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古今中外大智慧,谈兵论道三十载——谢国良、吴如嵩少将访谈 预览
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作者 吴如嵩 许金 《滨州学院学报》 2019年第3期5-8,12共5页
中国孙子兵法研究会于1989年5月25日在孙子故里山东省滨州市惠民县成立,是以研究《孙子兵法》等中国古代兵学理论及其在经济、政治、军事以及社会生活中广泛应用为主要内容的全国性群众学术团体,30年来在孙子研究领域发挥了巨大的作用... 中国孙子兵法研究会于1989年5月25日在孙子故里山东省滨州市惠民县成立,是以研究《孙子兵法》等中国古代兵学理论及其在经济、政治、军事以及社会生活中广泛应用为主要内容的全国性群众学术团体,30年来在孙子研究领域发挥了巨大的作用。研究会首任会长谢国良将军与副会长吴如嵩将军深情回顾了研究会创办的缘由、经过和影响,并畅想了研究会和孙子研究的未来发展,并对孙子故里的孙子文化普及提出殷切期望。 展开更多
关键词 《孙子兵法》 中国孙子兵法研究会 军事科学院 孙子故里 孙子文化 学术会议
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苏浙闽地区婴幼儿急性腹泻患者病毒检测及临床特征分析
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作者 何佳慧 崔大伟 +5 位作者 杨先知 郑书发 余斐 董月皎 陈瑜 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2019年第3期315-319,共5页
目的分析苏浙闽地区婴幼儿急性腹泻患者常见病毒及患儿临床特征,为婴幼儿急性腹泻的流行病学研究和临床治疗提供参考。方法选取2010至2014年苏浙闽地区多家医院门诊就诊的急性腹泻患儿1 452例,采用ELISA法检测A组轮状病毒(HRV),多重PCR... 目的分析苏浙闽地区婴幼儿急性腹泻患者常见病毒及患儿临床特征,为婴幼儿急性腹泻的流行病学研究和临床治疗提供参考。方法选取2010至2014年苏浙闽地区多家医院门诊就诊的急性腹泻患儿1 452例,采用ELISA法检测A组轮状病毒(HRV),多重PCR法检测诺如病毒(NoV)、肠道腺病毒(EAdV)和星状病毒(HAstV),并用RT-PCR法对A组轮状病毒阳性的样本进行G和P分型。结果 1 452例患儿中由常见病毒引起的急性腹泻患儿有707例,占总调查患者的48.69%。急性腹泻患儿常见病毒感染中单一病毒感染占90.10%(637/707),其感染病毒的构成以轮状病毒最多(47.52%,336/707),其次为诺如病毒(36.07%,255/707)以及星状病毒(2.40%,17/707)和肠道腺病毒(4.10%,29/707)。病毒感染腹泻患儿中多重感染者共70例,占9.90%(70/707),以A组轮状病毒合并诺如病毒感染最为常见,占多重感染者的68.57%(48/70)。226份A组轮状病毒阳性标本中,G分型以G1为优势分型,占33.19%;P分型中则以P [11]比例最高,占38.50%;G、P型组合以P [11]G11为主(38.50%)。结论 A组轮状病毒是引发婴幼儿急性腹泻的主要病毒,诺如病毒次之,且婴幼儿病毒性腹泻患者可合并多种病毒感染。不同地区腹泻患儿病毒感染阳性率有差异,轮状病毒基因型表现则具有多样性。 展开更多
关键词 婴幼儿 急性腹泻 临床特征
2016年杭州地区重症手足口病病原流行特点及脑脊液检测分析 被引量:1
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作者 王洁 周俊 +5 位作者 吴亦栋 郑书发 陈东 楼滨 陈瑜 《中华传染病杂志》 CSCD 2018年第5期264-269,共6页
目的 了解2016年杭州地区重症手足口病(hand,foot,and mouth disease,HFMD)肠道病毒(enterovirus,EV)病原型别构成,探讨脑脊液检测在重症HFMD实验室诊断中的应用价值,寻求重症H FM D实验室检查关键指标.方法 收集杭州市儿童医院2016... 目的 了解2016年杭州地区重症手足口病(hand,foot,and mouth disease,HFMD)肠道病毒(enterovirus,EV)病原型别构成,探讨脑脊液检测在重症HFMD实验室诊断中的应用价值,寻求重症H FM D实验室检查关键指标.方法 收集杭州市儿童医院2016年3月至7月288例临床诊断为重症HFMD住院患儿,对上述患儿采集咽拭子进行EV核酸实时荧光定量反转录(reverse transcription,RT)-PCR,同时抽取血和脑脊液进行肠道病毒71型(enterovirus A 71,EV-A71)、柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirusA16,CV-A16)免疫球蛋白M(immunoglobulin M,IgM)抗体和脑脊液常规、生物化学检测.正态分布的计量资料采用t检验,非正态分布的计量资料采用Mann-Whitney U检验;计数资料采用χ^2检验.结果 288例患者EV核酸总阳性率为83.7%(241/288),其中EV-A71阳性率为55.2%(159/288),CV-A16为4.9%(14/288),其他型别EV为23.6%(68/288).68例其他型别EV检测结果显示,CV-A6为29.4%(20/68)、CV-A4为16.2%(11/68)、CV-A10为10.3%(7/68).EV核酸联合血清和脑脊液EV-A71和CV-A16的IgM抗体检测总阳性率为98.3%(283/288),单纯EV核酸检测总阳性率为83.7%(241/288),两者总阳性率差异有统计学意义(χ2=37.289,P=0.000).EV-A71组患儿脑脊液有核细胞计数与CV-A16组、其他型别EV组比较差异均有统计学意义(Z值分别为-4.472和-9.991,均P〈0.05);EV-A71组脑脊液有核细胞计数阳性率与CV-A16组、其他型别EV组比较差异均有统计学意义(χ^2值分别为43.857和133.078,均P〈0.05).EV-A71组患儿脑脊液蛋白质水平与CV-A16组、其他型别EV组比较差异均有统计学意义(Z值分别为-3.151和-5.255,均P〈0.05);EV-A71组患儿脑脊液蛋白质水平〉400 mg/L的比例,与CV-A16组和其他型别EV组比较差异均有统计学意义(χ^2值分别为4.956和11.795,均P〈0.05).脑脊液EV-A71 IgM抗体阳性组和阴性组患儿脑脊液有核细胞计数及阳性率比较差 展开更多
关键词 手足口病 抗体 脑脊髓液
2016年浙江省急性胃肠炎患者诺如病毒的分子流行病学特征分析 预览 被引量:2
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作者 陈伟萍 崔大伟 +3 位作者 杨先知 郑书发 陈瑜 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2018年第4期304-308,共5页
目的探讨2016年浙江省急性胃肠炎患者中诺如病毒的流行病学和基因特征。方法收集2016年1月至12月共1 308份急性胃肠炎患者的临床流行病学资料和粪便标本,用一步法双重荧光RT-PCR技术检测诺如病毒GⅠ和GⅡ型,用分层抽样抽取阳性标本核酸... 目的探讨2016年浙江省急性胃肠炎患者中诺如病毒的流行病学和基因特征。方法收集2016年1月至12月共1 308份急性胃肠炎患者的临床流行病学资料和粪便标本,用一步法双重荧光RT-PCR技术检测诺如病毒GⅠ和GⅡ型,用分层抽样抽取阳性标本核酸进行普通RT-PCR扩增,并对扩增产物进行测序分析。结果诺如病毒阳性率为10.55%(138/1 308),其中GⅠ型12例,GⅡ型118例,GⅠ/GⅡ型混合感染8例。诺如病毒在不同年龄组的阳性率随患者年龄上升而下降,以≥60岁组最低;不同性别组间的阳性率差异无统计学意义;诺如病毒感染全年分布,其中12月阳性率达到顶峰,为37.50%。测序结果显示GⅠ的基因亚型主要是GⅠ.6;GⅡ的基因亚型以GⅡ.4与GⅡ.17为主,分别占40.91%(18/44)和34.09%(15/44)。结论诺如病毒是引起2016年浙江省急性胃肠炎的重要病原体,且GⅡ.4和GⅡ.17是主要的基因亚型。 展开更多
关键词 诺如病毒 急性胃肠炎 基因型
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手足口病患儿细胞因子水平及免疫球蛋白的变化及其临床意义 被引量:4
5
作者 毛其芬 崔大伟 +5 位作者 杨先知 王伟 吴亦栋 郭希超 陈瑜 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2017年第3期305-308,312共5页
目的探讨不同病情的手足口病患儿(HFMD)主要细胞因子及免疫球蛋白IgM、IgG、IgA的表达水平及其变化的临床意义。方法收集HFMD患儿50例,根据病情分为重症组12例,轻症组38例,另外选取同龄健康者15例为对照组。应用液相芯片分析平台检测I... 目的探讨不同病情的手足口病患儿(HFMD)主要细胞因子及免疫球蛋白IgM、IgG、IgA的表达水平及其变化的临床意义。方法收集HFMD患儿50例,根据病情分为重症组12例,轻症组38例,另外选取同龄健康者15例为对照组。应用液相芯片分析平台检测IL-4、IL-6、IL-10、IL-17A、TNF-α、IGF-β水平;实时荧光定量PCR检测上述细胞因子mRNA表达水平;免疫比浊法检测免疫球蛋白IgM、IgG、IgA的水平。结果重症组患儿血清各细胞因子水平显著高于轻症组及对照组(P〈0.05);重症组患儿外周血单个核细胞表达的各细胞因子mRNA水平显著高于轻症组(P〈0.05);重症组及轻症组血清免疫球蛋白IgM、IgG、IgA的水平较对照组明显下降(P〈0.05);重症组与轻症组间免疫球蛋白水平无明显差异(P〉0.05)。结论HFMD患儿存在细胞因子水平的改变,体液免疫功能低下,这些变化可能参与HFMD病情的发展。 展开更多
关键词 手足口病 细胞因子 免疫球蛋白
双重荧光定量PCR检测志贺毒素stx1和stx2基因
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作者 陆芸 王若南 +3 位作者 余斐 郑书发 陈晓 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2017年第5期591-593,597共4页
目的建立一种双重荧光定量PCR检测志贺毒素stx1和stx2基因的方法。方法根据不同细菌来源的stx1和stx2序列,设计PCR引物和TaqMan探针,建立双重实时荧光定量PCR检测体系,进行灵敏度、特异性和重复性评价,并对腹泻患者粪便样本进行检测分... 目的建立一种双重荧光定量PCR检测志贺毒素stx1和stx2基因的方法。方法根据不同细菌来源的stx1和stx2序列,设计PCR引物和TaqMan探针,建立双重实时荧光定量PCR检测体系,进行灵敏度、特异性和重复性评价,并对腹泻患者粪便样本进行检测分析。结果双重实时荧光定量PCR检测含志贺毒素基因重组质粒的最低检测下限为102 copies/mL;该法对12种常见肠道病原菌均无特异性扩增,对不同浓度的标准质粒检测重复性高,Ct值变异系数均小于10%;对急性腹泻粪便标本的检测阳性率高于细菌分离培养。结论建立的双重实时荧光定量PCR可作为不同细菌来源的志贺毒素基因的快速鉴定方法,亦可用于人感染性腹泻标本的快速筛查。 展开更多
关键词 志贺毒素 stx1 stx2 实时荧光定量PCR
江浙沪地区EV71的分子流行病学特征
7
作者 王磊 崔大伟 +5 位作者 戴玉柱 徐莉 杨先知 郑书发 陈瑜 《中华医院感染学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第19期4321-4324,共4页
目的研究江浙沪地区EV71-VP1遗传变异特征,了解江浙沪地区EV71病毒基因突变及抗原变异规律,为EV71的预防、治疗提供帮助。方法从GenBank上下载了江浙沪地区2009-2014年共79株EV71的VP1区段序列与各亚型参考株序列,用MEGA7.0软件构建进化... 目的研究江浙沪地区EV71-VP1遗传变异特征,了解江浙沪地区EV71病毒基因突变及抗原变异规律,为EV71的预防、治疗提供帮助。方法从GenBank上下载了江浙沪地区2009-2014年共79株EV71的VP1区段序列与各亚型参考株序列,用MEGA7.0软件构建进化树,分析江浙沪地区EV71-VP1分子流行病学特征;用疫苗株FY23株做为参考株比较江浙沪地区EV71毒株的氨基酸变异情况。结果通过进化树与序列同源分析,发现79株毒株均为C4a亚型,江浙沪地区EV71毒株可分为两个大簇与数个小簇,两个大簇间没有发现明显的序列差异,江浙沪三个地区的毒株在进化树上的分布不存在明显的差异。79株毒株共存在34个氨基酸位点突变,其中与病毒致病及疫苗接种效果相关的98、145、289位点发生多株突变,7株发生了病毒与受体结合相关的E145G/Q突变,7株发生了位于病毒表面BC环内的E98K突变,5株发生了与临床症状表现相关的A289T/V突变,未发现2009-2014年有明显的EV71毒株氨基酸变异差异。结论虽然2009-2014年江浙沪地区的EV71毒株流行亚型没有改变,也不存在明显地区间的流行差异,但是病毒的基因及氨基酸突变较为多见,仍应关注该地区的病毒基因及抗原变异,以便更好的预防EV71疫情。 展开更多
关键词 EV71 C4亚型 VP1基因 进化树 突变
浙江省柯萨奇病毒A16 VP1基因特征分析及B细胞抗原表位预测 预览 被引量:2
8
作者 徐莉 崔大伟 +7 位作者 戴玉柱 王磊 杨先知 郑书发 孙长贵 成军 陈瑜 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2017年第1期65-71,共7页
目的了解浙江省柯萨奇病毒A16(CA16)VP1基因特征及其变迁规律并预测VP1蛋白上B细胞抗原表位。方法在Gen Bank检索并下载35个浙江省CA16流行株及69个已知基因型CA16参考株的VP1基因序列,使用MEGA 6.0软件进行比对分析和构建种系进化树... 目的了解浙江省柯萨奇病毒A16(CA16)VP1基因特征及其变迁规律并预测VP1蛋白上B细胞抗原表位。方法在Gen Bank检索并下载35个浙江省CA16流行株及69个已知基因型CA16参考株的VP1基因序列,使用MEGA 6.0软件进行比对分析和构建种系进化树,确定浙江省CA16流行株的基因型,并分析VP1核苷酸和氨基酸同源性及氨基酸变异;运用DNA Star中的Protean模块预测VP1上可能的线性B淋巴细胞抗原表位。结果浙江省CA16病毒基因型为B1基因型(34株)和A基因型(1株)。B1型中以B1b亚型(24株)占绝对优势,其次为B1a亚型(10株)。浙江省CA16流行株VP1核苷酸和氨基酸同源性分别为75.5%-100%和89.5%-100%;VP1区氨基酸序列高度保守,但也存在部分变异。VP1中可能的B细胞抗原表位(氨基酸肽段)有13个,分别为10-20、30-38、57-62、73-79、98-106、118-123、159-168、173-177、184-189、240-246、265-273、274-284和289-295。结论浙江省CA16流行株存在A、B1 2个基因型,B1b和B1a为主要基因型,其VP1区氨基酸变异程度较低,VP1中13个预测的B细胞抗原表位可为CA16疫苗的研制提供科学依据。 展开更多
关键词 柯萨奇病毒A16 VP1 基因特征 氨基酸变异 B细胞抗原表位
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2013-2015年浙江地区哨点医院H3N2甲型流感病毒感染患者临床特点与流行病学特征 被引量:1
9
作者 孙海燕 崔大伟 +4 位作者 车飞虎 高敏 杨先知 陈瑜 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2016年第12期1374-1378,共5页
目的分析2013-2015年浙江地区哨点医院监测纳入的H3N2甲型流感病毒感染患者的临床特点及流行病学特征。方法对2013年1月至2015年12月浙江地区8家哨点医院纳入的符合急性呼吸道感染(acute respiratory infection,ARI)定义的病例进行流... 目的分析2013-2015年浙江地区哨点医院监测纳入的H3N2甲型流感病毒感染患者的临床特点及流行病学特征。方法对2013年1月至2015年12月浙江地区8家哨点医院纳入的符合急性呼吸道感染(acute respiratory infection,ARI)定义的病例进行流行病学和临床信息调查,采集呼吸道标本进行流感病毒核酸检测。按检测结果将病例分为H3N2阳性组和流感阴性组,分析两组病例流行病学和临床特征。结果 2013-2015年浙江地区8家哨点医院共纳入7 602例急性呼吸道感染,其中实验室确诊H3N2病例490例(占6.4%)。浙江地区连续3年的监测共出现3次发病高峰,分别是2013年12月-2014年3月、2015年1-3月和2015年7-8月。H3N2病例年龄中位数为50岁,其中男性占62.0%,慢性基础性疾病史、恶性肿瘤病史及吸烟史的患者在H3N2阳性组的比例高于流感阴性组,差异有统计学意义(其中慢性基础性疾病史χ~2=6.600、7.519、3.875、53.719、3.997、31.086、63.789、21.309和53.95;恶性肿瘤史χ~2=55.316;吸烟史χ~2=14.418,P值均〈0.05)。H3N2阳性组出现排痰性咳嗽、咯血、X线/CT表现异常和肺部听诊异常的比例较流感阴性组高,而H3N2阳性组白细胞总数和血小板总数较流感阴性组低,差异均有统计学意义(排痰性咳嗽χ~2=82.703,咯血χ~2=104.807,X线/CT表现异常χ~2=5.114,肺部听诊异常χ~2=11.823;白细胞总数t=-2.602,血小板总数t=-3.488,P值均〈0.05)。结论浙江地区H3N2流感多发生在冬春季和夏季,具有慢性基础性疾病及肿瘤等病情的患者是感染的高危人群。 展开更多
关键词 流感 甲型流感病毒 H3N2亚型 流行病学特征
人感染高致病性H5N6禽流感病毒的分子生物学特征 预览 被引量:5
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作者 高敏 崔大伟 +4 位作者 杨先知 车飞虎 孙海燕 陈瑜 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2016年第2期156-159,共4页
目的分析2014-2015年3例新型人感染高致病性禽流感(HPAI)H5N6毒株的血凝素(HA)与神经氨酸酶(NA)基因序列,探讨该病毒的遗传变异及分子生物学特征。方法收集Gen Bank、全球共享禽流感数据倡议组织(GISAID)及浙江大学传染病诊治... 目的分析2014-2015年3例新型人感染高致病性禽流感(HPAI)H5N6毒株的血凝素(HA)与神经氨酸酶(NA)基因序列,探讨该病毒的遗传变异及分子生物学特征。方法收集Gen Bank、全球共享禽流感数据倡议组织(GISAID)及浙江大学传染病诊治国家重点实验室提供的H5N6病毒基因序列,利用生物信息软件MEGA6.0及Net Nglyc服务器对基因序列进行遗传进化和分子变异特征分析。结果 3例感染HPAI-H5N6患者毒株的HA与NA氨基酸序列的同源性分别为96.5%~98.7%和90.1%~98.2%;HA氨基酸序列比对分析发现A/Guangzhou/39715/2014(H5N6)和A/Sichuan/26221/2014(H5N6)与A/duck/Eastern China/1111/2011(H5N2)同源性最近,分别为97.7%和98.5%;A/Yunnan/0127/2015(H5N6)与A/muscovy duck/Vietnam/LBM631/2014(H5N1)同源性最近(97.2%);NA氨基酸序列比对分析发现A/Guangzhou/39715/2014(H5N6)和A/Yunnan/0127/2015(H5N6)与A/swine/Guangdong/K6/2010(H6N6)同源性最近,分别为97.2%和97.6%,A/Sichuan/26221/2014(H5N6)与A/duck/Guangdong/S3073/2010(H6N6)同源性最近(97.4%);进化树分析显示3例患者毒株处于2个不同的分支;HA基因包含有S137A、T160A等突变,糖基化分析显示有6~7个N-糖基化位点。结论新型人感染HPAI-H5N6病毒是一种重组病毒,其HA基因来源于亚洲禽类H5亚型,NA基因来源于亚洲禽类H6N6;HA基因位点突变及N-糖基化改变可能有助于增强对人类的感染。 展开更多
关键词 禽流感H5N6病毒 血凝素 神经氨酸酶 N-糖基化
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2010-2013年杭州地区甲型流感H3N2分子流行病学分析 被引量:3
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作者 汪艳 戴玉柱 +8 位作者 崔大伟 杨先知 成军 孙长贵 金美彤 李静云 陈瑜 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2016年第10期1133-1137,共5页
目的对2010-2013年杭州地区甲型流感H3N2进行分子流行病学调查分析。方法收集2010-2013年杭州地区H3N2监测样本数据,对样本数据按年份、性别以及年龄进行分组,比较各组之间的差异。查询、整理GenBank中的中国H3N2序列并建立数据集,并对... 目的对2010-2013年杭州地区甲型流感H3N2进行分子流行病学调查分析。方法收集2010-2013年杭州地区H3N2监测样本数据,对样本数据按年份、性别以及年龄进行分组,比较各组之间的差异。查询、整理GenBank中的中国H3N2序列并建立数据集,并对国内H3N2的HA基因及2010-2013年杭州地区H3N2病毒HA、NA序列进行系统生物进化分析。结果 2010-2013年杭州地区H3N2感染率分析,不同年度间H3N2感染率差异具有统计学意义(χ2=14.004,P〈0.05),不同性别和年龄组间差异无统计学意义(χ2=3.552,χ2=2.691,P〉0.05)。杭州地区2010年与2012、2013年H3N2感染病毒株,在系统进化树上分布存在两个不同分支,且HA序列进化属于广东省H3N2进化的不同时间点的两个分支,在国内H3N2系统进化树上存在一类未见人类感染的病毒分支。结论 H3N2感染无性别选择性及年龄差异,不同年度的感染率存在差异;杭州及我国多省市流行的H3N2感染存在广泛迁徙的现象,今后仍然具有引起高致病性大规模流行的能力,因此应加强各地监测及信息共享,做到早发现和及时防控。 展开更多
关键词 甲型流感H3N2 流行病学调查 系统进化分析
2009-2014年浙江省哨点医院急性腹泻患者病原监测研究 被引量:16
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作者 郑书发 余斐 +7 位作者 陈晓 崔大伟 杨先知 王忆吟 余建兴 李中杰 陈瑜 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1084-1090,共7页
目的:分析浙江省门急诊急性腹泻患者的病原构成特征。方法2009年1月至2014年12月,选择杭州、湖州、宁波、衢州以及绍兴市的7家医院作为监测哨点,以其中的内科、儿科和感染科肠道门诊以及急诊的急性腹泻患者为研究对象,调查并记录患... 目的:分析浙江省门急诊急性腹泻患者的病原构成特征。方法2009年1月至2014年12月,选择杭州、湖州、宁波、衢州以及绍兴市的7家医院作为监测哨点,以其中的内科、儿科和感染科肠道门诊以及急诊的急性腹泻患者为研究对象,调查并记录患者个人基本信息、主要症状与体征等资料,采集患者的粪便样本(5g)进行8种细菌检测(包括霍乱弧菌、志贺菌、非伤寒沙门菌、致泻性大肠埃希菌、副溶血弧菌、气单胞菌、小肠结肠炎耶尔森菌、类志贺邻单胞菌)和5种病毒(包括轮状病毒、诺如病毒、扎如病毒、星状病毒和肠道腺病毒)检测。结果2009—2014年,共采集并检测9364例急性腹泻患者的粪便标本,腹泻病原阳性率为37.38%(3500例);单一细菌、单一病毒和多重感染总阳性率分别为13.14%(1230例)、20.75%(1943例)和3.49%(327例)。单一细菌感染者中,副溶血弧菌阳性率较高,为5.96%(558例),其次为致泻性大肠埃希菌,为3.86%(361例);单一病毒感染者中,诺如病毒和轮状病毒阳性率均较高,分别为10.73%(1005例)和8.35%(782例)。〈15岁患者以单一病毒感染者为主,阳性率为32.69%(1014例),≥15岁患者以单一细菌感染者为主,阳性率为16.86%(1056例)。单一细菌感染者中以25~34岁者为主,阳性率为18.62%(302例);单一病毒感染者中以1~4岁者为主,阳性率为41.12%(435例);多重感染者中以1~4岁者为主,阳性率为7.37%(78例)。7—9月感染单一细菌者比例较高,12月至次年3月感染单一病毒者比例较高。2009—2014年,门急诊急性腹泻患者病原谱变化较小,均以轮状病毒[22.34%(782/3500)]、诺如病毒[28.71%(1005/3500)]、副溶血弧菌[15.92%(558/3500)]、致泻大肠埃希菌[10.31%(361/3500)]为主。结论浙江省2009—2014年门急诊急性腹泻患者常见病原均有� 展开更多
关键词 腹泻 病原 监测 流行规律
杭州地区2014-2015年急性胃肠炎患者感染诺如病毒的流行病学特征分析 被引量:15
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作者 崔大伟 李中杰 +6 位作者 林洁 靳淼 杨先知 郑书发 余斐 陈瑜 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期254-258,共5页
目的 了解2014-2015年杭州地区急性胃肠炎患者中诺如病毒的流行病学特征。方法 收集1 109份急性胃肠炎患者的临床流行病学资料和粪便样本,采用一步法双重荧光RT-PCR对样本中诺如病毒(GⅠ、GⅡ型)进行初筛,然后随机选择诺如病毒阳性的... 目的 了解2014-2015年杭州地区急性胃肠炎患者中诺如病毒的流行病学特征。方法 收集1 109份急性胃肠炎患者的临床流行病学资料和粪便样本,采用一步法双重荧光RT-PCR对样本中诺如病毒(GⅠ、GⅡ型)进行初筛,然后随机选择诺如病毒阳性的样本核酸进行多重RT-PCR扩增,对产物进行测序分析。结果 1 109份的粪便样本中,诺如病毒检出率为26.87%(298/1 109),以GⅡ亚型为主,占25.52%(283/1 109),GⅠ亚型占1.35%(15/1 109);不同性别人群诺如病毒检出率差异无统计学意义(P〉0.05);不同年龄组人群中诺如病毒检出率分别为16.94%(〈5岁)、19.45%(5~18岁)和32.26%(≥18岁);全年均可检出诺如病毒感染,高发季节为12月至次年3月,阳性率为29.67%~37.08%。序列分析显示,GⅡ基因亚型中以GⅡ-4/Sydney株为主(46.43%,13/28),其次为GⅡ-4/2006b株;GⅠ基因亚型中以GⅠ-1亚型为主(55.56%,5/9)。结论 诺如病毒是导致2014-2015年杭州地区急性胃肠炎的主要病原之一,GⅡ基因亚型特别是GⅡ-4/Sydney变异株和GⅡ-4/2006b变异株是该地区流行的优势毒株。 展开更多
关键词 诺如病毒 急性胃肠炎 聚合酶链反应 基因型
2012-2013年浙江省手足口病流行病学和病原学特征分析 被引量:3
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作者 金美彤 崔大伟 +7 位作者 杨先知 成军 孙长贵 戴玉柱 李静云 陈瑜 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2016年第7期799-803,共5页
目的了解2012-2013年浙江省手足口病流行特征和病原构成,为手足口病防控工作提供参考。方法收集2012-2013年浙江省手足口病疑似患者粪便、咽拭子、疱疹液标本,采用实时荧光RT-PCR对收集样本进行HFMD病原体检测。结果 2012-2013年共采集... 目的了解2012-2013年浙江省手足口病流行特征和病原构成,为手足口病防控工作提供参考。方法收集2012-2013年浙江省手足口病疑似患者粪便、咽拭子、疱疹液标本,采用实时荧光RT-PCR对收集样本进行HFMD病原体检测。结果 2012-2013年共采集样本1 792例,患者以5岁以下散居儿童为主;浙江省手足口病发病高峰期在5-6月份,9月份出现发病次高峰;肠道病毒总检出率为72.9%,其中2012年浙江省手足口病优势病原体为EV71(40.3%),其次为CoxA16(31.3%),2013年浙江省手足口病优势病原体为其他肠道病毒(77.2%)(非EV71和CoxA16),以CoxA6为主(51.3%)。不同样本类型中,肠道病毒检出率依次为疱疹液(100.0%)、粪便(76.2%)和咽拭子(65.1%)。结论手足口病的流行具有季节性和人群性,不同年份引起手足口病的优势病原体存在变化,持续地病原监测有助于预防和控制手足口病的流行暴发。 展开更多
关键词 手足口病 流行病学 肠道病毒EV71 柯萨奇病毒A16型 柯萨奇病毒A6型
多重荧光定量RT-PCR检测高致病性H5N6禽流感病毒 预览 被引量:2
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作者 马光华 崔大伟 +5 位作者 杨先知 高敏 车飞虎 孙海燕 陈瑜 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2016年第2期81-84,共4页
目的建立一种快速检测流感病毒A型(FluA)及高致病性禽流感(HPAI)H5N6病毒感染的荧光定量RT-PCR法。方法以人细胞核糖核酸酶P(RP)基因作为临床样本的内参基因,用Primer Express 3.0软件设计PCR特异性引物和探针,建立一种检测FluA及... 目的建立一种快速检测流感病毒A型(FluA)及高致病性禽流感(HPAI)H5N6病毒感染的荧光定量RT-PCR法。方法以人细胞核糖核酸酶P(RP)基因作为临床样本的内参基因,用Primer Express 3.0软件设计PCR特异性引物和探针,建立一种检测FluA及HPAI-H5N6病毒的一步法多重荧光定量RT-PCR方法,评估其灵敏度、特异性,并与上海之江公司提供的试剂及测序法进行比较。结果建立的多重荧光定量RT-PCR法检测FluA、H5、N6及RP质粒标准品的灵敏度均达102copies/m L。各对引物和相应探针仅检测出相应的病毒,在这些病毒和常见病原分析中未发现存在交叉反应,特异性达100%。用该法检测135例临床标本,结果显示FluA为23例,未发现HPAI-H5N6病毒的感染者;与上海之江公司提供的试剂的检测结果及基因测序结果一致。结论建立的一步法多重荧光定量RT-PCR法可用于FluA及HPAI-H5N6病毒感染患者的早期诊断。 展开更多
关键词 甲型流感病毒 高致病性禽流感H5N6病毒 人细胞核糖核酸酶P基因 多重荧光定量RT-PCR
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2013-2015年浙江地区新型甲型H1N1流行性感冒的流行病学和临床特征调查 预览 被引量:8
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作者 车飞虎 崔大伟 +4 位作者 孙海燕 高敏 杨先知 陈瑜 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2016年第4期307-311,共5页
目的调查2013-2015年浙江地区哨点医院监测的新型甲型H1N1流行性感冒(简称流感)的临床特征及其流行病学特征。方法对2013-2015年浙江地区8家哨点医院纳入的符合急性呼吸道感染的患者进行流行病学和临床特征调查,采集研究对象呼吸道标... 目的调查2013-2015年浙江地区哨点医院监测的新型甲型H1N1流行性感冒(简称流感)的临床特征及其流行病学特征。方法对2013-2015年浙江地区8家哨点医院纳入的符合急性呼吸道感染的患者进行流行病学和临床特征调查,采集研究对象呼吸道标本进行流感病毒检测,分析新型甲型H1N1流感病毒阳性组与阴性组的临床和流行病学特征。结果 8家哨点医院共纳入7 602例急性呼吸道感染患者,其中,实验室确诊新型甲型H1N1流感779例(10.2%),新型甲型H1N1流感患者中位年龄为51岁,115例(33.6%)患有至少1种慢性基础性疾病,新型甲型H1N1流感中哮喘比例(2.6%)高于流感病毒阴性患者(0.6%),差异有统计学意义(χ^2=12.706,P〈0.01)。新型甲型H1N1流感中恶心、呕吐所占比例高于流感病毒阴性患者,排痰性咳嗽、腹泻所占比例低于流感病毒阴性患者。新型甲型H1N1流感患者的白细胞计数和中性粒细胞计数均低于流感病毒阴性组,差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论浙江地区人感染新型甲型H1N1流感的高发期为每年的冬春季节,其他时间呈散发。新型甲型H1N1流感的临床症状与非流感患者相比较无特异表现。 展开更多
关键词 新型甲型H1N1流感病毒 流行病学 临床特征 监测
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杭州市2013~2014年流感暴发流行期甲型流感病毒H3N2亚型基因特性分析 预览 被引量:6
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作者 杨先知 崔大伟 +2 位作者 郑书发 陈瑜 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2015年第8期586-590,共5页
目的分析杭州2013~2014年冬春季流感暴发期间流行的甲型流感病毒H3N2亚型的分子特性。方法选取H3N2阳性标本提取病毒RNA,PCR扩增全基因组并测序,构建血凝素(HA)及神经氨酸酶(NA)分子进化树,对H3N2亚型的病毒进化进行分析。结果 6个... 目的分析杭州2013~2014年冬春季流感暴发期间流行的甲型流感病毒H3N2亚型的分子特性。方法选取H3N2阳性标本提取病毒RNA,PCR扩增全基因组并测序,构建血凝素(HA)及神经氨酸酶(NA)分子进化树,对H3N2亚型的病毒进化进行分析。结果 6个代表株中H3N2未发生片段间的重配。以WHO推荐流感疫苗株A/TEXAS/50/2012为参考,HA1蛋白主要抗原决定区发生N145S氨基酸替换,并有其他多个位点的突变。病毒基质蛋白(M2)的金刚烷胺耐药位点全为S31N,神经氨酸酶抑制剂耐药位点未发生突变。结论 H3N2亚型甲型流感病毒HA1蛋白的氨基酸变异与2013~2014年杭州地区暴发流行有关。另外,病毒已出现对金刚烷胺的耐药突变,而对神经氨酸酶未发生耐药突变。 展开更多
关键词 流感 甲型流感病毒 H3N2亚型 突变 进化分析
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五重荧光定量RT-PCR法检测甲型流感病毒 预览 被引量:5
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作者 戴玉柱 崔大伟 +7 位作者 杨先知 成军 孙长贵 金美彤 李静云 陈瑜 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2015年第9期641-644,共4页
目的建立一种五重荧光定量RT-PCR检测并鉴别流感病毒A(Flu A)及血凝素H3、H5、H7基因亚型的方法。方法以人细胞核糖核酸酶P(RNase P)基因为内参照,用Primer Express 3.0软件设计PCR特异性引物和探针。构建质粒标准品用于分析该方法... 目的建立一种五重荧光定量RT-PCR检测并鉴别流感病毒A(Flu A)及血凝素H3、H5、H7基因亚型的方法。方法以人细胞核糖核酸酶P(RNase P)基因为内参照,用Primer Express 3.0软件设计PCR特异性引物和探针。构建质粒标准品用于分析该方法的灵敏度和重复性,利用不同来源的呼吸道病毒样本进行特异性分析。结果该法检测Flu A、H3、H5、H7以及RNase P质粒标准品的灵敏度均达102copies/m L,特异性达100%,各对引物和探针仅检测出相应的病毒,未有交叉反应,变异系数(CV)≤1.99%。结论建立的五重荧光定量RT-PCR法灵敏度、特异性高,重复性好,可用于检测出多种甲型流感亚型,对甲型流感病毒不同亚型早期诊断具有一定的价值。 展开更多
关键词 甲型流感病毒 H3 H5 H7 RNA酶P 多重荧光定量RT-PCR
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2011~2013年杭州市手足口病病原谱流行特征及柯萨奇病毒A16型VP1区基因变异研究 预览 被引量:3
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作者 郑书发 +4 位作者 崔大伟 杨先知 余斐 王忆吟 陈瑜 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2015年第2期104-107,共4页
目的了解杭州市手足口病病原谱流行特征及柯萨奇病毒A16型(CA16)分离株的VP1基因变迁规律。方法采集杭州市2011-2013年手足口病患者的2 197份临床标本,用通用引物进行肠道病毒实时荧光定量RT-PCR检测,对阳性标本进行分型,对部分CA16... 目的了解杭州市手足口病病原谱流行特征及柯萨奇病毒A16型(CA16)分离株的VP1基因变迁规律。方法采集杭州市2011-2013年手足口病患者的2 197份临床标本,用通用引物进行肠道病毒实时荧光定量RT-PCR检测,对阳性标本进行分型,对部分CA16感染阳性重症患者标本测定VP1基因序列并进行同源性比对和系统进化树分析。结果杭州地区肠道病毒通用型核酸检出率为56.0%(1 317/2 197),肠道病毒71(EV71)、CA16和其他肠道病毒的检出率分别为24.1%(530/2 197)、13.9%(306/2 197)和22.8%(501/2 197)。在咽拭子和粪便标本中EV71检出率均最高,分别为23.9%(301/1 258)和23.6%(148/627),而在疱疹液标本中其他型肠道病毒检出率最高,为32.6%(76/233),脑脊液标本中无CA16检出。咽拭子标本和粪便标本在发病初期的检出率较高,发病后第5天和第6天后检出率低于发病初期检出率,而脑脊液和疱疹液不同病程阶段的检出率无统计学意义。9株CA16分离株VP1基因的核苷酸同源性为90.8%-99.7%,分属于B1b亚型和B1a亚型。结论 2011-2013年杭州地区手足口病患者主要病原体以EV71和CA16为主,样本类型和采样时间是影响肠道病毒检出率的重要原因。杭州地区CA16毒株VP1区基因的变异程度较低,需进一步加强开展手足口病的监测。 展开更多
关键词 手足口病 肠道病毒 柯萨奇病毒A16型 VP1
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双重荧光定量RT-PCR法检测柯萨奇病毒A2和A5型 预览 被引量:2
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作者 李静云 崔大伟 +7 位作者 成军 孙长贵 金美彤 沈雄文 杨先知 陈瑜 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2015年第5期321-324,共4页
目的建立同时检测柯萨奇病毒A2和A5型(CVA2、CVA5)的双重实时荧光定量RT-PCR法。方法用Primer Express3.0软件设计高度特异性引物和荧光标记探针。通过优化反应体系,建立标准曲线,并评价双重荧光定量RT-PCR法的特异性、灵敏度和重复... 目的建立同时检测柯萨奇病毒A2和A5型(CVA2、CVA5)的双重实时荧光定量RT-PCR法。方法用Primer Express3.0软件设计高度特异性引物和荧光标记探针。通过优化反应体系,建立标准曲线,并评价双重荧光定量RT-PCR法的特异性、灵敏度和重复性。用建立的方法检测367例疑似手足口病患儿的粪便标本,并对阳性结果测序验证。结果荧光定量RT-PCR结果表明本实验所选的引物和探针可特异性检测并区分出CVA2、CVA5亚型,与其他肠道病毒的阳性核酸未发生交叉反应。该方法最低检测限达到10^2copies/m L,批内变异系数(CV)均〈1.49%。367份临床标本中CVA2型阳性23份,阳性率6.3%;CVA5阳性11份,阳性率3%,检测阳性结果与测序结果一致。结论成功建立了在单管中同时检测并鉴别CVA2、CVA5型的双重实时荧光定量RT-PCR检测方法。该方法具有较好的灵敏度、特异性、重复性,可用于CVA2、CVA5型引起的暴发疫情的快速筛查和手足口病的流行病学的研究。 展开更多
关键词 手足口病 荧光定量PCR 柯萨奇病毒 柯萨奇病毒A2型 柯萨奇病毒A5型
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