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水稻细菌性条斑病原菌室内快速分离与鉴定方法 被引量:4
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作者 谢仕猛 花龙 +3 位作者 向贤 翟文学 夏志辉 《分子植物育种》 CSCD 北大核心 2017年第5期1927-1932,共6页
本研究以海南海口罗牛山基地、屯昌水稻品种区试基地采集的感染细菌性条斑病(细条病)的水稻叶片为研究对象,探索细条病菌室内分离、鉴定与致病性测定方法。结果表明,70%酒精消毒1 min,10^4-10^5稀释倍数,培养3 d是有效分离细条病菌的... 本研究以海南海口罗牛山基地、屯昌水稻品种区试基地采集的感染细菌性条斑病(细条病)的水稻叶片为研究对象,探索细条病菌室内分离、鉴定与致病性测定方法。结果表明,70%酒精消毒1 min,10^4-10^5稀释倍数,培养3 d是有效分离细条病菌的优化因素;随机挑取的12个单克隆菌株经分子鉴定及致病性鉴定均为细菌性条斑病菌,且16S rDNA PCR产物测序序列与细条病菌模式菌株RS105一致性为100%。在所有的接种方法中均显示,浸染后保湿培养是影响致病效果的关键因子,在发病率方面,菌液浸泡抽真空、针刺法是最有效的方法,致病率均为100%。本研究结果为细条病菌的室内分离鉴定提供标准方法,有助于抗细条病种质资源的大规模筛选。 展开更多
关键词 水稻 细菌性条斑病 病原分离 致病性鉴定 接种方法
巴西橡胶树WRKY转录因子基因HbWRKY41的克隆与表达分析 预览 被引量:1
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作者 刘辉 +3 位作者 邓治 代龙军 杨洪 李德军 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2017年第5期91-96,共6页
为阐明巴西橡胶树WRKY转录因子基因Hb WRKY41的分子特征及表达特性,利用RT-PCR方法从巴西橡胶树中克隆了该基因。Hb WRKY41开放阅读框1 020 bp,编码339个氨基酸,预测蛋白分子量为38.48 k Da,理论等电点为5.52。Hb WRKY41含有1个WRKY保... 为阐明巴西橡胶树WRKY转录因子基因Hb WRKY41的分子特征及表达特性,利用RT-PCR方法从巴西橡胶树中克隆了该基因。Hb WRKY41开放阅读框1 020 bp,编码339个氨基酸,预测蛋白分子量为38.48 k Da,理论等电点为5.52。Hb WRKY41含有1个WRKY保守结构域和1个C_2HC型锌指结构,与蓖麻、棉花、大豆及拟南芥WRKY41蛋白聚为一类,属于Ⅲ类WRKY转录因子家族成员。实时荧光定量PCR检测结果表明,Hb WRKY41在巴西橡胶树根、树皮、胶乳、叶和花等组织中均有表达,以在衰老叶片中的表达最高,而在胶乳和树皮中的表达相对较低。干旱、低温及高盐胁迫均可上调Hb WRKY41的表达,其中以低温或盐胁迫下Hb WRKY41的表达持续升高。Hb WRKY41可能在巴西橡胶树叶片衰老和非生物胁迫应答中起着重要调控作用。 展开更多
关键词 巴西橡胶树 WRKY转录因子 基因克隆 表达分析 非生物胁迫
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大薯组培苗抗炭疽病接种方法的比较 预览 被引量:1
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作者 吴文嫱 +3 位作者 周鑫 黄小龙 许云 黄东益 《江苏农业科学》 北大核心 2015年第10期174-175,278共3页
炭疽病是大薯生产上最严重的病害,迫切需要可靠的方法来筛选抗病种质。采用薯蓣上分离到的2份炭疽病菌株SY01、DJ01的分生孢子对大薯Da87、Da115的组培苗进行接种,通过对病情指数的比较分析最佳的接种方法。结果表明:大薯Da87、Da115对... 炭疽病是大薯生产上最严重的病害,迫切需要可靠的方法来筛选抗病种质。采用薯蓣上分离到的2份炭疽病菌株SY01、DJ01的分生孢子对大薯Da87、Da115的组培苗进行接种,通过对病情指数的比较分析最佳的接种方法。结果表明:大薯Da87、Da115对炭疽菌的抗性差异极显著,菌株SY01、DJ01之间致病力差异极显著;在筛选的接种方法中,最佳的为使用3×106个/m L孢子浓度的涂抹法。 展开更多
关键词 大薯 炭疽病 接种方法 病情指数 抗病评价
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采用酵母双杂交系统筛选橡胶树HbTCTP1互作蛋白 被引量:1
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作者 邓治 +4 位作者 刘长仁 谢仕猛 向贤 夏志辉 李德军 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期3538-3544,共7页
翻译控制肿瘤蛋白(translationally controlled tumor protein,TCTP)是一种在生物体中普遍存在和结构上高度保守的多功能蛋白。本研究以橡胶树HbTCTP1基因的开放阅读框(open reading frame,ORF)作为诱饵,采用酵母双杂交系统构建... 翻译控制肿瘤蛋白(translationally controlled tumor protein,TCTP)是一种在生物体中普遍存在和结构上高度保守的多功能蛋白。本研究以橡胶树HbTCTP1基因的开放阅读框(open reading frame,ORF)作为诱饵,采用酵母双杂交系统构建筛选HbTCTP1互作蛋白的诱饵表达载体pBD.GALA—HbTCTP1,并在pADGAL4—2.1质粒构建的橡胶树胶乳cDNA文库中筛选HbTCTP1互作蛋白。将获得的两个与HbTCTP1互作的阳性克隆进行测序,比对NCBI非丰富蛋白数据库发现:它们分别是橡胶延长因子(rubber elongation factor,REF)和60S核糖体L44蛋白(60S ribosomal protein L44,RPL44)。本研究结果对进一步揭示HbTCTP1在橡胶树中的作用具有重要意义。 展开更多
关键词 橡胶树 翻译调控肿瘤蛋白(TCTP) 酵母双杂交系统 死皮
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