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改良咔唑法测定重组人溶菌酶滴眼液中透明质酸钠的含量 预览
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作者 李敏 侯增淼 +4 位作者 李晓颖 金芳 高恩 赵金礼 《化学分析计量》 CAS 2019年第1期95-98,共4页
采用改良咔唑法测定重组人溶菌酶滴眼液中透明质酸钠的含量。对显色条件进行优化,获得了最佳的测定条件:硼砂-硫酸加入量为5mL;水解温度为100℃;显色加热时间为20min;咔唑-乙醇溶液用量为0.2mL;显色后用冰水浴迅速冷却。该方法线性范围... 采用改良咔唑法测定重组人溶菌酶滴眼液中透明质酸钠的含量。对显色条件进行优化,获得了最佳的测定条件:硼砂-硫酸加入量为5mL;水解温度为100℃;显色加热时间为20min;咔唑-乙醇溶液用量为0.2mL;显色后用冰水浴迅速冷却。该方法线性范围为0.012~0.060mg/mL,测量重复性为2.15%(n=6),平均加标回收率为99.9%。该方法可用于重组人溶菌酶滴眼液中透明质酸钠含量的质量控制。 展开更多
关键词 重组人溶菌酶滴眼液 透明质酸钠 咔唑法
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重组人源性胶原蛋白的制备及表征
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作者 侯增淼 李晓颖 +3 位作者 李敏 金芳 赵金礼 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期319-326,共8页
为了获得可实现工业化生产的重组人源性胶原蛋白,根据人I型胶原蛋白Gly-X-Y序列,优选亲水性的Gly-X-Y胶原肽段设计人源性胶原蛋白氨基酸序列及对应的核苷酸序列,利用酶切技术构建pPIC9K-COL表达载体,电转化毕赤酵母获得人源性胶原蛋白... 为了获得可实现工业化生产的重组人源性胶原蛋白,根据人I型胶原蛋白Gly-X-Y序列,优选亲水性的Gly-X-Y胶原肽段设计人源性胶原蛋白氨基酸序列及对应的核苷酸序列,利用酶切技术构建pPIC9K-COL表达载体,电转化毕赤酵母获得人源性胶原蛋白毕赤酵母工程菌,并对其进行发酵罐发酵、纯化及鉴定。结果显示,获得表达量达4.5 g/L,纯度大于95%的人源性胶原蛋白,经氨基酸N端测序、分子量测定、氨基酸分析及胶原酶降解试验,确定获得的蛋白与理论的人源性胶原蛋白一级结构一致;同时胶原经冷冻干燥后进行扫描电镜分析及细胞毒性试验,确定人源性胶原蛋白冻干品具有多孔纤维网状结构及优良的细胞相容性,预示其具备作为生物医学材料的潜质。 展开更多
关键词 胶原蛋白 人源性 毕赤酵母 生物材料
重组人溶菌酶活性检测方法研究
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作者 李晓颖 高恩 +3 位作者 金芳 李敏 赵金礼 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1070-1074,共5页
目的:本研究旨在以分光光度法为基础,建立重组人溶菌酶原料药和重组人溶菌酶滴眼液的活性检测方法,并对其进行方法学研究。用于重组人溶菌酶原料药和滴眼液的质量控制。方法:依据卫生部药品标准,采用分光光度法,对重组人溶菌酶活性检测... 目的:本研究旨在以分光光度法为基础,建立重组人溶菌酶原料药和重组人溶菌酶滴眼液的活性检测方法,并对其进行方法学研究。用于重组人溶菌酶原料药和滴眼液的质量控制。方法:依据卫生部药品标准,采用分光光度法,对重组人溶菌酶活性检测方法的专属性、耐用性、精密度、线性范围以及准确性进行了验证。通过对重组人溶菌酶滴眼液进行同一时间不同样品不同底物,不同时间不同样品不同底物活性测定,确定重组人溶菌酶滴眼液的活性范围。结果:实验结果显示该活性检测方法专属性、耐用性、重复性、中间精密度、线性、准确度均良好。48 h耐用性(标准偏差为1 394. 4,RSD%为0. 95%);重复性(标准偏差为1 472. 0,RSD%为0. 99%),中间精密度(标准偏差1 000. 0,RSD%为0. 68%);检测下限为0. 625μg·m L-1,在5~25μg·m L-1浓度范围内线性(标准曲线为y=0. 007 7x+0. 068 5,R2=0. 991 1);准确性(回收率100. 7%~109. 6%,标准偏差为0. 032 2,RSD%为3. 05%);连续3批重组人溶菌酶原料活性分别为152 500,153 500和150 800 U·mg-1;3批重组人溶菌酶滴眼液活性分别为142 000,140 000和133 000 U·mg-1。连续3批重组人溶菌酶冻干粉和3批重组人溶菌酶滴眼液活性均稳定。结论:本方法可用于重组人溶菌酶原料药及重组人溶菌酶滴眼液的生物学活性测定。 展开更多
关键词 重组人溶菌酶 活性检测 方法验证
颈椎病中医综合治疗现状分析 预览
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作者 樊峰 梅虹 +2 位作者 黄明江 《医药前沿》 2019年第10期196-197,共2页
中医综合治疗对颈椎病治疗发挥着重要的作用.本研究在讨论中医治疗颈椎病的机理的基础上,总结了两种方法综合治疗、三种方法综合治疗及多种方法综合治疗的效果.
关键词 颈椎病 中医治疗 综合治疗
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高效毕赤酵母表达载体的改造与应用 预览
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作者 侯增淼 李晓颖 +2 位作者 高恩 赵金礼 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期107-111,共5页
构建一种可促进外源蛋白在毕赤酵母中高表达的载体,实现在同一载体中外源基因与二硫键异构酶共表达,同时失活YPS1基因。以pPICZαA载体为骨架载体,将酵母YPS1基因C端和N端非功能区序列连接至pPICZαA载体,获得重组载体pPICZαA-YPSΔ;... 构建一种可促进外源蛋白在毕赤酵母中高表达的载体,实现在同一载体中外源基因与二硫键异构酶共表达,同时失活YPS1基因。以pPICZαA载体为骨架载体,将酵母YPS1基因C端和N端非功能区序列连接至pPICZαA载体,获得重组载体pPICZαA-YPSΔ;将酵母PDI基因序列连接至pPICZαA载体,获得重组载体pPICZαA-PDI,再以重组载体pPICZαA-PDI为模板通过PCR获得PDI表达盒,然后将PDI表达盒连接至重组载体pPICZαA-YPSΔ,筛选获得高效表达载体pPICZαA-PDI-YPSΔ。最后,将外源基因HSA、hGH导入此载体,转化毕赤酵母GS115,检测HSA和hGH蛋白的表达。结果显示,高效表达载体pPICZαA-PDI-YPSΔ构建成功,外源蛋白HSA、hGH利用此载体,可获得高表达,具有很好的工业前景。 展开更多
关键词 YPS1基因 PDI表达盒 毕赤酵母 人血清白蛋白 人生长激素
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高价彩礼返还的司法解决方式探析——基于甘肃省定西市审判实践的实证研究 预览
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作者 王博 +1 位作者 罗芳情 范嘉伟 《法制博览》 2019年第18期5-8,共4页
高价彩礼返还纠纷是当前司法实践中的重难点问题。本课题组以彩礼风俗盛行的甘肃省定西市为研究对象,通过实地调研,探究当前基层司法审判实践现实问题。基于附解除条件赠与这一法律定位,就其解除条件之影响因素及其程度进行分析,进而提... 高价彩礼返还纠纷是当前司法实践中的重难点问题。本课题组以彩礼风俗盛行的甘肃省定西市为研究对象,通过实地调研,探究当前基层司法审判实践现实问题。基于附解除条件赠与这一法律定位,就其解除条件之影响因素及其程度进行分析,进而提出彩礼纠纷司法解决的完善建议,以期能为当前基层彩礼纠纷的司法审判提供参考。 展开更多
关键词 高价彩礼 返还 附解除条件赠与
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重组人溶菌酶滴眼液在兔眼房水中的药物含量分析
7
作者 史瑾 翟宁宁 +2 位作者 李晓颖 赵金礼 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第15期1881-1888,共8页
目的:重组人溶菌酶(rhLYZ)滴眼液经家兔干眼模型的药效学实验后,测定分析兔眼房水中重组人溶菌酶的含量,综合判断rhLYZ进入房水的可能性。方法:通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDSPAGE)、免疫印迹法(Western blotting)和反相高效液相色谱... 目的:重组人溶菌酶(rhLYZ)滴眼液经家兔干眼模型的药效学实验后,测定分析兔眼房水中重组人溶菌酶的含量,综合判断rhLYZ进入房水的可能性。方法:通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDSPAGE)、免疫印迹法(Western blotting)和反相高效液相色谱法(RP-HPLC),分别对兔眼房水中的rhLYZ进行定性分析及定量检测。结果:经3种方法对测定结果的比对及综合分析,用药组兔眼房水中,准确定性和定量检测到rhLYZ的样本仅有2个(n=18)。结论:经滴眼,在干眼的治疗过程中,初步判断rh LYZ基本在眼表发挥作用,通过眼表进入房水的可能性较低,或进入房水的量甚微,在药物代谢实验中需采用更为灵敏的方法进行检测分析。 展开更多
关键词 兔房水 重组人溶菌酶 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 免疫印迹 反相高效液相色谱法
基于支持向量机的新闻事件类型识别 预览
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作者 李响 +2 位作者 魏勇 董玮 胡涛 《地理信息世界》 2019年第2期73-78,共6页
新闻事件类型识别的核心是文本分类问题,可利用模式识别或者机器学习来解决。互联网中的新闻事件种类多样,各类事件都有不同的结构特征,在自然语言中的表达方式也多种多样,基于模式识别的事件抽取难以覆盖全部的事件表达模式,识别召回... 新闻事件类型识别的核心是文本分类问题,可利用模式识别或者机器学习来解决。互联网中的新闻事件种类多样,各类事件都有不同的结构特征,在自然语言中的表达方式也多种多样,基于模式识别的事件抽取难以覆盖全部的事件表达模式,识别召回率不高。本文使用机器学习方法来进行新闻事件的抽取,设计了词法、句法和语义三类不同类型的特征,并基于支持向量机实现新闻事件的类型识别。支持向量机模型适合解决自然语言这类高维数据的分类问题,能够有效捕捉不同特征之间的分类差异,具有较好的准确率和召回率。 展开更多
关键词 新闻事件 类型识别 支持向量机 机器学习
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GHK对B16细胞内黑色素合成的抑制作用
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作者 王昭维 王惠嘉 +2 位作者 高恩 赵金礼 《香料香精化妆品》 CAS 2019年第3期29-32,44共5页
为探讨甘氨酰组氨酰赖氨酸(GHK)对细胞内黑色素合成的抑制作用以及可能的作用机制,为GHK作为美白化妆品的添加剂提供试验依据,采用液相合成方法制备GHK,研究GHK对蘑菇酪氨酸酶的抑制作用及对小鼠B16黑素瘤细胞(B16)增殖、酪氨酸酶活性... 为探讨甘氨酰组氨酰赖氨酸(GHK)对细胞内黑色素合成的抑制作用以及可能的作用机制,为GHK作为美白化妆品的添加剂提供试验依据,采用液相合成方法制备GHK,研究GHK对蘑菇酪氨酸酶的抑制作用及对小鼠B16黑素瘤细胞(B16)增殖、酪氨酸酶活性及黑色素合成的影响。结果表明,GHK在质量浓度低于5 g/L时,在培养过程中B16细胞的增殖并没有受到影响,且随着GHK浓度的提高,对B16细胞内的酪氨酸酶活性及黑色素合成均呈现质量浓度依赖性的抑制作用。说明GHK对B16细胞内黑色素的合成具有显著的抑制作用,是一种高效的黑色素合成抑制剂,在美白化妆品中具有良好的应用潜力。 展开更多
关键词 化妆品添加剂 甘氨酰组氨酰赖氨酸 黑色素合成 酪氨酸酶
食源性血管紧张素转换酶抑制肽的研究进展 预览
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作者 李谋 赵金礼 《医学综述》 2019年第8期1490-1494,1500共6页
高血压全球发病率逐年攀升,开发具有抗高血压功效的多肽类食品及保健品将在未来高血压的防治中起重要作用。血管紧张素转换酶是体内血压调控的重要分子,研究开发其抑制肽可安全、有效防控高血压。食物来源的多肽因其安全性高,来源广泛... 高血压全球发病率逐年攀升,开发具有抗高血压功效的多肽类食品及保健品将在未来高血压的防治中起重要作用。血管紧张素转换酶是体内血压调控的重要分子,研究开发其抑制肽可安全、有效防控高血压。食物来源的多肽因其安全性高,来源广泛而被学者广泛关注,近年来研究者已经从植物、动物、海洋生物、乳品及发酵制品中发现多种具有抗高血压活性的血管紧张素转换酶抑制肽,然而对功效的验证大多停留在体外实验阶段,仅对少数血管紧张素转换酶抑制肽开展了体内功效研究。 展开更多
关键词 高血压 血管紧张素转换酶抑制肽 降血压
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重组人溶菌酶滴眼液无菌检测方法学研究
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作者 李晓颖 史瑾 +2 位作者 金芳 赵金礼 《药物生物技术》 CAS 2018年第5期406-409,共4页
实验旨在建立重组人溶菌酶滴眼液的无菌检测方法,并对该方法进行方法学验证,用于重组人溶菌酶滴眼液的质量控制。检测重组人溶菌酶滴眼液的抑菌活性,后依据《中华人民共和国药典》2015版四部通则1101无菌检查法,进行培养基灵敏度和薄膜... 实验旨在建立重组人溶菌酶滴眼液的无菌检测方法,并对该方法进行方法学验证,用于重组人溶菌酶滴眼液的质量控制。检测重组人溶菌酶滴眼液的抑菌活性,后依据《中华人民共和国药典》2015版四部通则1101无菌检查法,进行培养基灵敏度和薄膜过滤法方法适用性验证,检测重组人溶菌酶滴眼液是否符合无菌要求。经验证,重组人溶菌酶滴眼液对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌和白色念珠菌均有不同程度的抑菌作用,培养基的灵敏度符合要求,薄膜过滤法可用于重组人溶菌酶滴眼液的无菌检测,连续3批的重组人溶菌酶滴眼液无菌检查结果均符合规定。该方法可用于重组人溶菌酶滴眼液的无菌检测。 展开更多
关键词 重组人溶菌酶 滴眼液 无菌检测 薄膜过滤法 方法验证 抑菌性
反相高效液相色谱法测定重组人溶菌酶的含量及纯度
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作者 史瑾 邓晗 +3 位作者 王维 郝东 赵金礼 《药物分析杂志》 CSCD 北大核心 2018年第12期2167-2174,共8页
目的:建立重组人溶菌酶含量及纯度的反相高效液相色谱(RP-HPLC)检测方法。方法:采用WelchUltimateXB-C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),含0.1%三氟乙酸和0.9%氯化钠的水溶液为流动相A;含0.1%三氟乙酸和0.9%氯化钠水溶液-乙腈(40∶60)... 目的:建立重组人溶菌酶含量及纯度的反相高效液相色谱(RP-HPLC)检测方法。方法:采用WelchUltimateXB-C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),含0.1%三氟乙酸和0.9%氯化钠的水溶液为流动相A;含0.1%三氟乙酸和0.9%氯化钠水溶液-乙腈(40∶60)为流动相B;检测波长280nm,柱温32℃,流速1.0mL·min^-1,线性梯度洗脱。结果:本方法专属性良好;供试品48h内稳定,RSD为0.51%;重复性RSD为0.46%,中间精密度不同工作日间的RSD为0.52%,不同实验员间的RSD为0.53%;定量下限200ng、检测下限30ng;在进样量10-60μg范围内,线性关系良好,r=0.9999;平均回收率(n=9)99.7%,RSD为0.94%。测定3批重组人溶菌酶冻干粉含量分别为36.5%、32.8%和31.1%;纯度均大于98%。结论:方法学验证表明,该方法符合定量检测重组人溶菌酶含量和纯度的要求,适用于重组人溶菌酶的质量控制。 展开更多
关键词 重组人溶菌酶 反相高效液相色谱法 定量检测
免疫刺激寡肽Neogen的合成 预览
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作者 李晨 陈科 +3 位作者 范永刚 郭添 赵金礼 《科技与创新》 2018年第3期51-52,共2页
简要介绍了1种三肽Neogen的固相合成方法,采用Fmoc策略,在无水环境中,以2-氯三苯甲基氯树脂为原料进行逐个Fmoc保护的氨基酸缩合连接,脱除保护基得到三肽Neogen。这种方法合成高效,减少了杂质累积,降低了纯化难度,成本低,适合工业化生产。
关键词 Neogen 免疫刺激剂 寡肽 固相合成
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人工泪液在干眼症中的应用进展 预览
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作者 李谋 史瑾 +2 位作者 李元 赵金礼 《中国现代医生》 2018年第34期162-164,168共4页
干眼病患者人群逐年增加,人工泪液依然是干眼症治疗的主流方法,然而目前市场上的人工泪液主要以高分子聚合物为活性成分,鲜有活性蛋白及细胞因子的加入,距离理想人工泪液尚远。本文旨在综述人工泪液的现状及近年来天然泪液中发现的活性... 干眼病患者人群逐年增加,人工泪液依然是干眼症治疗的主流方法,然而目前市场上的人工泪液主要以高分子聚合物为活性成分,鲜有活性蛋白及细胞因子的加入,距离理想人工泪液尚远。本文旨在综述人工泪液的现状及近年来天然泪液中发现的活性分子,为开发理想的人工泪液提供思路。 展开更多
关键词 干眼症 活性蛋白 人工泪液 聚合物
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艾塞那肽合成 预览
15
作者 王慧 张忠旗 +1 位作者 赵金礼 《上海医药》 CAS 2018年第11期84-88,共5页
目的:开发一种高效率、低成本合成艾塞那肽的方法以满足规模化生产需要。方法:以N-C延伸策略,将艾塞那肽的39个氨基酸分成13个小片段,先用液相法分别合成12个N端Fmoc保护小片段肽,用固相法合成第13个肽树脂片段,然后用固相法将12个小... 目的:开发一种高效率、低成本合成艾塞那肽的方法以满足规模化生产需要。方法:以N-C延伸策略,将艾塞那肽的39个氨基酸分成13个小片段,先用液相法分别合成12个N端Fmoc保护小片段肽,用固相法合成第13个肽树脂片段,然后用固相法将12个小片段依次连接到第13个肽树脂片段上,得到艾塞那肽树脂,切割后得到艾塞那肽粗品。最后经反相色谱纯化、冷冻干燥等过程,得到艾塞那肽。结果:合成的艾塞那肽质谱表征结构正确,液相色谱显示纯度大于98%。结论:本方法提高了合成效率,减少杂质累积,降低了纯化难度,适合规模化生产。 展开更多
关键词 艾塞那肽 片段肽 多肽合成
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棕榈酰四肽-7的固相合成 预览
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作者 李乾 张忠旗 +3 位作者 郭添 王万科 赵金礼 《生物化工》 2018年第1期58-60,共3页
本文研究一种多肽固相合成棕榈酰四肽-7的方法,在无水环境中,以二氯树脂为原料,进行逐个Fmoc-保护基保护的氨基酸缩合反应,合成了棕榈酰四肽-7。结果表明:产物结构经质谱分析,与标准品对照谱图相符,合成收率95.91%、纯度为99.43%。固... 本文研究一种多肽固相合成棕榈酰四肽-7的方法,在无水环境中,以二氯树脂为原料,进行逐个Fmoc-保护基保护的氨基酸缩合反应,合成了棕榈酰四肽-7。结果表明:产物结构经质谱分析,与标准品对照谱图相符,合成收率95.91%、纯度为99.43%。固相法合成棕榈酰四肽-7操作简单快捷,副产物少,易于分离纯化,可重复性高,适用于大量生产制备。 展开更多
关键词 棕榈酰四肽-7固相合成 多肽 生产
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重组人超氧化物岐化酶基因工程菌稳定性研究 预览
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作者 李敏 侯增淼 +4 位作者 李晓颖 何越 高恩 赵金礼 《科技创新与应用》 2018年第4期11-12,共2页
目的:研究重组人超氧化物岐化酶毕赤酵母基因工程菌的遗传稳定性.方法:基因工程菌连续传代50次,每10代取样保藏菌种,通过对菌株形态、菌落形态、质粒稳定性、目的基因的PCR鉴定,蛋白表达的SDS-PAGE鉴定来评价工程菌的稳定性.结果:在... 目的:研究重组人超氧化物岐化酶毕赤酵母基因工程菌的遗传稳定性.方法:基因工程菌连续传代50次,每10代取样保藏菌种,通过对菌株形态、菌落形态、质粒稳定性、目的基因的PCR鉴定,蛋白表达的SDS-PAGE鉴定来评价工程菌的稳定性.结果:在连续传代50代的过程中,菌株、落形态与原始工程菌相比无明显差异,质粒保有率高,PCR鉴定结果显示,重组载体携带目的基因传至50代未消失,SDS-PAGE结果表明,传至50代蛋白表达量无明显差异.结论:该工程菌有良好的遗传稳定性. 展开更多
关键词 重组人超氧化物岐化酶 毕赤酵母工程菌 遗传稳定性
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GHK三肽的最新研究进展 预览
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作者 张凤龙 高恩 +1 位作者 赵金礼 《科技创新与应用》 2018年第6期1-3,6共4页
GHK(glycyl-L-histidyl-L-lysine)存在于人的血液、唾液、尿液当中并随着年龄的增长下降。通常GHK是与2价铜离子作为复合物来发挥促愈合和修复的功能。GHK可以调节胶原和糖胺聚糖的合成与分解,并且调节金属蛋白酶和它的抑制剂的活性... GHK(glycyl-L-histidyl-L-lysine)存在于人的血液、唾液、尿液当中并随着年龄的增长下降。通常GHK是与2价铜离子作为复合物来发挥促愈合和修复的功能。GHK可以调节胶原和糖胺聚糖的合成与分解,并且调节金属蛋白酶和它的抑制剂的活性。它刺激胶原、硫酸皮肤塑、硫酸几丁质、小糖蛋白、糖蛋白的合成,它同样能够恢复经过放化疗的成纤维细胞的再生能力。这种分子可以吸引免疫细胞和内皮细胞向受伤部位迁移。它加速皮肤、毛囊、胃肠道、骨组织,和狗的脚垫伤口愈合,它同样可以诱导大鼠、小鼠和猪的全身伤口愈合。在美容产品当中,它能够让松弛的皮肤紧实,并增加弹性,皮肤的密度和坚实度,减少细纹和皱纹,减少光损伤和色素沉着,增加角质形成细胞的增殖。已经证明GHK可以作为治疗性成分在慢性阻塞性肺炎和代谢性癌症中应用。GHK可以上调或者下调至少4000种人类基因,尤其在DNA恢复重建当中发挥重要作用。文章主要关注GHK在皮肤再生领域的最新进展。 展开更多
关键词 GHK GHK-Cu 铜肽 TGF-β信号途径
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人热休克蛋白10在毕赤酵母中的表达及纯化
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作者 李晓颖 侯增淼 +4 位作者 邓晗 李敏 李哲 赵金礼 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2018年第10期1066-1070,共5页
目的在毕赤酵母中表达及纯化人热休克蛋白10(heat shock protein 10,Hspl0)。方法取新鲜人胎盘组织提取总RNA,反转录合成eDNA。以其为模版PCR扩增Hspl0基因片段,构建外分泌重组表达载体pPIC9K—Hspl0,电击转化毕赤酵母GSll5菌株... 目的在毕赤酵母中表达及纯化人热休克蛋白10(heat shock protein 10,Hspl0)。方法取新鲜人胎盘组织提取总RNA,反转录合成eDNA。以其为模版PCR扩增Hspl0基因片段,构建外分泌重组表达载体pPIC9K—Hspl0,电击转化毕赤酵母GSll5菌株,经组氨酸缺陷筛选,获得阳性菌株pPIC9K-Hspl0/GSll5。重组菌经甲醇诱导,SDS.PAGE检测蛋白含量,Western blot分析Hspl0特异性。结果获取了序列正确的Hspl0基因及高表达菌株。表达产物在相对分子质量11000处可见特异表达条带,Hspl0蛋白表达量为400mg/L,纯度大于90%;Western blot分析表明,Hspl0具有良好的反应原性和特异性。结论Hspl0在毕赤酵母GSll5中成功表达,为该蛋白的放大生产及应用奠定了基础。 展开更多
关键词 人热休克蛋白10 毕赤酵母 真核表达 纯化
Tricine-SDS-PAGE电泳定量检测人体泪液中溶菌酶含量 预览 被引量:1
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作者 史瑾 赵金礼 《临床医学研究与实践》 2018年第2期4-6,共3页
目的 建立一种定量检测人体泪液中溶菌酶含量的方法。方法 通过改进的Tricine-SDS-PAGE电泳,分析正常人体天然泪液中分子量在3~30 k Da的蛋白质分布,使泪液溶菌酶与其它泪液蛋白有效分离,用Image J软件对溶菌酶电泳条带进行灰度分析,定... 目的 建立一种定量检测人体泪液中溶菌酶含量的方法。方法 通过改进的Tricine-SDS-PAGE电泳,分析正常人体天然泪液中分子量在3~30 k Da的蛋白质分布,使泪液溶菌酶与其它泪液蛋白有效分离,用Image J软件对溶菌酶电泳条带进行灰度分析,定量测定其中溶菌酶的含量。结果 泪液溶菌酶和其它小分子蛋白可用改进的Tricine-SDS-PAGE电泳有效分离,对于人体泪液中的溶菌酶检测专属性良好;上样量10~30μg范围内,溶菌酶含量和电泳条带灰度面积线性关系良好(r=0.9934);分析17例人体泪液的样本,其中溶菌酶的含量在1.38~3.07 mg/m L。结论 改进的Tricine-SDS-PAGE电泳法简单直观,并能批量性的一次分析多个样本,可用于科研及临床上人体泪液中溶菌酶的含量检测。 展开更多
关键词 人体泪液 溶菌酶 Tricine-SDS-PAGE电泳 定量检测
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