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B7基因转染联合LAK细胞治疗肝癌的体外研究 预览 被引量:1
1
作者 王权 李有柱 所剑 《吉林大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期 253-255,共3页
目的:探讨体外诱导的LAK细胞对B7基因转染的肝癌细胞的杀伤作用。方法:构建含人B7-1基因cDNA的真核表达载体pRCCMV—B7-1脂质体介导转染法将pRCCMV—B7-1转入人肝癌细胞系SMMC7721,G418筛选转染肝癌细胞(B7^+SMMC7721)。RT-PCR、流... 目的:探讨体外诱导的LAK细胞对B7基因转染的肝癌细胞的杀伤作用。方法:构建含人B7-1基因cDNA的真核表达载体pRCCMV—B7-1脂质体介导转染法将pRCCMV—B7-1转入人肝癌细胞系SMMC7721,G418筛选转染肝癌细胞(B7^+SMMC7721)。RT-PCR、流式细胞仪鉴定目的基因表达。MTT比色试验体外检测LAK细胞对B7-1转染肝癌细胞的杀伤活性。结果:B7^+SMMC7721细胞稳定表达B7基因。LAK细胞对B7^+SMMC7721细胞的杀伤活性明显高于野生型SMMC7721者,结果有统计学意义。结论:B7基因体外转染人肝癌细胞后可表达有活性的B7分子,LAK细胞对表达B7-1的肿瘤呈现增强的杀伤作用。 展开更多
关键词 肝细胞 基因 转染 共刺激分子
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HIV-1囊膜糖蛋白gp41三聚体结构域基因的表达及其单克隆抗体的制备 预览 被引量:1
2
作者 陈峥 徐志凯 +2 位作者 黄庆生 黎志东 姜世勃 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期 487-489,共3页
目的:表达HIV-1囊膜糖蛋白gp41三聚体结构域基因N51(L6)C46融合蛋白,并制备针对该融合蛋白的单克隆抗体(mAb),为筛选抗HIV多肽及分析gp41表位的免疫原提供抗体工具.方法:在BL21(DE3)中诱导表达N51(L6)C46融合蛋白,经mAb NC-1鉴定后,采... 目的:表达HIV-1囊膜糖蛋白gp41三聚体结构域基因N51(L6)C46融合蛋白,并制备针对该融合蛋白的单克隆抗体(mAb),为筛选抗HIV多肽及分析gp41表位的免疫原提供抗体工具.方法:在BL21(DE3)中诱导表达N51(L6)C46融合蛋白,经mAb NC-1鉴定后,采用小鼠腹股沟皮下NC膜免疫的方法免疫小鼠,并进行细胞融合、克隆化制备抗N51(L6)C46 mAb,用ELISA法初步鉴定其特异性位点.结果:获得了高表达的N51(L6)C46融合蛋白,并能与识别特异性空间构象的mAb NC-1反应.用该融合蛋白免疫小鼠后,获得了6株抗N51(L6)C46的mAb,这6株mAb均特异识别兔抗N36(L6)C34抗体捕获的融合蛋白,但不与N36或C34多肽片段反应.结论:得到高效表达融合蛋白N51(L6)C46,并呈现gp41核心结构空间构象.用此蛋白免疫小鼠得到6株特异结合gp41核心结构空间构象的单抗. 展开更多
关键词 HIV-1 GP41 原核表达 单克隆抗体
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HepG2人肝癌细胞胰岛素样生长因子1受体定量分析 预览 被引量:5
3
作者 罗朝学 程绍钧 李前伟 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期 206-208,共3页
目的对人肝癌HepG2细胞上的胰岛素样生长因子1受体(type 1 receptor of insulin-like growth factor, IGF1R)进行定量分析.方法常规培养HepG2细胞,以Iodogen法 131I标记抗IGF1R单克隆抗体1H7,Sephadex G-50纯化标记反应液, 131I-1H7和... 目的对人肝癌HepG2细胞上的胰岛素样生长因子1受体(type 1 receptor of insulin-like growth factor, IGF1R)进行定量分析.方法常规培养HepG2细胞,以Iodogen法 131I标记抗IGF1R单克隆抗体1H7,Sephadex G-50纯化标记反应液, 131I-1H7和非标记1H7与HepG2细胞表面的IGF1R竞争结合,Scatchard法分析HepG2细胞上IGF1R的平均表达量.结果每孔HepG2细胞(2.0×105)表面IGF1R的Bmax为6.746×10-12 mol/L,平均单个HepG2细胞IGF1R的密度为2.03×104/细胞.结论本实验条件下制备的 131I -1H7满足作为IGF1R特异性配体的要求,碘标记1H7对其与IGF1R结合活性无明显影响,HepG2细胞表达高密度与高亲和力的IGF1R. 展开更多
关键词 HEPG-2细胞 IGF1R 定量分析
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人体对单克隆抗体的免疫应答 预览
4
作者 周琪 《国外医学:预防.诊断.治疗用生物制品分册》 1994年第5期 208-212,共5页
无论是鼠、鼠/人嵌合型还是人源单克隆抗体(Mc-Ab)都已在人体试验中安全地使用了十年,在运用其内源性抗肿瘤免疫学活性和将各种细胞毒制剂导向癌症方面进行了大量研究。这些研究阐明了这些制剂能常规用于病人之前需要解决的几... 无论是鼠、鼠/人嵌合型还是人源单克隆抗体(Mc-Ab)都已在人体试验中安全地使用了十年,在运用其内源性抗肿瘤免疫学活性和将各种细胞毒制剂导向癌症方面进行了大量研究。这些研究阐明了这些制剂能常规用于病人之前需要解决的几个问题。其中这一就是这些McAb的免疫原性,本文讨论了人体对McAb的免疫应答及其临床后果。 展开更多
关键词 单克隆抗体 免疫应答 免疫力 免疫球蛋白
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口服转移因子转移抗原依赖性皮肤迟发型超敏反应的实验研究 预览 被引量:1
5
作者 姜训 赵革平 《中国实验临床免疫学杂志》 1994年第1期 7-9,共3页
本研究证明,口服乙肝特异性猪脾转移因子可诱导实验小鼠对乙肝疫苗的皮肤迟发型超敏反应(A组),与口服生理盐水的对照组(C组)相比较,有非常显著性差异,而口服正常猪脾转移因子的实验小鼠(B组),也可产生对乙肝疫苗的皮肤迟... 本研究证明,口服乙肝特异性猪脾转移因子可诱导实验小鼠对乙肝疫苗的皮肤迟发型超敏反应(A组),与口服生理盐水的对照组(C组)相比较,有非常显著性差异,而口服正常猪脾转移因子的实验小鼠(B组),也可产生对乙肝疫苗的皮肤迟发型超敏反应,但其程度不及A组动物明显(A-B组间P<0.001),从而表明转移因子也可通过口途途径转移抗原依赖特性异效应。 展开更多
关键词 皮肢迟发型 超敏反应 转移因子
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白细胞介素13 预览
6
作者 黄越承 陶群 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第2期 132-134,共3页
白细胞介素13是最近发现的由Th2细胞产生的细胞因子。其对B细胞调节作用与白细胞介素4相似,另外它也具有Th1细胞的功能,是一种多功能活性的细胞因子。本文对其生物学功能和分子生物学性质作一简单介绍。
关键词 免疫学 白细胞介素13
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手术与白细胞介素1 预览
7
作者 胡智勇 《国外医学:麻醉学与复苏分册》 北大核心 1995年第2期 66-68,共3页
手术创伤、感染、可使IL-1含量增加,其机理主要是应激性内分泌反应。IL-1与神经内分泌之间有着相互调节作用。
关键词 HPA轴 外科手术 白细胞介素1
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IgE与其高亲和力受体结合反应的研究及应用进展 预览
8
作者 李小刚 《国外医学:预防.诊断.治疗用生物制品分册》 1995年第3期 117-120,共4页
IgE分子与其高亲和力受体的结合反应在Ⅰ型变态反应中起着关键的介导作用。近年来,采用重组DNA,合成肽及单克隆抗体等技术对IgE分子的受体结合位点进行了较为说细的研究。
关键词 免疫球蛋白E 高亲和力受体 分子生物学
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酵母三杂交系统研究进展 预览
9
作者 杜建芳 徐东刚 王嘉玺 《医学研究通讯》 2005年第12期 62-64,共3页
许多生物过程是通过大分子如蛋白-蛋白,核酸-蛋白的相互作用来实现的,对这些大分子间的相互作用的研究有助于揭示生命过程的分子作用机制.酵母双杂交系统是研究蛋白间相互作用的有用工具,随着该系统的广泛应用,在此基础上发展了三杂交系... 许多生物过程是通过大分子如蛋白-蛋白,核酸-蛋白的相互作用来实现的,对这些大分子间的相互作用的研究有助于揭示生命过程的分子作用机制.酵母双杂交系统是研究蛋白间相互作用的有用工具,随着该系统的广泛应用,在此基础上发展了三杂交系统,研究包括三种成分在内的更为复杂的大分子相互作用,为蛋白-蛋白、RNA-蛋白和小分子-蛋白相互作用的研究提供了新的手段. 展开更多
关键词 酵母双杂交系统 系统研究 蛋白相互作用 分子作用机制 生命过程 大分子 分子间 小分子 三杂交系统
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一种新的整合素αⅡbPro126His突变导致的遗传性血小板无力症 预览 被引量:3
10
作者 沈卫章 李淑梅 +3 位作者 姜玉珍 王学锋 丁秋兰 王鸿利 《诊断学理论与实践》 2005年第6期 451-454,461,共5页
目的:对1例遗传性血小板无力症(GT)先证者及其家系成员进行表型和基因诊断,并探讨其分子发病机制.方法:通过血小板计数、血涂片观察血小板、出血时间测定、凝血象检查和血小板聚集试验进行表型诊断;流式细胞术检测血小板表面αⅡb和β3... 目的:对1例遗传性血小板无力症(GT)先证者及其家系成员进行表型和基因诊断,并探讨其分子发病机制.方法:通过血小板计数、血涂片观察血小板、出血时间测定、凝血象检查和血小板聚集试验进行表型诊断;流式细胞术检测血小板表面αⅡb和β3的含量;PCR法扩增先证者基因组DNAαⅡb和β3的所有外显子及其侧翼序列;PCR产物采用末端标记双脱氧法进行直接基因测序,对发现的突变位点采用AS-PCR法扩增先证者及其家系成员和正常人相对应的片段.结果:先证者血小板计数正常、血涂片血小板分散不聚集,出血时间明显延长,凝血象正常,对ADP、凝血酶、肾上腺素、胶原、花生四烯酸等多种诱聚剂反应低下,而对瑞斯托霉素的反应基本正常;先证者血小板表面未检测到αⅡb,β3阳性血小板仅占8%,平均荧光强度明显减弱;先证者在αⅡb基因外显子4存在C470A纯合突变,导致αⅡb氨基酸序列Pro126His(P126H)替换.父母为近亲婚配,均为该位点的杂合突变.AS-PCR排除了该突变为基因多态性的可能.结论:整合素αⅡb基因外显子4C470A(P126H)纯合错义突变是导致该患者GT的分子机制,是国际上首次报道的一种新的整合素αⅡb基因错义突变. 展开更多
关键词 血小板无力症 整合素αⅡbβ3 流式细胞术 突变 核酸测序
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高群体反应性抗体患者致敏因素分析 预览 被引量:5
11
作者 张爱民 李香铁 +4 位作者 李慎勤 徐友和 刘少鸽 刘仰东 王绪雷 《临床泌尿外科杂志》 2006年第3期 183-185,共3页
目的:对群体反应性抗体(PRA)增高的原因进行分析。方法:316例肾移植患者接受PRA检测。首先采用LATM检查,阳性患者再采用LAT方法进行检测,对高PRA患者的成因采用多因素分析。同时尝试用检测IgGl的方法替代检测IgG的方法来改良传统... 目的:对群体反应性抗体(PRA)增高的原因进行分析。方法:316例肾移植患者接受PRA检测。首先采用LATM检查,阳性患者再采用LAT方法进行检测,对高PRA患者的成因采用多因素分析。同时尝试用检测IgGl的方法替代检测IgG的方法来改良传统PRA的检测。结果:高PRA患者共有78例,PRA水平自10%~90%不等。男、女致敏率分别为18%和38.1%,差异有统计学意义(P〈0.05);透析时间1年以上和1年以下的致敏率分别为22.7%和21.8%,两者差异无统计学意义(P〉0.05);输血者和无输血者致敏率分别为43%和21%,两者差异有统计学意义(P〈0.05);妊娠者和无妊娠者的致敏率分别为37.6%和7.8%,有移植史者和无移植史者的致敏率分别为78.7%和20.3%,两者差异均有统计学意义(P〈0.01)。同时有移植史和输血史患者的致敏率高达91.4%,并有输血和妊娠的女性患者致敏率为74%。PRA的抗体频率分布与HLA抗原频率分布并不一致。HLA抗原出现频率较高的有A2、A11、A24、、B60、B5l、DRl5、DR4等,而PRA的抗体出现频率较高的为A24、A19、A2、B13、B46、B40、DR9等。结论:移植史、输血史、妊娠史及性别是致敏因素,这些致敏因素有协同作用,可提高致敏率。某些HLA抗原更易使机体产生抗体。 展开更多
关键词 群体反应性抗体 肾移植
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大鼠脑外伤后P-selectin表达的变化及意义 预览 被引量:5
12
作者 张荣军 游潮 +4 位作者 蔡博文 贺民 杨咏波 刘展 焦庆芳 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期 348-351,共4页
目的 探讨大鼠脑外伤后P-selectin的表达变化及其与脑水肿等继发性脑损伤的关系。方法 采用Feeney大鼠脑损伤动物模型,将60只Sprague-Dawley大鼠随机分为3组:A(标准对照组),B(轻伤组)、C组(重伤组),每组20只。分别于脑外伤后6... 目的 探讨大鼠脑外伤后P-selectin的表达变化及其与脑水肿等继发性脑损伤的关系。方法 采用Feeney大鼠脑损伤动物模型,将60只Sprague-Dawley大鼠随机分为3组:A(标准对照组),B(轻伤组)、C组(重伤组),每组20只。分别于脑外伤后6h、24h、3d、7d随机各取标本5只,测量脑水肿程度以及P-selectin在脑组织的表达变化以及免疫阳性染色血管,并进行计算机图像分析系统和统计学分析。结果 外伤后6h P-selectin的表达及粒细胞在脑组织的浸润显著升高(P〈0.05),于伤后24h达到高峰,然后逐渐降低。结论 脑外伤后P-selectin的表达及粒细胞在脑组织的浸润显著升高,其时程和空间分布与脑外伤后继发性损伤相吻合。提示P-selectin的表达增加可能参与了脑外伤后的继发性损伤。 展开更多
关键词 脑损伤 细胞粘附分子 中性粒细胞 血管内皮细胞
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首次发现慢性疲劳综合征可能与人的基因有关 预览
13
《传染病网络动态》 2006年第6期 16,共1页
据医业网5月10日报道,慢性疲劳综合征可能与人的基因结构有关,当这种结构在处理身体和心理紧张状态方面的能力降低时便会产生这种疾病。
关键词 慢性疲劳综合征 基因结构 首次发现 紧张状态
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金雀异黄素抗癌作用分子机制研究进展 预览 被引量:11
14
作者 朱松柏 吕永曼 《华中医学杂志》 CAS 2006年第3期 253-254,共2页
  金雀异黄素又称5、7、4'-三羟异黄酮或染料木素,是大豆异黄酮的主要活性成分,为一种天然的植物雌激素.体内体外实验及流行病学均显示,金雀异黄素对多种肿瘤均有抑制作用,如乳腺癌、前列腺癌、肾癌、胃癌、结直肠癌、膀胱癌、肺癌...   金雀异黄素又称5、7、4'-三羟异黄酮或染料木素,是大豆异黄酮的主要活性成分,为一种天然的植物雌激素.体内体外实验及流行病学均显示,金雀异黄素对多种肿瘤均有抑制作用,如乳腺癌、前列腺癌、肾癌、胃癌、结直肠癌、膀胱癌、肺癌、子宫癌、皮肤癌、白血病、淋巴瘤、神经母细胞瘤以及头颈癌等. 展开更多
关键词 金雀异黄素 机制研究 抗癌作用 分子 神经母细胞瘤 三羟异黄酮 大豆异黄酮 植物雌激素 染料木素 活性成分
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p27、Survivin在乳腺癌中的表达及相关性 预览 被引量:3
15
作者 张静 刘存 《新疆医科大学学报》 CAS 2006年第6期 477-479,482,共4页
目的:探讨p27、Survivin在乳腺癌中表达的意义及相关性。方法:用免疫组化S-P法检测48例乳腺癌中p27、Survivin的表达情况,并与29例乳腺良性病变检测结果进行对照分析。结果:(1)乳腺良性病变p27、Sur-vivin的阳性率分别是79.3%... 目的:探讨p27、Survivin在乳腺癌中表达的意义及相关性。方法:用免疫组化S-P法检测48例乳腺癌中p27、Survivin的表达情况,并与29例乳腺良性病变检测结果进行对照分析。结果:(1)乳腺良性病变p27、Sur-vivin的阳性率分别是79.3%(23/29)、24.1%(7/29);乳腺癌p27、Survivin的阳性率分别是42%(20/48)、72.9%(35/48)。p27、Survivin的阳性表达率在乳腺良、恶性病变中差异具有统计学意义(P〈0.01)。(2)乳腺癌p27与Survivin的表达呈负相关(P〈0.05)。(3)乳腺癌p27的表达与患者的年龄、族别无关(P〉0.05).与乳腺癌组织学分级相关(P〈0.01);Survivin的表达与患者的年龄、族别、乳腺癌的组织学分级均无关(P〉0.05)。结论:p27、Survivin表达异常可能在乳腺癌的发生、发展中具有重要的作用,二者在乳腺癌的发生、发展中可能具有相互作用。p27、Survivin表达异常可用于良、恶性乳腺疾病的鉴别.对乳腺良性病变的恶性转化有一定的预兆性。 展开更多
关键词 乳腺癌 P27 Survivin免疫组化
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壳聚糖载黄芪多糖纳米粒调节糖尿病小鼠免疫功能 预览
16
作者 董德刚 吴亚芬 +1 位作者 裘梁 喻治达 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1825-1828,1834共5页
研究低分散度壳聚糖载黄芪多糖纳米粒(LCA)对糖尿病(DM)小鼠免疫功能的影响。注射链脲佐菌素与环磷酰胺混合试剂建立DM合并免疫力低下小鼠模型,酶法制备低分散度壳聚糖,离子交联法制备低分散度壳聚糖纳米粒,超声包埋黄芪多糖制备药... 研究低分散度壳聚糖载黄芪多糖纳米粒(LCA)对糖尿病(DM)小鼠免疫功能的影响。注射链脲佐菌素与环磷酰胺混合试剂建立DM合并免疫力低下小鼠模型,酶法制备低分散度壳聚糖,离子交联法制备低分散度壳聚糖纳米粒,超声包埋黄芪多糖制备药物对昆明小鼠灌胃,每天1次,连续30 d。ELISA法检测小鼠血清Ig M、Ig G与INF-γ的含量,碳粒廓清法测定非特异性免疫功能,耳肿胀法检测迟发型变态反应,MTT法检测脾淋巴细胞增殖率以反映细胞免疫功能。结果显示灌胃350 mg/(kg·d)LCA显著提高血清Ig M、Ig G的分泌,显著降低INF-γ表达量,增强碳粒廓清率,提高小鼠迟发型变态反应(DTH),改善脾淋巴细胞增殖反应。适当剂量的低分散度壳聚糖载黄芪多糖纳米粒能提高DM小鼠体液免疫、非特异性免疫及细胞免疫功能,且效果优于纯黄芪多糖。 展开更多
关键词 壳聚糖 黄芪多糖 纳米粒 DM小鼠 免疫功能
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Th-17/IL-17在气道炎症疾病中的研究进展 被引量:6
17
作者 邵丽 许启霞 《国际呼吸杂志》 2015年第4期296-299,共4页
辅助性T细胞简称Th细胞,其中Th1/Th2失衡被认为是气道炎症性疾病发生、发展的重要因素。但近年来发现,Th17是一种不同于Th1、Th2新的Th细胞亚群,具有独立的分化和发育调节机制,其分化不依赖于传统的Th1、Th2细胞亚群分化的细胞因... 辅助性T细胞简称Th细胞,其中Th1/Th2失衡被认为是气道炎症性疾病发生、发展的重要因素。但近年来发现,Th17是一种不同于Th1、Th2新的Th细胞亚群,具有独立的分化和发育调节机制,其分化不依赖于传统的Th1、Th2细胞亚群分化的细胞因子及其转录因子。目前研究发现Th17细胞与IL-17在呼吸系统疾病的发生、发展中起着重要的作用。本文对Th17细胞及IL-17在气道炎症疾病中的作用进行综述。 展开更多
关键词 辅助性T17细胞 白介素17 哮喘 慢性阻塞性肺疾病 肺炎
人羊膜间充质干细胞抑制异体淋巴细胞增殖并减少γ干扰素的分泌 被引量:1
18
作者 宋瑾 丛姗 +2 位作者 李岩 白立恒 曹贵方 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期333-337,共5页
目的 观察人羊膜间充质干细胞(hAMSC)对体外培养的淋巴细胞功能的影响。方法 通过酶消化法分离培养hAMSC, 采用荧光团标记的小鼠抗人单克隆抗体结合流式细胞术鉴定细胞表面抗原; 免疫荧光染色检测培养细胞波形蛋白(vimentin)和阶段... 目的 观察人羊膜间充质干细胞(hAMSC)对体外培养的淋巴细胞功能的影响。方法 通过酶消化法分离培养hAMSC, 采用荧光团标记的小鼠抗人单克隆抗体结合流式细胞术鉴定细胞表面抗原; 免疫荧光染色检测培养细胞波形蛋白(vimentin)和阶段特异表达抗原4(SSEA-4)的表达; 分离培养hAMSC和外周血单个核细胞(PBMC), 将刀豆蛋白(ConA)刺激的淋巴细胞与1×10^4、5×10^4、1×10^5个hAMSC进行共培养。CCK-8法测定淋巴细胞增殖, ELISA测定细胞上清液中 IFN-γ的水平。结果 5 μg/mL ConA能够引起淋巴细胞增殖; 共培养条件下, hAMSC能够抑制ConA引起的淋巴细胞增殖, 且随着hAMSC的数量增加, 抑制效果更明显。培养72 h后, CCK-8法结果表明, 单纯ConA刺激后淋巴细胞数显著高于共培养细胞。选择抑制效果最佳的组别1×10^6个淋巴细胞与1×10^5个hAMSC共培养, ELISA测定1×10^5个hAMSC 对淋巴细胞抑制72 h后, 上清液中IFN-γ分泌, 共培养细胞上清液中IFN-γ水平显著低于单纯ConA刺激细胞。结论 hAMSC能在体外抑制ConA引起的淋巴细胞增殖并减少IFN-γ分泌。 展开更多
关键词 人羊膜间充质干细胞 淋巴细胞 干扰素-Γ 免疫抑制
PD-1抗体Nivolumab有望治疗卵巢癌 预览
19
《中国妇幼健康研究》 2015年第6期1236-1236,共1页
日本京都大学研究发现PD-1抗体Nivolumab在卵巢癌治疗中的潜力。Nivolumab已经在多种恶性肿瘤中显示出疗效,包括黑色素瘤、肾癌和非小细胞肺癌。卵巢癌是全世界女性第七最常见的癌症,有超过70%的复发率。复发的卵巢癌对化疗有抗药性... 日本京都大学研究发现PD-1抗体Nivolumab在卵巢癌治疗中的潜力。Nivolumab已经在多种恶性肿瘤中显示出疗效,包括黑色素瘤、肾癌和非小细胞肺癌。卵巢癌是全世界女性第七最常见的癌症,有超过70%的复发率。复发的卵巢癌对化疗有抗药性,非常难以治疗。据主要作者Junzo Hamanishi介绍,他们以前的研究发现具有高表达的PD-1配体PD—L1的患者有更坏的疾病结果。 展开更多
关键词 PD-1 卵巢癌 治疗 抗体 日本京都大学 非小细胞肺癌 恶性肿瘤 黑色素瘤
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过表达DKK1、Sost重组腺病毒载体的构建及其对MG63细胞和相关蛋白的影响 被引量:11
20
作者 万雷 黄宏兴 +4 位作者 黄红 柴生颋 魏合伟 张志海 王吉利 《广州中医药大学学报》 CAS 2016年第4期578-584,共7页
【目的】针对Wnt信号通路抑制因子Dickkopf(DKK)1、骨硬化蛋白Sclerostin(Sost)基因构建过表达重组腺病毒载体,观察其对MG63细胞和相关蛋白的影响。【方法】构建DKK1、Sost过表达重组腺病毒载体,将培养好的MG63细胞分为空白对照组... 【目的】针对Wnt信号通路抑制因子Dickkopf(DKK)1、骨硬化蛋白Sclerostin(Sost)基因构建过表达重组腺病毒载体,观察其对MG63细胞和相关蛋白的影响。【方法】构建DKK1、Sost过表达重组腺病毒载体,将培养好的MG63细胞分为空白对照组、空载病毒组(NC对照组)、过表达DKK1组、过表达Sost组、过表达DKK1+Sost组5组,根据组别不同分别用上述过表达重组腺病毒感染MG63细胞,观察细胞增殖、碱性磷酸酶(ALP)活性、钙离子浓度和骨调节蛋白表达情况。【结果】与空白对照组比较,过表达DKK1组、过表达Sost组、过表达DKK1+Sost组的细胞光密度值、ALP活性值均显著降低,而钙离子浓度显著升高,以过表达DKK1+Sost组变化最明显(P〈0.01)。与空白对照组比较,过表达DKK1组、过表达Sost组、过表达DKK1+Sost组的骨保护蛋白(OPG)、低密度脂蛋白受体相关蛋白(Lrp)5、骨形态发生蛋白(BMP)2、结缔组织生长因子(CTGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)2、骨桥蛋白(OPN)表达量均降低,而肿瘤坏死因子(TNF)-α表达量则升高,以过表达DKK1+Sost组变化最明显,组间比较差异均有统计学意义(P〈0.05或P〈0.01)。【结论】过表达DKK1、Sost可降低MG63细胞增殖和ALP活性,升高钙离子浓度,对骨调节蛋白有一定影响,尤以两者同时过表达时的作用最强。 展开更多
关键词 DKK1 SOST 过表达基因 腺病毒 MG63细胞 细胞培养
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