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非洲猪瘟病毒DP96R蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备 预览
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作者 王西西 吴映彤 +3 位作者 吴竞 陈鸿军 朱鸿飞 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2020年第1期22-27,共6页
本研究旨在通过克隆非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)Georgia 2007/1毒株毒力基因UK,采用原核表达系统表达获得重组蛋白DP96R,并进一步制备DP96R重组蛋白的多克隆抗体。构建的原核表达重组质粒pET-28a-UK转化BL21感受态细... 本研究旨在通过克隆非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)Georgia 2007/1毒株毒力基因UK,采用原核表达系统表达获得重组蛋白DP96R,并进一步制备DP96R重组蛋白的多克隆抗体。构建的原核表达重组质粒pET-28a-UK转化BL21感受态细胞,在16℃、0.4 mmol/L IPTG条件下诱导10 h后,检测到目的蛋白以可溶性表达为主,蛋白分子量约为15 kDa。制备的抗DP96R重组蛋白多克隆抗体具有良好的反应性,能够特异性识别真核表达的DP96R蛋白。本研究中DP96R重组蛋白及其多克隆抗体的制备为进一步研究DP96R蛋白的生物学功能,以及建立ASFV毒株鉴别诊断的血清学检测方法奠定了基础。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 UK基因 DP96R蛋白 原核表达 多克隆抗体
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非洲猪瘟病毒基因缺失疫苗株的构建和免疫保护特性 被引量:1
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作者 张艳艳 陈腾 +35 位作者 张静远 缪发明 薄宗义 王立冬 周鑫韬 杨金梅 高玉龙 汪春雨 鲍晨沂 米立娟 孙雪霏 冯娜 杨金金 王承 万忠海 李记平 孟轲音 田多 李楠 王述超 王颖 张菲 张锦霞 蒋依倩 刘晔 张守峰 张中洋 钱莺娟 朱鸿飞 高玉伟 陈鸿军 李金祥 扈荣良 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1421-1427,共7页
以我国首例非洲猪瘟疫情中分离的流行毒株(SY18)为亲本株构建了多基因家族(MGF)基因和CD2v基因缺失的非洲猪瘟病毒基因缺失疫苗候选株,针对基因缺失株的安全性和免疫保护效果进行了特性研究。结果显示,MGF和CD2v双基因缺失株(ASFV SY18... 以我国首例非洲猪瘟疫情中分离的流行毒株(SY18)为亲本株构建了多基因家族(MGF)基因和CD2v基因缺失的非洲猪瘟病毒基因缺失疫苗候选株,针对基因缺失株的安全性和免疫保护效果进行了特性研究。结果显示,MGF和CD2v双基因缺失株(ASFV SY18ΔMGF/ΔCD2v)对猪安全,接种猪能够100%抵抗亲本强毒株SY18株的攻击,对照猪全部死亡;说明该毒株可作为非洲猪瘟疫苗候选株。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 基因缺失 MGF基因 CD2v基因 疫苗候选株 安全性 免疫保护
SPOC中课堂互动对学生参与度的作用机制 预览
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作者 李慢 《实验技术与管理》 CAS 北大核心 2019年第6期244-248,273共6页
以技术接受模型(TAM)和信息系统持续使用理论为基础,构建了课堂互动对学生参与度的作用模型。在某高校SPOC平台收集数据,利用AMOS软件分析验证理论模型和假说。结果表明:SPOC学习中课堂互动显著正向影响感知有用性和感知易用性促进学生... 以技术接受模型(TAM)和信息系统持续使用理论为基础,构建了课堂互动对学生参与度的作用模型。在某高校SPOC平台收集数据,利用AMOS软件分析验证理论模型和假说。结果表明:SPOC学习中课堂互动显著正向影响感知有用性和感知易用性促进学生对SPOC系统的参与度。对SPOC学习中课堂互动和学生参与度之间关系的研究,揭示了课堂互动对学生参与SPOC学习的作用机制。 展开更多
关键词 SPOC 课堂互动 学生参与度 满意度
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肝脏药物代谢研究中的微流控模型(英文)
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作者 赵琳 姜勇 +2 位作者 屠鹏飞 《中国药学:英文版》 CAS CSCD 2019年第7期449-467,共19页
在新药研发临床前研究阶段,建立更接近人体内代谢情况的体外模型尤为重要,旨在减少实验动物的数量,并对药物在人体内的代谢情况进行更为准确的预测。利用微流控技术,通过结合亚细胞组分、肝细胞以及肝脏组织,可以建立更加完善的体外肝... 在新药研发临床前研究阶段,建立更接近人体内代谢情况的体外模型尤为重要,旨在减少实验动物的数量,并对药物在人体内的代谢情况进行更为准确的预测。利用微流控技术,通过结合亚细胞组分、肝细胞以及肝脏组织,可以建立更加完善的体外肝脏代谢模型,从而开展药物代谢的相关研究。微流控平台通过对流体的精确控制可建立动态培养环境,通过设计3D结构可模拟人体内的肝组织结构。此外,在芯片上进行不同细胞的共培养还可模拟人体器官的互作,提升体外模型的仿生性。本综述更新了自2011年以来基于微流控技术构建的肝脏药物代谢模型,并分别对不同的芯片载体(亚细胞组分、原代肝细胞及组织切片)进行了综述。 展开更多
关键词 微流控芯片 肝脏模型 药物代谢
宿主细胞基因序列插入亚洲1型口蹄疫病毒导致病毒对牛的致病性减弱的研究
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作者 邹兴启 朱元源 +13 位作者 包慧芳 孙普 徐璐 万建青 夏应菊 张乾义 徐嫄 李翠 王兆 王琴 刘在新 朱鸿飞 赵启祖 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期152-158,共7页
1株Asia 1型口蹄疫疫苗毒株在BHK21悬浮培养细胞中传代时与宿主BHK21细胞m RNA重组,导致VP1第206位与第207位氨基酸之间插入了VDLV序列,该插入突变使得疫苗免疫效果大幅下降,不能产生有效保护。比较发现,含12 nt插入序列的变异毒株(Vac-... 1株Asia 1型口蹄疫疫苗毒株在BHK21悬浮培养细胞中传代时与宿主BHK21细胞m RNA重组,导致VP1第206位与第207位氨基酸之间插入了VDLV序列,该插入突变使得疫苗免疫效果大幅下降,不能产生有效保护。比较发现,含12 nt插入序列的变异毒株(Vac-Asia1-VDLV)与亲本毒株(Asia 1/HN/06)在BHK21细胞上的生长曲线存在较大差异,变异毒株可感染CHO-K1,pgsA-745,pgsB-618,pgsD-677细胞,毒价可达到1×10^5PFU/mL以上,而亲本毒不能感染CHO类细胞并产生蚀斑。动物试验结果显示,乳鼠半数致死量(LD50)与亲本毒株相比变化不明显。但牛感染试验表明,大剂量(1×10^7LD50)接种牛舌面,Vac-Asia1-VDLV不引起体温反应和其它临床症状,荧光定量PCR检测鼻拭子和血液时未发现病毒,而Asia 1/HN/06引起典型的口蹄疫症状,鼻拭子和血液中检出病毒。上述试验结果表明,与亲本毒相比,变异毒株Vac-Asia 1-VDLV对牛的致病性明显降低。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 ASIA 1型 重组 致病力
口蹄疫疫苗非抗原蛋白对146S抗原免疫效果的影响 预览
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作者 李明 张雅娜 +3 位作者 高新桃 李金祥 朱鸿飞 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第3期905-912,共8页
为探究非抗原蛋白对口蹄疫病毒A型(FMDV-A)146S抗原免疫效果的影响,本研究以小鼠和猪为试验动物,分别制备5组小鼠注射用样品:A组(3μg146S抗原)、B组(3μg146S抗原+25μg非抗原蛋白)、C组(3μg146S抗原+50μg非抗原蛋白)、D组(3μg146S... 为探究非抗原蛋白对口蹄疫病毒A型(FMDV-A)146S抗原免疫效果的影响,本研究以小鼠和猪为试验动物,分别制备5组小鼠注射用样品:A组(3μg146S抗原)、B组(3μg146S抗原+25μg非抗原蛋白)、C组(3μg146S抗原+50μg非抗原蛋白)、D组(3μg146S抗原+100μg非抗原蛋白)及E组(空白对照,PBS);同时制备4组猪注射用样品:A组(18μg146S抗原)、B组(18μg146S抗原+400μg非抗原蛋白)、C(18μg146S抗原+4000μg非抗原蛋白)及D组(空白对照,PBS)。免疫接种试验动物后,通过淋巴细胞增殖试验及实时荧光定量PCR评价比较不同疫苗样品组小鼠产生的细胞免疫应答水平,同时通过液相阻断ELISA方法检测、评价各试验组动物(小鼠和猪)产生的体液免疫应答水平。小鼠试验结果显示,在免疫后3个检测时间点内,4个试验组中C组的平均抗体水平最高,平均抗体效价分别为4.13、5.83和5.50,而D组的抗体水平最低,平均抗体效价分别为3.46、5.16和4.46;C组细胞增殖能力及Th-1型细胞因子IL-6、IFN-β和TNF-αmRNA表达量均高于其他组。猪试验结果显示,A组和B组间平均抗体水平差异不显著(P>0.05),但A组和B组的平均抗体效价均极显著高于C组(P<0.01)。综合上述结果表明,一定范围内少量非抗原蛋白对FMDV-A 146S抗原的免疫效果没有影响,而高浓度的非抗原蛋白则抑制FMDV-A 146S抗原的免疫效果。 展开更多
关键词 非抗原蛋白 口蹄疫 146S抗原 免疫效果
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维生素A对肉鸡生长性能、免疫及抗氧化功能的影响 预览
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作者 韩俊英 +3 位作者 闫素梅 李胤豪 史彬林 赵艳丽 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期3582-3589,共8页
本试验旨在研究饲粮中添加不同水平维生素A对肉鸡生长性能、免疫及抗氧化功能的影响。采用单因子完全随机试验设计,选用1日龄健康爱拔益加(AA)肉鸡240只(公母各占1/2),随机分为5个组(在玉米-豆粕型饲粮中分别添加3 000、6 000、15 000、... 本试验旨在研究饲粮中添加不同水平维生素A对肉鸡生长性能、免疫及抗氧化功能的影响。采用单因子完全随机试验设计,选用1日龄健康爱拔益加(AA)肉鸡240只(公母各占1/2),随机分为5个组(在玉米-豆粕型饲粮中分别添加3 000、6 000、15 000、30 000和45 000 IU/kg维生素A),每个组6个重复,每个重复8只鸡,试验期42 d。结果表明:1)饲粮中添加不同水平维生素A对22~42日龄肉鸡的平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)及1~42日龄肉鸡的ADFI均有显著影响(P<0.05),对22~42日龄肉鸡的料重比(F/G)的影响有显著的趋势(0.05≤P<0.10),且22~42日龄和1~42日龄肉鸡的ADFI以及1~42日龄肉鸡的F/G随饲粮维生素A添加水平的增加均呈线性升高(P<0.05或0.05≤P<0.10),3 000 IU/kg组肉鸡增重效果较差,6 000和15 000 IU/kg组肉鸡增重高且F/G低,30 000和45 000 IU/kg组肉鸡ADFI较高、F/G不同程度升高。2)饲粮添加不同水平维生素A对21日龄血清白细胞介素-1(IL-1)和42日龄血清IL-1、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量有显著影响(P<0.05),对42日龄血清白细胞介素-2(IL-2)含量的影响有显著的趋势(0.05≤P<0.10),其中3 000、6 000和45 000 IU/kg组血清免疫因子含量较低,15 000 IU/kg组较高。3)饲粮添加不同水平维生素A对21日龄血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和42日龄血清GSH-Px、过氧化氢酶(CAT)活性有显著影响(P<0.05),且21日龄血清丙二醛(M DA)含量随饲粮维生素A添加水平的增加呈线性升高趋势(0.05≤P<0.10),42日龄血清MDA含量、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性随饲粮维生素A添加水平的增加分别呈显著的一次线性和二次曲线升高(P<0.05),其中45 000 IU/kg组血清MDA含量较高且T-SOD活性较低。综上,本试验条件下添加6 000和15 000 IU/kg的维生素A可使肉鸡获得较好的生长性能,且15 000 IU/kg维生素A可满足肉鸡免疫和抗氧化需要,而添加水平增至30 000和45 000 IU/kg� 展开更多
关键词 肉鸡 维生素A 生长性能 免疫因子 抗氧化功能
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重组犬α6干扰素的酵母表达及其抗病毒活性评价 预览
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作者 宋天琪 侯绍华 +5 位作者 鑫婷 姜一曈 袁维峰 朱鸿飞 贾红 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第7期2144-2150,共7页
试验旨在构建犬α6干扰素毕赤酵母表达系统,并对其进行优化和筛选,以期获得高活性的重组犬α6干扰素(CaIFN-α6)。根据CaIFN-α6基因序列,按毕赤酵母菌密码子偏好性对CaIFN-α6全基因序列进行优化与合成,用XhoⅠ和NotⅠ双酶切将其连接... 试验旨在构建犬α6干扰素毕赤酵母表达系统,并对其进行优化和筛选,以期获得高活性的重组犬α6干扰素(CaIFN-α6)。根据CaIFN-α6基因序列,按毕赤酵母菌密码子偏好性对CaIFN-α6全基因序列进行优化与合成,用XhoⅠ和NotⅠ双酶切将其连接至载体pPICZαA中,构建pPICZαA-CaIFN-α6重组表达质粒,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞。提取质粒pPICZαA-CaIFN-α6并线性化,电转入酵母感受态细胞X33中制备重组菌。采用甲醇进行诱导表达,收集上清,超滤浓缩,最终获得纯化的重组CaIFN-α6。利用BCA法测得纯化后的CaIFN-α6蛋白浓度为1.5 mg/mL,Western blotting分析表明CaIFN-α6蛋白具有良好的反应原性,SDS-PAGE显示其纯度约在95%以上,MDCK/VSV法检测其效价为2.37×10^7 IU/mL,比活性为1.58×10^7 IU/mg。结果表明犬α6干扰素在毕赤酵母pPICZαA表达载体系统中成功表达,且具有较高的生物活性,为后期的犬病毒病的临床预防与治疗提供了良好的支撑。 展开更多
关键词 犬α6干扰素(CaIFN-α6) 真核表达 纯化 抗病毒活性
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营养管理在减重手术中的应用现状分析 预览
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作者 张振美 高艳秋 《循证护理》 2019年第7期599-603,共5页
[目的]分析营养管理在减重手术病人中的应用现状。[方法]计算机检索PubMed数据库中有关营养管理在减重手术中的应用研究,检索时间为1980年1月1日—2017年1月1日,对检索结果进行分析总结。[结果]静息代谢率在减重手术后降低,病人能量摄... [目的]分析营养管理在减重手术病人中的应用现状。[方法]计算机检索PubMed数据库中有关营养管理在减重手术中的应用研究,检索时间为1980年1月1日—2017年1月1日,对检索结果进行分析总结。[结果]静息代谢率在减重手术后降低,病人能量摄入在术后减少,术后常量营养素分布与减重术后体重减轻之间无相关性。营养治疗对减重手术术后病人饮食和运动行为影响的证据有限,病人术后第1年通过营养治疗,超重体重减轻百分比变化明显(60%~80%,约为总体重减轻百分比20%~30%的变化),体质指数减少5%~31%。[结论]减重手术后病人营养素分布与体重减轻无相关性,营养管理在减重术后体重减轻方面具有重要作用。 展开更多
关键词 营养管理 营养师 减重手术 肥胖症 超重体重减轻百分比 体质指数
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鬼箭羽化学成分及体外抗氧化活性研究 预览
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作者 姬瑞芳 全庆华 +5 位作者 张伽妹 王政霖 谭鹏 韩静 刘永刚 《现代中药研究与实践》 CAS 2019年第2期26-29,共4页
目的研究鬼箭羽中的化学成分。方法采用重结晶,层析柱色谱等方法分离纯化鬼箭羽75%的乙醇提取物,并鉴定化合物的结构,用质谱、核磁共振等方法;通过分光光度法测定化合物的DPPH的清除率。结果从鬼箭羽中共分离纯化得到了8个单体化合物,... 目的研究鬼箭羽中的化学成分。方法采用重结晶,层析柱色谱等方法分离纯化鬼箭羽75%的乙醇提取物,并鉴定化合物的结构,用质谱、核磁共振等方法;通过分光光度法测定化合物的DPPH的清除率。结果从鬼箭羽中共分离纯化得到了8个单体化合物,分别为:木栓酮(1)、豆甾醇(2)、24s-豆甾-4-烯-3-酮(3)、α-羟基棕榈酸甲酯(4)、3-(4-羟基-2-甲氧基苯基)-丙烯酸-4-羟基-3-甲氧基苯基酯(5)、山柰酚(6)、槲皮素(7)、原儿茶酸(8)。与Vc相比三种化合物清除DPPH的能力大小顺序为:槲皮素>原儿茶酸>Vc>山柰酚。结论化合物2、4、5为首次在鬼箭羽中分离得到,槲皮素、原儿茶酸的体外抗氧化活性强于Vc。 展开更多
关键词 鬼箭羽 提取分离 抗氧化活性 结构鉴定 化学成分
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呼伦贝尔羔羊及呼杜杂交一代羔羊的肌肉与脂肪组织胆固醇含量比较研究 预览
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作者 于洋 刘树林 +2 位作者 李胤豪 闫素梅 《饲料工业》 北大核心 2019年第1期45-50,共6页
试验旨在比较研究呼伦贝尔羔羊(HL)及呼杜杂交一代羔羊(HZ)的肌肉与脂肪组织的胆固醇含量。采用2×2完全随机试验设计,选择4月龄断奶HL和HZ羔羊各60只,共120只,分为4组,每组30只。因素1为育肥方式,分为NG与GS;因素2为品种,分为HL和H... 试验旨在比较研究呼伦贝尔羔羊(HL)及呼杜杂交一代羔羊(HZ)的肌肉与脂肪组织的胆固醇含量。采用2×2完全随机试验设计,选择4月龄断奶HL和HZ羔羊各60只,共120只,分为4组,每组30只。因素1为育肥方式,分为NG与GS;因素2为品种,分为HL和HZ。育肥期均为60d,分为育肥前期和育肥后期两个阶段。试验结束时,放牧补饲组和自然放牧组中选择接近平均体重的5只羔羊(禁食24h、禁水2h)进行屠宰试验。结果表明:品种显著影响肌肉与脂肪组织的胆固醇含量,HZ羔羊的臂三头肌与股二头肌的胆固醇含量显著或趋于显著地高于HL羔羊(P=0.02、P=0.063),大网膜脂、肾周脂肪、尾脂、肠系膜脂与背脂的胆固醇含量显著或趋于显著低于HL羔羊(P<0.05,0.05<P<0.10)。与NG相比,GS显著增加了羔羊背最长肌和股二头肌胆固醇的含量(P<0.05),显著降低了大网膜脂、肾周脂肪、肠系膜脂及背脂的胆固醇含量(P<0.05)。不同部位的肌肉与脂肪组织其胆固醇的变化规律不完全相同,呼伦贝尔羔羊与呼杜杂交一代羔羊的肌肉与脂肪组织的胆固醇含量存在组织部位的差异。呼杜杂交一代羔羊的臂三头肌与股二头肌的胆固醇含量显著或趋于显著地高于呼伦贝尔羔羊,但大网膜脂、肾周脂肪、尾脂、肠系膜脂与背脂的胆固醇含量显著或趋于显著地低于呼伦贝尔羔羊。 展开更多
关键词 育肥方式 呼伦贝尔羔羊 呼杜杂交一代羔羊 胆固醇 品种
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黑沙蒿对阿尔巴斯白绒山羊体外瘤胃发酵参数的影响 预览
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作者 马国强 张清月 +3 位作者 胡耀 赵艳丽 闫素梅 《饲料工业》 北大核心 2019年第5期11-15,共5页
试验以阿尔巴斯白绒山羊为瘤胃液供体,探讨日粮中添加黑沙蒿对绒山羊体外瘤胃发酵功能的影响,为黑沙蒿在绒山羊生产中的科学使用提供依据。采用单因素随机试验设计,分为5个组,每组6个重复,各处理组中黑沙蒿占底物配比为0(对照组)、1%(试... 试验以阿尔巴斯白绒山羊为瘤胃液供体,探讨日粮中添加黑沙蒿对绒山羊体外瘤胃发酵功能的影响,为黑沙蒿在绒山羊生产中的科学使用提供依据。采用单因素随机试验设计,分为5个组,每组6个重复,各处理组中黑沙蒿占底物配比为0(对照组)、1%(试验1组)、2%(试验2组)、3%(试验3组)和4.5%(试验4组),分别在体外培养3、6、9、12、24 h。结果表明:与对照组相比,添加黑沙蒿可显著提高3 h和6 h体外培养液的pH值(P=0.035、P=0.005),显著提高所有时间点体外培养液的NH3-N浓度(P<0.05);显著提高6、9、24 h体外培养液中BCP(菌体蛋白)的含量(P<0.05),显著降低6、12 h和24 h体外培养液中的原虫数量(P<0.05),显著提高所有时间点的产气量(P<0.05)。由此可见,添加不同水平的黑沙蒿可抑制原虫的繁殖,促进体外瘤胃发酵。综合各指标可知,在各处理组中,以添加3%黑沙蒿的试验3组促进效果最好。 展开更多
关键词 黑沙蒿 瘤胃液pH值 原虫数量 氨氮浓度 微生物菌体蛋白
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维生素A过量对肉鸡早期骨骼钙磷代谢的影响 预览
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作者 闫素梅 +3 位作者 史彬林 李胤豪 韩俊英 赵艳丽 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第6期1660-1667,共8页
试验通过研究维生素A过量对肉鸡早期骨形成生化指标及组织中碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素(BGP)基因表达的影响,旨在为深入研究日粮维生素A过量对肉鸡骨骼钙磷代谢产生负面影响的机理提供理论基础。采用完全随机试验设计,将450只1日龄健康爱... 试验通过研究维生素A过量对肉鸡早期骨形成生化指标及组织中碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素(BGP)基因表达的影响,旨在为深入研究日粮维生素A过量对肉鸡骨骼钙磷代谢产生负面影响的机理提供理论基础。采用完全随机试验设计,将450只1日龄健康爱拔益加(AA)肉鸡(公母各半)称重后随机等分为5个处理组,每个处理6个重复,每个重复15只鸡。各处理组日粮分别在基础日粮中添加3 000、6 000、15 000、30 000和60 000 IU/kg维生素A。试验期28 d,分别于试验第14、28天从每个重复中随机抽取1只鸡,翅静脉采血制备血清后随即宰杀,在冰浴上迅速分离右侧肝脏、十二指肠、空肠、回肠、胫骨组织,-80℃保存备用。试验结果表明,随日粮维生素A添加剂量的升高,肉鸡血清BGP浓度、ALP活性和骨特异性碱性磷酸酶(BAP)活性及胫骨、肝脏及小肠组织中ALP、BGP mRNA相对表达量均呈显著(P<0.05)或趋于显著的一次线性或一元二次(P<0.10)降低,通过回归分析得出:维生素A水平在42 766~47 185 IU/kg时,肉鸡14 d胫骨和肝脏ALP mRNA相对表达量、肝脏BGP mRNA相对表达量,28 d的血清ALP活性及肝脏ALP mRNA相对表达量、胫骨和回肠的BGP mRNA相对表达量最低。综合试验结果,维生素A线性降低了肉鸡早期血清BAP活性;日粮维生素A以剂量依赖模式影响肉鸡早期血清BGP浓度、ALP活性及其在组织中的基因表达,42 766~47 185 IU/kg维生素A对上述指标的降低作用较大,提示日粮维生素A过量可抑制肉鸡早期骨形成相关生化指标的活性,并下调胫骨、肝脏及小肠组织中ALP、BGP mRNA的相对表达量。 展开更多
关键词 维生素A 肉鸡 早期 骨骼 碱性磷酸酶(ALP) 骨钙素(BGP)
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UPLC-LTQ-Orbitrap-MS快速识别驱虫斑鸠菊中多酚类化合物 预览
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作者 王加利 田婧鋆 +5 位作者 顾娟 孙倩倩 张伽妹 王春国 刘永刚 《中国现代中药》 CAS 2019年第7期881-887,共7页
目的:对驱虫斑鸠菊乙醇提取物中的化学成分进行分析鉴定。方法:采用超高效液相色谱-线性离子阱/静电场轨道阱组合式高分辨质谱(UPLC-LTQ-Orbitrap-MS)联用技术,总结驱虫斑鸠菊中黄酮类和咖啡酰奎宁酸类化合物的质谱裂解规律,建立其乙醇... 目的:对驱虫斑鸠菊乙醇提取物中的化学成分进行分析鉴定。方法:采用超高效液相色谱-线性离子阱/静电场轨道阱组合式高分辨质谱(UPLC-LTQ-Orbitrap-MS)联用技术,总结驱虫斑鸠菊中黄酮类和咖啡酰奎宁酸类化合物的质谱裂解规律,建立其乙醇提取物中多酚类成分的快速识别方法,并对其中的化学成分进行识别。结果:从其乙醇提取物中初步鉴定出43种多酚类化合物,其中包括30种黄酮类成分和13种酚酸类成分。结论:有26种化合物是首次在驱虫斑鸠菊中发现。 展开更多
关键词 驱虫斑鸠菊 超高效液相色谱-线性离子阱/静电场轨道阱组合式高分辨质谱 多酚类成分
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UPLC-Qtrap-MS法分析鉴定肉桂水提物给药后大鼠血浆、胆汁、尿液和粪便中的药源性成分
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作者 施梦玲 宋月林 +5 位作者 陈金凤 何珊 屠鹏飞 李军 姜勇 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第21期4720-4727,共8页
研究肉桂水提物主要成分在正常大鼠血浆、胆汁、尿液和粪便中的药源性成分,推测其代谢途径。通过灌胃给予大鼠肉桂水提物后,收集血浆、胆汁、尿液和粪便并进行预处理,采用UPLC-Qtrap-MS技术,综合使用增强型全扫描、母离子扫描、中性丢... 研究肉桂水提物主要成分在正常大鼠血浆、胆汁、尿液和粪便中的药源性成分,推测其代谢途径。通过灌胃给予大鼠肉桂水提物后,收集血浆、胆汁、尿液和粪便并进行预处理,采用UPLC-Qtrap-MS技术,综合使用增强型全扫描、母离子扫描、中性丢失扫描以及多离子监测等模式,从复杂生物基质中快速筛选目标成分。通过与对照品比对保留时间、相对分子质量和碎片离子以及分析总结文献报道的肉桂中原型成分的裂解规律,进行代谢产物解析。灌胃给药后,大鼠体内共检测并初步鉴定了5个原型成分和76个可能的代谢产物,包括原花青素类及其代谢产物44个,木脂素类代谢产物29个,二萜类成分3个,其他类成分5个。肉桂水提物中化学成分在大鼠体内的代谢途径主要包括脱糖基化、甲基化、硫酸化和葡萄糖醛酸化反应。该研究有助于阐明肉桂体内吸收代谢机制,为其临床应用以及进一步的开发提供有益参考。 展开更多
关键词 肉桂 水提物 UPLC-Qtrap-MS 代谢产物 原花青素 木脂素 二萜
非洲猪瘟病毒Georgia 2007/1株CD2v蛋白的原核表达及多克隆抗体制备 预览
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作者 任肖 吴竞 +4 位作者 于海男 林伟东 侯绍华 朱鸿飞 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第12期3698-3706,共9页
本研究旨在通过原核表达系统表达非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)Georgia 2007/1株EP 402 R基因,获得其编码的CD2v重组蛋白,并针对纯化的CD2v重组蛋白制备多克隆抗体。将ASFV EP 402 R全长基因进行密码子优化后连入pET-28... 本研究旨在通过原核表达系统表达非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)Georgia 2007/1株EP 402 R基因,获得其编码的CD2v重组蛋白,并针对纯化的CD2v重组蛋白制备多克隆抗体。将ASFV EP 402 R全长基因进行密码子优化后连入pET-28a(+)表达载体,构建原核重组表达质粒,经1 mmol/L IPTG于16℃诱导12 h后,利用SDS-PAGE和Western blotting对重组蛋白进行表达鉴定和反应原性分析。以纯化的CD2v重组蛋白为免疫原制备鼠源抗CD2v多克隆抗体,随后以间接ELISA方法、间接免疫荧光试验及Western blotting分别检测多克隆抗体的效价和特异性。结果显示,ASFV EP 402 R基因克隆至pET-28a(+)获得pET-28a-EP402R重组质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞后经诱导表达获得CD2v重组蛋白,其大小约为47 ku,重组蛋白主要以包涵体形式存在,部分也可以融合表达蛋白形式存在。Western blotting结果显示,其可溶性上清经镍柱纯化后能被ASFV阳性血清识别,具有良好的反应原性。间接ELISA检测该多克隆抗体效价可达1∶512000,间接免疫荧光试验和Western blotting表明该多克隆抗体可特异性识别真核表达的CD2v蛋白。以上结果表明,通过原核表达的ASFV CD2v重组蛋白具有较好的免疫原性,利用重组蛋白制备的多克隆抗体具有较高的抗体效价和特异性,为进一步研究ASFV EP402R生物学功能及基因缺失毒株的鉴别诊断和疫苗开发提供技术储备。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒(ASFV) EP 402 R基因 CD2v重组蛋白 原核表达 多克隆抗体
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耐候桥梁钢腐蚀力学行为研究及其应用进展
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作者 朱劲松 +1 位作者 亢景付 侯华兴 《中国公路学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第5期1-16,共16页
耐候钢以其优越的耐久性受到了桥梁设计者的重视和广泛关注,扩大耐候钢桥在中国的应用已成为必然趋势。鉴于目前中国耐候钢桥设计理论和方法匮乏的现状,通过调研国内外耐候钢和耐候钢桥研究文献,主要参考美国、日本和欧洲耐候钢桥建设经... 耐候钢以其优越的耐久性受到了桥梁设计者的重视和广泛关注,扩大耐候钢桥在中国的应用已成为必然趋势。鉴于目前中国耐候钢桥设计理论和方法匮乏的现状,通过调研国内外耐候钢和耐候钢桥研究文献,主要参考美国、日本和欧洲耐候钢桥建设经验,对耐候钢的应用研究现状以及耐候钢桥设计方法进行综述。重点阐述环境与荷载耦合作用下耐候钢的腐蚀机理、耐候钢腐蚀后的力学性能退化、耐候钢桥设计理论和细节设计方法等内容,总结和分析已有研究所取得的成果和尚存的问题。分析表明:当大气中Cl-和SO2浓度分别低于3,20 mg·(m^2·d)^-1或者非海洋大气环境中大气腐蚀等级为C2,C3时,可以裸装应用耐候钢;荷载作用下保护锈层存在开裂和脱落现象,锈层开裂为氧气扩散提供了通道,减弱了其对基体的保护能力,导致钢材进一步锈蚀,并且易发生局部腐蚀;裸装应用的耐候钢在使用不当时会产生较严重的腐蚀,从而导致力学性能退化,尤其是在应力腐蚀和腐蚀疲劳状态下其力学性能退化更为严重;钢桥细节设计方法对保证耐候钢的耐蚀性至关重要,定期维护可以延长结构的使用寿命;应用耐候钢可使钢桥全寿命周期成本显著降低。分析结果旨在为今后中国耐候钢耐蚀机理和力学性能的研究探明方向,并为耐候钢桥的设计和建造提供有效借鉴和参考。 展开更多
关键词 桥梁工程 耐候钢桥 综述 腐蚀机理 力学性能 设计理论和方法
基于案例的C程序设计实验教学的探索 预览
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作者 樊新华 +1 位作者 陈洪军 《现代计算机》 2019年第2期77-81,共5页
《C程序设计》是一门实践性很强的计算机基础课程,也是后续课程的基础。以验证为主的实验教学,并不适应现在教学要求。根据实际教学目标和实验教学特点,提出实验专题案例教学方法,即通过一个具体的实际专题案例,说明专题案例的设计、实... 《C程序设计》是一门实践性很强的计算机基础课程,也是后续课程的基础。以验证为主的实验教学,并不适应现在教学要求。根据实际教学目标和实验教学特点,提出实验专题案例教学方法,即通过一个具体的实际专题案例,说明专题案例的设计、实验教学的全过程。在专题案例设计中,所提问题的知识点前后相关、难度依次加强;在专题案例实验教学中,对不同问题提出不同要求并实现编程,以培养学生分析实际问题能力和创新思维。实践表明,分层专题案例实践教学可以增强学生的分析问题和编程能力,提高实验教学效果。 展开更多
关键词 程序设计 案例设计 实验教学 实验考核
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响应面法优化蒙药瞿麦中总生物碱提取工艺研究 预览
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作者 马岚 王来兵 +7 位作者 王敏 李冰 陈建平 白文明 钮松召 岳锦瑞 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期232-238,共7页
研究了响应面法优化蒙药瞿麦总生物碱的最佳提取工艺。采用紫外-可见分光光度法,以总生物碱含量作为评价指标,用Box-Behnken响应面设计考察各因素对其影响,对结果进行二项式拟合及响应曲面分析得到最佳提取工艺。结果表明:蒙药瞿麦中总... 研究了响应面法优化蒙药瞿麦总生物碱的最佳提取工艺。采用紫外-可见分光光度法,以总生物碱含量作为评价指标,用Box-Behnken响应面设计考察各因素对其影响,对结果进行二项式拟合及响应曲面分析得到最佳提取工艺。结果表明:蒙药瞿麦中总生物碱的最佳提取工艺为超声温度53℃,料液比1∶31g/mL,超声时间41min,超声功率140W。四因素影响顺序为料液比>超声温度>超声功率>超声时间。此方法简便、快速、灵敏,结果准确可靠,优化后的提取工艺稳定可行,且具有提取率高、提取时间短等优点,对今后的科研工作有一定参考价值。 展开更多
关键词 蒙药瞿麦 响应面优化 总生物碱 工艺条件 超声提取
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环测仪电池组质量问题分析及对策
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作者 鸿 《气体分离》 2019年第3期59-60,共2页
本文就山西汾西重工有限责任公司生产的环测仪在储存过程中存在环测仪显示屏无法正常显示,经过排查为电池组容量存在质量问题并提出了解决措施,有效避免了问题的再次发生。
关键词 环测仪 电池组 质量问题 对策
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