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水稻细菌性条斑病原菌室内快速分离与鉴定方法 被引量:4
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作者 花龙 +3 位作者 韦永选 向贤 翟文学 夏志辉 《分子植物育种》 CSCD 北大核心 2017年第5期1927-1932,共6页
本研究以海南海口罗牛山基地、屯昌水稻品种区试基地采集的感染细菌性条斑病(细条病)的水稻叶片为研究对象,探索细条病菌室内分离、鉴定与致病性测定方法。结果表明,70%酒精消毒1 min,10^4-10^5稀释倍数,培养3 d是有效分离细条病菌的... 本研究以海南海口罗牛山基地、屯昌水稻品种区试基地采集的感染细菌性条斑病(细条病)的水稻叶片为研究对象,探索细条病菌室内分离、鉴定与致病性测定方法。结果表明,70%酒精消毒1 min,10^4-10^5稀释倍数,培养3 d是有效分离细条病菌的优化因素;随机挑取的12个单克隆菌株经分子鉴定及致病性鉴定均为细菌性条斑病菌,且16S rDNA PCR产物测序序列与细条病菌模式菌株RS105一致性为100%。在所有的接种方法中均显示,浸染后保湿培养是影响致病效果的关键因子,在发病率方面,菌液浸泡抽真空、针刺法是最有效的方法,致病率均为100%。本研究结果为细条病菌的室内分离鉴定提供标准方法,有助于抗细条病种质资源的大规模筛选。 展开更多
关键词 水稻 细菌性条斑病 病原分离 致病性鉴定 接种方法
采用酵母双杂交系统筛选橡胶树HbTCTP1互作蛋白
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作者 韦永选 邓治 +4 位作者 刘长仁 向贤 夏志辉 李德军 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期3538-3544,共7页
翻译控制肿瘤蛋白(translationally controlled tumor protein,TCTP)是一种在生物体中普遍存在和结构上高度保守的多功能蛋白。本研究以橡胶树HbTCTP1基因的开放阅读框(open reading frame,ORF)作为诱饵,采用酵母双杂交系统构建... 翻译控制肿瘤蛋白(translationally controlled tumor protein,TCTP)是一种在生物体中普遍存在和结构上高度保守的多功能蛋白。本研究以橡胶树HbTCTP1基因的开放阅读框(open reading frame,ORF)作为诱饵,采用酵母双杂交系统构建筛选HbTCTP1互作蛋白的诱饵表达载体pBD.GALA—HbTCTP1,并在pADGAL4—2.1质粒构建的橡胶树胶乳cDNA文库中筛选HbTCTP1互作蛋白。将获得的两个与HbTCTP1互作的阳性克隆进行测序,比对NCBI非丰富蛋白数据库发现:它们分别是橡胶延长因子(rubber elongation factor,REF)和60S核糖体L44蛋白(60S ribosomal protein L44,RPL44)。本研究结果对进一步揭示HbTCTP1在橡胶树中的作用具有重要意义。 展开更多
关键词 橡胶树 翻译调控肿瘤蛋白(TCTP) 酵母双杂交系统 死皮
海南水稻白叶枯病菌优势生理小种的分离及致病力分析 被引量:3
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作者 夏立琼 李明容 +2 位作者 翟文学 夏志辉 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期1336-1340,共5页
本研究为了分离海南省白叶枯病菌优势生理小种及确定其致病力,首先利用6个携单一抗病基因(Xa3,Xa4,xa5,Xa13,Xa21和Xa23)的水稻白叶枯病鉴别品种及对照品种(IR24),对海南省18个市县采集的25份水稻白叶枯病叶浸泡出的菌株进行初步的... 本研究为了分离海南省白叶枯病菌优势生理小种及确定其致病力,首先利用6个携单一抗病基因(Xa3,Xa4,xa5,Xa13,Xa21和Xa23)的水稻白叶枯病鉴别品种及对照品种(IR24),对海南省18个市县采集的25份水稻白叶枯病叶浸泡出的菌株进行初步的致病力分析,结果表明,海南水稻白叶枯病叶浸泡出的菌株可以分为6个致病类型,其中2号致病类型是优势致病类型且对xa5、Xa23基因以外的其他基因都致病,为致病力最强的类型。接着从优势致病类型病叶中分离纯化得到单克隆菌株,并利用上述7个鉴别品种及其他8个携单一抗性基因的近等基因系(Xa1,Xa2,Xa7,Xa8,Xa10,Xa11,Xa14,Xa27)对其致病力进行进一步分析。结果表明,单克隆菌株在鉴别寄主上的致病力与病叶渗出菌株的致病力一致,只有xa5、Xa7、Xa23、Xa27基因对其具有抗性。本研究建立了一套简易、快速的分离鉴定水稻白叶枯病优势生理小种的方法,将为海南乃至全国白叶枯病抗病育种提供鉴别菌株与抗病效果好的候选基因。 展开更多
关键词 水稻白叶枯病菌 优势生理小种 致病力
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