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甲苯二异氰酸酯诱导人支气管上皮细胞炎症反应及自噬
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作者 陈昱君 张玉 +4 位作者 于功昌 杨玉婷 赛林霖 贾强 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2019年第1期1-7,共7页
目的探讨甲苯二异氰酸酯(TDI)对人支气管上皮细胞(16HBE)自噬的活化及炎性因子人白细胞介素(IL)-4、IL-6表达的影响。方法①制备TDI-人血清白蛋白(HSA),测定TDI-HAS中TDI的质量浓度。②分别以剂量为0.00~400.00 mg/L的TDI-HSA和HSA处理... 目的探讨甲苯二异氰酸酯(TDI)对人支气管上皮细胞(16HBE)自噬的活化及炎性因子人白细胞介素(IL)-4、IL-6表达的影响。方法①制备TDI-人血清白蛋白(HSA),测定TDI-HAS中TDI的质量浓度。②分别以剂量为0.00~400.00 mg/L的TDI-HSA和HSA处理细胞12 h后,以CCK-8实验测定细胞存活率,选择后续实验的TDI-HSA和HSA处理剂量。③分别以剂量为0.00~120.00 mg/L的TDI-HSA和HSA处理细胞12 h后,以流式细胞仪检测细胞中活性氧(ROS)水平,以酶联免疫吸附法检测细胞上清液中IL-4和IL-6的水平。④以剂量为0.00~120.00 mg/L的TDI-HSA处理细胞12 h后,在透射电子显微镜下观察细胞自噬活动,以蛋白免疫印迹法测定酵母自噬相关基因6 (Beclin1)、微管相关蛋白1轻链3(LC3β)和泛素结合蛋白P62的蛋白相对表达水平。结果①40.00、80.00、120.00 mg/L TDI-HSA组中TDI的质量浓度分别为0.44、0.89、1.33 mg/L。②CCK-8实验结果显示,剂量为120.00 mg/L以下的TDI-HSA和HSA不影响细胞存活率,选择0.00~120.00 mg/L为后续实验的TDI-HSA和HAS处理剂量。③40.00、80.00、120.00 mg/L TDI-HSA组16HBE细胞中ROS水平和细胞上清液中IL-4、IL-6的水平均高于同剂量HSA组(P<0.01);16HBE细胞中ROS水平和细胞上清液中IL-4、IL-6的水平均随着TDI-HSA剂量的增加而增加(P<0.01)。④透射电镜观察显示,与0.00 mg/L组比较,40.00、80.00、120.00 mg/L TDI-HSA组16HBE细胞内自噬溶酶体数量明显增多,线粒体空泡化数量增加。随着TDI-HSA剂量的增加,16HBE细胞上清液中Beclin1蛋白相对表达水平及LC3β-Ⅱ/Ⅰ比值逐渐升高(P<0.05),P62蛋白相对表达水平逐渐下降(P<0.01)。结论 TDI-HSA可诱导16HBE细胞ROS及炎性因子表达水平升高并诱导自噬的活化;细胞自噬可能是TDI诱导职业性哮喘发生中气道炎症反应的重要因素。 展开更多
关键词 甲苯二异氰酸酯 人支气管上皮细胞 活性氧 炎性因子 自噬
苯所致再生障碍性贫血小鼠骨髓细胞活性氧和细胞周期的改变
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作者 贺今 刘光峰 +4 位作者 于功昌 胡晨阳 贾强 崔萍 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2019年第2期167-173,共7页
目的探讨骨髓细胞活性氧(ROS)和细胞周期在苯所致小鼠再生障碍性贫血中的作用。方法取无特定病原体级雄性CD1小鼠随机分为对照组和染毒组,每组10只。染毒组小鼠予皮下注射剂量为2 mL/kg体质量的苯和玉米油(1∶1,V/V)混合物,对照组小鼠... 目的探讨骨髓细胞活性氧(ROS)和细胞周期在苯所致小鼠再生障碍性贫血中的作用。方法取无特定病原体级雄性CD1小鼠随机分为对照组和染毒组,每组10只。染毒组小鼠予皮下注射剂量为2 mL/kg体质量的苯和玉米油(1∶1,V/V)混合物,对照组小鼠皮下注射等体积玉米油;每周注射3次,累计注射25次。染毒结束后,检测小鼠周围血血常规和网织红细胞百分比,对小鼠股骨进行组织病理学检查,以固相萃取-气相色谱-质谱法检测小鼠血液、肝脏和骨髓中苯及其代谢产物氢醌、苯酚的水平,以流式细胞术检测骨髓单个核细胞(BMMNCs)中ROS水平与细胞周期,以免疫印迹法检测BMMNCs中细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)和周期蛋白依赖性激酶-4(CDK4)的表达。结果自第10次染毒起,染毒组小鼠体质量低于同时间点对照组(P<0.05)。染毒结束后,染毒组小鼠周围血中白细胞、红细胞、血小板的计数和血红蛋白水平、网织红细胞百分比均低于对照组(P<0.05);骨髓组织病理学检查示,染毒组小鼠骨髓造血细胞减少,非造血细胞增多。本研究成功建立了苯所致再生障碍性贫血小鼠模型。与对照组比较,染毒组小鼠血液、肝脏及骨髓中苯、氢醌、苯酚的水平均升高(P<0.05)。对于染毒组小鼠,苯水平由高至低依次为血液、肝脏和骨髓;氢醌和苯酚主要蓄积在血液和骨髓中。与对照组比较,染毒组小鼠BMMNCs中ROS水平、S期细胞比例和CyclinD1、CDK4的蛋白相对表达水平均升高(P<0.01),G1期细胞比例降低(P<0.01)。结论苯及其代谢物引起的骨髓细胞ROS水平升高及S期细胞阻滞在苯所致小鼠再生障碍性贫血发生发展中具有重要作用。 展开更多
关键词 氢醌 苯酚 再生障碍性贫血 活性氧 细胞周期
毒死蜱生殖毒性与神经毒性研究进展
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作者 张叶翠 李翎 +7 位作者 胡晨阳 贾强 郭启明 张玉 于功昌 李超 赛林霖 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2019年第5期628-632,共5页
毒死蜱,又名氯吡硫磷,相对分子质量为350.62,熔点为42.5~43.0℃,纯品为白色或灰白色颗粒状结晶,易挥发,易溶于大多数有机溶剂。毒死蜱于1965年由美国陶氏化学公司研发并首次进入市场,其作为一种广谱杀虫剂,具有良好的触杀、胃毒和熏蒸作... 毒死蜱,又名氯吡硫磷,相对分子质量为350.62,熔点为42.5~43.0℃,纯品为白色或灰白色颗粒状结晶,易挥发,易溶于大多数有机溶剂。毒死蜱于1965年由美国陶氏化学公司研发并首次进入市场,其作为一种广谱杀虫剂,具有良好的触杀、胃毒和熏蒸作用,常用于水稻、玉米、蔬菜、果树及茶树等病虫害防治。毒死蜱是我国农业生产中病虫害防治的主要农药之一[1]。其可经呼吸道、皮肤吸收,主要分布于肝脏、肾脏、脾脏等血流量较高的器官[2]。 展开更多
关键词 毒死蜱 生殖毒性 神经毒性 研究进展
邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯对小鼠睾丸损伤及p-CREB蛋白表达的影响 预览
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作者 张玉 +3 位作者 白金 韩茹 陈尚雅 赛林霖 《癌变.畸变.突变》 CAS 2019年第4期319-322,330共5页
目的:探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(DEHP)对小鼠睾丸损伤及睾丸组织磷酸化环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(p-CREB)表达的影响。方法:选用ICR初断乳雄性小鼠40只,随机分为对照组(玉米油)和DEHP染毒组(250、500、1000mg/kg),经口灌胃,1次/... 目的:探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(DEHP)对小鼠睾丸损伤及睾丸组织磷酸化环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(p-CREB)表达的影响。方法:选用ICR初断乳雄性小鼠40只,随机分为对照组(玉米油)和DEHP染毒组(250、500、1000mg/kg),经口灌胃,1次/天,6天/周,连续8周,于末次染毒24h后处死动物,称取睾丸、附睾质量计算脏器系数并进行精子计数,检测睾丸组织形态学改变,采用免疫组织化学SP法检测睾丸组织p-CREB蛋白的表达。结果:与对照组相比,250、500和1000mg/kgDEHP染毒组小鼠附睾脏器系数及精子计数均明显降低(P<0.05),1000mg/kg组小鼠睾丸系数亦明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。各DEHP染毒组小鼠睾丸曲细精管上皮细胞出现层次减少、排列疏松、紊乱等改变;随着染毒剂量升高,睾丸组织中p-CREB蛋白表达下降,DEHP500和1000mg/kg组较对照组差异有统计学意义(P<0.05)。结论:DEHP可致小鼠曲细精管生精上皮细胞损伤、精子数下降、p-CREB蛋白表达减少。 展开更多
关键词 邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯 睾丸 生精功能 磷酸化环磷酸腺苷反应元件结合蛋白
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脂肪间充质干细胞对染矽尘大鼠肺损伤修复的研究
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作者 陈尚雅 韩茹 +7 位作者 张恩国 杨叶 贾强 赛林霖 张玉 杜忠君 邵华 《中华劳动卫生职业病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期20-25,共6页
目的观察脂肪间充质干细胞(ADSCs)对矽尘所致大鼠肺损伤的修复作用。方法选取SPF级健康雌性SD大鼠28只,其中供体大鼠8只,获取大鼠原代ADSCs-GFP,对矽肺模型大鼠进行ADSCs-GFP尾静脉注射,定期观察肺脏的绿色荧光表达情况,确定ADSCs的归... 目的观察脂肪间充质干细胞(ADSCs)对矽尘所致大鼠肺损伤的修复作用。方法选取SPF级健康雌性SD大鼠28只,其中供体大鼠8只,获取大鼠原代ADSCs-GFP,对矽肺模型大鼠进行ADSCs-GFP尾静脉注射,定期观察肺脏的绿色荧光表达情况,确定ADSCs的归巢能力。获取大鼠原代ADSCs,将20只受体大鼠随机分为空白对照组、模型组、溶剂对照组和ADSCs组,通过非暴露式气管滴注法建立矽肺大鼠模型;滴注二氧化硅24h后,ADSCs组尾静脉注射10^6个/kg体重的ADSC,干预28d后观察评价肺组织病理学。通过免疫组化法检测凋亡相关蛋白Caspase-3、Bcl-2和细胞色素C,探索ADSCs对矽肺模型大鼠肺纤维化的早期干预机制。结果模型组大鼠暴露于二氧化硅28d后,具有明显的肺纤维化表现。与模型组和溶剂对照组比较,ADSCs组肺部炎症减轻、矽结节数量减少、胶原纤维沉积面积减少。免疫组化结果显示,ADSCs移植后大鼠肺组织Caspase-3、细胞色素C蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达增加。结论ADSCs回输对于延缓染矽尘大鼠早期矽肺纤维化具有明显的作用,其机制可能与调节细胞凋亡过程有关。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞 矽肺 大鼠 纤维化 细胞凋亡
邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯对初断乳雄性小鼠的毒性作用
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作者 白金 张玉 +3 位作者 张元元 赛林霖 陈尚雅 《中国工业医学杂志》 CAS 2019年第3期203-204,共2页
选用ICR初断乳雄性小鼠,按体重随机分为对照组和250、500、1 000 mg/kg邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(DEHP)染毒组,连续染毒灌胃8周,观察各组小鼠的一般状况、血液指标、脏器系数及病理组织学检查。结果显示,DEHP能损伤小鼠肝脏和睾丸,且睾... 选用ICR初断乳雄性小鼠,按体重随机分为对照组和250、500、1 000 mg/kg邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(DEHP)染毒组,连续染毒灌胃8周,观察各组小鼠的一般状况、血液指标、脏器系数及病理组织学检查。结果显示,DEHP能损伤小鼠肝脏和睾丸,且睾丸损伤较明显。 展开更多
关键词 邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(DEHP) 小鼠 生殖毒性 脏器系数
染矽尘大鼠肺组织纤维化及自噬相关蛋白的变化
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作者 杨玉婷 张玉 +4 位作者 于功昌 陈昱君 贾强 邵华 《中华劳动卫生职业病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期890-895,共6页
目的 探讨游离二氧化硅(SiO2)粉尘暴露大鼠肺组织不同时间点自噬标志物微管相关蛋白1轻链3(Microtubules associated protein 1 light chain 3,LC3)和酵母自噬相关基因6(Beclin1)的变化。 方法 将72只无特定病原体级(SPF)Wistar雄性大... 目的 探讨游离二氧化硅(SiO2)粉尘暴露大鼠肺组织不同时间点自噬标志物微管相关蛋白1轻链3(Microtubules associated protein 1 light chain 3,LC3)和酵母自噬相关基因6(Beclin1)的变化。 方法 将72只无特定病原体级(SPF)Wistar雄性大鼠随机分为溶剂对照组和SiO2模型组,模型组大鼠采用非暴露式气管滴注法一次性给予SiO2悬浮液建立矽肺模型,溶剂对照组大鼠给予等量生理盐水。造模后两组分别于1、7、14、21、28、60 d处死6只大鼠,用苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色观察两组大鼠不同时间点肺组织常规病理变化和纤维化程度;用酶联免疫吸附(ELISA)法检测肺组织匀浆中转化生长因子(TGF)-β、白细胞介素(IL)-1和肿瘤坏死因子(TNF)-α的水平;用Western blot法检测肺组织中自噬相关蛋白LC3和Beclin1的相对表达水平。 结果 HE染色结果显示,模型组大鼠肺组织在第1天至第60天持续存在炎性反应,炎性评分均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);Masson染色观察结果显示,模型组大鼠肺组织从第14天开始出现少量胶原纤维增生,至第60天可见大量胶原纤维,纤维化评分明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);对照组大鼠肺组织未见胶原纤维增生。ELISA法测定结果显示,模型组大鼠在染尘后各时间点肺组织匀浆中IL-1、TNF-α和TGF-β的含量均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示,模型组大鼠肺组织Beclin1蛋白表达水平在第7、14、21、28和60天时呈下降趋势,均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);模型组大鼠肺组织LC3II/LC3I的比值在第1、7、14、21、28和60天时呈下降趋势,均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。 结论 游离SiO2粉尘致大鼠矽肺发病过程中,自噬相关蛋白LC3和Beclin1的表达水平与矽肺的不同发展阶段有关。在大鼠染矽尘早期,肺组织以炎性变化为主;随着染矽尘� 展开更多
关键词 自噬 矽肺 纤维化 炎性反应
西玛津染毒非洲爪蟾的肝损伤及相关基因的表达
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作者 赛林霖 曲滨鹏 +5 位作者 贾强 张玉 于功昌 韩明明 杜忠君 《环境与健康杂志》 北大核心 2018年第12期1043-1046,F0003共5页
目的研究除草剂西玛津对非洲爪蟾肝脏的毒性及相关基因表达的影响。方法随机选取第46阶段(孵化后第6天)健康混合性别的非洲爪蟾蝌蚪600只,分别于0[对照(0.01%DMSO)]、0.1、1、10、100μg/L西玛津溶液中连续饲养100 d。观察非洲爪蟾肝脏... 目的研究除草剂西玛津对非洲爪蟾肝脏的毒性及相关基因表达的影响。方法随机选取第46阶段(孵化后第6天)健康混合性别的非洲爪蟾蝌蚪600只,分别于0[对照(0.01%DMSO)]、0.1、1、10、100μg/L西玛津溶液中连续饲养100 d。观察非洲爪蟾肝脏组织的病理学改变;采用Q-RT-PCR法检测雌雄爪蟾肝脏相关基因(hsp70、hsp90、ar、er、gr、vtga2)的表达水平。结果10、100μg/L西玛津可使肝脏细胞萎缩、坏死和空泡。西玛津对雌雄非洲爪蟾肝脏组织中的hsp90、ar、er、gr、vtga2基因表达量未见显著影响,只有0.1μg/L西玛津显著诱导了雌性爪蟾肝脏中的hsp70的表达水平上调(P<0.05)。结论西玛津可对非洲爪蟾的肝脏组织学结构产生病理损伤,但未显示出内分泌干扰物的特性。 展开更多
关键词 西玛津 非洲爪蟾 肝脏 基因
农达对小鼠脾脏淋巴细胞亚群和氧化应激状态的影响
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作者 范甜甜 杨治峰 +1 位作者 张振玲 《环境与健康杂志》 北大核心 2017年第9期767-770,共4页
目的 探讨农达(roundup,活性成分为草甘膦)对小鼠脾脏淋巴细胞亚群和氧化应激状态的影响。方法 将48只成熟SPF级雄性Balb/c小鼠随机分为阴性对照(蒸馏水)组和20、200、2 000 mg/kg农达染毒组,每组12只,灌胃染毒0.02ml/g,每日1次,连... 目的 探讨农达(roundup,活性成分为草甘膦)对小鼠脾脏淋巴细胞亚群和氧化应激状态的影响。方法 将48只成熟SPF级雄性Balb/c小鼠随机分为阴性对照(蒸馏水)组和20、200、2 000 mg/kg农达染毒组,每组12只,灌胃染毒0.02ml/g,每日1次,连续染毒30 d。计算脾脏系数,采用流式细胞仪分析小鼠脾脏CD3+、CD4+、CD8+T细胞,CD45r+B细胞,CD49b+NK细胞比例并计算CD4+T/CD8+T比值;测定小鼠脾脏中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力。结果 染毒30 d后,各农达染毒组小鼠脾脏重量呈下降趋势;与阴性对照组相比,200、2 000mg/kg农达染毒组小鼠脾脏CD3+、CD4+、CD8+T细胞比例明显升高,CD45r+B细胞比例明显下降,200 mg/kg农达染毒组CD4+T/CD8+T比值下降,差异有统计学意义(P〈0.01)。各染毒组小鼠脾脏中MDA含量均增加,GSH-Px活力均降低,差异有统计学意义(P〈0.01)。结论 除草剂农达可能通过影响小鼠脾脏淋巴细胞亚群和氧化应激状态,抑制小鼠免疫功能。 展开更多
关键词 除草剂 农达 脾脏 淋巴细胞 氧化应激
染矽尘大鼠差异性表达基因生物信息学分析 被引量:2
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作者 陈尚雅 崔冠群 +3 位作者 贾强 杜忠君 邵华 《中国职业医学》 北大核心 2017年第2期181-187,共7页
目的 采用生物信息学方法,对染矽尘大鼠周围血标本的芯片进行差异基因表达谱分析,筛选与矽肺发生发展相关的潜在差异表达基因(DEGs)和信号通路.方法 从高通量基因表达数据库检索染矽尘大鼠的周围血样品基因表达微阵列芯片数据集GSE270... 目的 采用生物信息学方法,对染矽尘大鼠周围血标本的芯片进行差异基因表达谱分析,筛选与矽肺发生发展相关的潜在差异表达基因(DEGs)和信号通路.方法 从高通量基因表达数据库检索染矽尘大鼠的周围血样品基因表达微阵列芯片数据集GSE27023,采用配对样本t检验和倍比法筛选DEGs,采用DAVID数据库进行基因本体分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析,采用相互作用基因库检索工具和Cytoscape软件构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络.结果 共筛选出2 767个刺激反应DEGs,上调基因1 363个,下调基因1 404个.KEGG通路分析结果显示,钙信号通路、神经活性的受体-配体相互作用通路和Ras相关蛋白1信号通路等39条信号通路被显著富集,DEGs富集最多、最显著的是钙信号通路.PPI网络分析筛选出节点度最高的前10个中心蛋白编码基因分别是丝裂原活化蛋白激酶14(Mapk14)、DNA指导的RNA聚合酶Ⅱ亚基、成红细胞白血病病毒癌基因同源物4、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、受体相互作用的丝氨酸/苏氨酸激酶4、PH域富含亮氨酸重复蛋白磷酸酶2、DNA指导的RNA聚合酶Ⅲ亚基、神经源性基因Notch同源蛋白1、组蛋白去乙酰化酶1、酵母交换型转换/蔗糖不发酵相关基质关联肌动蛋白依赖性调节因子亚家族A成员4,其中表达上调、节点度最高的是Mapk14,表达下调、节点度最高的是Bcl-2.结论 通过再次分析大鼠染矽尘后周围血芯片数据,筛选出与大鼠染矽尘毒性反应相关的39条信号通路和10个DEGs;钙信号通路和基因Mapk14、Bcl-2可能在大鼠矽肺的发生发展过程中发挥重要作用. 展开更多
关键词 矽肺 大鼠 生物信息学 基因 蛋白
大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞系RLE-6TN诱导脂肪间充质干细胞体外分化 预览 被引量:1
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作者 陈尚雅 崔冠群 +5 位作者 张玉 张恩国 杨叶 杜忠君 邵华 《中国组织工程研究》 北大核心 2017年第33期5280-5286,共7页
背景:研究表明,骨髓间充质干细胞具有在体外分化为肺泡上皮细胞的可能性,但至今未见脂肪间充质干细胞与肺泡上皮细胞通过长时间Transwell共培养,诱导脂肪间充质干细胞分化的相关报道。目的:观察大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞系RLE-6TN诱导... 背景:研究表明,骨髓间充质干细胞具有在体外分化为肺泡上皮细胞的可能性,但至今未见脂肪间充质干细胞与肺泡上皮细胞通过长时间Transwell共培养,诱导脂肪间充质干细胞分化的相关报道。目的:观察大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞系RLE-6TN诱导大鼠脂肪间充质干细胞分化为肺泡Ⅱ型上皮细胞的可行性。方法:取3只SPF级健康雌性SD大鼠作为供体,分离、提取、培养、鉴定脂肪间充质干细胞。实验分2组:实验组(脂肪间充质干细胞与大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞系RLE-6TN进行Transwell共培养)和对照组(脂肪间充质干细胞单独培养)。共培养第21天,倒置显微镜观察各组脂肪间充质干细胞的形态变化,对脂肪间充质干细胞进行SP-C免疫荧光染色,荧光显微镜下观察蛋白表达并拍照,采用Imageproplus6.0软件分析荧光表达的积分吸光度值。结果与结论:①共培养21d,实验组的脂肪间充质干细胞形态由长梭形、成纤维细胞样,逐渐转化为卵圆形、多边形,对照组脂肪间充质干细胞形态保持成纤维细胞样;②荧光显微镜下观察,实验组脂肪间充质干细胞可见红色荧光表达,对照组无红色荧光表达,实验组的荧光表达较对照组增强(P<0.05);③结果表明,大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞系RLE-6TN能够在长时间(21d)共培养条件下,诱导脂肪间充质干细胞分化为肺泡上皮细胞。 展开更多
关键词 干细胞 脂肪肝细胞 脂肪间充质干细胞 肺泡上皮细胞 RLE-6TN 共培养 TRANSWELL 细胞分化 大鼠 国家自然科学基金
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TDI致哮喘小鼠肺组织中ROR-γt、IL-17A和Foxp3基因表达及其启动子区甲基化变化 被引量:7
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作者 王晓群 贾强 +5 位作者 张振玲 于功昌 张玉 杨治峰 邵华 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2017年第1期7-13,共7页
目的研究甲苯二异氰酸酯(TDI)致哮喘过程中维甲酸相关核孤儿受体-γt(ROR-γt)、白细胞介素(IL)-17A和叉头状/翅状螺旋蛋白3(Foxp3)基因表达及其启动子区甲基化变化情况。方法无特定病原体级健康雄性BALB/c小鼠随机分为哮喘组... 目的研究甲苯二异氰酸酯(TDI)致哮喘过程中维甲酸相关核孤儿受体-γt(ROR-γt)、白细胞介素(IL)-17A和叉头状/翅状螺旋蛋白3(Foxp3)基因表达及其启动子区甲基化变化情况。方法无特定病原体级健康雄性BALB/c小鼠随机分为哮喘组和对照组,每组20只。哮喘组小鼠于第1和8天于耳背分别涂抹20μL质量体积比为0.30%的TDI致敏,第15天经气管予20μL质量体积比为0.01%的TDI激发;对照组小鼠予等体积的溶剂进行致敏与激发。激发后24 h,观察小鼠气管和肺组织病理学变化情况,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)进行炎性细胞计数与分类,以酶联免疫吸附实验法检测BALF上清液中IL-4和干扰素-γ(IFN-γ)的水平,以实时荧光定量聚合酶链式反应法检测肺组织中ROR-γt、IL-17A和Foxp3的mRNA表达,以Mass Array飞行质谱法检测肺组织中ROR-γt、IL-17A和Foxp3基因启动子区甲基化程度。结果经TDI致敏激发后,哮喘组小鼠均出现明显的喘息、呼吸急促、点头呼吸、弓背、前肢缩抬等哮喘症状,对照组小鼠无上述症状。苏木素-伊红染色可见哮喘组小鼠气管和肺组织均出现明显炎性病变。与对照组比较,哮喘组小鼠BALF中白细胞总数、中性粒细胞百分比、嗜酸性粒细胞百分比、IL-4水平和IFN-γ水平均升高(P〈0.01),淋巴细胞百分比和单核细胞百分比均下降(P〈0.01)。与对照组比较,哮喘组小鼠肺组织中ROR-γt mRNA相对表达水平升高(P〈0.01),其启动子区CpG位点3、4、5、6、8、11和12的甲基化程度均下降(P〈0.05);IL-17A mRNA相对表达水平升高(P〈0.01),其启动子区CpG位点6、7的甲基化程度均下降(P〈0.01);Foxp3 mRNA相对表达水平下降(P〈0.01),其启动子区CpG位点1和10的甲基化程度均升高(P〈0.01)。结论 TDI所致哮喘发病过程中存在Th17/Treg细胞免疫失衡;ROR-γt、IL-17A和Foxp3基因启动子区甲基化异常可� 展开更多
关键词 甲苯二异氰酸酯 哮喘 职业病 FOXP3 ROR-γt 白细胞介素 DNA甲基化 Th17/Treg细胞平衡
农达对小鼠生精作用的影响
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作者 范甜甜 杨治峰 +1 位作者 张振玲 《环境与健康杂志》 北大核心 2017年第5期391-393,共3页
目的探讨农达(roundup,活性成分为草甘膦)对小鼠生精作用的影响。方法将24只成年SPF级雄性Balb/c小鼠随机分为阴性对照(蒸馏水)组和20、200、2 000 mg/kg农达染毒组,每组6只。采用经口灌胃方式进行染毒,染毒容量为20 ml/kg,每天1次... 目的探讨农达(roundup,活性成分为草甘膦)对小鼠生精作用的影响。方法将24只成年SPF级雄性Balb/c小鼠随机分为阴性对照(蒸馏水)组和20、200、2 000 mg/kg农达染毒组,每组6只。采用经口灌胃方式进行染毒,染毒容量为20 ml/kg,每天1次,连续染毒30 d。测定小鼠精子数量、精子活动率和血清中睾酮(T)浓度及睾丸生精细胞的凋亡情况。结果与阴性对照组相比,200、2 000 mg/kg农达染毒组小鼠精子数量减少、精子活动度降低;各剂量农达染毒组小鼠血清睾酮浓度均降低,而睾丸生精细胞的凋亡率均升高,差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论在本实验染毒时间和剂量范围内,农达对雄性Balb/c小鼠的生精功能有一定的毒性作用。 展开更多
关键词 除草剂 农达 生精毒性
改良型甲苯二异氰酸酯哮喘小鼠模型的建立
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作者 王晓群 贾强 +4 位作者 张振玲 于功昌 张玉 邵华 《环境与健康杂志》 CAS 北大核心 2016年第11期954-957,F0003共5页
目的采用气管滴注方式进行甲苯二异氰酸酯(toluene-diisocyanate,TDI)激发给药,改进TDI哮喘小鼠模型建立方法,并对模型的建立进行评价。方法将20只SPF级健康雌性BALB/c小鼠随机分为TDI组和溶剂对照组,每组10只。TDI组小鼠第1、8天于... 目的采用气管滴注方式进行甲苯二异氰酸酯(toluene-diisocyanate,TDI)激发给药,改进TDI哮喘小鼠模型建立方法,并对模型的建立进行评价。方法将20只SPF级健康雌性BALB/c小鼠随机分为TDI组和溶剂对照组,每组10只。TDI组小鼠第1、8天于耳背分别涂抹20μl 0.3%TDI致敏,第15天采用气管滴注法给予20μl 0.01%TDI进行激发,溶剂对照组给予等量溶剂(丙酮与橄榄油混合物)。激发结束后,观察各组小鼠的行为学改变。致敏实验后每组取6只小鼠收集支气管肺泡灌洗液(BALF)并进行炎细胞计数分类,以ELISA法检测BALF上清中白细胞介素-4(IL-4)、γ-干扰素(IFN-γ)含量;以HE染色观察小鼠肺组织病理变化。结果激发结束后,TDI组小鼠均出现呼吸急促、点头呼吸、弓背、前肢缩抬等行为学改变,溶剂对照组未出现上述症状。TDI组小鼠BALF中白细胞总数、嗜中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞数目均高于溶剂对照组,且嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞百分比高于溶剂对照组,BALF中细胞因子IL-4、IFN-γ含量高于溶剂对照组,差异均有统计学意义(P〈0.05)。HE染色可见TDI组小鼠肺组织内支气管管壁破坏明显,管腔增厚,支气管管腔内及肺泡腔内有大量的炎细胞浸润,而溶剂对照组未见明显病理变化。结论采用气管滴注方式进行TDI激发给药,可成功建立TDI哮喘小鼠模型。 展开更多
关键词 甲苯二异氰酸酯 职业性哮喘 气管滴注 小鼠模型
马拉硫磷对大鼠睾丸标志酶活力和精子质量的影响 被引量:1
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作者 耿晓 邵华 《中华劳动卫生职业病杂志》 CAS CSCD 2016年第5期329-332,共4页
目的探讨马拉硫磷亚慢性染毒对雄性大鼠睾丸标志酶活力和精子质量的影响。方法40只SPF级未成年Wistar雄性大鼠被随机分为对照组和3个染毒组。染毒组分别以33.75、54.00、108.00mg/kg(1/32LD50、1/20LD50,1/10LD50)马拉硫磷对... 目的探讨马拉硫磷亚慢性染毒对雄性大鼠睾丸标志酶活力和精子质量的影响。方法40只SPF级未成年Wistar雄性大鼠被随机分为对照组和3个染毒组。染毒组分别以33.75、54.00、108.00mg/kg(1/32LD50、1/20LD50,1/10LD50)马拉硫磷对雄性大鼠连续灌胃染毒60d,对照组给予等量蒸馏水。染毒后,测定大鼠体重,处死后立即取睾丸和附睾并测定其重量;取左侧附睾尾测定大鼠精子活率、精子数量及精子畸形率;左侧睾丸冻存于-80℃测定睾丸标志酶酸性磷酸酶(ACP)、乳酸脱氢酶(LDH)、山梨醇脱氢酶(SDH)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)活力。结果54.00、108.00mg/kg染毒组大鼠体重、睾丸重呈下降趋势,与对照组的差异有统计学意义(P〈0.05),染毒组大鼠精子数量及精子活率降低,精子畸形率上升,108.00mg/kg染毒组与对照组的差异有统计学意义(P〈0.05)。108.00mg/kg染毒组ACP和γ—GT活力降低,LDH活力上升,与对照组的差异均有统计学意义(P〈0.05);SDH活力未见明显改变。结论马拉硫磷降低了雄性大鼠精子数量和精子活率,提高了精子畸形率,抑制了大鼠睾丸标志酶活力。 展开更多
关键词 马拉硫磷 大鼠 酸性磷酸酶 乳酸脱氢酶
马拉硫磷对大鼠睾丸生精功能的影响
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作者 耿晓 +1 位作者 韩贵芝 邵华 《中华劳动卫生职业病杂志》 CAS CSCD 2015年第3期180-185,共6页
目的 探讨马拉硫磷对雄性大鼠睾丸生精功能的影响及其作用机制.方法 40只SPF级未成年Wistar雄性大鼠被随机分为4组(对照组和3个染毒组,每组10只).染毒组分别以33.75、54.00、108.00 mg/kg(1/32LD50,1/20LD50,1/10LD50)剂量马拉硫磷... 目的 探讨马拉硫磷对雄性大鼠睾丸生精功能的影响及其作用机制.方法 40只SPF级未成年Wistar雄性大鼠被随机分为4组(对照组和3个染毒组,每组10只).染毒组分别以33.75、54.00、108.00 mg/kg(1/32LD50,1/20LD50,1/10LD50)剂量马拉硫磷对雄性大鼠连续灌胃染毒60 d,对照组给予等量蒸馏水.染毒结束后,测定大鼠体重,处死后立即取睾丸和附睾,测定重量及其脏器系数;取左侧附睾尾测定大鼠精子活率、精子数量及精子畸形率;采用HE染色法、原位末端标记法(TUNEL)及免疫组化SABC法观察大鼠睾丸组织的病理学变化、细胞凋亡和Bcl-2/Bax表达情况.结果 54.00、108.00mg/kg染毒组大鼠体重、睾丸重均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);54.00、108.00 mg/kg染毒组组大鼠精子活率均低于对照组,精子畸形率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);108.00 mg/kg染毒组精子数量明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01).精子数量、精子畸形率与染毒剂量呈负相关,精子畸形率与染毒剂量呈正相关(r=--0.81、r=-0.52、r=0.85,P<0.01).3个染毒组生精细胞凋亡率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01).54.00、108.00 mg/kg染毒组Bax蛋白表达量低于对照组,Bcl-2蛋白表达值高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01).睾丸组织病理学检查发现,随马拉硫磷染毒剂量的增加,生精小管在不同剂量出现退行性改变.结论 马拉硫磷可影响大鼠睾丸生精功能,使大鼠在睾丸组织及Bax、Bcl-2蛋白表达水平发生改变. 展开更多
关键词 马拉硫磷 大鼠 睾丸
2,4-二氯苯氧乙酸对子代大鼠发育及脑组织的氧化损伤作用 预览
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作者 张振玲 +4 位作者 赛林霖 张放 杨治峰 谢琳 贾强 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2015年第3期221-224,共4页
目的:研究大鼠孕期和哺乳期暴露2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)对子代发育及脑组织脂质过氧化的损伤作用。方法:Wistar大鼠于受孕后第2天开始经口灌胃染毒2,4-D(0、25、50和100 mg/kg)直至仔鼠出生后第21天,每天1次,连续42 d。期间检测... 目的:研究大鼠孕期和哺乳期暴露2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)对子代发育及脑组织脂质过氧化的损伤作用。方法:Wistar大鼠于受孕后第2天开始经口灌胃染毒2,4-D(0、25、50和100 mg/kg)直至仔鼠出生后第21天,每天1次,连续42 d。期间检测仔鼠生理及早期神经行为发育指标。断乳1周后处死仔鼠检测脑组织丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)的含量及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力。结果:与对照组相比,100 mg/kg剂量组仔鼠体质量从出生后14 d开始降低,50 mg/kg剂量组仔鼠体质量从出生后21 d开始降低,差异均有统计学意义(P〈0.05),而其他各生理发育指标差异均无统计学意义(P〉0.05)。神经行为测试中100 mg/kg剂量组仔鼠断崖回避、空中翻正及听觉惊愕的阳性发生率均明显低于对照组(P〈0.05),出现神经行为发育迟缓。50和100mg/kg剂量组仔鼠脑组织中MDA含量升高,100 mg/kg剂量组仔鼠脑组织GSH含量及GSH-Px的活性下降,与对照组相比差异均有统计学意义(P均〈0.05)。结论:大鼠孕期和哺乳期暴露2,4-D致子代神经发育迟缓可能与2,4-D引起脑组织脂质过氧化损伤有关。 展开更多
关键词 2 4-二氯苯氧乙酸 神经行为 丙二醛 还原型谷胱甘肽 谷胱甘肽过氧化物酶
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邻苯二甲酸酯的神经毒性作用研究进展 被引量:3
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作者 杨治峰 杜忠君 《环境与健康杂志》 CAS 北大核心 2015年第7期647-649,共3页
邻苯二甲酸酯(phthalates,PAEs)是塑胶工业中最为常用的增塑剂和软化剂。该物质可通过食品包装材料直接迁移到食品中,也可通过含有该物质的塑料制品迁移到环境中,对空气、水、土壤和食品造成污染而危害人类的健康。PAEs具有雌激素效应... 邻苯二甲酸酯(phthalates,PAEs)是塑胶工业中最为常用的增塑剂和软化剂。该物质可通过食品包装材料直接迁移到食品中,也可通过含有该物质的塑料制品迁移到环境中,对空气、水、土壤和食品造成污染而危害人类的健康。PAEs具有雌激素效应,对神经系统具有毒性作用。笔者就PAEs的神经毒性作用及其机制的研究进展作一综述,为今后对该物质的毒理学研究提供参考。 展开更多
关键词 邻苯二甲酸酯 增塑剂 神经毒性 内分泌干扰物
2,4-二氯苯氧乙酸对非洲爪蟾蝌蚪生存及发育的影响
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作者 贾强 +5 位作者 杜忠君 张放 于功昌 杨治峰 谢琳 赛林霖 《中国工业医学杂志》 CAS 2015年第2期116-117,共2页
探讨2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)对非洲爪蟾蝌蚪的毒性效应。采用发育至51期蝌蚪进行急性和慢性毒性实验,结果显示2,4-D对非洲爪蟾蝌蚪毒性属低毒,长期暴露能增加蝌蚪的死亡率,抑制蝌蚪的变态及生长发育。建议使用2,4-D时选择合适的浓度... 探讨2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)对非洲爪蟾蝌蚪的毒性效应。采用发育至51期蝌蚪进行急性和慢性毒性实验,结果显示2,4-D对非洲爪蟾蝌蚪毒性属低毒,长期暴露能增加蝌蚪的死亡率,抑制蝌蚪的变态及生长发育。建议使用2,4-D时选择合适的浓度,尽量避免水环境污染。 展开更多
关键词 2 4-D 非洲爪蟾 蝌蚪 急性毒性 慢性毒性
苯并咪唑对体外培养大鼠睾丸支持细胞影响研究 被引量:3
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作者 于功昌 谢琳 +4 位作者 郭启明 赛林霖 李莉 王筱芬 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期11-15,共5页
目的研究苯并咪唑对体外培养大鼠睾丸支持细胞波形蛋白和微管蛋白表达的影响。方法取18—20日龄Wistar雄性大鼠睾丸支持细胞,通过Tris-Hcl低渗处理进行细胞纯化,用MTT法检测阴性对照组、溶剂对照组、苯并咪唑剂量组(0.1、1、10和100... 目的研究苯并咪唑对体外培养大鼠睾丸支持细胞波形蛋白和微管蛋白表达的影响。方法取18—20日龄Wistar雄性大鼠睾丸支持细胞,通过Tris-Hcl低渗处理进行细胞纯化,用MTT法检测阴性对照组、溶剂对照组、苯并咪唑剂量组(0.1、1、10和100μg/m1)中大鼠睾丸支持细胞的生长抑制率。用免疫细胞化学法检测细胞中波形蛋白、α/β-微管蛋白的表达。结果10和100μg/ml苯并咪唑剂量组在24、48和72h时均明显抑制了支持细胞的增殖;10和100pg/ml苯并咪唑剂量组中支持细胞波形蛋白、α/β-微管蛋白表达明显减少。结论苯并咪唑对体外培养大鼠支持细胞毒作用明显,抑制睾丸支持细胞的增殖,影响波形蛋白、α/β-微管蛋白的表达。 展开更多
关键词 苯并咪唑 支持细胞 波形蛋白 微管蛋白 大鼠
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