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基于SCI文献分析家蚕相关研究进展 预览 被引量:1
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作者 李玉兰 《蚕学通讯》 2011年第2期 9-13,共5页
使用Thomson Data Analyzer及Excel软件,通过对SCI—EXPANDED中2002—2010年的家蚕文献的文献类型、主要国家/地区分布、研究机构、作者、来源期刊、学科分布及关键词进行统计分析,以文献为依据看近年来家蚕研究的发展动态与趋势。MA... 使用Thomson Data Analyzer及Excel软件,通过对SCI—EXPANDED中2002—2010年的家蚕文献的文献类型、主要国家/地区分布、研究机构、作者、来源期刊、学科分布及关键词进行统计分析,以文献为依据看近年来家蚕研究的发展动态与趋势。MAI指数分析表明近两年我国家蚕研究已处于世界领先水平。关键词TDA分析显示家蚕蚕丝蛋白、家蚕核型多角体病毒、电纺丝、细胞凋亡基因、天然免疫力利用等方面是近年来研究的新热点。 展开更多
关键词 家蚕 SCI 文献计量学
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纳米银处理家蚕病毒病NPV、CPV病原物的生物学效应 预览 被引量:5
2
作者 陈泽雄 王叶元 +2 位作者 陈芳艳 钟杨生 李文楚 《广东蚕业》 2013年第2期11-14,共4页
纳米银作为一种新兴产业的纳米抑菌剂,具有非常可观的应用前景。蚕丝科学系课题组应用纳米银处理家蚕各种细菌病、桑树病原菌甚至真菌、病毒病都有很好的效果。本实验利用现有的仪器设备,通过添食病毒、分区饲养、生物学统计等方法,... 纳米银作为一种新兴产业的纳米抑菌剂,具有非常可观的应用前景。蚕丝科学系课题组应用纳米银处理家蚕各种细菌病、桑树病原菌甚至真菌、病毒病都有很好的效果。本实验利用现有的仪器设备,通过添食病毒、分区饲养、生物学统计等方法,研究了纳米银对家蚕病毒病NPV和CPV的作用效果。结果表明,用适当浓度(2×106CFU/ml病毒原液)的NPV和CPV病毒液感染四龄期第3天家蚕,未经纳米银处理的病毒添食的家蚕在5龄后期会呈爆发性发病,而在纳米银处理的实验组中,家蚕病毒病的发病率大大降低,显示纳米银对NPV和CPV具有明显的杀灭作用。 展开更多
关键词 纳米银 核型多角体病毒(NPV) 质型多角体病毒(CPV) 生物学效应 发病率
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酪氨酸蛋白磷酸酯酶1B抑制剂的分子对接和三维定量构效关系研究 预览 被引量:5
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作者 周梅 章威 +2 位作者 成元华 计明娟 徐筱杰 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第23期 2131-2136,共6页
用一种柔性分子对接方法(FlexX)将12个2-草酰胺苯甲酸类抑制剂和酪氨酸蛋白磷酸酯酶(PTP1B)活性口袋进行分子对接,对接程序预测的抑制剂和酶之间的相互作用能与抑制活性之间有很好的相关性(非线性相关系数R2达0.859),这说明对接结果可... 用一种柔性分子对接方法(FlexX)将12个2-草酰胺苯甲酸类抑制剂和酪氨酸蛋白磷酸酯酶(PTP1B)活性口袋进行分子对接,对接程序预测的抑制剂和酶之间的相互作用能与抑制活性之间有很好的相关性(非线性相关系数R2达0.859),这说明对接结果可以比较准确地预测抑制剂和PTP1B之间的结合模式.然后,将33个同类抑制剂的骨架叠合在分子对接预测的结合构象上,用比较分子力场分析方法(CoMFA)对其进行三维定量活性构效关系研究,得到的CoMFA模型具有很好的统计相关性(交互验证回归系数q2为0.650),并可以准确地预测测试集6个化合物的活性(平均标准偏差为0.177).同时,由CoMFA模型得出的抑制剂改造信息与用FlexX预测的结合模式是一致的,进一步证明我们预测的结合模式是正确的.为研究这类抑制剂和PTP1B的结合模式及对抑制剂进行结构改造提供了信息. 展开更多
关键词 酪氨酸蛋白磷酸酯酶 分子对接 三维定量构效关系 比较分子力场分析方法
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试论血液型脓病的防治 预览 被引量:1
4
作者 刘凯 《蚕桑茶叶通讯》 1995年第2期 29-32,共4页
试论血液型脓病的防治刘凯(弋阳县蚕桑局)家委的血液型脏病又称核型多角体病,属亚急性传染病毒病。在我县乃至我省的各蚕区不同季节都有发生。特别是夏秋期,常因气候条件较差,尤以消毒不严、管理不善,容易造成蚕病暴发,减产减收... 试论血液型脓病的防治刘凯(弋阳县蚕桑局)家委的血液型脏病又称核型多角体病,属亚急性传染病毒病。在我县乃至我省的各蚕区不同季节都有发生。特别是夏秋期,常因气候条件较差,尤以消毒不严、管理不善,容易造成蚕病暴发,减产减收。据调查,戈阳县血液型脓病损失占蚕... 展开更多
关键词 家蚕 血液型脓病 病原 发病规律 症状 病变 诊断 防治
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BmNPV多角体蛋白片段引导外源蛋白固定入多角体的研究 被引量:6
5
作者 曹翠平 于少芳 +4 位作者 郭爱芹 杨锐 相兴伟 陈琳 吴小锋 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期282-289,共8页
家蚕核型多角体病毒(BmNPV)晚期产生大量多角体,其主要作用是包埋病毒粒子免受外部恶劣环境的影响,为次代感染提供保障。将BmNPV多角体基因分段克隆并与报告基因——增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因融合,利用BmNPV Polh’Bac-to-Ba... 家蚕核型多角体病毒(BmNPV)晚期产生大量多角体,其主要作用是包埋病毒粒子免受外部恶劣环境的影响,为次代感染提供保障。将BmNPV多角体基因分段克隆并与报告基因——增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因融合,利用BmNPV Polh’Bac-to-Bac表达系统构建重组病毒,使多角体蛋白与融合蛋白在BmN细胞内共表达。分析感染细胞和形成的多角体中融合蛋白的含量,研究不同的多角体蛋白片段引导EGFP固定入多角体的效果,结果表明构建的5种重组病毒都能大量表达融合蛋白,每种多角体蛋白片段都能引导EGFP固定入多角体内部,且外源融合蛋白在多角体总蛋白中占有较高的比例,其中,以多角体蛋白N末端100个氨基酸和完整多角体蛋白序列作为信号固定EGFP的效率最高。这一现象为解决活性蛋白长期保存提供了新思路,同时对于开发含有毒素蛋白的新型生物杀虫剂和新型疫苗的转运载体也具有较好的参考价值。 展开更多
关键词 家蚕核型多角体病毒 多角体 多角体蛋白片段 蛋白质固定
家蚕中肠细胞与家蚕核型多角体病毒经口感染因子P74的互作蛋白筛选
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作者 郑秦 孔祥硕 +2 位作者 王海萍 许伟凡 吴小锋 《蚕业科学》 CSCD 北大核心 2018年第1期56-63,共8页
家蚕核型多角体病毒(Bm NPV)包涵体衍生型病毒粒子(ODV)被家蚕幼虫食下后通过侵染中肠上皮细胞引发全身性感染,这个过程称为经口感染。已知有多种ODV囊膜蛋白在经口感染中发挥关键作用,被称为经口感染因子(PIF)。P74作为最早被鉴... 家蚕核型多角体病毒(Bm NPV)包涵体衍生型病毒粒子(ODV)被家蚕幼虫食下后通过侵染中肠上皮细胞引发全身性感染,这个过程称为经口感染。已知有多种ODV囊膜蛋白在经口感染中发挥关键作用,被称为经口感染因子(PIF)。P74作为最早被鉴定的PIF,与ODV结合中肠上皮细胞有关。为了鉴定宿主家蚕中肠细胞中与P74互作的蛋白质,构建家蚕中肠酵母文库,并以P74作为诱饵进行酵母双杂交筛选。初步筛选到7种互作候选蛋白,分别为U3小核仁核糖核蛋白IMP3、60S核糖体蛋白L5、JAB-MPN结构域蛋白、细胞质肌动蛋白A3、35 k D蛋白酶、富半胱氨酸和组氨酸蛋白1-B和真核翻译起始因子1A。免疫共沉淀实验结果表明JAB-MPN结构域蛋白和P74之间存在强烈互作,该蛋白质可能是ODV结合中肠细胞的关键宿主因子。研究结果为进一步阐明Bm NPV经口感染的详细分子机制提供了新的线索。 展开更多
关键词 家蚕 中肠细胞 家蚕核型多角体病毒 经口感染因子 互作蛋白
BmNPV对家蚕抗氧化酶基因表达 及其酶活性的影响 预览
7
作者 唐芬芬 杨伟克 +3 位作者 朱峰 邵榆岚 张永红 白兴荣 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期2308-2313,共6页
【目的】探究喂食家蚕核型多角体病毒(BmNPV)后家蚕血淋巴和中肠组织抗氧化酶[超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)]的活性及其基因表达变化规律,明确BmNPV侵染对家蚕抗氧化系统的影响,为解析BmNPV的致病机理提供理论依据。【方法】... 【目的】探究喂食家蚕核型多角体病毒(BmNPV)后家蚕血淋巴和中肠组织抗氧化酶[超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)]的活性及其基因表达变化规律,明确BmNPV侵染对家蚕抗氧化系统的影响,为解析BmNPV的致病机理提供理论依据。【方法】以五龄家蚕为研究对象,经口喂食BmNPV,分别于添食后6、12、18、24、30、36、42和48 h采集家蚕的血淋巴和中肠组织,采用实时荧光定量PCR检测两种抗氧化酶基因(Bmsod和Bmcat)的表达水平,同时以抗氧化酶活性测试盒测定SOD和CAT的活性变化情况。【结果】BmNPV侵染五龄家蚕能引起典型的血液型脓病,主要表现为蚕体环节肿胀,狂躁爬行,体壁易破,体液呈乳白色等。家蚕血淋巴和中肠组织中Bmsod和Bmcat基因均在感染BmNPV中期开始上调表达,在感染后期呈下调表达趋势,其相对表达量也呈先增加后急剧减少的变化趋势。添食BmNPV后,家蚕血淋巴和中肠组织的SOD活性在感染18和24 h时极显著高于对照组(添食等量灭菌水)家蚕(P<0.01,下同),但从感染30 h起SOD活性开始急剧下降,至感染48 h时降至最低值。家蚕血淋巴和中肠组织的CAT活性在感染早期(6 h)略有下降,从感染12 h起CAT活性开始呈上升趋势,血淋巴CAT活性在感染18~30 h极显著高于对照组,随后急剧下降且显著低于对照组家蚕(P<0.05,下同);中肠组织CAT活性仅在感染18和24 h时显著或极显著高于对照组家蚕,从感染30 h起开始持续下降,至感染48 h时降至最低值,约为对照组家蚕的18%。【结论】BmNPV侵染能影响家蚕机体相关保护酶活性及其基因转录水平,SOD和CAT活性及其基因表达量在感染中期增加,感染后期则急剧降低,提示抗氧化酶SOD和CAT在家蚕的抗病毒过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 家蚕 家蚕核型多角体病毒(BmNPV) SOD CAT 酶活性 基因表达
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一种适用于家蚕核型多角体病毒的PCR检测方法 被引量:4
8
作者 唐芬芬 杨伟克 +4 位作者 钟健 邵榆岚 李平平 刘增虎 白兴荣 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期1202-1205,共4页
建立家蚕核型多角体病毒(BmNPV)的快速检测技术,有利于病害的早期诊断。选择家蚕核型多角体病毒极早期基因pe38为靶基因设计特异性检测引物,对不同浓度BmNPV基因组DNA模板及含有pe38的重组质粒pMD@18-pe38标准品进行PCR检测,结果... 建立家蚕核型多角体病毒(BmNPV)的快速检测技术,有利于病害的早期诊断。选择家蚕核型多角体病毒极早期基因pe38为靶基因设计特异性检测引物,对不同浓度BmNPV基因组DNA模板及含有pe38的重组质粒pMD@18-pe38标准品进行PCR检测,结果扩增出BmNPV370bp的特异性片段,病毒多角体的最低检测浓度为4.86×10^3mL-1,标准质粒的最低检测量为0.7pg。将BmNPV感染家蚕幼虫后不同时间取其血淋巴用于PCR检测方法的验证,结果表明,接种病毒多角体浓度为4.86×10^8mL-1时,感染36h后取样的幼虫血淋巴中能扩增出370bp的病毒特异条带,可检出病毒的时间随添毒浓度的递减而延迟。该检测方法具有较好的特异性和灵敏度。 展开更多
关键词 家蚕核型多角体病毒 PCR pe38基因
家蚕抗BmNPV细胞因子的筛选和分析 预览
9
作者 王菲 李显扬 +1 位作者 化晓婷 夏庆友 《中国农业科学》 CSCD 北大核心 2018年第4期789-799,共11页
【目的】探讨家蚕NF-κB类转录因子Bm Relish在抗核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV)感染的免疫应答中的作用,筛选和分析抗病毒细胞因子,完善对家蚕抗病毒免疫机制的认识。【方法】通过Western blot检测当Bm NPV... 【目的】探讨家蚕NF-κB类转录因子Bm Relish在抗核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV)感染的免疫应答中的作用,筛选和分析抗病毒细胞因子,完善对家蚕抗病毒免疫机制的认识。【方法】通过Western blot检测当Bm NPV感染家蚕BmE细胞后BmRelish全长形式(BmRelish-FL)是否转变成其活性形式(BmRelishact);利用荧光定量PCR检测过表达BmRelishact的细胞在感染Bm NPV后胞内病毒DNA的相对水平,观测在被荧光标记的BmNPV(BmNPV-EGFP)感染后呈现EGFP荧光的细胞数,并与作为对照的未表达BmRelishact的细胞相比较,以确定Bm Relish是否参与抗病毒免疫;将新鲜细胞通过Transwell细胞共培养体系经过表达BmRelishact的细胞上清培养液孵育后,定量检测在感染BmNPV后胞内病毒DNA的相对水平,以探讨过表达BmRelishact的细胞是否产生并分泌抗病毒细胞因子;通过超滤等方法对过表达BmRelishact的细胞上清培养液予以初步分离,将滤过液和截留液分别孵育新鲜细胞,定量检测感染BmNPV后胞内病毒DNA的相对水平,从而确定抗病毒细胞因子的分子量范围;用高温处理滤过液和截留液后再孵育新鲜细胞,定量检测感染BmNPV后胞内病毒DNA的相对水平以确定抗病毒细胞因子的属性;利用LC-MS/MS对滤过液中的多肽做进一步鉴定和分析。【结果】BmE细胞被BmNPV感染后,部分BmRelish-FL转变成其活性形式BmRelishact;过表达BmRelishact的细胞被Bm NPV感染后,胞内病毒DNA的相对水平显著低于对照细胞,且呈现EGFP荧光的细胞数也较对照少;新鲜细胞经过表达BmRelishact的细胞上清培养液孵育后,胞内病毒DNA的相对水平显著低于用对照细胞上清培养液孵育的细胞;用100和3 kD超滤管超滤过表达BmRelishact的细胞上清培养液后,滤过液仍然具有显著降低所孵育细胞的胞内病毒DNA的相对水平,而截留液无此活性;经高温处理后,该细胞上清培养液不再具有降低所孵� 展开更多
关键词 家蚕 家蚕核型多角体病毒 BmRelish 细胞因子 抗病毒免疫
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家蚕核型多角体病毒bro基因的单核苷多态性研究 预览 被引量:3
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作者 王霞 潘国庆 +2 位作者 庞敏 李艳红 周泽扬 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期 294-299,共6页
bro(baculovirus repeated ORFs)基因家族是一类存在于核型多角体病毒中比较复杂的基因家族.家蚕核型多角体病毒T3 BmNPV基因组中有5个bro基因,分别为bro-a,bro-b,bro-c,bro-d,bro-e.对我国的BmNPV CQ1株进行了全基因组测序,与T3序列比... bro(baculovirus repeated ORFs)基因家族是一类存在于核型多角体病毒中比较复杂的基因家族.家蚕核型多角体病毒T3 BmNPV基因组中有5个bro基因,分别为bro-a,bro-b,bro-c,bro-d,bro-e.对我国的BmNPV CQ1株进行了全基因组测序,与T3序列比较发现两个差异较大区域,分别命名为V1,V2区.在此基础上,对来自国内不同地区的另外5株BmNPV分离株对应的差异区域进行了研究,克隆了包含15个bro基因的10个DNA片段,其中包含了5个bro-c基因序列,5个bro-d基因序列,4个bro-e基因序列,加上公共数据库中已有的2个bro-c、2个bro-d、1个bro-e,合并后对bro-c、bro-d、bro-e分别进行核苷酸多态性分析,结果表明bro-c、d、e类基因都存在高密度的SNP位点.出现在这3类基因中的单核苷酸位点或核苷酸片段的插入/缺失数目分别为9、1、1.(θ,π)分析表明bro-c类基因的多态性在3类bro基因中最高.Tajima'D检验结果说明这些核苷酸变化符合中性突变假说.Pi(a)/Pi(s)分析暗示bro-c,bro-d和bro-e的N端的一些区段受到正向选择. 展开更多
关键词 家蚕核型多角体病毒 bro基因 单核苷多态性 插入/缺失 Tajima’D检验
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家蚕核型多角体病毒成纤维细胞生长因子基因的表达和定位 预览
11
作者 宋志秀 李兵 +1 位作者 王文兵 沈卫德 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期 189-192,I0002,共5页
为了解杆状病毒基因组中成纤维细胞生长因子基因(fgf)的功能,分离纯化了BmNPVDNA,采用PCR方法获得了BmNPV的faf基因,并克隆至原核表达载体pET28a,构建了高效原核表达质粒pET28a-fgf.通过IPTG诱导表达后,经SDS-PAGE检测证实了在2... 为了解杆状病毒基因组中成纤维细胞生长因子基因(fgf)的功能,分离纯化了BmNPVDNA,采用PCR方法获得了BmNPV的faf基因,并克隆至原核表达载体pET28a,构建了高效原核表达质粒pET28a-fgf.通过IPTG诱导表达后,经SDS-PAGE检测证实了在27kD左右有一特异条带.与预测的蛋白质分子量大小一致,并通过Ni^2+-NTA离子交换树脂亲和纯化了目的蛋白。同时构建了融合GFP的真核表达载体pCDNA3.1-gfp-fgf,通过脂质体转染进入COS-7细胞进行表达和定位观察。fgf基因产物定位于细胞核。 展开更多
关键词 家蚕核型多角体病毒 成纤维细胞生长因子 表达 纯化
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家蚕核型多角体病毒株系的分子鉴定初探 被引量:1
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作者 唐芬芬 邵榆岚 +5 位作者 钟健 张永红 黄平 董占鹏 廖鹏飞 白兴荣 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1030-1035,共6页
来自不同地域或蚕区的家蚕核型多角体病毒(Bm NPV)对家蚕的致病力存在较大差异,出现明显的株系分化现象。对Bm NPV流行株系鉴定是病害监测与防控的重要基础。以最早完成基因组测序的Bm NPV-T3株的多角体蛋白基因(polh)序列与其他6个... 来自不同地域或蚕区的家蚕核型多角体病毒(Bm NPV)对家蚕的致病力存在较大差异,出现明显的株系分化现象。对Bm NPV流行株系鉴定是病害监测与防控的重要基础。以最早完成基因组测序的Bm NPV-T3株的多角体蛋白基因(polh)序列与其他6个Bm NPV株系进行同源基因序列及氨基酸序列的BLAST比对,结果表明不同株系的Polh氨基酸序列高度同源,相似度达到99.94%;再以Bm NPV-T3株的143个开放阅读框序列为参照,对不同Bm NPV株系的基因组序列进行双序列比对,发现不同株系重复阅读框基因(bro)家族成员的组成、序列及拷贝数存在差异,且分布位置呈现多样性。初步认为,高度保守的polh基因可用于Bm NPV病毒的鉴定,而相对保守的bro家族基因可作为Bm NPV病毒株系分子鉴定的依据。 展开更多
关键词 家蚕核型多角体病毒 株系 多角体蛋白基因 杆状病毒重复阅读框基因
家蚕核型多角体病毒的PCR检测及其部分序列分析 预览 被引量:4
13
作者 刘吉平 王永宾 +1 位作者 魏建影 辛锦兰 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期 664-669,共6页
为研究应用PCR技术进行家蚕核型多角体病毒广东株的敏感性检验以及探讨不同地理株系的基因水平的相互关系,本文通过对家蚕核型多角体病毒BmNPV广东株的人工繁殖与纯化,引用了一对根据多角体蛋白基因设计的引物phy35/phy36,对BmNPV... 为研究应用PCR技术进行家蚕核型多角体病毒广东株的敏感性检验以及探讨不同地理株系的基因水平的相互关系,本文通过对家蚕核型多角体病毒BmNPV广东株的人工繁殖与纯化,引用了一对根据多角体蛋白基因设计的引物phy35/phy36,对BmNPV的基因组模板DNA进行了PCR扩增,并对其产物进行测序分析。结果显示,PCR技术均可扩增检测出3×10^8个/mL至3×10^2个/mL不同浓度的BmNPV模板DNA,特异目标片段大小约为680bp,且扩增带的亮度随着病毒液浓度的降低而减弱,说明应用引物phy35/Dhy36进行PCR方法可以有效地应用于检测BmNPV病毒感染的家蚕。同时,测序获得了BmNPV广东株多角体蛋白pof佩edrin基因674bp大小的片段,GC含量为46.4%。经过BLAST比对分析,与BmNPV泰国株的相似性为99%,暗示家蚕BmNPV广东株与泰国株的BmNPV(登录号AY779044)亲缘关系非常相近,两者可能属于BmNPV的不同地理株系。通过系统发育树的进一步分析发现,家蚕核型多角体病毒广东株polyhedrin基因部分序列与家蚕NPV分离株s9多角体蛋白基因(DQ231336)关系很近。 展开更多
关键词 家蚕 BmNPV基因组 polyhedrin基因 PCR
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肠出血性大肠杆菌O157外膜蛋白的SDS-PAGE分析 预览 被引量:1
14
作者 帅领 覃志初 +1 位作者 张任娜 王豪举 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2008年第10期 80-81,共2页
肠出血性大肠杆菌(EHEC)是世界上食源性疾病的重要诱因。在EHEC众多血清型中,O157:H7是与人类疾病相关的最常见血清型,不仅可引起人类腹泻、出血性肠炎(HC),还可引起溶血性尿毒综合征(HUS)和血栓性血小板减少性紫癜(TIP),... 肠出血性大肠杆菌(EHEC)是世界上食源性疾病的重要诱因。在EHEC众多血清型中,O157:H7是与人类疾病相关的最常见血清型,不仅可引起人类腹泻、出血性肠炎(HC),还可引起溶血性尿毒综合征(HUS)和血栓性血小板减少性紫癜(TIP),甚至死亡。牛、羊、猪、野生鸟类等是EHEC的天然宿主。 展开更多
关键词 大肠杆菌0157 SDS-PAGE分析 外膜蛋白 肠出血性 出血性大肠杆菌 O157:H7 EHEC 人类疾病
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利用RNAi技术培育家蚕核型多角体病毒抗性品种的研究进展 预览 被引量:2
15
作者 李娜 成传刚 +3 位作者 田甜 吕军 张军 潘敏慧 《蚕学通讯》 2009年第4期 29-34,共6页
家蚕核型多角体病毒属于杆状病毒科,包涵体亚科,它引起的家蚕核型多角体病是蚕业生产上的主要病害,培育家蚕核型多角体病毒抗性品种是防治该病的有效措施,而RNAi技术为家蚕核型多角体病毒抗性品种的培育提供了新的方法。本文综述了... 家蚕核型多角体病毒属于杆状病毒科,包涵体亚科,它引起的家蚕核型多角体病是蚕业生产上的主要病害,培育家蚕核型多角体病毒抗性品种是防治该病的有效措施,而RNAi技术为家蚕核型多角体病毒抗性品种的培育提供了新的方法。本文综述了近年来利用RNAi技术培育家蚕核型多角体病毒抗性品种的研究进展。 展开更多
关键词 家蚕 家蚕核型多角体病毒 RNAI 抗性品种
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家蚕核型多角体病毒几丁质酶基因 预览 被引量:4
16
作者 贡成良 薛仁宇 +2 位作者 曹广力 石晓燕 马志明 《蚕业科学》 CAS CSCD 2001年第4期 283-286,共4页
序列分析表明:家蚕核型多角体病毒苏州株(BmNPVsu)编码的ChiA基因的ORF为1656个核苷酸,编码551个氨基酸.同源性分析表明:杆状病毒编码的ChiA基因在DNA水平上、氨基酸水平上都具有较好的同源性,与灵菌的ChiA在氨基酸水平上的同源性达47.8... 序列分析表明:家蚕核型多角体病毒苏州株(BmNPVsu)编码的ChiA基因的ORF为1656个核苷酸,编码551个氨基酸.同源性分析表明:杆状病毒编码的ChiA基因在DNA水平上、氨基酸水平上都具有较好的同源性,与灵菌的ChiA在氨基酸水平上的同源性达47.8%~58.5%,推测杆状病毒编码的ChiA基因由细菌通过基因的水平转移而来在杆状病毒ChiA的系统树中,舞毒蛾核型多角体病毒(LdNPV)为一单独分枝,处于进化树的最根部,其余可分2组,其中棉铃虫核型多角体病毒(HaNPV)ChiA、谷实夜蛾核型多角体病毒(HzNPV)ChiA为一组,其它杆状病毒的ChiA构成了第二组. 展开更多
关键词 家蚕 核型多角体病毒 几丁质酶基因 基因序列 同源性分析 分子进化
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家蚕核型多角体病毒碱性磷酸酶基因(alk-exo)与杆状病毒的分子进化分析 预览 被引量:3
17
作者 王崇龙 薛仁宇 +2 位作者 曹广力 沈卫德 贡成良 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期 199-205,共7页
基于为杆状病毒分类提供新的依据,克隆了家蚕核型多角体病毒苏州株(BmNPV,SU)碱性核酸酶基因(alk-exo)及其侧翼区,并进行序列和进化分析。BLAST检索显示,BmNPV-SU alk-exo上游的部分ORF109序列仅在AcNPV、RoNPV中检索到同源序... 基于为杆状病毒分类提供新的依据,克隆了家蚕核型多角体病毒苏州株(BmNPV,SU)碱性核酸酶基因(alk-exo)及其侧翼区,并进行序列和进化分析。BLAST检索显示,BmNPV-SU alk-exo上游的部分ORF109序列仅在AcNPV、RoNPV中检索到同源序列;下游区域在AcNPV、RoNPV、SINPV的基因组中检索到同源序列。序列分析表明,BmNPV-SU的alk-exo基因编码420个氨基酸残基,下游区域存在2个正向的重复。比对结果分析显示。在22种杆状病毒中,alk-exo基因间核苷酸序列和氨基酸序列的同源性不高,变异较大。同时,利用MEGA软件包中的UMEGA算法建立了基于alk-exo基因的分子进化系统树,表明通过杆状病毒的进化可以反映宿主昆虫的进化.杆状病毒与其宿主昆虫之间存在共进化关系。 展开更多
关键词 杆状病毒 家蚕核型多角体病毒 碱性磷酸酶基因 序列分析 共进化
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家蚕核型多角体病毒orf90基因在Bac-to-Bac家蚕杆状病毒系统中快速表达 预览
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作者 王强 陈克平 +3 位作者 郭忠建 姚勤 王海燕 陈慧卿 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期3286-3291,共6页
【目的】利用BmNPV的Bac-to-Bac系统快速表达目的基因orf90,为深入研究该基因打下基础。【方法】将目的基因BmNPV orf90 克隆到转移载体pFasBacHTb上,并将报告基因egfp插入到orf90的3'末端,形成重组转移载体pFasBacHTb-egfp-90。在... 【目的】利用BmNPV的Bac-to-Bac系统快速表达目的基因orf90,为深入研究该基因打下基础。【方法】将目的基因BmNPV orf90 克隆到转移载体pFasBacHTb上,并将报告基因egfp插入到orf90的3'末端,形成重组转移载体pFasBacHTb-egfp-90。在将其转化到含穿梭载体bacmid的感受态细胞DH10Bac中,通过转座作用,经白斑筛选得到重组穿梭载体。纯化DNA,用脂质体介导转染家蚕BmN细胞,得到重组病毒bacmid-egfp-90。【结果】转染细胞72 h后在荧光显微镜下可以观察到强烈的绿色荧光。重组病毒穿刺接种家蚕蛹,5 d后观察到很强的荧光。结果表明构建的Bac-to-Bac系统能在家蚕细胞和蛹体中正确的快速表达外源基因。【结论】证明BmNPV的Bac-to-Bac是一个快速表达系统,适合在家蚕上广泛应用。 展开更多
关键词 BMNPV Bac-to-Bac表达系统 orf90 EGFP基因
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dsRNA对家蚕核型多角体病毒复制增殖的抑制效果 预览 被引量:11
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作者 夏定国 张国政 +5 位作者 王文兵 赵巧玲 沈兴家 唐顺明 张业顺 韦亚东 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期 206-210,共5页
以家蚕核型多角体病毒(BmNPV)复制必需的极早期基因ie-1和细胞释放型病毒CRV入侵关键基因gp64为靶序列,分别人工设计并体外转录出dsRNA I1(438bp)和dsRNA G1(337bp),用家蚕培养细胞BmN研究目标dsRNA对BmNPV复制、增殖的抑制效... 以家蚕核型多角体病毒(BmNPV)复制必需的极早期基因ie-1和细胞释放型病毒CRV入侵关键基因gp64为靶序列,分别人工设计并体外转录出dsRNA I1(438bp)和dsRNA G1(337bp),用家蚕培养细胞BmN研究目标dsRNA对BmNPV复制、增殖的抑制效果。结果表明:dsRNA I1能有效地抑制BmNPV在BmN细胞中的增殖,最大抑制效果使培养液中的病毒滴度(TCID50)比对照降低了10^4.30倍;dsRNA G1能显著地抑制新形成的病毒粒子的细胞侵染能力,最高可使培养液中的病毒滴度降低10^3.17倍。 展开更多
关键词 双链RNA RNA干扰 家蚕核型多角体病毒 复制 增殖
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家蚕抗BmNPV品系与感性品系血淋巴液蛋白质组的差异分析 预览 被引量:11
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作者 蔡克亚 陈克平 +2 位作者 刘晓勇 姚勤 李军 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期 285-290,共6页
利用遗传学的原理,通过杂交和回交的方法,建立家蚕抗BmNPV、感BmNPV以及近等基因系模型,利用2-D电泳和MALDI TOF/TOFMS质谱技术,从蛋白质组水平上研究家蚕对BmNPV抵抗性。其结果是获得家蚕高抗NB,高感306,近等基因系BC8五龄起蚕... 利用遗传学的原理,通过杂交和回交的方法,建立家蚕抗BmNPV、感BmNPV以及近等基因系模型,利用2-D电泳和MALDI TOF/TOFMS质谱技术,从蛋白质组水平上研究家蚕对BmNPV抵抗性。其结果是获得家蚕高抗NB,高感306,近等基因系BC8五龄起蚕血淋巴液蛋白质差异表达谱,分别获得180、190、187个蛋白点,其中80%的蛋白点集中在等电点5-9范围之内。从三块凝胶上共获得明显差异蛋白点12个,由质谱鉴定出5种蛋白,其中氨基酰化酶(Aminoacylase)仅出现在抗性品系NB、近等基因系图谱中,感性品系没有出现,初步推测是家蚕抗BmNPV特有蛋白,这是首次报道结果。 展开更多
关键词 2-D电泳 MALDI TOF/TOF MS 蛋白质组 抗核型多角体病毒 家蚕
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