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深圳市公众药品安全认知度和满意度现状调查与分析 预览
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作者 魏芬芳 冯霄婵 +5 位作者 成斌 肖霄 王茜 毛秋荣 杨悦 《中国药物警戒》 2019年第1期37-42,共6页
目的调查深圳市公众对药品安全的认知度和满意度现状,为药品安全监管提供决策支撑和参考。方法通过网络发放公众认知度和满意度调研问卷,采用Excel建立数据库,SPSS22.0进行统计分析。结果有效问卷1885份,有效率88.83%。本次问卷调查认... 目的调查深圳市公众对药品安全的认知度和满意度现状,为药品安全监管提供决策支撑和参考。方法通过网络发放公众认知度和满意度调研问卷,采用Excel建立数据库,SPSS22.0进行统计分析。结果有效问卷1885份,有效率88.83%。本次问卷调查认知度得分75.1±17.53分,满意度得分76.2±17.01分。经单因素和多因素统计分析,年龄和医学/药学背景对认知度有显著性影响,性别、年龄、职业和所处区域对满意度有显著性影响。结论深圳市公众药品安全认知度和满意度总体较高。其中,需要加强提高青少年和老年人的药品安全认知水平,加强对中药注射剂质量的监管,以及加大对违法广告的打击力度。 展开更多
关键词 药品安全 认知度 满意度 公众 深圳
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中国香港特别行政区与大陆药品不良反应监测体系的比较 预览 被引量:3
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作者 肖霄 +1 位作者 毛秋荣 成斌 《中国药物警戒》 2017年第3期153-157,共5页
目的通过介绍香港药品不良反应(ADR)监测系统的特点,分析对比中国香港特别行政区和大陆ADR监测体系的不同.方法采用实地走访调研座谈、结合文献检索和搜索相关网站信息的方法,了解香港药品监管法规和ADR监测体系.结果香港具有较为精简... 目的通过介绍香港药品不良反应(ADR)监测系统的特点,分析对比中国香港特别行政区和大陆ADR监测体系的不同.方法采用实地走访调研座谈、结合文献检索和搜索相关网站信息的方法,了解香港药品监管法规和ADR监测体系.结果香港具有较为精简的ADR监测组织架构,适合本地的药品监管体系和较为有效的ADR监测信息.结论香港药品监管机制在加强企业责任、严重的ADR信息收集、完善法规制度等方面做法值得参考. 展开更多
关键词 香港 药品不良反应 监测体系
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基于多指标综合评价方法的药品安全指数构建 预览
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作者 魏芬芳 冯霄婵 +5 位作者 毛秋荣 成斌 肖霄 王茜 杨悦 《中国药物警戒》 2017年第9期545-550,共6页
目的 旨在建立药品安全评估指标体系,并构建药品安全指数.方法 采取文献研究、实地调研方式识别和监测药品安全风险来源,建立药品安全指标体系和指数.结果 药品安全指数可对多个地区同一时间段内与药品安全相关的多个评估指标进行综合评... 目的 旨在建立药品安全评估指标体系,并构建药品安全指数.方法 采取文献研究、实地调研方式识别和监测药品安全风险来源,建立药品安全指标体系和指数.结果 药品安全指数可对多个地区同一时间段内与药品安全相关的多个评估指标进行综合评估.结论 根据综合评估结果提出针对性的药品安全风险管理强化的对策和意见,为政府和药品监管机构提供决策支撑和参考. 展开更多
关键词 药品安全 风险评估 指标 指数
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口服盐酸克林霉素棕榈酸酯颗粒致呼吸循环功能障碍1例
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作者 吴斌 谭娟 《今日药学》 CAS 2016年第10期751-752,共2页
1例1岁男性患儿诊断为"急性上呼吸道感染(细菌感染)",收治入院。口服盐酸克林霉素棕榈酸酯颗粒37.5 mg,约100 min后出现全身皮肤灰白,口唇及四肢紫绀、瞳孔对光反射消失等症状,遂予以正压通气、胸外按压、气管插管辅助呼吸、心电监... 1例1岁男性患儿诊断为"急性上呼吸道感染(细菌感染)",收治入院。口服盐酸克林霉素棕榈酸酯颗粒37.5 mg,约100 min后出现全身皮肤灰白,口唇及四肢紫绀、瞳孔对光反射消失等症状,遂予以正压通气、胸外按压、气管插管辅助呼吸、心电监护等辅助治疗,同时快速扩容,并先后给予肾上腺素、洛贝林、阿托品、地塞米松静脉推注,抢救1 h无效而死亡。 展开更多
关键词 盐酸克林霉素棕榈酸酯颗粒 口服 不良反应
4569例抗感染药物不良反应分析 预览
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作者 张明群 吴斌 +2 位作者 左丽 谭娟 《包头医学院学报》 CAS 2016年第4期80-82,共3页
目的:探讨抗感染药物不良反应的临床特征,以有效指导临床合理应用抗菌药物。方法:将本中心2014年1月至2014年12月上报的共4 569例抗感染药物不良反应报告进行回顾性分析。结果:抗感染药物ADR的发生对不同性别无明显影响,在婴幼儿年... 目的:探讨抗感染药物不良反应的临床特征,以有效指导临床合理应用抗菌药物。方法:将本中心2014年1月至2014年12月上报的共4 569例抗感染药物不良反应报告进行回顾性分析。结果:抗感染药物ADR的发生对不同性别无明显影响,在婴幼儿年龄段发生几率最高,多发生于静脉滴注;头孢菌素类药物ADR的发生比例最高,其次是喹诺酮类、其他β-内酰胺类,2014年抗感染药物ADR病例报告中排名第一的是左氧氟沙星-盐酸、第二是头孢曲松钠、第三是头孢孟多酯钠;不良反应报告类型情况:一般的3 509例,新的一般的780例,严重的158例,新的严重的122例;涉及器官系统18个,以皮肤及其附件损害最多见,其次为消化系统损害;2014年抗感染药物不良反应/事件转归中,治愈2 494例,占总数54.59%,好转2 057例,占45.02%,死亡病例5例。结论:临床应重视和加强抗菌药物合理应用及管理,提高抗菌药物运用水平,有效避免不良反应的发生。 展开更多
关键词 抗菌药物 不良反应 分析
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广东省四地区二级以上医院部分医务人员一次性输液器认知度调查 被引量:1
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作者 吴斌 吴建茹 +2 位作者 王宏 邓剑雄 《药物流行病学杂志》 CAS 2016年第2期104-107,共4页
目的:了解广东省医疗机构医务人员使用一次性输液器的认知现状,为一次性输液器安全使用提供参考。方法:自行设计问卷。对广东省四个地区的医疗机构175名医务人员进行调查。结果:参与调查的医务人员对一次性输液器导致不良事件的知晓... 目的:了解广东省医疗机构医务人员使用一次性输液器的认知现状,为一次性输液器安全使用提供参考。方法:自行设计问卷。对广东省四个地区的医疗机构175名医务人员进行调查。结果:参与调查的医务人员对一次性输液器导致不良事件的知晓率为46.29%;对精密输液器和避光输液器的知晓率分别为48.00%和48.29%;对含增塑剂的PVC输液器不能用于新生儿、青春期前男性、怀孕期和哺乳期妇女的知晓率分别为27.43%、12.00%和34.29%。71.43%的医务人员希望在以后的工作中获得一次性输液器相关知识培训。结论:医务人员对一次性输液器的认知情况不容乐观,监管部门应加大一次性输液器相关知识的培训力度,提高医务人员对一次性输液器不良事件监测的认知度,提高监测能力,减少不良事件的发生。 展开更多
关键词 一次性输液器 不良事件 医务人员 认知度
广东省四地市医疗机构参麦注射液不合理用药情况分析 预览 被引量:3
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作者 吴斌 吴建茹 +2 位作者 林宇 张业象 《中国药物警戒》 2016年第4期236-239,共4页
目的通过对广东省四地市基层医疗机构基本药物参麦注射剂的主动监测,获得参麦注射液在日常现实使用操作中的情况后,分析其不合理用药的情况,为提高基层合理用药提供依据和指导。方法采用前瞻性病例系列研究方法对广东省四地市13家医院2 ... 目的通过对广东省四地市基层医疗机构基本药物参麦注射剂的主动监测,获得参麦注射液在日常现实使用操作中的情况后,分析其不合理用药的情况,为提高基层合理用药提供依据和指导。方法采用前瞻性病例系列研究方法对广东省四地市13家医院2 402例使用参麦注射液的患者进行调查和数据分析。结果一级医院不合理用药率(82.64%)高于二级医院不合理用药率(76.45%),且存在统计学分析上的显著差异(χ2=6.66,P=0.0099)。不合理用药主要表现为超适应证用药、溶媒使用不当、浓度过大、合并用药。其中,一级医院超适应证用药为1 565例,占74.21%;二级医院超适应证用药为138例,占47.10%。结论广东省四地市医疗机构参麦注射液不合理用药情况较为严重,应加强对基层医疗机构的合理用药干预及对医生的用药指导。 展开更多
关键词 参麦注射液 不合理用药 统计学分析
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广东省5地区医务人员医疗器械不良事件监测认知度调查 被引量:7
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作者 吴斌 吴建茹 +5 位作者 宋新康 王大源 温润龙 吕春喜 王佳佳 《药物流行病学杂志》 CAS 2015年第2期93-96,共4页
目的:了解广东省医疗机构医务人员对医疗器械不良事件及相关监测工作的认知程度,为深入开展医疗器械不良事件监测奠定基础。方法:采用分层与整群随机抽样相结合的方法,自行设计问卷对1 717名医务人员进行调查。结果:医务人员对医疗... 目的:了解广东省医疗机构医务人员对医疗器械不良事件及相关监测工作的认知程度,为深入开展医疗器械不良事件监测奠定基础。方法:采用分层与整群随机抽样相结合的方法,自行设计问卷对1 717名医务人员进行调查。结果:医务人员对医疗器械不良事件及相关监测工作认知程度较低;不同级别医院医务人员对医疗器械不良事件监测的认知情况存在差异,部分知识点表现为市/省级医院知晓率较高(P〈0.05);医务人员对需报告的医疗器械不良事件认识模糊;参加过培训的医务人员,其不良事件上报率高于未参加培训者(OR=3.459,95%CI:2.430~4.924,P〈0.01)。结论:应加大宣传培训力度,加强宣传培训的覆盖率和针对性,提高医务人员对医疗器械不良事件监测的认知度,提高医疗器械不良事件监测能力,减少医疗器械不良事件发生率。 展开更多
关键词 医疗器械不良事件 监测 医务人员 认知度
一种新型长效重组绒毛膜促性腺激素的表达、活性和药代动力学研究 预览
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作者 黄虎 杨凡 +3 位作者 吴茂柏 张玉杰 侯永敏 《实验动物与比较医学》 CAS 2014年第2期113-119,共7页
目的 构建含有Fc片段的绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,hCG)新型长效重组hCG-Fc融合蛋白,可显著延长其在血液中的半衰期,有利于提高患者用药依从性.方法 首次将Fc DNA片段有序连接到hCG基因3'端,构建hCG-Fc表达载体... 目的 构建含有Fc片段的绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,hCG)新型长效重组hCG-Fc融合蛋白,可显著延长其在血液中的半衰期,有利于提高患者用药依从性.方法 首次将Fc DNA片段有序连接到hCG基因3'端,构建hCG-Fc表达载体并将其稳定表达在哺乳动物细胞,通过无血清悬浮细胞培养和基于亲和层析的蛋白纯化,制备了新型重组hCG-Fc融合蛋白.检测其分子量、ELISA免疫活性和体内生物活性,并测定其在大鼠体内血循环半衰期.结果 重组融合蛋白分子量与理论推断值相当,ELISA活性为2 965 IU/mg,体内生物活性为2 288 IU/mg,消除半衰期为174 h.结论 hCG-Fc融合蛋白构建表达成功,且具有显著的体内外活性,药代动力学分析显示hCG-Fc重组融合蛋白半衰期是重组hCG的近6倍.这种新型长效融合蛋白在临床上可大大减少注射次数,提高患者用药依从性,具有显著的社会和经济效益. 展开更多
关键词 重组绒毛膜促性腺激素(γhCG) FC融合蛋白 长效 药代动力学
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新型长效重组促卵泡素的纯化和性质及药代动力学研究 被引量:1
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作者 杨凡 黄虎 +4 位作者 李屹晨 邓衡露 吴茂柏 侯永敏 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期45-51,共7页
促卵泡素(Follicle-stimulating hormone,FSH)用于治疗男女不孕不育症,由于FSH的半衰期较短,需要频繁注射给药,因此制备长效FSH制剂一直是该类药物的研发方向.首次将来自绒促性素(human chorionic gonadotropin,HCG)中的羧基端肽(c... 促卵泡素(Follicle-stimulating hormone,FSH)用于治疗男女不孕不育症,由于FSH的半衰期较短,需要频繁注射给药,因此制备长效FSH制剂一直是该类药物的研发方向.首次将来自绒促性素(human chorionic gonadotropin,HCG)中的羧基端肽(carboxy-terminal peptide,CTP)和人免疫球蛋白G2(immunoglobulin G2,IgG2)Fc片段变体(vFc)与单链FSH有序连接,通过基因工程和哺乳动物细胞培养技术实现了其在中国仓鼠卵巢细胞中的稳定表达,然后利用Protein A柱层析手段进行纯化,制备了新型重组FSH-CTP-vFc融合蛋白,同时分析了不同细胞培养时间表达的重组融合蛋白的理化性质和体内外活性.动物试验结果表明,纯化的FSH-CTP-vFc融合蛋白具有显著的体内生物活性,药代动力学分析显示该重组融合蛋白的半衰期是重组FSH的近10倍.这种新型长效重组FSH-CTP-vFc融合蛋白在临床上可大大减少注射次数和患者痛苦,提高患者用药依从性. 展开更多
关键词 重组人促卵泡素 长效 vFc融合蛋白 药代动力学
帕金森病基因α-Synuclein过表达对秀丽隐杆线虫毒性作用的研究 预览 被引量:3
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作者 孙亚奇 卢锡林 +7 位作者 苏凤娟 龙思梅 梁凤银 郭文苑 孙喜翠 黄颐 裴中 《新医学》 2013年第4期273-277,共5页
目的:利用载体pPD95.86建立携带帕金森病基因仪·Synuelein(α-SYN)的秀丽隐杆线虫(秀丽线虫)模型,探讨α-SYN过表达对秀丽线虫的毒性作用。方法:构建同时表达α-SYN和绿色荧光蛋白(GFP)的重组质粒pPD95.86:α-SYN,采... 目的:利用载体pPD95.86建立携带帕金森病基因仪·Synuelein(α-SYN)的秀丽隐杆线虫(秀丽线虫)模型,探讨α-SYN过表达对秀丽线虫的毒性作用。方法:构建同时表达α-SYN和绿色荧光蛋白(GFP)的重组质粒pPD95.86:α-SYN,采用野生型N2秀丽线虫,通过显微注射和基因整合筛选获得pPD95.86转基因线虫和pPD95.86:α-SYN转基因线虫。同步化野生型N2秀丽线虫和两种转基因线虫,以pPD95.86:α-SYN转基因线虫为实验组,以pPD95.86转基因线虫为条件对照组,以N2野生型线虫为空白对照组,观察3组线虫的寿命、运动能力和热休克条件下的存活情况。结果:与两对照组比较,pPD95.86:α-SYN转基因线虫的寿命明显缩短,运动能力显著下降,热休克条件下其存活能力减弱(P均〈0.01)。结论:帕金森病基因α-SYN的过表达对秀丽线虫具有明显的毒性作用,并且该毒性在热休克条件下加重。 展开更多
关键词 Α-突触核蛋白 秀丽线虫 寿命 热休克
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Ac-HF对Aβ1-42也致大鼠皮质原代神经元损伤的保护作用及对α分泌酶活性的影响 预览
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作者 奉文尚 赵宇红 +1 位作者 王红梅 《解剖学研究》 CAS 2012年第6期406-410,共5页
目的探讨贯叶金丝桃素乙酸酯(hyperforinacetate,Ac—HF)对β淀粉样肽(Aβ)1-42毒性损伤大鼠原代培养大脑皮层神经元的作用及对Ⅸ分泌酶活性的影响及可能机制。方法采用大鼠原代培养皮层细胞,用MTT法观察Ac—HF对Aβ1-42毒性损伤... 目的探讨贯叶金丝桃素乙酸酯(hyperforinacetate,Ac—HF)对β淀粉样肽(Aβ)1-42毒性损伤大鼠原代培养大脑皮层神经元的作用及对Ⅸ分泌酶活性的影响及可能机制。方法采用大鼠原代培养皮层细胞,用MTT法观察Ac—HF对Aβ1-42毒性损伤后的神经细胞活力的影响。用ELASA检测其对α分泌酶活性及可溶性淀粉样前体蛋白(sAPPα)分泌的影响,应用Western blot检其对淀粉样前体蛋白(APP)及解聚金属蛋白酶(a disintegrin and metalloproteinas,ADAM)10表达的影响:并观察CalphostinC(Cal.C)对Ac—HF这些作用的影响。结果0.1—10.0μmol/LAc-HF无细胞毒性(P〉0.05),1.0—50.0μmol/LAc—HF可增加Aβ1-42毒性损伤的大鼠皮层神经细胞的活力(P〈0.05),0.1~10.0μmol/LAc—HF可使仅分泌酶活性增加,sAPPα分泌增多,对APP蛋白表达无影响,使ADAM10表达增多,PKC抑制剂CalphostinC(Cal.C)可抑制Ac—HF对α分泌酶的活性,sAPPα分泌及ADAM10表达的影响。结论1.0~10.0μmol/LAc—HF对Aβ1-42毒性损伤的大鼠皮层神经细胞有保护作用,Ac—HF可通过增加仪分泌酶活性及sAPPα分泌产生保护作用,这一作用可能是通过激活PKC通路增加ADAM10表达。 展开更多
关键词 贯叶金丝桃素乙酸酯 α分泌酶 解聚金属蛋白酶10 PKC抑制剂
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NMDA受体的活化调节原代皮层神经元的Wnt/β-catenin信号通路 被引量:1
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作者 彭彦茜 万仙子 +4 位作者 李屹晨 李莎莎 张薇 Tang Shaojun 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期 250-256,共7页
经典的Wnt/β-catenin信号通路在中枢神经系统突触形成和功能中发挥重要的调节作用。作为兴奋性神经递质的谷氨酸,与其受体结合,参与许多信号调节活动。为了探讨NMDA受体活化对Wnt/β-catenin信号通路的作用,该文利用18 d的C57小鼠胚胎... 经典的Wnt/β-catenin信号通路在中枢神经系统突触形成和功能中发挥重要的调节作用。作为兴奋性神经递质的谷氨酸,与其受体结合,参与许多信号调节活动。为了探讨NMDA受体活化对Wnt/β-catenin信号通路的作用,该文利用18 d的C57小鼠胚胎培养皮层神经元(离体10 d),用10μmol/L谷氨酸钠(monosodium glutamate,MSG)和50μmol/L N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)处理细胞,通过蛋白免疫印迹技术或者细胞免疫荧光染色分析Wnt/β-catenin信号通路关键成员。结果发现,NMDA受体的活化能使GSK-3β的Ser9位磷酸化水平增加,活性被抑制,胞浆内β-catenin蛋白降解减少,入核增加,激活下游基因表达。这些结果提示,NMDA受体激活能够上调Wnt/β-catenin信号通路。 展开更多
关键词 NMDA受体 WNT/Β-CATENIN信号通路 原代培养 皮层神经元
八氢贯叶金丝桃素乙酸酯对淀粉样前体蛋白水解途径的影响及机制 预览
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作者 奉文尚 赵宇红 +2 位作者 王东梅 张巍 《广东药学院学报》 CAS 2012年第6期640-643,共4页
目的探讨合成的稳定化合物八氢贯叶金丝桃素乙酸酯[(8H)-Ac-HF]对皮层原代神经元细胞中淀粉样前体蛋白(APP)水解途径的影响及其作用机制。方法建立SD大鼠皮层原代神经元细胞体外培养体系,用MTT法检测(8H)-Ac-HF对原代神经元细胞... 目的探讨合成的稳定化合物八氢贯叶金丝桃素乙酸酯[(8H)-Ac-HF]对皮层原代神经元细胞中淀粉样前体蛋白(APP)水解途径的影响及其作用机制。方法建立SD大鼠皮层原代神经元细胞体外培养体系,用MTT法检测(8H)-Ac-HF对原代神经元细胞的生长活力影响;用ELISA方法检测(8H)-Ac-HF对原代神经元细胞培养上清液中可溶性淀粉酶前体蛋白α(sAPPα)分泌及α-分泌酶活性的影响;用Western blot检测(8H)-Ac-HF对解聚金属蛋白酶10(adisintegrin and metalloprotease,ADAM10)蛋白表达的影响;并通过蛋白激酶C(PKC)抑制剂calphostinC(Cal.C)观察其可能作用的信号途径。结果 0~50μmol/L(8H)-Ac-HF处理皮层神经元30 h对细胞生长活性无显著影响;20、50μmol/L(8H)-Ac-HF可增加神经元细胞sAPPα的胞外分泌(P〈0.01),增加α-分泌酶活性,上调ADAM10蛋白的表达;其对sAPPα、ADAM10和α-分泌酶的上调作用可受PKC抑制剂Cal.C抑制。结论 (8H)-Ac-HF可通过PKC信号途径,增加ADAM10表达及α-分泌酶活性,促进APP经非淀粉样途径水解。 展开更多
关键词 八氢贯叶金丝桃素乙酸酯 淀粉样蛋白 Α-分泌酶 蛋白激酶C
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NMDA受体激活引起的突触活动对Wnt非经典通路的影响 预览 被引量:2
15
作者 李屹晨 万仙子 +3 位作者 杨湘玲 杨成 张薇 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2011年第3期 181-187,275,共8页
目的探讨NMDA受体激活引起的突触活动诱导Wnt非经典通路的活化。方法构建C57BL/6J胎鼠大脑皮层神经元原代培养体系,用NMDA处理神经元细胞,并结合Western blotting、双免疫荧光染色等技术,检测神经元细胞内Wnt非经典通路的相关蛋白的变... 目的探讨NMDA受体激活引起的突触活动诱导Wnt非经典通路的活化。方法构建C57BL/6J胎鼠大脑皮层神经元原代培养体系,用NMDA处理神经元细胞,并结合Western blotting、双免疫荧光染色等技术,检测神经元细胞内Wnt非经典通路的相关蛋白的变化。结果免疫荧光染色显示成功建立了C57BL/6J胎鼠大脑皮层神经元体外培养体系,原代神经元细胞在体外培养10d生长良好,且纯度达90%;体外培养的神经元细胞内存在Wnt5a神经递质,经NMDA的刺激,发现Wnt非经典通路的两个标志性蛋白CaMKII和JNK的磷酸化水平显著增加,且Wnt非经典通路的一种受体Frizzled-5的蛋白表达水平也显著增加。进一步的研究显示,用NMDA竞争性抑制剂DAP5能够阻断NMDA引起的CaMKII和JNK蛋白的磷酸化水平的提高。结论 NMDA受体的激活会诱导Wnt非经典通路的活化。 展开更多
关键词 小鼠 皮层神经元 原代培养 NMDA受体 Wnt非经典通路
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hK1-L-Fc融合蛋白在CHO细胞中的表达及其活性研究 被引量:1
16
作者 邓春平 陶建军 +1 位作者 侯永敏 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期23-28,共6页
为进一步改造重组人激肽释放酶1(hK1),以期提高其生物活性,制备了通过柔性接头相连接的重组人激肽释放酶1-L-IgG1 Fc融合蛋白(hK1-L-Fc)。采用重叠延伸PCR技术构建hK1-L-Fc融合基因,克隆至表达载体pcDNA3.1,在中国仓鼠卵巢细胞(CH... 为进一步改造重组人激肽释放酶1(hK1),以期提高其生物活性,制备了通过柔性接头相连接的重组人激肽释放酶1-L-IgG1 Fc融合蛋白(hK1-L-Fc)。采用重叠延伸PCR技术构建hK1-L-Fc融合基因,克隆至表达载体pcDNA3.1,在中国仓鼠卵巢细胞(CHO-S)中表达。利用Protein A亲和层析柱纯化融合蛋白,SDS-PAGE、Western blotting、飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)、HPLC检测表达产物,底物法检测融合蛋白的体外活性。结果显示:成功构建pcDNA3.1-hK1-L-Fc重组表达载体;获得稳定表达融合蛋白的细胞株;无血清悬浮批式培养的表达量在0.7 mg/L以上;纯化的蛋白其纯度在95%以上,分子量约60 kDa;活性检测显示其比活性在9.2 U/mg以上,较hK1-Fc蛋白提高了18%以上。 展开更多
关键词 激肽释放酶1 融合蛋白 CHO细胞
mTOR信号通路及其与阿尔茨海默病的关系 预览 被引量:9
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作者 汝文娟 唐少君 《中国比较医学杂志》 2010年第8期 70-75,共6页
哺乳动物雷帕霉素靶蛋白mTOR是一个进化上十分保守的蛋白激酶,属于PIKK超家族。在细胞内mTOR存在两种功能不同的复合体mTORC1和mTORC2。mTOR主要通过接受上游信号分子Rheb、TSC1/TSC2的调控来整合细胞内外信号,其下游效应器是4E-BP和p70... 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白mTOR是一个进化上十分保守的蛋白激酶,属于PIKK超家族。在细胞内mTOR存在两种功能不同的复合体mTORC1和mTORC2。mTOR主要通过接受上游信号分子Rheb、TSC1/TSC2的调控来整合细胞内外信号,其下游效应器是4E-BP和p70S6K,通过影响特定mRNA的翻译调节细胞的生长和增殖。在神经系统方面,神经元的发育、突触可塑性的调节、学习和记忆的形成都依赖于适当的mTOR通路的活化。新近的研究显示,神经退行性疾病阿尔茨海默病患者表现mTOR通路的异常,在双转基因鼠中,APP和PS1表达与mTOR/P70S6K下调关联,并影响精神状态评分。mTOR信号通路生理功能和调节机制的研究对了解AD的发病机理和寻找药物靶点具有重要意义。 展开更多
关键词 MTOR 调节 增殖分化 阿尔茨海默病
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脱氢表雄酮调节HepG2/GFP-HBx细胞p16基因甲基化及其与细胞周期和凋亡的相关性 预览
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作者 吕元 邓春平 +2 位作者 黄冰 郭中敏 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2009年第3期 180-185,共6页
目的探讨HBx与p16基因甲基化的关系,研究脱氢表雄酮(DHEA)对p16基因甲基化以及细胞周期和细胞凋亡的调节作用。方法以HepG2、HepG2/GFP和HepG2/GFP-HBx三种细胞为材料,采用MTT法检测细胞生长;流式细胞术检测细胞周期和凋亡率;MSP-PCR... 目的探讨HBx与p16基因甲基化的关系,研究脱氢表雄酮(DHEA)对p16基因甲基化以及细胞周期和细胞凋亡的调节作用。方法以HepG2、HepG2/GFP和HepG2/GFP-HBx三种细胞为材料,采用MTT法检测细胞生长;流式细胞术检测细胞周期和凋亡率;MSP-PCR检测p16基因甲基化水平。比较分析HBx与p16基因启动子甲基化、DHEA与各检测指标的关系。结果HepG2/GFP-HBx细胞与HepG2细胞和HepG2/GFP细胞相比,细胞的增殖速度提高(P〈0.05),G0/G1期细胞减少,S期细胞增多(P〈0.05),凋亡率降低(P〈0.05);HepG2/GFP-HBx细胞的p16基因启动子呈现高水平甲基化,HepG2和HepG2/GFP细胞呈现高水平非甲基化。100μmol/L的DHEA使三种细胞的增殖速度降低(P〈0.05),G0/G1期细胞增加,S期细胞减少(P〈0.05),凋亡率提高(P〈0.05)。DHEA可下调HepG2/GFP-HBx细胞的p16基因启动子甲基化水平,但对HepG2和HepG2/GFP细胞的p16基因启动子甲基化水平不产生影响。结论HBx引起肝癌细胞p16基因甲基化,并缩短细胞周期抑制细胞凋亡;DHEA可明显下调HBx引起的p16基因甲基化水平,延长细胞周期促进细胞凋亡,在无HBx基因整合的情况下,DHEA对肝癌细胞生长、细胞周期和凋亡的影响不通过p16基因甲基化的途径实现。 展开更多
关键词 P16基因 甲基化 脱氢表雄酮 HBX 细胞周期 细胞凋亡
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共轭亚油酸单体诱导乳腺癌细胞MCF-7凋亡及其作用机制的研究 预览 被引量:3
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作者 袁贤琳 陈青 +1 位作者 杨湘玲 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期 537-543,共7页
目的:研究2种共轭亚油酸(conjugatedlinoleicacid,CLA)单体——顺9,反11-CLA(cis9,trans11-CLA.c9.t11-CLA)和反10,顺12-CLA(trans10,cis12-CLA,t10,c12-CLA)诱导乳腺癌细胞MCF-7凋亡及其作用机制。方法:采用MTT法检测... 目的:研究2种共轭亚油酸(conjugatedlinoleicacid,CLA)单体——顺9,反11-CLA(cis9,trans11-CLA.c9.t11-CLA)和反10,顺12-CLA(trans10,cis12-CLA,t10,c12-CLA)诱导乳腺癌细胞MCF-7凋亡及其作用机制。方法:采用MTT法检测CLA对MCF-7细胞的生长抑制作用,锥虫蓝染色绘制CLA作用后MCF-7细胞的生长曲线;荧光显微镜观察及FCM检测MCF-7细胞的凋亡和细胞周期的改变;RT—PCR和Western印迹法检测MCF-7细胞PPARγ、Bcl—xL和Bcl—xSmRNA以及PPARγ、Bcl-2、Bax和caspase-3的蛋白表达。结果:2种CLA单体均可抑制MCF-7细胞增殖并诱导细胞凋亡,与对照组相比差异有统计学意义(P〈0.05);RT—PCR和Western印迹法检测结果显示,2种CLA单体均可以提高PPARγ、Bcl—xSmRNA和PPAR3,、Bax、caspase-3蛋白的表达,降低Bcl—xLmRNA和Bcl-2蛋白的表达,与对照组比较差异有统计学意义(P〈0.05);且2种CLA单体对PPARγ与凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和caspase-3的表达影响呈剂量和时间依赖性及同步相关性。结论:c9,t11-CLA和t10,c12-CLA对乳腺癌MCF-7细胞具有抑制生长和促凋亡的作用,CLA可能作为PPARγ的配体通过激活PPARγ-Bcl-2-easpase-3细胞凋亡信号通路而实现抑制肿瘤细胞生长的作用。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 细胞凋亡 细胞周期 共轭亚油酸单体 细胞 MCF-7
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原小檗碱类多靶点抗老年性痴呆症药理作用 预览 被引量:6
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作者 陈青 奉文尚 +1 位作者 何峰 《中山大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期 86-90,共5页
原小檗碱是一类异喹啉生物碱,具有相同的药效基团。本研究检测了以小檗碱和四氢黄藤素为代表的原小檗碱多靶点抗AD效应及分子作用机制。以人神经母细胞瘤SH—SY5Y为研究对象,利用Westernblot检测药物对细胞全长APP和BACE1蛋白水平的... 原小檗碱是一类异喹啉生物碱,具有相同的药效基团。本研究检测了以小檗碱和四氢黄藤素为代表的原小檗碱多靶点抗AD效应及分子作用机制。以人神经母细胞瘤SH—SY5Y为研究对象,利用Westernblot检测药物对细胞全长APP和BACE1蛋白水平的影响;ELISA技术检测细胞外可溶性淀粉样前体蛋白α(sAPPα)的分泌;酶活性检测试剂盒检测乙酰胆碱酯酶(AChE)的活性。结果显示,药物处理细胞24h后,二者均能显著地抑制BACE1蛋白的表达,并可使sAPPct的分泌显著增加,但未见细胞APP蛋白含量明显变化,同时对该细胞的AchE的活性具有显著的抑制作用。以上结果证明:原小檗碱生物碱药理活性涉及预防和减少AB沉积和增强乙酰胆碱对脑胆碱受体的作用,并通过细胞自身的代谢增加具有神经营养作用的sAPPer的分泌。提示此类化合物具有多靶点抗老年痴呆的潜能,通过结构优化改造,将有望获得副作用小的新一代抗AD有效药物。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 原小檗碱 淀粉样前体蛋白 β-分泌酶1 可溶性淀粉样前体蛋白α 乙酰胆碱酯酶
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