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兰香草化学成分预实验 预览
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作者 陈美安 春花 张欣影 《广州化工》 CAS 2020年第1期99-100,共2页
为初步探讨兰香草的化学成分。采用系统预实验法对兰香草的水提取液、95%乙醇提取液和石油醚提取液进行初步研究。结果表明兰香草中可能含有氨基酸、糖、多糖、苷类、皂苷、鞣质、有机酸、黄酮类、蒽醌类、酚类、香豆素类、甾体类、三... 为初步探讨兰香草的化学成分。采用系统预实验法对兰香草的水提取液、95%乙醇提取液和石油醚提取液进行初步研究。结果表明兰香草中可能含有氨基酸、糖、多糖、苷类、皂苷、鞣质、有机酸、黄酮类、蒽醌类、酚类、香豆素类、甾体类、三萜类、生物碱、挥发油等化学成分。本研究初步确定兰香草可能含有的化学成分类型,为兰香草化学成分的进一步研究奠定基础。 展开更多
关键词 兰香草 化学成分 预实验
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橡胶树炭疽菌CsHog1基因的克隆和原核表达分析 预览
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作者 廖小淼 何其光 +6 位作者 刘耀 徐良向 周晓韵 刘文波 张宇 春花 缪卫国 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2019年第5期932-938,共7页
HOG MAPK途径在植物病原真菌生长发育、致病过程和对杀菌剂敏感性等方面发挥重要功能,但在不同的病原真菌中具有一定差异。为研究Hog1蛋白在橡胶树炭疽菌(Colletotrichum siamense)中的功能和调控机制,本研究利用同源克隆法克隆获得橡... HOG MAPK途径在植物病原真菌生长发育、致病过程和对杀菌剂敏感性等方面发挥重要功能,但在不同的病原真菌中具有一定差异。为研究Hog1蛋白在橡胶树炭疽菌(Colletotrichum siamense)中的功能和调控机制,本研究利用同源克隆法克隆获得橡胶树炭疽菌(C. siamense)的CsHog1基因,构建GST-CsHog1融合表达载体,利用SDS-PAGE和WesternBlot检测蛋白表达情况。结果表明:橡胶树炭疽菌(C.siamense)的CsHog1基因大小1383 nt,编码459个氨基酸,包含5个内含子,具有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶催化结构域;聚类分析显示橡胶树炭疽菌的CsHog1基因编码的氨基酸序列与黄瓜炭疽菌的ClOsc1(Hog1同源基因)同源性最高。所构建的蛋白融合表达载体在供试条件下(IPTG0.3、0.5、0.8、1.0 mmol/L;温度16、25、28℃)均可较好诱导表达,GST-CsHog1融合蛋白大小约为70 ku。用GST亲和层析柱纯化获得蛋白,经Western Blot检测显示该蛋白可与GST单克隆抗体特异性结合。 展开更多
关键词 橡胶树 橡胶树炭疽菌 Hog1基因 蛋白纯化 原核表达
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巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)HbMlo2基因克隆与表达分析
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作者 刘承圆 何其光 +1 位作者 春花 缪卫国 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期1512-1518,共7页
Mlo (mildew resistance locus O)是一种植物防卫相关基因,对植物的抗病性有负向调控作用。本研究采用基因编辑技术等方法为培育橡胶树抗病品种作出铺垫,进一步填补Mlo家族成员。通过对拟南芥的AtMlo2基因在巴西橡胶树上进行比对,根据... Mlo (mildew resistance locus O)是一种植物防卫相关基因,对植物的抗病性有负向调控作用。本研究采用基因编辑技术等方法为培育橡胶树抗病品种作出铺垫,进一步填补Mlo家族成员。通过对拟南芥的AtMlo2基因在巴西橡胶树上进行比对,根据同源性克隆得到一个cDNA序列,将其命名为HbMlo2。根据生物信息学分析得出,该基因cDNA全长1 725 bp,编码574个氨基酸,该蛋白的分子量为65.78 kD,等电点为8.98,8个跨膜域,没有信号肽,HbMlo2基因与已知的木薯的Mlo基因相似性达到83%。白粉菌侵染橡胶树叶组织后,通过qRT-PCR发现HbMlo2基因显著上调。本研究结果初步表明,HbMlo2可能参与橡胶树的抗病反应机制,为橡胶树抗病育种的研究提供新思路。 展开更多
关键词 巴西橡胶树(Hevea brasiliensis) HbMlo2基因 生物信息学 MLO (mildew resistance LOCUS O)
企业财务管理存在的问题与对策研究 预览
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作者 春花 《财会学习》 2019年第22期81-81,83共2页
当前,不少企业在财务管理方面还存在着一些突出问题,对于企业的正常经营活动开展实施也带来了较大不利影响。本文针对企业财务管理,首先简要分析了企业财务管理相关理论,并深入总结了当前企业财务管理过程中出现的一些问题,最后就优化... 当前,不少企业在财务管理方面还存在着一些突出问题,对于企业的正常经营活动开展实施也带来了较大不利影响。本文针对企业财务管理,首先简要分析了企业财务管理相关理论,并深入总结了当前企业财务管理过程中出现的一些问题,最后就优化提升企业财务管理水平,进行了全面的论述分析。 展开更多
关键词 财务管理 资金管理 预算管理
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企业财务会计与管理会计的结合研究 预览
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作者 春花 《中国集体经济》 2019年第34期123-124,共2页
随着我国经济的发展,会计的发展也变得十分重要。在我国的传统企业中财务会计重要性高于管理会计,导致财务会计与管理会计“分节”,不符合当下我国经济的发展要求。企业要想获得强大的竞争力,在激烈的竞争环境中占有一席之地,就必须重... 随着我国经济的发展,会计的发展也变得十分重要。在我国的传统企业中财务会计重要性高于管理会计,导致财务会计与管理会计“分节”,不符合当下我国经济的发展要求。企业要想获得强大的竞争力,在激烈的竞争环境中占有一席之地,就必须重视企业内部财务会计与管理会计的结合,在正确认识二者的基础上积极推进企业内部财务会计与管理会计的结合,才能够降低企业的经营管理成本,有效提高企业的竞争力。 展开更多
关键词 企业 财务会计 管理会计 结合
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橡胶树炭疽菌CsPbs2基因的原核表达分析
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作者 廖小淼 何其光 +6 位作者 刘耀 徐良向 龙熙平 刘文波 张宇 春花 缪卫国 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期2126-2132,共7页
HOG MAPK途径参与植物病原真菌生长发育、致病和对杀菌剂敏感性等过程,CsPbs2基因是HOG MAPK信号通路的关键成员。为研究CsPbs2蛋白的互作蛋白及其调控机制,本研究克隆了橡胶树炭疽菌(Colletotrichum siamense) CsPbs2基因,构建融合蛋... HOG MAPK途径参与植物病原真菌生长发育、致病和对杀菌剂敏感性等过程,CsPbs2基因是HOG MAPK信号通路的关键成员。为研究CsPbs2蛋白的互作蛋白及其调控机制,本研究克隆了橡胶树炭疽菌(Colletotrichum siamense) CsPbs2基因,构建融合蛋白表达载体,利用SDS-PAGE和Western Blot检测蛋白表达。结果显示橡胶树炭疽菌(C. siamense)的CsPbs2基因全长2 051 bp,编码667个氨基酸,包含个1个内含子,具有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶催化结构域。CsPbs2基因在进化关系上与球孢白僵菌(Beauveria bassiana)、禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)、尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)、稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)的Pbs2基因有最近的亲缘关系。构建的GST-CsPbs2蛋白融合表达载体在供试条件下(IPTG:0.6 mmol/L, 0.8 mmol/L,1.0 mmol/L温度16℃和25℃)均可较好诱导表达,GST-CsPbs2融合蛋白大小约为96 kD。用GST亲和层析柱纯化获得蛋白,经Western Blot检测显示该蛋白可与GST单克隆抗体特异性结合。本研究成功构建了GSTCsPbs2蛋白融合表达载体,纯化得到GST-CsPbs2融合蛋白,为后续利用Pull-down技术钓取Cs Pbs2的互作蛋白提供基础。 展开更多
关键词 橡胶树 橡胶树炭疽菌 Pbs2基因 蛋白纯化 原核表达
启动子探针载体的构建及橡胶树白粉菌启动子筛选鉴定 预览
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作者 徐良向 刘耀 +6 位作者 廖小淼 王义 M.J.N.Rajaofera 何其光 刘文波 春花 缪卫国 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期51-57,共7页
旨在构建适于快速检测橡胶树白粉病菌(Oidium heveae)HO-73启动子的探针载体。以卡那霉素抗性基因Kan作为报告基因,在pUC19骨架载体,构建获得启动子探针载体pUC19-K,连入CaMV35S启动子做启动子探针载体功能验证;利用启动子探针载体pUC1... 旨在构建适于快速检测橡胶树白粉病菌(Oidium heveae)HO-73启动子的探针载体。以卡那霉素抗性基因Kan作为报告基因,在pUC19骨架载体,构建获得启动子探针载体pUC19-K,连入CaMV35S启动子做启动子探针载体功能验证;利用启动子探针载体pUC19-K对预测的启动子片段LY1、LY2、LY3、LY4进行筛选鉴定。将CaMV35S启动子连入到启动子探针载体中,得到可检测启动子活性的启动子探针载体pUC19-K;应用生物信息学软件对部分橡胶树白粉菌HO-73全基因组数据预测,得到4个理论上具有活性的启动子序列LY1、LY2、LY3、LY4,利用构建的启动子活性探针载体进行活性比较,卡那耐受性实验检测发现含LY2和LY3的菌株随卡那霉素浓度的升高耐受性更强,最终得到2个活性较强的启动子LY2和LY3。以上结果表明,构建的启动子活性探针载体可以有效、灵敏地用于HO-73强启动子的筛选和启动子活性检测。 展开更多
关键词 橡胶树白粉菌 启动子 探针载体
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基于设计科学的产品设计研究方法综述 预览
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作者 陈波 春花 孙秋霞 《包装工程》 CAS 北大核心 2019年第18期20-27,共8页
目的智能设计需要符合设计规律的推理机制。目前工业设计师主要是以个人主观意图进行设计,面对国家经济发展的需求,有必要在设计实践的同时,采用科学的方法探究设计规律。方法采用文献研究方法对比分析设计科学、管理科学、情报学、工... 目的智能设计需要符合设计规律的推理机制。目前工业设计师主要是以个人主观意图进行设计,面对国家经济发展的需求,有必要在设计实践的同时,采用科学的方法探究设计规律。方法采用文献研究方法对比分析设计科学、管理科学、情报学、工程科学领域中有关产品设计方法的研究成果,从设计科学的内涵、研究对象、研究范式和研究方法进行综述,重点对设计思维、设计知识研究方法进行了分析。结论设计科学是采用科学的研究方法研究人的思维、设计对象、设计过程和设计结果。设计科学研究方法不仅需要规范性研究范式,也需要描述性研究范式,采用基于科学范式的科学方法探究设计规律,才能真正助推智能设计、设计科学和设计学科的发展。 展开更多
关键词 设计科学 研究范式 研究方法 设计思维 设计知识
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浅谈中职旅游专业学生"服务意识"的培养对策 预览
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作者 春花 《文理导航》 2019年第28期87-87,89共2页
旅游业作为服务性行业,从业人员除了要掌握专业知识、职业技能外,还应具备基本的服务意识。在中职旅游教育活动中,老师要结合学生的实际情况,根据其特点,结合有效的教学方式,帮助学生培养、提高服务意识。笔者通过分析当前中职旅游教育... 旅游业作为服务性行业,从业人员除了要掌握专业知识、职业技能外,还应具备基本的服务意识。在中职旅游教育活动中,老师要结合学生的实际情况,根据其特点,结合有效的教学方式,帮助学生培养、提高服务意识。笔者通过分析当前中职旅游教育现状,并针对其存在的问题,提出服务意识培养与提高对策。 展开更多
关键词 中职 旅游教育 服务意识
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橡胶树炭疽菌蛋白激酶A催化亚基基因的克隆及表达
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作者 赵晓宇 王记圆 +4 位作者 廖小淼 春花 缪卫国 刘文波 郑服丛 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期3622-3628,共7页
为了解蛋白激酶A (protein kinase A, PKA)在橡胶树炭疽菌(Colletotrichum siamense)的生长发育和致病性中的功能。本研究利用同源克隆法设计引物,采用PCR和RT-PCR的方法获得炭疽菌(C. siamense)的PKA两个催化亚基PKA-C1与PKA-C2,并基于... 为了解蛋白激酶A (protein kinase A, PKA)在橡胶树炭疽菌(Colletotrichum siamense)的生长发育和致病性中的功能。本研究利用同源克隆法设计引物,采用PCR和RT-PCR的方法获得炭疽菌(C. siamense)的PKA两个催化亚基PKA-C1与PKA-C2,并基于RSF-Duet载体构建两基因原核表达载体,在大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)菌株中表达,利用SDS-PAGE检测蛋白表达情况。结果表明:催化亚基PKA-C1编码498个氨基酸,包含3个内含子;PKA-C2基因编码381个氨基酸,包含2个内含子;两基因均含有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶催化结构域S_TKc和S_TK_X;聚类分析显示两基因与胶孢炭疽菌(C. gloeosporioides)依赖cAMP蛋白激酶催化亚基序列有高度同源性。SDS-PAGE检测表明目的基因在大肠杆菌中可成功表达,大小符合预期。本研究结果为进一步分析炭疽菌的PKA催化亚基基因功能提供了帮助。 展开更多
关键词 橡胶树 炭疽菌 蛋白激酶A 克隆 原核表达
应用全基因组测序鉴定一例新发的染色体结构异常
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作者 张芹 偶健 +5 位作者 王玮 冯涛 段程颖 李培培 春花 李红 《中华医学遗传学杂志》 CSCD 2018年第1期96-99,共4页
目的探讨全基因组测序在鉴定新发染色体结构异常方面的应用价值。方法应用全基因组测序检测1例外周血染色体核型为46,XY,ins(3)(q21p13p21)的患儿,其异常表型包括眼裂小、睑下垂、鼻梁低平等。结果全基因组测序提示患儿的染色体... 目的探讨全基因组测序在鉴定新发染色体结构异常方面的应用价值。方法应用全基因组测序检测1例外周血染色体核型为46,XY,ins(3)(q21p13p21)的患儿,其异常表型包括眼裂小、睑下垂、鼻梁低平等。结果全基因组测序提示患儿的染色体断裂发生于3号染色体的55473257~78341929位置,这段序列插入到了3号染色体136876730~138643831的位置,所涉及的4个染色体断裂点均发生于基因间区,此外患儿在138643831~138694476之间的序列发生了缺失,其间包含睑裂狭小一睑下垂倒向型内眦赘皮综合征(blepharophimosis-ptosis epicanthus inversus syndrome)的重要致病基因FOXL2。结论染色体结构异常有可能造成断裂处基因的破坏或者在断裂区域发生染色体微缺失。要准确判断其致病性,需要同时进行基因和基因组层面的检测,而全基因组测序已成为其可选的方案。 展开更多
关键词 全基因组测序 新发突变 染色体结构异常 FOXL2基因 睑裂狭小-睑下垂-倒向 型内眦赘皮综合征
电感耦合等离子体串联质谱与电感耦合等离子体质谱法测定蜂蜜中微量硒的对比研究 预览 被引量:2
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作者 春花 谢贤清 +3 位作者 刘德永 邱春新 廖维 宋永海 《分析科学学报》 CSCD 北大核心 2018年第5期596-600,共5页
利用微波消解-电感耦合等离子体串联质谱(ICP-MS/MS)技术,建立了一种快速测定蜂蜜中微量Se的方法。在MS/MS模式下设置Q1为(m/z)78、80、82,使用O2作为池气体,设定流速为0.40mL/min,Se~+与O2反应后生成SeO+,再将Q2分别设置为(m/z... 利用微波消解-电感耦合等离子体串联质谱(ICP-MS/MS)技术,建立了一种快速测定蜂蜜中微量Se的方法。在MS/MS模式下设置Q1为(m/z)78、80、82,使用O2作为池气体,设定流速为0.40mL/min,Se~+与O2反应后生成SeO+,再将Q2分别设置为(m/z)94、96、98,然后进行测定。研究表明:Q1=78/Q2=94的质量对在0.041~5μg/L范围内线性关系良好(R=0.9999),检出限为0.013μg/L,样品加标回收率为89.3%~106.7%,相对标准偏差(RSD)为1.1%~3.6%。另外,比较MS/MS模式和MS模式(Q1作为离子导杆)下消除Ca、K元素产生的多原子离子干扰的差异性以及对Se含量测定的影响。与ICP-MS相比,ICP-MS/MS下采用两级质谱进行质量筛选,并结合O2反应,通过质量转移法能获得良好的灵敏度、更低的检测限、更低的背景等效浓度(BEC)和更准确的检测结果,为类似物质的分析提供了参考。 展开更多
关键词 电感耦合等离子体串联质谱法 电感耦合等离子体质谱法 微波消解 氧气质量转移法 蜂蜜
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福建家风家训文化品牌打造研究 预览
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作者 “打造福建特色丈化品牌研究”课题组 陈秋平 +3 位作者 俞杰 刘祖陛 孙众超 春花 《福建史志》 2018年第6期4-8,63共6页
福建家训是历代治家经验的总结和智慧的结晶,其内容丰富多彩,包含了勤俭忍让的齐家之道、知行合一的修身之道、礼敬谦和的处世之道、舍生取义的家国情怀等。近年来,福建省方志委等相关单位,通过深入挖掘、创新宣传传统家风家训,大力弘... 福建家训是历代治家经验的总结和智慧的结晶,其内容丰富多彩,包含了勤俭忍让的齐家之道、知行合一的修身之道、礼敬谦和的处世之道、舍生取义的家国情怀等。近年来,福建省方志委等相关单位,通过深入挖掘、创新宣传传统家风家训,大力弘扬优秀传统文化,带动良好社会风气的形成,并取得一定的社会影响和社会效应。为此,我们要进一步做好福建家风家训宣传工作,加大品牌建设的支持力度,加强品牌打造的理论研究,做好家风家训文化品牌的宣传推广。 展开更多
关键词 福建家风家训 传承 创新 品牌打造
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疏水表面诱导橡胶树炭疽菌侵染结构的发育分化过程
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作者 春花 牟保辉 +2 位作者 刘文波 缪卫国 郑服丛 《植物保护学报》 CSCD 北大核心 2018年第3期470-477,共8页
为了解橡胶树2种炭疽病菌的侵染结构发育分化过程,采用平板菌落生长速率法测定了3株胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides和3株尖孢炭疽菌C.acutatum的菌丝生长速率,测量其分生孢子大小,显微观察2种炭疽菌在疏水表面诱导下侵染结... 为了解橡胶树2种炭疽病菌的侵染结构发育分化过程,采用平板菌落生长速率法测定了3株胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides和3株尖孢炭疽菌C.acutatum的菌丝生长速率,测量其分生孢子大小,显微观察2种炭疽菌在疏水表面诱导下侵染结构的发育分化过程。结果表明,胶孢炭疽菌菌丝生长速率为0.96-1.36 cm/d,显著高于尖孢炭疽菌的菌丝生长速率0.72-0.89 cm/d,但二者分生孢子大小无显著差异。在疏水表面诱导下,2种炭疽菌分生孢子在接种2-6 h后开始萌发,12 h孢子萌发率为71.70%-88.05%,13-16 h开始分化附着胞,24 h附着胞形成率为48.99%-70.74%,36 h菌丝诱发形成大量附着枝,48 h后分生孢子产生的次生菌丝也可诱发形成附着枝,附着枝呈圆形、姜瓣形、梨形或不规则形。分生孢子极易产生,可在菌丝顶端成簇或菌丝侧面排列产生,也可由分生孢子形成的芽管产生,或在芽管分化附着胞过程分枝形成分生孢子;附着胞多着生于芽管顶端,少数附着胞顶端可继续萌发类似短芽管结构,再次分化形成可黑色化的次级附着胞。表明橡胶树2种炭疽菌不同菌株间分生孢子萌发时间、孢子萌发率、附着胞形成时间和形成率有一定差异,但种间无明显差异;橡胶树炭疽菌分生孢子极易形成,在疏水表面容易分化形成附着胞和附着枝,说明具有极强的适生性。 展开更多
关键词 橡胶树 胶孢炭疽菌 尖孢炭疽菌 侵染结构 显微观察
海南橡胶树炭疽菌Colletotrichum siamense和C. fructicola的鉴定及系统发育分析 预览 被引量:3
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作者 春花 杨欢 +4 位作者 赵晓宇 潘潇涵 刘文波 缪卫国 郑服丛 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2018年第1期129-136,共8页
橡胶树炭疽病是橡胶树上一种重要叶部病害,胶孢炭疽菌复合群为我国橡胶树炭疽病的重要病原菌,但至今未知具体是由复合群下哪些种引起。为了对前期已经确定为属于胶孢炭疽菌复合群的来自海南13株胶孢炭疽菌进行进一步种属鉴定,本研究继... 橡胶树炭疽病是橡胶树上一种重要叶部病害,胶孢炭疽菌复合群为我国橡胶树炭疽病的重要病原菌,但至今未知具体是由复合群下哪些种引起。为了对前期已经确定为属于胶孢炭疽菌复合群的来自海南13株胶孢炭疽菌进行进一步种属鉴定,本研究继续克隆了供试菌株的Ap Mat和GS 2个基因,并分别采用Ap MAT单基因、GS/Ap MAT双基因和采用ITS/CHS-1/GAPDH/ACT/GS/Ap MAT 6个基因的多基因拼接序列分别进行分析。结果表明:无论是采用Ap Mat单基因、GS/Ap Mat双基因还是6基因拼接序列,都能将供试的13株炭疽菌分属胶孢炭疽菌复合群下的C.siamense和C.fructicola 2个种。该结果说明危害海南橡胶树炭疽病的胶孢炭疽菌复合群主要有C.siamense和C.fructicola 2个种,同时也说明了利用Ap MAT基因和GS/Ap MAT双基因能对胶孢炭疽菌复合群下的种进行鉴定。 展开更多
关键词 橡胶树 胶孢炭疽菌复合群 多基因序列分析法 分子鉴定
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让分子检测技术渗入植物病理学本科课程体系 预览
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作者 刘晓妹 丁晓帆 春花 《科技风》 2018年第27期12-12,14共2页
分子检测技术已在植物病害诊断方面取得了大量研究成果,但在本科教学中缺乏渗入。利用这些先进的技术激发植保本科新生的专业兴趣,将其引入到植保学科主干课程的理论课、实验课、课程论文、毕业论文等教学环节,不仅可以为本科生打下前... 分子检测技术已在植物病害诊断方面取得了大量研究成果,但在本科教学中缺乏渗入。利用这些先进的技术激发植保本科新生的专业兴趣,将其引入到植保学科主干课程的理论课、实验课、课程论文、毕业论文等教学环节,不仅可以为本科生打下前瞻性的专业基础知识,架起科研成果应用于田间地头的桥梁,而且可以开拓学生专业素养的视野,提高学生追踪新知识、新技术的能力。 展开更多
关键词 分子检测 植物病理学 本科 课程
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转hpalXoo基因棉花在棉花炭疽病侵染下的过敏性反应检测及相关抗性基因表达研究 预览
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作者 刘文波 何其光 +4 位作者 蔡加挺 靳鹏飞 春花 邬国良 缪卫国 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2018年第12期2478-2485,共8页
【目的】本文研究了转hpalXoo基因棉花对棉花炭疽病的抗性水平与其应用潜力。【方法】采用棉花炭疽菌(Colletotrichum gossypii)侵染转hpalxoo基因的棉花材料和普通棉花,将棉花炭疽菌接种于转基因棉花(出发品种为陆地棉品种854)和普通棉... 【目的】本文研究了转hpalXoo基因棉花对棉花炭疽病的抗性水平与其应用潜力。【方法】采用棉花炭疽菌(Colletotrichum gossypii)侵染转hpalxoo基因的棉花材料和普通棉花,将棉花炭疽菌接种于转基因棉花(出发品种为陆地棉品种854)和普通棉花(854)的叶片上,分别于接种后0、12、24、48、72 h取样,进行叶片H2O2含量和H2O2DAB定位检测,过氧化物酶(POD)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性测定及对棉花抗性相关基因的表达情况进行分析。【结果】在接种棉花炭疽菌后48 h,转hpalxoo基因棉花的H2O2含量及其定位检测可显示出峰值,随后又下降到和0 h相当的水平;POD与PAL活性也显示出类似的变化趋势。然而普通棉花叶片在接种后24 h,H2O2含量及其定位检测可显示出峰值;POD酶活性只有在72 h才略微上升。抗性相关基因荧光定量检测显示,在接种后24 h转hpalxoo基因棉花中防卫基因hsr203J表达高于普通棉,而在72 h转基因与普通棉花两者几乎都没有表达;另外,在接种后0~48 h转基因植株中NPR1基因的表达一直低于普通棉花,但其表达量比普通棉花增长速度快,在72 h两者的表达量相同。在接种后0~12 h转基因植株中PR-1b基因就有微弱的表达,在24 h表达量最大,后续逐渐减弱,而普通棉花一直处于低表达。在受到棉花炭疽菌侵染时,hpalxoo基因能够诱导寄主产生高水平活性氧及相关基因表达,说明hpalxoo编码的HarpinXoo表达赋予转基因棉花对棉花炭疽菌的抗性。【结论】转hpalxoo基因棉花为某些防卫基因超水平表达提供了分子基础。 展开更多
关键词 棉花炭疽病 转hpalXoo基因 活性氧 防卫基因
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一种适用于田间LAMP检测的橡胶树白粉菌DNA粗提取方法
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作者 史梦玉 春花 +2 位作者 刘文波 缪卫国 郑服丛 《分子植物育种》 CSCD 北大核心 2018年第21期7089-7093,共5页
为了探索建立一种快速、简便适用于田间LAMP (loop-mediated isothermal amplification)检测的橡胶树白粉菌DNA粗提取方法,在无液氮也不需要研磨的情况下,利用渗透压破壁的方法提取橡胶树白粉菌DNA。通过改变渗透压对橡胶树白粉菌DN... 为了探索建立一种快速、简便适用于田间LAMP (loop-mediated isothermal amplification)检测的橡胶树白粉菌DNA粗提取方法,在无液氮也不需要研磨的情况下,利用渗透压破壁的方法提取橡胶树白粉菌DNA。通过改变渗透压对橡胶树白粉菌DNA进行提取,使用特异性引物OH-666A (5'-ACTGACACCCCATCACGACTAAAA-3'), OH-666S (5'-CATATTCTCACGAAGGAAAGCATTG-3')进行PCR扩增,并与试剂盒提取DNA的PCR产物进行比较,对提取的DNA进行LAMP检测。20μL甘油加入600μL ddH20,离心10min,去上清,加50μL水离心2min即可提出橡胶树白粉菌的DNA,PCR扩增能获得清晰目的条带,对得到的扩增产物进行测序,同时对提取的DNA进行LAMP检测,并与实验室常规方法比对,所有结果均一致。破壁法可用于橡胶树白粉菌DNA的快速提取,由于不需要特殊仪器,且快速方便,在田间容易实现,所以更适用于田间橡胶树白粉菌DNA的田间粗提取,对开展橡胶树白粉病田间分子预测提供了技术支持。 展开更多
关键词 橡胶树白粉菌 甘油破壁法 DNA LAMP检测
中国2种橡胶树炭疽病菌对咪鲜胺敏感性比较 预览
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作者 春花 徐轩 +4 位作者 戈玉琪 牟保辉 刘文波 缪卫国 郑服丛 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2017年第1期111-115,共5页
炭疽病是橡胶树上一种重要的叶部病害,主要病原有胶孢炭疽菌和尖孢炭疽菌。为了解中国各植胶区炭疽菌对咪鲜胺的敏感性,采用生长速率法室内测定来自海南、云南、广东和广西4省(区)22株橡胶树胶孢炭疽病菌和15株尖孢炭疽菌对咪鲜胺的... 炭疽病是橡胶树上一种重要的叶部病害,主要病原有胶孢炭疽菌和尖孢炭疽菌。为了解中国各植胶区炭疽菌对咪鲜胺的敏感性,采用生长速率法室内测定来自海南、云南、广东和广西4省(区)22株橡胶树胶孢炭疽病菌和15株尖孢炭疽菌对咪鲜胺的敏感性。结果表明:供试的37株橡胶炭疽病菌菌株对咪鲜胺的EC_(50)值为0.022 0~0.272 1 mg/L,平均为(0.061 7±0.055 4)mg/L,EC_(50)最大值是最小值的12.5倍。其中89.2%参试菌株的EC_(50)值介于0~0.100 0 mg/L。根据成组t检验分析结果表明,目前中国4个植胶区的2种橡胶炭疽病菌对咪鲜胺敏感性无明显差异。除了来自海南和云南地区的尖孢炭疽菌有显著性差异外,其他来自不同省份的胶孢炭疽菌和尖孢炭疽菌对咪鲜胺敏感性均无明显差异。研究显示中国橡胶炭疽菌对咪鲜胺仍具有较高的敏感性,但菌株间敏感性有一定的差异,存在一定的潜在抗性风险。 展开更多
关键词 橡胶树 胶孢炭疽菌 尖孢炭疽菌 咪鲜胺 敏感性
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