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高效捕获阪崎肠杆菌免疫磁珠的制备研究 预览 被引量:1
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作者 姚骅珊 朱志强 《安徽化工》 CAS 2019年第1期55-59,共5页
制备以链霉亲和素———生物素介导偶联的免疫磁珠,通过偶联条件和捕获条件的优化,建立高效、特异富集阪崎肠杆菌的方法。结果表明,按照100μgSA/mg磁珠制备链霉亲和素磁珠,以抗体与磁珠表面链霉亲和素物质的量比为3∶1,37℃偶联30min,... 制备以链霉亲和素———生物素介导偶联的免疫磁珠,通过偶联条件和捕获条件的优化,建立高效、特异富集阪崎肠杆菌的方法。结果表明,按照100μgSA/mg磁珠制备链霉亲和素磁珠,以抗体与磁珠表面链霉亲和素物质的量比为3∶1,37℃偶联30min,可获得抗体结合量为386.6μg/mg免疫磁珠。在1mL体系中添加粒径为80nm的链霉亲和素免疫磁珠0.3mg室温孵育30min,纯培养条件下对阪崎肠杆菌捕获效率在80.5%以上,人工污染样品条件下捕获效率可达61.1%以上,非特异性低于5.0%。该免疫磁珠为富集阪崎肠杆菌提供了一种操作简单、捕获效率高、特异性好的方法,可广泛应用于食品中阪崎肠杆菌的检测。 展开更多
关键词 阪崎肠杆菌 免疫磁珠 捕获 偶联
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一起疑似阪崎肠杆菌引起的学校食源性疾病的流行病学调查
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作者 夏广金 董建云 +1 位作者 韩宁生 冯靖宇 《中国食品卫生杂志》 北大核心 2018年第3期299-303,共5页
目的调查食源性疾病暴发疫情的原因,研讨致病危险因素,为食源性疾病防控提供依据。方法用现场流行病学调查方法,运用病例对照研究对暴露的可疑餐次进行分析,开展现场卫生学调查,并采集样品和标本进行实验室检测。结果本次调查共发现156... 目的调查食源性疾病暴发疫情的原因,研讨致病危险因素,为食源性疾病防控提供依据。方法用现场流行病学调查方法,运用病例对照研究对暴露的可疑餐次进行分析,开展现场卫生学调查,并采集样品和标本进行实验室检测。结果本次调查共发现156名病例,罹患率为8.30%(156/1 879),临床表现以腹泻(99.4%,155/156)、腹痛(81.4%,127/156)、恶心(16.7%,26/156)、呕吐(3.8%,6/156)为主。病例对照研究显示,10月24日食堂晚餐是危险餐次(OR=49.91,95%CI=12.93-192.63),不同的班级罹患率差异有统计学意义(χ2=115.56,P〈0.01),采集的107份样品和标本中,患者肛拭子、送餐车及送餐箱桶和留样食品中的千张结烧肉检出阪崎肠杆菌。结论本次疫情是一起疑似由阪崎肠杆菌污染引起的食源性疾病,中毒原因可能为食用10月24日晚餐中千张结烧肉引起,建议加强餐饮行业监管,防止此类事件再次发生。 展开更多
关键词 阪崎肠杆菌 食源性疾病 流行病学调查 学校 南京
能力验证试验中阪崎肠杆菌的检测 预览
3
作者 苏子行 李振球 《现代食品》 2018年第5期124-125,共2页
目的:完善和强化实验室质量管理体系,增强和提高实验室的市场竞争力。方法:采用食品安全国家标准GB4789.40-2016《食品微生物学检验阪崎肠杆菌检验》。结果:采用多种鉴定方法对样品和标准菌株进行对照检测,结果为未检出阪崎肠杆菌。结论... 目的:完善和强化实验室质量管理体系,增强和提高实验室的市场竞争力。方法:采用食品安全国家标准GB4789.40-2016《食品微生物学检验阪崎肠杆菌检验》。结果:采用多种鉴定方法对样品和标准菌株进行对照检测,结果为未检出阪崎肠杆菌。结论:中国合格评定国家认可委员会(CNAS)对本实验室检测的能力验证样品试验结果判断为满意。 展开更多
关键词 实验室 能力验证 阪崎肠杆菌
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阪崎肠杆菌在不同品牌显色培养基上的对比分析 预览
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作者 李翠 周志云 +1 位作者 杨静 杨晓莉 《中国食物与营养》 2018年第10期35-38,共4页
目的:对比不同生产单位同种选择性培养基的差异,为乳粉的阪崎肠杆菌分离提供参考。方法:采用盲样考核样品,考察5家生产单位生产的不同品牌的阪崎杆菌显色培养基的选择性强弱。结果:不同品牌的显色培养基的准确率分别为100%、66.67%、20.... 目的:对比不同生产单位同种选择性培养基的差异,为乳粉的阪崎肠杆菌分离提供参考。方法:采用盲样考核样品,考察5家生产单位生产的不同品牌的阪崎杆菌显色培养基的选择性强弱。结果:不同品牌的显色培养基的准确率分别为100%、66.67%、20.00%和13.33%。结论:各生产单位生产的不同品牌阪崎肠杆菌显色培养基质量参差不齐,建议使用者在进行阪崎肠杆菌检查时,尽量选择不同生产单位的培养基进行筛查,避免因培养基的质量差异,出现检验结果误判。 展开更多
关键词 阪崎肠杆菌 培养基 品牌 对比
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晋城地区市售婴幼儿谷类辅助食品微生物污染状况评价
5
作者 董倩 郭树荣 +2 位作者 蒋忠瑭 吴双霞 李瑞君 《公共卫生与预防医学》 2018年第2期109-111,共3页
目的评价山西省晋城地区市售婴幼儿谷类辅助食品微生物污染状况,为监管部门制定措施提供参考。方法依据有关国家标准和风险监测手册对晋城地区2013—2016年市售婴幼儿谷类辅助食品进行菌落总数﹑大肠菌群﹑阪崎肠杆菌和蜡样芽孢杆菌的... 目的评价山西省晋城地区市售婴幼儿谷类辅助食品微生物污染状况,为监管部门制定措施提供参考。方法依据有关国家标准和风险监测手册对晋城地区2013—2016年市售婴幼儿谷类辅助食品进行菌落总数﹑大肠菌群﹑阪崎肠杆菌和蜡样芽孢杆菌的检测。结果 112份婴幼儿谷类辅助食品中,菌落总数超标率16.96%,大肠菌群超标率8.03%,致病菌检出率为:阪崎肠杆菌16.07%,蜡样芽孢杆菌21.43%。婴幼儿生制类谷物辅助食品菌落总数超标率53.33%高于婴幼儿谷物辅助食品11.11%和婴幼儿饼干12.50%(χ2=12.785,P=0.001),阪崎肠杆菌检出率46.67%高于婴幼儿谷物辅助食品13.58%和婴幼儿饼干0.00%(χ2=11.571,P=0.002)。网购环节菌落总数超标率43.75%高于其他流通环节(χ2=16.299,P〈0.001)。采自超市样品的蜡样芽孢杆菌检出率44.44%高于其他流通环节,差异有统计学意义(χ2=12.055,P=0.006)。以麦粉为原料的谷物辅助食品菌落总数超标率33.33%高于以大米5.45%和小米14.29%为原料类型(χ2=7.012,P=0.016)。结论晋城地区市售婴幼儿谷类辅助食品存在一定的食品安全隐患。 展开更多
关键词 婴幼儿谷类辅助食品 菌落总数 大肠菌群 阪崎肠杆菌 蜡样芽孢杆菌 食品安全
晋城地区市售婴幼儿谷类辅助食品卫生状况调查
6
作者 董倩 郭树荣 +2 位作者 成岁岁 赵芳芳 王静 《中国卫生检验杂志》 CAS 2018年第22期2810-2812,共3页
目的 调查评价晋城地区市售婴幼儿谷类辅助食品卫生状况,为相关部门进行风险评估提供基础数据。方法 采集晋城地区2013年-2016年市售婴幼儿谷类辅助食品进行阪崎肠杆菌、蜡样芽胞杆菌以及卫生指标菌检测。结果 112份婴幼儿谷类辅助食品... 目的 调查评价晋城地区市售婴幼儿谷类辅助食品卫生状况,为相关部门进行风险评估提供基础数据。方法 采集晋城地区2013年-2016年市售婴幼儿谷类辅助食品进行阪崎肠杆菌、蜡样芽胞杆菌以及卫生指标菌检测。结果 112份婴幼儿谷类辅助食品中,菌落总数超标率16. 96%,大肠菌群超标率8. 03%,致病菌检出率为37. 50%,其中阪崎肠杆菌16. 07%,蜡样芽胞杆菌21. 43%。进口婴幼儿谷类辅助食品中大肠菌群超标率(21. 43%)高于国产食品(6. 12%),差异有统计学意义(χ^2=3. 883,P 〈0. 05)。整袋或罐装类型谷粉的菌落总数超标率(30. 43%)高于内置独立小袋包装类型(3. 45%),差异有统计学意义(χ^2=12. 144,P 〈0. 001),前者大肠菌群超标率(26. 09%)高于内置独立小袋包装类型(3. 45%),差异有统计学意义(χ^2=9. 483,P 〈0. 05)。结论 晋城地区市售婴幼儿谷类辅助食品具有潜在的食品安全隐患。 展开更多
关键词 婴幼儿谷类辅助食品 菌落总数 大肠菌群 阪崎肠杆菌 蜡样芽胞杆菌
免疫磁珠分离联合荧光定量聚合酶链式反应快速检测阪崎肠杆菌的试验研究 预览
7
作者 姚骅珊 陈悦科 《江苏工程职业技术学院学报》 2018年第2期1-6,共6页
建立免疫磁珠分离(Immunomagnetic Separation,简称“IMS”)联合荧光定量聚合酶链式反应PCR(Polymerase Chain Reaction,简称“PCR”)快速检测阪崎肠杆菌的方法。制备以生物素介导偶联的链霉亲和素免疫磁珠,优化偶联和捕获条件。合成阪... 建立免疫磁珠分离(Immunomagnetic Separation,简称“IMS”)联合荧光定量聚合酶链式反应PCR(Polymerase Chain Reaction,简称“PCR”)快速检测阪崎肠杆菌的方法。制备以生物素介导偶联的链霉亲和素免疫磁珠,优化偶联和捕获条件。合成阪崎肠杆菌ITS(Internal Transcribed Spacer简称“ITS”)靶基因序列的引物和探针,同时构建内参质粒(Internal Amplification Control,简称“IAC”),建立能够实时监控反应过程的荧光定量PCR反应体系。在1 mL体系中添加粒径为80 nm的链霉亲和素免疫磁珠0.3 mg,孵育30 min,可获得80.5%以上的捕获效率。建立的基于内参的荧光PCR体系针对质粒检测时,Ct值(Cycle threshold,简称“Ct值”)与模板拷贝数有着良好的线性关系(R2=0.998),IMS-PCR检测体系对阪崎肠杆菌菌液的检测灵敏度为33.3 CFU/mL,可在3 h内完成。针对4株阪崎肠杆菌标准菌株和5株非阪崎肠杆菌菌株的检测也显示出较好的特异性和稳定性,人工模拟样品的检测结果与采用国标法检测的结果完全一致,可用于快速检测样品中的阪崎肠杆菌和疾病预防。 展开更多
关键词 免疫磁珠 荧光定量PCR 内参 阪崎肠杆菌 快速检测
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2016年山西省晋城市婴幼儿谷类辅助食品阪崎肠杆菌污染情况调查 被引量:1
8
作者 宋晓红 刘晔 王文军 《中国卫生检验杂志》 CAS 2018年第2期228-230,共3页
目的了解山西省晋城市市场上婴幼儿谷类辅助食品中阪崎肠杆菌的污染状况,为婴幼儿谷类辅助食品相关标准的制定及安全监管提供数据依据。方法按照GB 4789.40—2010《食品安全国家标准食品微生物学检验阪崎肠杆菌检验》MPN法进行实验室检... 目的了解山西省晋城市市场上婴幼儿谷类辅助食品中阪崎肠杆菌的污染状况,为婴幼儿谷类辅助食品相关标准的制定及安全监管提供数据依据。方法按照GB 4789.40—2010《食品安全国家标准食品微生物学检验阪崎肠杆菌检验》MPN法进行实验室检测。结果 93份样品中检出阪崎肠杆菌的样品数16份,检出率为17.20%,定量结果为15 MPN/100 g~46 MPN/100 g。3类食用方式中,煮熟后食用的阪崎肠杆菌的检出率最高(63.64%);产地方面,国内16个省份的产品中7个省份检出阪崎肠杆菌,其中以中国台湾和河北省的产品污染最严重;采样环节方面,来自专卖店和网购的产品阪崎肠杆菌的检出率高于超市的检出率。结论晋城市婴幼儿谷类辅助食品中阪崎肠杆菌污染严重,对婴幼儿的健康存在潜在威胁。 展开更多
关键词 婴幼儿谷类辅助食品 阪崎肠杆菌 污染率
恒温荧光核酸检测仪检测2种食源性致病菌的方法验证 被引量:2
9
作者 李洁云 王文珺 +4 位作者 阎颖 戴向东 王海华 王汝琦 桑华春 《食品安全质量检测学报》 CAS 2018年第4期761-768,共8页
目的以传统国标培养法作为参考比对方法,考察恒温荧光核酸检测仪(constant temperature fluorescent nucleic acid detector)检测食品(自然食品和加标食品)中食源性致病菌如阪崎肠杆菌和单核细胞增生李斯特氏菌的一致性。方法通过... 目的以传统国标培养法作为参考比对方法,考察恒温荧光核酸检测仪(constant temperature fluorescent nucleic acid detector)检测食品(自然食品和加标食品)中食源性致病菌如阪崎肠杆菌和单核细胞增生李斯特氏菌的一致性。方法通过对食品中阪崎肠杆菌和单核细胞增生李斯特氏菌国标培养法和恒温荧光核酸检测仪方法检测结果的比对,考量后者方法的灵敏度、特异性、假阳性率、假阴性率和准确度。结果恒温荧光核酸检测仪检测食品中阪崎肠杆菌和单核细胞增生李斯特氏菌的灵敏度和特异性都是100%,假阴性率为0;假阳性率为0。结论恒温荧光核酸检测仪方法特异性强、准确度高、无一例漏检。 展开更多
关键词 恒温荧光核酸检测仪 食源性致病菌 单核细胞增生李斯特氏菌 阪崎肠杆菌
婴幼儿奶粉中阪崎肠杆菌双重荧光PCR快速检测方法的建立 预览
10
作者 黄建飞 刘小青 +3 位作者 刘斌 陈泽峰 兰全学 陈晶 《食品工业科技》 CSCD 北大核心 2018年第6期246-249,297共5页
旨在建立针对阪崎肠杆菌的双重荧光PCR快速检测方法。以阪崎肠杆菌局部大分子合成(MMS)操纵子和外膜蛋白A(ompA)为靶基因,建立双重荧光PCR反应体系,探讨该体系的特异性、灵敏度和抗干扰能力。结果表明,双重荧光PCR体系对阪崎肠... 旨在建立针对阪崎肠杆菌的双重荧光PCR快速检测方法。以阪崎肠杆菌局部大分子合成(MMS)操纵子和外膜蛋白A(ompA)为靶基因,建立双重荧光PCR反应体系,探讨该体系的特异性、灵敏度和抗干扰能力。结果表明,双重荧光PCR体系对阪崎肠杆菌的灵敏度为4.3×103 CFU/mL,人工污染初始菌量为2CFU/100g奶粉样品增菌24h即可检出;39株实验菌中的15株阪崎肠杆菌出现特异性扩增,24株非阪崎肠杆菌未出现特异性扩增。本研究所建立的双重荧光PCR体系特异好、灵敏度较高及抗干扰能力强,可用于婴幼儿奶粉中阪崎肠杆菌的快速检测。 展开更多
关键词 阪崎肠肝菌 荧光PCR ompA基因 MMS基因
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荷兰婴儿配方乳粉阪崎肠杆菌污染事件的警示 预览 被引量:2
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作者 李美英 周博雅 +2 位作者 林亚青 赵洪静 张晓娜 《中国乳品工业》 CSCD 北大核心 2018年第7期28-32,共5页
在介绍该事件经过的基础上,归纳分析阪崎肠杆菌的特点、致病性、致病机理及污染途径,介绍了国内外对婴儿配方乳粉防控阪崎肠杆菌污染的管理措施,进而对我国防控婴儿配方乳粉阪崎肠杆菌污染的潜在风险和输入性风险提出了初步思考。
关键词 婴儿配方乳粉 阪崎肠杆菌 食品安全
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食品中阪崎肠杆菌能力验证结果分析与探讨 预览 被引量:1
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作者 周露 马蓉 《绿色科技》 2017年第18期224-226,共3页
指出了为提升实验室食品中阪崎肠杆菌检测能力,增强实验室竞争能力,实验参与了食药总局组织的阪崎肠杆菌检测能力验证活动。利用BAX Q7对能力验证中的10个样品进行了快速筛查,根据GB4789.40-2010《食品安全国家标准食品微生物学检验阪... 指出了为提升实验室食品中阪崎肠杆菌检测能力,增强实验室竞争能力,实验参与了食药总局组织的阪崎肠杆菌检测能力验证活动。利用BAX Q7对能力验证中的10个样品进行了快速筛查,根据GB4789.40-2010《食品安全国家标准食品微生物学检验阪崎肠杆菌检验》,对疑似菌进行了鉴定。结果显示:编号CODE 2、CODE 6、CODE 9样品检出阪崎肠杆菌,其余7个样品均未检出阪崎肠杆菌。实验室顺利完成能力验证,结果为满意。 展开更多
关键词 能力验证 阪崎肠杆菌 自动病源微生物检测系统
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2016年上海市松江区婴幼儿食品中阪崎肠杆菌污染状况分析 被引量:6
13
作者 乔雪飞 邱香 +4 位作者 吴佳瑾 俞佳莉 陆晓红 孙中兴 李欣 《环境与职业医学》 CSCD 北大核心 2017年第7期612-616,共5页
[目的]了解上海市松江区婴幼儿食品中阪崎肠杆菌的污染状况、分子分型及耐药性,为婴幼儿食品安全管理和食源性疾病的预警及临床用药提供科学依据。[方法]2016年选择松江区3个街道和4个乡镇,共19家食品店或超市,采集婴幼儿配方奶粉(包... [目的]了解上海市松江区婴幼儿食品中阪崎肠杆菌的污染状况、分子分型及耐药性,为婴幼儿食品安全管理和食源性疾病的预警及临床用药提供科学依据。[方法]2016年选择松江区3个街道和4个乡镇,共19家食品店或超市,采集婴幼儿配方奶粉(包括乳基、豆基)、婴幼儿谷类辅助食品和适用于婴幼儿的固体饮料,共124件。依据GB 4789.40—2010《食品安全国家标准食品微生物学检验阪崎肠杆菌检验》检验程序及荧光定量PCR方法,对所采集样品进行阪崎肠杆菌的分离培养鉴定及血清分型,并进一步进行药物敏感性试验;采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术进行分子分型。[结果]124件样品中:婴幼儿谷类辅食51件,检出阪崎肠杆菌11株(9株保存成功),阳性率为21.6%;婴幼儿配方奶粉53件、固体饮料20件,均未检出阪崎肠杆菌;3类食品中阪崎肠杆菌检出率的差异有统计学意义(P〈0.01)。采用PCR方法验证阳性菌,符合率为100%。9株阳性菌血清分型显示3株O1群,6株O2群。药敏试验结果显示,在所测定的16种抗生素中,9株阪崎肠杆菌只对头孢唑啉中度耐药或耐药,对其他抗生素均敏感。PFGE分子分型结果显示9株阪崎肠杆菌分为5种PFGE型别,相似度范围在50%~100%;其中A型有4株,B型有2株,相似度均为100%。[结论]上海市松江区婴幼儿谷类辅食中阪崎肠杆菌的阳性率高于其他类婴幼儿食品。阪崎肠杆菌对测定的抗生素(除头孢唑啉外)均敏感,其血清分型主要为O1、O2群,PFGE分型显示不同或相同品牌婴幼儿辅食中阪崎肠杆菌有同源性,可应用于阪崎肠杆菌的溯源。 展开更多
关键词 阪崎肠杆菌 婴幼儿 食品 药物敏感性 血清分型 脉冲场凝胶电泳
乳制品中四种病原菌多重荧光PCR检测方法的建立与应用 被引量:1
14
作者 李涛 王艳 +1 位作者 王粮子 刘代新 《基因组学与应用生物学》 CSCD 北大核心 2017年第9期3807-3813,共7页
本研究建立了可快速特异检测乳制品中阪崎肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和单核细胞增生李斯特氏菌的多重荧光PCR方法。通过设计阪崎肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和单核细胞增生李斯特氏菌的特异性引物和探针,建立了多重PCR反... 本研究建立了可快速特异检测乳制品中阪崎肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和单核细胞增生李斯特氏菌的多重荧光PCR方法。通过设计阪崎肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和单核细胞增生李斯特氏菌的特异性引物和探针,建立了多重PCR反应体系,评价了该方法的特异性、灵敏度和精密度,并用该方法和国标法分别检测了150份乳制品中的4种致病菌,对检测结果进行对比。结果显示,检测目标菌为相应阳性,检测其他12种非目标供试菌为阴性;检测灵敏度分别为1 cfu/μL;其精密度的变异系数均小于5%;与国标检测方法相比其检测结果具有良好的一致性。 展开更多
关键词 多重荧光PCR 阪崎肠杆菌 沙门氏菌 金黄色葡萄球菌 单核细胞增生李斯特氏菌
黑龙江省实验室能力比对乳粉中阪崎肠杆菌检验结果分析 预览 被引量:1
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作者 田冬梅 史春辉 张肖宁 《中国乳品工业》 CSCD 北大核心 2017年第7期45-47,共3页
通过实验室能力比对工作,评价食品微生物实验室的检测能力,提高实验室的检测水平,保证检测结果准确、可靠。依据CNAS—GL02《能力验证结果的统计处理和能力评价指南》和CNAS—CLS7《能力验证提供者认可准则在微生物领域的应用说明》... 通过实验室能力比对工作,评价食品微生物实验室的检测能力,提高实验室的检测水平,保证检测结果准确、可靠。依据CNAS—GL02《能力验证结果的统计处理和能力评价指南》和CNAS—CLS7《能力验证提供者认可准则在微生物领域的应用说明》进行结果统计和评价。结果表明:40家参比实验室中,4家为不满意结果,满意率为90%。食品微生物实验室检验能力尚存在不足,检验能力有待提高。 展开更多
关键词 阪崎肠杆菌 实验室能力比对 结果评价
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一例由阪崎肠杆菌感染引起的婴儿腹泻调查 被引量:4
16
作者 龙奇志 何志敏 +5 位作者 陈友群 林伟 王岚 胡世雄 彭文伏 贾华云 《实用预防医学》 CAS 2017年第8期954-956,共3页
目的对一例9月龄反复腹泻婴儿进行流行病学调查和实验室检测,为诊断提供依据。方法根据流行病学调查,采集患儿粪便、奶粉、米粉等食品及奶瓶等可疑样本,进行常见肠道病原菌的分离培养,对检出的病原菌进行脉冲场凝胶电泳分子分型和... 目的对一例9月龄反复腹泻婴儿进行流行病学调查和实验室检测,为诊断提供依据。方法根据流行病学调查,采集患儿粪便、奶粉、米粉等食品及奶瓶等可疑样本,进行常见肠道病原菌的分离培养,对检出的病原菌进行脉冲场凝胶电泳分子分型和药敏实验。结果患儿断奶后以某品牌羊奶粉为主食,出现发热伴腹泻症状,反复近半个月,后经头孢噻肟和维生素C治疗得到康复。患儿的粪便、羊奶粉及两个奶瓶经检测均检出阪崎肠杆菌。分离菌株PFGE分型显示奶粉(1株)和奶瓶洗脱液样品中(2株)的3株阪崎肠杆菌具有相同的PFGE带型,与患者粪便中的分离株(1株)相似度为64.3%。药敏实验显示4株阪崎肠杆菌对氨苄青霉素、氯霉素、环丙沙星、阿奇霉素、亚胺培南、头孢西丁、庆大霉素、萘啶酸、复方磺胺甲恶唑和四环素10种抗生素敏感实验结果均为敏感。结论婴幼儿配方羊奶粉中阪崎肠杆菌的污染不容忽视,存在严重潜在危险。 展开更多
关键词 阪崎肠杆菌 婴幼儿 感染 溯源 药敏实验
一种基于TaqMan探针法的阪崎肠杆菌qPCR全自动检测技术体系的建立 预览
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作者 王芬 刘宽 +2 位作者 马龙 李阳 吴酬飞 《安徽农业科学》 CAS 2017年第34期144-147,共4页
[目的]建立快速准确地检测食物样品中食源性致病菌的体系.[方法]配套湖州市微生物制剂与农产品安全重点实验室自主研发的微生物分子检测仪,建立一种基于TaqMan探针法的阪崎肠杆菌qPCR检测体系.[结果]体系建立成功,标准曲线斜率为-3.44,R... [目的]建立快速准确地检测食物样品中食源性致病菌的体系.[方法]配套湖州市微生物制剂与农产品安全重点实验室自主研发的微生物分子检测仪,建立一种基于TaqMan探针法的阪崎肠杆菌qPCR检测体系.[结果]体系建立成功,标准曲线斜率为-3.44,R^2=0.9955,扩增效率为95.3%.[结论]该qPCR体系特异性强,灵敏度高,明显缩短了检测时间,并具有良好的稳定性与重复性,为食品中阪崎肠杆菌的高通量和自动化检测提供了一个新的途径. 展开更多
关键词 阪崎肠杆菌 qPCR 全自动检测
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6种食源性致病菌质控考核结果分析 被引量:3
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作者 韩海红 刘继开 +4 位作者 李薇薇 郭云昌 付萍 李业鹏 余东敏 《中国食品卫生杂志》 2017年第3期345-350,共6页
目的对承担食品安全风险监测任务的全国各级疾病预防控制中心开展微生物质量控制考核,以评价其对6种食源性致病菌的检验能力。方法 6种质控考核菌株包括单核细胞增生李斯特菌、蜡样芽胞杆菌、阪崎肠杆菌、大肠埃希菌、沙门菌以及金黄色... 目的对承担食品安全风险监测任务的全国各级疾病预防控制中心开展微生物质量控制考核,以评价其对6种食源性致病菌的检验能力。方法 6种质控考核菌株包括单核细胞增生李斯特菌、蜡样芽胞杆菌、阪崎肠杆菌、大肠埃希菌、沙门菌以及金黄色葡萄球菌。按照2011和2012年设计的组合,将新鲜培养的致病菌增菌液混合后滴加于灭菌奶粉载体中制成样品。2011年考核制备了6种样品(I~VI),2012年为10种样品(A~J)。运用点分数法对两年结果分别进行满意率评价,率的比较用Pearsonx~2检验或对数似然比x~2检验。结果 2011和2012年考核总体满意率分别为86.5%(268/310)和84.3%(375/445),2011年样品满意率最低的是空白样品VI(68.0%,17/25),2012年满意率最低的是G样品(0.0%,0/8)。2011和2012年考核结果主要漏检的是大肠埃希菌,其中2012年大肠埃希菌漏检率占漏检总数的85.7%(60/70)。2011年非考核菌中漏检最多的是金黄色葡萄球菌和蜡样芽胞杆菌。2012年考核结果主要多检的是金黄色葡萄球菌,占多检总数的36.8%(7/19)。两年的结果均显示大肠埃希菌和阪崎肠杆菌组合样品中,大肠埃希菌的漏检率明显增高。沙门菌和大肠埃希菌的血清分型正确率较低,分别为41.5%(95/229)和45.1%(105/233)。单核细胞增生李斯特菌易错误鉴别成英诺克李斯特菌,蜡样芽胞杆菌易错误鉴别成蕈状芽胞杆菌,阪崎肠杆菌易错误鉴别成河生肠杆菌。结论 80%以上的疾病预防控制中心对6种致病菌的定性检验能力较好,可以满足食品安全风险监测的需求。其中对沙门菌的检验能力最高;金黄色葡萄球菌漏检率较低但易出现多检;大肠埃希菌的检验能力有待提高;阪崎肠杆菌的检验水平较2010年结果有明显提升。 展开更多
关键词 单核细胞增生李斯特菌 蜡样芽胞杆菌 阪崎肠杆菌 大肠埃希菌 沙门菌 金黄色葡萄球菌 食源性致病菌 质量控制 检测
免疫磁性壳聚糖微球的制备及对阪崎肠杆菌的分离效果 被引量:1
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作者 朱英莲 徐莹 汪东风 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第9期95-100,共6页
目的:制备用于特异性分离阪崎肠杆菌的免疫磁性壳聚糖微球以及对阪崎肠杆菌的捕获效果。方法:采用反向悬浮交联法制备磁性壳聚糖微球.并对微球的表面进行氨基化修饰。然后与阪崎肠杆菌多克隆抗体进行偶联,制备免疫磁性壳聚糖微球。... 目的:制备用于特异性分离阪崎肠杆菌的免疫磁性壳聚糖微球以及对阪崎肠杆菌的捕获效果。方法:采用反向悬浮交联法制备磁性壳聚糖微球.并对微球的表面进行氨基化修饰。然后与阪崎肠杆菌多克隆抗体进行偶联,制备免疫磁性壳聚糖微球。优化磁性壳聚糖微球对阪崎肠杆菌多克隆抗体的偶联条件,包括偶联时间、磁性壳聚糖微球用量、偶联体系pH,对抗体的饱和偶联量。通过与显色培养基结合的方法研究免疫磁性壳聚糖微球对阪崎肠杆菌的捕获能力。结果:制备的磁性壳聚糖微球通过表面修饰能连接上大量的活性氨基。在pH7.4的偶联体系中,10.0min即可完成对阪崎肠杆菌多克隆抗体的偶联,0.01g磁性壳聚糖微球对抗体的饱和偶联量为25~50μL。当阪崎肠杆菌浓度较低时,制备的免疫磁性壳聚糖微球对阪崎肠杆菌的捕获率达94.7%,对阪崎肠杆菌的灵敏度为5cfu/mL。结论:获得阪崎肠杆菌免疫磁性壳聚糖微球,该微球是一种非常有潜力的快速富集、分离阪崎肠杆菌的有效方法。 展开更多
关键词 壳聚糖 免疫磁性微球 阪崎肠杆菌 分离
三种方法检测奶粉中克罗诺杆菌(原阪崎肠杆菌)的比较分析 预览 被引量:1
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作者 周臣清 赵玲 +5 位作者 黄宝莹 熊波 韩振亚 张娟 朱婉清 黄玲玲 《广东化工》 CAS 2016年第5期171-172,共2页
参加盲样考核,比较传统国标法、VETIK及荧光PCR法检测奶粉中阪崎肠杆菌的检测效果。文章参考GB/T 4789.40-2010《食品微生物学检验阪崎肠杆菌检验》和SN/T 1632.3-2013《出口奶粉中阪崎肠杆菌的检验方法》,对10份盲样采用传统国标法、VE... 参加盲样考核,比较传统国标法、VETIK及荧光PCR法检测奶粉中阪崎肠杆菌的检测效果。文章参考GB/T 4789.40-2010《食品微生物学检验阪崎肠杆菌检验》和SN/T 1632.3-2013《出口奶粉中阪崎肠杆菌的检验方法》,对10份盲样采用传统国标法、VETIK及荧光PCR法比较验证。结果表明3种检测方法结果吻合,10份样品中有四份检测阪崎肠杆菌,编号分别为#2、#4、#5和#8,其他6份样品未检出。 展开更多
关键词 盲样考核 阪崎肠杆菌 荧光PCR VITEK 传统国标法
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