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乌兹别克斯坦引进棉花种质资源抗旱性比较及相关分子标记筛选 预览
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作者 叶春秀 曾强 +4 位作者 田又升 王志军 于航 庄振刚 谢宗铭 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第3期495-498,共4页
【目的】通过抗旱性相关指标测定及比较,对引进棉花种质抗旱性做出评价,并初步筛选相关分子标记。【方法】以引进的7份棉花种质为研究对象,在苗期进行相应的干旱处理,测定SOD、POD、CAT活性分析、MDA含量、超氧阴离子含量、可溶性蛋白... 【目的】通过抗旱性相关指标测定及比较,对引进棉花种质抗旱性做出评价,并初步筛选相关分子标记。【方法】以引进的7份棉花种质为研究对象,在苗期进行相应的干旱处理,测定SOD、POD、CAT活性分析、MDA含量、超氧阴离子含量、可溶性蛋白含量、APX等指标,评价引进种质的抗旱性强弱,并进行验证。【结果】引进的几份种质中,种质引4、引20、引23是耐旱性较强的,种质引22稍弱,其它种质属于干旱敏感性种质,盆栽抗旱性验证结果与生理生化指标测定分析结果具有一致性,同时初步筛选得到一个与抗旱性相关的标记,有待进一步进行验证。【结论】种质资源抗旱性的评价将为进一步利用种质进行育种提供依据,分子标记的筛选将为辅助育种提供方法。 展开更多
关键词 棉花 种质 抗旱 分子标记
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棉花诱变种质Gh14-3-3L基因的Eco-TILLING分析 预览
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作者 叶春秀 王志军 +3 位作者 曾强 庄振刚 马盼盼 杨永林 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第4期728-733,共6页
【目的】为了验证前期建立的诱变体系和鉴定技术在棉花种质资源创制方面的效果。【方法】本实验利用Eco-TILLING技术和测序技术,对诱变获得的棉花材料纤维相关基因进行分析。【结果】与纤维相关的基因Gh14-3-3L在对照和诱变材料上获得... 【目的】为了验证前期建立的诱变体系和鉴定技术在棉花种质资源创制方面的效果。【方法】本实验利用Eco-TILLING技术和测序技术,对诱变获得的棉花材料纤维相关基因进行分析。【结果】与纤维相关的基因Gh14-3-3L在对照和诱变材料上获得了不同的SNP位点变异,在石引150材料上的扩增产物存在1个SNP位点差异,位于320bp处;石引200材料的扩增产物存在2个SNP位点,分别位于320和380bp处;石引250材料扩增产物与对照存在1个SNP位点,位于320bp处,并且经过酶切和测序结果得到了验证。蛋白比对显示其中1个SNP位点的改变导致开放阅读框(ORF)变短,氨基酸数目减少,蛋白结构发生改变,其结构功能有待于进一步研究;连续3年纤维检测数据显示石引200材料与对照之间存在差异性,推断可能与SNP位点变异有关,研究结果将为深入研究SNP位点变异与绒长改变之间的关联性奠定基础。【结论】建立的诱变体系和鉴定技术能够用于棉花种质资源的创制,所得材料在表型性状和分子水平都发生了变化,为深入研究棉花种质资源的创制提供了新的方法和鉴定技术。 展开更多
关键词 棉花 纤维 Eco-Tilling分析 诱变
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雷蒙德氏棉和亚洲棉Alfin-like PHD finger家族的生物信息学分析
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作者 马盼盼 曾强 +2 位作者 叶春秀 孙国清 谢宗铭 《分子植物育种》 CSCD 北大核心 2018年第3期724-732,共9页
Alfin-like PHD finger是植物中特有的一类转录调控因子,在调控植物生长发育、非生物胁迫响应及抗病反应等过程中起重要作用。为全面了解Alfin-like PHD finger基因家族在雷蒙德氏棉和亚洲棉基因组中的数目、分布情况及家族各成员间的关... Alfin-like PHD finger是植物中特有的一类转录调控因子,在调控植物生长发育、非生物胁迫响应及抗病反应等过程中起重要作用。为全面了解Alfin-like PHD finger基因家族在雷蒙德氏棉和亚洲棉基因组中的数目、分布情况及家族各成员间的关系,进而研究和揭示Alfin-like PHD finger在棉花抵抗逆境胁迫中的作用。运用生物信息学的方法在雷蒙德氏棉(D5)和亚洲棉(A2)全基因组中分别鉴定出12个和10个Alfin-like PHD finger基因家族成员,并对家族成员的基因结构、染色体定位、保守结构域及进化关系等方面进行分析。结果表明,雷蒙德氏棉和亚洲棉中Alfin-like PHD finger转录因子具有高度保守的DUF3594结构域和PHD结构域,两个二倍体棉花中该家族基因成员之间为一对一关系;雷蒙德氏棉中的12个成员基因分布在5条染色体上,亚洲棉中的10个成员基因也分布在5条染色体上;亚细胞定位预测发现,该家族的基因分别定位于细胞核、叶绿体基质、过氧化物酶体和细胞质基质;根据结构域差异和系统发育分析结果,将Alfin-like PHD finger转录因子家族分为3个进化分支。上述结果为分离鉴定棉花中新的逆境胁迫响应基因提供参考。 展开更多
关键词 Alfin-like PHD FINGER 雷蒙德氏棉 亚洲棉 生物信息学
一种室内快速鉴定棉花苗期黄萎病抗性的新方法——无纺布育苗袋接种法 预览
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作者 张国丽 李全胜 +4 位作者 田又升 曾强 马盼盼 于航 谢宗铭 《西北农业学报》 CSCD 北大核心 2018年第2期155-162,共8页
为了快速准确筛选棉花抗黄萎病品种,为抗病育种提供理论支撑,利用植物根系可伸出无纺布育苗袋特点,将棉花种植于育苗袋中,接种时将伸出育苗袋的根系造成创伤,于黄萎病菌孢子悬浮液(孢子数密度为107 cfu/mL)中浸蘸1s。结果表明,接种后... 为了快速准确筛选棉花抗黄萎病品种,为抗病育种提供理论支撑,利用植物根系可伸出无纺布育苗袋特点,将棉花种植于育苗袋中,接种时将伸出育苗袋的根系造成创伤,于黄萎病菌孢子悬浮液(孢子数密度为107 cfu/mL)中浸蘸1s。结果表明,接种后于第7天棉花植株开始发病,第20~25天病情稳定;利用该方法对16个棉花品种进行接种鉴定,试验表明,该方法能够快速准确区分16个棉花品种的抗、感病情况。无纺布育苗袋接种无需剪底,移苗等繁琐伤根过程,简单快速,易操作,不影响棉花正常生长,接种后发病均匀,鉴定结果准确可靠。 展开更多
关键词 抗病性鉴定 棉花黄萎病 无纺布育苗袋 接种
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早熟、高产陆地棉新品种新垦棉1号的选育及栽培技术 预览
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作者 王志军 董永梅 +3 位作者 李有忠 曾强 孙国清 谢宗铭 《中国棉花》 2018年第4期30-31,共2页
新垦棉1号是由新疆农垦科学院生物技术研究所和甘肃省农业科学院黄羊试验场联合选育的早熟、高产、优质陆地棉常规种,2018年1月通过甘肃省农作物品种审定委员会审定。简要介绍了其选育过程、特征特性和栽培要点。
关键词 棉花品种 新垦棉1号 丰产 栽培技术
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棉花蕾期至初花期抗旱性评价及指标筛选 预览
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作者 田又升 叶春秀 +7 位作者 张国丽 董永梅 李全胜 王志军 曾强 马盼盼 孙国清 谢宗铭 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2018年第2期306-312,共7页
【目的】筛选棉花抗旱性综合评价指标,为棉花抗旱品种选育提供理论依据。【方法】以68个棉花品种(系)为材料,在蕾期至初花期进行干旱处理,测定株高、茎粗、叶面积、荧光参数、产量等17个指标,评价棉花抗旱性并筛选抗旱性评价指标。【... 【目的】筛选棉花抗旱性综合评价指标,为棉花抗旱品种选育提供理论依据。【方法】以68个棉花品种(系)为材料,在蕾期至初花期进行干旱处理,测定株高、茎粗、叶面积、荧光参数、产量等17个指标,评价棉花抗旱性并筛选抗旱性评价指标。【结果】(1)品种(系)间变异系数较大的指标为Y(NO)和电导率,说明Y(NO)和电导率对干旱胁迫的敏感性存在较大的品种差异。(2)采用隶属函数值评价棉花品种(系)的抗旱性,在68份材料中,高抗材料7份,中抗材料20份,弱抗材料41份。(3)主成分分析将17个指标归类为3大因子,第一类因子中F_v/F_m、Y(NPQ)和Φ_(PSⅡ),第二类因子中茎粗、电导率和第三类因子中叶背面气孔数量、叶正面气孔面积为负荷量较大的指标,可作为棉花蕾期至初花期抗旱性鉴定指标。【结论】可采用F_v/F_m、Y(NPQ)、Φ_(PSⅡ)、茎粗、电导率、叶背面气孔数量和叶正面气孔面积综合评价棉花蕾期至初花期的抗旱性。 展开更多
关键词 棉花 干旱胁迫 评价指标
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机采杂交棉宽行稀植栽培模式的优势及应用效果 预览
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作者 王志军 董永梅 +3 位作者 李有忠 曾强 孙国清 谢宗铭 《贵州农业科学》 CAS 2018年第8期41-45,共5页
机采杂交棉宽行稀植栽培模式是新疆杂交棉的创新栽培模式。该模式是以杂交棉良种为基础,培育壮苗为前提,田间配套管理为措施,病虫害综合防治为儇证,常规水肥管理和全程化学调控等为手段实现棉花高产优质的一种栽培模式。为机采杂交... 机采杂交棉宽行稀植栽培模式是新疆杂交棉的创新栽培模式。该模式是以杂交棉良种为基础,培育壮苗为前提,田间配套管理为措施,病虫害综合防治为儇证,常规水肥管理和全程化学调控等为手段实现棉花高产优质的一种栽培模式。为机采杂交棉宽行稀植栽培模式的进一步推广应用提供参考,从棉株冠层结构合理,生育进程加快;种植效益升高,杂种优势凸显;株行距配置合适,光能利用率较高等方面总结了机采杂交棉宽行稀植栽培模式的优势;从品种选择、规范种植和田间管理等方面介绍了进行机采杂交棉宽行稀植栽培的条件;并对其应用效果和应用前景进行了介绍和展望,同时提出了进一步应用该栽培模式的建议。 展开更多
关键词 杂交棉 宽行稀植 栽培方式 杂种优势
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棉花GhTGA1与GhTGA9.2基因克隆及表达特征分析 预览
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作者 曾强 李潇玲 +2 位作者 张析 张薇 练文明 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2018年第5期82-88,共7页
为了揭示棉花GhTGA1与GhTGA9.2基因的生物学功能,利用RT-PCR技术,从抗枯萎病棉花品种中棉所12号中克隆了TGA转录因子基因GhTGA1与GhTGA9.2。生物信息学分析表明,2个基因开放阅读框(ORF)长分别为1281,1461bp,分别编码405,486个氨基酸。... 为了揭示棉花GhTGA1与GhTGA9.2基因的生物学功能,利用RT-PCR技术,从抗枯萎病棉花品种中棉所12号中克隆了TGA转录因子基因GhTGA1与GhTGA9.2。生物信息学分析表明,2个基因开放阅读框(ORF)长分别为1281,1461bp,分别编码405,486个氨基酸。序列分析表明,2个基因均含有bZIP和DOG1结构域,属于bZIP亚家族TGA转录因子基因。利用实时荧光定量(qRT-PCR)技术进行表达特征分析表明,GhTGA1基因能被枯萎病菌、乙烯(ET)、茉莉酸(JA)诱导上调表达,水杨酸(SA)诱导后,在各处理时间点,该基因表达量均低于Mock,以上结果表明,GhTGA1基因可能通过参与乙烯(ET)和茉莉酸(JA)信号通路调控棉花对枯萎病的抗性;枯萎病处理后,GhTGA9.2基因在各时间点表达量均低于Mock,呈下调表达,但能被激素(ET、JA、SA)诱导上调表达。结果表明,GhTGA9.2基因可能通过激素(ET、JA、SA)途径参与胁迫应答,通过对GhTGA1与GhTGA9.2基因表达特征分析为后续研究提供基础。 展开更多
关键词 棉花 TGA转录因子 GhTGA1与GhTGA9.2克隆 表达分析
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海岛棉GbRLCK10基因克隆及表达分析 预览 被引量:3
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作者 曾强 孙国清 +4 位作者 张国丽 马盼盼 王志军 叶春秀 谢宗铭 《西北植物学报》 CSCD 北大核心 2017年第11期2130-2138,共9页
该研究以拟南芥抗逆基因At1g67520为探针,利用海岛棉ESTs数据库,通过电子克隆获得海岛棉RLCK家族基因GbRLCK10,解析该基因组结构,并结合qRT-PCR技术分析该基因mRNA的组织表达特征以及在不同胁迫诱导下的表达模式,为揭示RLCK家族基因在... 该研究以拟南芥抗逆基因At1g67520为探针,利用海岛棉ESTs数据库,通过电子克隆获得海岛棉RLCK家族基因GbRLCK10,解析该基因组结构,并结合qRT-PCR技术分析该基因mRNA的组织表达特征以及在不同胁迫诱导下的表达模式,为揭示RLCK家族基因在海岛棉中的表达调控及作用机制提供理论依据。结果显示:(1)获得海岛棉类受体胞质激酶(RLCK)基因,其开放阅读框(ORF)为1179bp,编码392个氨基酸,具有典型的Serine/Threonine结构域,属于RLCK家族,与GaRLCK10(XP_017604046.1)亲缘关系较近,命名为GbRLCK10(登录号2022184),且该基因由5个外显子和4个内含子组成。(2)实时荧光定量(qRT-PCR)检测显示,GbRLCK10基因在抗病品种‘新海21’和感病品种‘新海14’的根、茎、叶中均有表达;当黄萎病菌诱导后,GbRLCK10基因在抗病品种中对于病原菌的响应时间早于感病品种,且对黄萎病菌响应更强烈,推测该基因参与棉花对黄萎病的响应;盐(NaCl)、干旱(PEG-6000)处理‘新海21’后,GbRLCK10基因在NaCl处理下响应时间要早于PEG-6000处理,但对PEG-6000处理响应更强烈;分别用4种激素处理‘新海21’后,GbRLCK10均能被诱导表达,且在水杨酸(SA)处理后,GbRLCK10基因表现为先增加后下降再增加趋势,在乙烯(ET)处理后GbRLCK10基因表达量为持续上升趋势,在茉莉酸甲酯(MeJA)处理后,GbRLCK10基因呈先升高然后下降的趋势,但GbRLCK10基因对赤霉素(GA3)响应不明显。研究表明,GbRLCK10基因具有RLCK基因家族典型特征,该基因随黄萎病菌、NaCl、干旱、激素处理时间推移而发生变化,推测GbRLCK10基因可能参与了棉花对黄萎病菌、NaCl、干旱、激素胁迫的应答反应,但其功能仍需进一步研究。 展开更多
关键词 棉花 类受体胞质激酶 GbRLCK10基因克隆 表达分析
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北疆早熟棉主要农艺性状相关性和主成分分析 预览
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作者 李有忠 叶春秀 +3 位作者 王志军 董永梅 曾强 谢宗铭 《绿洲农业科学与工程》 2017年第4期11-15,共5页
本研究对北疆早熟棉品比试验中14个品种的10个农艺性状进行相关分析及主成分分析.相关分析表明,产 量与单铃重呈显著相关,与生育期、衣分、始节高、株高、果枝数、铃数呈正相关,但未达到显著程度,与绒长、始节位呈负 相关;主成分分析表... 本研究对北疆早熟棉品比试验中14个品种的10个农艺性状进行相关分析及主成分分析.相关分析表明,产 量与单铃重呈显著相关,与生育期、衣分、始节高、株高、果枝数、铃数呈正相关,但未达到显著程度,与绒长、始节位呈负 相关;主成分分析表明,前5个主成分的累积贡献率是91.095 8%. 展开更多
关键词 北疆棉区 早熟棉 农艺性状 相关分析 主成分分析
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棉花抗枯萎病相关转录因子基因GhERFB101的克隆与表达分析 预览 被引量:5
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作者 韩泽刚 曾强 +3 位作者 何兰兰 柴蒙亮 李会会 张薇 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2015年第1期66-72,共7页
为了探究ERF转录因子家族与棉花枯萎病抗性之间的关系,也为海岛抗枯萎病品种的选育工作提供新的基因资源,从Solexa高通量测序技术建立的棉花基因表达谱中筛选探针序列,通过电子克隆结合RT-PCR技术从高抗枯萎病的棉花品种中棉所12中... 为了探究ERF转录因子家族与棉花枯萎病抗性之间的关系,也为海岛抗枯萎病品种的选育工作提供新的基因资源,从Solexa高通量测序技术建立的棉花基因表达谱中筛选探针序列,通过电子克隆结合RT-PCR技术从高抗枯萎病的棉花品种中棉所12中克隆到一个新的 ERF-B1亚组转录因子基因,命名为 GhERFB101( GenBank:KF850521)。序列分析表明,该基因开放阅读框738 bp,编码245个氨基酸,含有一个保守的AP2/ERF结构域,在进化上与拟南芥AtERF11的亲缘关系最近。实时荧光定量PCR分析显示,枯萎病菌诱导后,GhERFB101基因在抗病品种根中的表达量呈现下降趋势;而在感病品种中,该基因呈上调表达,随着病菌处理后时间延长,其表达量呈现先增加后降低的变化趋势,在病菌处理后12 h表达量达到最大,在48 h下降到最低。乙烯和茉莉酸诱导后,该基因表达量均呈现明显的先增加后降低的变化趋势,在乙烯处理后2h基因的表达量达到最大;茉莉酸则在处理后1h基因的表达量达到最大;而水杨酸诱导后基因的变化幅度不大;推测该基因可能通过茉莉酸、乙烯信号传导途径参与对枯萎病菌的防御反应。 展开更多
关键词 棉花 ERF-B1转录因子 枯萎病菌 基因克隆 表达分析
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枯萎病菌诱导感、抗陆地棉品种的转录因子表达变化 预览 被引量:2
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作者 韩泽刚 曾强 +3 位作者 何兰兰 柴蒙亮 李会会 张薇 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期228-239,共12页
以陆地棉抗病品种中棉所12和感病品种新陆早7号为材料,利用Solexa高通量测序技术调查枯萎病菌诱导后不同时间感、抗陆地棉品种转录因子家族及转录因子的表达情况。结果表明,枯萎病菌诱导后,抗病品种中棉所12有39个转录因子家族的433个... 以陆地棉抗病品种中棉所12和感病品种新陆早7号为材料,利用Solexa高通量测序技术调查枯萎病菌诱导后不同时间感、抗陆地棉品种转录因子家族及转录因子的表达情况。结果表明,枯萎病菌诱导后,抗病品种中棉所12有39个转录因子家族的433个转录因子在至少一个比对组中表达活性发生变化;感病品种新陆早7号则有52个转录因子家族的588个转录因子在至少一个比对组中表达活性发生变化。新陆早7号对枯萎病菌响应的转录因子及转录因子家族的数目明显多于中棉所12,且2个品种的下调基因数目均多于上调基因。随着枯萎病菌诱导后时间延长,两品种对枯萎病菌诱导响应的转录因子家族及转录因子数量均呈现先增加后降低的变化趋势,中棉所12在枯萎病菌诱导后6 h达最多,而新陆早7号在诱导后3 h达最多。在6个比对组中,表达活性均发生变化的重叠转录因子,中棉所12中有9个,隶属于6个转录因子家族;新陆早7号中有31个,隶属于17个转录因子家族。不同抗病性品种对枯萎病的响应有较强的品种特异性,除37个共有的转录因子家族外,2个转录因子家族是中棉所12所特有,15个转录因子家族是新陆早7号所特有。 展开更多
关键词 陆地棉 枯萎病 Solexa测序 转录因子
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棉花GhWRKY44基因的克隆与表达分析 预览 被引量:2
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作者 曾强 韩泽刚 +3 位作者 李会会 李潇玲 张析 张薇 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期10-15,共6页
该研究以枯萎病菌诱导棉花根部基因表达谱中筛选得到的WRKY基因片段为探针,通过电子克隆结合RT-PCR技术,从高抗枯萎病品种‘中棉所12’中克隆到1个与抗枯萎病相关的WRKY转录因子基因GhWRKY44(GenBank登录号KJ801807)。序列分析表明,Gh... 该研究以枯萎病菌诱导棉花根部基因表达谱中筛选得到的WRKY基因片段为探针,通过电子克隆结合RT-PCR技术,从高抗枯萎病品种‘中棉所12’中克隆到1个与抗枯萎病相关的WRKY转录因子基因GhWRKY44(GenBank登录号KJ801807)。序列分析表明,GhWRKY44基因开放阅读框1 197bp,编码398个氨基酸,含有2个WRKY结构域及C2H2型锌指结构,属于棉花WRKY转录因子家族第Ⅰ类;系统进化分析显示,GhWRKY44基因与拟南芥AtWRKY44亲缘关系最近。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测该基因表达特性,结果发现枯萎病菌诱导后,GhWRKY44基因在抗病品种中优势表达,随处理后时间的推移,其表达量呈先增加后降低再增加的变化趋势,处理后3h时GhWRKY44基因表达量达到最大;而在感病品种中,GhWRKY44基因表达水平明显低于抗病品种,对病原菌响应时间也晚于抗病品种,处理后6h时GhWRKY44基因表达量才达到最大。水杨酸和茉莉酸均能诱导GhWRKY44基因的表达,水杨酸诱导后,GhWRKY44基因表达量迅速增加,且其表达量一直维持在一个较高水平;而茉莉酸诱导后,GhWRKY44基因表达量呈先增加后降低的变化趋势,且其表达水平明显低于水杨酸诱导。研究表明,GhWRKY44基因可能参与了棉花对病原菌和激素胁迫的应答反应。 展开更多
关键词 棉花 WRKY转录因子 枯萎病菌 基因克隆 表达分析
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应用Solexa测序技术分析棉花不同抗病品种的数字表达谱 预览 被引量:4
14
作者 韩泽刚 曾强 +3 位作者 何兰兰 柴蒙亮 李会会 张薇 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期651-662,共12页
棉花枯萎病是一种危害严重的世界性病害,构建棉花枯萎病不同抗病品种的基因表达谱将为进一步研究棉花抗枯萎病的分子调控机制及筛选抗枯萎病相关基因奠定基础。本研究选用高抗枯萎病的陆地棉品种中棉所12和高感枯萎病的陆地棉品种新陆早... 棉花枯萎病是一种危害严重的世界性病害,构建棉花枯萎病不同抗病品种的基因表达谱将为进一步研究棉花抗枯萎病的分子调控机制及筛选抗枯萎病相关基因奠定基础。本研究选用高抗枯萎病的陆地棉品种中棉所12和高感枯萎病的陆地棉品种新陆早7号为材料,利用Solexa高通量测序技术分析棉花幼苗根部组织中的基因表达情况。Solexa高通量测序后构建了多达350万个reads的标签文库,根据已知序列信息,显著差异表达基因1 080个,其中上调基因302个,下调基因778个。基因功能分析表明,已注释的显著差异表达基因可划分为分子功能、生物过程和细胞组件3个功能注释本体,并进一步细分为37个功能类别。鉴定出112条代谢通路,注释了1 238个显著差异表达基因,共涉及氨基酸代谢、多糖的生物合成和代谢、脂类代谢、能量代谢及信号转导等方面。在植物激素信号转导通路分析中,涉及到26个已知功能基因,4个基因编码AP2/ERF转录因子,4个基因与LRR类受体丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶或蛋白激酶有关,5个基因与蛋白磷酸酶2C有关,而这些基因都参与植物的抗病反应。随机抽取5个基因进行实时荧光定量PCR验证,其结果与测序结果一致。本研究初步揭示了棉花枯萎病抗感品种在转录组水平上的表达差异,获得了大量差异表达基因。 展开更多
关键词 陆地棉 枯萎病 Solexa 基因表达谱
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棉花抗枯萎病相关GhB301基因对烟草的遗传转化及功能分析 预览 被引量:1
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作者 何兰兰 柴蒙亮 +2 位作者 韩泽刚 曾强 张薇 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期589-594,共6页
【目的】ERF是乙烯信号传导途径中的重要转录因子,在植物与病原菌互作中发挥着重要的调控作用。棉花抗枯萎病相关Gh B301基因是从棉花中获得的ERF-B3亚组基因,探索该基因在烟草异位表达后的功能,为进一步研究其在棉花抗枯萎病中的功能... 【目的】ERF是乙烯信号传导途径中的重要转录因子,在植物与病原菌互作中发挥着重要的调控作用。棉花抗枯萎病相关Gh B301基因是从棉花中获得的ERF-B3亚组基因,探索该基因在烟草异位表达后的功能,为进一步研究其在棉花抗枯萎病中的功能奠定基础。【方法】以p PZP35S表达载体为基础,构建Gh B301的过表达载体;采用农杆菌介导法转化烟草并获得转基因植株。【结果】经卡那霉素筛选、PCR和RT-PCR检测,获得3株转基因阳性植株;q PCR分析显示,转基因阳性植株中部分病程相关蛋白基因的表达量较野生型明显升高。【结论】棉花抗枯萎病相关基因Gh B301在烟草中异位表达后可能会通过增强部分病程相关蛋白基因的表达来提高植株抗病性。 展开更多
关键词 GhB301基因 遗传转化 病程相关蛋白基因 实时荧光定量PCR
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棉花GhWRKY106-1的克隆与表达分析
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作者 李会会 曾强 +3 位作者 韩泽刚 张析 李潇玲 张薇 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期2461-2468,共8页
为了研究WRKY转录因子对棉花抗枯萎病的作用机理,发掘抗枯萎病基因资源,本实验以枯萎病菌诱导棉花根部基因表达谱中筛选出的WRKY基因片段为探针,利用电子克隆结合RT-PCR技术,从陆地棉"中棉所12"根部c DNA克隆得到一个WRKY基因... 为了研究WRKY转录因子对棉花抗枯萎病的作用机理,发掘抗枯萎病基因资源,本实验以枯萎病菌诱导棉花根部基因表达谱中筛选出的WRKY基因片段为探针,利用电子克隆结合RT-PCR技术,从陆地棉"中棉所12"根部c DNA克隆得到一个WRKY基因,命名为Gh WRKY106-1(登录号:KP202869)。序列分析表明,该基因开放阅读框全长918 bp,编码306个氨基酸,含有1个WRKY结构域和一个典型的C2HC锌指结构,属于典型的第Ⅲ类WRKY家族转录因子。q RT-PCR检测该基因在"中棉所12号"中的表达特性结果分析表明:枯萎病菌诱导后,该基因的表达量表现出先升高后降低的趋势,并且在处理后3 h基因的表达量达到最大。激素处理:茉莉酸(JA)、水杨酸(SA)和乙烯(ET)胁迫后Gh WRKY106-1基因表达量均发生变化,其中茉莉酸在处理后4 h基因的表达量达到最大,而水杨酸和乙烯诱导响应最强烈的时间均在3 h;并且水杨酸诱导Gh WRKY106-1基因的表达较茉莉酸强烈,而乙烯的表达量在处理前期又明显高于水杨酸和茉莉酸,因此推测该基因在棉花对枯萎菌的抗性反应中起着一定作用,可为今后棉花抗枯萎病研究提供依据。 展开更多
关键词 陆地棉 基因克隆 WRKY转录因子 基因表达
枯萎病菌诱导感、抗陆地棉品种的基因表达谱分析 预览 被引量:2
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作者 韩泽刚 曾强 +3 位作者 李会会 张析 李潇玲 张薇 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1201-1211,共11页
选用陆地棉抗枯萎病品种中棉所12和感枯萎病品种新陆早7号,利用Solexa高通量测序技术分析棉花幼苗受到枯萎病菌侵染后3 h和6 h根部组织的基因表达谱。中棉所12受病菌侵染后3 h与0 h相比,6 h与0 h相比以及6 h与3 h相比,分别鉴定出4447、5... 选用陆地棉抗枯萎病品种中棉所12和感枯萎病品种新陆早7号,利用Solexa高通量测序技术分析棉花幼苗受到枯萎病菌侵染后3 h和6 h根部组织的基因表达谱。中棉所12受病菌侵染后3 h与0 h相比,6 h与0 h相比以及6 h与3 h相比,分别鉴定出4447、5481和2559个差异表达基因;新陆早7号分别鉴定出8615、6727和2078个差异表达基因;2个品种比较,在3 h和6 h分别鉴定出1879个和500个差异表达基因。基因功能分析表明,差异表达基因划分为生物学过程、细胞组分和分子功能注释本体,并进一步细分为48个功能类别。代谢通路分析显示,中棉所12和新陆早7号在枯萎病菌侵染后的6 h与0 h相比鉴定出的代谢通路(Pathway)最多,均有126条;在枯萎病菌侵染后6 h,2个品种相比鉴定出的代谢通路最少,仅有89条。各个比对组的代谢通路涉及的基因可被划分为次生代谢产物的生物合成、多糖的生物合成和代谢、环境适应和免疫系统等13类。在环境适应和免疫系统分类中存在着植物与病原菌相互作用代谢通路,涉及到996个已知功能的差异表达基因,有444个基因上调表达,552个基因下调表达。其中,差异表达基因最多的是 WRKY 转录因子家族基因,其次为丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶基因,而 DNA 损伤修复/耐受性蛋白, JAZ1、RAR1和RPM1互作蛋白,S位点的特异性糖蛋白S6前体以及钙牵引蛋白等6类基因参与该代谢通路的数目最少。最后随机抽取6个基因进行实时荧光定量PCR验证,其结果与测序结果一致。 展开更多
关键词 陆地棉 枯萎病 Solexa 基因表达谱
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海岛棉抗枯萎病相关GbNPR1基因的克隆及其表达分析 被引量:1
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作者 柴蒙亮 何兰兰 +2 位作者 韩泽刚 曾强 张薇 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期5-11,共7页
目的:克隆海岛棉GbNPR1基因并研究该基因在抗病及抗病信号传导中的功能。方法:根据已报道的棉花NPR1基因序列设计1对特异引物,利用RT—PCR从新海21号克隆CbNPR1基因并对其序列进行生物信息学分析;通过实时定量PCR技术检测海岛棉经... 目的:克隆海岛棉GbNPR1基因并研究该基因在抗病及抗病信号传导中的功能。方法:根据已报道的棉花NPR1基因序列设计1对特异引物,利用RT—PCR从新海21号克隆CbNPR1基因并对其序列进行生物信息学分析;通过实时定量PCR技术检测海岛棉经枯萎病菌侵染、水杨酸和乙烯诱导后该基因的表达特性。结果:GbNPR1基因编码587个氨基酸,与可可树中NPR1基因编码的氨基酸同源性最高(89.61%),其蛋白含有保守的BTB/POZ、ANK和NPR1-jike—C结构域;枯萎病菌侵染,水杨酸和乙烯诱导均可使GbNPR1明显上调表达,枯萎病菌侵染3h,水杨酸和乙烯诱导2h表达量最高。结论:GbNPRl基因在棉花抵御枯萎病菌侵染及植物抗病信号转导过程中起一定作用。 展开更多
关键词 海岛棉 GbNPR1 枯萎病菌 基因克隆 实时定量PCR
棉花抗枯萎病相关ERF—B3亚组转录因子的克隆与表达 预览 被引量:11
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作者 何兰兰 柴蒙亮 +2 位作者 韩泽刚 曾强 张薇 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期2375-2381,共7页
以拟南芥ERF—B3亚组转录因子的AP2/ERF结构域为探针,利用NCBI中的棉花(Gossypiumhirsutum)EST数据库,通过电子克隆结合RT—PCR方法,从枯萎病菌诱导后的高抗枯萎病品种‘中棉所12’克隆到1个与抗枯萎病相关的ERF—B3亚组转录因子... 以拟南芥ERF—B3亚组转录因子的AP2/ERF结构域为探针,利用NCBI中的棉花(Gossypiumhirsutum)EST数据库,通过电子克隆结合RT—PCR方法,从枯萎病菌诱导后的高抗枯萎病品种‘中棉所12’克隆到1个与抗枯萎病相关的ERF—B3亚组转录因子基因GhB30I。序列分析结果显示,GhB301基因cDNA全长593bp,开放阅读框384bp,编码127个氨基酸,含有一个保守的AP2/ERF结构域。实时荧光定量PCR检测该基因的表达显示,枯萎病菌诱导后,GhB301基因在棉花根中、抗病品种中优势表达;在乙烯、水杨酸、干旱、低温及高盐的诱导下表达量均发生变化。研究结果表明,GhB301基因可能参与了棉花对病原菌、激素及非生物胁迫的应答反应。 展开更多
关键词 棉花 ERF—B3转录因子 枯萎病菌 基因克隆 表达分析
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新疆杂交棉育种及推广示范的研究进展与展望 预览
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作者 王志军 董永梅 +3 位作者 李有忠 曾强 孙国清 谢宗铭 《江苏农业科学》 2019年第4期1-5,共5页
新疆棉区目前已成为我国最重要的产棉区,近年来,该棉区选育的60多个常规品种的产量遗传改良不显著,出现徘徊现象,常规品种的增产幅度已经进入瓶颈期,利用常规种进一步提高单产的难度越来越大。杂交棉能够集中2亲本的优势,可将高产、优... 新疆棉区目前已成为我国最重要的产棉区,近年来,该棉区选育的60多个常规品种的产量遗传改良不显著,出现徘徊现象,常规品种的增产幅度已经进入瓶颈期,利用常规种进一步提高单产的难度越来越大。杂交棉能够集中2亲本的优势,可将高产、优质和抗病三者结合,且组合选配周期短,能较快地提高棉花产量和品质,对于新疆棉花提质增效具有重要意义,因此,在新疆棉区开展杂交棉的育种、栽培示范以及推广应用研究对于提高新疆乃至全国棉花产量和改善纤维品质均具有重要战略意义。鉴于此,本文参考近年来国内外公开发表的文献资料以及深入新疆地方和团场连队调研数据,归纳总结新疆杂交棉育种、推广应用的发展现状,分析存在的问题,并对其发展趋势进行展望,以期为新疆杂交棉的发展提供理论参考资料。 展开更多
关键词 新疆棉区 杂交棉 推广示范 杂种优势 发展现状 问题分析 发展趋势
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