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HPLC法测定DNA纳米运输系统载药阿霉素的含量
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作者 杨学礼 +5 位作者 杨瑜涛 张超 韩孟楠 杜洁 李玮 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1239-1243,共5页
目的:建立反相高效液相色谱法测定DNA四面体纳米运输系统中阿霉素的含量。方法:采用Agilent Extend C18色谱柱,以含0.05%三氟乙酸的水溶液-含0.05%三氟乙酸的乙腈溶液(72:28)为流动相,流速1.0 mL·min^-1,检测波长260 nm,柱温30℃... 目的:建立反相高效液相色谱法测定DNA四面体纳米运输系统中阿霉素的含量。方法:采用Agilent Extend C18色谱柱,以含0.05%三氟乙酸的水溶液-含0.05%三氟乙酸的乙腈溶液(72:28)为流动相,流速1.0 mL·min^-1,检测波长260 nm,柱温30℃。结果:阿霉素浓度在5~150μmol·L^-1范围内与峰面积呈现良好的线性关系(r=0.999 5);加样回收率为97.6%~104.2%(RSD<1.5%,n=6)。优化得到DNaseⅠ脱氧核糖核酸酶酶解DNA四面体释放阿霉素的最佳酶解浓度和最佳酶解时间分别为0.3 mg·mL^-1和30min。3批样品中DNA四面体结合阿霉素含量分别为131.6、131L4、132.1μmol·L^-1。结论:该方法为定量分析DNA载体系统中阿霉素的含量提供了有效方法。 展开更多
关键词 反相高效液相色谱 阿霉素 蒽环类抗肿瘤抗生素 DNA四面体载体 纳米运输载体 酶解
一株高效不对称还原产生(R)-苯基乙二醇的菌株筛选、鉴定及全细胞催化体系
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作者 +2 位作者 张超 徐志栋 李玮 《应用与环境生物学报》 CSCD 北大核心 2018年第2期352-356,共5页
R)-苯基乙二醇是合成许多光学活性药物的重要手性中间体,其制备具有重要的现实意义. 以α-羟基苯乙酮为底物,从土壤中筛选得到一株能够立体选择性催化α-羟基苯乙酮产生(R)-苯基乙二醇的细菌菌株HBU-SI7. 经形态学观察和16S rDNA... R)-苯基乙二醇是合成许多光学活性药物的重要手性中间体,其制备具有重要的现实意义. 以α-羟基苯乙酮为底物,从土壤中筛选得到一株能够立体选择性催化α-羟基苯乙酮产生(R)-苯基乙二醇的细菌菌株HBU-SI7. 经形态学观察和16S rDNA序列分析,鉴定此转化菌株为红球菌属菌株Rhodococcus sp. 菌株全细胞催化体系研究表明在邻苯二甲酸二丁酯-磷酸盐缓冲液(V:V = 1:3)的两相催化体系下,菌体转化α-羟基苯乙酮的最优浓度为3.0 g/L,转化率高达96.2%,e.e值为99.3%. 本研究建立的红球菌全细胞催化还原体系对(R)-苯基乙二醇的高效制备具有潜在的研究和应用价值. (图6 表2 参20) 展开更多
关键词 红球菌 全细胞催化 不对称还原 α-羟基苯乙酮 (R)-苯基乙二醇
解脂酵母羰基还原酶基因的克隆表达及酶学性质 预览
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作者 +3 位作者 张超 韩孟楠 徐志栋 李玮 《河北大学学报:自然科学版》 北大核心 2018年第2期168-176,共9页
通过构建重组菌E.coliBL21(DE3)/pET28a-yacrⅡ,成功实现了解脂酵母(Yarrowialipolytica)的羰基还原酶(YaCRⅡ)基因(yacrⅡ)的表达.应用HisTrapHP亲和层析分离纯化YaCRⅡ,并对该酶的酶学性质进行了研究.结果表明,yacrⅡ基因序列长942bp... 通过构建重组菌E.coliBL21(DE3)/pET28a-yacrⅡ,成功实现了解脂酵母(Yarrowialipolytica)的羰基还原酶(YaCRⅡ)基因(yacrⅡ)的表达.应用HisTrapHP亲和层析分离纯化YaCRⅡ,并对该酶的酶学性质进行了研究.结果表明,yacrⅡ基因序列长942bp,编码蛋白的分子质量为37ku,属于中链醇脱氢酶家族.该酶可以催化不对称还原2-羟基苯乙酮生成(S)-1-苯基-1,2-乙二醇,酶的比活力为7.85U/mg,光学纯度为99.9%(e.e.).该酶反应的最适pH值为5.0,最适温度为50℃.底物结构分析表明,该酶对苯环对位有吸电子基团的2-羟基苯乙酮有较高的催化活性.该酶的发现为制备高光学纯度的手性醇提供了一个新的有效方法. 展开更多
关键词 解脂酵母 羰基还原酶 重组表达 酶学性质
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