6月本院78例HCC组织及癌旁组织,同时取18例肝脏正常组织作为对照。SP免疫组化方法检测组织标本中Ki-67和FasL表达情况;结合临床资料分析Ki-67、FasL... 目的探究肝细胞癌(HCC)中Ki-67和FasL的表达关系及临床意义。方法收集2008年6月至2012年6月本院78例HCC组织及癌旁组织,同时取18例肝脏正常组织作为对照。SP免疫组化方法检测组织标本中Ki-67和FasL表达情况;结合临床资料分析Ki-67、FasL与HCC患者临床病理特征及预后的关系。结果①SP免疫组化结果显示,Ki-67主要表达于HCC组织细胞核内,其在HCC组织中阳性表达率显著高于癌旁组织(χ2=32.402,P=0.000)和正常组织(χ2=53.820,P=0.000)。②FasL主要表达于HCC组织细胞质内,其在HCC组织中阳性表达率显著高于癌旁组织(χ2=12.484,P=0.000)和正常组织(χ2=19.309,P=0.000)。③Ki-67、FasL表达强度与HCC患者的病理分级、淋巴结是否转移有关(P<0.05)。④至随访结束,全部患者的中位生存时间为50个月,术后1、3、5年累积生存率分别为82.05%、60.26%、47.44%。Ki-67高表达患者术后1、3、5年的累积生存率分别为75.51%、48.98%、38.78%;Ki-67低表达患者分别为93.10%、79.31%、62.07%;两者生存率差异有统计学意义(P<0.05)。FasL高表达患者术后1、3、5年的累积生存率分别为71.88%、43.75%、31.25%;FasL低表达患者分别为89.13%、73.91%、58.70%;两者生存率差异有统计学意义(P<0.05)。结论Ki-67和FasL表达水平与HCC的发生、发展有关,可用来评估HCC患者的临床预后。 展开更多
关键词 肝细胞癌 KI-67 FASL 免疫组化
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补肺健脾方对慢性阻塞性肺疾病大鼠骨骼肌Fas/FasL/Caspase-3的影响 被引量:5
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作者 李亚 毛静 +5 位作者 董玉琼 田燕歌 李琳琳 王丽丽 李素云 罗珊 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期1238-1241,共4页
目的:观察补肺健脾方对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠骨骼肌Fas/FasL/Caspase-3的影响。方法:SD大鼠48只随机分为对照组、模型组、补肺健脾组和氨茶碱组,每组12只。采用香烟熏吸联合细菌反复感染法制备COPD稳定期大鼠模型。自第9周起,对... 目的:观察补肺健脾方对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠骨骼肌Fas/FasL/Caspase-3的影响。方法:SD大鼠48只随机分为对照组、模型组、补肺健脾组和氨茶碱组,每组12只。采用香烟熏吸联合细菌反复感染法制备COPD稳定期大鼠模型。自第9周起,对照组和模型组均给予0.9%氯化钠溶液灌胃,其余2组分别给予补肺健脾方及氨茶碱治疗,第20周结束时取材。采用TUNEL技术检测股四头肌、肋间肌、肱二头肌和比目鱼肌4种骨骼肌的细胞凋亡率;采用荧光定量PCR技术和Western blot技术观察4种骨骼肌Fas、FasL和Caspase-3 mRNA和蛋白表达。结果:模型组4种肌肉细胞凋亡率和Fas、FasL、Caspase-3表达均较对照组显著升高(P<0.01),补肺健脾方和氨茶碱均可显著改善上述指标(P<0.05,P<0.01)。结论:补肺健脾方可以显著改善COPD大鼠骨骼肌凋亡,降低Fas、FasL和Caspase-3 mRNA和蛋白表达。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病 骨骼肌功能障碍 凋亡 FAS FASL Caspase-3 补肺健脾方
阿特拉津对大鼠支持细胞凋亡的影响
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作者 宋阳 张誉 +1 位作者 马梦婷 张立实 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期103-108,共6页
目的探讨阿特拉津对雄性SD大鼠睾丸支持细胞凋亡的影响及其作用机制。方法选用18~21日龄雄性SD大鼠,建立支持细胞原代培养模型。设溶剂对照组和阿特拉津10、50、100和200μmol/L 4个染毒剂量组,对支持细胞染毒24 h后,采用MTT法检测细... 目的探讨阿特拉津对雄性SD大鼠睾丸支持细胞凋亡的影响及其作用机制。方法选用18~21日龄雄性SD大鼠,建立支持细胞原代培养模型。设溶剂对照组和阿特拉津10、50、100和200μmol/L 4个染毒剂量组,对支持细胞染毒24 h后,采用MTT法检测细胞活性,免疫荧光法观察波形蛋白的表达,流式细胞术测定细胞凋亡率,Real time-PCR与ELISA分别检测Fas L、caspase-3与caspase-8的mRNA表达及蛋白含量。结果阿特拉津50、100和200μmol/L染毒组细胞活力分别为82.47%、75.23%和53.76%,与溶剂对照组比较分别降低17.53%(P〈0.05)、24.77%(P〈0.05)、46.24%(P〈0.01)。波形蛋白表达受抑制。阿特拉津50、100和200μmol/L染毒组细胞凋亡率分别为8.53%、13.07%和14.45%,与溶剂对照组比较分别升高86.86%(P〈0.01)、186.13%(P〈0.01)、216.06%(P〈0.01)。Fas L、caspase-3、caspase-8的mRNA表达及蛋白含量上调(P〈0.05或P〈0.01)。结论阿特拉津可影响大鼠支持细胞活性,可通过Fas L途径诱导支持细胞凋亡。 展开更多
关键词 阿特拉津 支持细胞 波形蛋白 细胞凋亡 FASL
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