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以学生为中心的临床药理学混合式教学模式探讨 认领
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作者 高明奇 《基础医学教育》 2021年第1期11-13,共3页
在“互联网+”教育的时代背景下,以教师为中心的线下教学工作面临巨大的挑战,以学生为中心线上线下结合的混合式教学模式将成为当前高校教育教学改革的主流模式。该研究结合学校线上教学平台的实际情况,将线上腾讯课堂、雨课堂学习与在... 在“互联网+”教育的时代背景下,以教师为中心的线下教学工作面临巨大的挑战,以学生为中心线上线下结合的混合式教学模式将成为当前高校教育教学改革的主流模式。该研究结合学校线上教学平台的实际情况,将线上腾讯课堂、雨课堂学习与在线的毕博学习平台相结合,开展混合式教学模式的实践探讨。通过混合式教学设计的课前学情分析,提出通过雨课堂与毕博平台发布预习课件及学习任务单的方式进行课前导学、腾讯课堂与雨课堂进行课堂学习与讨论、雨课堂与毕博平台进行课后测验与专题讨论的混合式教学模式,教学效果良好。 展开更多
关键词 临床药理学 教学改革 混合式教学模式
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多孔钽棒治疗ARCOⅠ-Ⅱ期非创伤性股骨头坏死后塌陷及相关因素分析 认领
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作者 张耀杰 +3 位作者 曹斌 郝学伟 李晓 韩永台 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2021年第15期2400-2404,共5页
背景:多孔钽棒植入联合髓芯减压治疗早期非创伤性股骨头坏死具有较好的临床效果,但治疗后仍有股骨头塌陷病例的报道,其发生率为2%-56%。目的:探讨多孔钽棒植入治疗ARCOⅠ-Ⅱ期非创伤性股骨头坏死后股骨头塌陷情况及其影响因素。方法:回... 背景:多孔钽棒植入联合髓芯减压治疗早期非创伤性股骨头坏死具有较好的临床效果,但治疗后仍有股骨头塌陷病例的报道,其发生率为2%-56%。目的:探讨多孔钽棒植入治疗ARCOⅠ-Ⅱ期非创伤性股骨头坏死后股骨头塌陷情况及其影响因素。方法:回顾性分析2014年5月至2018年4月石家庄市第一医院收治的ARCOⅠ-Ⅱ期非创伤性股骨头坏死患者的病历资料,77例患者均接受多孔钽棒植入治疗,其中男58例,女19例,年龄22-58岁,术后随访观察股骨头塌陷情况。记录患者性别、年龄、股骨头坏死病因、侧别、坏死区位置、范围、ARCO分期、钽棒植入位置(钽棒顶端与坏死中心距离、钽棒与股骨头颈交界区两侧骨皮质距离比值)等临床及手术资料,对临床及手术资料进行单因素分析,采用二元多因素Logistic回归分析筛选出多孔钽棒治疗ARCOⅠ-Ⅱ期非创伤性股骨头坏死后塌陷的独立影响因素。研究获得石家庄第一医院伦理委员会批准(批准号:201403011)。结果与结论:①77例患者术后获得3-60个月的随访,其中股骨头塌陷23例,无塌陷54例;②单因素分析显示,塌陷组与无塌陷组性别、年龄、病变侧别、ARCO分期、钽棒顶端与股骨头颈交界区两侧骨皮质距离比值差异无显著性意义(P>0.05),两组股骨头坏死病因、坏死范围、坏死位置分布及钽棒顶端与坏死中心位置距离间差异有显著性意义(P<0.05);③二元多因素Logisitic回归分析显示,激素性股骨头坏死、坏死区范围、坏死区位置为C1型和钽棒顶端距坏死中心距离是影响多孔钽棒治疗ARCOⅠ-Ⅱ期非创伤性股骨头坏死后塌陷的独立影响因素[OR=7.977,95%CI(1.031,61.708),P=0.047;OR=7.248,95%CI(1.563,34.548),P=0.012;OR=16.028,95%CI(1.074,239.267),P=0.044;OR=2.310,95%CI(1.388,3.845),P=0.001];④结果表明,多孔钽棒植入治疗ARCOⅠ-Ⅱ期非创伤性股骨头坏死术后短期临床效果较好,激素性股骨头� 展开更多
关键词 植入物 钽棒 股骨头坏死 股骨头塌陷 因素分析
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无症状成人颈胸交界区脊柱矢状面参数的相关性 认领
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作者 曹斌 左玉强 +3 位作者 杜晗 于海泉 孟浩勇 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2020年第33期5354-5357,共4页
背景:颈胸交界区脊柱矢状面平衡不仅与全脊柱矢状面平衡相关,还与颈椎矢状面平衡相关。目的:探讨无症状成人颈胸交界区脊柱矢状面参数的相关性。方法:选择2017年1月至2018年12月在河北医科大学第二医院体检中心行健康体检且无颈椎病相... 背景:颈胸交界区脊柱矢状面平衡不仅与全脊柱矢状面平衡相关,还与颈椎矢状面平衡相关。目的:探讨无症状成人颈胸交界区脊柱矢状面参数的相关性。方法:选择2017年1月至2018年12月在河北医科大学第二医院体检中心行健康体检且无颈椎病相关临床症状者120名,年龄23-79岁,根据年龄分为21-40岁组、41-60岁组、61-80岁组,每组40名,均拍摄颈椎侧位DR影像,测量下面影像学参数:C2-C7矢状面轴向垂直距离、头部重心到C7椎体矢状面轴向垂直距离、胸廓入口角、颈倾角、T1倾斜角、颅倾角。结果与结论:①3组间C2-C7矢状面轴向垂直距离、头部重心到C7椎体矢状面轴向垂直距离、胸廓入口角、颈倾角、T1倾斜角、颅倾角比较差异均有显著性意义(P<0.05),并且组间两两比较差异亦有显著性意义(P<0.05);胸廓入口角、颈倾角、T1倾斜角随着年龄的增大而增大;②相关性分析显示胸廓入口角、颈倾角、T1倾斜角与年龄呈正相关(r=0.622,r=0.439,r=0.533,P均<0.001);胸廓入口角与T1倾斜角呈正相关(r=0.569,P<0.001);胸廓入口角、T1倾斜角均与C2-C7矢状面轴向垂直距离呈负相关(r=-0.725,r=-0.352,P均<0.001);③结果表明,无症状成人胸廓入口角、颈倾角、颅倾角、T1倾斜角呈随年龄增大而增大的趋势,且胸廓入口角、颈倾角、T1倾斜角与年龄呈正相关。 展开更多
关键词 胸廓入口角 颈椎矢状面平衡 影像学 相关性 无症状 成人 DR 矢状面轴向距离
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CSL与CaV 1.2钙通道N末端的相互结合作用 认领
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作者 薛迎春 张峰慧 +7 位作者 雷帅 周诗 晏珊 严玲 邵冬雪 胡慧媛 郝丽英 《解剖科学进展》 2020年第6期622-625,629,共5页
目的探讨钙蛋白酶抑素结构域L(CSL)与CaV1.2钙通道N末端(NT)之间的相互结合作用。方法利用I-TASSER同源建模服务器,对豚鼠CaV 1.2钙通道N末端和人源CSL蛋白进行同源建模,利用MOE软件预测CSL和NT蛋白之间的结合,并采用GST pull-down实验... 目的探讨钙蛋白酶抑素结构域L(CSL)与CaV1.2钙通道N末端(NT)之间的相互结合作用。方法利用I-TASSER同源建模服务器,对豚鼠CaV 1.2钙通道N末端和人源CSL蛋白进行同源建模,利用MOE软件预测CSL和NT蛋白之间的结合,并采用GST pull-down实验研究CSL和NT蛋白的结合特点。结果与MOE软件预测出CSL和NT蛋白可以结合,且在NT蛋白上存在两个结合位点;Pull-down实验进一步证实二者可以直接结合,且该结合具有CSL浓度依赖性。结论 CSL可以与NT蛋白结合,为进一步揭示CaV1.2钙通道的调节机制奠定了基础。 展开更多
关键词 CaV1.2钙通道 钙蛋白酶抑素 MOE GST pull-down
成人无症状前凸型颈椎矢状面平衡影像学参数的相关性特征 认领 被引量:1
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作者 曹斌 左玉强 +3 位作者 李存瑞 康伟峰 于海泉 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2020年第6期898-902,共5页
背景:正常的颈椎矢状面平衡是颈椎矫形手术的关键。由于颈椎解剖结构和生理功能的复杂性,故对颈椎矢状面平衡参数的准确测量及参数间相关性成为制定手术方案及评价疗效的重要参考,现有研究集中在有临床症状的颈椎病患者。目的:探讨成人... 背景:正常的颈椎矢状面平衡是颈椎矫形手术的关键。由于颈椎解剖结构和生理功能的复杂性,故对颈椎矢状面平衡参数的准确测量及参数间相关性成为制定手术方案及评价疗效的重要参考,现有研究集中在有临床症状的颈椎病患者。目的:探讨成人无症状前凸型颈椎矢状面平衡影像学参数相关性。方法:回顾性分析120例成人无症状前凸型颈椎正侧位DR影像,根据研究对象年龄将其分为3组,A组(21-40岁)、B组(41-60岁)、C组(61-80岁),测量其颈椎矢状面平衡影像学参数,包括C2-C7矢状面轴向垂直距离(C2-C7 sagittal vertical axis,C2-C7 SVA)、头部重心到C7矢状面轴向垂直距离(central of gravity to C7 sagittal vertical axis,CG-C7 SVA)、T1倾斜角、C0-C2 Cobb角及C2-C7 Cobb角,分析组间影像学参数差异及不同影像学参数与年龄间相关性。研究通过石家庄市第一医院、河北医科大学第二医院伦理委员会批准,纳入者均签署知情同意书。结果与结论:(1)不同年龄组的C2-C7 SVA(F=11.188,P<0.001)、CG-C7 SVA(F=6.132,P=0.003)、T1倾斜角(F=11.682,P<0.001)组间比较差异均有统计学意义,C0-C2 Cobb角(F=1.178,P=0.311)、C2-C7Cobb角(F=0.860,P=0.426)组间比较差异无统计学意义;(2)A、B、C组的T1倾斜角分别为(51.63±5.85)°,(54.66±5.58)°,(57.48±4.74)°,线性相关分析显示T1倾斜角与年龄呈正相关(r=0.533,P<0.001);另T1倾斜角和C2-C7 Cobb角间存在正相关(r=0.561,P<0.001)。提示:在成人无症状前凸型颈椎者中,T1倾斜角有随着年龄增大而增大的趋势,且T1倾斜角与年龄呈正相关。 展开更多
关键词 颈椎 矢状面平衡 影像学 相关性
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无症状成人不同曲度颈椎矢状面参数相关性分析 认领
6
作者 曹斌 左玉强 +5 位作者 康伟峰 于海泉 田玉良 刘云鹏 侯勇 《临床骨科杂志》 2020年第4期461-464,共4页
目的探讨无症状成人不同曲度颈椎矢状面参数相关性。方法分析180例无症状成人颈椎DR正、侧位片影像学资料,根据Borden测量法将体检者分为前凸组(120例)和非前凸组(60例)。比较矢状面各参数:C0~C2 Cobb角、C2~C7 Cobb角、T1倾斜角(TS)、... 目的探讨无症状成人不同曲度颈椎矢状面参数相关性。方法分析180例无症状成人颈椎DR正、侧位片影像学资料,根据Borden测量法将体检者分为前凸组(120例)和非前凸组(60例)。比较矢状面各参数:C0~C2 Cobb角、C2~C7 Cobb角、T1倾斜角(TS)、胸廓入口角(TIA)、C2~C7椎体矢状面垂直距离(C2~C7 SVA)。采用Pearson相关系数分析颈椎矢状面各参数的相关性。结果C2~C7 Cobb角、TS两组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。分析颈椎矢状面各参数的相关性:①前凸组:C0~C2 Cobb角与C2~C7Cobb角呈负相关,与C2~C7 SVA呈正相关;C2~C7Cobb角、TIA均与TS呈正相关;TIA、TS均与C2~C7 SVA呈负相关。②非前凸组:TIA与TS、C0~C2Cobb角与C2~C7SVA呈正相关;C2~C7 Cobb角与C2~C7 SVA呈负相关。结论无症状成人不同曲度颈椎矢状面参数相关性不同,提示不同曲度颈椎序列代偿机制可能不同,对于非前凸型成人,建议进行C2~C7 Cobb角、TS、TIA测量后综合评估以制定更合适的治疗方案。 展开更多
关键词 颈椎曲度 矢状面力线 平衡 相关性分析
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无症状成人前凸型颈椎DR与MRI矢状位参数比较 认领
7
作者 田玉良 曹斌 +4 位作者 左玉强 康伟峰 于海泉 刘云鹏 《河北医药》 CAS 2020年第18期2779-2782,共4页
目的分析无症状成人前凸型颈椎DR与MRI矢状位参数的差异性及相关性。方法收集59例无症状成人前凸型颈椎体检者的DR、MRI影像资料,并在DR、MRI影像上分别测量C 2~C 7 Cobb角、胸1椎体倾斜角(T1 Slope,TS)、胸廓入口角(thoracic inlet ang... 目的分析无症状成人前凸型颈椎DR与MRI矢状位参数的差异性及相关性。方法收集59例无症状成人前凸型颈椎体检者的DR、MRI影像资料,并在DR、MRI影像上分别测量C 2~C 7 Cobb角、胸1椎体倾斜角(T1 Slope,TS)、胸廓入口角(thoracic inlet angle,TIA)及颈椎倾斜角(neck nilting,NT)等颈椎矢状位参数,比较DR、MRI两种影像测量参数的差异性,采用Pearson相关性检验对DR、MRI两种影像测量参数进行相关性分析,应用线性回归建立DR、MRI两种测量方式参数的线性模型。结果DR影像上测量的C 2~C 7 Cobb角、NT平均值较MRI影像上测量的C 2~C 7 Cobb角、NT平均值大,差异均有统计学意义(P<0.05)。DR测量结果显示TIA与NT、TS呈正相关(r值分别为0.597、0.662,P<0.05)。MRI测量结果显示TIA与TS、TS与NT呈正相关(r值分别为0.530、0.275,P<0.05)。DR、MRI影像中所测量的颈椎矢状面参数C 2~C 7 Cobb角、TS、TIA和NT间均呈正相关(r值分别为0.680、0.741、0.826、0.810,P<0.05)。结论C 2~C 7 Cobb角、NT、TS和TIA在DR、MRI影像上测量结果间存在显著相关性,颈椎MRI矢状位参数可以用来评估颈椎矢状位平衡状况。 展开更多
关键词 颈椎矢状面平衡 DR MRI 相关性 无症状
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体外重组Ca_V1.2钙通道CT1蛋白片段制备方法的优化 认领
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作者 康泽 邵冬雪 +4 位作者 彭羽 封瑞 孙雪菲 郝丽英 《解剖科学进展》 2019年第5期528-531,共4页
目的通过改变多种实验条件提高CaV 1.2钙通道C末端GST融合蛋白(GST-CT1)在大肠杆菌BL21中的表达量及分离纯化产量。方法把pGEX-6p-3/CT1质粒转入大肠杆菌BL21中,筛选其中转化成功的菌株培养并用异丙基硫代半乳糖苷(Isopropylβ-D-Thioga... 目的通过改变多种实验条件提高CaV 1.2钙通道C末端GST融合蛋白(GST-CT1)在大肠杆菌BL21中的表达量及分离纯化产量。方法把pGEX-6p-3/CT1质粒转入大肠杆菌BL21中,筛选其中转化成功的菌株培养并用异丙基硫代半乳糖苷(Isopropylβ-D-Thiogalactoside,IPTG)在不同细菌浓度,不同诱导时间或不同温度下诱导表达GST-CT1蛋白,Glutathione-Sepharose 4B beads(GS-4B beads)纯化蛋白,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测蛋白表达水平。结果当吸光度为0.6~1.0时,GST-CT1在大肠杆菌BL21中的表达量较高,IPTG诱导表达蛋白大于4h后无明显表达量差异,并且当诱导温度为25℃时,蛋白的产量将大大增加。结论可以通过控制细菌数量、控制诱导时长和降低诱导温度的方法来提高GST-CT1蛋白的产量。 展开更多
关键词 钙通道 融合蛋白 包涵体 蛋白表达
MRI对喙突下撞击综合征的诊断价值 认领 被引量:2
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作者 曹斌 王猛 +1 位作者 杜晗 《精准医学杂志》 2018年第6期516-519,共4页
目的 探讨MRI对喙突下撞击综合征的诊断价值。方法 回顾性分析观察组23例经临床及关节镜手术证实为喙突下撞击综合征病人及对照组28例正常志愿者肩关节的MRI影像,分别测量两组肩关节的喙肱间距及喙盂间距,并进行比较。结果 观察组与对... 目的 探讨MRI对喙突下撞击综合征的诊断价值。方法 回顾性分析观察组23例经临床及关节镜手术证实为喙突下撞击综合征病人及对照组28例正常志愿者肩关节的MRI影像,分别测量两组肩关节的喙肱间距及喙盂间距,并进行比较。结果 观察组与对照组喙肱间距平均值分别为(7.64±1.37)、(10.38±1.00)mm,观察组喙肱间距平均值小于对照组,差异有统计学意义(t=-8.278,P<0.05);观察组、对照组喙盂间距平均值分别为(14.19±2.92)、(9.71±1.48)mm,观察组喙盂间距平均值大于对照组,两组比较差异具有统计学意义(t=6.673,P<0.05)。结论 喙突下撞击综合征病人的喙肱间距较正常人小,而喙盂间距较正常人大,肩关节MRI影像有助于以上两间距的测量并为诊断提供依据。 展开更多
关键词 肩胛骨 肩撞击综合征 磁共振成像 诊断 鉴别
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CSL载体构建表达纯化及活性鉴定 认领 被引量:1
10
作者 雷帅 胡慧媛 +4 位作者 王一妃 周诗 曾晓荣 郝丽英 《解剖科学进展》 2018年第6期644-647,共4页
目的构建CalpastatinN末端结构域Calpastatin domain L(CSL)(a.a.150-230)融合蛋白质粒,表达、提取、纯化CSL蛋白并进行生物学活性鉴定。方法将CSL的cDNA片段插入pGEX-6p-3质粒载体后,转化大肠杆菌BL21感受态细胞,大量培养后用异丙基硫... 目的构建CalpastatinN末端结构域Calpastatin domain L(CSL)(a.a.150-230)融合蛋白质粒,表达、提取、纯化CSL蛋白并进行生物学活性鉴定。方法将CSL的cDNA片段插入pGEX-6p-3质粒载体后,转化大肠杆菌BL21感受态细胞,大量培养后用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(isopropy-β-D-thiogalactoside,IPTG)诱导蛋白表达,超声破碎法提取CSL蛋白。利用Glutathione-Sepharose4B(GS-4B)beads和PreScission蛋白酶分离纯化蛋白,pull down assay检测其生物学活性。结果CSL质粒经测序比对后表明构建成功;超声破碎法提取的CSL蛋白纯度和浓度均较高,并具有能够与GST-CT1融合蛋白浓度依赖性结合的生物学活性。结论成功构建CSL融合蛋白质粒,提取纯化具有生物活性的CSL蛋白,为探讨Cav1.2钙通道自身调节机制奠定基础。 展开更多
关键词 钙蛋白酶抑素 pulldownassay 质粒构建
重组蛋白酶切方法的比较与分析 认领
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作者 封瑞 吕丽婷 +4 位作者 康泽 毛建伟 郝丽英 曾晓荣 《解剖科学进展》 2018年第4期408-410,414共4页
目的探讨制备纯化重组蛋白的酶切方法,比较不同蛋白纯化方法的差异。方法在大肠杆菌BL-21中分别诱导表达pGEX-6p-3/CT1,pGEX-6p-3/CT3,pGEX-6p-3/CaM,pGEX-6p-3/CaMKⅡ。采用超声破碎、B-per试剂以及B-per试剂加变性复性试剂盒等方法制... 目的探讨制备纯化重组蛋白的酶切方法,比较不同蛋白纯化方法的差异。方法在大肠杆菌BL-21中分别诱导表达pGEX-6p-3/CT1,pGEX-6p-3/CT3,pGEX-6p-3/CaM,pGEX-6p-3/CaMKⅡ。采用超声破碎、B-per试剂以及B-per试剂加变性复性试剂盒等方法制备带GST标签的融合蛋白,进一步在不同条件下使用蛋白酶进行酶切获得相应蛋白。将制备得到的蛋白进行SDS-PAGE电泳鉴定,同时,使用pull-down方法对蛋白活性进行鉴定。结果采用B-per试剂以及变性再复性试剂盒,同时酶切时加入DTT,能得到较高浓度与纯度的CT1蛋白。而无论采用B-per试剂或超声破碎,只要酶切时加入DTT均能获得CT3蛋白。采用简单的超声破碎,酶切时不需加入任何试剂即可得到高浓度与高纯度的胞浆蛋白CaM,而目前仍没找到纯化CaMKⅡ蛋白的理想方法,需进一步的实验研究。结论重组蛋白酶切纯化方法存在差异,DTT可能在酶切纯化蛋白时起到关键作用。 展开更多
关键词 重组蛋白 钙通道 酶切 膜蛋白
CaM突变体质粒的构建、表达纯化及活性鉴定 认领
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作者 王蓉蓉 +7 位作者 袁媛 李松霖 朱正南 黄露婷 封瑞 邵冬雪 孙雪菲 郝丽英 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期97-101,共5页
目的 制备钙调蛋白(CaM)突变体CaME141G的融合蛋白质粒,并进行蛋白表达、提取纯化和活性鉴定。方法 利用定点突变技术将野生型CaM的第141个氨基酸E (GAG)突变为G (GGG),再将突变体质粒转化大肠杆菌BL21感受态细胞,大量培养后... 目的 制备钙调蛋白(CaM)突变体CaME141G的融合蛋白质粒,并进行蛋白表达、提取纯化和活性鉴定。方法 利用定点突变技术将野生型CaM的第141个氨基酸E (GAG)突变为G (GGG),再将突变体质粒转化大肠杆菌BL21感受态细胞,大量培养后诱导其GST融合蛋白表达,GS-4B beads纯化,PreScission protease酶切GST标签,采用Bradford方法测定纯化后蛋白浓度,SDS-PAGE凝胶电泳检测CaME141G蛋白的相对分子量和纯度,pull-down实验鉴定纯化后蛋白的生物活性。结果 提取纯化后的CaME141G蛋白具有较高的浓度和纯度,且能与心肌CaV1.2钙通道C末端的PreIQ蛋白片段结合,并具有CaME141G蛋白浓度依赖性,提示该蛋白具有与心肌CaV1.2钙通道结合的能力。结论 成功构建了CaME141G融合蛋白质粒,并获得了纯化后的CaME141G蛋白,为深入研究CaM突变体在心肌CaV1.2钙通道中的调节作用及其与心血管系统疾病的关系奠定了基础。 展开更多
关键词 钙调蛋白 突变体 质粒 表达纯化 pull-down实验
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异丙肾上腺素诱导小鼠心肌肥厚模型的方法优化 认领 被引量:1
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作者 祝旭东 李菁媛 +5 位作者 刘彩刚 王思奇 于义 于佳慧 郝丽英 《解剖科学进展》 2018年第3期275-277,共3页
目的对应用异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)诱导小鼠心肌肥厚模型的方法进行进一步的优化。方法小鼠皮下注射剂量为7mg/kg的ISO,每日注射1次,连续注射1周。应用心重体重比,左心室重体重比,心肌细胞横截面积等指标来验证心肌肥厚模型... 目的对应用异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)诱导小鼠心肌肥厚模型的方法进行进一步的优化。方法小鼠皮下注射剂量为7mg/kg的ISO,每日注射1次,连续注射1周。应用心重体重比,左心室重体重比,心肌细胞横截面积等指标来验证心肌肥厚模型的构建情况。应用切片HE染色方法来观察小鼠心肌细胞的形态学改变。结果实验组与对照组相比,心重体重比,左心室重体重比,心肌细胞横截面积均增加(P〈0.05)。与对照组相比,实验组心肌细胞横截面的直径增大,细胞间质增宽,细胞核变形。结论皮下注射ISO 1周,成功构建小鼠心肌肥厚模型,该方法更加简单,经济,科学,快速。为后续实验进行更加深入的研究提供了条件。 展开更多
关键词 心肌肥厚 异丙肾上腺素 动物模型 小鼠
钙调蛋白突变体CaMD130G和CaMD96V的制备提取与纯化 认领
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作者 封瑞 袁媛 +6 位作者 孙旋旋 彭羽 康泽 赵君 郝丽英 曾晓荣 《解剖科学进展》 2018年第5期486-488,492共4页
目的制备纯化钙调蛋白突变体CaMD130G和CaMD96V的蛋白,为后续体外实验研究提供高浓度高纯度的突变体蛋白奠定基础。方法采用基因重组将重组质粒pGEX-6P-3/GST-CaMD130G和pGEX-6P-3/GST-CaMD96V转化入大肠杆菌,在大肠杆菌中诱导表达相应... 目的制备纯化钙调蛋白突变体CaMD130G和CaMD96V的蛋白,为后续体外实验研究提供高浓度高纯度的突变体蛋白奠定基础。方法采用基因重组将重组质粒pGEX-6P-3/GST-CaMD130G和pGEX-6P-3/GST-CaMD96V转化入大肠杆菌,在大肠杆菌中诱导表达相应的蛋白,再采用超声破碎法制备融合蛋白,并且采用Precission protease进行酶切,SDS-PAGE确认制备蛋白的浓度与纯度,Pull-down assay的方法检测蛋白的活性。结果本研究制备了较高浓度与纯度的钙调蛋白突变体CaMD130G和CaMD96V蛋白,CaMD130G蛋白能浓度依赖性地与心肌钙通道蛋白片段CT1结合,而CaMD96V蛋白能浓度依赖性地与心肌钙通道蛋白片段pre-IQ结合,制备的CaMD130G和CaMD96V蛋白具有很好的活性。结论基因重组、超声破碎的方法能制备高浓度、高纯度以及高活性的突变体CaMD130G和CaMD96V蛋白,为进一步研究奠定坚实的基础。 展开更多
关键词 钙调蛋白 突变体 融合蛋白 长QT综合征
心肌Cav1.2钙通道NT片段的提取纯化及其与CaM的相互作用 认领 被引量:1
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作者 邵冬雪 +7 位作者 雷明 康泽 赵君 方涵田 郭凤 赵美眯 郝丽英 封瑞 《中国医科大学学报》 CSCD 北大核心 2017年第5期397-400,共4页
目的 探讨心肌 Cav1.2 钙通道 NT 蛋白片段提取与纯化的方法,并研究其与 CaM 的相互作用。方法 将 NT 的 cDNA 插 入 pGEX-6p-3 质粒载体后,转化大肠杆菌 BL-21 感受态细胞,大量培养并利用异丙基硫代-β-D 半乳糖苷(IPTG)诱导 NT... 目的 探讨心肌 Cav1.2 钙通道 NT 蛋白片段提取与纯化的方法,并研究其与 CaM 的相互作用。方法 将 NT 的 cDNA 插 入 pGEX-6p-3 质粒载体后,转化大肠杆菌 BL-21 感受态细胞,大量培养并利用异丙基硫代-β-D 半乳糖苷(IPTG)诱导 NT 的 GST 融合蛋白表达,GS-4B beads 分离纯化,PreScission 蛋白酶切除 GST 标签,进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS- PAGE)检测蛋白纯度和相对分子质量。采用 GST pull-down 实验研究 NT 片段与 CaM 的相互作用。结果 SDS-PAGE 结果显示 成功纯化获得 NT 蛋白片段,且具有较高的纯度。GST pull-down 实验结果显示 NT 可与 CaM 结合,且具有浓度依赖性。结论 本研究成功制备与纯化了心肌 Cav1.2 钙通道 NT 蛋白片段,为深入研究蛋白相互作用及 NT 的生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 NT 提取 纯化 CAM GS Tpull-down实验
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经皮微创锁定钢板与股骨近端抗旋髓内钉治疗老年股骨粗隆间骨折疗效比较 认领 被引量:16
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作者 田玉良 李一鹏 +1 位作者 于海泉 《现代中西医结合杂志》 CAS 2017年第7期717-719,共3页
目的比较经皮微创股骨近端锁定加压钢板(LCP)与股骨近端抗旋髓内钉(PFNA)闭合复位治疗老年股骨粗隆间骨折的疗效。方法将90例老年股骨粗隆间骨折患者按治疗方法不同分为LCP组及PFNA组,观察比较2组治疗效果。结果 PFNA组手术时间、... 目的比较经皮微创股骨近端锁定加压钢板(LCP)与股骨近端抗旋髓内钉(PFNA)闭合复位治疗老年股骨粗隆间骨折的疗效。方法将90例老年股骨粗隆间骨折患者按治疗方法不同分为LCP组及PFNA组,观察比较2组治疗效果。结果 PFNA组手术时间、负重时间均明显短于LCP组(P均〈0.05),术中出血量明显少于LCP组(P〈0.05);2组术后并发症发生率比较差异无统计学意义(P〉0.05)。LCP组Harris评分优良率比较差异无统计学意义(P〉0.05)。结论 LCP与PFNA治疗老年股骨粗隆间骨折同样具有创伤小、固定确切、骨折愈合率高、术后并发症发生率低的优点,在PFNA受限的特殊病例中LCP更具优势。 展开更多
关键词 股骨粗隆间骨折 锁定加压钢板 股骨近端抗旋髓内钉
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Cav1.2钙离子通道三维结构的同源建模及其应用 认领 被引量:2
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作者 雷明 +4 位作者 李卓 晏珊 孙雪菲 朱彤 郝丽英 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期90-94,共5页
目的构建心肌Cav1.2钙离子通道三维结构模型,检验模型的准确性与可靠性。方法利用SWISS-MODEL同源建模服务器,对豚鼠心肌细胞Cav1.2通道α1亚基进行同源建模,建模结果提交至加州大学蛋白质结构在线检测服务器进行检测评估,并对结构模型... 目的构建心肌Cav1.2钙离子通道三维结构模型,检验模型的准确性与可靠性。方法利用SWISS-MODEL同源建模服务器,对豚鼠心肌细胞Cav1.2通道α1亚基进行同源建模,建模结果提交至加州大学蛋白质结构在线检测服务器进行检测评估,并对结构模型进行打分。利用MOE软件分子对接程序模拟阻断剂或药物与Cav1.2通道模型的结合,进一步验证通道模型的准确性与可靠性。结果在SWISS-MODEL服务器上搜寻到的模板序列Cav1.1α1S与目标序列Cav1.2α1C均为L型钙通道,序列比对结果显示其同源性高达71.5%,选择自动模式(automated mode)进行同源建模。L型钙通道阻断剂维拉帕米、硝苯地平、地尔硫卓能结合到Cav1.2通道三维结构模型的特定区域,而钠通道特异性阻断剂河豚毒素并未与该模型相结合,中药有效成份白花前胡甲素和小檗碱与该模型也有一定的结合。结论成功构建了心肌Cav1.2钙离子通道三维结构模型,为后续研究提供了可靠样本,也为同源建模在研究离子通道三维结构预测中的应用奠定了基础。 展开更多
关键词 离子通道 三维结构 同源建模 MOE软件 L型钙通道阻断剂 分子对接
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3种不同术式治疗伴Ⅰ度退行性滑脱的腰椎管狭窄症效果观察 认领 被引量:5
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作者 李一鹏 田玉良 +3 位作者 于海泉 曹斌 王猛 《河北医科大学学报》 CAS 2016年第7期793-797,805共6页
目的观察单纯减压、椎间孔入路椎间融合术(transforaminal lumbar interbody fusion,TLIF)、经后路椎间融合术(posterior lumbar interbody fusion,PLIF)治疗伴Ⅰ度退行性滑脱的腰椎管狭窄症的效果。方法选择伴Ⅰ度退行性滑脱的腰... 目的观察单纯减压、椎间孔入路椎间融合术(transforaminal lumbar interbody fusion,TLIF)、经后路椎间融合术(posterior lumbar interbody fusion,PLIF)治疗伴Ⅰ度退行性滑脱的腰椎管狭窄症的效果。方法选择伴Ⅰ度退行性滑脱的腰椎管狭窄症患者103例,均为单侧症状严重者,分为3组:单纯减压组38例、TLIF组31例和PLIF组34例。比较3组术中指标及术后6个月、2年随访时的滑脱程度、腰腿疼痛视觉模拟评分法(Visual Analogue Scale,VAS)评分、日本骨科协会(Japanese Orthopedic Association,JOA)评分,比较TLIF组及PLIF组术后植骨融合情况,比较3组治疗效果。结果 TLIF组和PLIF组手术时间、术中失血量及术后引流量明显多于单纯减压组,而术后卧床时间明显少于单纯减压组。PLIF组手术时间、术中失血量及术后引流量显著多于TLIF组(P〈0.05)。3组间疗效和并发症发生率差异无统计学意义(P〉0.05)。TLIF组及PLIF组腰疼痛VAS评分呈逐渐下降趋势,单纯减压组腰疼痛VAS评分呈先下降后升高趋势,3组腿疼痛VAS评分均呈下降趋势,3组不同时点间、组间·不同时点间交互作用差异有统计学意义(P〈0.05)。TLIF组及PLIF组术后6个月及2年时滑脱程度逐渐降低,单纯减压组滑脱程度呈逐渐加重趋势,3组组间、不同时点间、组间·不同时点间交互作用差异均有统计学意义(P〈0.05)。术后6个月复查时,TLIF组未融合1例,PLIF组未融合2例;术后2年复查时,2组均融合。结论对于伴Ⅰ度退行性滑脱的腰椎管狭窄症患者,单纯开窗减压手术损伤小,TLIF和PLIF的远期效果更佳。TLIF手术失血量、住院时间、对神经和硬膜损伤等均少于PLIF。应用TLIF手术治疗伴Ⅰ度退行性滑脱的腰椎管狭窄症更安全、有效。 展开更多
关键词 椎管狭窄 脊椎滑脱 脊柱融合术
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超声破碎法联合应用DTT提取纯化Cav1.2钙通道CT3蛋白 认领 被引量:1
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作者 封瑞 +6 位作者 吕力婷 邵冬雪 李墨 方涵田 魏贵贵 孙雪菲 郝丽英 《解剖科学进展》 2016年第6期602-605,共4页
目的 探讨心肌Cav1.2钙通道CT3蛋白片段提取与纯化的方法。方法 将CT3的cDNA插入pG EX-6p-3质粒载体后,转化大肠杆菌BL-21感受态细胞,大量培养并利用异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导CT3的GST融合蛋白表达,并采用超声破碎法进行分... 目的 探讨心肌Cav1.2钙通道CT3蛋白片段提取与纯化的方法。方法 将CT3的cDNA插入pG EX-6p-3质粒载体后,转化大肠杆菌BL-21感受态细胞,大量培养并利用异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导CT3的GST融合蛋白表达,并采用超声破碎法进行分离纯化,在10mmol/L二硫苏糖醇(DL-dithiothreitol,DTT)存在的情况下,PreScission蛋白酶切除GST标签,凝胶电泳鉴定CT3蛋白,检测蛋白纯度和相对分子质量。结果 SDSPAGE结果显示,超声破碎法可以纯化得到GST-CT3融合蛋白,且单纯应用PreScission蛋白酶酶切GST-CT3,得到的CT3蛋白片段浓度较低,而采用PreS cission蛋白酶联合应用DTT则可以成功提取纯化出浓度较高的CT3蛋白片段。结论 超声破碎法联合应用DTT与PreScission蛋白酶能够提取纯化出高浓度和纯度的CT3蛋白片段,为深入研究CT3的生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 DTT CT3 融合蛋白 提取 纯化 超声破碎法
有限切开复位内固定联合外固定架固定治疗胫腓骨远端骨折 认领 被引量:2
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作者 侯勇 李谦 +2 位作者 彭晓伟 吴涛 《生物骨科材料与临床研究》 CAS 2013年第2期61-61,64共2页
我院自2009年3月-2011年6月采用有限切开复位内固定联合外固定架固定治疗胫腓骨远端粉碎性骨折12例患者,现将临床资料进行分析总结如下。
关键词 切开复位内固定 固定治疗 外固定架 胫腓骨远端骨折 胫腓骨远端粉碎性骨折 2009年 临床资料
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