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不同浓度亚油酸对二维和三维培养模式下奶牛乳腺上皮细胞形态及乳蛋白合成相关基因表达的影响 预览
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作者 邢媛媛 李大 +1 位作者 李子南 金亚亚 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期4667-4674,共8页
本试验旨在研究不同浓度亚油酸(LA)对二维(2D)和三维(3D)培养模式下奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)形态及乳蛋白合成相关基因表达的影响。试验采用单因子完全随机试验设计,将P3代的BMECs接种在铺有基质胶(Matrigel)的6孔板中,培养至第3天时,... 本试验旨在研究不同浓度亚油酸(LA)对二维(2D)和三维(3D)培养模式下奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)形态及乳蛋白合成相关基因表达的影响。试验采用单因子完全随机试验设计,将P3代的BMECs接种在铺有基质胶(Matrigel)的6孔板中,培养至第3天时,然后在培养基中添加不同浓度(0、40和80μmol/L)的LA作用48 h。在2D和3D培养模型的BMECs中添加相同浓度的LA,比较2D和3D培养模型中BMECs的细胞形态,并采用实时荧光定量法测定乳蛋白合成相关基因的表达。结果表明:1)BMECs在2D培养模型中呈现鹅卵石的形态,而在3D培养模型中呈现腺泡样结构。2)BMECs中乳蛋白合成相关基因在3D培养模型中的表达量显著高于其在2D培养模型中的表达量(P<0.05)。3)α-酪蛋白(CSN1S1)、信号转导转录激活因子5(STAT5A)、真核翻译启始因子4E结合蛋白1(EIF4EBP1)和核糖体p70s6激酶(RPS6K1)的基因表达量在2D和3D培养模型中的变化趋势一致,而κ-酪蛋白(CSN3)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT1)的基因表达量在2D和3D培养模型中却呈现相反的趋势。综上,对于CSN3、mTOR和AKT1的基因表达量的研究,3D培养模型为更适宜的模型。 展开更多
关键词 奶牛 三维细胞培养模型 亚油酸 乳蛋白合成
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日粮中不同水平单宁对绵羊瘤胃发酵的影响 预览
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作者 王敬尧 白丽丽 +2 位作者 谢湧芳 朱寿谦 李大 《畜牧与饲料科学》 2019年第11期24-26,34,共4页
旨在探讨日粮中来源于柠条的缩合单宁对绵羊瘤胃发酵参数的影响。选择体重为40 kg左右的健康杜蒙绵羊羯羊15只,按体重相近的原则随机分为3组:对照组(n=5),饲粮中不含单宁;试验Ⅰ组(n=5)和试验Ⅱ组(n=5),饲粮中分别含2%和4%单宁。分别于... 旨在探讨日粮中来源于柠条的缩合单宁对绵羊瘤胃发酵参数的影响。选择体重为40 kg左右的健康杜蒙绵羊羯羊15只,按体重相近的原则随机分为3组:对照组(n=5),饲粮中不含单宁;试验Ⅰ组(n=5)和试验Ⅱ组(n=5),饲粮中分别含2%和4%单宁。分别于试验期晨饲前(0 h)和晨饲后3、6、9 h采集各组绵羊瘤胃液,测定和比较各组绵羊瘤胃内环境指标,包括pH值、氨氮(NH3-N)浓度、菌体蛋白(BCP)浓度。结果表明,饲喂含有2%(试验Ⅰ组)和4%(试验Ⅱ组)单宁的日粮对杜蒙绵羊的瘤胃pH值无显著影响(P>0.05);饲喂含有2%(试验Ⅰ组)和4%(试验Ⅱ组)单宁的日粮3 h和6 h后,绵羊瘤胃NH3-N浓度显著(P<0.05)降低;饲喂含有2%(试验Ⅰ组)和4%(试验Ⅱ组)单宁的日粮6 h和9 h后,绵羊瘤胃BCP浓度显著(P<0.05)提高。日粮中添加2%和4%来源于柠条的单宁,对绵羊瘤胃pH值无影响,可降低瘤胃NH3-N浓度,提高瘤胃BCP浓度。 展开更多
关键词 柠条 单宁 绵羊 发酵参数
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不同生理阶段荷斯坦奶牛瘤胃细菌多样性研究 预览 被引量:1
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作者 李子健 李大 +2 位作者 高民 王典 兰儒冰 《动物营养学报》 CSCD 北大核心 2018年第8期3017-3025,共9页
本试验旨在探究不同生理阶段荷斯坦奶牛瘤胃细菌多样性。选取处于围产前期、泌乳前期、泌乳中期和泌乳后期的经产荷斯坦奶牛各4头,共16头,采集瘤胃液用于测定瘤胃发酵参数和提取微生物DNA,采用Illumina Miseq PE300平台测定瘤胃细菌... 本试验旨在探究不同生理阶段荷斯坦奶牛瘤胃细菌多样性。选取处于围产前期、泌乳前期、泌乳中期和泌乳后期的经产荷斯坦奶牛各4头,共16头,采集瘤胃液用于测定瘤胃发酵参数和提取微生物DNA,采用Illumina Miseq PE300平台测定瘤胃细菌组成。结果表明:1)围产前期奶牛瘤胃微生物蛋白、乙酸、丁酸、总挥发性脂肪酸浓度与乙酸/丙酸显著高于泌乳期( P < 0.05 )。围产前期奶牛瘤胃丙酸浓度显著低于泌乳期( P <0.05)。2)在门的水平上,围产前期奶牛瘤胃内的优势菌门为拟杆菌门和厚壁菌门,泌乳期奶牛瘤胃内的优势菌门则为拟杆菌门、变形菌门和厚壁菌门。围产前期奶牛瘤胃内的拟杆菌门、SR1细菌、蓝菌门、柔膜菌门、TM7细菌和纤维杆菌门的相对丰度显著高于泌乳期( P <0.05),而泌乳期各阶段之间差异不显著( P 〉 0.05 );围产前期奶牛瘤胃内的变形菌门的相对丰度显著低于泌乳期( P <0.05)。3)在科的水平上,围产前期奶牛瘤胃内的优势菌科为普雷沃氏菌科,而泌乳期奶牛瘤胃内的优势菌科为琥珀酸弧菌科和普雷沃氏菌科。围产前期奶牛瘤胃内的普雷沃氏菌科、瘤胃菌科、理研菌科、BS11细菌、RF16细菌、SR1细菌、Gastranaerophilales、克里斯滕森菌科、TM7细菌、RF9细菌和纤维杆菌科的相对丰度显著高于泌乳期( P <0.05);围产前期奶牛瘤胃内的琥珀酸弧菌科、毛螺菌科和韦荣球菌科则显著低于泌乳期( P <0.05)。综上得出,奶牛从围产前期进入到泌乳期,瘤胃细菌多样性显著降低;泌乳期各阶段瘤胃细菌组成差异较小。 展开更多
关键词 荷斯坦奶牛 生理阶段 瘤胃细菌 多样性
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脂肪酸对奶牛乳腺上皮细胞乳蛋白和乳脂合成相关基因表达量的影响 预览
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作者 张花 李大 +1 位作者 邢媛媛 孙梅 《动物营养学报》 CSCD 北大核心 2017年第11期4143-4150,共8页
本试验旨在探寻促进奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)乳蛋白和乳脂合成的短链脂肪酸(乙酸、β-羟丁酸)和长链脂肪酸(油酸、亚油酸、亚麻酸)的组合添加模式,为调控乳成分合成提供理论依据。BMECs经分离、纯化后,选取第2代细胞,分为5组,对... 本试验旨在探寻促进奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)乳蛋白和乳脂合成的短链脂肪酸(乙酸、β-羟丁酸)和长链脂肪酸(油酸、亚油酸、亚麻酸)的组合添加模式,为调控乳成分合成提供理论依据。BMECs经分离、纯化后,选取第2代细胞,分为5组,对照组不添加脂肪酸,Ⅰ组和Ⅱ组添加的乙酸、β-羟丁酸浓度比例均为2.0(9.60 mmol/L)∶1.0(4.80 mmol/L),油酸、亚油酸、亚麻酸的浓度比例分别为2.0(17.30μmol/L)∶13.3(115.05μmol/L)∶1.0(8.65μmol/L)和9.6(75.20μmol/L)∶7.4(58.00μmol/L)∶1.0(7.80μmol/L);Ⅲ组和Ⅳ组添加的乙酸、β-羟丁酸的浓度比例均为1.0(7.20 mmol/L)∶1.0(7.20 mmol/L),油酸、亚油酸、亚麻酸的浓度比例分别为2.0∶13.3∶1.0和9.6∶7.4∶1.0,各组添加的短链脂肪酸(SCFA)和长链脂肪酸(LCFA)总浓度为14.541 mmol/L,每组3个重复。培养24 h后,检测细胞相对增殖率(RGR)、甘油三酯(TAG)的合成量以及乳蛋白和乳脂合成相关基因的表达量。结果表明:1)试验组BMECs RGR及TAG的合成量均显著高于对照组(P〈0.05);Ⅰ组RGR最高,TAG合成量最多。2)与对照组相比,Ⅱ组显著提高了核糖体蛋白S6激酶1(S6K1)、κ-酪蛋白(CSN3)基因的表达量(P〈0.05);Ⅳ组显著提高了CSN3、蛋白激酶B(AKT)、S6K1、真核翻译起始因子4E结合蛋白1(4EBP1)基因的表达量(P〈0.05);试验组信号转导和转录激活因子5(STAT5)基因的表达量显著降低(P〈0.05)。3)与对照组相比,试验组二酰甘油酰基转移酶2(DG AT2)基因的表达量显著提高(P〈0.05),脂肪酸合成酶(FASN)基因的表达量显著降低(P〈0.05)。综上所述,在培养液中添加7.20 mmol/L乙酸、7.20 mmol/Lβ-羟丁酸、75.20μmol/L油酸、58.00μmol/L亚油酸、7.80μmol/L亚麻酸对BM ECs乳蛋白和乳脂合成相关基因的表达量有较好的促进作用。 展开更多
关键词 奶牛乳腺上皮细胞 短链脂肪酸 长链脂肪酸 乳蛋白 乳脂
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油酸对奶牛乳腺上皮细胞内甘油三酯含量和乳脂肪合成相关基因表达的影响 预览 被引量:2
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作者 邢媛媛 李红磊 +3 位作者 李大 胡红莲 张兴夫 高民 《中国畜牧杂志》 北大核心 2017年第7期56-61,共6页
本试验旨在探讨油酸对奶牛乳腺上皮细胞内甘油三酯含量和乳脂肪合成相关基因表达的影响。选取中国荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)为试验材料,经纯化培养后,培养基中添加0(对照)、50、100、200、400μmol/L油酸,继续培养24h。通... 本试验旨在探讨油酸对奶牛乳腺上皮细胞内甘油三酯含量和乳脂肪合成相关基因表达的影响。选取中国荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)为试验材料,经纯化培养后,培养基中添加0(对照)、50、100、200、400μmol/L油酸,继续培养24h。通过四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞活力;利用试剂盒检测胞内甘油三酯的含量;采用实时定量PCR法检测乳脂肪合成相关基因的表达。结果表明:油酸浓度为200、400μmol/L时,BMECs相对增殖率显著低于对照组与其他试验组(P〈0.05);添加100、200μmol/L的油酸促进了胞内甘油三酯的合成(P〈0.05);添加油酸上调了二酰甘油酰基转移酶(DGAT)基因表达量,50μmol/L的油酸显著上调了乙酰辅酶A羧化酶(ACC)和过氧化物酶体增殖物激活受体T(pPARGT)基因表达量(P〈0.05),100-400μmol/L的油酸显著抑制了硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD)、脂肪酸结合蛋白3(FAB朋)、固醇调节原件结合蛋白1(SREBP-1)基因表达量。综上所述,50~100μmol/L的油酸对BMECs乳脂肪合成具有较好的促进效果。 展开更多
关键词 奶牛乳腺上皮细胞 油酸 细胞活力 甘油三酯 乳脂肪合成相关基因
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氢化可的松对奶牛乳腺上皮细胞乳脂肪合成的影响 被引量:1
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作者 孙梅 李大 +3 位作者 邢媛媛 张花 王卫云 李子健 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2017年第9期1156-1164,共9页
该研究旨在探讨不同浓度的氢化可的松处理对奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary gland epithelial cells,BMECs)增殖、甘油三酯(triglyceride,TAG)合成、脂滴的形成以及乳脂肪合成相关基因表达的影响。采用单因子随机实验设计,以不添... 该研究旨在探讨不同浓度的氢化可的松处理对奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary gland epithelial cells,BMECs)增殖、甘油三酯(triglyceride,TAG)合成、脂滴的形成以及乳脂肪合成相关基因表达的影响。采用单因子随机实验设计,以不添加氢化可的松组为对照组,处理组的氢化可的松浓度分别为1、10、100、1 000 ng/m L。各组细胞处理24 h后,通过四甲基偶氮唑盐(thiazoly blue tetrazolium,MTT)比色法检测细胞活力;利用试剂盒检测胞内TAG的含量;使用油红O染色法检测细胞内乳脂球的合成;采用实时定量PCR法检测乳脂合成相关基因的表达。结果表明,氢化可的松处理对BMECs增殖无显著影响(P〉0.05);与对照组相比,100 ng/m L氢化可的松组能够显著提高TAG的合成量、增加胞内脂滴的形成以及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator activated receptorγ,PPARγ)的基因表达(P〈0.05);10 ng/m L和100 ng/m L氢化可的松组能够显著上调乙酰辅酶A羧化酶(acetyl-Co A carboxylase,ACC)、二酰甘油酰基转移酶(diacylgycerol acyltransferase,DGAT)的基因表达(P〈0.05);1、10、100 ng/m L氢化可的松组能够显著上调脂肪酸合酶(fatty acid synthase,FASN)基因表达(P〈0.05),且1 ng/m L的促进效果最明显,而1 000 ng/m L则显著抑制了FASN的表达(P〈0.05)。该研究结果说明,氢化可的松能够促进BMECs乳脂肪合成,且100 ng/m L的剂量对乳脂合成的促进效果最佳。 展开更多
关键词 氢化可的松 奶牛乳腺上皮细胞 乳脂合成
动物科学专业“科技英才”培养模式的探索与实践 被引量:1
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作者 李大 张文广 +1 位作者 敖长金 闫素梅 《内蒙古农业大学学报:社会科学版》 2017年第1期80-83,共4页
在大众化教育背景下,如何提高学生的培养质量,全面提升学生的创新能力,培养具有创新精神和创新思维的高素质、高科技人才,是当前高等教育改革实践面临的重要问题。本文从科研训练、实践教学、学术交流等方面对内蒙古农业大学动物科学专... 在大众化教育背景下,如何提高学生的培养质量,全面提升学生的创新能力,培养具有创新精神和创新思维的高素质、高科技人才,是当前高等教育改革实践面临的重要问题。本文从科研训练、实践教学、学术交流等方面对内蒙古农业大学动物科学专业"科技英才"培养模式进行了探索,取得了较好的成效。学生的学习成绩、综合运用知识的能力、参与科学研究的积极性和考研率有了明显提高。 展开更多
关键词 动物科学 科技英才 教学改革
催乳素对奶牛乳腺上皮细胞乳脂和乳蛋白合成相关基因表达的影响 预览 被引量:7
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作者 邢媛媛 李大 +2 位作者 李红磊 于永强 王卫云 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期2439-2447,共9页
本试验旨在探讨催乳素对奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)乳脂和乳蛋白合成相关基因表达的影响。选取中国荷斯坦奶牛BMECs为试验材料,经纯化培养后,培养基中添加不同浓度催乳素[0(对照)、100、300、500和1 000 ng/m L],继续培养24 h。通过... 本试验旨在探讨催乳素对奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)乳脂和乳蛋白合成相关基因表达的影响。选取中国荷斯坦奶牛BMECs为试验材料,经纯化培养后,培养基中添加不同浓度催乳素[0(对照)、100、300、500和1 000 ng/m L],继续培养24 h。通过四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞活力;利用试剂盒检测胞内甘油三酯的含量;采用实时定量PCR法检测乳脂和乳蛋白合成相关基因的表达。结果表明:1)催乳素浓度为100、300 ng/m L时,BMECs相对增殖率显著高于对照组与其他试验组(P〈0.05)。2)与对照组相比,300 ng/m L催乳素能够显著提高BM ECs乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、二酰甘油酰基转移酶(DG AT)、脂肪酸结合蛋白3(FABP3)基因表达量及甘油三酯的含量(P〈0.05),硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)基因表达量有增加的趋势。3)与对照组相比,100、300 ng/m L催乳素能够显著提高哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)、催乳素受体(PRLR)基因表达量(P〈0.05);300 ng/m L催乳素能显著提高αS1酪蛋白(CSN1 S1)基因表达量(P〈0.05)。综上所述,100~300 ng/m L的催乳素对BM ECs乳脂和乳蛋白合成有较好的促进效果。 展开更多
关键词 奶牛乳腺上皮细胞 催乳素 细胞活力 甘油三酯 乳脂和乳蛋白合成相关基因
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丁酸对乳腺组织基因表达的调控作用及其机制 预览
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作者 邢媛媛 李大 +1 位作者 塔娜 李红磊 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期3064-3069,共6页
丁酸是重要的短链脂肪酸,可作为信号分子结合其受体在机体发挥一些重要的生理作用,如调节乳腺、肝脏及脂肪组织的脂质代谢。丁酸的作用机制是多方面的,其中许多机制与其参与基因表达的调控作用有关。丁酸不仅调节某一个基因的表达,还参... 丁酸是重要的短链脂肪酸,可作为信号分子结合其受体在机体发挥一些重要的生理作用,如调节乳腺、肝脏及脂肪组织的脂质代谢。丁酸的作用机制是多方面的,其中许多机制与其参与基因表达的调控作用有关。丁酸不仅调节某一个基因的表达,还参与信号通路及基因网络的调节。本文综述了丁酸作为重要的乳成分合成前体物、组蛋白去乙酰酶(DHAC)抑制剂、G蛋白偶联受体的配体对乳腺组织基因表达的调控作用及其相关机制。 展开更多
关键词 丁酸 乳脂合成前体物 组蛋白去乙酰酶抑制剂 G蛋白偶联受体的配体 机制
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亚油酸对奶牛乳腺上皮细胞乳脂肪和乳蛋白合成相关基因表达的影响
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作者 李大 李红磊 +4 位作者 邢媛媛 于永强 王卫云 陈玲 李平 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2016年第3期257-264,共8页
该文主要研究了添加不同浓度的亚油酸(顺-9,顺-12-十八碳二烯酸)(0、20、40、80、120μmol/L)对奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells,BMECs)乳脂和乳蛋白合成相关基因表达的影响。通过MTT法检测细胞活力,利用甘油... 该文主要研究了添加不同浓度的亚油酸(顺-9,顺-12-十八碳二烯酸)(0、20、40、80、120μmol/L)对奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells,BMECs)乳脂和乳蛋白合成相关基因表达的影响。通过MTT法检测细胞活力,利用甘油三酯试剂盒检测BMECs内甘油三酯(triglyceride,TAG)的合成量,实时荧光定量PCR检测乳脂和乳蛋白合成相关基因的表达。结果表明:(1)添加20μmol/L的亚油酸能促进BMECs的增殖,120μmol/L的亚油酸组BMECs的相对增殖率显著低于对照组(P〈0.05);(2)40μmol/L和80μmol/L亚油酸添加组BMECs中TAG的合成量显著高于对照组(P〈0.05);(3)添加20μmol/L亚油酸显著上调αs1-酪蛋白(casein alpha s1 identifiers symbols,CSN1S1)和κ-酪蛋白(κ-casein,CSN3)基因的表达,而80μmol/L和120μmol/L亚油酸显著下调CSN1S1和CSN3基因的表达(P〈0.05);(4)120μmol/L亚油酸上调了真核启始4E结合蛋白-1(eukaryotic initiation factor 4E-binding-protein-1,4EBP1)基因的表达,下调了核糖体蛋白S6激酶-1(ribosomal protein S6 kinase-1,RPS6K1)基因的表达(P〈0.05);(5)添加20~120μmol/L亚油酸显著下调脂肪酸合酶(fatty acid synthase,FASN)、硬脂酰辅酶A去饱和酶(stearoyl-Co A desaturase,SCD)、脂肪酸结合蛋白-3(fatty acid-binding protein-3,FABP3)的基因表达(P〈0.05);(6)20μmol/L亚油酸添加组过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARG)基因表达量显著高于对照组,而120μmol/L亚油酸组PPARG、固醇调节元件结合因子-1(sterol regulatory element binding factor-1,SREBF1)的表达量显著低于对照组(P〈0.05)。综上所述,20~40μmol/L的亚油酸对BMECs乳脂肪和乳蛋白合成有较好的促进效果。 展开更多
关键词 奶牛乳腺上皮细胞 细胞活力 αs1-酪蛋白 κ-酪蛋白 甘油三酯 乳脂合成相关基因
瘤胃4株纤维降解细菌的分离鉴定及其纤维降解特性 预览
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作者 王卫云 李大 +2 位作者 于永强 邢媛媛 李子健 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期2294-2300,共7页
作者从蒙古绵羊瘤胃内容物中筛选出四株纤维素降解细菌并进行鉴定,将其编号为H1、H2、N1、N2,对菌株生长特性和纤维素酶活力进行测定,以期为后续试验提供试验材料。通过生理生化特征、DNA序列分析对分离菌株进行鉴定,比浊法测定细菌生... 作者从蒙古绵羊瘤胃内容物中筛选出四株纤维素降解细菌并进行鉴定,将其编号为H1、H2、N1、N2,对菌株生长特性和纤维素酶活力进行测定,以期为后续试验提供试验材料。通过生理生化特征、DNA序列分析对分离菌株进行鉴定,比浊法测定细菌生长曲线,用还原糖法测定四株细菌的滤纸酶活、羧甲基纤维素酶活、水杨苷酶活和微晶纤维素酶活力。结果表明:经鉴定,四株菌中H1、H2为黄色瘤胃球菌(Ruminococcus flavefaciens),N1、N2为链球菌(Streptococcus);生长曲线测定表明菌株H1生长延迟期为4h,H2、N1、N2均为3h,黄色瘤胃球菌最大菌体浓度出现在28h,链球菌为14h;四株细菌均具有良好的纤维降解特性,其中H2滤纸酶活力、羧甲基纤维素酶活力、微晶纤维素酶活力显著高于菌株H1、N1、N2(P〈0.05),H1滤纸酶活力最低,为0.08μmol·(mL·min)-1。本试验利用hungate滚管法分离出4株具有纤维素酶活力的细菌,可以满足后续试验需要。 展开更多
关键词 瘤胃纤维素降解细菌 筛选 鉴定 纤维素酶
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饲养方式和品种对育肥羔羊瘤胃发酵功能的影响
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作者 韩帅 闫素梅 +4 位作者 吴铁梅 侯先志 李大 李疆 包利锋 《畜牧与兽医》 北大核心 2015年第3期65-68,共4页
采用2×2完全随机试验设计,选择体重相近的4月龄断奶呼伦贝尔羊公羔和呼伦贝尔羊与杜泊羊的杂交一代公羔各60只,随机分成4组,每组30只。其中,因素一分为自然放牧和放牧补饲两种饲养方式,因素二设2个品种,分别为呼伦贝尔羊公羔和呼... 采用2×2完全随机试验设计,选择体重相近的4月龄断奶呼伦贝尔羊公羔和呼伦贝尔羊与杜泊羊的杂交一代公羔各60只,随机分成4组,每组30只。其中,因素一分为自然放牧和放牧补饲两种饲养方式,因素二设2个品种,分别为呼伦贝尔羊公羔和呼伦贝尔羊与杜泊羊的杂一代公羔。自然放牧组在天然草场进行自然放牧,放牧补饲组在自然放牧的基础上每天补饲两次,试验期2个月。在试验结束时,分别从每组中选择5只公羔进行屠宰,采集瘤胃液。结果表明:与自然放牧组相比,放牧补饲可显著增加呼伦贝尔和杂一代羔羊的瘤胃NH3-N和BCP浓度(P〈0.05),p H值有降低的趋势(P=0.07)。放牧补饲促进了羔羊的瘤胃发酵和瘤胃微生物对日粮氮源的有效利用。呼伦贝尔和杂一代羔羊的瘤胃发酵功能无显著差异。本研究为科学制定呼伦贝尔地区的羔羊放牧补饲育肥方案、改善草原生态环境和提高牧民经济效益提供了理论依据。 展开更多
关键词 羔羊 自然放牧 放牧补饲 瘤胃发酵
单宁和聚乙二醇对绵羊和山羊瘤胃纤维降解菌数量的影响 预览 被引量:8
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作者 李大 张梅梅 +4 位作者 于永强 李红磊 塔娜 邢媛媛 王卫云 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期596-605,共10页
本文旨在研究饲粮中添加不同水平的单宁和高单宁饲粮条件下添加聚乙二醇( PEG )对绵羊和山羊瘤胃纤维降解菌数量的影响。试验选用1.5岁、体重约45 kg、安装永久性瘤胃瘘管的绵羊和绒山羊各4只,采用自身对照试验设计,分4期进行。第1期... 本文旨在研究饲粮中添加不同水平的单宁和高单宁饲粮条件下添加聚乙二醇( PEG )对绵羊和山羊瘤胃纤维降解菌数量的影响。试验选用1.5岁、体重约45 kg、安装永久性瘤胃瘘管的绵羊和绒山羊各4只,采用自身对照试验设计,分4期进行。第1期饲喂基础饲粮(Ⅰ组),第2期在基础饲粮中添加2%的单宁(Ⅱ组),第3期在基础饲粮中添加6%的单宁(Ⅲ组),第4期在基础饲粮中添加6%单宁+12% PEG(Ⅳ组)。每期试验30 d,其中预试期12 d,正试期18 d。每个正试期第1天,采集绵羊和山羊瘤胃内容物,测定瘤胃液pH、氨态氮( NH3-N)和菌体蛋白( MCP)浓度;运用实时定量PCR技术对固相、液相及全食糜中所附着的白色瘤胃球菌、黄色瘤胃球菌、产琥珀酸拟杆菌进行定量检测。结果表明:1)与Ⅰ组相比,添加6%单宁显著降低了山羊瘤胃液NH3-N浓度和绵羊瘤胃液MCP浓度( P<0.05)。添加6%单宁+12% PEG后,这2个指标恢复至与Ⅰ组相当的水平。2)与Ⅰ组相比,添加6%单宁显著降低了绵羊和山羊瘤胃固相、绵羊瘤胃液相白色瘤胃球菌数量( P<0.05);添加2%和6%单宁显著降低了绵羊和山羊固相黄色瘤胃球菌数量( P<0.05),添加6%单宁显著降低了绵羊和山羊瘤胃液相黄色瘤胃球菌数量( P<0.05);添加6%单宁显著降低了绵羊和山羊瘤胃固相、绵羊全食糜产琥珀酸拟杆菌数量( P<0.05)。添加6%单宁+12% PEG后,绵羊和山羊瘤胃这3株纤维降解菌数量恢复至Ⅰ组水平或高于Ⅰ组。由此可见,饲粮单宁添加量达到6%时降低了瘤胃液NH3-N的浓度,影响MCP的合成,抑制瘤胃固相纤维降解菌的增殖;添加PEG可以削弱单宁对瘤胃纤维降解菌生长的负面影响,促进瘤胃发酵。 展开更多
关键词 单宁 聚乙二醇 纤维降解菌 绵羊 山羊
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单宁和聚乙二醇对绵羊和山羊瘤胃微生物数量和营养物质表观消化率的影响 预览 被引量:3
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作者 李大 于永强 +3 位作者 王卫云 张梅梅 李红磊 邢媛媛 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期3155-3162,共8页
本试验旨在研究饲粮中添加不同水平单宁和高单宁饲粮条件下添加聚乙二醇(PEG)对绵羊和山羊瘤胃总细菌、总厌氧真菌、原虫数量和营养物质表观消化率的影响。选取1.5-2.0岁、体重45 kg左右、安装有永久性瘤胃瘘管的绵羊和绒山羊各4只为... 本试验旨在研究饲粮中添加不同水平单宁和高单宁饲粮条件下添加聚乙二醇(PEG)对绵羊和山羊瘤胃总细菌、总厌氧真菌、原虫数量和营养物质表观消化率的影响。选取1.5-2.0岁、体重45 kg左右、安装有永久性瘤胃瘘管的绵羊和绒山羊各4只为试验动物。采用自身对照设计,共分4期进行,第1期饲喂基础饲粮(Ⅰ组,对照组),第2、3、4期除饲喂基础饲粮外再分别添加占采食量2%单宁(Ⅱ组)、6%单宁(Ⅲ组)、6%单宁+12%PEG(Ⅳ组);每期试验30d,其中预试期12 d,正试期18 d。结果表明:1)山羊Ⅲ组有机物(OM)、粗蛋白质(CP)、酸性洗涤纤维(ADF)表观消化率,Ⅳ组干物质(DM)、OM、CP表观消化率均显著低于对照组(P〈0.05)。绵羊营养物质表观消化率各组之间无显著差异(P〉0.05)。2)晨饲前(0 h)山羊Ⅲ、Ⅳ组,6 h绵羊和山羊Ⅳ组瘤胃原虫数量均显著低于对照组(P〉0.05)。3)0 h绵羊和山羊试验组瘤胃总细菌数量显著低于对照组(P〈0.05)。6 hⅡ、Ⅲ组山羊瘤胃总厌氧真菌的数量显著低于对照组(P〈0.05)。结果提示,在饲粮中添加单宁会降低瘤胃总细菌和总厌氧真菌数量以及营养物质表观消化率,PEG可削弱单宁对瘤胃总细菌生长的影响;山羊的瘤胃微生物区系受单宁的影响程度比绵羊更大。 展开更多
关键词 单宁 聚乙二醇 绵羊 山羊 瘤胃微生物 表观消化率
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聚乙二醇对柠条体外发酵特性及干物质降解率的影响
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作者 李大 张梅梅 +2 位作者 塔娜 白雨薇 解静静 《内蒙古农业大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2014年第3期7-12,共6页
选择3只体况良好安装有永久性瘤胃瘘管的蒙古羊羯羊作为瘤胃液供体,通过体外批次培养技术研究了不同剂量的聚乙二醇(PEG)对柠条体外发酵参数及干物质(DM)降解率的影响。根据PEG添加剂量试验分4个组,分别为对照组(不添加PEG),处理... 选择3只体况良好安装有永久性瘤胃瘘管的蒙古羊羯羊作为瘤胃液供体,通过体外批次培养技术研究了不同剂量的聚乙二醇(PEG)对柠条体外发酵参数及干物质(DM)降解率的影响。根据PEG添加剂量试验分4个组,分别为对照组(不添加PEG),处理1组(PEG添加量∶单宁含量=1∶1),处理2组(PEG添加量∶单宁含量=2∶1)和处理3组(PEG添加量∶单宁含量=4∶1)。在3h、6h、9h、12h和24h 5个培养时间点测定培养液p H值、NH3-N浓度、菌体蛋白浓度、产气量和柠条的DM降解率,并应用多项指标综合指数(MFAEI)对体外发酵参数进行综合评定。试验结果表明:各培养时间点添加PEG组的产气量均高于对照组,在培养的12 h 2∶1组和4∶1组的产气量显著高于对照组和1∶1组(P〈0.05);添加PEG对培养液p H值没有显著影响;添加PEG降低了培养液NH3-N浓度,增加了微生物蛋白的合成量。DM体外降解率在培养的24h,4∶1组和2∶1组高于对照组,但统计分析差异不显著。运用多项组合效应指数对体外发酵参数进行综合评定,发现4∶1组,体外发酵效果最佳。 展开更多
关键词 聚乙二醇 柠条 单宁 体外发酵 干物质降解
乙酸钠和β-羟丁酸钠对奶牛乳腺上皮细胞乳脂和乳蛋白合成相关基因表达的影响 预览 被引量:6
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作者 塔娜 李红磊 +3 位作者 侯先志 考桂兰 高民 李大 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1527-1534,共8页
本试验旨在研究乙酸钠和β-羟丁酸钠对奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)乳脂和乳蛋白合成相关基因表达的影响。试验分2部分,均采用单因子完全随机试验设计。第1部分,单独添加试验,乙酸钠的添加浓度分别为0(对照)、6.00、9.00、12.00和15.... 本试验旨在研究乙酸钠和β-羟丁酸钠对奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)乳脂和乳蛋白合成相关基因表达的影响。试验分2部分,均采用单因子完全随机试验设计。第1部分,单独添加试验,乙酸钠的添加浓度分别为0(对照)、6.00、9.00、12.00和15.00 mmol/L,β-羟丁酸钠的添加浓度分别为0(对照)、0.80、1.60和2.40 mmol/L。第2部分,混合添加试验,以单独添加试验得出的乙酸钠和β-羟丁酸钠的适宜浓度,二者之和为总添加浓度,设定3种不同配比,即乙酸钠:β-羟丁酸钠分别为1:1、2:1和4:1,对照组不添加乙酸钠和β-羟丁酸钠。结果表明:1)与对照组相比,12.00 mmol/L乙酸钠能够显著提高BMECs乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、脂肪酸合成酶(FAS)、二酰甘油酰基转移酶(DGAT)、乙酰辅酶A合成酶2(ACSS2)、过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARG)、κ酪蛋白(CSN3)和雷帕霉素靶蛋白(mTOR)基因的表达量及甘油三酯(TAG)的含量(P〈0.05)。2)与对照组相比,2.40 mmol/L的β-羟丁酸钠能够显著提高BMECs ACC、FAS、ACSS2、PPARG、mTOR基因表达量及TAG含量(P〈0.05)。3)添加不同配比的乙酸钠和β-羟丁酸钠均不同程度地促进了乳脂合成相关基因的表达,乙酸钠:β-羟丁酸钠为2:1和4:1时,BMECs中TAG含量显著高于为1:1时和对照组(P〈0.05)。综合各项指标,以9.60 mmol/L乙酸钠和4.80 mmol/L β-羟丁酸钠混合添加对奶牛乳腺上皮细胞乳脂和乳蛋白合成的促进效果较好。 展开更多
关键词 奶牛乳腺上皮细胞 乙酸钠 β-羟丁酸钠 乳脂 乳蛋白
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消化酶及胎牛血清对奶牛乳腺上皮细胞培养的影响 预览 被引量:1
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作者 杨银芬 考桂兰 +4 位作者 高爱武 侯先志 李大 王秀美 杨苗 《畜牧与饲料科学》 2011年第9期 46-48,共3页
试验研究了不同浓度及组合消化酶对奶牛乳腺组织分离的影响以及不同FBS浓度培养基对奶牛乳腺上皮细胞纯化和生长的影响。试验结果表明,0.25%胰酶+0.20%Ⅱ胶原酶对组织块分离效果最好,乳腺上皮细胞生长最多,5%与10%浓度FBS对奶牛乳腺上... 试验研究了不同浓度及组合消化酶对奶牛乳腺组织分离的影响以及不同FBS浓度培养基对奶牛乳腺上皮细胞纯化和生长的影响。试验结果表明,0.25%胰酶+0.20%Ⅱ胶原酶对组织块分离效果最好,乳腺上皮细胞生长最多,5%与10%浓度FBS对奶牛乳腺上皮细胞纯化效果最好,5%与10%浓度FBS对细胞生长没有明显的差异(P〉0.05),但明显高于其他处理组(P〈0.01)。 展开更多
关键词 奶牛乳腺上皮细胞 胎牛血清 消化酶
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营养限制及补偿对羔羊小肠黏膜生长发育的影响 预览 被引量:6
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作者 刘小刚 李大 +5 位作者 侯先志 考桂兰 王海荣 杨金丽 张崇志 夏巍 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第17期3613-3621,共9页
【目的】研究营养限饲及补偿对羔羊小肠黏膜结构生长发育的影响。【方法】选用80只平均体重为(14.72士1.10)kg的3月龄乌珠穆沁羔羊,按照体重相近原则分为4个试验组,即对照组(CC,)、限制Ⅰ组(RG1)、限制Ⅱ组(RG2)和限制Ⅲ组... 【目的】研究营养限饲及补偿对羔羊小肠黏膜结构生长发育的影响。【方法】选用80只平均体重为(14.72士1.10)kg的3月龄乌珠穆沁羔羊,按照体重相近原则分为4个试验组,即对照组(CC,)、限制Ⅰ组(RG1)、限制Ⅱ组(RG2)和限制Ⅲ组(RG3)。营养限制期(0—60d)4组对应日粮能氮水平分别为ME:10.61、10.49、8.36和8.10MJ·kg-1;CP:150.8、92.4、150.1和62.7g·kg-1。营养补偿期(60—150d)各组饲喂同一能氮水平日粮(ME:9.77MJ·kg-1;CP:124.8g·kg-1)。试验期间每周称重并在限制期开始、限制期结束和补偿期结束,分别从各组选取4只与组内平均体重相近的羔羊,屠宰后迅速取其十二指肠、空肠和回肠中段,用多聚甲醛磷酸缓冲液固定。经HIE染色后,光镜下观察小肠黏膜的形态结构。【结果】营养限制结束,RGl、RG2组羔羊平均体重显著低于cG组∽〈0.05),RG3组羔羊体重极显著低于cG组∽〈0.01);在补偿期后60d,RG3组平均日增重显著高于cG组(尸〈0.05),表现出较高的生长速率。不同能氮营养水平限制饲养后对小肠结构发育有影响,限制能量(RG2)比限制蛋白(RGl)表现出更高的补偿效应。【结论】乌珠穆沁羔羊受不同能氮营养水平限饲后,羔羊体重和小肠黏膜发育均表现出补偿生长效应,而且低能高氮限饲羔羊比高能低氮限饲羔羊表现出更强的补偿效应,限饲蛋白对小肠黏膜发育影响更大。当以ME(8.36MJ·kg-1)和CP(150.1g·kg-1)限饲60d并经过90d的营养恢复后,羔羊小肠黏膜发育实现了完全补偿,小肠吸收功能增强,生长速率加快。 展开更多
关键词 营养限制 营养补偿 羔羊 小肠 黏膜结构 体重
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不同冻存液对奶牛乳腺上皮细胞冻存质量的影响 预览
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作者 杨苗 考桂兰 +4 位作者 侯先志 高爱武 李大 王秀美 杨银芬 《畜牧与饲料科学》 2011年第9期 96-99,共4页
试验旨在探究奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells,BMECs)最佳的冻存液以改善乳腺上皮细胞的冻存质量。BMECs传至第5代后分别加入以下10种不同配方的冻存液。A组:85%DMEM+10%胎牛血清+5%DMSO;B组:80%DMEM+10%胎牛... 试验旨在探究奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells,BMECs)最佳的冻存液以改善乳腺上皮细胞的冻存质量。BMECs传至第5代后分别加入以下10种不同配方的冻存液。A组:85%DMEM+10%胎牛血清+5%DMSO;B组:80%DMEM+10%胎牛血清+10%DMSO;C组:75%DMEM+10%胎牛血清+15%DMSO;D组:70%DMEM+10%胎牛血清+20%DMSO;E组:85%DMEM+5%胎牛血清+10%DMSO;F组:75%DMEM+15%胎牛血清+10%DMSO;G组:70%DMEM+20%胎牛血清+10%DMSO;H组:80%DMEM+10%胎牛血清+10%甘油;I组:70%DMEM+10%胎牛血清+20%甘油;J组:60%DMEM+10%胎牛血清+30%甘油,冻存前统一调整细胞密度到1×106个/mL冻存。分别对复苏后的细胞进行台盼蓝染色计算存活率和PI/Hoechst33258双染计算凋亡率。结果表明,BMECs经不同冻存剂冻存复苏后,细胞活力、形态学及凋亡率表现有所不同,其中B组和G组的活力和24h贴壁率较其他组高,二者的凋亡率较低,二者之间差异无显著性(P〉0.05);传代后B组细胞的生长状况最好。 展开更多
关键词 奶牛 乳腺上皮细胞 冻存液
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不同冻存液对奶牛乳腺上皮细胞冻存质量的影响 预览 被引量:4
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作者 杨苗 考桂兰 +4 位作者 侯先志 高爱武 李大 王秀美 杨银芬 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2010年第18期 17-21,共5页
试验旨在探究奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells,BMECs)最佳的冻存液以改善乳腺上皮细胞的冻存质量。BMECs传至第5代后分别加入以下10种不同配方的冻存液。A组:85%DMEM+10%胎牛血清+5%DMSO;B组:80%DMEM+10%胎牛... 试验旨在探究奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells,BMECs)最佳的冻存液以改善乳腺上皮细胞的冻存质量。BMECs传至第5代后分别加入以下10种不同配方的冻存液。A组:85%DMEM+10%胎牛血清+5%DMSO;B组:80%DMEM+10%胎牛血清+10%DMSO;C组:75%DMEM+10%胎牛血清+15%DMSO;D组:70%DMEM+10%胎牛血清+20%DMSO;E组:85%DMEM+5%胎牛血清+10%DMSO;F组:75%DMEM+15%胎牛血清+10%DMSO;G组:70%DMEM+20%胎牛血清+10%DMSO;H组:80%DMEM+10%胎牛血清+10%甘油;I组:70%DMEM+10%胎牛血清+20%甘油;J组:60%DMEM+10%胎牛血清+30%甘油,冻存前统一调整细胞密度到1×106个/mL冻存。分别对复苏后的细胞进行台盼蓝染色计算存活率和PI/Hoechst33258双染计算凋亡率。结果表明:BMECs经不同冻存剂冻存复苏后,细胞活力、形态学及凋亡率表现有所不同,其中B组和G组的活力和24h贴壁率较其他组高,二者的凋亡率较低,二者之间差异无显著性(P〉0.05);传代后B组细胞的生长状况最好。 展开更多
关键词 奶牛 乳腺上皮细胞 冻存液
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