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MALDI-TOF MS在临床微生物鉴定中的标准化操作专家共识
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作者 胡继红 马筱玲 +20 位作者 王辉 张建中 罗燕萍 鲁辛辛 苏建荣 张嵘 赵虎 余方友 孙自镛 顾兵 刘小平 赵建宏 胡云建 胡志东 吕火烊 周铁丽 金大智 刘文恩 喻华 徐修礼 杨青 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期241-249,共9页
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(Matrix-assisted laser desorption/ionization time-of- flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS)技术,简称飞行质谱技术,是近年来临床微生物鉴定领域最具代表性的技术之一。每种微生物都由自身独... 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(Matrix-assisted laser desorption/ionization time-of- flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS)技术,简称飞行质谱技术,是近年来临床微生物鉴定领域最具代表性的技术之一。每种微生物都由自身独特的肽/蛋白质组成,通过MALDI-TOF MS检测微生物的肽/蛋白质指纹图谱,经软件处理并与微生物数据库进行比对分析,可在几分钟之内完成对微生物种、属水平的鉴定。与传统的检测微生物表型和生理生化方法相比,MALDI-TOF MS具有快速、准确、高通量、和低成本的优势。除了可鉴定常见细菌和酵母样真菌,更极大提高了临床微生物实验室对苛养菌、厌氧菌、丝状真菌以及分枝杆菌等难鉴定微生物的鉴定效率和能力。对MALDI-TOF MS系统开发耐药性分析、细菌同源性分析及阳性血培养、无菌体液细菌直接鉴定等工作尚处在科研阶段,随着研究的成熟和标准化的实现,有望逐步从研究走入临床应用。 展开更多
关键词 MALDI-TOF 微生物鉴定 标准化操作 临床应用 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 MS 蛋白质指纹图谱 专家
4种用于产毒型艰难梭菌核酸检测的粪便基因组提取试剂的性能评价
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作者 杨筠 叶菊连 +3 位作者 罗芸 宋小军 吴俊 金大智 《中国卫生检验杂志》 CAS 2019年第22期2699-2702,共4页
目的对4种粪便基因组提取试剂进行比较,评价适用于艰难梭菌临床诊断的试剂盒。方法随机选取100份临床腹泻样本,分别采用QIAGEN、天根、美宁康诚和新百基4种试剂提取粪便DNA,采用本实验室研发的艰难梭菌毒素基因检测方法进行检测。结果4... 目的对4种粪便基因组提取试剂进行比较,评价适用于艰难梭菌临床诊断的试剂盒。方法随机选取100份临床腹泻样本,分别采用QIAGEN、天根、美宁康诚和新百基4种试剂提取粪便DNA,采用本实验室研发的艰难梭菌毒素基因检测方法进行检测。结果4种提取试剂的特异度均较好(>95%),敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值差异均无统计学意义(P>0.05)。而QIAGEN试剂盒的最低检测限(10^3 cfu/ml)高于其他3种试剂盒。4种试剂盒的变异系数均<5%。美宁康诚试剂盒同时操作10份标本的平均用时(30 min)远少于其他3种(F=483.18,P<0.01)。结论4种提取试剂盒均能用于艰难梭菌分子诊断的样本前处理。但美宁康诚试剂盒提取操作时间短,敏感度和特异度均符合检测要求,结果准确,较适合待检艰难梭菌的临床粪便标本的前处理。 展开更多
关键词 艰难梭菌 核酸提取 评价
杭州市富阳区住院腹泻患者艰难梭菌感染及菌株分子特征分析
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作者 黄有平 金旭华 +5 位作者 叶菊连 罗芸 李珺 宋小军 黄忱 金大智 《疾病监测》 CAS 2019年第3期232-236,共5页
目的了解浙江省杭州市富阳地区住院腹泻患者艰难梭菌感染情况,研究感染患者临床危险因素及分离菌株的分子特征。方法收集2017年5月至2018年2月就诊于第一人民医院的228例腹泻患者的粪便标本,通过厌氧培养进行艰难梭菌菌株分离和鉴定,进... 目的了解浙江省杭州市富阳地区住院腹泻患者艰难梭菌感染情况,研究感染患者临床危险因素及分离菌株的分子特征。方法收集2017年5月至2018年2月就诊于第一人民医院的228例腹泻患者的粪便标本,通过厌氧培养进行艰难梭菌菌株分离和鉴定,进行多位点序列基因分型,以琼脂稀释法测定菌株耐药性,对患者临床资料进行统计分析。结果 228份标本共检测出产毒型艰难梭菌41株,其中31株为医院获得性腹泻;阳性患者平均年龄67.8岁,主要来自消化内科(34.1%)和肾内科(19.5%)。ST2、ST3和ST54为主要基因型。所有菌株对万古霉素、甲硝唑、四环素、哌拉西林敏感。临床资料统计分析显示,>60周岁、患基础性疾病和有抗生素用药史的阳性患者数量远高于阴性患者比例(χ^2=4.229、9.022、5.767,P=0.023、0.001、0.009)。结论杭州市富阳区住院腹泻患者艰难梭菌感染患者主要来源于院内感染。患有基础性疾病、8周内有抗生素用药史的老年患者为感染的危险因素;在院内感染防控中需进一步加强监测。 展开更多
关键词 艰难梭菌 腹泻 感染 分子特征
一种用于艰难梭菌分离培养的新型显色培养基的性能评价 预览
4
作者 边俏 罗芸 +4 位作者 许星星 宋小军 叶菊连 蒋健敏 金大智 《临床检验杂志》 CAS 2019年第4期301-304,共4页
目的 评价自主研发的艰难梭菌显色培养基(CDCA)性能。方法 选用艰难梭菌及其他细菌的标准株进行CDCA显色的特异性评价;将艰难梭菌标准菌株梯度稀释后测定BD公司CDSA、生物梅里埃公司CDIF和CDCA的灵敏度。收集临床120份粪便样本分别采用... 目的 评价自主研发的艰难梭菌显色培养基(CDCA)性能。方法 选用艰难梭菌及其他细菌的标准株进行CDCA显色的特异性评价;将艰难梭菌标准菌株梯度稀释后测定BD公司CDSA、生物梅里埃公司CDIF和CDCA的灵敏度。收集临床120份粪便样本分别采用3种培养基进行艰难梭菌分离培养,并对生长菌落进行质谱鉴定和 tpi 基因检测,以3种平板中任1种能培养出艰难梭菌的样本定义为真阳性。结果 在CDCA平板上除了梭形梭菌、双酶梭菌、第三梭菌、脆弱拟杆菌等菌种能够少量生长并显色外,对其他实验菌种均有抑制作用。CDSA、CDIF和CDCA检测艰难梭菌的灵敏度分别为2.0×10^5 CFU/mL、8.0×10^1 CFU/mL和4.0×10^2 CFU/mL。120份标本中检出艰难梭菌31份(25.8%),CDSA、CDIF和CDCA培养阳性标本分别为25份(20.8%)、28份(23.3%)和 26份(21.7%),3种显色培养基对临床腹泻标本检测阳性率差异无统计学意义(χ^2=0.418, P = 0.811 )。3种显色培养基的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为:CDCA 83.8%、100%、100%、94.7%;CDIF 90.3%、98.9%、96.6%、96.7%;CDSA 80.6%、100%、100%、93.7%。结论 本实验室研发的CDCA的特异性和灵敏度较高,可用于临床艰难梭菌的初步分离。 展开更多
关键词 艰难梭菌 显色培养基 性能评价
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艰难梭菌毒素蛋白表达与艰难梭菌感染分级关系的研究
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作者 王丽倩 罗芸 +5 位作者 许星星 黄忱 吴盛海 管福强 金大智 王贤军 《中华医院感染学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第24期3709-3712,共4页
目的分析医院艰难梭菌感染(clostridium difficile infection,CDI)患者的临床表现与实验室检查结果,初步研究艰难梭菌毒素蛋白表达与CDI严重程度分级的关系。方法收集2016年3月-2017年5月医院连续采集的860例腹泻便样本,采用Techlab Cdi... 目的分析医院艰难梭菌感染(clostridium difficile infection,CDI)患者的临床表现与实验室检查结果,初步研究艰难梭菌毒素蛋白表达与CDI严重程度分级的关系。方法收集2016年3月-2017年5月医院连续采集的860例腹泻便样本,采用Techlab Cdiff Quik Check Complete试剂盒和艰难梭菌毒素基因试剂盒分别检测艰难梭菌谷氨酸脱氢酶抗原(Clostridium difficile glutamate dehydrogenase antigen,GDH)、艰难梭菌毒素蛋白和艰难梭菌毒素基因,并对CDI患者临床资料和实验室结果进行统计分析。结果860份腹泻样本中,GDH阳性99例占11.51%,其中艰难梭菌毒素蛋白阳性16例占16。16%,毒素基因阳性94例占94.95%;艰难梭菌毒素蛋白阳性患者的外周血白细胞数量、血清肌酐水平、腹泻次数、CDI分级指数及院内CDI患者概率均高于毒素蛋白阴性患者(P<0.05)。结论艰难梭菌毒素蛋白阳性患者常伴随严重的艰难梭菌感染临床表现,推测艰难梭菌毒素蛋白可作为一项重度艰难梭菌感染的预测指标,为临床判断CDI分级及合理选择治疗方案提供及时客观的依据。 展开更多
关键词 艰难梭菌 毒素蛋白 艰难梭菌感染分级
两种产毒型艰难梭菌分子诊断方法的临床应用评价
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作者 庄国华 宋小军 +9 位作者 许星星 罗芸 黄忱 叶菊连 蔡剑 王丽倩 许向军 王贤军 汪一萍 金大智 《中华检验医学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第1期35-40,共6页
目的通过与Xpert C.difficile/Epi检测临床粪便样本中艰难梭菌毒素基因方法的对比,系统评价实验室研发的艰难梭菌毒素基因多重荧光PCR检测方法的性能。方法2016年8月1日至12月30日采集杭州市余杭区第一人民医院和宁波市鄞州人民医院... 目的通过与Xpert C.difficile/Epi检测临床粪便样本中艰难梭菌毒素基因方法的对比,系统评价实验室研发的艰难梭菌毒素基因多重荧光PCR检测方法的性能。方法2016年8月1日至12月30日采集杭州市余杭区第一人民医院和宁波市鄞州人民医院临床腹泻患者粪便样本176份,平行采用Xpert C.difficile/Epi和实验室研发的检测方法进行检测,同时进行艰难梭菌分离培养和PCR毒素鉴定。采用SPSS 20.0软件对检测结果进行交叉表分析。结果以Xpert C.difficile/Epi检测结果为标准,本实验室研发方法的敏感度为91.7%(22/24)、特异度为100%(152/152)、阳性预测值为100%(22/22)、阴性预测值为98.7%(152/154),两种方法检测结果的一致性好(Kappa=0.950,P〈0.001)。以厌氧分离培养和PCR毒素检测结果为标准,本实验室研发方法的敏感度为90.0%(18/20)、特异度为97.0%(152/156)、阳性预测值为81.8%(18/22)、阴性预测值为98.7%(152/154)(Kappa=0.838,P〈0.001);Xpert C.difficile/Epi的敏感度为90.0%(18/20)、特异度为96.0%(150/156)、阳性预测值为75.0%(18/24)、阴性预测值为98.7%(150/152)(Kappa=0.792,P〈0.001)。结论实验室研发的艰难梭菌毒素基因多重荧光PCR检测方法与Xpert C.difficile/Epi检测性能基本一致,可直接用于临床腹泻标本中产毒型艰难梭菌检测。该方法的临床应用为国内临床艰难梭菌感染病例的诊断提供一种国产化的检测方法。 展开更多
关键词 艰难梭菌 分子诊断 临床评价
国内外艰难梭菌感染现状分析 预览 被引量:2
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作者 许星星 罗芸 +1 位作者 王贤军 金大智 《传染病信息》 2018年第2期175-180,共6页
艰难梭菌是一种革兰阳性厌氧芽孢杆菌,也是抗生素相关性腹泻的主要病原菌之一。近年来,由于高毒力菌株核糖体027型的出现,导致艰难梭菌感染在世界范围内的暴发和流行。目前,艰难梭菌分子流行病学研究进展迅速,不同地区的艰难梭菌具有不... 艰难梭菌是一种革兰阳性厌氧芽孢杆菌,也是抗生素相关性腹泻的主要病原菌之一。近年来,由于高毒力菌株核糖体027型的出现,导致艰难梭菌感染在世界范围内的暴发和流行。目前,艰难梭菌分子流行病学研究进展迅速,不同地区的艰难梭菌具有不同的感染特点。北美和欧洲等发达国家的流行病学特征已经比较清楚,该菌在中国的研究起步较晚,但近几年的研究也初步呈现出中国艰难梭菌感染现状和分子特征。本文从艰难梭菌感染的临床表现、危险因素、国内外感染现状等角度进行综述,为后续进一步推进中国艰难梭菌感染防控及分子流行病学研究提供数据参考。 展开更多
关键词 艰难梭菌感染 危险因素 临床表现 现状
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掺玻璃粉混凝土的力学性能 预览 被引量:6
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作者 刘光焰 金大智 +1 位作者 戴昌强 高鹏飞 《河南科技大学学报:自然科学版》 北大核心 2018年第1期59-62,7-8共5页
介绍了玻璃粉的制备流程,并对其化学成分、不同粉磨时间的粒度分布、水化放热速率等进行了分析。把玻璃粉作为胶凝材料掺入混凝土中,通过设计质量分数(0%、10%、20%、30%、50%)、水灰比(0.4、0.5、0.6)、粉磨时间(15 min、35 min、60 m... 介绍了玻璃粉的制备流程,并对其化学成分、不同粉磨时间的粒度分布、水化放热速率等进行了分析。把玻璃粉作为胶凝材料掺入混凝土中,通过设计质量分数(0%、10%、20%、30%、50%)、水灰比(0.4、0.5、0.6)、粉磨时间(15 min、35 min、60 min)等因素的变化,对其抗压强度进行测试。测试结果表明:玻璃粉成分中含有大量的SiO2,具有潜在火山灰性。掺玻璃粉混凝土的强度随着玻璃粉质量分数的增加而降低,玻璃粉的后期火山灰活性会抵消部分下降趋势。随着粉磨时间的增加,玻璃粉颗粒粒度减小,火山灰性增强,且分散性更好,能有效改善浆体结构,提高致密性,使混凝土强度增加。 展开更多
关键词 废弃玻璃粉 火山灰性 力学性能
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玻璃粉水泥浆的初期水化产物和浆体结构 预览 被引量:3
9
作者 刘光焰 樊磊 +1 位作者 高鹏飞 金大智 《硅酸盐通报》 CSCD 北大核心 2018年第1期86-91,共6页
采用SEM、XRD研究了玻璃粉水泥浆的初期水化产物、浆体结构。并用化学结合水量和有效结合水法来定性和定量分析玻璃粉对水化初期复合体系及水泥的促进或抑制作用以及作用程度。研究表明:在水化反应初期(1 d内),因为玻璃粉的掺入既由... 采用SEM、XRD研究了玻璃粉水泥浆的初期水化产物、浆体结构。并用化学结合水量和有效结合水法来定性和定量分析玻璃粉对水化初期复合体系及水泥的促进或抑制作用以及作用程度。研究表明:在水化反应初期(1 d内),因为玻璃粉的掺入既由此而产生的稀释作用使有效水灰比增加而产生的对水泥熟料水化的促进作用,因此,硅酸盐水泥熟料的水化程度较高,但从整体来看,大掺量(50%)的玻璃粉延缓了复合胶凝材料总水化程度;水化开始(6 h~1 d)时,水化反应开始加速进行,水化产物的数量迅速增加,主要为纤维状CSH凝胶、针棒状钙矾石晶体和Ca(OH)_2,这些水化产物彼此间相互搭接、交错生长,部分未水化的水泥颗粒镶嵌其中,并将玻璃粉粘结成整体,构成体系骨架。 展开更多
关键词 玻璃粉水泥浆 初期水化产物 水化程度 微观结构
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往事成风——乌丹记忆 预览
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作者 金大智 《青年文学家》 2018年第8X期15-15,17共2页
遥忆2015年夏末,我别离了母校,踏上了职业生涯的道路。辗转三月有余,终于与一家地方铁路公司签订了试用合同,成为了一名铁路信号工,由此便开始了一段全新的旅程。当时的公司名为赤大白铁路公司,主要经营项目是为系统内的电厂运输发电所... 遥忆2015年夏末,我别离了母校,踏上了职业生涯的道路。辗转三月有余,终于与一家地方铁路公司签订了试用合同,成为了一名铁路信号工,由此便开始了一段全新的旅程。当时的公司名为赤大白铁路公司,主要经营项目是为系统内的电厂运输发电所用的燃料——褐煤,公司的地理位置处于内蒙古自治区赤峰市松山区。当时的岗位为信号见习生。对于初入职场的我,立志要在人生第一份工作中做出辉煌的成绩以向他人展示个人能力。 展开更多
关键词 信号工区 基本轨
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纳米二氧化硅对玻璃粉水泥体系水化硬化的影响 预览 被引量:2
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作者 刘光焰 樊磊 +2 位作者 金大智 卢瑞阳 苏和平 《硅酸盐通报》 CSCD 北大核心 2017年第6期2112-2116,共5页
利用X射线衍射、扫描电镜及力学性能测试等手段研究了纳米Si O2对玻璃粉水泥体系水化硬化的影响,结果表明:纳米Si O2促进了水泥早期溶解,提高了复合体系碱度,有利于玻璃粉内部高能键(Si-O,Al-O)断裂,从而提高复合体系中玻璃粉早期水... 利用X射线衍射、扫描电镜及力学性能测试等手段研究了纳米Si O2对玻璃粉水泥体系水化硬化的影响,结果表明:纳米Si O2促进了水泥早期溶解,提高了复合体系碱度,有利于玻璃粉内部高能键(Si-O,Al-O)断裂,从而提高复合体系中玻璃粉早期水化程度;纳米Si O2对材料凝结硬化的促进作用较大程度上缓解了掺玻璃粉体系早期性能发展不足的缺陷;纳米Si O2的微集料效应,改善了玻璃粉水泥浆的微观结构,使得硬化浆体更为密实;纳米Si O2的促凝作用可显著缩短复合体系凝结时间,大幅度提高其早期强度,但掺纳米Si O2的复合胶凝材料强度存在一个极值,而5%纳米Si O2为其最佳掺入量。 展开更多
关键词 玻璃粉 纳米SI O2 水化机理 纳米改性 力学性能
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亚微米玻璃粉制备及其水化性能的研究 预览 被引量:2
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作者 刘光焰 金大智 高鹏飞 《四川建筑科学研究》 北大核心 2017年第4期111-115,共5页
把废弃玻璃粉粉磨至颗粒粒径达到亚微米,并等质量取代部分水泥制作玻璃粉净浆试件,通过测试不同龄期的强度,以及采用扫描电子显微镜(SEM)和X射线衍射仪(XRD)对亚微米级废弃玻璃粉的活性及水化作用机理进行了分析。结果表明:亚微米... 把废弃玻璃粉粉磨至颗粒粒径达到亚微米,并等质量取代部分水泥制作玻璃粉净浆试件,通过测试不同龄期的强度,以及采用扫描电子显微镜(SEM)和X射线衍射仪(XRD)对亚微米级废弃玻璃粉的活性及水化作用机理进行了分析。结果表明:亚微米玻璃粉不需要任何外物激发因素就具有火山灰活性,28 d龄期时,不同取代率亚微米玻璃粉的活性均超过了75%,尤其是在取代率不超过30%时,活性指数均在85%以上;随着亚微米玻璃粉取代率的增加,水化产物中的氢氧化钙明显减少,水化硅酸钙凝胶(C-S-H)呈微弱的减小趋势但并不明显,说明亚微米玻璃粉在28 d龄期时已经发生火山灰反应,并且反应吸收了部分氢氧化钙晶体。 展开更多
关键词 废弃玻璃粉 亚微米 火山灰活性
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玻璃粉表面改性及其对水泥浆水化硬化作用 预览
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作者 刘光焰 樊磊 +2 位作者 金大智 卢瑞阳 苏和平 《科学技术与工程》 北大核心 2017年第14期286-290,共5页
利用增钙、机械粉磨等手段对玻璃粉进行局部活化,采用SEM、XRD等测试方法研究了改性玻璃粉水泥浆水化产物和微观结构,并讨论了改性玻璃粉在水泥浆水化硬化过程的作用。研究表明:氧化钙的掺入提高了复合体系液相的碱度,从而加快了水泥... 利用增钙、机械粉磨等手段对玻璃粉进行局部活化,采用SEM、XRD等测试方法研究了改性玻璃粉水泥浆水化产物和微观结构,并讨论了改性玻璃粉在水泥浆水化硬化过程的作用。研究表明:氧化钙的掺入提高了复合体系液相的碱度,从而加快了水泥水化反应生成更多水化产物;掺入氧化钙的玻璃粉水泥浆微观结构更为密实,28 d龄期时水化产物间的孔隙远远小于3 d,水化产物发育更好,硬化浆体的强度大幅提高。当CaO掺量过大(6%)时,生成过多的氢氧化钙晶体引起膨胀开裂,对玻璃粉水泥浆的强度发展产生不利影响。 展开更多
关键词 玻璃粉 表面改性 水化特性 力学性能
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一种艰难梭菌毒素基因检测方法的临床应用评价 被引量:3
14
作者 王丽倩 罗芸 +4 位作者 黄忱 叶菊莲 宋小军 金大智 王贤军 《中华检验医学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第7期511-514,共4页
目的 通过与BD MAX试剂盒检测临床粪便标本中艰难梭菌毒素基因的比对,评价本实验室前期研发的艰难梭菌毒素基因检测方法.方法 本研究为临床应用研究.2014年7月1日至9月30日采集浙江中医药大学附属杭州市第一医院的腹泻患者粪便标本147份... 目的 通过与BD MAX试剂盒检测临床粪便标本中艰难梭菌毒素基因的比对,评价本实验室前期研发的艰难梭菌毒素基因检测方法.方法 本研究为临床应用研究.2014年7月1日至9月30日采集浙江中医药大学附属杭州市第一医院的腹泻患者粪便标本147份,分别采用BD MAX和本实验室前期研发的艰难梭菌毒素基因检测方法进行检测.BD MAX试剂盒采用自动化核酸提取和PCR检测;实验室前期研发方法通过提取粪便DNA后进行荧光定量PCR检测,最后采用SPSS10.0软件进行分析.结果 147份标本中,两方法均检出艰难梭菌毒素B基因阳性33份,阴性114份,其中有4份标本的结果不一致.以BD MAX试剂盒的结果为标准,得出本实验室前期研发的艰难梭菌毒素基因检测方法的敏感度为93.94%(31/33),特异度为98.25%(112/114),阳性预测值为93.94 %(31/33)和阴性预测值为98.25 %(112/114).且上述两种方法检测结果的一致性较好(Kappa值为0.922,P〈0.01).结论 本实验室前期研发的艰难梭菌毒素基因检测方法与BD MAX试剂盒性能相似,敏感度高、特异度强,同时该方法成本低并可直接对腹泻标本进行测定,无需配套提取仪器,更适合我国临床开展常规艰难梭菌毒素基因检测. 展开更多
关键词 难辨梭菌 细菌毒素类 分子诊断技术
艰难梭菌毒素C蛋白的克隆表达和抗体制备 预览
15
作者 王建霞 王宏伟 +5 位作者 杨锡琴 黄忱 罗芸 金大智 冯晓燕 张贺秋 《中国药理学与毒理学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第7期760-765,共6页
目的 克隆艰难梭菌毒素C(tcdC)基因并构建TcdC蛋白的原核表达载体,制备多克隆抗体。方法从艰难梭菌标准株(ATCC43255)基因组DNA中扩增获得tcdC基因的部分片段,连接到原核表达载体并转化到大肠杆菌中,诱导表达GST-TcdC/L和IL1-TcdC/... 目的 克隆艰难梭菌毒素C(tcdC)基因并构建TcdC蛋白的原核表达载体,制备多克隆抗体。方法从艰难梭菌标准株(ATCC43255)基因组DNA中扩增获得tcdC基因的部分片段,连接到原核表达载体并转化到大肠杆菌中,诱导表达GST-TcdC/L和IL1-TcdC/L融合蛋白,前者用作免疫抗原,后者用作检测抗原。采用SDS-PAGE法鉴定融合蛋白的表达,并通过Ni柱纯化IL1-TcdC/L融合蛋白,Q柱纯化GST-TcdC/L融合蛋白。将纯化的GST-TcdC/L融合蛋白于兔背部皮内多点注射,每只1 mg,4周1次,共3次。最后1次免疫后2周,采血分离血清。用IL1-TcdC/L蛋白包被酶联板,采用ELISA法检测多抗血清效价;Western蛋白印迹法检测多抗特异性,结果 SDS-PAGE结果表明,所表达的2个融合蛋白与预期分子质量一致。ELISA结果显示,制备的TcdC多克隆抗体效价〉1:6.4×10^4。Western蛋白印迹实验显示,制备的TcdC/L多克隆抗体能特异性识别艰难梭菌中的TcdC蛋白。结论 成功克隆了艰难梭菌tcdC/L基因并进行了原核表达,成功制备了其多克隆抗体,为后续研究tcdC基因在艰难梭菌致病过程中的作用及机制奠定了基础。 展开更多
关键词 艰难梭菌 毒素C蛋白 多克隆抗体
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高温养护对玻璃粉复合胶凝材料性能的影响 预览 被引量:2
16
作者 金大智 刘光焰 高鹏飞 《科学技术与工程》 北大核心 2017年第31期153-157,共5页
为了研究养护温度对废弃玻璃粉胶凝性能的影响,将废弃玻璃粉取代0、10%、30%、50%的水泥制备复合砂浆;并分别置于常温水域及75℃恒温水域中养护3 d、7 d、28 d、90 d。测试不同龄期的强度。运用活性因子法判别玻璃粉在复合体系中的贡献... 为了研究养护温度对废弃玻璃粉胶凝性能的影响,将废弃玻璃粉取代0、10%、30%、50%的水泥制备复合砂浆;并分别置于常温水域及75℃恒温水域中养护3 d、7 d、28 d、90 d。测试不同龄期的强度。运用活性因子法判别玻璃粉在复合体系中的贡献程度。采用扫描电子显微镜(SEM)分析复合浆体的微观结构。结果表明:高温养护可以促进复合材料水化反应,提高试块的早期强度;但不利于后期强度的发展,在7 d龄期时玻璃粉的贡献度最大。常温养护时,试块早期强度增长较慢,后期强度大幅提升,玻璃粉的活性因子随着龄期的增长而变大。 展开更多
关键词 废弃玻璃粉 胶砂 火山灰活性 活性因子
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玻璃粉粒度对复合胶凝材料性能的影响 预览 被引量:6
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作者 樊磊 刘光焰 +1 位作者 卢瑞阳 金大智 《硅酸盐通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期180-185,共6页
用激光粒度分析仪测定不同细度的玻璃粉粒度分布,以灰色关联方法(GIA)和扫描电子显微镜(SEM)研究了玻璃粉粒度对复合胶凝材料性能的影响。研究结果表明,玻璃粉中10μm以下的颗粒关联性均为正,说明这些颗粒对复合胶凝材料强度发展有... 用激光粒度分析仪测定不同细度的玻璃粉粒度分布,以灰色关联方法(GIA)和扫描电子显微镜(SEM)研究了玻璃粉粒度对复合胶凝材料性能的影响。研究结果表明,玻璃粉中10μm以下的颗粒关联性均为正,说明这些颗粒对复合胶凝材料强度发展有积极贡献,其中以5-10μm的关联度为最大;而45μm的颗粒呈负关联,其火山灰活性没有得到充分发挥;玻璃粉经适当物理磨细(35 min)后,能更有效地分散到复合胶凝材料的孔隙中,使复合胶凝材料的结构更加密实,从而提高了复合胶凝材料的抗压强度。 展开更多
关键词 玻璃粉 粒度分布 灰色关联分析 微观结构
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基于正交试验法和灰色关联分析的玻璃粉混凝土的强度研究 预览 被引量:1
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作者 樊磊 刘光焰 +2 位作者 金大智 卢瑞阳 王沾义 《混凝土》 CAS 北大核心 2017年第3期97-99,共3页
研究不同因素对玻璃粉混凝土强度影响,并寻求最佳配合比,对实际工程应用具有显著意义。采用四因素三水平的正交试验法对玻璃粉混凝土的配合比进行试验设计,并运用直观法和灰色关联分析法探讨了水胶比、玻璃粉掺量、玻璃粉粒径和相调节... 研究不同因素对玻璃粉混凝土强度影响,并寻求最佳配合比,对实际工程应用具有显著意义。采用四因素三水平的正交试验法对玻璃粉混凝土的配合比进行试验设计,并运用直观法和灰色关联分析法探讨了水胶比、玻璃粉掺量、玻璃粉粒径和相调节剂掺入量对玻璃粉混凝土抗压强度的影响规律。结果表明,直观分析法与灰色关联分析法存在差异性,同时包含一致性,其中,水灰比对玻璃粉混凝土抗压强度影响最大,玻璃粉掺量稍次,玻璃粉粒径与相调节剂掺入量影响不大。 展开更多
关键词 玻璃粉混凝土 灰色关联分析 正交试验法 抗压强度
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低水胶比下掺玻璃粉水泥浆力学性能和活性 预览 被引量:1
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作者 刘光焰 樊磊 +2 位作者 牟卡莉 金大智 高鹏飞 《科学技术与工程》 北大核心 2017年第20期241-246,共6页
为了研究低水胶比下掺玻璃粉水泥浆的浆体力学性能和活性,运用活性因子法排除干扰因素,探讨了低水胶比对不同掺量玻璃粉水泥浆强度的影响规律。结果表明:水化反应早期,玻璃粉的微集料效应与密实填充占据主要地位,玻璃粉的火山灰效应忽... 为了研究低水胶比下掺玻璃粉水泥浆的浆体力学性能和活性,运用活性因子法排除干扰因素,探讨了低水胶比对不同掺量玻璃粉水泥浆强度的影响规律。结果表明:水化反应早期,玻璃粉的微集料效应与密实填充占据主要地位,玻璃粉的火山灰效应忽略不计。有效水灰比随玻璃粉掺量增加而增加,玻璃粉-水泥浆体中的Ca~(2+)浓度降低,生成的C—S—H凝胶数量相对减少,整个复合体系之间的黏结力下降,玻璃粉与水泥的界面效应也相应减弱,从而引起玻璃粉-水泥硬化浆体的抗压强度降低。 展开更多
关键词 玻璃粉 微观结构 低水胶比 力学性能 活性
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艰难梭菌分子分型技术研究进展 被引量:1
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作者 黄忱 罗芸 +1 位作者 王贤军 金大智 《疾病监测》 CAS 2016年第8期676-682,共7页
艰难梭菌是一种革兰阳性的专性厌氧产芽孢杆菌。核糖体027型高毒力株在发达国家的多次暴发使得艰难梭菌越来越引起重视,近年来艰难梭菌感染的发生频率已在全世界范围内呈显著上升趋势。目前该菌的分子流行病学研究进展较快,常用的分子... 艰难梭菌是一种革兰阳性的专性厌氧产芽孢杆菌。核糖体027型高毒力株在发达国家的多次暴发使得艰难梭菌越来越引起重视,近年来艰难梭菌感染的发生频率已在全世界范围内呈显著上升趋势。目前该菌的分子流行病学研究进展较快,常用的分子分型方法包括限制性酶切分型、PCR核糖体分型、脉冲场凝胶电泳、多位点序列分析、重复序列PCR分型、多位点可变数目串联重复序列分析、毒素分型和全基因组测序分析等。同时,仍有不断改进的新型分子分型方法应用于此,以期更准确、快速和有效地对艰难梭菌感染暴发进行识别与调查,为艰难梭菌的感染防控提供可靠的分子流行病学数据。 展开更多
关键词 艰难梭菌 分子分型 分子流行病学
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