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卡那霉素筛选转基因棉花技术研究 预览
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作者 吕孟雨 杨帆 +5 位作者 董福双 赵和 刘永伟 周硕 王海波 《湖南农业科学》 2019年第2期1-3,共3页
为了提高带有npt-Ⅱ标记基因的转基因棉花后代的筛选效率,通过利用不同浓度的卡那霉素溶液进行浸种,同时比较浸种时间的长短对棉花子叶片伤害程度,并用PCR分子检测相互验证。结果表明:用浓度1000mg/L的硫酸卡那霉素溶液浸种3d,每5mL溶... 为了提高带有npt-Ⅱ标记基因的转基因棉花后代的筛选效率,通过利用不同浓度的卡那霉素溶液进行浸种,同时比较浸种时间的长短对棉花子叶片伤害程度,并用PCR分子检测相互验证。结果表明:用浓度1000mg/L的硫酸卡那霉素溶液浸种3d,每5mL溶液浸泡1粒棉花种子,播种出苗以后,拔除子叶上有白化斑的棉花苗,剩余的子叶上没有出现白化斑的棉花苗即为转基因阳性植株,经PCR检测筛选的准确率达100%。利用卡那霉素溶液浸种的方法筛选带有npt-Ⅱ标记基因的转基因棉花后代材料的技术流程经济有效、准确可行。 展开更多
关键词 转基因棉花 卡那霉素 浸种 筛选
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玉米种子芽大小对农杆菌转化的影响 预览
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作者 吕孟雨 董福双 +3 位作者 周硕 张俊敏 王海波 《湖北农业科学》 2019年第20期168-169,173共3页
以郑58玉米自交系的种子作为试验材料,将玉米种子消毒,发芽后按长度分别将大、小2种玉米芽的生长点进行农杆菌转化,经过共培养后,通过对转化后的再发芽情况和转化芽的绿色荧光蛋白检测,分析玉米芽的大小对转化的影响。结果表明,玉米种... 以郑58玉米自交系的种子作为试验材料,将玉米种子消毒,发芽后按长度分别将大、小2种玉米芽的生长点进行农杆菌转化,经过共培养后,通过对转化后的再发芽情况和转化芽的绿色荧光蛋白检测,分析玉米芽的大小对转化的影响。结果表明,玉米种子芽长度在0.3~0.5 cm时用于农杆菌转化,有利于农杆菌对玉米芽生长点的侵染转化和转化后芽的再生。 展开更多
关键词 玉米 芽长 农杆菌 转基因
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分离小麦麦谷蛋白亚基的几个关键因素研究 预览
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作者 李春燕 张翠绵 +9 位作者 秘彩莉 马秀英 赵和 吕孟雨 周硕 董福双 刘永伟 杨帆 王海波 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2019年第4期32-36,共5页
小麦高分子量、低分子量麦谷蛋白亚基组成是影响小麦加工品质的重要因素,为了经济快速鉴定小麦高低分子量麦谷蛋白亚基组成,需要不断对提取和分离这些蛋白的方法进行优化。在Singh等提出的提取分离小麦高低分子量麦谷蛋白亚基方法的基础... 小麦高分子量、低分子量麦谷蛋白亚基组成是影响小麦加工品质的重要因素,为了经济快速鉴定小麦高低分子量麦谷蛋白亚基组成,需要不断对提取和分离这些蛋白的方法进行优化。在Singh等提出的提取分离小麦高低分子量麦谷蛋白亚基方法的基础上,对其中涉及的单体蛋白去除、麦谷蛋白还原和烷化过程中使用的异丙醇浓度、烷化剂浓度以及烷化过程能否简化几个关键因素进行了深入研究。结果表明:在麦谷蛋白还原时,在10%~50%的异丙醇浓度范围内,不同浓度的异丙醇对高分子量麦谷蛋白亚基的提取效果没有差别,而低分子量麦谷蛋白亚基在用低浓度异丙醇提取时效果较差,随异丙醇浓度提高,提取效果逐渐提高,异丙醇浓度提高到30%时,提取效果达到最高,异丙醇浓度继续提高到50%,提取效果不再提高;使用30%和50%的异丙醇,去除单体蛋白的效果相同;把烷化剂直接加到样品缓冲液中进行烷化,不同浓度(0.6%~1.4%)的烷化剂处理麦谷蛋白亚基的烷化效果相同,但烷化剂浓度为1.4%时电泳背景较重。优化后的方法为:在单体蛋白去除和麦谷蛋白还原时把异丙醇浓度由原来的50%降为30%,去掉单独的烷化步骤,把0.6%的烷化剂直接加到样品缓冲液中进行烷化。优化后的方法不但减少了试剂用量,简化了提取步骤,还提高了电泳条带强度。 展开更多
关键词 小麦 麦谷蛋白亚基 SDS-PAGE 优化 分离方法
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小麦粒重相关分子标记Xgwm46等位变异的鉴定与评价 预览 被引量:1
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作者 刘永伟 周硕 +6 位作者 王雪征 孙果忠 董福双 李春杰 赵和 王海波 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期7-15,共9页
为评价粒重相关SSR标记Xgwm46在小麦分子育种工作中的应用效果,以442份黄淮麦区小麦品种(系)为材料,鉴定了Xgwm46标记等位变异类型及其分布频率,分析了Xgwm46标记等位变异类型与千粒重、粒长、粒宽和籽粒面积的关联性,并进一步探... 为评价粒重相关SSR标记Xgwm46在小麦分子育种工作中的应用效果,以442份黄淮麦区小麦品种(系)为材料,鉴定了Xgwm46标记等位变异类型及其分布频率,分析了Xgwm46标记等位变异类型与千粒重、粒长、粒宽和籽粒面积的关联性,并进一步探讨了各种等位变异的育种价值。结果表明,Xgwm46标记可以检测出A、B、C三种类型的等位变异,分布频率分别为31.90%、55.20%和12.90%。关联分析表明,B类型与C类型材料的千粒重(P〈0.001)、粒长(P〈0.05)、粒宽(P〈0.001)和籽粒面积(P〈0.001)等粒重性状的差异都达到显著水平,而且B类型与粒重性状均呈显著正相关,C类型与粒重性状均呈显著负相关。B类型比C类型的材料平均粒长长0.16 mm,粒宽宽0.10 mm,籽粒面积大0.81 mm,千粒重重1.98 g,其等位变异效应较突出。总之,Xgwm46标记适合用于小麦粒重农艺性状的鉴定与筛选,其中,B类型是粒重性状优异的等位变异,可应用于小麦分子标记辅助选择育种。 展开更多
关键词 小麦 粒重 Xgwm46标记 等位变异 应用价值
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小麦类钙调素TaCML79基因的克隆和表达分析 预览
5
作者 周硕 刘永伟 +6 位作者 董福双 杨帆 赵和 吕孟雨 孙果忠 王海波 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2016年第6期1-6,共6页
为了研究小麦类钙调素基因的功能和在植物逆境响应中的分子机制,以电子克隆结合RT-PCR的方法,在小麦中克隆到一个类钙调素基因TaCML79。该基因的开放阅读框长度为588bp,编码的蛋白长度为195个氨基酸,推测的分子量为20.45kDa,等电点为4.6... 为了研究小麦类钙调素基因的功能和在植物逆境响应中的分子机制,以电子克隆结合RT-PCR的方法,在小麦中克隆到一个类钙调素基因TaCML79。该基因的开放阅读框长度为588bp,编码的蛋白长度为195个氨基酸,推测的分子量为20.45kDa,等电点为4.6,属于酸性蛋白,具有2个典型的和一个不完整的EF-hand结构域。多序列比对和系统进化树分析表明,TaCML79与野生稻的ObCML35和水稻的OsCML10亲缘关系较近,相似性分别为84.6%和86.8%。该基因的表达在根和地上部分受到热激、NaCl、渗透和冷胁迫的诱导或抑制,初步推断该基因可能与植物抗逆有密切的关系。 展开更多
关键词 小麦 类钙调素 EF-hand结构域 基因克隆 基因表达
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ω-黑麦碱基因沉默对小麦1B/1R易位系加工品质的影响 预览 被引量:7
6
作者 王海波 +2 位作者 马秀英 张翠绵 董福双 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期627-632,共6页
ω-黑麦碱是造成小麦1B/1R易位系加工品质差的一个重要因素,为探索解决这一问题,构建了ω-黑麦碱基因沉默表达载体,并通过农杆菌介导转化小麦品种金禾9123,获得3个T_0代转基因植株,再经连续的扩繁和PCR检测,获得纯合转基因T_4代株系。酸... ω-黑麦碱是造成小麦1B/1R易位系加工品质差的一个重要因素,为探索解决这一问题,构建了ω-黑麦碱基因沉默表达载体,并通过农杆菌介导转化小麦品种金禾9123,获得3个T_0代转基因植株,再经连续的扩繁和PCR检测,获得纯合转基因T_4代株系。酸性PAGE检测结果表明,这些纯合转基因株系中ω-黑麦碱的总表达量平均下降53%。这些ω-黑麦碱基因沉默的转基因株系的面筋指数、沉降值和稳定时间均显著提高,而其农艺性状,如株高、穗粒数、千粒重和小区产量,均没有受到不良影响,说明沉默ω-黑麦碱基因可以在不影响产量的前提下提高小麦1B/1R易位系的加工品质。 展开更多
关键词 小麦1B/1R易位系 黑麦碱 RNA干扰 基因沉默 加工品质
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民族品牌 高端动力——一汽锡柴召开非道路三阶段产品推介会
7
作者 《农业机械》 2016年第1期120-121,共2页
2015年12月15日上午,20余家权威媒体镜头聚焦江南腹地无锡,一场主题为"民族品牌高端动力——一汽锡柴非道路三阶段产品推介会"在锡柴厂多功能厅隆重召开。国内知名叉车、拖拉机、收割机、装载机和机组厂领导与用户代表等近140人汇聚一... 2015年12月15日上午,20余家权威媒体镜头聚焦江南腹地无锡,一场主题为"民族品牌高端动力——一汽锡柴非道路三阶段产品推介会"在锡柴厂多功能厅隆重召开。国内知名叉车、拖拉机、收割机、装载机和机组厂领导与用户代表等近140人汇聚一堂,共同见证锡柴非道路三阶段发动机独特的技术优势,为用户打造最有价值的体验,实现最优的节能减排效果,从根源上抑制PM2.5的产生,为社会大环境改善贡献力量。 展开更多
关键词 非道路 产品推介会 技术优势 柴油机排气 镜头聚焦 工程机械 节能减排 整车厂 发动机行业 机械装备制造
小麦氮高效基因型的蛭石盒筛选 预览 被引量:1
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作者 张翠绵 +3 位作者 林景 马秀英 赵和 王海波 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期129-134,共6页
为探索一种简便易行的小麦氮高效基因型筛选方法,以塑料盒为栽培容器,以浇施营养液的蛭石为栽培介质,对黄淮麦区24个小麦基因型在3种氮素水平下进行了氮高效基因型的筛选。结果表明,这种蛭石盒筛选法,能有效筛选出不同氮素水平的氮高效... 为探索一种简便易行的小麦氮高效基因型筛选方法,以塑料盒为栽培容器,以浇施营养液的蛭石为栽培介质,对黄淮麦区24个小麦基因型在3种氮素水平下进行了氮高效基因型的筛选。结果表明,这种蛭石盒筛选法,能有效筛选出不同氮素水平的氮高效基因型,利用该方法筛选出的低氮高效基因型有石家庄8号、邯6172和科农199,高氮高效基因型有矮抗58和092-38,氮不敏感基因型有092-39,其中石家庄8号为典型的低氮高效型品种,矮抗58为典型的高氮高效型品种,筛选结果与材料的田间表现比较一致。这种蛭石盒筛选法不但操作简单,而且筛选效果明显,可应用于小麦营养高效研究。 展开更多
关键词 小麦 蛭石 氮素营养效率 基因型筛选
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利用卡那霉素“浸种法”准确筛选转基因小麦种子的方法研究 预览 被引量:2
9
作者 董福双 高义平 +2 位作者 吕孟雨 王海波 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期1105-1110,共6页
为了确定利用卡那霉素“浸种法”筛选转基因小麦后代种子的准确方法,以冬小麦种子为试材,探讨了卡那霉素溶液体积、浓度及种子粒数对筛选结果的影响。结果表明,卡那霉素溶液体积、小麦种子的粒数对筛选结果的影响与卡那霉素浓度同等... 为了确定利用卡那霉素“浸种法”筛选转基因小麦后代种子的准确方法,以冬小麦种子为试材,探讨了卡那霉素溶液体积、浓度及种子粒数对筛选结果的影响。结果表明,卡那霉素溶液体积、小麦种子的粒数对筛选结果的影响与卡那霉素浓度同等重要。在卡那霉素浓度为60~180mg·L^-1的范围内,以“单粒分享量”(单粒分享量=卡那霉素浓度×溶液体积/种子粒数)为筛选标准,能有效地对小麦种子进行筛选。利用此方法,我们对小麦金禾9123转基因后代7个株系的412个籽粒进行卡那霉素溶液筛选,获得84株抗性苗,经PCR检测,76株为阳性,卡那霉素筛选正确率达90.5%;同时以7个不同遗传背景的普通小麦品种也验证了此选择方法的可靠性。 展开更多
关键词 卡那霉素 小麦 转基因 抗性筛选 单粒分享量
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浅谈地理和别的学科的关系 预览
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作者 《神州》 2012年第6期 371-372,共2页
初中地理虽然有很重要的作用,但是,有的学生对学习地理没有怎么上心,怎样才能让学生能够更好的想学地理,这是我们要讨论的问题。我们运用其他的知识让学生们更好的学习地理知识。
关键词 初中地理 地理教学 联系
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小麦1B/1R易位系中有活性的ω黑麦碱基因的启动子的克隆与功能验证 预览 被引量:1
11
作者 《农业生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期 477-482,共6页
小麦1B/1R易位系由于具有高产和适应性广等优点,在我国的小麦生产中得到了广泛的应用,但这类品种有一个共同的缺点,就是加工品质比较差,ω-黑麦碱被认为是影响其加工品质的一个重要因素。通过RNA干扰途径沉默ω-黑麦碱基因的表达,是改... 小麦1B/1R易位系由于具有高产和适应性广等优点,在我国的小麦生产中得到了广泛的应用,但这类品种有一个共同的缺点,就是加工品质比较差,ω-黑麦碱被认为是影响其加工品质的一个重要因素。通过RNA干扰途径沉默ω-黑麦碱基因的表达,是改良小麦1B/1R易位系加工品质的一个重要策略。使用由ω-黑麦碱基因自身启动子驱动的RNA干扰表达载体,可使转入的基因在需要的部位和需要的时间表达,提高分子育种的效果。为获得有活性的ω黑麦碱基因的启动子,本研究设计了覆盖启动子区和部分编码区的一对特异引物,以小麦(Triticumaestivum)1B/1R易位系兰考906为试材,通过PCR克隆得到了与3个有转录活性的ω-黑麦碱基因有对应关系的5个启动子A9-1、H2-1、H7-1、C11和F11-1,选择与其中2个有转录活性的ω-黑麦碱基因分别有对应关系的启动子A9-1和F11-1构建以GUS为标记基因的表达载体,并用基因枪对小麦幼嫩种子进行了轰击,通过对GUS基因的瞬时表达分析,证实其中一个启动子F11-1具有活性。研究结果为构建由ω黑麦碱基因自身启动子驱动的RNA干扰表达载体提供了基础资料。 展开更多
关键词 小麦 1B/1R易位系 ω-黑麦碱 启动子克隆 功能验证
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以社会主义核心价值体系引领文化产业发展 预览 被引量:5
12
作者 李娟 《山西高等学校社会科学学报》 2010年第12期 29-32,共4页
以社会主义核心价值体系引领文化产业发展,是弘扬社会主义主流意识形态的必然要求,也是增强我国文化软实力和文化竞争力的必然选择。以社会主义核心价值体系引领文化产业发展,文化产业要始终坚持社会主义先进文化的前进方向;以社会效益... 以社会主义核心价值体系引领文化产业发展,是弘扬社会主义主流意识形态的必然要求,也是增强我国文化软实力和文化竞争力的必然选择。以社会主义核心价值体系引领文化产业发展,文化产业要始终坚持社会主义先进文化的前进方向;以社会效益为首;不断创新,创造出更多更好的文化产品。 展开更多
关键词 社会主义核心价值体系 引领 文化产业
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中国传统文化之解读:特征与弊端的初析 预览 被引量:3
13
作者 《山西高等学校社会科学学报》 2009年第1期 2-6,共5页
华夏大地为中华文明的发展提供了独特的自然环境。特殊的半封闭的地理位置与地形条件,“深耕细作”型的农业经济,使整个国家构成了“内向型”经济运行模式,形成独具特色的中华文化。其特征是:不喜欢远征、不喜欢极端、不喜欢失序。... 华夏大地为中华文明的发展提供了独特的自然环境。特殊的半封闭的地理位置与地形条件,“深耕细作”型的农业经济,使整个国家构成了“内向型”经济运行模式,形成独具特色的中华文化。其特征是:不喜欢远征、不喜欢极端、不喜欢失序。其弊端有:不在乎公共社会空间(也包括公德等)、不在乎真假、不在乎创新,这就是世界视野下的中华文化。中华文化是一种在辉煌时期也缺少变化的文化。进入21世纪,要寻找新的支点,要从深层次上打破传统文化的惯性,融合到世界文化之中,使中华文化更加焕发出新的光辉。 展开更多
关键词 中华文化 特征 弊端
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创造性思维系统特征初探——兼谈与美育的密切关系 预览 被引量:2
14
作者 《山西高等学校社会科学学报》 2007年第1期 13-19,共7页
人的思维创造活动是作为开放系统而存在的,人是思维的主体,必须远离常规思维的原来平衡态。只有在这种自由创造状态中,才有可能出现新的思维涨落,这种涨落会由于系统内部非线性作用的交互相干效应而迅速放大,形成巨涨落,演化成为... 人的思维创造活动是作为开放系统而存在的,人是思维的主体,必须远离常规思维的原来平衡态。只有在这种自由创造状态中,才有可能出现新的思维涨落,这种涨落会由于系统内部非线性作用的交互相干效应而迅速放大,形成巨涨落,演化成为新的思维创造活动的有序结构。本文从系统理论角度分析创造性思维系统的运作及形成条件。在这种系统中,非逻辑思维占有重要位置,直觉、灵感、想象则成为创造过程的精华。而且,创造性思维的培养是与美育密切相关的。 展开更多
关键词 创造性思维 系统 特征 非线性 美育
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一种适于PCR扩增的小麦基因组DNA快速提取法 预览 被引量:30
15
作者 刘旭 贾继增 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 2006年第2期 246-248,共3页
许多小麦分子生物学研究需要对大量的小麦样品进行PCR检测,因此,建立一种快速提取小麦基因组DNA的方法十分必要。根据国外报道的一种快速提取水稻和玉米基因组DNA的方法,我们对部分提取步骤进行变动后,在小麦上进行了尝试,长度为1... 许多小麦分子生物学研究需要对大量的小麦样品进行PCR检测,因此,建立一种快速提取小麦基因组DNA的方法十分必要。根据国外报道的一种快速提取水稻和玉米基因组DNA的方法,我们对部分提取步骤进行变动后,在小麦上进行了尝试,长度为1.5kb的片段能得到稳定的扩增。该方法样品研磨在1.5ml的离心管内进行,后续操作不用酚、氯仿、CTAB、SDS和巯基乙醇,整个提取过程不需要使用通风橱,操作步骤简单,花费时间少,而且提取的小麦基因组DNA完整性好,量也较可观。一个DNA样品可供50~100次PCR反应使用,适用于小麦遗传多样性、分子标记辅助选择、转基因后代检测以及引物筛选、分子标记定位等多种研究。 展开更多
关键词 小麦 DNA提取 PCR
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高等教育职能的演变与未来大学特征初探 预览 被引量:3
16
作者 《山西高等学校社会科学学报》 2005年第7期 1-5,共5页
高等教育的变革与发展,必须适应经济发展和社会进步的需要,这是历史证明了的客观规律.21世纪,人类正在进入网络化时代,未来大学的职能将是"满足个体和社会多层次、全方位的需求".为此,对网络化时代大学的社会角色、功能、目... 高等教育的变革与发展,必须适应经济发展和社会进步的需要,这是历史证明了的客观规律.21世纪,人类正在进入网络化时代,未来大学的职能将是"满足个体和社会多层次、全方位的需求".为此,对网络化时代大学的社会角色、功能、目的、组织形式和教学模式等方面的变革及其某些负面影响进行深入探讨很有必要. 展开更多
关键词 高等教育 职能 大学特征 变革 影响
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RNA沉默及其在植物基因功能研究和作物改良中的应用 预览
17
作者 《河北农业科学》 2003年第B09期 33-39,共7页
RNA沉默是指导入或细胞内转录合成的双链RNA会特异性地降解具有同源序列的mRNA,从而导致内源的、外源的和病毒基因的沉默,它是真棱生物特有的一种阻止转座子转座和抵御外源DNA入侵的防御机制。利用RNA沉默技术,人们正对大量基因进行... RNA沉默是指导入或细胞内转录合成的双链RNA会特异性地降解具有同源序列的mRNA,从而导致内源的、外源的和病毒基因的沉默,它是真棱生物特有的一种阻止转座子转座和抵御外源DNA入侵的防御机制。利用RNA沉默技术,人们正对大量基因进行功能研究,并在作物性状改良方面取得了一些可喜成果。 展开更多
关键词 RNA沉默 植物 基因功能 作物改良 应用 同源序列 病毒基因 真棱生物 作物性状
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利用减法AFLP有效标记小麦中的外源染色体片段 预览 被引量:6
18
作者 吴志明 +2 位作者 赵和 André LAROCHE 王海波 《植物学报:英文版》 CSCD 2003年第4期 379-383,共5页
为解决AFLP中样品间共同片段对多态性片段识别的干扰,作者建立了一种'减法AFLP'标记技术,并运用这种技术成功对小麦中的外源染色体片段进行了标记.运用该技术,样品间的共同扩增片段显著减少,在非变性聚丙稀酰胺凝胶上带型差异... 为解决AFLP中样品间共同片段对多态性片段识别的干扰,作者建立了一种'减法AFLP'标记技术,并运用这种技术成功对小麦中的外源染色体片段进行了标记.运用该技术,样品间的共同扩增片段显著减少,在非变性聚丙稀酰胺凝胶上带型差异十分明显,多态性片段很容易分辨.其真实性通过将其中两条成功转换成外源染色体片段特异的SCAR标记得到了验证.减法AFLP标记技术的建立为标记作物中的外源染色体片段提供了一种有效手段. 展开更多
关键词 减法AFLP 减法杂交 AFLP 外源染色体片段 小麦
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按照“三个代表”的要求 搞好高校党委工作 预览
19
作者 《山西高等学校社会科学学报》 2003年第S1期,共2页
按照“三个代表”的要求搞好高校党委工作 ,首先 ,要对高校全体党员特别是各级领导干部进行“三讲”教育 ;其次 ,要不断完善党委的领导体制和工作制度 ,使党的工作充满活力 ;第三 ,要做好人的思想教育转化和引导工作 ;第四 ,要努力教育... 按照“三个代表”的要求搞好高校党委工作 ,首先 ,要对高校全体党员特别是各级领导干部进行“三讲”教育 ;其次 ,要不断完善党委的领导体制和工作制度 ,使党的工作充满活力 ;第三 ,要做好人的思想教育转化和引导工作 ;第四 ,要努力教育党员和广大师生坚持马克思主义信仰 展开更多
关键词 “三个代表” 高校 党委 工作
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虚拟现实技术与信息化校园 预览
20
作者 李忱 《电力学报》 2002年第4期 239-242,共4页
提出了信息化校园的构成要素为校园网加虚拟现实技术加信息素养人的观点。指出其表现形式为现状教育模式、现代教育管理模式、现代文化校园,并对其内涵进行了阐述和扩展。
关键词 虚拟现实 信息化 校园
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