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甘肃地区女性乳腺导管癌患者血浆中miR-21-5p高表达 预览
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作者 郭欢 李海宁 +14 位作者 郭雁 曾祥挺 王涛 郭红云 陈晓怡 赵信科 李永辉 王海涛 周海红 王兰 闵建平 朱公建 张永东 李应东 苏海 《甘肃医药》 2019年第1期1-5,20共6页
目的:研究甘肃地区乳腺导管癌妇女血浆中miR-21-5p的表达。方法:分别通过芯片法和茎环Q-PCR(Stem-loopQ-PCR)检测甘肃43名汉族乳腺导管癌患者(BC)和44名健康者(NC)血浆中的miR-21-5p水平。同时通过Stem-100PQ-PCR法测定正常乳腺上皮细胞... 目的:研究甘肃地区乳腺导管癌妇女血浆中miR-21-5p的表达。方法:分别通过芯片法和茎环Q-PCR(Stem-loopQ-PCR)检测甘肃43名汉族乳腺导管癌患者(BC)和44名健康者(NC)血浆中的miR-21-5p水平。同时通过Stem-100PQ-PCR法测定正常乳腺上皮细胞系(HsBST-578)与四种乳腺癌细胞系中miR-21-5p的表达。结果:Q-PCR结果显示,与健康供者相比,乳腺导管癌患者血浆miR-21-5p水平显著上调(P=0.0043)。工作特征曲线(ROC)也显示了miR-21-5p对患者的显著诊断能力(AUC=0.6583,95%CI:0.5345~0.7822,P=0.0154)。miR-21-5p的血浆水平与TNM分期密切相关。乳腺癌细胞系MCF-7(5.428±1.391)中miR-21-5p的表达水平高于正常乳腺上皮细胞HsBST-578。结论:miR-21-5p在甘肃地区乳腺导管癌患者血浆中的高表达,表明miR-21-5p可以作为乳腺导管癌血浆生物标志物的潜在靶标。 展开更多
关键词 乳腺导管癌 血浆 循环miRNA miR-21-5p 高表达
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一种简易高效的大鼠原代肝细胞分离方法 预览
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作者 张秀莉 郭红云 +3 位作者 张永东 王涛 梁涛 苏海 《现代肿瘤医学》 CAS 2019年第9期1469-1472,共4页
目的:寻找一种简易高效的大鼠原代肝细胞分离方法。方法:在Seglen两步胶原酶灌注法的基础上加以改进,按门静脉灌注法分离培养大鼠肝细胞,重复10次分离肝细胞实验,观察各项指标结果。采用胰酶、Ⅳ型胶原酶经门静脉灌注,大鼠肝脏肝门部结... 目的:寻找一种简易高效的大鼠原代肝细胞分离方法。方法:在Seglen两步胶原酶灌注法的基础上加以改进,按门静脉灌注法分离培养大鼠肝细胞,重复10次分离肝细胞实验,观察各项指标结果。采用胰酶、Ⅳ型胶原酶经门静脉灌注,大鼠肝脏肝门部结构、肝上及肝下腔静脉封闭保留胶原酶消化分离获取肝细胞,经80目和200目的筛网依次过滤细胞后,细胞悬液分别以1000、500、300r/min离心各5min以纯化肝细胞,以台盼蓝排染法测定细胞活性,HE染色鉴定肝细胞纯度。结果:平均每只成年Wistar雄性大鼠可以获得(1.53±0.31)×10^8个肝细胞,平均获得肝细胞活率可达到94.63%,平均获得肝细胞纯度为96.7%。结论:本实验介绍的方法简便易行,且肝细胞产量较高,活力好,纯度高,适宜在一般条件的实验室推广和应用。 展开更多
关键词 肝细胞 原代培养 胶原酶 胰酶
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液体活检技术在肺癌精准医疗中的应用 预览
3
作者 苏海 刘超敏 +3 位作者 郭亚楠 王涛 郭红云 何贵山 《甘肃医药》 2019年第2期100-104,共5页
肿瘤精准医疗的发展方向之一是无创诊疗,其中液体活检愈来愈受诊断业界的关注。液体活检通过无创方式检测各种体液中的循环肿瘤细胞、循环肿瘤DNA、外泌体等肿瘤来源的生物标志物,动态反应疾病的进展,为肿瘤的早期诊断、预后评估、疗效... 肿瘤精准医疗的发展方向之一是无创诊疗,其中液体活检愈来愈受诊断业界的关注。液体活检通过无创方式检测各种体液中的循环肿瘤细胞、循环肿瘤DNA、外泌体等肿瘤来源的生物标志物,动态反应疾病的进展,为肿瘤的早期诊断、预后评估、疗效监测、复发转移检测和个体化诊疗等提供简便快捷手段。肺癌,特别是非小细胞肺癌对靶向治疗的响应预测取决于大量生物标志物,如EGFR、ALK、ROS-1和PD-L1。生物标志物检测最常见的是用手术切除样本完成的。但组织样本的获取尤其是重复获取较困难,液态活检恰好弥补了这一缺陷。本综述主要讨论液态活检技术及血浆来源的循环肿瘤DNA分析方法在非小细胞肺癌患者中的应用。 展开更多
关键词 精准医疗 液体活检 循环肿瘤细胞(CTC) 循环肿瘤DNA(ctDNA) 非小细胞肺癌 PCR ddPCR NGS EGFR
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中药诱导血管性休眠防治肿瘤的研究进展 预览
4
作者 刘超敏 王涛 +2 位作者 郭亚楠 王玉洁 苏海 《甘肃医药》 2019年第3期205-207,211共4页
肿瘤休眠是恶性肿瘤的生物学特征之一,也是肿瘤难以根治、复发转移的主要原因。在无法根除肿瘤细胞的情况下,可通过诱导肿瘤细胞休眠减缓生长、防止肿瘤复发或通过靶向存活机制、耐药机制诱导残留休眠细胞死亡。血管性休眠作为肿瘤休眠... 肿瘤休眠是恶性肿瘤的生物学特征之一,也是肿瘤难以根治、复发转移的主要原因。在无法根除肿瘤细胞的情况下,可通过诱导肿瘤细胞休眠减缓生长、防止肿瘤复发或通过靶向存活机制、耐药机制诱导残留休眠细胞死亡。血管性休眠作为肿瘤休眠的一种类型,通过抑制内皮细胞增殖和血管生成,调节促血管生成因子和抗血管生成因子间的平衡,可以使肿瘤细胞退出生长周期,维持休眠状态,能显著抑制肿瘤的复发和转移。中医“久病入络”理论与西医肿瘤血管生成理念相似,通过中医药抑制促血管生成因子可诱导肿瘤血管性休眠,从而防止肿瘤复发。本研究对中医药诱导血管性休眠的相关机制进行综述,以期为中医药对肿瘤的精准治疗提供理论依据。 展开更多
关键词 肿瘤 血管性休眠 复发和转移 中医药 血管内皮生长因子
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疑似蝇蛆病1例报告 预览
5
作者 马志明 樊锦慧 +3 位作者 江秀娟 冯晶平 苏海 马春艳 《甘肃医药》 2018年第10期953-954,共2页
患者,男性,75岁,回族,农民,生活于半牧区。自述10d前肛门旁肿胀疼痛,呈持续性胀痛,以排便时疼痛加重,无尿急、尿频、尿痛及排尿困难,无明显肉眼血尿及腰背疼痛不适,无心悸、乏力、气短等,无恶心、呕吐、腹痛及腹胀。当时未引起重视,亦... 患者,男性,75岁,回族,农民,生活于半牧区。自述10d前肛门旁肿胀疼痛,呈持续性胀痛,以排便时疼痛加重,无尿急、尿频、尿痛及排尿困难,无明显肉眼血尿及腰背疼痛不适,无心悸、乏力、气短等,无恶心、呕吐、腹痛及腹胀。当时未引起重视,亦未行任何治疗。近日来肿胀疼痛迸一步加重,于2018年7月26号门诊以“肛周脓肿”初次入院。既往体检,无手术外伤及食物药物过敏史,无肝炎、结核、伤寒等传染病史及遗传病史,无重大精神创伤史,亦无性病史。之前无身体不适、无肛周瘙痒。 展开更多
关键词 蝇蛆病 腰背疼痛 疑似 传染病史 身体不适 持续性胀痛 药物过敏史 排尿困难
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长链非编码RNA HOTAIR在泌尿系统肿瘤中的研究进展 预览
6
作者 朱公建 王晓敏 +3 位作者 郭红云 朱小康 刘元强 苏海 《甘肃医药》 2018年第4期300-302,共3页
长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)在基因组广泛被转录且在表观调控中发挥着重要作用,研究发现lncRNA HOTAIR与多种肿瘤的发生发展进程密切相关。本文对lncRNA HOTAIR在泌尿系统肿瘤中的研究进展进行综述。
关键词 长链非编码RNA HOTAIR 泌尿系统肿瘤 进展
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黄腐酚对顺铂诱导H1650细胞凋亡的影响
7
作者 李晨龙 张永东 +3 位作者 郭红云 赵勤 刘启明 苏海 《中华肿瘤防治杂志》 北大核心 2017年第14期960-965,共6页
目的 以顺铂为主的非小细胞肺癌化疗方案不断更新,目前研究旨在寻求疗效的放大及毒副作用的缩小。黄腐酚被证明有抗癌及保护正常细胞的作用。本实验主要探讨黄腐酚的不同给药方式对顺铂诱导人非小细胞肺癌细胞株H1650凋亡的影响。方法 ... 目的 以顺铂为主的非小细胞肺癌化疗方案不断更新,目前研究旨在寻求疗效的放大及毒副作用的缩小。黄腐酚被证明有抗癌及保护正常细胞的作用。本实验主要探讨黄腐酚的不同给药方式对顺铂诱导人非小细胞肺癌细胞株H1650凋亡的影响。方法 采用CCK-8法检测黄腐酚、顺铂单用及先用低浓度黄腐酚干预,后补入顺铂对H1650细胞增殖的影响;使用流式细胞术分别分析先用黄腐酚后用顺铂、先用顺铂再补入黄腐酚2种干预方式对H1650细胞凋亡率或存活率的影响。结果 CCK-8检测结果显示,2μmol/L黄腐酚干预H1650细胞48h后,继续给予20、40和80μmol/L顺铂干预24h,抑制细胞增殖率分别为(13.16±1.06)%、(19.14±1.67)%和(28.17±2.79)%,均低于同浓度顺铂单纯干预24h组的(18.96±3.02)%、(23.28±1.43)%和(39.79±3.44)%,P〈0.05。流式细胞术检测结果显示,10、20和40μmol/L顺铂干预细胞24h后,继续给予7[(85.66±3.19)%、(74.62±2.98)%和(59.55±2.70)%]或14μmol/L[(82.04±2.88)%、(76.50±3.11)%和(61.76±3.01)%]黄腐酚干预24h,其细胞存活率明显高于同浓度顺铂单纯干预48h组的(72.60±2.69)%、(56.98±3.80)%和(44.15±2.01)%,P〈0.05。3μmol/L黄腐酚干预细胞24h,弃培养液,更换10、20和40μmol/L顺铂再干预24h,其细胞凋亡率分别为(29.79±3.78)%、(30.53±3.89)%和(39.48±4.98)%,明显高于顺铂单纯干预24h组的(17.21±3.01)%、(14.53±2.99)%和(18.88±4.20)%,P〈0.05。结论 黄腐酚直接有效保护顺铂对H1650细胞的杀伤,但低浓度黄腐酚的前期干预间接提高了顺铂对H1650细胞的凋亡率。 展开更多
关键词 黄腐酚 顺铂 人非小细胞肺癌 H1650 细胞凋亡
黄腐酚诱导非小细胞肺癌细胞凋亡的初步研究 被引量:1
8
作者 李晨龙 李海宁 +1 位作者 郭红云 苏海 《解放军药学学报》 CAS CSCD 2017年第2期109-112,179共5页
目的探索黄腐酚对人非小细胞肺癌细胞株A549与H1650凋亡的影响。方法采用CCK-8法检测黄腐酚对A549与H1650细胞增殖的影响;流式细胞术分析黄腐酚对两种细胞凋亡的影响;Western Blot法检测两种细胞被不同浓度黄腐酚干预后细胞中凋亡相关蛋... 目的探索黄腐酚对人非小细胞肺癌细胞株A549与H1650凋亡的影响。方法采用CCK-8法检测黄腐酚对A549与H1650细胞增殖的影响;流式细胞术分析黄腐酚对两种细胞凋亡的影响;Western Blot法检测两种细胞被不同浓度黄腐酚干预后细胞中凋亡相关蛋白Bax、Bcl-xl、pro-caspase-3的表达。结果黄腐酚能有效抑制A549与H1650细胞的增殖,其抑制强度与浓度呈正相关,对H1650细胞有更好的抑制作用;两种细胞的凋亡率随黄腐酚浓度的增大而上升,5μmol·L-1诱发的凋亡率与同浓度顺铂无差异(P〉0.05);两种细胞中凋亡相关蛋白的表达与黄腐酚浓度相关。结论黄腐酚可能通过调控Bcl-xl、Bax、Caspase-3及其相关基因使非小细胞肺癌细胞发生凋亡。 展开更多
关键词 黄腐酚 人非小细胞肺癌 细胞A549 细胞H1650 细胞凋亡
锌原卟啉对非小细胞肺癌耐药细胞株A549/DDP的P-糖蛋白及化疗敏感性的影响 预览
9
作者 王涛 李海宁 +4 位作者 张永东 张学良 郭欢 郭红云 苏海 《甘肃医药》 2017年第1期1-2,45共3页
目的:评估锌原卟啉(ZnPP)对肺癌耐药细胞株A549/DDP的P-糖蛋白(P-gp)的影响,探究ZnPP的耐药逆转作用及其可能的作用机理。方法:CCK8法检测不同浓度的ZnPP作用于A549/DDP细胞株后,顺铂作用的半数抑制浓度(IC50),流式细胞术检测Z... 目的:评估锌原卟啉(ZnPP)对肺癌耐药细胞株A549/DDP的P-糖蛋白(P-gp)的影响,探究ZnPP的耐药逆转作用及其可能的作用机理。方法:CCK8法检测不同浓度的ZnPP作用于A549/DDP细胞株后,顺铂作用的半数抑制浓度(IC50),流式细胞术检测ZnPP作用细胞株后P-gp表达量,通过罗丹明123的潴留实验检测P-gp对药物的外排功能。结果:ZnPP作用A549/DDP细胞株24h后,顺铂的ICC50值均显著降低,P-gp表达量显著降低(P〈0.05),罗丹明123的蓄积量显著增加(P〈0.05)。结论:ZnPP可通过降低P-gp蛋白的表达水平,减弱P-gp药物外排功能,使肺癌耐药细胞株的化疗敏感性降低;ZnPP可作为一种潜在的化疗耐药逆转剂。 展开更多
关键词 化疗耐药性 非小细胞肺癌 P-糖蛋白 锌原卟啉
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毛蕊花苷对血红素氧化酶-1过表达大鼠原代星形胶质细胞铁沉积的影响
10
作者 郭欢 王涛 +7 位作者 王海涛 张永东 郭红云 李永辉 闵建平 刘元强 赵勤 苏海 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期109-114,共6页
目的 观察毛蕊花苷( verbascoside )对过表达血红素氧化酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)的大鼠原代星形胶质细胞铁离子沉积的影响,寻找抗阿尔兹海默病的新药物。方法 体外培养和纯化大鼠原代星形胶质细胞,构建转染HO-1基因的星形胶... 目的 观察毛蕊花苷( verbascoside )对过表达血红素氧化酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)的大鼠原代星形胶质细胞铁离子沉积的影响,寻找抗阿尔兹海默病的新药物。方法 体外培养和纯化大鼠原代星形胶质细胞,构建转染HO-1基因的星形胶质细胞模型,用CCK-8法检测细胞损伤,Western blotting法检测 HO-1 蛋白的表达,普鲁士蓝染色法检测细胞铁离子沉积。结果 95%以上的细胞呈胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性,表明成功培养出星形胶质细胞;毛蕊花苷对 HO-1基因转染后的原代星形胶质细胞具有不同程度的增殖抑制效应,抑制率与药物浓度呈正相关;转染HO-1基因入星形胶质细胞后,HO-1蛋白表达增加6.86倍;在施加毛蕊花苷干预后,20、40、60 μmol·L-1均能不同程度地降低HO-1蛋白的表达,同时不同程度地减少由过表达HO-1导致的铁离子沉积(20 μmol·L-1降低 47.69%,40 μmol·L-1降低 51.63%)。结论 毛蕊花苷可以抑制过表达 HO-1 大鼠原代星形胶质细胞的铁离子沉积,可能成为针对“铁-氧化损伤”途径的抗阿尔兹海默病的新药物。 展开更多
关键词 大鼠原代星形胶质细胞 血红素氧化酶-1 铁离子沉积 阿尔兹海默病 毛蕊花苷
白藜芦醇对血红素氧化酶-1诱导的离体星形胶质细胞损伤的保护作用 预览
11
作者 王涛 郭欢 +4 位作者 王海涛 张永东 郭红云 刘元强 苏海 《中国老年学杂志》 北大核心 2017年第18期4452-4455,共4页
目的探讨白藜芦醇对血红素氧化酶(HO)-1诱导的离体星形胶质细胞损伤的保护作用。方法体外培养、纯化获得星形胶质细胞,并构建HO-1基因转染入星形胶质细胞,在施加白藜芦醇干预后,运用CCK-8法检测细胞损伤情况,Western印迹检测HO-1蛋白... 目的探讨白藜芦醇对血红素氧化酶(HO)-1诱导的离体星形胶质细胞损伤的保护作用。方法体外培养、纯化获得星形胶质细胞,并构建HO-1基因转染入星形胶质细胞,在施加白藜芦醇干预后,运用CCK-8法检测细胞损伤情况,Western印迹检测HO-1蛋白的表达及普鲁士蓝染色法检测铁离子的沉积情况。结果 GFAP鉴定显示95%以上的细胞为星形胶质细胞;转染HO-1基因入星形胶质细胞后HO-1蛋白显著升高2.3倍;在施加白藜芦醇干预后,100μmol/L白藜芦醇均能降低HO-1蛋白的表达;同时,10、50μmol/L白藜芦醇也能够降低55%铁离子的沉积。结论白藜芦醇对HO-1诱导的离体星形胶质细胞损伤具有较好的保护作用。 展开更多
关键词 白藜芦醇 血红素氧化酶-1 星形胶质细胞 铁沉积
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黄腐酚与肝病治疗的研究进展 预览
12
作者 苏海 李晨龙 郭红云 《甘肃医药》 2017年第1期13-16,共4页
黄腐酚是啤酒雌花中主要的含异戊二烯基类黄酮,具有抗炎、抗氧化、降低血糖和抗肿瘤等多种生物学作用。近年来的研究证实,黄腐酚可以通过不同的作用机制影响慢性肝病的发生发展,尤其是肝炎、肝纤维化和肝癌。本文综述近年来有关黄腐酚... 黄腐酚是啤酒雌花中主要的含异戊二烯基类黄酮,具有抗炎、抗氧化、降低血糖和抗肿瘤等多种生物学作用。近年来的研究证实,黄腐酚可以通过不同的作用机制影响慢性肝病的发生发展,尤其是肝炎、肝纤维化和肝癌。本文综述近年来有关黄腐酚与慢性肝病治疗之间的相关性研究成果,总结黄腐酚在防治慢性肝病中的作用机制,以期为肝炎、肝纤维化和肝癌的临床研究和治疗提供新的思路。 展开更多
关键词 黄腐酚 慢性肝病 肝炎 肝纤维化 肝癌 肝星状细胞
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一种酵母表达载体的构建及表达鉴定 预览
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作者 王海涛 李雪萍 +5 位作者 郭红云 王涛 闵建平 郭欢 朱公建 苏海 《甘肃医药》 2017年第12期993-996,共4页
目的通过基因工程技术构建霍乱毒素B亚基(CTB)与人A茁42的融合基因,并进行表达鉴定.方法:将融合基因克隆到酵母表达载体pYES2中,并将鉴定正确的重组载体通过乙酸锂转化法转人野生型酵母菌株INVSc1.筛选阳性转化株,并将其诱导表达,通... 目的通过基因工程技术构建霍乱毒素B亚基(CTB)与人A茁42的融合基因,并进行表达鉴定.方法:将融合基因克隆到酵母表达载体pYES2中,并将鉴定正确的重组载体通过乙酸锂转化法转人野生型酵母菌株INVSc1.筛选阳性转化株,并将其诱导表达,通过Westernblot检测融合蛋白CTB-Aβ42.结果:成功构建了CTB-Aβ42融合基因的酵母表达载体,并且可以有效表达融合蛋白.结论:本研究为进一步研制有效的抗阿尔茨海默症药物提供了一种新思路,具有一定的理论和应用价值. 展开更多
关键词 乱毒素B亚基 茁淀粉样蛋白 融合蛋白 酵母表达
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人颗粒溶素蛋白的生物信息学分析 预览
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作者 徐向红 李东昀 +3 位作者 曲涛 陈小梅 高萌 苏海 《甘肃医药》 2017年第11期897-902,共6页
目的:预测和分析人颗粒溶素(Granulysin,GNLY)蛋白的结构与功能.方法:采用生物信息学的方法对GNLY迸行系统分析与研究,包括GNLY的理化性质、跨膜区和引导肽、亚细胞定位、二级结构功能域、蛋白质的功能分类预测、多重序列比对与系... 目的:预测和分析人颗粒溶素(Granulysin,GNLY)蛋白的结构与功能.方法:采用生物信息学的方法对GNLY迸行系统分析与研究,包括GNLY的理化性质、跨膜区和引导肽、亚细胞定位、二级结构功能域、蛋白质的功能分类预测、多重序列比对与系统发育树构建、三级结构建模等.结果:GNLY蛋白分子量为15.33kD,等电点为9.35,具有引导肽(N端1-22个氨基酸序列)无跨膜区,该蛋白属于分泌性蛋白;其二级结构主要为α螺旋和无规则卷曲,包含1个SapB结构域,三级结构显示结果与二级结构预测结果相符.蛋白质多重序列比对和聚类分析显示,人GNLY蛋白与牛、猪及艾鼬等哺乳动物的GNLY蛋白具有一定的同源性.结论:GNLY生物信息学数据的探索,可为GNLY蛋白的功能研究提供参考资料和理论依据. 展开更多
关键词 人类 颗粒溶素 蛋白质 结构 生物信息学
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CARD9蛋白及其在肿瘤中的研究进展 预览
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作者 孙振 周海红 +2 位作者 郭红云 陈学忠 苏海 《甘肃医药》 2017年第3期173-176,共4页
胱天蛋白酶募集域蛋白9(CAR09)是一种重要的衔接蛋白,与Bcl-10和MALT-1结合形成CBM复合体,作为TRLs、Nods、ITAM受体通路的重要媒介物,激活NF-κB、MAPK等炎症信号通路,进而激活下游信号分子,促进炎症因子产生。在炎症反应中发挥重要... 胱天蛋白酶募集域蛋白9(CAR09)是一种重要的衔接蛋白,与Bcl-10和MALT-1结合形成CBM复合体,作为TRLs、Nods、ITAM受体通路的重要媒介物,激活NF-κB、MAPK等炎症信号通路,进而激活下游信号分子,促进炎症因子产生。在炎症反应中发挥重要作用,同时在结肠癌、肾癌、肝癌等肿瘤的发生发展中也扮演着重要角色。 展开更多
关键词 CARD9 信号通路 炎症反应 肿瘤
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CARD9蛋白在乳腺癌组织中的表达及其临床意义 被引量:2
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作者 孙振 周海红 +2 位作者 郭红云 陈学忠 苏海 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期245-254,共10页
目的:探讨胱天蛋白酶募集域蛋白9(caspase recruitment domain containing protein 9,CARD9)在乳腺癌中的表达及其临床意义。方法:应用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测乳腺癌细胞、正常乳腺细胞、乳腺癌组织和癌旁组织中CARD9 m... 目的:探讨胱天蛋白酶募集域蛋白9(caspase recruitment domain containing protein 9,CARD9)在乳腺癌中的表达及其临床意义。方法:应用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测乳腺癌细胞、正常乳腺细胞、乳腺癌组织和癌旁组织中CARD9 mRNA和蛋白的表达,分析CARD9表达与乳腺癌患者临床病理特征间的关系。应用实时荧光定量PCR法检测乳腺癌组织和癌旁组织中核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路相关因子p50、p65、白细胞介素1β(interlukin-1β,IL-1β)和IL-12 mRNA的表达,蛋白质印迹法检测乳腺癌组织和癌旁组织中p50、p65、抑制性NF-κB激酶α(inhibitor of NF-κB kinaseα,IKKα)和磷酸化IKKα(phosphorylated-IKKα,p-IKKα)蛋白的表达。WST-1法检测CARD9高表达对乳腺癌细胞增殖的影响。结果:乳腺癌组织中CARD9 mRNA(P〈0.01)和蛋白(P=0.012)表达水平显著高于癌旁组织。乳腺癌T-47D细胞(P=0.021)和MCF-7细胞(P=0.014)中CARD9 mRNA表达水平高于正常乳腺细胞Hs578Bst,乳腺癌ZR-75-1细胞中CARD9 mRNA(P=0.003)和蛋白(P=0.015)表达水平均高于正常乳腺细胞Hs578Bst。CARD9蛋白表达与肿瘤大小和雌激素受体(estrogen receptor,ER)表达有关(P值均〈0.05)。乳腺癌组织中p50(P〈0.05)和p-IKKα(P〈0.01)蛋白的表达水平高于癌旁组织,而且乳腺癌组织中CARD9 mRNA表达与p50(r=0.622,P〈0.001)、p65(r=0.392,P=0.005)、IL-1β(r=0.685,P〈0.001)和IL-12(r=0.556,P〈0.001)mRNA表达间呈正相关。CARD9高表达可促进乳腺癌细胞的增殖(P〈0.05)。结论:CARD9可能通过激活NF-κB信号通路而促进细胞增殖,参与乳腺癌的发生和发展。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 细胞增殖 NF-ΚB 信号通路 CARD9
遗传变异分类标准与指南 被引量:22
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作者 王秋菊 沈亦平 +52 位作者 陈少科 陈子江 方向东 傅松滨 龚瑶琴 郝晓柯 黄国英 黄国宁 黄荷凤 黄山 黄涛生 冀小平 李红 梁波 廖灿 乔杰 秦胜营 苏海 汪道文 王磊 王树玉 王晓红 魏军 邬玲仟 邢清和 徐湘民 杨正林 于世辉 袁慧军 张学军 郑茜 周从容 周文浩 曾勇 关静 王洪阳 王大勇 赵立东 王慧君 孔今印 宣黎明 冒燕 祝轶君 徐君玲 王剑青 王莉 赵婷 秦一丁 夏滢颖 樊丽霞 赵丁丁 邱浩 贺林 《中国科学:生命科学》 CSCD 北大核心 2017年第6期668-688,共21页
美国医学遗传学与基因组学学会(TheAmericanCollegeofMedicalGeneticsandGenomics,ACMG)曾制定过序列变异解读指南.在过去的十年中,随着新一代高通量测序的出现,测序技术有了快速发展.利用新一代测序技术,临床实验室检测遗传性... 美国医学遗传学与基因组学学会(TheAmericanCollegeofMedicalGeneticsandGenomics,ACMG)曾制定过序列变异解读指南.在过去的十年中,随着新一代高通量测序的出现,测序技术有了快速发展.利用新一代测序技术,临床实验室检测遗传性疾病的产品种类不断增加,包括基因分型、单基因、基因包、外显子组、基因组、转录组和表观遗传学检测.随着技术的复杂性日益增加,基因检测在序列解读方面不断面临着新的挑战.因此ACMG在2013年成立了一个工作组来重新审视和修订序列变异解读的标准和指南,工作组包括ACMG、分子病理协会(theAssociationforMolecularPathology,AMP)和美国病理学家协会(theCollegeofAmericanPathologists,CAP)的代表.该工作组由临床实验室主任和临床医生组成.本报告代表了工作组中来自ACMG,AMP和CAP的专家意见.本报告提出的建议可应用于临床实验室的各种基因检测方法,包括基因分型、单基因、基因包、外显子组和基因组.本报告建议使用特定标准术语来描述孟德尔疾病相关的基因变异——“致病的”、“可能致病的”、“意义不明确的”、“可能良性的”和“良性的”.此外,本报告描述了基于典型的数据类型(如人群数据,计算数据,功能数据,共分离数据)对变异进行五级分类的标准过程.由于临床基因检测分析和解读中不断增加的复杂性,ACMG强烈建议临床分子基因检测应在符合临床实验室改进修正案(CLIA)认证的实验室中进行,其检测结果应由通过职业认证的临床分子遗传学家或分子遗传病理学家或相同职能的专业人员解读. 展开更多
关键词 ACMG实验室指南 临床遗传检测 解读 报告 序列变异术语 变异报告
分化型甲状腺癌端粒酶逆转录酶启动子突变的临床意义
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作者 茹晓婷 刘勤江 +1 位作者 苏海 周海红 《中国肿瘤临床与康复》 2016年第12期1409-1412,共4页
目的探讨端粒酶逆转录酶(TERT)启动子突变与分化型甲状腺癌(DTC)临床病理特征之间的关系。方法选取2014年10月至2016年1月间甘肃省肿瘤医院头颈外科229例经临床病理确诊为分化型甲状腺癌患者、52例结节性甲状腺肿患者和31例正常甲... 目的探讨端粒酶逆转录酶(TERT)启动子突变与分化型甲状腺癌(DTC)临床病理特征之间的关系。方法选取2014年10月至2016年1月间甘肃省肿瘤医院头颈外科229例经临床病理确诊为分化型甲状腺癌患者、52例结节性甲状腺肿患者和31例正常甲状腺组织。采用聚合酶链式反应(PCR)直接测序法对所有组织中TERT启动子突变进行检测。结果 DTC中,TERT C228T/C250T突变率为7.9%(18/229),其中TERT C228T位点突变率为0.9%(2/229),TERT C250T位点突变率为7.0%(16/229),结节性甲状腺肿和正常甲状腺组织均未发生该突变。TERT启动子突变与DTC患者性别、年龄和复发危险度分层均相关,差异均有统计学意义(均P〈0.05)。结论检测TERT启动子突变可以帮助区分甲状腺肿瘤良恶性,对患者预后评估有指导意义。 展开更多
关键词 甲状腺肿瘤 端粒酶逆转录酶启动子突变 直接测序
ERCC5基因miRNA结合部位多态性rs4150390与乳腺癌的易感性分析
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作者 郭欢 郭红云 +10 位作者 李永辉 王涛 杨碎胜 朱公建 闵建平 王海涛 王兰 张永东 李海宁 梁涛 苏海 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期479-483,共5页
本研究旨在探讨切除修复交叉互补基因5(complementation group 5,ERCC5)基因miRNAs结合位点的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)与甘肃地区女性乳腺癌易感性间的关系。以甘肃省散发乳腺癌病例101人和乳腺纤维... 本研究旨在探讨切除修复交叉互补基因5(complementation group 5,ERCC5)基因miRNAs结合位点的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)与甘肃地区女性乳腺癌易感性间的关系。以甘肃省散发乳腺癌病例101人和乳腺纤维腺瘤病例101人做研究对象;通过在线软件预测的方法,筛选出ERCC5基因rs4150390 SNP(G〉A)为研究位点,利用PCR-RFLP方法进行基因组DNA rs4150390位点SNP分型分析。研究结果显示rs4150390 A/G基因SNP与甘肃地区女性乳腺癌易感性无相关性,并且和肿瘤组织ER、PR、Her-2、P53的表达也无相关性。但当乳腺癌患者携带rs4150390突变型基因A/A时与肿瘤组织Ki67阴性表达相关(odds ratio,4.947;95%confidence interval,3.311~7.393;p=0.046)。综上所述rs4150390 A/G基因多态性与甘肃地区女性乳腺癌易感性无相关性。 展开更多
关键词 乳腺癌 核苷酸切除修复 ERCC5 SNP rs4150390 Ki67MiRNA
检测ERCC2基因多态性在乳腺癌分子病理诊断中的应用 预览 被引量:3
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作者 王涛 张永东 +4 位作者 郭欢 李海宁 李永辉 郭红云 苏海 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期277-281,共5页
目的 探讨ERCC2基因rs3916840C/T、rs1799793G/A和rs238416G/A多态性在乳腺癌分子病理诊断中的应用价值。方法 应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP... 目的 探讨ERCC2基因rs3916840C/T、rs1799793G/A和rs238416G/A多态性在乳腺癌分子病理诊断中的应用价值。方法 应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)法比较101例乳腺癌和101例正常对照组中ERCC2基因rs3916840、rs1799793和rs238416位点的多态性分布与乳腺癌易感性及临床病理特征之间的关系。结果 rs3916840位点的多态性分布与肿瘤大小显著相关(P=0.049);rs1799793位点的多态性分布与乳腺病理组织PR状态(P=0.037)及三阴性乳腺癌(P=0.037)显著相关,rs238416位点的多态性分布与p53蛋白表达显著相关,p53蛋白阳性的乳腺癌患者所携带的GA基因型频率显著低于p53阴性乳腺癌患者(P=0.026)。缺失rs238416位点基因型GA的个体患乳腺癌的风险增加0.287倍(P〈0.001,95%CI:0.153~0.537),rs3916840和rs1799793位点多态性分布与乳腺癌的发病风险无关(P〉0.05)。结论 rs3916840、rs1799793和rs238416位点的多态性分布分别与肿瘤大小、PR状态、三阴性乳腺癌以及p53蛋白表达相关,检测ERCC2基因的多态性在乳腺癌的早期诊断及预后中具有一定的应用价值。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 三阴性乳腺癌 单核苷酸多态性 ERCC2基因 P53
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